CROMATOGRAFIA

KATHERINE BARRETO JUAN CAMILO GUTIERREZ DIEGO FELIPE PULIDO CAMILO ANDRES JIMENEZ

Contenido
Introduccin a la cromatografa Cromatografa de papel Cromatografa en capa fina Cromatografa liquida Cromatografa de gases Cromatografa de Fluidos sper crticos

CROMATOGRAFIA
Es un mtodo de separacin para la mezclas complejas. Esta nos permite: 1. Separar los componentes de la mezcla, para obtener los mas puros y que puedan ser usados de nuevo. 2. Medir la proporcin de los componentes, generalmente las cantidades son pequeas.

 La cromatografa fue descrita por Mijal Tswett en el ao de 1906. Invento un mtodo para separar pigmentos de las plantas utilizando un tubo de vidrio lleno de CaCO3. Despus de aadir un extracto de plantas y lavarlo con un disolvente orgnico observo que se separaban diferentes bandas de color en el interior de el tubo.

Clasificacin
De acuerdo a su utilidad: 1. Analtica 2. Preparativa

CROMATOGRAFIA DE PAPEL
Es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar anlisis cualitativos, ya que al no ser una tcnica muy compleja no se requiere ningn tipo de equipamiento.

Ejemplo

Cromatografa en Capa Fina

La cromatografa en capa fina es una tcnica cromatografca. La fase estacionaria es una capa uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte.

Desarrollo de la cromatografa
El desarrollo de los cromatogramas en capa fina se realiza normalmente por el mtodo ascendente, esto es, al permitir que un eluyente ascienda por una placa casi en vertical, por la accin de la capilaridad.

Aplicacin de las muestras

Los productos a examinar se disolvern, cuando sea posible, en un disolvente orgnico que tenga un punto de ebullicin lo suficientemente bajo para que se evapore despus de la aplicacin, lo ms comn es usar acetona

Localizacin de sustancias
Si los compuestos separados no son coloreados es necesario revelar la posicin de dichos compuestos, para ello existen dos tipos de mtodos: - Mtodos qumicos - Mtodos fsicos

Cromatografa Liquida
Es una tcnica de separacin y no debe confundirse con una tcnica cuantitativa o cualitativa de anlisis.

Mtodo Lquido, slido o deadsorcin Lquido

Abreviatura LSC LLC

Mecanismo predominante Adsorcin sobre la superficie Reparto entre fases lquidas, una mvil y la otra estacionaria. Reparto y / o adsorcin entre las fases mvil y enlazada. Uso de la estructura de ligantes inmovilizados para unir bioselectivamente la protena deseada.

Fase enlazada

BPC

Afinidad

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CROMATOGRAFIA DE GASES

Solido o liquido Sobre Solido (columna)

1-6 m Longitud 2-4 mm dimetro

Fase Estacionaria: aluminio, slica gel, carbn o tierra de diatomeas

 Cuando la fase estacionaria es un slido, la interaccin que puede tener con la fase mvil se puede clasificar en: Adsorcin, intercambio inico y de filtracin sobre geles porosos. Cuando es un lquido, la interaccin con la fase mvil recibe el nombre de reparto, esta ltima es la forma ms usual de hacer cromatografa de gases.

Tipos de Columnas
Columnas clsicas de relleno Longitud 1-10 m Dimetro interno 2-4 mm hasta 5 cm en escala preparativa Tamao de la partcula de relleno diez veces menor que el dimetro del tubo Capacidad de carga grande Relacin de fases pequea Permeabilidad baja
Tubo Grano de Soporte Fase estacionaria

Columnas capilares de capa porosa Longitud de 25-200 m Dimetro interno de 0.1-0.5 mm Tamao de la partcula de relleno vara entre el de un soporte clsico y las partculas de carbono producidas por la pirlisis de una sustancia orgnica. Permeablilidad valores mximos (al igual que las capilares abiertas)

