Hemoglobina O transporte de oxignio dos pulmes aos tecidos efetuado pela hemoglobina presente nas hemcias.

. A hemoglobina dos seres humanos adultos (HbA) formada por quatro subunidades, duas e duas . A estrutura quaternria da hemoglobina mantida por ligaes no-covalentes e resulta em uma molcula tetramrica, composta por dois dmeros, 11 e 2 2, dispostos simetricamente ao redor de um eixo central. As interfaces entre os dmeros sofrem modificaes importantes durante a oxigenao e a desoxigenao da hemoglobina. O grupo prosttico heme o stio de ligao do oxignio. O heme uma molcula de porfirina contendo um tomo de ferro, que, na mioglobina e hemoglobina, permanece no estado ferroso (Fe2+). O grupo heme, em cada subunidade, localiza-se dentro de uma cavidade hidrofbica, delimitada por aminocidos apolares que estabelecem interaes hidrofbicas co o anel porfirnico. O tomo de ferro fica no centro do grupo heme, formando seis ligaes: liga-se aos quatro tomos de nitrognio do anel porfirnico, cadeia polipeptdica (atravs de um resduo de histidina do segmento F, a His 87, chamada histidina proximal) e pode, ainda, ligar-se reversivelmente a uma molcula de oxignio (O2). O oxignio liga-se reversivelmente ao ferro (Fe2+), sem que ele seja oxidado ao estado frrico (Fe3+). Alm disso, o oxignio estabelece uma ponte de hidrognio com a His 58, chamada histidina distal, que fica oposta histidina proximal. A molcula de oxignio fica, portanto, prensada entre o tomo de ferro a histidina distal. A ligao com o oxignio desencadeia alteraes na conformao da hemoglobina. As grandes mudanas ocorrem nas reas de contato entre os dmeros, que, efetivamente, se deslocam um em relao ao outro. A oxigenao da hemoglobina leva resulta em estreitamento do bolso entre as subunidades . Deste modo, os deslocamentos em uma subunidade se propagam, produzindo uma alterao na conformao da subunidade em questo, que transmitida para as outras subunidades, atravs das reas de contato entre elas. Detalhes da aula: Oxihemoglobina ou oximioglobina: cor vermelha O Fe3+ no permite a ligao do O2: meta-hemoglobina, cor castanha. Cada cadeia est em contato com 2 cadeias . H pouca interao entre duas cadeias ou duas cadeias . Foras que mantm unidas as cadeias: interaes hidrofbicas, pontes de hidrognio e pontes salinas.

A hemoglobina liga-se ao oxignio cooperativamente: A ligao da primeira molcula de oxignio facilita o preenchimento dos outros grupos heme, de tal maneira que a ligao da quarta molcula de oxignio 300 vezes mais fcil que a ligao da primeira. A esse fenmeno d-se o nome de cooperatividade. A cooperatividade resulta da influncia exercida por um stio sobre outros localizados em subunidades diferentes de uma mesma molcula. No caso da mioglobina, por exemplo, que apresenta uma nica cadeia polipeptdica e um nico grupo heme, a cooperatividade no observada. Mioglobina, pO2 nos pulmes e tecidos e trabalho muscular: O fenmeno da cooperatividade, que ocorre na hemoglobina, a causa da diferena no mecanismo de oxigenao da mioglobina e da hemoglobina. Enquanto a mioglobina apresenta uma curva de oxigenao hiperblica, a hemoglobina exibe uma curva sigmoidal. A forma hiperblica aquela esperada para uma protena com um nico stio de ligao e, portanto, a ligao de uma molcula de oxignio a uma molcula de mioglobina no afeta a ligao de outras molculas de oxignio a outras molculas de mioglobina. A curva sigmoidal indica que a ligao das molculas de oxignio aos quatro heme no independente, e que o preenchimento de um heme aumenta a afinidade dos outros heme, no ocupados por oxignio. A cooperatividade exibida pela hemoglobina proporciona uma resposta mais sensvel a variaes na concentrao de oxignio, adequando-se, com perfeio, sua funo de transportar este gs nos vertebrados. No sangue arterial que sai dos pulmes, a pO 2 alta (100mmHg, em mdia) e a hemoglobina fica 98% saturada com oxignio; nos tecidos extrapulmonares, onde a pO2 baixa (sangue venoso), ela libera grande parte do oxignio. Por exemplo, a pO2 nos capilares que irrigam um msculo em atividade cerca de 20mmHg, e a hemoglobina permanea 33% saturada, liberando 65% do oxignio associado. A mioglobina seria um transportador bem menos eficiente, j que menos de 10% do seu oxignio seria liberado nessas condies. Todavia, sua alta afinidade por oxignio, mesmo em baixa pO2, permite que ela desempenhe eficientemente a funo de reservatrio

