Abstrack

Sebuah air diekstrak panas polisakarida fraksi (PFCM) dari Passiflora edulis ditandai oleh mikroanalisis spektroskopi, inframerah, NMR dan kinerja kromatografi pengucilan ukuran tinggi. utama komponen dalam PFCM adalah (1 4) terkait galacturonic asam (esterifikasi dan tanpa esterifikasi). Netral gula seperti sebagai arabinosa, glukosa, rhamnosa, manosa, dan fucose juga hadir. Jejak xilosa dan ribosa yang terdeteksi. Sampel PFCM memiliki massa molar yang sama dengan pektin yang diekstrak dari P. edulis bawah asam kondisi. Sarkoma 180 tumor diobati dengan PFCM menunjukkan rasio penghambatan pertumbuhan mulai dari 40,59% menjadi 48,73% tergantung pada dosis dan jenis PFCM administrasi (oral atau intraperitoneal). Analisis toksikologi menunjukkan bahwa PFCM meningkatkan jenis sel yang terlibat dalam pertahanan utama mekanisme dan tidak ada perubahan signifikan dalam parameter biokimia dan organ (misalnya ginjal dan hati) diamati. Namun, penggunaan pengobatan PFCM meningkatkan berat limpa bila dibandingkan dengan penggunaan 5-fluorouracil.

Introduction

Terapi saat ini terhadap kanker masih tidak memuaskan terutama karena efek sampingnya. Dalam beberapa tahun terakhir, alam (atau bio-) polisakarida telah digambarkan memiliki antitumor activity (Leung, Liu, Koon, & Fung, 2006). Ini biasanya polisakarida memiliki toksisitas rendah dan sedikit efek samping, yang membuat mereka approprimakan untuk imunoterapi terhadap kanker. Para antitumor properti umumnya berhubungan dengan aktivasi makrofag dan komplemen sistem modulasi (Chihara, 1992;. Wang et al, 1997). P. edulis f. flavicarpa (markisa) adalah tanaman dari Passifloreaceae keluarga. Tanaman ini secara ekonomi penting dan sangat umum di Brasil. Beberapa bagian dari tanaman ini secara biologis aktif. Ekstrak buah dilaporkan diberikannya anxiolytic (Barbosa et al, 2008.; Coleta et al, 2006.), Anti-inflamasi (Montanher, Zucolotto, Schenkel, & Frode, 2007; Vargas et al, 2007) dan antioksidan. (Talcott, Percival, Pittet-Moore, & Celoria, 2003) kegiatan.
Pektin dari markisa telah diekstrak dengan menggunakan asam encer solusi (Pinheiro et al, 2008;. Yapo & Koffi, 2006). Pektin adalah comkompleks polisakarida yang terdiri dari (1 4) asam galacturonic-linked residu sebagai komponen utama. Asam galacturonic hadir sebagai

bebas asam (atau garam) dan dalam bentuk metil ester. netral gula seperti rhamnosa, arabinosa, xilosa, manosa, fucose dan glutathioneduduk seenak-enaknya juga telah ditemukan di pektin dari sumber yang berbeda (Duan, Zheng, Dong, & Fang, 2004; Mukhiddinov, Khalikov, Abdusamiev, & Avloev, 2000; Petersen, Meier, Duus, Clausen, 2008; Tamaki, Konishi, Fukuta, & Tako, 2008; Yapo & Koffi, 2006). Pektin telah diekstraksi dari buah markisa dengan asam nitrat encer dan karakteristikterized oleh Yapo dan Koffi (2006). Komponen utama ditemukan menjadi asam galacturonic, tapi gula netral seperti rhamnosa, arabinose, xilosa, manosa, fucose dan glukosa juga hadir (Yapo & Koffi, 2006). Massa molar pektin yang diekstrak dari markisa berkisar dari 6,4 104-5,1 104 g / mol tergantung pada pengobatan yang digunakan untuk mendapatkan polisakarida tersebut (Yapo & Koffi, 2006). Dalam studi ini, fraksi polisakarida P. edulis f. flavicarpa (PFCM) diperoleh tanpa menggunakan kondisi asam dalam protokol ekstraksi. Tujuan penelitian ini adalah untuk characterize polisakarida memperoleh dan menyelidiki antitumor nya

properti. Hematologi, biokimia dan histopatologi analpemanas program 40 C / menit hingga 220 C (suhu konstan). yses dilakukan untuk mengevaluasi toksisitas terkait Hasil derivatif diidentifikasi oleh elektron khas mereka dengan PFCM tersebut. dampak kerusakan profil. Kandungan asam uronic adalah menghalangiditambang menggunakan metode meta-hydroxydiphenyl (Blumenkrantz & 2. Bahan dan metode Asboe-Hansen, 1973). Suatu asam galacturonic kurva standar yang digunakan.

