Evaluacin del habito de alimentacin de la larva de Plutella xylostella (L.

) (Lepidoptera: Plutellidae)
EDNA PAOLA BECERRA E MAESTRIA EN CIENCIAS AGRARIAS ENTOMOLOGIA Ecologa del comportamiento de plagas 2012-1

Evaluacin del habito de alimentacin de la larva de Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera: Plutellidae)

INTRODUCCION PREGUNTA OBJETIVOS METODOLOGIA RESULTADOS Y DISCUSION

INTRODUCCIN
Plutella xylostella (L.) es el insecto plaga ms destructivo de brasicceas en todo el mundo y ha desarrollado resistencia a la mayora de los insecticidas sintticos aplicados a campo

Oligofago = Brassicaceae
Es un insecto cosmopolita, con gran capacidad de adaptacin a diferentes condiciones climticas (Bertolaccini et al., 2010)

INTRODUCCION
Ciclo de vida 12 a 26 das. huevo 2,90 + 0,58 das; larva 7,96 + 0,74 das y pupa 3,19 + 0,65 das. P. xylostella cuatro instares larvales.

Colocan un promedio de 118,55 + 60,86 huevos longevidad de los adultos: 23,85 + 8,07 das para la hembra 21,81 + 9,16 das para los machos. (Fernndez y lvarez, 1988)

(Ochoa et al., 1989)

P. xylostella es un insecto especialista capaz de desarmar el sistema natural de defensas que las crucferas (Brassicaceae) poseen hacia los fitfagos, constituido por los glucosinolatos (Sarfraz & Keddie, 2005., Bertolaccini et al., 2010).

La planta presenta glucosinolatos en los tejidos que al hidrolizarse produce volatiles en las partes daadas de la planta.
Puede juga un rol en la atraccin para oviposicion y alimentacin (Rodrguez et al., 1997)

Dao
La larva perfora las hojas durante el desarrollo de la planta En etapas tempranas se reduce el rea fotosinttica y el vigor de la planta Si el dao afecta el cogollo, cuando se inicia la formacin de la cabeza este proceso se puede detener Si la planta ya tiene la cabeza formada continua barrenando y afecta la calidad del producto (Ochoa et al., 1989)

Pregunta: Cul es la conducta de alimentacin del estado larval P. xylostella (L.) (Lepidoptera: Plutellidae) en repollo Brassica oleracea (L.)?

Objetivos General: Evaluar el comportamiento de alimentacin de P. xylostella Especficos: 1. Analizar la conducta de alimentacin (deteccin del alimento y masticacin) 2. Determinar ritmo de alimentacin 3. Describir el dao dependiendo del estado larval

Metodologa
1.
Para analizar la conducta de alimentacin (deteccin del alimento y masticacin)

se observo al estereoscopio el movimiento y uso del aparato bucal para realizar el corte e ingerir el alimento

se realizo revisin de literatura para profundizar en la forma de deteccin del alimento y analizar el comportamiento observado

Metodologa
2
Para determinar ritmo de alimentacin por medio de una cmara fotografa se tomo una hoja sin presencia de dao y se colocaron larvas en diferentes estados larvales de P. xylostella.

Se realizaron grabaciones de aproximadamente media hora donde se evaluaron los tiempos de alimentacin, caminar y reposo.

Se realizo revisin de literatura sobre las tcnicas usadas para evaluar este comportamiento y comparar los resultados encontrados.

Metodologa
3.
Para describir el dao dependiendo del estado larval se realizo observacin directa

En estereoscopio se tomaron fotografas para diferenciar el dao de cada estado larval de P. xylostella

Resultados y discusin
1. Analizar la conducta de alimentacin (deteccin del alimento y masticacin)

 Receptores gustativos : un pequeo nmero (3 a 10) neuronas sensoriales dentro de un pelo o cono de la cutcula con un nico poro en la punta. sensilios uniporous, para distinguirlos de sensilios olfativos que tienen muchos poros pequeos (multiporous). Los trminos "gusto" y "quimiorrecepcin de contacto" se utilizan con referencia a sabor" en insectos

los receptores con una anatoma similar estn presentes en las antenas , tarsos y piezas bucales, y estn involucrados en regulacin de la oviposicin, seleccin de pareja y alimentacin. (Chapman, 2003)

Schematic drawing of different type of sensillasensilla . (a) multiporous olfactory sensillum; (b) uniporous gustatory sensillum; (c) mechanosensory hair. CU cuticle, DB dendritic branches, DS dendrite sheath, IDS inner dendritic segments, JM joint membrane, N nucleus, ODS outer dendritic segments, P pores, SN sensory neurons, TB tubular body, TH thecogen cell, TO tormogen cell, TR trichogen cell

 Qumicos estimulantes alcanzan las dendritas a travs del poro terminal. Cuando el insecto que se alimenta, la sensilia en las partes de la boca se baaba en el lquido que sale del alimento. Las neuronas responden a los productos qumicos en disolucin para detectar los productos qumicos en una superficie seca, el compuesto es absorbido por el material que rodea las puntas de las dendritas que a veces exuda desde el poro terminal de la sensilia (Chapman, 2003)

