LA BIOFERTILIZACION COMO TECNOLOGIA SOSTENIBLE

25-NOVIEMBRE-2004

RIO BRAVO, TAM., MEXICO

SIMPOSIO DE BIOFERTILIZACIN
LA BIOFERTILIZACIN COMO TECNOLOGA SOSTENIBLE

COMIT ORGANIZADOR
ARTURO DAZ FRANCO, FELIPE SERRANO MEDINA Y NICOLS MALDONADO MORENO

COORDINACIN
JAVIER GONZLEZ QUINTERO, IDALIA GARZA CANO, VCTOR PECINA QUINTERO, LEOPOLDO GARZA GUAJARDO, MANUEL ALVARADO CARRILLO, JAIME SALINAS GARCA E HIPLITO CASTILLO TOVAR

MEMORIA
EDICIN
ARTURO DAZ FRANCO, NETZAHUALCYOTL MAYEK PREZ, ALBERTO MENDOZA HERRERA Y NICOLS MALDONADO MORENO

DISEO DE PORTADA LEOPOLDO GARZA GUAJARDO Y ARTURO DAZ FRANCO

Primera edicin: 2004 Para la presente edicin, Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP. Carretera Matamoros-Reynosa km 61, Ro Bravo, Tam., Mxico.

Foto de portada: Colonizacin de Glomus intraradices; con autorizacin de P. Tiwari.

CONTENIDO Pgina TRABAJOS COMPLETOS Biotecnologa de los hongos micorrzicos arbusculares. Ronald Ferrera-Cerrato y Alejandro Alarcn Impacto de la micorriza arbuscular en la productividad del sorgo en Tamaulipas. Arturo Daz Franco, Idalia Garza Cano, Vctor Pecina Quintero y Agustn Magallanes Estala Biofertilizacin bacteriana del pasto buffel C. Loredo-Osti, D. Espinosa V., R. Ferrera-Cerrato, J. Castellanos R. y J. Prez Biofertilizantes; mcorrizas y bacterias promotoras de crecimiento.. Vctor Olalde Portugal y Rosalinda Serratos Efectos de labranza y biofertilizacin en propiedades del suelo que afectan la sostenibilidad de produccin de frijol. Jaime Roel Salinas Garca, Arturo Daz Franco e Idalia Garza Cano Respuesta de la biofertilizacin en el crecimiento y rendimiento de sorgo de grano en Linares, Nuevo Len Juan Martnez Medina Biotecnologa de los hongos etomicorrzicos Jess Prez-Moreno Evaluacin de la inoculacin de simbiontes en soya (Glycine max) bajo condiciones de campo. Ponciano Prez Garca, Arturo Daz Franco y Nicols Maldonado Moreno Biofertilizantes microbianos: Antecedentes del programa y resultados de validacin en Mxico.. Juan Francisco Aguirre Medina Aislamiento, seleccin, produccin y evaluacin de un inoculante basado en cepas nativas de Azospirillum en el Norte de Tamaulipas.. Alberto Mendoza H., Antonia Cruz H. y Cuauhtemoc Jacques H. 1

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RESMENES Respuesta de variedades de cacahuate (Arachis hypogea L.) a la fertilizacin qumica y biolgica en un suelo regosol. Arturo Durn Prado, Vctor Lpez Galvn y Oscar Hugo Tosquy Valle Respuesta de germoplasma de frijol a la fertilizacin qumica y biolgica Arturo Durn Prado, Vctor Lpez Galvan y Javier Cumpin Gutirrez

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Respuesta de variedades de frijol a la fertilizacin qumica y biolgica en un suelo fluvisol de Veracruz... Arturo Durn Prado, Vctor Lpez Galvn y Oscar Hugo Tosquy Valle Respuesta de variedades de soya a la inoculacin con micorriza Glomus intraradix en Veracruz Arturo Durn Prado, Oscar Hugo Tosquy Valle y Vctor Lpez Galvn Efectividad de micorriza arbuscular en genotipos de pasto buffel (Cenchrus ciliaris) Arturo Daz Franco, Idalia Garza Cano y Asuncin Mndez Rodrguez Influencia de micorriza arbuscular en el crecimiento y rendimiento de crtamo... Arturo Daz Franco, Alfredo Ortegn Morales e Idalia Garza Cano Biofertirrigacin: tecnologa sustentable del Siglo XXI. Lina Hernndez Flores, Juan M. Covarrubias Ramrez, Rodrigo Aveldao Salazar y Juan Jos Pea Cabriales Respuesta del maz y sorgo a la fertilizacin biolgica.. Vctor Pecina Quintero, Arturo Daz Franco e Idalia Garza Cano Efecto de la micorriza arbuscular en sorgo bajo dos condiciones de humedad.. Vctor Pecina Quintero, Arturo Daz Franco e Idalia Garza Cano Efecto de una composta y cidos flvicos en la produccin de lilies (Lilium sp) en el sureste de Coahuila. Ma. del Rosario Ziga Estrada, Juan M. Covarrubias Ramrez y Rubn Lpez Cervantes Transferencia tecnolgica del maz QPM y el biofertilizante en la Huasteca Hidalguense. Juan Pablo Prez Camarillo, Guadalupe Zacatenco Gonzlez, Ren Galvn Parra y Rodrigo Aveldao Salazar