2.1. Reagen

2.5.2. Elemental Mikroanalisis

5-Fluorourasil (5-FU) dan O-phenylenidiamine dihidroklorida dibeli dari Sigma-Aldrich (St Louis, MO, USA). Semua lain reagen adalah kelas analitis. Buah kering (P. edulis f. Flavicarpa) kulit tepung diperoleh dari Pectina yang berbasis di Brasil Isi nitrogen polisakarida ditentukan dengan unsur Mikroanalisis menggunakan Perkin-Elmer 2400 CHN analyzer dan terkait dengan kadar p c rotein total melalui faktor konversi sebesar 6,25. pengembangan taman teknologi PADETEC (Parque de Desenvolvimento Tecnolgico melakukan Cear) di Fortaleza, Brasil. 2.5.3. Kinerja tinggi ukuran-pengecualian kromatografi (HPSEC) Massa molar puncak sampel PFCM ditentukan dengan 2.2. Hewan HPSEC menggunakan Shimadzu LC-10AD kromatografi dengan bias yang indeks (RID-6A) detektor pada suhu kamar pada UltrahydroSwiss tikus (perempuan, 25-30 g), yang diperoleh dari pusat animal rumah dari Universitas Federal Cear (UFC), Brasil, adalah gel linier kolom (7,8 mm x 300 mm). Sebuah volume 50 L dari polisakarida solusi (0,1% (b / v)) disuntikkan ke dalam kolom, digunakan. Hewan yang tinggal di kandang dengan akses bebas untuk makanan dan air. Semua hewan itu disimpan di bawah siklus terang-gelap 12:12 h (lampu dan elusi dilakukan dengan 0,1 mol / L NaNO3 dengan laju aliran 0,5 mL / menit. Massa molar rata diperkirakan menggunakan pullulan pada pada 06:00). Hewan diperlakukan sesuai dengan etika prinsipPrinsip utama eksperimen hewan COBEA (Colegio de Brasileiro standar 5,9 103-7,9 105 g / mol kisaran molar. Korelasi antara massa molar pullulan standar dan volume elusi Experimentac Ao Hewan), Brasil. Hewan Studi Komite

diberikan oleh Persamaan. (1): UFC telah menyetujui protokol percobaan.

2.3. Sel log M = 14,016-0,951 Ve R = 0,991 (1) mana Ve adalah volume elusi. Sitotoksisitas sampel PFCM telah diuji terhadap HL60 (leukemia manusia), MDA-MB-435 (melanoma), SF-295 (otak), dan HCT-8 (usus manusia) baris sel, semua diperoleh dari National Cancer Institute, Bethesda, MD, Amerika Serikat. Sel ditumbuhkan dalam RPMI1640 ditambah dengan 10% serum janin sapi sedang, 2 mM glutamin, 100 g / mL streptomisin dan 100 U / mL penisilin, dan 2.5.4. Spektroskopi inframerah Spektra FTIR direkam dengan KBr pelet pada FTIR Shimadzu 8300 spektrofotometer dengan resolusi 2 cm-1. Itu Spektrum diperoleh dari 30 scan. diinkubasi pada suhu 37 C dalam suasana CO2 5%. Sarkoma 180 sel tumor telah dipelihara dalam peritoneum 2.5.5. Resonansi magnet inti rongga dari tikus Swiss di Laboratorium Eksperimental Oncology di UFC sejak pertengahan 1980-an.

