Principios de Cromatografa Qumica Analtica III

Clasificacin de la cromatografa
Esta tcnica analtica se clasifica de acuerdo a su mecanismo de separacin en cromatografa de: Reparto Adsorcin Exclusin. Intercambio inico Cromatografa de afinidad

Cromatografa de Reparto
Usa una fase estacionaria lquida que forma una fina pelcula sobre la superficie de un soporte slido. El soluto est en equilibrio entre el lquido estacionario y la fase mvil

La fase mvil puede ser un lquido o un gas segn sea el caso de la cromatografa; en caso de que la cromatografa sea lquido / lquido la fase mvil ser un liquido, o de un gas en cuyo caso es cromatografa gas/ lquido.

Cromatografa de reparto
El soluto se disuelve en la fase lquida con que est recubierta el soporte slido CROMATOGRAFIA DE REPARTO O PARTICIN Fase estacionaria: Lquido sostenido o adsorbido en un slido inerte. Fase mvil: Lquido (CLL) Gas (CLG)
Nota: Los lquidos de las 2 fases deben ser inmiscibles entre s.

Cromatografa de Adsorcin
Usa una fase estacionaria slida y una fase mvil lquida o gaseosa
CROMATOGRAFA DE ADSORCIN Fase estacionaria: slido. Fase mvil: Lquido ( CSL) Gas (CSG)

El soluto se adsorbe sobre las superficie de las partculas slidas, la separacin se explica con la desercin de sustancias contenidas en la fase mvil sobre un slido estacionario Pueden ser sistemas lquido/slido y gas/slido. En cualquier fenmeno de adsorcin influyen tres variables: adsorbente, eluente y solutos .

Cromatografa de adsorcin
El trmino adsorcin en el contexto cromatogrfico se refiere a interacciones dbiles.

Xm

Cromatografa de adsorcin
Cromatografa lquido/ slido: la fase estacionaria suele ser gel de slice , almina, carbn activado y polvo poliamida. Algunas veces al aplicar almina pueden ocurrir cambios qumicos, es decir, quimisorcin durante el paso del soluto por la fase estacionaria. Cromatografa gas /slido: los adsorbentes mas usados son: almina, gel de slice, carbn activado y mallas moleculares. Se realizan en columna. El material que sea utilizado como adsorbente debe presentar una estructura rgida, tamao uniforme y ser qumicamente inerte.

Cromatografa de Exclusin
La separacin est basada en los diferentes volmenes moleculares de los solutos. El tiempo de elusin es proporcional al peso molecular de los mismos, lo que provoca ser no muy usada con compuestos de alto peso molecular. Principalmente en este proceso se emplean geles no inicos de partculas uniformes y porosos, como fase estacionaria.

Tambin llamada de filtracin por gel o de permeacin por gel.

Separa molculas por su tamao, las molculas grandes pasan ms rpido que las pequeas, no hay una interaccin entre la fase estacionaria y el soluto, sino que la fase mvil pasa a travs de un gel poroso. Los poros pequeos dejan pasar a las molculas grandes y las molculas pequeas tardan ms tiempo en pasar a travs de la columna.

Cromatografa de exclusin molecular

Se excluyen las molculas grandes

Cromatografa de intercambio inico En este tipo de Los iones en

cromatografa existen aniones como: -SO3,o cationes como: N(CH3)3+ . Iones covalentemente unidos a la fase estacionaria slida, que ordinariamente es una resina. disolucin de carga opuesta son atrados a la fase estacionaria por fuerzas electrostticas. La fase mvil es un lquido.

Cromatografa de intercambio inico

Los aniones mviles permanecen cerca de los cationes que estn covalentemente unidos a la fase estacionaria

Resina catinica, que solo fija aniones.

Cromatografa de Afinidad
Es la ms selectiva, emplea interacciones de molculas de un soluto en particular y una segunda molcula que est unida covalentemente (inmovilizada) a la fase estacionaria. La molcula inmovilizada podra ser un anticuerpo unido a una protena determinada. Solo la protena que reacciona con el anticuerpo se fija en la columna.

Cromatografa de Afinidad
Todas las dems molculas se eliminan

Una clase especfica de molculas, se une a la fase estacionaria

Gracias y estudien!!!