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Produccin y evaluacin de un biofertilizante (Azospirillum spp) para el noreste de Mxico IPN-CBG.. Jess G. Garca, Alberto Mendoza, Cuauhtemoc Jacques, Antonia Cruz y Felipe Serrano Respuesta del sorgo a la inoculacin de Glomus intraradices en campo.. Agustn Magallanes Estala Rentabilidad del sorgo mediante la inoculacin de simbiontes en suelo con y sin fertilizacin qumica... Agustn Magallanes Estala, Arturo Daz Franco y Vctor Olalde Portugal Evaluacin de biofertilizantes en crtamo.. Agustn Magallanes Estala, Alfredo S. Ortegn Morales y Arturo Daz Franco Interaccin de Azospirillum brasilense, nitrgeno y azcar en canola de riego bajo labranza convencional y de conservacin... Mario Cepeda Villegas, Eulalio Venegas Gonzlez y Blanca Gmez Lucatero Respuesta del maz al tratamiento con Azospirillum brasilense y nitrgeno bajo labranza de conservacin Mario Cepeda Villegas y Eulalio Venegas Gonzlez Efecto estimulante de bacterias esporuladas sobre crecimiento y desarrollo del chile jalapeo (Capsicum annuum) en invernadero y campo. Nicolasa Garca Licona, Gabriel Gallegos Morales, Melchor Cepeda Siller y Fco. Daniel Hernndez Castillo Resultados preliminares de la evaluacin de biofertilizantes en maz QPM. Jos Ernesto Cervantes Martnez Efecto de biofertilizantes sobre el rendimiento del maz Csar A. Reyes Mndez y Miguel ngel Cant Almaguer Evaluacin combinada de inoculantes microbiolgicos y fertilizantes qumicos en el cultivo de sorgo.. Othn Martn Carrillo Rendn, Mara Esther Salazar Durn, Ismael Machuca Orta y Cuauhtemoc Jacques Hernndez Biofertilizacin en sorgo de temporal en la zona media de San Luis Potos.. Andrs Ramiro Crdova y Cesario Jasso Chaverra Simbiosis Rhizobium-micorriza arbuscular y uso de brassinoesteroides en frijol. Cesario Jasso-Chaverra y Miguel ngel martnez-Gamio Efecto del biofertilizante y la preparacin del suelo en la produccin de maz, sorgo y sorgo x Sudn en la zona media Potosina.. Miguel ngel Martnez Gamio y Cesario Jasso Chaverra

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Biofertirrigacin por goteo a base de guano en cultivos diversos bajo un sistema hidropnico con produccin de tilapia en Jalisco, Nayarit. Alberto Betancourt Vallejo, Pedro D. Flores Pea, Vctor M. Gonzlez Velsquez, Rafael Quezada Morales, Vctor Jimnez Garca y Roberto Gmez Aguilar

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BIOTECNOLOGIA DE LOS HONGOS MICORRIZICOS ARBUSCULARES

Ronald Ferrera-Cerrato1, Alejandro Alarcn1, 2
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Microbiologa de Suelos. Especialidad de Edafologa. Instituto de Recursos Naturales. Colegio de Postgraduados. Carretera Mxico-Texcoco, km 36.5. Montecillo, Estado de Mxico 56230. Mxico. 2Department of Horticultural Sciences. Texas A&M University. College Station, Texas. 77843-2133 USA ronaldfc@colpos.mx, alexala@colpos.mx, alarconal@tamu.edu

