Universidad Autnoma de Zacatecas rea de Ciencias de la Salud Unidad Acadmica de Ciencias Qumicas Qumico Farmacutico Bilogo

REPORTE DE PRCTICA DEL LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO INSTRUMENTAL (Qumica analtica III)

PRACTICA 3. CONSTRUCCION DE UNA CURVA DE CALIBRACION

Caldern Ros N., Lpez Arellano A., Martnez Hernndez M. Dra. Sols Recendez M. G.

4Semestre Grupo C Programa educativo Q.F.B. UACQ, ACS, Campus UAZ Siglo XXI, carretera Zacatecas-Guadalajara Km 6 s/n ejido La Escondida Cp. 98160 Zacatecas Zac. Ciclo enero junio 2010
01 de marzo de 2010 02 de marzo 2010

RESUMEN

En esta practica obtuvimos los conocimientos necesarios para construir una curva de calibracin, para ello se efectan diluciones de unas muestras de concentracin conocida y se produce su lectura y el consiguiente establecimiento de una funcin matemtica (regresin lineal)que relacione ambas; despus, se lee el mismo carcter en la muestra problema y, mediante la sustitucin de la variable independiente ( absorbancia) de esa funcin, se obtiene la concentracin de esta.

Palabras clave: Calibracin, regresin lineal, precisin, exactitud, limites.

Introduccin Dentro de las metodologas analticas, las determinaciones cuantitativas tienen una especial relevancia en diversas actividades como la investigacin, docencia, industria farmacutica, alimentaria, en diagnostico clnico, en cuestiones ambientales, etc., donde la informacin ser4a utilizada para la toma de decisiones. La obtencin de una curva de calibracin, nos permite cuantificar la concentracin de muestras problema con cierto grado de certidumbre, es ah donde la estadstica y la qumica interaccionan para darle al qumico analtico las herramientas necesarias para asegurar la calidad de los resultados generados en el proceso. Los qumicos necesitan parmetros de calidad, se enumeran los criterios cuantitativos de funcionamiento de los instrumentos, criterios que se pueden utilizar para decidir su un determinado mtodo instrumental es o no adecuando para resolver un problema analtico. Estas caractersticas se expresan en trminos numricos. Para un problema analtico dado, los parmetros de calidad permiten reducir la eleccin de los instrumentos a tan solo unos pocos y entonces la seleccin entre ellos ya se hace con los criterios cualitativos de funcionamiento. Para los parmetros de calidad se debe de tomar en cuenta criterios importantes como la precisin que el la reproductibilidad de resultados, es decir, a obtener el mismo resultado todas las veces que se repita el evento, pero la exactitud que tambin es un criterio toma en cuenta el acercamiento posible al valor real o verdadero. Para la determinacin de errores sistemticos o determinado de un mtodo analtico no s referimos al sesgo. Una propiedad de la analtica bsica es la robustez que describe la resistencia al cambio de respuesta cuando se aplica independientemente a alcuotas de la misma muestra variando ligeramente las condiciones experimentales. Los errores que se sufren en el mtodo analtico pueden ser causados par la sensibilidad del instrumento, esto se refiere a la capacidad de diferenciar pequeas variaciones en la concentracin del analito. Pero en caso de cualquier error se puede verificar y detectar con la lnea recta, esta linealidad nos indica que tan alejados estamos del resultado correcto ya que es una proporcin directa. Para esta lnea recta necesitamos la regresin lineal que es un mtodo matemtico que grafica la variable dependiente contra la independiente y el coeficiente de correlacin que es un ndice estadstico que mide la relacin lineal entre dos variables cuantitativas, en este caso la concentracin de un analito contra su absorbencia. La selectividad de un mtodo analtico indica el grado de ausencia de interferencias con otras especies que contiene la matriz de la muestra, desafortunadamente ningn mtodo analtico esta libre de interferencias y con frecuencia hay que realizar diversas etapas para disminuir sus efectos. La curva de calibracin es un mtodo grafico donde encontramos la absorbencia contra una concentracin de un analito y en estas podemos encontrar el limite de deteccin que es la mnimo concentracin de un analito que se puede detectar para un nivel de confianza dado, y el limite de cuantificacin o intervalo lineal que va desde la concentracin mas pequea a la que se puede realizar en medidas cuantitativas hasta la concentracin a la que la curva de calibrado se desva de la linealidad.

Como se menciono anterior mente la regresin lineal es un mtodo de anlisis de los datos que sirve para poner en evidencia las relaciones que existen entre distintas variables. La regresin lineal se expresa de la siguiente manera: Donde m es la pendiente, b es la ordenada al origen y y es parte de las abscisas. La condicin para la regresin lineal es elegir valores determinados para los parmetros desconocidos, de modo que la ecuacin quede completamente especificada. Los errores que podemos encontrar en determinaciones analticas son de dos tipos: Errores determinados: que son aquellos cuya magnitud puede medirse y eliminarse fcilmente ya que se conoce la causa. Esta clase de errores tiene el mismo valor bajo cierta variedad de condiciones y permanece constante de una determinacin a otra. Las causas de los errores determinados pueden ser instrumentales, de reactivos con bajo grado de pureza y los errores del operador. Errores indeterminados: la causa es desconocida son de pequea magnitud y se hacen evidentes por la diferencias en los valores obtenidos en varias determinaciones, cuando las mediciones se llevan a cabo cuidadosamente y bajo condiciones cercanas a lo ideal. No pueden se evitados y por lo tanto es necesario medirlos. Objetivo El objetivo de este trabajo es adquirir los conocimientos necesarios para elaborar una curva de calibrado partiendo de una serie de datos obtenidos experimentalmente (absorbancias) mediante la utilizacin del espectrofotmetro y utilizando una serie de herramientas estadsticas para asegurar la confiabilidad de los datos. En este reporte se presenta de manera sencilla la metodologa para desarrollar la prctica. Materiales y Mtodos Para realizar esta prctica fue necesario preparar previamente una solucin estandarizada de KMnO4 de concentracin 0.005M y para esta preparacin tuvieron que pesarse 0.0394g del reactivo y agregarlos a un matraz volumtrico de 50 ml que previamente contena un poco de agua destilada se disolvi bien y se aforo dejndose reposar una hora aprox.(a oscuras), posteriormente se filtro y se guardo en un frasco mbar tapado e identificado, a continuacin se procedi a preparar cinco soluciones diluidas de KMnO4 tomando alcuotas de (0,1.0,1.25,1.5,1.75,2.0)ml de la solucin madre en diferentes matraces, y aforando cada una a 25ml con agua destilada, despus calculamos las nuevas concentraciones de KMnO 4 de cada una de las diluciones utilizando la ecuacin:C1V1=C2V2 , luego ya encendido el espectrofotmetro lo ajustamos a una longitud de onda de 525nm y con lectura para absorbancia; primeramente establecimos el matraz cero como la solucin