70 1H dan 13C broadband spektrum dari 3% (b / v) solusi dalam D2O di C direkam pada Transformasi Fourier Bruker Avance DRX 500 spektrometer dengan gradien multinuclear terbalik probe-kepala 2.4. Polisakarida ekstraksi

dilengkapi dengan z-terlindung gulungan gradien, dan dengan Silicon Grafikics. Natrium 2,2-dimethylsilapentane-5-sulfonat (DSS) digunakan Tepung sampel (20 g) terdispersi dalam air suling sebesar 3% sebagai standar internal (0.00 ppm untuk 1H). (B / v) dan disimpan di bawah pengadukan terus menerus selama 2 jam pada suhu dari 90-100 C. PH larutan adalah 6,0 dan tetap konstan during ekstraksi. Setelah filtrasi melalui kain halus, ekstrak 2.6. Antitumor aktivitas PFCM disentrifugasi pada 17.000 g selama 20 menit pada 20 C. Supernatan disaring melalui corong vakum G3 dan terkonsentrasi di bawah

2.6.1. Penentuan efek PFCM pada sel tumor di mengurangi tekanan. PH konsentrat yang dihasilkan telah disesuaikan budaya menjadi 7,0 dengan NaOH. Polisakarida ini diendapkan dengan penambahan Pertumbuhan sel tumor dihitung oleh kemampuan hidup etanol (1:4 (v / v)), dicuci dengan etanol / aseton, dikeringkan pada 40 C sel untuk mengurangi pewarna kuning 3 - (4,5-dimetil-2-thiazolyl) -2,5 dan disimpan (6,97 g). Polisakarida terisolasi disebut sebagai difenil-2H-tetrazolium bromida (MTT) ke formazan biru tua PFCM. produk (Mosmann, 1983). Untuk semua percobaan, sel adalah diunggulkan di piring 96-baik (105 sel baik-1 untuk sel patuh atau 2.5. Polisakarida karakterisasi 0,5 105 sel baik-1 untuk sel disuspensikan dalam 100 liter menengah).

Setelah 24 jam, PFCM (0,5-100,0 g / mL), dilarutkan dalam air suling 2.5.1. Komposisi monosakarida (10 L 90 L PFCM ditambah medium) ditambahkan untuk setiap sumur Komposisi monosakarida polisakarida adalah ditentukan setelah hidrolisis dengan asam 4 M trifluoroasetat selama 5 jam (Menggunakan HTS - penyaringan throughput tinggi - biomek 3000 - Beckpria Coulter, Inc, Fullerton, CA, USA) dan diinkubasi selama 72 jam pada 37 C pada 96 C. Metanol ditambahkan ke bahan terhidrolisis dan TFA dalam inkubator CO2. 5-FU (5-fluorourasil) digunakan sebagai positif telah dieliminasi oleh rotaevaporation dari campuran metanol / TFA. mengontrol. Pada akhir inkubasi, piring disentrifugasi Para monosakarida dirilis diubah menjadi asetat alditol dan menengah digantikan oleh media segar (150 L) berisidengan reduksi berturut-turut dengan NaBH4 diikuti oleh asetilasi dengan piridin-Ac2O. Kromatografi gas-cair (GLC) analisis adalah dilakukan pada 3800 Varian Gas Kromatografi terhubung ke ing 0,5 mg / mL MTT. Tiga jam kemudian, produk formazan adalah dilarutkan dalam 150 L DMSO dan absorbansi diukur dengan menggunakan sebuah multiplate pembaca (DTX 880 Detector Multimode, Beckman Coul2000 R-12 Varian Ion-Perangkap Spektrometer Massa, dengan Dia sebagai mobilter, Inc, Fullerton, CA, USA). Efek obat dihitung sebagai carrier gas (2,0 mL / menit). Sebuah DB-23 kolom kapiler digunakan dengan persentase absorbansi kontrol dari pewarna berkurang pada 595 nm.

2.6.2. Penentuan efek PFCM pada pertumbuhan tumor in vivo

Tabel 1 Analisis data untuk polisakarida edulis Passiflora (PFCM). Sepuluh hari yang berusia Sarkoma 180 ascite tumor sel Analytical Data Nilai (g/100 g PFCM) (2 106 cell/500 L) ditanamkan subkutan ke dalam meninggalkan pangkal paha belakang dari tikus. Suatu hari setelah inokulasi, PFCM yang dilarutkan dalam air suling dan diberikan selama 7 hari (10 atau 25 mg / kg, intraperitoneal dikelola, i.p. dan 50 atau 100 mg / kg, Embun Asha Protein (% N 6,25) Polisakarida 14.3 13.8 3.0 82.7 oral, po) pada tikus ditransplantasikan dengan Sarkoma yang sebuah Sebagai abu adalah karena reaksi degradasi itu tidak memperhitungkan polisakarida com180 tumor. 5-FU (25 mg / kg) digunakan sebagai kontrol positif. Itu kontrol negatif disuntik dengan NaCl 0,9%. Pada hari ke 8, perifer