Neuronas activas : Fagoestimulantes Deterrentes (disuasivo) Pueden responder compuestos o estmulos, para transmitir la informacin de al SNC Los metabolitos secundarios que inhiben la alimentacin estimulan a las clulas gustativas en la sensilias del aparato bucal. Se llaman fagodisuasivas (fagodeterrentes), o simplemente disuasivo (deterrentes),

(Chapman, 2003)

 En P. xylostella los quimiorreceptores de contactoo sensilias gustativas inervan dos maxilas superiores en la galea

Actan como mediadores principales de la conducta quimiosensorial y la discriminacin de la planta hospedera

(van Loon et al., 2002)

(Chapman, 2003)

Fagoestimulantes: efectos positivos en la alimentacin sensibles a slo un tipo de compuesto.

Catalpol (glicosido) acta como fagoestimulante en Plutella xylostella (10-7M ) pero en otras especies la concentraciones de 10-3 es disuasivo

GLUCOSINOLATOS presentes brassicaceae : Sinigrin

Sinalbin

Glucocheirolin

Estimulan la alimentacin de la larva de 4 instar de P. xylostella En dietas artificiales se encontro que 18 plantas inaceptables o no hospederos pueden ser aceptable por recubrimiento de la hoja con estos compuestos

(van Loon et al., 2002)

Sinigrin

(van Loon et al., 2002)

Pico ( poca amplitud alta frecuencia) 10picos/s

Agua

Sinigrin 0,001mM

Sinigrin 1mM

(van Loon et al., 2002)

Intensidad de excitacin de la neurona Respuesta electrofisiolgica

Sensila styloconica
P. xylostella posee neuronas sensibles a glucosinolatos tanto en las sensilias estiloconicas laterales y medias las laterales son menos sensibles (1000ms=1s)

(van Loon et al., 2002)

Receptores gustativos galeales de P. xylostella Mostraron que: Sensilia laterial es inervada por una neurona sensible a sacarosa y una sensitiva a sinirgrin Se encontro una neurona sensible a inositol
Las sensilias medias son inervadas por una neurona sensible a glucosinolato y una neurona deterrente
(van Loon et al., 2002)

ac: typical larval lepidopteran uniporous sensillum styloconicum present on the maxilla. a: Reconstruction of styloconic sensillum of Mamestra configurata (Noctuidae) b: Cross-section of a styloconic sensillum approximately at the level indicated in a (flechas). One of these dendrites innervates the base of the sensillum at the top of the style and is mechanosensory, the other four are chemosensory. The dendritic sheath (cubierta) is elaborate at this level, surrounding individual dendrites and presumably providing support for them.

c: Proximal to b, the dendritic sheath is less elaborate and the five dendrites mingle in the same space.

(Mitchell et al., 1999)

Morphology of the s. styloconica on the proboscis of H. virescens. Light microscopy (LM), scanning electron microscopy (SEM) and transmission electron microscopy (TEM) (D and E) The cone has a distinct socket (coneccion) (Cs) (note the thin cuticle) (F and G) The cone has a single pore (P) at the tip with a diameter of approximately 200 nm . (Kvello et al., 2006)

protocerebrum antennal lobes oesophagus optic lobes

Three-dimensional reconstructions of the brain and the SOG (ganglio sub esofageo)of H. virescens. The termination area of the sensory neurones associated with s. styloconica on the proboscis is depicted by the blebs (B), (black dots) on the axon terminals.

SOG neuropil

Arrows show the direction of anterior (A) and posterior (P). MxN maxillary nerve; TC tritocerebral commissure; FN frontal ganglion nerve.
(Kvello et al., 2006)

Bilateral projection of one axon associated with a s. styloconicum on the proboscis of H. virescens.

(A)

Projection of an optical stack showing the axonal projections of the sensory neurones (Ax) associated with a single sensillum.

(B) Three-dimensional reconstruction of (A) in a frontal view (B), and lateral view (C) showing the axon (Ax) with the contralateral branch and the associated black blebs. The grey blebs (B) on the ipsilateral side are terminals of ipsilateral projecting neurones from seven other preparations which are merged with the projection of this neurone. Note that one of the ipsilateral branches extends into the area defined by the grey blebs in the dorsal OG/tritocerebrum. T tritocerebrum; TC tritocerebral commissure; FN frontal ganglion nerve; SOGn SOG neuropil; O oesophagus; MxN maxillary nerve.

Resultados y discusin
2. Determinar ritmo de alimentacin Reposo 1 (3 min) Reposo 2 (8 min) Bsqueda (23 min) Alimentacin 1 Alimentacin 2 Alimentacin 3 camina

Suitability of electronic monitoring system to the analysis of feeding behavior of the diamondback moth, Plutella xylostella (Lepidoptera: Yponomeutidae), larvae
(Takahashi y Kawabe, 2003) El sistema de monitoreo electrnico (EMS) se ha utilizado para medir el comportamiento de alimentacin de los insectos picadores chupadores. (Tsukuba Rika Seiki Co. Ltd.).