LA SIMBIOSIS MICORRIZICA La simbiosis micorrzica1 se refiere a la asociacin mutualista que se establece entre plantas y especficos grupos de hongos que habitan en el suelo y en la rizosfera. De este modo, se tienen identificados siete diferentes tipos de simbiosis micorrzicas, las cuales tienen repercusin en lo que respecta a la evolucin, fisiologa y adaptacin ecolgica de las plantas que habitan los ecosistemas terrestres (Smith y Read, 1997): 1) simbiosis ectomicorrzica, la cual se forma especficamente entre miembros de familias botnicas como Cupresaceae, Pinaceae, Betulaceae, Fagaceae, entre otras, con cierto grupo de hongos que pertenece a las clases Basidiomycetes, y Ascomyceks, principalmente; 2) la micorriza orquideoide, que forma entre orqudeas y hongos del gnero Rhizoctonia; 3) micorriza monotropoide; 4) micorriza arbutoide; 5) micorriza ericoide; 6) ectoendomicorriza. No obstante, una de las simbiosis micorrzicas que tiene vasto avance cientfico y biotecnolgico es aquella que se forma entre aproximadamente 150 especies de hongos de Glomeromycota con ms del 80% del total de las plantas terrestres que se conocen hoy en da, la cual se denomina 7) micorriza (vesculo-)arbuscular. En la actualidad, la simbiosis micorrzica arbuscular tiene enorme trascendencia ya que en diversos estudios se ha demostrado el efecto benfico de los hongos micorrzicos arbusculares (HMA) en el mejoramiento de la nutricin, aprovechamiento de agua, crecimiento y adaptacin de las plantas ante diversas condiciones de estrs intuido tanto por factores biticos como por factores abiticos (Aug, 2001; Jeffries et al., 2003). ECOLOGA DE LA MICORRIZA ARBUSCULAR Los HMA son microorganismos rizosfricos cosmopolitas por lo que se pueden encontrar en la mayora de los biomas terrestres (Smith y Read, 1997). No obstante, la distribucin y presencia de estos simbiontes es afectada en aquellos suelos con diferente grado de fertilidad, diferente manejo agrotecnolgico (ejemplo, aplicacin de insumos fertilizantes, biocidas o plaguicidas), o por diversos agentes de perturbacin tales como el pastoreo el cual produce compactacin del suelo, o por impacto de procesos industriales como la minera, petroqumica, o deposicin de desechos industriales (Abbott y Robson, 1991; Sieverding, 1991; Sylvia et al., 1993; Nadian et al., 1998; Trejo et al. , 1998; Jeffries et al., 2003). No obstante, estas condiciones desfavorables inducen una seleccin de HMA
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El trmino micorrzico se utiliza con base en el diccionario de Micologa del Dr. Miguel Ulloa (1991)a y el diccionario de Font Quer (1982)b: a) micorrzico, ca, micorrizgeno, na: mycorrhizal, mycorrhizogenous (del

gr. mykes, hongo; rhza, raz, y gnos origen, de genno, engendrar, producir): hongo que es capaz de formar una micorriza, que interviene en su constitucin. b) micorrzico, ca: adj. Relativo a la micorriza, perteneciente a ella.