sampel darah dengan kontrol dan tikus diperlakukan dikumpulkan dari retro-orbital pleksus dengan anestesi eter cahaya dan posisi. Tabel 2 Gula komposisi polisakarida diekstrak dari Passiflora edulis. binatang kemudian dikorbankan secara dislokasi leher. Tumor, hati, limpa dan ginjal extirpated, ditimbang dan tetap dalam 10% formaldehida. Rasio inhibisi (%) dihitung dengan menggunakan berikut rumus: inhibisi rasio (%) = [(A - B) / A] 100, dimana A adalah berat tumor rata-rata dari kontrol negatif dan B adalah bahwa dari kelompok perlakuan. Berat badan diukur pada awal dan pada hari terakhir pengobatan. Sampel darah yang digunakan untuk hematologi dan biokimia analisis. 2,7. Toksikologi analisis Gula Galacturonic asam Arabinosa Rhamnosa Glukosa Mannose Galaktosa Xylose Ribosa Fucose Nilai (g/100 g polisakarida) 44.2 11.8 10.6 11.8 9.0 6.1 3.6 1.3 1.6

2.7.1. Penentuan efek PFCM pada biokimia parameter Contoh darah dari hewan yang dirawat dikumpulkan dari retro-orbital pleksus dengan anestesi eter cahaya. Biokimia anal-

ysis dilakukan pada sampel serum diperoleh setelah sentrifugasi dari total darah tanpa antikoagulan, pada 2500 rpm selama 15 menit. Standardized diagnostik kit oleh LABTEST spektrofotometer (Lagoa Santa, MG, Brasil) digunakan dalam spektrofotometri determination dari alanin aminotransferase aspartat (ALT), aminotransferase (AST) dan tingkat urea. 2.7.2. Penentuan efek PFCM pada hematologi parameter Untuk analisis hematologi, satu alikuot darah per hewan ditempatkan dalam asam ethylenediaminetetraacetic (EDTA) dan berbagai hematologi parameter (jumlah platelet dan total dan diferensial leukosit count) dilakukan oleh prosedur manual standar menggunakan mikroskop cahaya. 2,8. Histopatologi dan morfologi analisis Setelah diperbaiki dengan formaldehida, tumor, hati, limpa, dan ginjal terlalu diperiksa untuk perubahan ukuran atau warna dan pendarahan. Beberapa bagian dari, hati limpa tumor, dan ginjal adalah kemudian dipotong kecil-kecil, diikuti dengan pewarnaan dari histologikal bagian dengan hematoxylin dan eosin. Analisis histologi adalah dilakukan dengan mikroskop cahaya. Pengakuan dan extension lesi hati, ginjal atau limpa disebabkan oleh obat yang direkam. 2,9. Analisis statistik Data yang disajikan sebagai mean S.E.M. Perbedaan antara kelompok eksperimen dibandingkan dengan ANOVA (analisis variabelAnce) diikuti oleh Siswa-Newman-Keuls (p <0,05) dengan menggunakan GRAPHPAD Program (Software Intuitif untuk Sains, San Diego, CA). 3. Hasil dan diskusi

polisakarida dalam kaitannya dengan tepung kering adalah 34,9%. AnaData lytical untuk polisakarida PFCM ditunjukkan pada Tabel 1. Isi protein (Tabel 1) sampel PFCM lebih rendah dari yang diperoleh untuk tepung markisa diekstraksi dengan asam asetat (4,05%). Ini kandungan protein mungkin karena adanya polisakarida-protein kompleks seperti yang diamati dalam polysaccha lainrides. Pektin diekstraksi dengan asam nitrat memiliki kandungan protein berkisar dari 0,9% menjadi 5,1% tergantung pada perawatan yang digunakan dalam proses (Yapo & Koffi, 2006). Komponen utama dari PFCM adalah galacturonic asam (Tabel 2).

