LABORATORIO 2 INFORME DE LABORATORIO COMPARACION MICROSCOPIO Y ESTEREOCROSPIO

CARLOS IVN MESA MANRIQUE CDIGO: 45121608 CARLOS FELIPE MACAS HERNNDEZ CDIGO: 45112600

PROFESOR: STEVE STEPHENS

UNIVERSIDAD DE LA SALLE INGENIERA EN AUTOMATIZACIN BIOLOGA GENERAL 14 DE SEPTIEMBRE DE 2012 BOGOT D.C., COLOMBIA
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INDICE DE CONTENIDO Pagina Resumen.3 Objetivos.4 Introduccin5 Metodologa9 Resultados11 Discusin de resultados.16 Conclusiones17 Bibliografa18 Anexos..19

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RESUMEN

El microscopio ptico y el estereomicroscopio son herramientas indispensables para la observacin de microrganismos, muchos avances de la qumica, la biologa y la medicina son fruto de la observacin microscpica (Cobiella, 2008). Se ha especulado mucho acerca del origen de este instrumento, sin embargo se tiene la nocin de que su invencin se llev a cabo en el siglo XVI y que a partir de este momento su desarrollo y evolucin ha sido mayores con el pasar de los aos. Objetivo. Determinar las diferencias entre el microscopio ptico y el estereomicroscopio. Metodologa. Para llevar a cabo esta prctica se necesit realizar un montaje hmedo con recortes de peridico de la letra A, E y O, se procedi a realizar observacin en el microscopio ptico con revolver de 10, 40 y 100, en seguida se calcular el nmero de aumentos de cada observacin; del mismo modo se realizo la observacin con el estereomicroscopio y se tomo nota detallada de lo observado. Resultados Palabras claves: microscopio, estereomicroscopio, observacin, aumentos, resolucin, muestra.

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OBJETIVOS

Sealar los componentes mecnicos y pticos que constituyen el microscopio. Realizar montajes hmedos Comprobar las propiedades que posee el microscopio. Realizar correctamente el manejo del microscopio ptico Calcular el dimetro del campo de visin Comprobar los principios en que se basa la microscopa ptica. Desarrollar en trabajo colaborativo el informe de laboratorio