ms aptos para tolerar condiciones ambientales adversas. En este particular caso, estos HMA ecolgicamente adaptados pueden ser sujetos de manipulacin para la produccin de inoculante con fines de restauracin o remediacin de reas altamente perturbadas. El manejo sustentable de agro ecosistemas adems, contribuye en la regulacin de la diversidad, composicin e interacciones de la microflora y de la macro fauna que se establecen en el suelo y en la rizosfera de las plantas (Linderman, 1993; Harinikumar y Bajyaraj, 1994; Thimm y Larink, 1994; Ferrera-Cerrato, 1995; Gonzlez y Ferrera-Cerrato, 1996; Ferrera-Cerrato y Alarcn, 2001; Rilling y Steinberg, 2002; Jefrries et al., 2003). Otros factores que determinan no solo la distribucin pero tambin la funcionalidad o efectividad de los HMA se relacionan con la vegetacin predominante, la cual participa como reservorio de estos hongos, y la variacin estacional (Smith y Read, 1997; Sanders y Fitter, 1992). El genotipo tanto de los hospedantes como el de los HMA involucrados en la simbiosis, ha recibido especial atencin ya que esta interaccin determina la respuesta de la inoculacin con los HMA. En este sentido, se han identificado variaciones en la respuesta de las plantas a la inoculacin de HMA ya sea nativos o exticos y se ha llegado a establecer que no es apropiado generalizar que los HMA siempre estimulan el crecimiento de las plantas, tanto en ambientes naturales como controlados. Por esta razn, se ha propuesto definir a la simbiosis micorrzica arbuscular como un continuo del parasitismo al mutualismo (Johnson et al., 1997; Klironomos, 2003). Ante tal situacin, la seleccin de HMA debe enfocarse a aspectos que se relacionen con el objetivo de mejorar el crecimiento y desarrollo de las plantas (por ejemplo, mejorar la tolerancia y adaptacin a condiciones adversas, mejoramiento del aprovechamiento de fertilizantes, etc.). Para tal fin, se debe tener mayor estudio y entendimiento de los aspectos ecolgicos que podran influir en el establecimiento y efectividad de los HMA (Sanders y Fitter, 1992). FISIOLOGA DE LA SIMBIOSIS MICORRIZICA ARBUSCULAR Los HMA son considerados como simbiontes obligados, de tal forma que la simbiosis con plantas le permite captar fotosintatos que favorecen el desarrollo y propagacin de los HMA. El mutualismo, que en la mayora de los casos caracteriza a la simbiosis HMA-planta (Dakessian et al., 1986; Gonzlez y Ferrera-Cerrato, 1990; Rapparini et al., 1994; Ferrera-Cerrato y Alarcn, 1998; Alarcn y Ferrera-Cerrato, 2003), es determinado por la integracin morfolgica y estructural de ambos simbiontes, lo cual define el intercambio bidireccional de nutrimentos entre ambos simbiontes. La colonizacin de las clulas corticales permite al HMA la posibilidad de obtener fuentes de carbono, el cual es considerado la divisa de cambio que la planta aporta al hongo con el fin de tener mayor capacidad de captacin de nutrimentos minerales necesarios para sus diversas etapas de desarrollo (Bago et al., 2000). La mayor respuesta de las plantas a la inoculacin de HMA se presenta cuando se utilizan sustratos o suelos con limitada disponibilidad nutrimental. El mejoramiento del aprovechamiento y captacin nutrimental por efecto de HMA depende de factores inherentes a la planta as como factores del suelo (Gianinazzi-Pearson y Azcn-Aguilar, 1991). En el caso de las plantas, el sistema radical tiene un papel trascendental en la absorcin y aprovechamiento de nutrimentos desde la solucin de suelo hasta los tejidos internos de ellas (Gregory, 1992). No obstante, los aspectos fisiolgicos de la absorcin de iones por la raz dependen de la movilidad de los iones, y de la selectividad por algunos iones, lo cual depende de la especie vegetal. De esta forma, aspectos como la morfologa de la raz (longitud, dimetro, distribucin, cantidad de pelos absorbentes, etc.), determina la capacidad de explorar mayor volumen de suelo y con ello, captar nutrimentos minerales.