Gula netral ditentukan dengan GC / MS analisis adalah arabinosa, glukosa, rhamnosa, dan mannosa. Sejumlah kecil fucose, xilosa dan ribosa juga terdeteksi. Ini netral gula, dengan perkecualiantion dari ribosa, juga telah ditemukan dalam bahan dinding kuning markisa tepung (Yapo & Koffi, 2006). Data dalam Tabel 2 suggest yang PFCM memiliki linier homogalacturonan (HG) dan netral gula - bercabang rhamnogalacturonan-1 (RG-1) struktur. Itu galacturonic rasio asam / rhamnosa rendah menunjukkan bahwa RG-1 hadir dalam proporsi yang lebih tinggi dari HG. Hasil ini sangat berbeda dengan yang dilaporkan oleh Yapo dan Koffi (2006) untuk pektin diperoleh dengan asam ekstraksi dari markisa di mana struktur terutama terdiri dari homogalacturonan. HPSEC kromatogram dari PFCM menggunakan indeks bias detektor yang ditunjukkan pada Gambar. 1. Hanya satu yang luas puncak dengan maxVolume elusi Imum di 9,71 mL muncul. Massa molar polisakarida itu diperkirakan dengan menggunakan Persamaan. (1) dan nilai adalah 6,0 104 g / mol. Nilai ini berada dalam kisaran ditemukan oleh Yapo dan Koffi (2006) untuk pektin yang diekstrak dari buah markisa kuning (6,4 104-5,1 104 g / mol). Spektrum FTIR dari polisakarida PFCM (Gambar 2) menunjukkan band pada 1740 cm-1 dan 1653 cm-1, disebabkan, masing-masing, dengan CO peregangan getaran esterifikasi dan tanpa esterifikasi galacturonic asam (Iagher, Reicher, & Ganter, 2002; Marrique & Lajolo, 2002; Souza et al, 2009.). Tingkat esterifikasi (DE) dari PFCM adalah dihitung dengan menggunakan pendekatan yang diusulkan oleh Marrique dan Lajolo (2002). Dalam perhitungan ini daerah puncak FTIR karena vibrasi ulur gugus karbonil asam uronic diesterifikasi (1740 cm-1) itu terkait dengan yang ada pada asam uronic tanpa esterifikasi (1653 cm-1) melalui Pers. (2) (Marrique & Lajolo, 2002). 3.1. Polisakarida karakterisasi DE (% mol) = + 2,20 124.7R (2) Ekstraksi polisakarida dari tepung markisa adalah dimana R = A1740 / (A1740 + A1653). Rendahnya nilai DE untuk FPCM dilakukan dengan air panas tanpa pengasaman. Hasil dari (26,2 0,8% mol) adalah

konsisten dengan itu Hasil diamati

Grafik Gambar. 1. HPSEC kromatogram dari polisakarida edulis P. (PFCM). Gambar. 2. FT-IR spektrum untuk KBr pelet dari polisakarida edulis P. (PFCM).

untuk pektin yang diperoleh dari buah markisa oleh asam ekstrak-

dan 3-O-galacturonic asam, masing-masing (Tamaki dkk., 2008). itu tion pada suhu rendah (32,4-26,3% mol) oleh Yapo dan Koffi metil kelompok l-rhamnosa diamati pada 1,25. Sinyal pada (2006). 5,3 dan 5,13 dikaitkan, masing-masing, untuk H-1 dari rhamnosa Spektrum 1H NMR PFCM (Gambar 3) menunjukkan sinyal yang kuat dan galacturonic asam. H-5 asam galacturonic esterifikasi adalah di 3,80 karena kelompok metil asam galacturonic diesterifikasi terdeteksi pada 4,9 sedangkan untuk asam galacturonic tanpa esterifikasi adalah (Gala Me) (Cozzolino et al, 2006;.. Tamaki dkk, 2008). dua sinyal ditemukan di kisaran 4,6-4,7 (Coenen, Bakx, Verhoef, Schols, &

di 2,17 dan 2,06 ditugaskan untuk kelompok asetil terkait dengan 2-O Voragen, 2007). Grafik

