PLASMODIUM

Omul poate fi parazitat de 4 specii de Plasmodium: P. vivax P. malariae P. falciparum P. ovale Sunt protozoare intracelulare, cu multiplicare asexuat (schizonic) la om si sexuat (sporogonic) la insecta vector, femela de anofel. Boala se numeste malarie. Ciclul de via al plasmodiilor: A. Ciclul exoeritrocitar primar (Stadiul pre-eritrocitar; Schizogonia tisular): La om are loc nmulirea asexuat. n timpul nepturii, femela de anofel infectat injecteaz o dat cu saliva paraziii sub form de sporozoizi, care rmn n circulaie doar 30 minute. Ajung repede n ficat unde se desfsoar ciclul exoeritrocitar primar. Sporozoizii ptrund n hepatocite, unde se dezvolt, nucleul se divide, formndu-se un corp voluminos = schizondul pre-eritrocitar, care conine numerosi nuclei si deformeaz hepatocitul, mpingnd nucleul la periferia celulei. Cednd presiunii din interior, membrana celular se rupe, iar merozoizii eliberai ajung n circulaia sanguin, ptrunznd n eritrocite. Durata acestui ciclu variaz la cele 4 specii: P. falciparum 6 zile, P. vivax 8 zile, P. ovale 9 zile, P. malariae 15 zile. A. Ciclul exoeritrocitar secundar: P. vivax (1-18 luni) , P. ovale (2-8 luni) au un stadiu adiional de dezvoltare n ficat. Unii sporozoizi, ptrunsi n hepatocite, rmn n stare latent sub form de trofozoid tnr o lung perioad de timp. Se numesc hypnozoizi. Acestia se reactiveaz, cresc si se transform n merozoizi care ptrund n circulaie si invadeaz eritrocitele, provocnd o recdere a bolii. B. Ciclul eritrocitar (Ciclul asexuat eritrocitar; Schizogonia eritrocitar): Merozoizii invadeaz hematiile, n special pe cele tinere. Ei se ataseaz de suprafaa eritrocitelor prin polul apical, mping membrana si ajung n interiorul unei vacuole parazitofor. O hematie poate fi parazitat de un singur merozoid (excepie P. falciparum). Se transform apoi n trofozoid tnr, cu dimensiuni de 2-3, avnd un nucleu si o citoplasm care nconjoar o vacuol, lund aspectul de inel. Parazitul creste, consumnd hemoglobina eritrocitului, si modific forma, devenind amiboidal si ocup cea mai mare parte a celulei (trofozoid matur). Nu metabolizeaz

complet hemoglobina, reziduul care rmne este pigmentul malaric care pe un preparat colorat Giemsa apare sub form de numeroase particule mici galben-aurii la P. vivax. La P. ovale granulaiile sunt mai mari, de culoare maron, iar la P. falciparum sunt n numr redus, mari si negre. La P. malariae particulele sunt mari de culoare brun nchis. Dup cteva ore nucleul se divide de 35 ori, apare o fromaiune multinucleat = schizond sau pre-rozet. Fiecare nucleu nou format atrage n jurul su o poriune de citoplasm, formndu-se rozete caracteristice fiecrei specii. Eritrocitele care conin merozoizi maturi se rup si sunt eliberai merozoizii care vor invada alte eritrocite, devenind trofozoizi, care vor continua ciclul. Pigmentul rmas dup ce parazitul a prsit eritrocitul este fagocitat de celulele sistemului monocito-macrofagic. Majoritatea merozoizilor invadeaz alte eritrocite, dar unii evolueaz diferit transformnduse n gametocii: macrogametocit (feminin) si microgametocit (masculin) care nu se divid n organismul uman si vor muri n cteva sptmni dac nu sunt ingerai de o femel de ar anofel. C. Ciclul sporogonic: nghiind snge de la un bolnav de malarie, femela de anofel preia si paraziii aflai n diferite stadii ale ciclului eritrocitar.Elementele asexuate sunt digerate, vii rmn doar gametociii. n stomacul narului microgametocitul se transform prin exflagelaie n microgamet, iar macrogametocitul, prin expusia de corpusculilor cromatidieni, n macrogamet. Are loc fertilizarea macrogametului rezultnd un zigot cu un nucleu diploid, care prin diviziune devine haploid. Zigotul se transform apoi ntr-un ou mobil = oochinet, care traverseaz peretele stomacului printre sau prin celulele epiteliale, stabilindu-se ntre celulele epiteliale si lamina bazal. Se rotunjesc formnd un oochist n care se formeaz sporozoizii. Acestia rup membrana oochistului si migreaz n glandele salivare ale narului, de unde o dat cu saliva sunt injectai n gazda uman. Durata medie este de 15 zile. Morfologia speciilor de plasmodii: Speciile de plasmodii Stadiile evideniate n snge

