Welcome to Scribd, the world's digital library. Read, publish, and share books and documents. See more
Download
Standard view
Full view
of .
Save to My Library
Look up keyword
Like this
8Activity
0 of .
Results for:
No results containing your search query
P. 1
Pembuatan Preparat Hewan

Pembuatan Preparat Hewan

Ratings: (0)|Views: 487 |Likes:
Published by d3r1v4t
mikroteknik
mikroteknik

More info:

Published by: d3r1v4t on Dec 16, 2012
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as DOCX, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

03/16/2014

pdf

text

original

 
1
PEMBUATAN PREPARAT JARINGAN HEWAN
Pada dasarnya pembuatan preparat jaringan hewan terdiri atas prosespengambilan organ yang akan dibuat preparat
section
-nya, proses pengawetan(fiksasi), proses dehidrasi,
clearing
,
embedding
, pemotongan blok, deparafinisasi,rehidrasi, pewarnaan,
clearing
, dan
mounting
. Metode pewarnaan yang digunakandisesuaikan dengan jaringan atau organ yang akan dibuat preparatnya. Metodepewarnaan yang umum digunakan diantaranya adalah pewarnaan Hematoxilin-Eosin(H-E), pewarnaan Mallory Azan (M-A), pewarnaan Verhoef Van Gieson (VVG),pewarnaan Impregnasi Perak, dan pewarnaan
Periodic Acid Schiff 
. Adapun padapraktikum pembuatan preparat jaringan hewan ini digunakan metode pewarnaanhematoxylin-eosin (H-E).
ALAT DAN BAHANAlat:
 
Botol anestesi
 
Papan bedah
 
Alat bedah
 
Spuit
 
Inkubator
 
Gelas obyek dan gelas penutup
 
Mikrotom
 
Mikroskop
Bahan:
 
Tikus putih
 
Eter
 
2
 
NaCl fisiologis 0,09%
 
Larutan Bouin
 
Alkohol
 
Xylol
 
Parafin
 
Air kran
 
Pewarna Hematoxylin
 
Pewarna Eosin
 
Entellan
CARA KERJA
1.
 
Pengambilan Sampel
Tikus putih dibius menggunakan eter dalam botol anestesi sampai pingsan.Letakkan tikus putih pada punggungnya di atas papan bedah. Keempatkakinya difiksasi menggunakan jarum pentul. Rambut tubuh di linea medianadibasahi sedikit air. Kulit di anterior genitalia eksterna diangkat menggunakanpinset dan dipotong lateral. Arah gunting kemudian dilanjutkan ke arahanterior tubuh sampai memotong diafragma dada dan berlanjut sampai kebawah mandibula. Kulit kemudian diangkat dari jaringan di bawahnyamenggunakan pinset dan difiksasi pada papan bedah menggunakan jarumpentul. Dinding perut dibuka dan ambillah organ-organ yang akan digunakandibuat preparat histologi. Organ yang dikehendaki segera diambil dandimasukkan ke dalam larutan pencuci, kemudian dimasukkan ke larutanpengawet (larutan Bouin). Untuk organ pencernaan, sebelum diambil segeradisuntik dengan larutan pengawet.
2.
 
Proses Pengawetan (Fiksasi)
Organ yang akan dibuat preparat dimasukkan ke dalam larutan Bouin dandisimpan selama 24 jam.
3.
 
Proses Dehidrasi
 
3
Jaringan dihilangkan kandungan airnya dengan cara dimasukkan ke dalamalkohol bertingkat, mulai dari 70%, 80%, 90%, 95%, dan 100%, masing-masing selama 30 menit.
4.
 
Clearing
Jaringan yang sudah didehidrasi kemudian dimasukkan dalam larutan xylolselama 1,5 jam.
5.
 
 Embedding
Sebelum di-
embedding
jaringan dimasukkan ke dalam xylol:parafin 1 (3:1),xylol:parafin 2 (1:1), xylol:parafin 3 (1:3), dan parafin murni dua kali,masing-masing selama 30 menit (diletakkan dalam oven suhu 56-58
C.Setelah dari parafin murni, jaringan di-
embedding
(diblok) dengan parafinsampai mengeras.
6.
 
Pengirisan Blok 
a.
 
Masukkan preparat dalam blok parafin ke dalam lemari es agar keras.b.
 
Letakkan blok pada mikrotom, kemudian iris dengan ketebalan 5 mikron.
 
c.
 
Ambil potongan jaringan menggunakan kuas kecil dan ditempel padagelas obyek serta diberi lem dari putih telur dan gliserin.
 
d.
 
Tetesilah dengan satu tetes formalin 4%.
 
e.
 
Pindahkan ke inkubator selama 12 jam.
 
7.
 
 Deparafinisasi
Jaringan yang sudah menempel pada gelas obyek dimasukkan ke dalam xylol1, xylol 2, dan xylol 3, masing-masing selama 1 menit.
8.
 
 Rehidrasi
Setelah dari xylol 3, gelas obyek direhidrasi dengan jalan dimasukkan kedalam alkohol absolut 1, absolut 2, absolut 3, alkohol 95%, alkohol 90%,alkohol 80%, dan alkohol 70%, masing-masing 1 menit. Kemudian obyek tersebut dimasukkan ke dalam wadah yang dialiri air kran yang mengalirselama 10 menit.
9.
 
Pewarnaan

Activity (8)

You've already reviewed this. Edit your review.
1 thousand reads
1 hundred reads
Erik Henci liked this
Tyl Murny liked this
Nia Anzini liked this
Fandri Samudra liked this
Sue Haida liked this

You're Reading a Free Preview

Download
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->