La simbiosis micorrzica representa una alternativa biolgica para las plantas para satisfacer sus requerimientos por nutrimentos y agua a partir del suelo, ya que la extensiva red de hifas que se desarrollan en el suelo, es capaz de explorar mayor volumen de suelo y llegar a sitios ricos en nutrimentos donde la raz por si misma seria incapaz de penetrar (Smith y Read, 1997; Schachtman et al., 1998). El entendimiento de los factores ambientales que favorecen o afectan a las cepas de HMA es fundamental para manipular y controlar ciertas condiciones de cultivo que los hongos requieren para establecerse y producir mayor cantidad de propgulos. De esta forma, se mantiene la actividad fisiolgica del hongo que a corto y largo plazo contribuye en beneficios para las plantas inoculadas. APLICACIONES DE LOS HONGOS MICORRZICOS ARBUSCULARES El beneficio que aporta la simbiosis micorrzica arbuscular en plantas ha sido bien documentado, dando especial nfasis en los que respecta a la promocin del crecimiento y nutricin de plantas, especialmente aquellas de inters hortcola, frutcola y forestal (Alarcn y Ferrera-Cerrato; 1999; Davies et al., 2000; Jeffries et al., 2003). La aplicacin de los HMA es factible de realizarse en los diferentes sistemas de propagacin de plantas: semillas, cultivo de tejidos o estacas (Alarcn y Ferrera-Cerrato, 1999; Davies et al., 2000). En la mayora de los casos, los HMA incrementan el crecimiento y estado nutricional de las plntulas, y mejoran la etapa de aclimatacin y adaptacin de vitroplantas a condiciones ambientales y su productividad (Alarcn et al., 2000, 2001). La inoculacin de HMA ha contribuido a la adaptacin y crecimiento de plantas en condiciones ambientales extremas como lo son sitios erosionados, sitios con baja fertilidad, sitios con problemas de salinidad, y en sitios de zonas ridas o con problemas de contaminacin por diversos agentes orgnicos e inorgnicos (Ferrera-Cerrato y Alarcn, 2004). Otra aplicacin de los HMA con repercusin ecolgica se dirige a la rehabilitacin de reas afectadas por deposiciones volcnicas, como se ha demostrado en Japn (Saito y Marumoto, 2002). Uno de los aspectos que ha recibido poca atencin se refiere al efecto de los HMA en plantas utilizadas en interiores. En este sentido, existe un reporte en el que se evaluaron diferentes cepas de HMA sobre la adaptacin y crecimiento de siete gneros de plantas. En dicho estudio se reportan variaciones de la respuesta de las plantas al establecimiento de los HMA que fueron desde la promocin hasta la inhibicin del crecimiento de algunas de ellas (Busch y Lelley, 1997). A pesar de las beneficios de los HMA no solo en la produccin sostenible de los cultivos sino tambin en lo que respecta a la conservacin ambiental, uno de los problemas de la produccin de inculo de estos simbiontes mutualistas, estriba en su condicin natural de biotrofismo obligado, es decir, que estos micosimbiontes son dependientes de su establecimiento en un sistema radical vivo para satisfacer sus requerimientos nutricionales y completar su ciclo biolgico. Con base en lo anterior, a continuacin se describen brevemente, diferentes sistemas de cultivo y propagacin de HMA con fines de produccin de inoculo a diferente escala. PROCESO BIOTECNOLGICO DE LA PRODUCCIN DE INCULO DE HMA En la mayora de los sistemas de produccin de plantas se ha acudido a la utilizacin de inoculante a base de esporas en suelo y raz, suelo-inculo, o races colonizadas por los HMA. Uno de los aspectos que deben ser considerados en los diferentes mtodos de produccin de inoculante micorrzico, es la seleccin de la planta

hospedante. Generalmente para obtener mayor cantidad de propgulos de HMA se ha acudido a utilizar gramneas como plantas trampa, ya que producen mayor cantidad de races las cuales son susceptibles de ser colonizadas y utilizar estos propgulos como fuente de inculo de HMA. La combinacin HMA-planta trampa es un factor determinante en la propagacin de una cepa fngica en especial. En este sentido, se ha mencionado que existe cierto grado de especificidad de algunos hongos por un determinado genotipo de un mismo gnero de planta hospedante (Boyetchko y Tewari, 1995). La produccin de inculo mediante el uso de arcillas expandibles permite obtener mayor cantidad de propgulos de HMA (micelio, esporas y races colonizadas), as como mantener el inoculante viable durante largos periodos de almacenamiento de hasta cinco aos, incluso a temperatura ambiente (Gruntwald-Stocker y Dehne, 1989; Aboul-Nasr, 1997). El uso de soportes orgnicos e inorgnicos para la produccin de inculo micorrzico arbuscular, representa en la actualidad una excelente alternativa de bajo costo (Jarsfter y Sylvia, 1992; Saito, 1990; Saito y Marumoto, 2002) ya que se puede lograr el escalamiento masivo de la produccin de inoculante para ser utilizado en los diferentes sistemas agrcolas y hortcolas (Alarcn et al., 2004). Para este caso, es necesario tener un buen cuidado de las condiciones de cultivo de las plantas trampa, ya que el inculo debe estar libre de microorganismos fitopatgenos. Por tal razn, se requiere de la aplicacin de plaguicidas que adems de erradicar los organismos plaga, deben permitir el desarrollo de la simbiosis micorrzica. Algunos fungicidas comnmente utilizados para erradicar enfermedades de tipo fngico y que han mostrado tener poco efecto en la produccin de esporas de HMA, son el benomilo (sistmico) y mancozeb (contacto) aplicados en dosis recomendadas (Cabello, 1994). En la actualidad existen diferentes mtodos para la propagacin de cepas, as como para la produccin de inoculantes a base de HMA. Bsicamente, los sistemas de produccin de inoculante micorrzico arbuscular consisten en la utilizacin de una planta hospedante que permita el establecimiento y reproduccin de los hongos tanto en races como en la rizosfera. Estos sistemas pueden considerar el uso de suelo o cualquier substrato o material inerte, as como el uso de sistemas ms sofisticados en invernadero que permitan la propagacin de los HMA en un sistema radical el cual se asperja o impregna con especficas soluciones nutritivas (Cooper, 1975; Zobel et al., 1976; Mosse y Thompson, 1984; Sylvia y Hubbel, 1986; Heinzeman y Weritz, 1990; Sylvia, 1999; Alarcn y Ferrera-Cerrato, 2001). La aplicacin de fertilizantes en los cultivos trampa o incluso en sistemas aeropnicos e hidropnicos, tiene especial repercusin en la colonizacin de los HMA as como en la produccin de esporas y micelio externo. Uno de los elementos crticos que influyen en establecimiento de la colonizacin por HMA en el sistema radical, es el fsforo (Jasfter y Sylvia, 1992). Sin embargo, algunas cepas o complejos micorrzicos pueden ser tolerantes a altas concentraciones de este elemento (Alarcn y Ferrera-Cerrato, 2003), por lo que pueden mantener su capacidad de promover el crecimiento y producir incluso mayor cantidad de propgulos. Por otra parte, la aplicacin de soluciones nutritivas es muy comn para la produccin de inculo en cultivos con plantas trampa. En este sentido, el uso de la solucin nutritiva de Hoagland a 20 y 50%, ha permitido la produccin de mayor cantidad de raz colonizada, as como produccin de esporas (Chen et al., 2003). El cultivo aeropnico de plantas (Zobel et al., 1976) ha permitido la obtencin de inoculantes de HMA. Este sistema consiste de la aspersin de solucin nutritiva a diversos intervalos y duraciones, al sistema radical que esta colonizado por el o los HMA. No obstante, las plantas hospedantes deben ser precolonizadas con HMA y ser mantenidas en invernadero o cmaras de crecimiento, de tal forma que despus de cierto periodo las