Columna Capilares Abiertas

Longitud hasta 200 m, los ms utilizados varan entre 50-100 m Dimetro interno 0.1-0.5 mm Capacidad de carga muy pequea Relacin de fases es la ms alta

Mide soluto en el gas acarreador

Clasificados Grado de selectividad Recuperacin de la muestra Modo de respuesta Proceso de deteccin

Anlisis Cualitativo Pico en la Cromatografa

En la cromatografa de gases cada muestra suministra tres unidades de informacin, posicin, altura, anchura

METODOS CUALITATIVOS

Aplicaciones
a) Comida, sabores y fragancias. Productos naturales y las feromonas, anlisis de pesticidas; separacin de enantimeros. b) Petrleo y qumicos. cidos grasos; combustibles sintticos, carbn y aceites; separacin de enantimeros. c) Ambientales. Contaminantes de agua, aire y tierra; halometanos en el agua hasta las dioxinas en la tierra; anlisis de pesticidas; separacin de enantimeros. d) Mdicas y biolgicas. cidos grasos; niveles de alcohol y drogas en la sangre; anlisis de pesticidas; separacin de enantimeros.

Cromatografa de fluidos supercrticos

es una tcnica hbrida entre la cromatografa de gases (GC) y la liquida, que combina lo mejor de ambas tcnicas. Esta tcnica es importante porque permite la separacin de mezclas en las que no es adecuada la aplicacin de la GC ni de la HPLC En concreto, se aplica a compuestos no voltiles o trmicamente inestables que no pueden ser separados mediante GC, o aquellos que contienen grupos funcionales que imposibilitan su deteccin en HPLC.

Instrumentacin
Debida a las caractersticas de la fase mvil (alta presin y temperatura) se emplean equipos parecidos a los de HPLC, con varias diferencias: El empleo de un horno termosttico para poder controlar con precisin la temperatura de la fase mvil. El uso de un restrictor, empleado para poder mantener por una parte la presin en el interior de la columna y por otra parte permitir la bajada de la presin a la salida para que el fluido supercrtico (SF en adelante) pase al estado gaseoso y pueda ser detectado adecuadamente el analito.

Fases estacionarias
Se pueden emplear, al igual que en la GC, las columnas capilares o de relleno, prefirindose las primeras. Las dimensiones son parecidas en longitud, de 10 a 20 m, y el dimetro interno es bastante menor, de 0,05 a 0,10 mm. La pelcula interna es de siloxano entrelazado y polimerizado. Si se emplean columnas de relleno, su dimetro interno vara entre 0,5 y 4,6 mm, y el grosor de la partcula de relleno es de 3 a 10 m. En este caso, el recubrimiento es parecido al empleando en HPLC de reparto.

Fases mviles
La fase mvil estrella en la SFC es el dixido de carbn, por sus excelentes propiedades: Apolar, disuelve una gran variedad de molculas orgnicas. Transparente a la radiacin ultravioleta Inodoro No txico Fcil de obtener Barato No inflamable

Detectores
Se puede emplear el detector de ionizacin de llama (tambin usado en GC), por sus caractersticas de universalidad (permite detectar casi cualquier compuesto orgnico), alta sensibilidad y bajo mantenimiento. El espectrmetro de masas tambin tiene utilidad, al tener una salida en fase gas, y detectores espectrofotomtricos como el de infrarrojos, ultravioleta, el de emisin por fluorescencia, el termoinico y el fotomtrico de llama.

Aplicaciones
La SFC se aplica a una gran variedad de compuestos, entre los que podemos citar drogas, alimentos, herbicidas, tensioactivos, polmeros y aditivos para stos, impelentes, explosivos o combustibles fsiles.

Cibergrafia.
http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%A Da http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%A Da_en_papel http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%A Da_de_fluidos_supercr%C3%ADticos http://www.invivo.fiocruz.br/cgi/cgilua.exe/sys/st art.htm?infoid=989&sid=3 http://www.ulpgc.es/hege/almacen/download/3 9/39360/separaciones_por_cromatografia_1.pdf