1

Relacin [A] con t

RESUMEN CATALIZADORES
Intervienen en alguna etapa de la reaccin pero no se
modifican pues se recuperan al final y no aparece en la
ecuacin global ajustada.
Modifican el mecanismo y por tanto E
a
.
No modifican las constantes de los equilibrios.
Pueden ser:
Positivos: hacen que v | pues consiguen que E
a
|.
Negativos: hacen que v | pues consiguen que E
a
|.
Los catalizadores tambin pueden clasificarse en:
Homogneos: en la misma fase que los reactivos.
Heterogneos: se encuentra en distinta fase.
2
3
Catlisis.
Se reserva el trmino catalizador a las sustancias que aceleran la velocidad de
reaccin; si la sustancia disminuye la velocidad de reaccin se denomina inhibidor
o catalizador
negativo. La accin del catalizador se llama catlisis
El catalizador no aparece en la ecuacin neta de la reaccin, ya que se
regenera en el transcurso de la misma
Los catalizadores aumentan la velocidad de reaccin debido a que disminuyen la
energa de activacin. El catalizador cambia el mecanismo de la reaccin:
proporciona un camino de reaccin alternativo, cu ya E
a
sea menor
Los valores de AH
r
, AS
r
y
AG
r
no se ven afectados por
la presencia del catalizador
La presencia del catalizador
no afecta en nada al calor de
reaccin ni a la espontaneidad
del proceso
4
TIPOS DE CATLISIS
Catlisis homognea: el catalizador se encuentra en la misma fase que los reactivos.



Catlisis heterognea: el catalizador se encuentra en una fase diferente de la de los
reactivos. Su mecanismo se basa en la adsorcin de las molculas reaccionantes
(gases) en la superficie del catalizador (slido), sobre la que ocurre la reaccin.











Ejemplo: fabricacin de H
2
SO
4
por el mtodo de las cmaras de plomo:
2 SO
2
(g) + O
2
(g) 2SO
3
(g) se cataliza con una mezcla gaseosa de
NO
2
+ NO
Ejemplo: O
2
+ 2H
2
2 H
2
O sobre platino
5
El reactivo o sustrato encaja perfectamente en un punto especfico de
la superficie de la enzima, mantenindose en esta posicin por fuerzas
intermoleculares
Despus de esta adsorcin, la configuracin de la enzima puede variar,
debilitndose el enlace clave del sustrato y aumentando la velocidad
de reaccin
Catlisis enzimtica: las sustancias que catalizan las reacciones
bioqumicas se llaman enzimas (proteinas de elevada masa molecular)



Ejemplo: las reacciones que tienen lugar en el cuerpo humano pueden
realizarse a la temperatura del organismo (37C) gracias a la accin de
las enzimas
Ejemplo:
Teniendo en cuenta la grfica
adjunta:
a) indique si la reaccin es exotrmica
o endotrmica;
b) represente el valor de AH de reaccin;
c) represente la curva de reaccin al aadir un catalizador positivo.
d) qu efectos produce el hecho de aadir un catalizador positivo?
a) Es exotrmica ya que E
productos
< E
reactivos
.
d) Disminuye la E
activacin
y por tanto existe una
mayor cantidad de reactivos con energa
suficiente para reaccionar; por tanto aumentar
la velocidad.

6
reactivos
productos
coordenada de reaccin
AH
N
2
(g) + 3H
2
(g) 2NH
3
(g)
Fe/Al
2
O
3
/K
2
O
catalizador
Proceso de Haber
13.6
Proceso Ostwald
Un alambre caliente Pt
sobre una disolucin
NH
3

Pt-Rh catalizador usado
en el proceso Ostwald
4NH
3
(g) + 5O
2
(g) 4NO (g) + 6H
2
O (g)
Pt catalizador
2NO (g) + O
2
(g) 2NO
2
(g)
2NO
2
(g) + H
2
O (l) HNO
2
(ac) + HNO
3
(ac)
13.6
Convertidores catalticos
CO + Hidrocarburos no quemados + O
2

CO
2
+ H
2
O
convertidor
cataltico
2NO + 2NO
2

2N
2
+ 3O
2

convertidor
cataltico
Colector de gases de escape
Tubo de escape
Convertidores catalticos
Compresor de aire;
Fuente secundaria de aire
Salida de tubo de escape
Catlisis enzimtica
Sustrato Productos
Enzima
Complejo
Enzima-Sustrato
Enzima
Mecanismo Michaelis y Menten:
E + S ES
k
1
k
-1