de oxignio nos msculos de mamferos, onde encontrada em abundncia. A mioglobina tem afinidade por oxignio maior que a hemoglobina em qualquer pO2, o que permite que ele seja transferido do sangue para o msculo, onde fica associado mioglobina e pode ser utilizado pelas mitocndrias das clulas musculares.

Hemoglobina fetal: O feto humano, e de outros mamferos, tem uma hemoglobina diferente da HbA, a principal hemoglobina dos adultos. Na hemoglobina fetal (HbF), as duas subunidades so substitudas por outras cadeias polipeptdicas, chamadas . A estrutura da HbF , portanto, 22, em contraposio estrutura 2 2 da HbA. A HbF tem maior afinidade por oxignio que a HbA: sua curva de saturao com oxignio deslocada para a esquerda em relao curva de saturao da HbA. Graas a essa propriedade, o feto pode obter oxignio do sangue da me, atravs da placenta. Efetivamente, a HbF oxigenada custa da HbA materna. BGP: A hemoglobina dos mamferos, quando presente nas hemcias, tem afinidade menor por oxignio que quando purificada: estas clulas contm altos nveis de 2,3bifosfoglicerato (BGP). O BGP liga-se preferencialmente desoxi-Hb, que apresenta a cavidade entre as subunidades , suficientemente grande para aloj-la. Esta cavidade circundada por radicais carregados positivamente, que interagem com os grupos negativos do BPG. Na

oxi-Hb, a cavidade menor, o que dificulta a ligao do BPG. O resultado da ao do BPG a predominncia da forma desoxigenada de hemoglobina. Em presses elevadas, esta situao pode ser revertida. Nas condies de alta pO2 dos pulmes, a hemoglobina fica saturada com oxignio, mesmo na presena de BPG. O seu papel fisiolgico aumentar substancialmente a liberao de oxignio nos tecidos extrapulmonares, onde a pO2 baixa. O nvel de BPG nas hemcias aumenta em condies associadas com hipxia tissular (oxigenao deficitria dos tecidos) prolongada. A diferena de afinidade por oxignio entre HbF e HbA devida fora de ligao de BPG aos dois tipos de hemoglobina. A HbF se liga menos eficientemente ao BGP disponvel, pois possui um par a menos de grupos positivos na cavidade onde ocorre a ligao de BPG. Assim, a forma desoxigenada desta hemoglobina fica menos estvel e a sua afinidade por oxignio aumenta: o oxignio flui da oxi-Hb da me para a desoxi-Hb do feto. Hb-BPG + 4O2 Hb(O2)4 + BPG Efeito alostrico BPG: Altitudes, HbF Efeito da temperatura: A curva de saturao do oxignio tambm deslocada para a direita quando as medidas so feitas em temperaturas mais elevadas. Este efeito da temperatura tem grande importncia fisiolgica porque permite maior disponibilidade de oxignio quando a demanda de energia alta, devido ao aumento do metabolismo celular, como acontece na febre e em grupos musculares sob contrao intensa.