plantas puedan ser transferidas al sistema de cultivo aeropnico. De este modo, se ha logrado producir inoculantes de hongos como Glomus intraradices Schenck et Smith, Entrophospora kentinensis Wu et Liu, G. clarum Nicol. et Schenck. G. etunicatum Becker et Gerd. (Sylvia y Hubbel, 1986; Wu et al., 1995; Paiva et al., 2003). La produccin de inoculantes de HMA no esta sujeta a la propagacin de una sola especie fngica, sino tambin es posible crear cultivos mixtos de especies que han sido previamente seleccionadas como eficientes en al promocin del crecimiento de diversas plantas. Por otra parte, es posible la propagacin de consorcios naturales de HMA no seleccionados por el hombre, pero aislados de la rizosfera de plantas de sitios especficos y cuyas especies se expresan naturalmente (Chamizo et al., 1998). En algunos reportes se ha mencionado que la efectividad de los HMA es mayor cuando se inoculan cultivos mixtos o consorcios naturales, comparado con los efectos obtenidos por la inoculacin individual de cada especie fngica que integra al cultivo mixto o al consorcio (Mehrotra y Baijal, 1995; Ferrera-Cerrato y Alarcn, 2003). En la actualidad se cuenta ya con un sistema de propagacin de HMA in vitro, en el que es posible obtener micelio y esporas libres de otros microorganismos. Como se ha venido mencionando, la propagacin de estos hongos requiere de la presencia de una raz que suministre fuentes de carbono indispensables para el desarrollo del hongo. Bajo este sistema de cultivo, se han utilizado races transformadas de Daucus carota (en las que se inserta el plsmido inductor de la proliferacin de races que se encuentra en Agrobacterium rhizogenes), o bien races sin transformar de Lycopersicum esculentum (Becard y Fortn, 1988; Berbara, 2000). Este sistema fue implementado desde 1975 y a la fecha se ha venido perfeccionando de tal modo que ya se cuenta con bancos de germoplasma de algunos HMA propagados en cultivo in vitro o cultivo monoxnico, como tambin se le conoce. Este tipo de cultivo de HMA ofrece enormes ventajas para el estudio fisiolgico, bioqumico y taxonmico de estos hongos, por lo que se tiene informacin fundamental de la biologa de estos micosimbiontes (Lammers et al., 2001; Declerck et al., 2001; Bago et al., 2002). Adems de las ventajas mencionadas del cultivo monoxnico, es posible tambin producir inoculante para fines de investigacin o incluso para su aplicacin en menor escala. Este tipo de sistemas, dado las condiciones de esterilidad, reactivos para la preparacin de medio de cultivo, y de equipo de laboratorio, representa un alto costo. Lo anterior representa una desventaja para producir inoculante a gran escala, aunque con base a la obtencin de propgulos como esporas (Declerck et al., 2001), es posible aplicar menor cantidad de ellos a las plantas. Otra desventaja es que solo algunas especies de HMA, principalmente del gnero Glomus, han sido exitosamente cultivadas in vitro, por lo que se requiere de mayor conocimiento respecto a la composicin de medios de cultivo, raz hospedante y condiciones de cultivo para propagar el mayor nmero de especies de estos hongos simbiticos. La aplicacin comercial de inoculantes de HMA es factible realizarla al inocular sustratos o el sistema radical de las plantas con el suelo inoculo procedente de cultivos trampa. No obstante, para el caso de inoculante producido por sistemas aeropnicos o va cultivo monoxnico, se ha ideado la suspensin de los propgulos micorrzicos en soluciones de alginato de sodio al 2% y posteriormente, procesadas para su polimerizacin en una solucin de CaCl2 0.1 M (Declerck et al., 1996), y cuyas perlas resultantes contendrn los propgulos micorrzicos para ser utilizados en la inoculacin de plantas. El uso de inoculantes de HMA contenidos en alginato ha resultado apropiado para inducir crecimiento y mejorar la nutricin de plantas de banano, as como proliferar en el sustrato comercial del vivero (Jaizme-Vega et al., 2003). El uso de alginatos, ya sea pelculas o perlas, como una tcnica de inoculacin representa ventajas que se relacionan

