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inmunoquimicaBIOQUIMICA

inmunoquimicaBIOQUIMICA

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Published by: Leydi Laura Lopez Santos on Dec 10, 2012
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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICOINSTITUTO DE BIOTECNOLOGÍA
Maestría en Ciencias BioquímicasCurso de Métodos Fisicoquímicos en Biotecnología
Inmunoquímica
Presenta:IBQ. Rocío Vanessa Calderón PascacioCoordinador del curso Dr. Roberto P. Stock Silberman
Cuernavaca, Morelos, Junio 2007
 
2
Contenido
Introduccn ……………………………………………..……………………………...4Historia de la inmunoloa ……………………………………………………………...4Anticuerpos ……………………………………………………………………………..10Antígenos ……………………………………………………………………………….13Interacción antígeno-anticuerpo ………………………………………………………...15Anticuerpos monoclonales y policlonales ………………………………………………17Técnicas inmunoquímicas ……………………………………………………………...19Técnicas de precipitación ……………………………………………………….21Reacción de precipitación clásica ……………………………………….21Técnica de precipitación ……………………………………………….22Técnica de difusión radial doble de Ouchterlony ……………………….23Técnica de inmunoelectroforésis ………………………………………..23Incremento de precipitación por inmunoelectroforesis concontracorriente …………………………………………………..23Técnica de difusión radial simple de Manzini (SRID) ………………….24Técnicas de aglutinación ………………………………………………………..25Aglutinación de partículas recubiertas por antígeno …………………25Hemoaglutinación directa ……………………………………………….26Hemoaglutinación indirecta ……………………………………………..27Técnicas de inmunofluorescencia ……………………………………………27Citometría de flujo ………………………………………………………29Técnica de radioinmunoensayo ………………………………………………32Técnica de enzimoinmunoensayo (ELISA) …………………………………….34 Nefelometría …………………………………………………………………….36Selección de células unidas a un anticuerpo …………………………………39Purificación de antígenos y anticuerpos por cromatografía de afinidad ………..39Inmunoprecipitación e inmunoblotting …………………………………………40Western blot, Dot blot y Slot blot ……………………………………….41Detección específica de proteínas en filtros …………………….43Bloqueo de la membrana ………………………………………..43
 
3Tinción de proteínas en el filtro …………………………………45Colorantes ……………………………………………………….45Tinción mediante biotina-estreptavidina ………………..45Tinción mediante oro coloidal ……………………..........45Análisis de interacciones moleculares (BIAcore) ……………………………46Aplicaciones principales ………………………………………………...47Otras técnicas basadas en la unión antígeno-anticuerpo ………………………..47Técnicas de biología molecular útiles en inmunología ………………………48Southern Blot …………………………………………………………48Hibridación fluorescente
in situ
(FISH:
 F 
luorescent
 I 
n
itu
 H 
ybridization) …………………………………………………………...49FISH de Metafase …………………………………………….....50FISH de Interfase ………………………………………………..50PCR 
in situ
………………………………………………………………51Mecanismo de la reacción ………………………………………52Bibliografía ……………………………………………..………………………………53

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