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Acta zoológica lilloana 51 (2): 161–163, 2007
161
Graciela Ruiz de Bigliardo
1-2
, María Eugenia Pérez
1
, Marcela BeatrizHernández
1-2
 
 y 
Francisco Fernández
2
1
Fundación Miguel Lillo, Miguel Lillo 251, Tucumán.
2
Facultad de Ciencias Naturales e IML, Universidad Nacional de Tucumán.
Recibido: 22/05/08 – Aceptado: 10/07/08
 A 
 
B
 
S
 
T
 
R 
 
 A 
 
C
 
T
—
 
“Polymorphism of
α
s1
Caseín of the vicuna (
Vicugna vicugna 
)”. Electro-phoretic analysis of casein samples from vicuna milk, in polyacrylamide gel containing urea,was carried out. Results showed a polymorphism in one of the principal proteins revealing three patterns, one of them containing two bands (A and B), the other two with onlyone of these, either A or B. Different positions are due to distinct electric charges ofcorresponding molecules. Migration of polymorphic bands correspond to calcium sensitive
α
s1
Caseín according to the assay conditions of electrophoresis. This is the first time thata vicuna casein polymorphism is reported.K 
EYWORDS
: Vicugna; protein polymorphism;
α
s1
-casein.P
ALABRAS
 
CLAVE
: Vicuña; polimorfismo proteínico;
α
s1
-caseína.
Las proteínas de la secreción láctea pre-sentan varios tipos de polimorfismos, losmás comunes corresponden a variantes gené-ticas de tipo mendelianas que representan lapresencia de dos o más alelos. En este grupola mayor parte de los estudios se han centra-do, históricamente, sobre los polimorfismosque se presentan en las especies domésticasde ganado lechero (Addeo
et al
., 1983; Ci-tek y Maskova, 1997). Se destacan especial-mente las variantes genéticas de
β
-Cn,
α
-Cns y 
κ
-Cn en bovinos (Davoli
et al
., 1990;Ojala
et al
., 1997; Schaar, 1995) y las co-rrespondientes a
α
s1
-Cn en caprinos por es-tar asociadas a caracteres de producción(Grosclaude
et al
., 1987). A los polimorfis-mos genéticos se deben agregar los post-tra-duccionales (Ginger y Grigor, 1999;O’Donnell
et al
., 2004) que han demostradoconstituir la principal fuente de variación. Enlos mamíferos silvestres, si bien existen va-rias referencias a la existencia de polimorfis-mos genéticos de lactoproteínas, éstos se re-fieren a estudios sobre polimorfismos genó-micos, por ejemplo en la secuencia de nu-cleótidos (Ward
et al
., 1997) y su númeropuede calificarse de exiguo frente la grancantidad de estudios y de variantes detecta-das en las especies domésticas. Ello se debeseguramente a dos causas, el hecho de ser,estas últimas especies, muy estudiadas por suinterés económico y por constituir las espe-cies domésticas poblaciones en las cuales las variaciones y las cargas genéticas son con-servadas ó mejor toleradas, por estar prote-gidas. Entre los camélidos domesticados sehan mencionado, entre otros polimorfismosgenéticos de lactoproteínas detectados porelectroenfoque (Wangoh,
et al
., 1998).Respecto a la vicuña no hemos encontra-do en la bibliografía ninguna referenciaacerca de la existencia de polimorfismos enlactoproteínas. Nuestro hallazgo se ha pro-ducido durante el estudio de los tipos de ca-seínas y sus características en esta especie,en muestras de leche de una población deanimales pertenecientes a la Estación Experi-mental del INTA de Abra Pampa, Jujuy, Ar-gentina. Las caseínas de las muestras de le-che se precipitaron en buffer acetato de so-dio 0,5 M a pH 4,3, se lavaron varias vecescon el mismo buffer, se disolvieron en urea 5M y se sometieron a electroforesis en gelesde poliacrilamida 10 % en presencia de urea5 M sin SDS para investigar su comporta-miento en función de las diferencias de car-gas eléctricas entre las distintas proteínas.Las corridas electroforéticas se llevaron a
Polimorfismo de
ααααα
s1
Caseína de vicuña (
Vicugna vicugna 
)
COMUNICACIÓN
 
