R m (-) coccus S agilis S R R elaninogenicus S V R s crodens S S S ortiferum R S S m S S S bacterium Sp. R lus Gram (+) sporeforming I.

. TUJUAN PRAKTIKUM : R Memahami gambaran mikroskopik rida pengecatan Gram).

S R S

S R R V
,

S R LEMBAR KERJA PRAKTIKUM S R S KUMAN ANAEROB R S S S

S kuman anaerob (bentuk, susunan, sifat terhadap

Memahami gambaran pertumbuhan kuman anaerob pada media GAM semi solid. Memahami isolasi dan identifikasi kuman anaerob. Memahami cara membedakan kuman anaerob dan aerob. II. DASAR TEORI : (Tulislah Dasar Teori sebanyak 150-200 kata pada lembar ini sebelum pelaksanaan praktikum)

III. ALAT DAN BAHAN : A. Alat :

B. Bahan :

- Lampu spiritus/bunsen - Spesimen klinik (dari penderita terinfeksi kuman anaerob) - Korek api - Media GAM semi solid - Obyek glass - Cat Gram - Kertas label - Minyak imersi - Ose bulat - Contoh preparat mikroskopik kuman anaerob - Rak pengecatan - Contoh pertumbuhan kuman anaerob pada GAM semi solid Mikroskop - Contoh hasil identifikasi spesies kuman anaerob Anaerobic jar

IV. CARA KERJA a. Pemeriksaan Kuman Anaerob (hari ke-1) Pemeriksaan mikroskopik langsung - Pengecatan Gram : bentuk-bentuk pleomorf Ditanam pada GAM semi solid atau thioglycolat broth sebagai media penyubur Ditanam pada Brucella agar darah, diberi disk metronidazole pada goresan pertama dan diinkubasi pada anaerobic jar selama 24 jam 37C b. Pemeriksaan hari ke-2 Bila tidak didapatkan pertumbuhan, dilakukan penggoresan ulang dari media penyubur Bila ditemukan adanya pertumbuhan dan terdapat zone hambatan disekitar disk metronidazol : kuman anaerob Dilakukan pengecatan dengan Gram Dilakukan identifikasi dengan menggunakan disk : colistin 10 gr, eritromisin 30 gr, kanamisin 1000 gr, penisilin 2 gr, rifampisin 15 gr dan vankomisin 5 gr
Skema cara pengecatan Gram :
Preparat yang telah siap dicat, digenangi dengan cat Gram A selama 1 3 menit

Cat dibuang, lalu preparat dicuci dengan air mengalir

Preparat digenangi cat Gram B selama 0,5 1 menit

Cat dibuang, lalu preparat dicuci dengan air mengalir

Preparat ditetesi dengan cat Gram C sampai warna cat tepat dilunturkan.

Cat dibuang, lalu preparat dicuci dengan air mengalir

Preparat digenangi dengan cat Gram D selama 1 2 menit Sisa cat dibuang lalu preparat dicuci dan dikeringkan dalam udara kamar (posisi miring)

Preparat siap diamati di bawah mikroskop

Identifikasi dengan Disk Antibiotik

Keterangan: R resisten (zona kurang 10 mm) S sensitif V variabel Sr biasanya sensitif, kadang kadang resisten Rs biasanya resisten, kadang-kadang sensitif

C 10 Colistin 10 gr E 60 Erythromycin 60 gr K-1000 Kanamicyn 1000 gr P-2 Penicillin 1 gr r-15 Rifampicin 15 gr V- 5 Vancomycin 5 gr YANG DIKERJAKAN MAHASISWA Membuat preparat dari spesimen yg disediakan dan melakukan pengecatan Gram Menggambar contoh preparat mikroskopik awetan kuman anaerob Menggambar hasil pertumbuhan kuman anaerob pada media GAM semi solid Menggambar hasil pertumbuhan kuman anaerob pada agar darah Menggambar hasil identifikasi spesies anaerob Membaca hasil uji kepekaan kuman V. HASIL

aerob

Anaerob

VI. PEMBAHASAN

VII. KESIMPULAN

Yogyakarta, 200 Mengetahui Assisten/Dosen Praktikan