Spektrum 13C NMR dari PFCM (Gambar 3) menunjukkan puncak resonansi di 53,6 karakteristik dari metil ester dari Gala Aku. sinyal di 101,1; 100,9 dan 108,5 dapat ditugaskan untuk karbon anomeric dari galacturonic asam (Gala), galacturonic asam metil ester (Gala Me) dan arabinofuranose (Ara), masing-masing. Sebuah sinyal intens rendah pada 17,5 menegaskan kehadiran rhamnosa di polisakarida tersebut. di wilayah karbonil dari spektrum dua sinyal di 171,3 dan 175,3 sesuai dengan CO dari Gala Gala dan Me, masing-masing. Distribusi kelompok methoxyl di polisakarida asam diselidiki oleh Westerlund, Aman, Andersson, Andersson, dan Rahman (1991) dan Catoire, Goldberg, Pierron, Morvan, dan Penhoat (1998) menggunakan pola NMR 13C wilayah karbonil. Para penulis mengusulkan bahwa kimia karbon pergeseran karbonil yang

143 kelompok dipengaruhi oleh berikutnya tetangga efek diawaliing dan mengikuti residu. Triad dari tanpa esterifikasi (U) dan esterifikasi (E) galacturonic asam seperti UEU, EEE dan UUU dapat diidentifikasi (dimana garis bawah menunjukkan residu yang diamati) (Catoire et al. 1998; Westerlund et al, 1991).. Dengan mempertimbangkan pemecahan dari resonansi karbonil, triad dari asam sepenuhnya diesterifikasi memiliki lebih rendah pergeseran kimia (EEE) dibandingkan mereka di mana unit asam tanpa esterifikasi adalah hadir dalam triad (UEU). Triad dengan hanya kelompok tanpa esterifikasi diamati di wilayah 175 dan 177 (Catoire et al., 1998). Gambar. 3B menunjukkan amplifikasi daerah terkait dengan PFCM yang

karbonil kelompok. Di wilayah 171-172 dua sinyal yang tajam dapat diamati dan bahu di 171,3; 171,5 dan 171,7 ditugaskan untuk Gala Me di EEE triad, UEE dan UEU, masing-masing. Sebuah luas sinyal yang diamati antara 173,0 dan 175,7 karena resonansi Gambar. 4. Pengaruh polisakarida yang diisolasi dari P. edulis (PFCM) dan 5-FU pada tikus ditransplantasikan dengan Sarkoma 180 tumor. Grafik menunjukkan pertumbuhan tumor inhibisi (abu-abu gelap) dan tumor berat (cahaya abu-abu). Data yang disajikan sebagai mean S.E.M. delapan binatang. *, (P <0,05) dibandingkan dengan salin dengan ANOVA dilanjutkan oleh Mahasiswa-Newman-Keuls tes. tabel 4 Pengaruh polisakarida yang diisolasi dari Passiflora edulis (PFCM) pada Biochemical perubahan pada darah perifer. Tikus disuntik dengan Sarkoma 180 (2,0 106 sel / hewan s.c.). Hewan-hewan diobati, dimulai satu hari setelah implan tumor, selama tujuh hari berturut-turut.

3.2. Antitumor aktivitas PFCM Sifat antitumor dari PFCM diselidiki menggunakan in vitro dan in vivo model. Sebagaimana ditunjukkan untuk polysaccha-lain wahana (Gonzaga et al, 2009;. Lins et al, 2009;.. Sousa dkk, 2007), PFCM tidak mampu menghambat proliferasi sel kanker pada budaya pada konsentrasi diuji (nilai IC50 lebih besar dari 100 g / mL). 5-Fluorourasil, digunakan sebagai kontrol positif, menunjukkan Nilai IC50 berkisar antara 0,36-12,59 g / mL untuk HCT-8 dan HL-60, masing-masing. Di sisi lain, penurunan yang signifikan dalam berat tumor diamati pada PFCM hewan yang diobati (p <0,05). Pada hari 8, berat tumor rata-rata tikus kontrol adalah 1,37 0,08 g. Itu administrasi intraperitoneal PFCM (10 dan 25 mg / kg) yang dipimpin penghambatan tumor dari 70,40% dan 72,89% masing-masing. Oral administrasi (50 dan 100 mg / kg) menghambat pertumbuhan tumor oleh 40,59% dan 48,73% (Gambar 4). Penghambatan ini terkait dengan terjadinya area luas nekrosis coagulative sebagai diamati Data yang disajikan sebagai mean S.E.M. lima hewan. melalui analisis histopatologi dari tumor extirpated