con la proteccin y retencin de los propgulos micorrzicos en suelos arenosos o en sustratos artificiales inorgnicos en los que el inculo puede perderse fcilmente por lixiviacin, al momento de aplicar los riegos (Calvet et al., 1996). En Mxico, este tipo de inoculante as como su presentacin en tabletas, ha sido producido a nivel experimental por el grupo de investigacin de la Facultad de Agronoma, Universidad Veracruzana, Xalapa, Veracruz (Dra. Dora Trejo, comunicacin personal). PERSPECTIVAS Y CONCLUSIONES El conocimiento de los procesos involucrados en el establecimiento de la simbiosis micorrzica, permite que el xito de la colonizacin de las races por los hongos benficos pueda realizarse al tiempo o edad apropiada en que las plantas hospedantes la necesitan. Este conocimiento ser la base de los lineamientos a seguir en el manejo y produccin de inoculante micorrzico arbuscular, con la finalidad de maximizar los beneficios que esta simbiosis aporta a sus macrosimbiontes. As tambin, la relativa tolerancia de algunos endfitos a perturbaciones especficas en sus nichos proveer la identificacin, a travs de la seleccin, de aquellos hongos con caractersticas para persistir en ambientes desfavorables para el crecimiento de plantas. Asimismo, se requiere de mayor vinculacin entre la industria y expertos de la simbiosis micorrzica con el fin de coadyuvar en el mejoramiento de sistemas de produccin de inoculante, as como en la calidad de los mismos. De esta forma, se podr ofrecer productos biofertilizantes que beneficien a las plantas inoculadas, ya sea en condiciones de invernadero, vivero o en condiciones de campo, donde sea factible realizar la inoculacin de HMA, especialmente cuando se intenta fortalecer los programas de restauracin y recuperacin de suelos perturbados, degradados o contaminados. De igual manera, se requiere de mayor estudio respecto a la aplicabilidad de HMA en el crecimiento y desarrollo de plantas destinadas a decorar interiores en edificios pblicos, cuyas condiciones potencialmente representan estrs para ellas, y la simbiosis micorrzica arbuscular podra contribuir en aminorar sus efectos adversos. Por otra parte, se hace especial nfasis en la utilizacin de cepas de HMA de origen mexicano que puedan ser reintroducidas a travs de su inoculacin en plantas destinadas a sitios con climas especficos. Con ello, se puede reducir el impacto sobre la diversidad de HMA nativos lo cual aun es desconocido, por efecto de la introduccin de cepas de HMA alctonos o y de las que procedan del extranjero. Para tal fin, se requiere estudiar detalladamente las interacciones de HMA nativos versus alctonos en microcosmos, con el objeto de predecir la competencia y el posible desplazamiento de especies de HMA, sobre todo por aquellos gneros fngicos que se caracterizan por tener mayor agresividad para colonizar hospedantes.
Agradecimientos. Este trabajo forma parte del proyecto correspondiente al programa de colaboracin en investigacin aplicada: SISIERRA-CONACYT 2002-0301 Escalamiento del inculo micorrzico arbuscular para la sostenibilidad de viveros de ctricos tolerantes al VTC, en el Estado de Campeche.