Midieron el comportamiento de alimentacin de las larvas de tercer estadio P. xylostella en las hojas de repollo mediante el uso de un EMS basado en computadora para correlacionar entre las formas de onda y eventos de conducta

 Un hilo de oro (20m de dimetro, 10 cm de longitud) se une directamente al segmento dorsal metatorcico de larvas de P. xylostella con pintura de plata.

La alimentacin se midi durante 60 min. Las grabaciones fueron obtenidas a partir de 15 insectos

se confirmaron cuatro formas de onda, cada forma de onda se distinguen fcilmente por la forma Camina (W), Reposo (R) Alimentacin (FB) :alimentacin (F) pausa (P)

(Takahashi y Kawabe, 2003)

La forma de onda W se registr para 15.260.8 min / h

La forma de onda R se registr para 6.760.4 min / h

Cada forma de onda se distingue segn la conducta

Las secuencias de PF se repiti aproximadamente 80 veces durante 1 horas. La duracin media de la onda F fue 24.0611.3 s, mientras que de la forma de onda P fue 4.062.6 s Estos resultados sugieren que un ataque de alimentacin de las larvas se compone de la masticacin repetida y haciendo una pausa.

 En F, se observaron muchos pulsos con amplitudes pequeas El nmero de los impulsos en la forma de onda F fue 116,46 +7.8/min La frecuencia de masticar contada durante la alimentacin fue de 115.96 + 6.7/min Un pulso = una mordedura (Takahashi y Kawabe, 2003)

(Eigenbrode y Pillai, 1998)

(Eigenbrode y Pillai, 1998)

Proportion of time (seconds per min averaged over 5-min observation) spent by neonate P. xylostella in different activities on waxes extracted from resistant, glossy NY 9427 and susceptible, normal-wax Round-Up cabbage. Of the 30 insects, those biting during the assay were included in the analysis: normal-wax, 29; glossy, 25.

Resultados y discusin
3. Describir el dao dependiendo del estado larval

Larva 1 y 2
Se alimenta de la cutcula, puntos circulares 1-5 mm dimetro

Larva 3
Se alimenta de la cutcula y mesofilo en forma circular, masticacin lateral

Larva 4

Mordida rapida

Resultados y discusin
Comportamiento minador en el primer estado larval y defoliador en los otros 3 en canola (Brassica Napus Oleifera) y Mostacilla (Paphistrum rugosum ) (Rodriguez et al., 1997)

CONCLUSIONES
P. xylostella importante plaga en estado de larva que al alimentarse de las hojas causa perdidas econmicas importantes Dentro de las conductas esta plaga (bsqueda, reposo, y alimentacin) la ultima es la mas frecuente y duradera en cualquier periodo de tiempo Los glucosinolatos de la familia Brassicaceae actan como fagoestimulantes para P. xylostella

Los quimiorreceptores maxilares permiten detectar el alimento

El conocimiento del habito y ritmos de alimentacin y tipo daos en esta especie permite generar estrategias de control

Bibliografa
Bertolaccini, I., D. Snchez y C. Arregui. 2010. Incidencia de algunos factores naturales de mortalidad de Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera: Plutellidae), en el rea centro-este de Santa Fe, Argentina . Hort. Arg. 29(68): Ene.-Abr. 2010 Chapman, R.F. 2003. Contact chemoreception in feedingby phytophagous insects. Annu. Rev. Entomol. 48:45584 Eigenbrode, S. D. y S. K. Pillai. 1998. Neonate Plutella xylostella responses to surface wax components of a resistant cabbage (Brassica oleracea). Journ. of Chem. Ecol., (24) 10. Kvello, P., T. J. Almaas., H. Mustaparta. 2006. A confined taste area in a lepidopteran brain. Arthropod Structure & Development (35 ) 3545

Bibliografa
Mitchell, B.K., H. Itagaki y M. Rivet. 1999. Peripheral and Central Structures Involved in Insect Gustation. Microscopy Research and Technique 47:401415 Rodriguez, S.M., C.Trouchot y P.Carrizo, 1997. Observaciones biologicas sobre Plutella xylostella (Lepidoptera: Yponomeutidae) en canola y mostacilla. Rev. Ch. Ent. 24 (5)-8 Sarfraz, M. y Keddie, B.A. 2005. Conserving the efficacy of insecticides against Plutella xylostella(L.) (Lep., Plutellidae). Blackwell Verlag, Berlin, JEN, 129: 149157 Takahashi,O. y S. Kawabe, 2003. Suitability of electronic monitoring system to the analysis of feeding behavior of the diamondback moth, Plutella xylostella (Lepidoptera: Yponomeutidae), Larvae. Appl. Entomol. Zool. 38 (1): 6972 van Loon, J., Ch. Z. Wang., J. K. Nielsen, R. Gols y Y. T. Qiu. 2002. Flavonoids from cabbage are feeding stimulants for diamondback moth larvae additional to glucosinolates: Chemoreception and behaviour. Ent. Exp. et Appl. 104: 2734.

GRACIAS