G. Ruiz de Bigliardo
et al.
: Polimorfismo de
α
s1
Caseína de vicuña (
Vicugna vicugna 
)
162cabo a 15 mA durante 2 horas. Se sembra-ron unos 20 µg de proteínas por pocillo. Losgeles fueron teñidos con Coomassie blue. A partir de los estudios que estamos llevando acabo (Ruiz de Bigliardo
et al.
, inédito) y otros realizados anteriormente (Fernández
etal
. 1997; Fernández y Hernández, 2006;Hernández y Fernández, 2007) hemos com-probado que las tres principales caseínas de vicuña,
β
-Cn,
α
s1
-Cn y 
κ
-Cn, cuyas masasmoleculares oscilan entre 25 y 35 kDa, secomportaban, en las corridas electroforéti-cas en los medios desnaturalizantes mencio-nados, de la misma forma que las corres-pondientes al resto de los camélidos sudame-ricanos, y en forma similar a los camélidosdel viejo mundo (Otani
et al
., 2004). En loque respecta a variación entre individuoshemos detectado dos tipos de polimorfismos,por una parte los correspondientes a las dife-rencias que implican a bandas proteicas pe-queñas en cuanto a la intensidad observada(microbandas); y por otra parte las que ata-ñen a las bandas de caseína de mayor inten-sidad. Cabe mencionar que la presencia demicrobandas (ó microheterogeneidad) esgenerada por mecanismos post-traducciona-les de fosforilación ó glicosilación (Baranyi
et al
., 1995; Egito
et al
., 2002). En la lechede vicuña, en las condiciones en que se llevóa cabo la electroforesis mostrada en la Figu-ra 1, son visibles dos bandas mayores, pues-to que la banda de la
κ
-Cn es más tenue y sesuperpone parcialmente con una de las ban-das mayores. Cabe mencionar que la canti-dad de
κ
-Cn existente en la leche es menor auna décima parte de lo correspondiente a lasotras caseínas. Asimismo los resultados de ladigitalización de las imágenes de los gelesmostraron que cada una de las denominadasmicrobandas, que en total dan un promediode 10, da cuenta de un 2% aproximadamen-te de la cantidad total de proteína caseínica.Estas determinaciones demostraron que, delas dos bandas mayores, la
β
-Cn constituyecerca de un 30% y la
α
s1
-Cn suma un 51%del total. En la Figura 1 se muestra la foto-grafía de una electroforesis en gel de polia-crilamida con urea 5 M, correspondientes alas muestras de seis animales distintos, en lacual se ha graduado la cantidad de proteínaa los efectos que solamente las bandas ma- yores sean notorias. Las bandas de la filasuperior corresponden a la
β
-Cn, mientrasque las de la fila inferior corresponden a la
α
s1
-Cn. Como se puede observar, en estascondiciones todas las bandas de
β
-Cn tienenuna posición similar como así también lo esel grueso de la banda, salvo las muestras C y F. Estas dos muestras exhiben una bandamenor, más rápida, asociada a la
β
-Cn, lacual consideramos que es la
κ
-caseína, quecomo hemos mencionado se superpone conla primera. Por otra parte las bandas de
α
s1
-Cn muestran tres disposiciones diferentesque se pueden ejemplificar en las muestras B,C y D. La banda de B ha corrido más que lade C, por una parte, y la de D es más gruesa y abarca la suma de B y C. Este patrón escompatible con la existencia de dos alelospara la
α
s1
-Cn, siendo el ejemplar B homo-cigota para la proteína más rápida, el ejem-plar C homocigota para la más lenta y el Dheterocigota puesto que contiene ambas pro-teínas. Debido a que las electroforesis sehan llevado a cabo en presencia de urea, ladiferente migración corresponde a una dife-rencia de carga que debe estar producidapor uno o más aminoácidos en las cadenaspolipeptídicas.Es por ello que consideramos que la va-riación encontrada corresponde a un poli-morfismo genético y que existen dos formas
Fig. 1.
Electroforesis de caseínas de vicuñaen presencia de urea correspondiente amuestras de seis animales. Las muestras A y B son homocigotas de la variante rápida,las muestras C y F son homocigotas de la variante lenta y las muestras D y E son hete-rocigotas. La primera calle (V) corresponde a
β
-caseína bovina. El ánodo se encuentra en laparte inferior del gel de la figura.
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