1)
2) ES E + P
k
2

K
1
[E] S - k_
1
[ES] - K
2
[ES] = 0
Tratamiento cintico estacionario ([ES]=cte)
[E]
o
= [E] + [ES]
K1 ([E]
o
- [ES]) [S] - (K_
1
+ K
2
)[ES] = 0
v=k
2
[ES]


Constante de Michaelis: K
m
= (k
-1
+k
-2
)/k
1

S muy pequea
V =
K
2
[E
o
] [S]
K
m

= k [E
o
][S]
K
m

v = k
2
[E
o
]
<< S
13
La ecuacin anterior demuestra que la formacin de producto es
constante de algn valor mximo igual al producto de la
concentracin inicial de enzima por k2. Tambin se puede
construir una grafica reciproca de la velocidad de reaccin
resultando la ecuacin de Lineweaver-Burk
14
DeVoe y Kistiakowsky estudiaron la cinetica de hidratacin de CO2
catalizada por la enzima carbonico anhidrasa.
CO2 + H2O HCO3- + H+
En esta reaccin el CO2 se convierte en ion bicarbonato. El bicarbonato
es transportado por el flujo sanguneo y se vuelve a convertir en CO2 en
los pulmones, una reaccin que esta catalizada por la carbnico
anhidrasa. Se obtuvieron las siguientes velocidades de reaccin inicial
para la reaccin de hidratacin con concentracin de 2.3nM y temperatura
de 0.5C.
Velocidad (M s-1) [CO2] (nM)
2.78 x10-5 1.25
5.00x10-5 2.5
8.33x10-5 5.0
1.67x10-4 20.0
Determinar Km y k2 para la enzima a esta temperatura
Cintica Enzimtica
La cintica enzimtica es el anlisis cuantitativo del efecto de cada
uno de los factores que intervienen en la actividad enzimtica, que
se evala a travs de la velocidad de la reaccin catalizada.
Las variables ms importantes son:
Concentracin de enzima, sustratos y productos
(incluyendo inhibidores y/o activadores)
pH
Temperatura
Ella est basada en la medicin de la velocidad de reaccin. As en
la reaccin:


Se tendr:
Como se observa en la figura, la velocidad de reaccin (pendiente)
disminuye continuamente a partir de un valor mximo inicial. Esto
se puede deber a:
Desaturacin de la enzima con sustrato, por disminucin
de la concentracin del sustrato
Inactivacin de la enzima por su inherente inestabilidad
Inhibicin por el producto
Desplazamiento del equilibrio, si la reaccin es
reversible
dt
ds
dt
dp
v = =
E
S P
Baja
concentracin
de sustrato
ALTA
concentracin
de sustrato
SATURACION
v
[s]
Efecto de la concentracin de substrato
.
.
.
.
.
. .
.
E + S
ES E + P
k
+1

k
-1

k
+2

Una cintica hiperblica implica un proceso saturante:
Hay un nmero limitado de sitios en la enzima
para fijar substrato; una vez que estn ocupados
todos, por mucho que aumente la concentracin
de substrato, la velocidad permanecer constante
tendiendo a un valor asinttico
El sistema de ecuaciones diferenciales que describe la dinmica
del sistema
E + S
ES E + P
k
+1

k
-1

k
+2

Sistema No admite solucin analtica.

- Simulaciones numricas
- Hiptesis que lo simplifiquen
Hiptesis de Michaelis - Menten
E + S
ES E + P
k
+1

k
-1

k
+2

- La primera parte del mecanismo,
E + S
ES
k
+1

k
-1

Tiene lugar mucho ms rpidamente que la segunda:
ES E + P
k
+2

| || |
| |
( )
K
E S
ES
es
x
e x s
x
m
= = =

0
x
e s
K s
m
=
+
0
v
k e s
K s
m
=
+
+2 0
k e V
+
=
2 0 max
v
V s
K s
m
=
+
max
Hiptesis de
Michaelis-Menten
Equilibrio rpido
v k x =
+2
Hiptesis de estado estacionario
Segn veamos en la simulacin numrica, hay un tiempo
relativamente prolongado en el curso de la reaccin en el
que la variacin de complejo [ES] es prcticamente igual
a cero:
dx/dt = k
+1
es - (k
-1
+ k
+2
) x = 0
A partir de esta expresin podemos llegar a obtener una
expresin que nos da la velocidad para la concentracin
de substrato
( )
dx
dt
k es k k x = = +
+ +
0
1 1 2
( ) ( ) k es k e x s k k x
+ + +
= = +
1 1 0 1 2
x
e s
k k
k
s
e s
K s
m
=
+
+
=
+
+
+
0
1 2
1
0
v
V s
K s
m
=
+
max
v k x =
+2
k e V
+
=
2 0 max
Hiptesis de
estado estacionario
A partir de las suposiciones de Michaelis-Menten y
Estado estacionario, llegamos a la ecuacin
K
m
+ s
v =
V
max *
s
La nica diferencia radica en el significado de K
m
:

K
m
= k
-1
/k
+1
en mecanismo de M.M.

K
m
= (k
-1
+ k
+2
)/k
+1
en mecanismo de E.E.
Significado de la constante K
m

1. Constante de equilibrio de disociacin del complejo ES
(en condiciones de equilibrio rpido)

2. Medida inversa de la afinidad de la enzima por el substrato
(en condiciones de equilibrio rpido)

3. Mide la funcin de fijacin (en cond.de equilibrio rpido)

4. Concentracin de substrato para la que la velocidad se hace
igual a la mitad de la mxima (s
0.5
)

5. Se define para una pareja enzima-substrato

6. Se mide en unidades de concentracin
Significado de la constante V
max
= k
+2
e
0

1. Velocidad asinttica para s

2. Directamente proporcional a la concentracin de
enzima (hoy se prefiere caracterizar a la enzima
por k
+2
)


3. Mide funcin de transformacin cataltica

4. Se expresa en unidades de velocidad
RELACIN ENTRE KM Y VMAX
MICHAELIS Y MENTEN
Concentracin de Sustrato [S]
V
e
l
o
c
i
d
a
d

d
e

l
a

r
e
a
c
c
i

n

(
v
)

Km
Vmax
Vmax/2
La Km es la concentracin de sustrato
donde se obtiene la mitad de la Vmax
Concentracin de Sustrato [S]
V
e
l
o
c
i
d
a
d

d
e

l
a

r
e
a
c
c
i

n

(
v
)

Km
Vmax
Vmax/2

A mayor Km, menor es la afinidad de la enzima por el sustrato
A menor Km mayor es la afinidad de la enzima por el sustrato
Representacin directa
s
0 20 40 60 80 100
v
0
20
40
60
80
100
K
m

V
max

v
V s
K s
mx
m
=
+
Representacin recproca doble
(Lineweaver - Burk)
1/s
-0.4 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6
1/v
0.00
0.01
0.02
0.03
0.04
1 1 1
v
K
V s V
m
mx mx
= +
-1/K
m

1/V
max

REPRESENTACIN LINEWEAVER-BURKE
Representacin s -s/v
(Eadie - Hofstee)
s
-20 0 20 40 60 80 100 120
s/v
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
s
v V
s
K
V
mx
m
mx
= +
1
-K
m

REPRESENTACIN HANES
Representacin v/s - v
(Wong - Hanes)
v/s
0 2 4 6 8 10 12 14 16
v
0
20
40
60
80
100
v K
v
s
V
m mx
= +
V
max

REPRESENTACIN DE EADIE-HOFSTEE
MTODOS DE LINEALIZACIN PARA DETERMINACIN
PARMETROS CINTICOS
Mtodo Eje Y Eje X Intercepto
Eje Y
Intercepto
Eje x
Pendiente
Lineweaver-
Burke
1/v 1/s 1/V -1/K K/V
Hanes s/v s K/V -K 1/V
Eadie-
Hofstee
v v/s V V/K -K
Un Qumico midi la rapidez inicial de una reaccin catalizada por
enzima en presencia y en presencia del inhibidor A y en un
procedimiento aparte del inhibidor B. En cada caso el inhibidor fue
de 8mM (8x10
-3
M). A continuacin se muestran los datos
36
[S]/M Vo/M s
-1
Sin inhibidor
Vo/M s
-1
Inhibidor A
Vo/M s
-1
Inhibidor B
0.0005 0.00000125 0.00000058 0.00000038
0.001 0.000002 0.00000104 0.0000063
0.0025 0.00000313 0.000002 0.000001
0.005 0.00000385 0.00000278 0.00000125
0.01 0.00000455 0.00000357 0.00000143
a) Determine los valores de Km y Vmax de la enzima b)
Determine el tipo de inhibicin causada por los inhibidores A y
B y calcule el valor de K1 en cada caso.