Pengaruh Modifier pada Reaksi Enzimatik

Charliandri S. Wahab (09040014) Jefri Arisandi (09040118)

M. Sarfian Noor (09040083)

Endah Fitriyastuti (2010-024)

Kristiria (2010-046)
Pretty Mulya U (2010-035) Alvina Prastika (2010-010)

Dasar Teori

Modifier = modulator = efektor (bahan yang dapat mengubah aktivitas enzim). Bahan tersebut terbagi menjadi 2 yaitu : senyawa organik dan senyawa anorganik. Senyawa anorganik terbagi : - modifier positif : koenzim dan metabolit allosterik

- modifier negatif : inhibitor reversible dan irresible

Senyawa organik (logam) terbagi : - modifier positif : Fe, Mn, Cu, Ca, Zn. Dalam jumlah sedikit logam ini berfungsi sebagai kofaktor - modifier negatif : logam berat seperti Hg, Ag, Pb

Progress Curve

Terlihat grafik /kerja enzim tanpa penambahan inhibitor (garis merah) dapat menghasilkan produk lebih banyak daripada yang ditambah inhibitor (garis biru).
Hal ini disebabkan karena enzim telah mengikat inhibitor sehingga tidak dapat mengikat substrat.

Alat dan Bahan

Alat

Reagensia

1. Bejana Erlenmeyer

2. Pipet volumetric 1ml

3. Tabung reaksi 10 buah 4. stopwatch

1. Larutan enzim E (saliva) 2. Larutan NaCl 0,9% 3. Larutan dapar pH 6,5

4. Larutan substrat S
5. Larutan HgCl2 (di dalam botol kecil) 6. Larutan KI-KIO3 7. Larutan HCl 0,05 N

Bagan Alir
Siapkan 10 tabung reaksi bersih Beri masing-masing tanda 0, 5, 10, 15, 20

Siapkan erlenmeyer dan pipet volumetric

Ambil 15ml dapar + 3ml larutan S + 6ml NaCl 0.09% Goyang erlenmeyer agar isi tercampur rata Isi masing-masing 5 tabung reaksi dengan 10ml HCl 0,05 N

Pipet 1ml larutan dalam erlenmeyer

Masukkan ke dalam tabung reaksi bertanda 0

Pipet 1ml enzim E + dalam erlenmeyer

Goyang erlenmeyer agar isi tercampur rata

Ambil 1ml larutan dalam labu erlenmeyer Masukkan dalam tabung reaksi tanda 5 tepat pada menit ke-5 Lakukan kembali prosedur untuk menit ke 10, 15, 20

Tambahkan 1ml larutan KI-KIO3 Campur merata dengan membalik-balikkan tabung Diamkan kira-kira 5 menit Saring subtrat dan bacalah absorbance Dari nilai absorbance hitung % substrat yang dicerna

enzim saliva

larutan dapar

larutan substrat amilum

Lar. induk

lar. Induk dng enzim

Lar. induk

10

15

20 + 2 ml KI-KIO3

10

15

20 0

10

15

20

Tiap tabung diisi 5 ml HCl 0,05 N

Catat nilai transmisi yg terlihat

Hasil Praktikum
Waktu 0 5 10 15 20 Transmisi 96 91 61 80 90 Absorbance 0,0177 0,0410 0,2147 0,0969 0,0458 % Substrat yang Dicerna 0% -131,64% -21,30% -447,46% -158,75% % Substrat yang tidak dicerna

Grafik Kelompok
kelompok 2
0% -50% -100% -150% -200% -250% -300% -350% -400% -450% -500% kelompok 2 0' 5' 10' 15' 20'

grafik kelompok 1-5

200%

0% 0' 5' 10' 15' 20'

-200%

% substrat dicerna

-400%

kelompok 1

kelompok 2
kelompok 3

kelompok 4

-600%

kelompok 5

-800%

-1000%

-1200%

Hasil Praktikum Kelas

Kelompok 0 5 -411,47 -131,64 -625,67 -1136,32 -104,52 0 -125,05 78,46 43,81 -76,19 10 -411,47 -21,30 -360,81 -1100 -51,98 12,98 -146,31 47,56 43,81 14,60 15 -305,96 -447,46 -312,16 -927,35 25,96 -74,59 82,15 29,21 -14,92 20 -516,97 -158,75 -712,61 -894,63 50,28 -167,67 -353,69 0 29,21 0

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Pembahasan

Dari grafik diatas terlihat modifier mempengaruhi kerja reaksi enzimatik. Pada penambahan NaCl enzim tidak dapat bekerja sempurna, seharusnya NaCl dapat mempercepat reaksi enzimatik Berbeda dengan penambahan HgCl2. Penambahan ion logam berat dapat menghambat kerja enzimatik. Tetapi pada praktikum ini penambahan HgCl2 tidak terlalu menganggu kerja enzim

Kesimpulan

Inhibitor adalah zat yang dapat menghambat kerja enzim. Penghambatan kerja enzim dibedakan menjadi penghambatan reversibel dan penghambatan ireversibel. Selain itu, ada pula inhibitor kompetitif dan inhibitor non-kompetitif. Inhibitor nonkompetitif yang reversible menurunkan percapatan reaksi maksimal yang diperoleh pada pemberiaan sejumlah tertentu enzim Inhibitor non-kompetitif ireversibel yaitu inhibitor yang berikatan dengan enzim tidak pada active site-nya dan pengikatan inhibitor-enzim tidak dapat lepas lagi. Ion-ion logam berat, seperti Ag+ dan Hg2+, dapat mengurangi aktivitas enzim. Jika ion logam berat ini berikatan dengan enzim, enzim akan mengalami denaturasi sehingga aktivitas enzim kecil sekali.