Anemia falciforme: A anemia falciforme uma doena gentica na qual um indivduo herda um alelo para a hemoglobina S (HbS) de ambos os pais. Os eritrcitos destes indivduos so anormais e esto presentes em menores quantidades. Alm de haver uma quantidade incomum de clulas imaturas, o sangue contm muitos eritrcitos longos e delgados que se parecem com a lmina de uma foice. Quando a hemoglobina destas clulas (HbS) desoxigenada, ela torna-se insolvel e forma polmeros que se agregam em fibras tubulares. A hemoglobina normal (HbA) permanece solvel quando ocorre desoxigenao. As fibras insolveis da hemoglobina S desoxigenada so responsveis pela deformao dos eritrcitos. Efeito Bohr: A ligao do oxignio com a hemoglobina depende do pH. Para cada valor de pO2 considerado, a afinidade da hemoglobina pelo oxignio tanto menor quanto menor o pH. Os ons H+ (como acontece com o BPG), ligam-se preferencialmente desoxi-Hb, que passa, ento, a constituir a forma predominante: o resultado uma diminuio na afinidade da hemoglobina pelo oxignio. A associao preferencial dos ons H+ desxi-Hb evidencia que esta forma de protena uma base de Bronsted (substncia capaz de receber prtons) mais forte que a forma oxigenada. Esta diferena de comportamento cido-base conseqncia da movimentao das subunidades da hemoglobina, devido associao/dissociao do oxignio. A converso de oxi-Hb em desoxi-Hb acompanhada pela captao de prtons, que so liberados na sua oxigenao. A influncia do pH sobre a oxigenao da hemoglobina tem grande importncia fisiolgica, porque, nos organismos, um decrscimo de pH est sempre associado a uma maior demanda de oxignio. Nos tecidos, o CO2 produzido pelo metabolismo celular difunde-se at as hemcias, onde hidratado rapidamente em uma reao catalisada pela anidrase carbnica (AC). No pH do sangue (7,4-7,2), o H2CO3 dissocia-se em HCO- e H+. CO2 + H2O H2CO3 HCO3- + H+ A ocorrncia destas duas reaes consecutivas explica por que um aumento na concentrao de CO2 causa uma diminuio do pH. Este aumento de acidez, associado baixa pO2 tecidual faz com que a hemoglobina libere O2 e capte H+, impedindo que ocorram grandes variaes de pH (Os ions H+ so tamponados pela Hb). O HCO3-, produzido nas hemcias, difunde-se para o plasma.

Nos pulmes a situao inverte-se. A alta pO2 leva oxigenao da hemoglobina e liberao de H+. Esta liberao de prtons corrige o valor do pH que, de outro modo, tenderia a aumentar. De fato, com a baixa pCO2 alveolar, o CO2 eliminado na atmosfera, consumindo H+ e CO2. H+ + HCO3- H2CO3 H2O + CO2 Transporte de O2: O2 se difunde dos alvolos pulmonares para os capilares chegando na circulao. Nas hemcias, o O2 se liga hemoglobina. Em paralelo, o CO2 se difunde do sangue para os alvolos. A menor concentrao de CO2 dissolvido no sangue faz com que o pH (~7,6) seja mais alto no pulmo do que nos tecidos perifricos (~7,2) onde a pCO2 alta. As hemcias contendo HbO2 chegam nos tecidos perifricos: pO2 baixa

A combinao de uma baixa pO2 e um pH baixo nos tecidos perifricos provoca uma diminuio na saturao do O2, que liberado pela hemoglobina! Propriedades alostricas da Hb: A ligao de um O2 facilita a ligao de mais O2 (efeito cooperativo) A afinidade da Hb por O2 depende do pH e da pCO2 (efeito Bohr) A afinidade da Hb por O2 regulada por fosfatos orgnicos (BPG) IMPORTANTE: a mioglobina no apresenta nenhuma destas propriedades! Diminuem a afinidade da hemoglobina pelo O2: temperatura H+ ( pH) CO2 2,3 BPG Relaes alostricas entre H+, CO2 e O2: Nos tecidos, o pH mais baixo e a pCO2 mais alta resulta na converso da forma R para T. Isto causa a liberao do O2 porque a forma T tem menor afinidade pelo O2 que a forma R. O O2 e H+ no se ligam no mesmo stio na Hb. O resduo que mais contribui para efeito Bohr a His 146 (), que forma um par inico com o Asp94 () estabiliza a conformao T A forma T tem mais afinidade por ions H+ que a forma R pK mais alto Transporte de CO2 CO2 + Prot-H2N- H+ + Prot-NHCOO- (carbamino compostos) O H+ contribui para o Efeito Bohr