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INTRODUCCIN

El ser humano posee el sentido de la vista desarrollado. Sin embargo, no se pueden ver a simple vista cosas que midan menos de una dcima de milmetro. Y muchos de los avances en qumica, biologa y medicina no se hubieran logrado si antes no se hubiera inventado el microscopio (Cobiella, 2008). Historia del microscopio La base fundamental para la construccin del microscopio (del griego mikros=pequeo y skopein=observar) es el sistema de lentes. Tal es su importancia que un solo lente colocado sobre un soporte puede sr llamado microscopio. El primer microscopio formado por un objetivo y por un ocular, fue construido a finales del siglo XVI y su invencin se atribuye a los fabricantes de anteojos holandeses Hans Jansen, su hijo Zacharias y Hans Lippershey (Shannon et l., 2002). En verdad, distintas excavaciones nos remontan mucho ms atrs en la historia del microscopio: diferentes descubrimientos nos han trado a nuestros tiempos los restos de lentes planos, convexos y biconvexos con registro de antigedad que nos llevan hasta casi 3000 aos antes de Cristo. Un investigador de nombre Beck encuentra en una expedicin de 1928 estas lentes en la Antigua Mesopotamia. Es hacia la primera parte del siglo XIX que el microscopio va adquiriendo formas ms precisas y acercndose al formato que hoy conocemos. En 1610 Galileo Galilei desarrollo un primer modelo simple de microscopio, para 1655, el ingls Robert Hooke cre el primer microscopio compuesto, en el cual se utilizaban dos sistemas de lentes, las lentes oculares (u ocular) para visualizar y las lentes objetivos. Public Micrographia, el primer libro en el que se describan las observaciones de varios organismos realizadas a travs de su microscopio. En su libro, Robert Hooke llam a los numerosos compartimientos divididos por paredes clulas. El descubrimiento de las clulas provoc el rpido avance del microscopio. El holands Antoni Van Leeuvenhoek fabric sus propios microscopios simples, que lo llevaron al descubrimiento de los glbulos rojos en 1673, as como tambin al descubrimiento de las bacterias y del esperma humano.(Olympus, 2010)
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En los siglos XVIII y XIX, se hicieron esfuerzos para mejorar el microscopio, principalmente en Inglaterra. Los microscopios desarrollados por las empresas alemanas Leitz y Zeiss se popularizaron a partir de la segunda mitad del siglo XIX. (Olympus, 2010) Pero recin en el Siglo XX lleg el gran cambio, con el microscopio electrnico, que sustituy la luz por electrones; y las lentes por campos magnticos. El primer microscopio electrnico lo construy el fsico canadiense James Hillier en 1937 y poda ampliar las imgenes hasta 7000 veces. Se continu perfeccionando hasta llegar a aumentar unos dos millones de veces. En 1981 surgi el microscopio de efecto tnel (MET), que surgi aplicando la mecnica cuntica, y logrando atrapar a los electrones que escapan en ese efecto tnel, para lograr una imagen ultra detallada de la estructura atmica de la materia con una espectacular resolucin, en la que cada tomo se puede distinguir de otro, y que ha sido esencial para el avance -a su vez- de la microelectrnica moderna (Cobiela, 2005). Desde ese momento, el microscopio ptico se ha transformado en uno de los medios ms importantes para el diagnstico de las enfermedades y en la microbiologa. Partes del microscopio Todos los microscopios de luz convencionales y pticos contienen las siguientes partes Lentes oculares: Estas son las lentes a travs de las cuales miramos, habitualmente tienen el poder de entre 10x y 40x. Brazo: conecta la base con el lente ocular y la torre. Base: La base del microscopio. Iluminador: La fuente de luz localizada en la base del microscopio, con fuente de electricidad y o un observador, reflejando luz natural externa. Tabla: La plataforma con clips donde yace el espcimen Torre: La parte rotativa del microscopio con lentes de objetivo. Lentes objetivos: Hay habitualmente entre 3 y 4 de ellos, localizados en la torre. Los lentes objetivos tienen los siguientes magnificadores: 4X, 10X, 40X y 100X. Los lentes ms largos tienen un poder de 100X. Los lentes son normalmente acromticos y para focales. Lentes condensadores: Ellos focalizan la luz del rayo sobre el objeto observado.