dari mencit perlakuan (data tidak ditunjukkan). Pola host-dimediasi aktivitas antitumor juga telah diamati untuk polisakarida lain, seperti alginat dari Sargasjumlah vulgare, sulfat dari polisakarida Champia feldmannii dan kompleks polisakarida-protein dari Agaricus Blazei (Gonzaga et al, 2009;. Lins et al, 2009;.. Sousa dkk, 2007) menggunakan yang sama model. Ia telah mengemukakan bahwa kegiatan ini berkaitan dengan modulasi dari sistem kekebalan tubuh. Dengan demikian, bioaktif polysaccharides dianggap pengubah respon biologis, bertindak melalui aktivasi langsung atau tidak langsung dari komponen yang berbeda dari sistem kekebalan tubuh seperti makrofag, limfosit-T, Blimfosit dan sel-sel pembunuh alami (Leung et al., 2006). Itu mekanisme yang terlibat dalam proses ini tidak sepenuhnya dijelaskan, tetapi respon yang diamati pada model binatang termasuk penghambatan

Tabel 3 Efek dari polisakarida yang diisolasi dari Passiflora edulis (PFCM) pada bobot organ. Tikus disuntik dengan Sarkoma 180 (2,0 106 sel / hewan sc). Hewan-hewan itu diobati, dimulai satu hari setelah implan tumor, selama tujuh hari berturut-turut.

pertumbuhan kanker angiogenesis sel, dan metastasis (Glinsky & Raz,

FU menunjukkan penurunan yang cukup besar dalam leukosit total (p <0,05). 2009; Leung et al, 2006).. Penting untuk dicatat bahwa pengaruh Selain itu, ada perbedaan yang bermakna (p <0,05) dalam perPFCM sebanding dengan atau lebih umum, lebih besar dari itu tampak dalam persentase limfosit dan neutrofil dalam darah perifer diamati dengan polisakarida lain menggunakan Sarkoma 180 tumor hewan ditransplantasikan dengan Sarkoma 180 tumor bila dibandingkan model (Gan, Zhang, Yang, & Xu, 2004; Gonzaga et al, 2009;. Lins

untuk kelompok normal diobati dengan saline (Tabel 5). Pengobatan dengan et al, 2009;. Liu et al, 2006;.. Sousa dkk, 2007). PFCM positif mempengaruhi jumlah yang meningkat dari total Leukocytes. Selain itu, pengobatan PFCM dinormalisasi persentase limfosit dan neutrofil dalam darah perifer. Hasil ini 3.3. Toksikologi analisis menunjukkan bahwa PFCM meningkat jenis sel yang terlibat dalam utama mekanisme pertahanan. Salah satu aspek penting dari penelitian ini adalah profil toksikologi dari polisakarida. Secara umum, perawatan baik tolerated dan efek samping diamati berpotensi reversibel 4. Kesimpulan (Gonzaga et al, 2009;. Leung et al, 2006;. Lins et al, 2009;. Sousa et al, 2007, 2008).. Dalam penilaian awal terhadap toxicological efek dari pengobatan PFCM, perubahan morfologi hati, ginjal dan limpa dievaluasi berdasarkan berat histopatologi dan analisis. Juga, perubahan metabolik dasar dipantau termasuk urea, alanin aminotransferase (ALT) dan aspartat aminotransferase (AST) tingkat. Akhirnya, hematologKesimpulannya, PFCM memiliki linier homogalacturonan (HG) dan neunetral gula - bercabang rhamnogalacturonan-1 (RG-1) struktur dan DE rendah. Rasio galacturonic / rhamnosa rendah menunjukkan bahwa RG-1 hadir dalam proporsi yang lebih tinggi dari HG. PFCM dipamerkan in vivo, tapi tidak secara in vitro, efek antitumor tanpa toksisitas ekspresif. Ini aktivitas tampaknya berhubungan dengan sifat-sifatnya imunostimulan. ical evaluasi dilakukan. Tidak ada perubahan signifikan dalam berat hati atau ginjal adalah Ucapan Terima Kasih diamati pada hewan yang dirawat PFCM (Tabel 3). Namun, setelah pengobatan dengan PFCM, bobot limpa secara signifikan