Aspectul eritrocitelor Morfologia parazitului P. vivax Trofozoid tnr (stadiul de inel) mai ales hematiile tineresunt infestate;hemata se dilat, devine palid, iar n partea neocupat de parazit apar granulaii fine = punctele Shffner, care la coloraia Giemsa sunt rosii o vacuol nconjurat de o citoplasm subire si un mic nucleu rotund Trofozoid matur (stadiul amiboidal) se dilat, devine palid, iar n partea neocupat de parazit apar granulaii fine = punctele hffner mas citoplasmatic amiboidal mare care emite pseudopode cu miscri rapide vivax), nucleu mare, pigment fin galben-aurii Schizond - Rozet se dilat, devine palid, iar n partea neocupat de parazit apar granulaii fine =punctele Shffner mare, ocup aproape toat celula, vacuola dispare, citoplasma devine mai dens, nucleul se divide si se formeaz 16-24 nuclei noi atrgnd n jur o parte de citoplasm, acesta fiind stadiul de ozet n care merozoizii sunt asezai n planuri diferite (aspect muriform) n jurul pigmentului galbenmaro nchis sau crbunos. Gametocit se dilat, devine palid, iarn partea neocupat de parazit apar granulaii fine punctele Shffner sferic sau oval, ocup aproape toat celula, nu are vacuol, citoplasma este dens, nucleu dispus excentric (macro-) sau difuz (microgametocit) si prezint pigment maro. P. malariae Trofozoid tnr (stadiul de inel) predilecie pentru hematiile mature dimensiune normal (pn la o mrire de 3/4x) citoplasm bine difereniat, nucleu mare Trofozoid matur dimensiune normal (pn la citoplasm compact; nucleu (stadiul amiboidal) o mrire de 3/4x); pe frotiurile supuse unor coloraii prelungite pot apare niste puncte mici rosii = granulaiile Ziemann. mare; iau form de amib, apoi de band care se ntinde de la o margine la alta a celulei; pigmentul este brun-nchis sau negru si se aglomereaz la o extremitate a benzii, opus celei la care se situeaz nucleul.

Schizond dimensiune normal (pn la o mrire de 3/4x); pe frotiurile supuse unor coloraii prelungite pot apare niste puncte mici rosii = granulaiile Ziemann. nucleul ncepe s se divid dup 48 ore, rozeta matur se formeaz dup 72 ore; sunt 812 merozoizi cu nuclei mari asezai pe un singur plan n jurul unei mase de pigment maro-nchis. Gametocit dimensiune normal (pn la o mrire de 3/4x); pe frotiurile supuse unor coloraii prelungite pot apare niste puncte mici rosii = granulaiile Ziemann. rotund sau oval, compact, ocup aproape ntreaga hematite, nucleul compact este dispus excentric (macro-) sau difuz (microgametocit), pigment maro P. ovale Trofozoid tnr (stadiul de inel) si mreste dimensiunile si i se subiaz membrana, de aceea n momentul efecturii frotiului hematia devine oval si cu marginile franjurate, devine palid, iar n partea neocupat de parazit apar punctele Shffner citoplasm subire care nconjur o vacuol, un nucleu mare si rotund Trofozoid matur (stadiul amiboidal) mare, oval cu marginile franjurate, punctele Shffner mas citoplasmatic amiboidal mare, nucleu mare, cu pigment

maro-nchis Schizond mare, oval cu marginile franjurate, punctele Shffner mare, ocup aproape toat celula, vacuola dispare, citoplasma devine mai dens, nucleul se divide si se formeaz 16-24 nuclei noi atrgnd n jur o parte de citoplasm, acesta fiind stadiul de rozet n care merozoizii sunt asezai n planuri diferite (aspect muriform) n jurul pigmentului maro-nchis Gametocit mare, oval cu marginile franjurate, punctele Shffner rotund sau oval, compact, pot umple aproape toat hematia, nucleul compact dispus excentric (macro-) sau difuz (microgametocit), pigment maro. P. falciparum Trofozoid tnr (stadiul de inel) infesteaz si hematii tinere si adulte Inel mic, filiform cu citoplasm subire, un nucleu mare (pot fi si 2 nuclei) si o vacuol. Trofozoid matur (stadiul dimensiune normal; pe suprafaa eritrocitelor apar rar vzut n sngele periferic, form amiboidal, citoplasm amiboidal) niste excrescene care usureaz aderarea eritrocitelor de endoteliul venulelor si al capilalelor din organele interne: splin, mduv hematogen, placent, creier compact, pigment nchis la culoare

Schizond dimensiune normal; pe suprafaa eritrocitelor apar niste excrescene care usureaz aderarea eritrocitelor de endoteliul venulelor si al capilalelor din organele interne: splin, mduv hematogen, placent, creier rar vzut n sngele periferic, se gsesc 8-24 merozoizi mici; pigmentul se aglomereaz ntro mas maro nchis sau neagr Gametocit eritrocitul este distorsionat de parazit form semilunar, mai mari dect hematia, de aceea n concavitate se mai observ un rest din membrana eritrocitului; microgametocitul are un nucleu mare, difuz, citoplasma se coloreaz n albastru cu tent rosiatic, pigmentul nchis la culoare este mprstiat n toat citoplasma sub form de granule mari, extremitile sunt mai rotunjite; macrogametocitul are o citoplasm albastr, nucleul compact, granulaiile pigmentului nchis la culoare sunt grupate n jurul nucleului, extremitile sunt mai ascuite dect ale microgametocitului; Diagnosticul de laborator: Produs patologic: - snge periferic Examen direct: 1. se realizeaz frotiu din sngele periferic si se caut morfologia caracterisc a speciilor de plasmodii, respectiv a eritrocitelor. 2. dac este negativ, iar pacientul are simptomatologie, provine dintr-o zon endemic se poate efectua si identificarea speciilor de Plasmodium prin nested PCR n doi timpi, metod care are specificitate de specie. Se recoteaz sngele periferic n vacutainere cu EDTA. 3. detectarea antigenelor malarice prezente n sngele periferic prin metode de

imuncromatografie (ELISA, test rapid imunocromatografic) 4. detectarea lactat dehidrogenazei asociat speciilor de Plasmodium prin metode biochimice sau ELISA. Examen indirect: 1. detectarea anticorpilor anti-Plasmodium prin IFA