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Tipos de microscopio Como el objetivo de esta prctica es hacer una comparacin entre el microscopio ptico y el estereomicroscopio, solo se abarcara el estudio de estos; sin embargo es oportuno mencionar que hay varias clases de microscopios disponibles segn la clase de observacin que se desee hacer o segn las necesidades del observador (Cobiella, 2005). A continuacin se mencionan las clases de microscopios y luego se aborda de modo ms detallados el microscopio ptico y el estereomicroscopio que son el objeto de estudio: Microscopio electrnico de barrido. Microscopio simple Microscopio compuesto Microscopio ptico especial Microscopio de luz ultravioleta Microscopio de fluorescencia Microscopio petrogrfico Microscopio en campo oscuro Microscopio de contraste de fase Microscopio de luz polarizada Microscopio con focal Microscopio electrnico Microscopio electrnico de transmisin Microscopio electrnico de barrido Microscopio de iones en campo Microscopio de sonda de barrido Microscopio de efecto tnel Microscopio de fuerza atmica Microscopio virtual Microscopio de Contraste de Fases. o Su sistema est compuesto por lente ocular, anillo de fases, lente del objetivo, lente del condensador y diafragma anular. Tiene una amplificacin de 1,000 a 2,000 nm. Permite observar estructuras muy difciles de distinguir. No requiere de una tincin. Microscopio de Fluorescencia. o Se compone de un primer filtro de corte o filtro de excitacin, espejo dicroico, segundo filtro de corte o filtro de emisin, fuente de iluminacin y condensador. Se observan muestras teidas, inmuno fluorescencia directa o indirecta. Microscopio de Interferencia. o Es un instrumento que permite la medida de la masa de regiones pequeas y transparentes de clulas vivas, obtenindose datos de tipo cualitativo y cuantitativo. Sus componentes son analizador rotable, un cuarto de longitud de onda, objetivo de interferencia, condensador, polarizador y filtro de interferencia. Microscopio Electrnico de Barrido.
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o Est compuesto por un can de electrones (nodo, ctodo y electroimn), sistema de barrido y de lentes. Su resolucin depende de la cantidad de electrones emitidos, contando as con un lmite de resolucin. Tiene una amplificacin de 100,000 a 200,000 veces y una alta resolucin en 3D. Microscopio Electrnico de Transmisin. o Est compuesto por can electrnico, lente condensadora, cmara de muestra, lente objetiva, lente intermedia, proyector, pantalla fluorescente y cmara (placa fotogrfica). Utiliza electrones con una longitud de onda de 0.5 . Proporciona un aumento de las clulas de 100, 000 veces aproximadamente.(4) Microscopio ptico: El microscopio ptico tiene un lmite resolucin de cerca de 200 nm (0.2 m ). Este lmite se debe a la longitud de onda de la luz (0.4-0.7 m ). Las clulas observadas bajo el microscopio ptico pueden estar vivas o fijadas y teidas (University of Arizona, 2002). El microscopio ptico ms simple es la lente convexa doble con una distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar un objeto hasta 15 veces. Por lo general se utilizan microscopios compuestos, que disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores. Algunos microscopios pticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2.000 veces. El microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular, montados en extremos opuestos de un tubo cerrado. El objetivo est compuesto de varias lentes que crean una imagen real aumentada del objeto examinado. Las lentes de los microscopios estn dispuestas de forma que el objetivo se encuentre en el punto focal del ocular. Cuando se mira a travs del ocular se ve una imagen virtual aumentada de la imagen real. El aumento total del microscopio depende de las longitudes focales de los dos sistemas de lentes. Estereomicroscopio: la visin es por reflexin, lo que per mite ver los objetos naturales. Tiene un inversor que permite ver la imagen derecha; esto hace ms fcil las manipulaciones que se realizan con lupa. Su observacin generalmente es de conjunto, debido a su gran campo. As, una mosca domstica puesta en la platina del estereomicroscopio, nos da una visin completa del animal con una talla superior a los 10 centmetros. En el microscopio slo sera posible ver, incluso con los aumentos ms pequeos, una parte de las alas y por ser stas muy transparentes. La visin estereoscpica, o sensacin de relieve, slo se consigue cuando a cada ojo lleguen imgenes distintas del objeto; por ello tiene la lupa binocular dos sistemas pticos distintos. Cada ojo, recibe una imagen por separado, captada por cada sistema ptico correspondiente del aparato, y con la convergencia necesaria para producir una visin correcta (Rufino,2004)

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METODOLOGA

Para llevar a cabo esta prctica de laboratorio y evidenciar las diferencias entre microscopio y estereomicroscopio se necesito de los siguientes materiales: Microscopio ptico Estereomicroscopio Lamina portaobjetos Cubreobjetos Letras de papel peridico Tijeras Blsamo de inmersin MATERIALES QUE LE SERN SUMINISTRADOS EN EL LABORATORIO Lamina con extendido coloreada, Microscopio,
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Papel de Arroz o de ptica, Procedimiento: 1. Se procedi a recortar del peridico las letras en mayscula. 2. Para empezar la observacin se tomo la letra A con la cual se procedi a realizar un montaje hmedo, este se realiz tomando la lamina portaobjetos completamente limpia y seca, enseguida se coloco una gota de agua en el centro, se ubic la letra A en la mitad y se humedeci el cubreobjetos para luego cubrir el preparado, las burbujas se disiparon con la yema de los dedos, la muestra se coloc sobre la platina y se procedi a su observacin. 3. Se encendi el microscopio ptico y se busc el menor aumento, el diafragma se ubico hasta conseguir mejorar la imagen, con la platina se asegur la muestra y se ubico en el centro de tal manera que quedara en todo el centro de la luz. 4. Con el tornillo macromtrico se empieza a enfocar hasta que aparezca la imagen de la muestra y con el micromtrico se busco ajustar la imagen. 5. Se procedi a realizar la observacin con el revlver nmero 10 y se tomo nota lo ms detalladamente posible. Enseguida se busc calcular el nmero de aumentos o ampliaciones multiplicando el nmero del revlver (10) por el del ocular (10). 6. Se realiz la misma observacin pero esta vez con el revlver de 40 y de la misma manera se hall el nmero de ampliaciones con la que se vea la muestra en este momento. 7. Para poder realizar la observacin de la muestra con el revlver de 100, fue necesario aplicar blsamo de inmersin a la muestra, luego ajustar nuevamente el lente y buscar el punto preciso donde se apreci una imagen ms clara, e igualmente se hall en nmero de ampliaciones. 8. Una vez realizadas las observaciones de la muestra con el revlver de 10, 40 y 100 respectivamente del microscopio ptico, se procedi a realizar la observacin en el estereomicroscopio. La manipulacin de este instrumento es ms sencilla, ya que solo se debe colocar la muestra y ajustarla hasta obtener una imagen clara. Se procede a observar y tomar nota y a describirlo visto. 9. Se repiti el procedimiento anterior pero con las letras E y O y se hizo la observacin oportuna, tanto con microscopio ptico como con el estereomicroscopio.

