Welcome to Scribd, the world's digital library. Read, publish, and share books and documents. See more
Download
Standard view
Full view
of .
Save to My Library
Look up keyword
Like this
2Activity
0 of .
Results for:
No results containing your search query
P. 1
Download

Download

Ratings: (0)|Views: 17 |Likes:
Published by Prima Andikacitra

More info:

Published by: Prima Andikacitra on Jul 16, 2012
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

07/10/2013

pdf

text

original

 
Analisis HPLC dan Aplikasinya
BAB I
 
PENDAHULUAN
 Kromatografi cairan kolom klasik merupakan prosedur pemisahan yang sudah mapandalam mana fase cair yang mobil mengalir lambat-lambat lewat kolom karena gravitasi.Umumnya metode itu dicirikan oleh efisiensi kolom yang rendah dan waktu pemisahan yanglama. Namun sejak kira-kira tahun 1969, perhatian dalam teknik kolom cairan hidup kembalidengan sangat menyolok karena dikembangkannya sistem tekanan tinggi oleh Kirchland danHuber, yang bekerja pada tekanan sampai 2,07 x 10
7
Nm
-2
(3000 p.s.i). Dalam metode inidigunakan kolom berdiameter kecil (1-3 mm) dengan partikel pendukung berukuran sekitar 30m dan eluen dipompakan ke dalamnya dengan laju alir yang tinggi (sekitar 1-5 cm
3
m
-1
).Pemisahan dengan metode ini dilakukan jauh lebih cepat (sekitar 100 kali lebih cepat) daripadadengan kromatografi cairan yang biasa. Meskipun peralatan yang tersedia di pasar dewasa iniagak mahal.Kromatografi Cair Tekanan Tinggi, HPLC merupakan bentuk kromatografi kolom yangsering digunakan dalam biokimia dan analisis kimia untuk memisahkan, mengidentifikasi,mengukur dan memanjang. HPLC memanfaatkan kolom yang memegang chromatographic bahan kemasan (tahap tak berubah), sebuah pompa yang bergerak selular fase (s) melalui kolom,dan detektor yang menunjukkan ingatan waktu Molecules. Retensi waktu bervariasi tergantung pada interaksi antara keadilan tahap, yang Molecules yang dianalisis, dan larutan (s) yangdigunakan.Kromatografi jenis ini menggunakan fase gerak berupa cairan yang dialirkan dengantekanan sangat tinggi sedangkan fase diamnya dapat berbagai macam, tergantung modekromatografi yang dipilih dalam proses pemisahan.Bila dibandingkan terhadap kromatografi gas-cair/
 gas-liquid chromatography
(GLC),maka HPLC
 
lebih bermanfaat untuk isolasi zat tidak mudah menguap, demikian juga zat yangsecara termal tidak stabil.
 
BAB II
 
PEMBAHASAN
 
ANALISIS HPLC
 HPLC adalah alat yang sangat bermanfaat dalam analisis.Prinsip dasar dari HPLC adalah memisahkan setiap komponen dalamsample untuk selanjutnya diidentifikasi (kualitatif) dan dihitung berapakonsentrasi dari masing-masing komponen tersebut (kuantitatif).Sebetulnya hanya ada dua hal utama yang menjadi krusial point dalammetode HPLC. Yang pertama adalah proses separasi/pemisahan danyang kedua adalah proses identifikasi. Dua hal ini mejadi faktor yangsangat penting dalam keberhasilan proses analisa.Aplikasi analisis HPLC adalah untuk penentuan kualitatif dan penentuan kuantitatif.
 Penentuan Kualitatif 
 HPLC digunakan untuk analisa kualitatif didasarkan pada waktu retensi untuk identifikasi.Identifikasi dapat diandalkan apabila waktu retensi sampel dibandingkan dengan larutan standar.
 Penentuan Kuantitatif 
 Beberapa hal yang harus diperhatikan agar HPLC dapat dipergunakan untuk penentuansecara kuantitatif adalah:
o
 
Parameter percobaan sama antara standar dan sampel
o
 
Penentuan berdasarkan waktu retensi sampel dan standar yang sama
o
 
Penentuan kadar dilakukan berdasarkan hubungan (korelasi) dengan menggunakan larutanstandar seri pada waktu retensi tertentu.
-
 
Berdasarkan area kromatogram
 
-
 
Berdasarkan tinggi puncak kromatogramHasil analisa HPLC diperoleh dalam bentuk signal kromatogram. Dalam kromatogramakan terdapat peak-peak yang menggambarkan banyaknya jenis komponen dalam sample.Sample yang mengandung banyak komponen didalamnya akan mempunyai kromatogramdengan banyak peak. Bahkan tak jarang antar peak saling bertumpuk (overlap). Hal ini akanmenyulitkan dalam identifikasi dan perhitungan konsentrasi. Oleh karena itu biasanya untuk sample jenis ini dilakukan tahapan preparasi sample yang lebih rumit agar sample yang siapdiinjeksikan ke HPLC sudah cukup bersih dari impuritis. Sample farmasi biasanya jauh lebihmudah karena sedikit mengandung komponen selain zat aktif. Sample ini umumnya hanyamelalui proses pelarutan saja.Contoh kromatogram dengan banyak peak Kesulitan biasanya dihadapi ketika akan mengidentifikasi suatu kromatogram yang terdiriatas banyak peak. Untuk mengetahui peak mana yang merupakan milik analat (zat target analisa)kromatogram dibandingkan dengan kromatogram standard. Cara yang paling umum untuk mengidentifikasi adalah dengan melihat Retention time (RT). Peak yang mempunyai RT yangsama dengan standard umumnya akan langsung di vonis sebagai peak milik analat. Memangsenyawa/zat yang sama akan mempunyai RT yang juga sama, dengan catatan sample dan

Activity (2)

You've already reviewed this. Edit your review.
1 hundred reads
1 hundred reads

You're Reading a Free Preview

Download
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->