UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO Fac.

de Ingeniera Ambiental y Recursos Naturales

Curso: analisis instrumental

C ROMATOGRAFIA

IONICA

ALUMNO:

Snchez Castillo, Jean Carlos

Profesora : Aliaga Martnez, Maria

OBJETIVO

Aniones inorgnicos y orgnicos: Fluoruros, cloruros, nitritos, bromuros, nitratos, fosfatos, sulfatos, bromatos, cloritos, cloratos, actico, ctrico, tartrico, lctico, srbico, benzoico -Cationes: Sodio, amonio, potasio, calcio, magnesio

P ROCESO
Es un proceso que permite la separacin de iones y molculas polares basado en las propiedades de carga de las molculas. Puede ser usada en casi cualquier tipo de molcula cargada, incluyendo grandes protenas, pequeos nucletidos y aminocidos. La solucin que debe inyectarse es usualmente llamada "muestra" y los componentes separados individualmente son llamados analitos. Es usada a menudo en purificacin de protenas, anlisis de agua o control de calidad.

PRINCIPIOS

Se basa en el uso de resinas de intercambio inico. Cuando una muestra inica atraviesa estas columnas, los iones presentes se separan debido a las diferentes retenciones que sufren al interactuar con la fase fija de las columnas analticas. Una vez separada, la muestra pasa a travs de un detector (conductimtrico, amperomtrico, UV...) donde se registra la seal obtenida respecto al tiempo de retencin.

El resultado son unos cromatogrmas donde la posicin de los mximos nos indica el in presente (carcter cualitativo) y su rea nos indica que cantidad existente de dicho in (carcter cuantitativo).

SEPARACIN DE PROTENAS
Las protenas tienen numerosos grupos funcionales que tienen cargas positivas y negativas. La cromatografa de intercambio inico separa las protenas de acuerdo a su carga neta, la cual depende la composicin de la fase mvil. Ajustando el pH o la concentracin de iones de la fase mvil, varias molculas de protena pueden ser separadas. Por ejemplo, si la protena tiene una carga positiva con un pH de 7, entonces puede unirse a una columna cargada negativamente, mientras que una protena con carga negativa no lo podra hacer. Tambin podra eliminarse cambiando el pH para que la carga neta de la protena sea negativa.

TCNICA TPICA
Un muestra es introducida, de forma manual o con autosampler, dentro de un ciclo de muestras de volumen conocido. Una solucin buffer acuosa conocida como fase mvil del bucle a la columna que contiene alguna forma de material en fase estacionaria. Esto es tpicamente una resina o matriz de gel que consiste en agarosa o celulosa unido a grupos funcionales cargados. Los analitos objetivo (aniones o cationes) son conservados en la fase estacionaria pero pueden ser eliminados incrementando la concentracin de especies de similar carga que pueden desplazar los iones analitos de la fase estacionaria. Por ejemplo, en la cromatografa de intercambio catinico, los analitos cargados positivamente pueden ser desplazados agregando iones de sodio cargados positivamente. Los analitos de inters pueden entonces ser detectados de varias maneras, tpicamente por conductividad o por absorcin de luz UV/Visible.

TIPOS DE FASE
La fase estacionaria insoluble lleva en la superficie cargas electrostticas fijas, que retienen contra iones mviles que pueden intercambiarse por iones de la fase mvil La fase mvil en cromatografa de intercambio inico suele ser una disolucin acuosa con cantidades moderadas de metanol u otro disolvente orgnico miscible con agua que contiene especies inicas en forma, generalmente de buffer

PARTES

DEL PROCESO

Para realizar una cromatografa de intercambio inico son necesarios los siguientes materiales:
(1) Columna de vidrio (2) Matriz de intercambio inico (Resina) (3) Eluyente (4) Muestra a fraccionar (5) Colectores. La mayora de los experimentos basados en esta tcnica estn basados en 4 etapas.

PROCESO DE MUESTRA

Equilibrio: El primer paso es el equilibrio de la fase estacionaria con las condiciones iniciales deseadas. Cuando el equilibrio se ha logrado, toda la fase estacionaria se encuentra asociada a iones complementarios (que pueden ser cloro o sodio). Por ejemplo, un intercambiador catinico sulfonado asociado a Na+ producto de la disociacin de NaOH. Aplicacin y Lavado: El paso siguiente es aplicar la muestra la cual queremos filtrar a travs de la columna mediante un lavado especfico. Para ello es necesario aplicar un buffer con el mismo pH y fuerza inica que el buffer inicial para que todas las protenas cargadas se unan al intercambiador.

Elusin: Las molculas captadas por el intercambiador son eludas debido a cambios en la composicin del buffer. Una manera comn es incrementando la fuerza inica con cloruro de sodio u otra sal comn. Los aminocidos sern eludos dependiendo de la carga neta que estos posean. A medida que se aumenta gradualmente el pH y la concentracin de NaCl del medio eluyente acuoso, los aminocidos descienden en la columna a velocidades diferentes y pueden recogerse en muchas pequeas fracciones. Regeneracin: Por ltimo, remover las partculas que an estn asociadas al intercambiador. Para ello se debe generar un cambio ms drstico en el pH y la concentracin salina. Ahora la fase estacionaria puede volver a ser utilizada.

A PLICACIN

C ROMATOGRAFA
CIC - 100

INICA

1. Unidad central
2. Bomba de la cromatografa del ion 3. Detector de la conductividad 4. Sistema de flujo 5. Sistema analtico de la cromatografa 6. Sistema de supresin

US $15,881 - 16,381 / Sistema

7. MPPM
8. Software de la cromatografa 9. Sistema del control de la temperatura