blanco que contena solo agua llenamos la celda para luz visible con el blanco y calibramos a cero de absorbancia, luego tomamos en otra celda las soluciones diluidas de los matraces 1-5(cada una por separado por supuesto) y tomamos 3 lecturas de absorbancia de cada una calibrando con el blanco entre cada lectura ,obtenemos el promedio de estas tres lecturas y lo utilizamos para hacer la curva de calibracin donde estos datos sern los puntos de las ordenadas mientras que los datos de concentracin(de permanganato de potasio) ocuparan el lugar de las abscisas; ahora utilizando la calculadora hacemos la regresin lineal para obtener los datos de la pendiente que ser el coeficiente de absortividad(), la ordenada al origen(B) y el coeficiente de regresin lineal(r). Posteriormente se nos proporcionaron dos soluciones (problema) que tambin contenan KMnO4 una de concentracin desconocida y la otra cuya concentracin es de 0.3 mM, la cual fue preparada por la auxiliar del laboratorio, llenamos la celda con un poco de solucin muestra problema y tomamos tres lecturas calibrando con el blanco entre cada una, tambin hacemos lo mismo para la solucin de concentracin conocida y anotamos nuestros resultados, obtenemos el promedio de las tres lecturas. Ahora utilizando la ecuacin de la ley de Beer despejamos para concentracin C=A-B/b y como previamente obtuvimos el valor de a y de la ordenada al origen calculamos con ella la concentracin de las soluciones problema, por ultimo comparamos con la informacin que se nos proporciono sobre la muestra. Ya terminado lo experimental realizamos los clculos estadsticos necesarios para verificar la confiabilidad de nuestros resultados. Resultados A continuacin se presentan los resultados obtenidos de los clculos para las concentraciones y los datos de las lecturas de absorbancia obtenidas en el espectrofotmetro para las soluciones diluidas de KMnO4
Tabla 3.1 soluciones para una curva de calibracin

No. matraz

Solucin A

H2O Destilada Aforar hasta

Concentracin de KMnO4 en el matraz

Absorbancias
Lectura1Lectura2 Lectura3

Absorbancia promedio

0 1 2 3 4 5

0ml 1.0ml 1.25ml 1.5ml 1.75ml 2.0ml

25ml 25ml 25ml 25ml 25ml 25ml

0M 0.0002M 0.00025M 0.0003M 0.00035M 0.0004M

0 0.443 0.490 0.638 0.834 0.936

0 0.445 0.490 0.636 0.834 0.936

0 0.444 0.490 0.637 0.834 0.936

0 0.444 0.490 0.637 0.834 0.936

La siguiente grfica muestra la curva de calibracin que construimos a partir de los datos de absorbancia en las ordenadas y la concentracin en las abscisas para las concentraciones de permanganato de potasio.

En la siguiente tabla se muestran los resultados que obtuvimos de las lecturas de absorbancia, contiene tambin los datos que obtuvimos al calcular las concentraciones de KMnO4 en las muestras problema.
Tabla 3.2 Muestra problema y estndar

Matraz Muestra problema Estndar(0.3mM)

Concentracin de KMnO4 en el matraz

Absorbancia promedio 0.9143 0.6583

3.9254mM 2.9615mM

Porcentaje de error =1.3% 98.7% de confiabilidad

Discusion y conclusiones Interpretando los resultados de las tablas y los datos de la curva nos dimos cuenta que efectivamente con un coeficiente de regresin lineal de

0.9838 se cumple la ley de beer que es una lnea recta, calculando la pendiente de esta lnea recta pudimos obtener el coeficiente de absortividad molar () de el KMnO4 (2656) con el cual nos permiti sustituirlo en la ecuacin de la ley de beer y despejando para la concentracin c calculamos las concentraciones de las muestras problema obteniendo que la muestra problema contena 3.9254 mili moles de KMnO4 y la muestra estndar contena 2.9615mM del reactivo es decir 98.7% de precisin al compararla con la muestra estndar. Con lo cual concluimos que fue un buen trabajo, ya que se cumpli nuestro objetivo de aprender a construir la curva de calibracin y aprender a manejar las formulas estadsticas para tener un trabajo de buena calidad.

Referencias

[1] Skoog A. D, Holler J. F, Nieman T .A. Principios de Anlisis instrumental, 5a edicin, pp. 11-16 Grupo editorial Mc Graw Hill/ Interamericana de Espaa, Aravaca (Madrid), 2001.