Kami ingin berterima kasih CNPq, jubah bertopi, Instituto Claude Bernard, FUNmeningkat bila dibandingkan dengan 5-FU kelompok (p <0,05). Tidak ada sigCAP dan FINEP untuk dukungan keuangan dalam bentuk hibah nifikan perubahan pertambahan bobot badan yang dicatat antara dan penghargaan persekutuan. Para penulis juga berterima kasih kepada National Cankelompok (data tidak ditunjukkan). cer Institute (Bethesda, MD, USA) untuk sumbangan sel tumor Analisa histopatologi dari sampel hati tidak menunjukkan garis digunakan dalam penelitian ini. Para penulis terima Franc Silvana sebuah dos Santos setiap perubahan yang berkaitan dengan pengobatan PFCM, menunjukkan bahwa ini untuk bantuan teknis. Para penulis juga ingin mengucapkan terima kasih CENAUorgan tidak terpengaruh oleh pengobatan. Demikian juga, ada REMN (Centro de Nordestino Aplicac Ao e Uso de Ressonncia ada perbedaan terkait dengan tingkat ALT dan AST (Tabel 4). Itu Magntica Nuklir) untuk merekam spektrum NMR dan Biochemginjal dikeluarkan dari PFCM-diperlakukan hewan, di sisi lain, istry Departemen Federal University of Paran untuk merekam menunjukkan perubahan hidropik diskrit dan beberapa daerah nekrosis fokal GC / MS analisis. di epitel tubulus proksimal (di 25 mg / kg), glomerulus dan tubular perdarahan. Struktur glomerulus pada dasarnya praReferensi menjabat, yang menunjukkan bahwa perubahan ini dapat dianggap

berpotensi reversibel (Olsen & Solez, 1994). Hasil ini perjanjian dengan temuan yang disajikan oleh Sousa dkk. (2007, 2008) dan Lins et al. (2009), dan ginjal tampaknya menjadi utama toxBarbosa, PR, Valvassori, SS, Bordignon, CL, Kappel, VD, Martins, MR, Gavioli, E. C, dkk. (2008). Para berair ekstrak Passiflora alata dan Passiflora edulis mengurangi kecemasan yang berhubungan dengan perilaku tanpa mempengaruhi proses memori di tikus. Journal of Medicinal Food, 11, 282-288. icological target untuk kelas ini senyawa (Sousa dkk., 2008). Namun, tidak ada perubahan signifikan yang diamati pada tingkat urea (Tabel 4). Bahkan, ada penundaan yang cukup sebelum urea darah Blumenkrantz, N., & Asboe-Hansen, G. (1973). Baru Metode kuantitatifpenentuan asam uronic. Analytical Biokimia, 54, 484-489. Catoire, L., Goldberg, R., Pierron, M., Morvan, C., & Penhoat, CH (1998). Yang efisien prosedur untuk mempelajari struktur pektin yang menggabungkan terbatas depolymerizaTingkat ini meningkat setelah perubahan ginjal (Varley, Gowenlock, & tion dan NMR 13C. Eropa Biofisika Journal, 27, 127-136. Bell, 1980). Dalam limpa, PFCM tikus yang diobati menunjukkan peningkatan dalam pulp putih dan sarang megakaryocytes, yang menunjukkan sebuah Chihara, G. (1992). Immunopharmacology dari Lentinan, sebuah polisakarida yang diisolasi dari Lentinus edodes: Its aplikasi sebagai potensiator pertahanan tuan rumah. Internasional Journal of Oriental Medicine, 17, 57-77. imunomodulator aktivitas. Coenen, GJ, Bakx, Verhoef, RP, Schols, HA, & Voragen, AGJ (2007). IDENHewan-hewan ditransplantasikan dengan Sarkoma 180 tumor menunjukkan signifikan penurunan (p <0,05) dalam jumlah total yang beredar tification dari hubungan yang menghubungkan antara homo atau xylogalacturonan dan rhamnogalacturonan jenis Polimer Karbohidrat I., 70, 224-235. Coleta, M., Batista, MT, Campos, MG, Carvalho, R., Cotrim, MD, Lima, TC, dkk. leukosit perifer dibandingkan dengan hewan yang sehat. Selain itu, 5 (2006). Neuropharmacological evaluasi efek ansiolitik putative