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RESULTADOS 1. Descripcin de los dibujos: (Vista en el microscopio y estereoscopio)

Se busca en el menor aumento y se va moviendo el diafragma para mejorar la imagen. Con la platina se asegura la muestra y se ubica la muestra de tal modo que queda en el centro de la luz, con el tornillo macro mtrico se empieza a enfocar hasta que aparezca la imagen, ajustamos imagen con el micromtrico. Para calcular el nmero de aumentos se calcula el nmero del revolver por el ocular. OBJETO AUMENTO OBSERVADO FOTOTOGRFIA O DIBUJO ANALISIS Y CONCLUCIONES

PLANTA

SIMPLE VISTA

Esta es la imagen que se ve con nuestros ojos sin ningn aumento

PLANTA

4X

Esta es la imagen con un aumento de 4x solo se ve la clula con un con un flagelo

PLANTA

10X

En este aumento se observa la cantidad de clulas que esta integrada la hoja de la planta

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PLANTA

40X

en esta figura se observa mas cerca la cantidad de clulas que contiene la hoja de la planta

PLANTA

100X

Esta imagen muestra lo gruesa que es la pared celular

PLANTA

Estereoscopio

Esta la figura nos muestra lo que podemos ver en estereoscopio.

PERIODICO

SIMPLE VISTA

En esta figura se muestra lo que se puede ver sin ningn lente.

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PERIODICO

4x

Nos muestra solo una letra del pedazo del peridico que tomamos como muestra.

PERIODICO

10X

Nos muestra la letra mas cerca. Adems nos muestra de forma irregular la forma que fue impresa la letra

PERIODICO

40X

Nos muestra los puntos de tinta que forman una letra

PERIODICO

100X

Esta figura nos muestra la forma irregular como se distribuye la tinta

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PERIODICO

ESTEROSCOPIO

Nos muestra una palabra completa con las irregularidades en la distribucin de la tinta

PULGA DE AGUA

SIMPLE VISTA

Solo vemos un punto muy pequeo

PULGA DE AGUA

4X

Podemos ver en la imagen la forma de la pulga de agua

PULGA DE AGUA

10X

Podemos ver el interior de la pulga de agua

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PULGA DE AGUA

100X

Nos muestra las patas de la pulga de agua

PULGA DE AGUA

ESTEREOCOPIO

Nos permite ver bien la forma de la pulga de agua

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DISCUSIN DE RESULTADOS

En este laboratorio no permite microscopio y el estereoscopio.

hacer la comparacin prctica

entre

el

La comparacin se realiz con diferentes muestras las cuales fueron. Una pulga de agua para la muestra animal, una hoja de una mata acutica para la muestra de vegetal, y un pedazo de peridico para la muestra no viva. Se pudo observar en la prctica que el microscopio nos permite observar ms de cerca las muestras y ver su funcionamiento de forma ms clara, la nica desventaja es que solo nos permite ver un pedazo pequeo a medida que se hace zoom lo que con el estereoscopio si podemos ya que muestra la totalidad de la muestra pero sin poder ver ms detalladamente los elementos ms pequeos de la muestra

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CONCLUSIONES

Realizamos montajes hmedos para poder observar ms de cerca las muestras. Comprobramos los principios en que se basa la microscopia ptica. Realizamos trabajo colaborativo en el informe de laboratorio. Comprendimos los componentes mecnicos y pticos que constituyen el microscopio.

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BIBLIOGRAFA

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