LITERATURA CITADA
Abbott, L.K. y A.D. Robson. 1991. Factors influencing the occurrence of vesicular arbuscular mycorrhizas. Agric. Ecosystems Environ. 35:121-150. Aboul-Nasr, A. 1997. Inoculum production for vesicular arbuscular mycorrhizal fungi on expanded clay. Alex. J. Agric. Res. 42:169-176.

Alarcn, A. y R. Ferrera-Cerrato. 1999. Manejo de la micorriza arbuscular en sistemas de propagacin de plantas frutcolas. Terra 17:171-191. Alarcn, A. y R. Ferrera-Cerrato. 2001. Biofertilizantes: importancia y manejo en la agricultura. Rev. Agricultura Tcnica de Mxico. 26:63-75. Alarcn, A. y R. Ferrera-Cerrato. 2003. Aplicacin de fsforo e inoculacin de hongos micorrzicos arbusculares en el crecimiento y estado nutricional de Citrus volkameriana Tan & Pasq. Terra 21:91-99. Alarcn, A., R. Ferrera-Cerrato, M.C. Gonzlez-Chvez y A. Villegas-Monter. 2000. Hongos micorrzicos arbusculares en la dinmica de aparicin de estolones y nutricin de plantas de fresa cv. Fern obtenidas por cultivo in vitro. Terra. 18:211-218. Alarcn , A.; M.C. Gonzlez-Chvez, R. Ferrera-Cerrato, y A.Villegas-Monter. 2001. Efectividad de Glomus fasciculatum y Glomus etunicatum en el crecimiento de plntulas de Vitis vinifera L. obtenidas por micropropagacin. Terra. 19:29-35. Alarcn, A.; J.J. Almaraz S., R. Ferrera-Cerrato, M.C.A. Gonzlez-Chvez, M.E. Lara-Hernndez, M.J. Manjarrez M., R. Quintero L. y S. Santamara R. 2004. Manual: Tecnologa hongos micorrzicos en la produccin de especies forestales en vivero. R. Ferrera-Cerrato, A. Alarcn, y M.E. Lara H. (Eds.). Colegio de Postgraduados, Montecillo. SEMARNATPRONARE, Mxico. 98 p. Se puede consultar en: http://www.conafor.gob.mx/programas_nacionales_forestales/pronare/sire/publicaciones/P ARTE1%20MICORRIZAS.pdf Aug, R.M. 2001. Water relations, drought and vesicular-arbuscular mycorrhizal symbiosis. Mycorrhiza 11:3-42. Bago, B.; C. Azcn-Aguilar, Y. Shachar-Hill, y P.E. Pfeffer. 2000. El micelio externo de la micorriza arbuscular como puente simbitico entre la raz y su entorno. In. A. Alarcn y R. Ferrera-Cerrato (Eds.).Ecologa, fisiologa y biotecnologa de la micorriza arbuscular. Ed. MundiPrensa. Mexico. pp. 78-92. Bago, B.; W. Zipfel, R.M. Williams, J. Jun, R. Arreola, P.J. Lammers, P.E. Pfeffer, y Y. ShacharHill. 2002. Translocation and utilization of fungal storage lipid in the arbuscular mycorrhizal symbiosis. Plant Physiol. 128:108-124. Becard, G. y J.A. Fortn. 1988. Early events of vesicular-arbuscular mycorrhiza formation on Ri TDNA transformed roots. New Phytol. 108:211-218. Barbara, R.L.L. 2000. Potencialidades no estudo com fungos micorrizicos arbusculares em sistemas radiculares transgnicos. In. A. Alarcn y R. Ferrera-Cerrato (Eds.). Ecologa, fisiologa y biotecnologa de la micorriza arbuscular. Mundi Prensa. Mxico. pp.118-123. Boyetchko, S.M. y J.P. Tewari. 1995. Susceptibility of barley cultivars to vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi. Can. J. Plant Sci. 75:269-275. Busch, E, y J.I. Lelley. 1997. Use of endomycorrhizal fungi for plant cultivation on buildings. Angew. Bot. 71:50-53. Cabello, M.N. 1994. Efecto de la aplicacin secuencial de fungicidas sobre hongos formadores de micorrizas vesculo-arbusculares en condiciones de campo. Bol. Micol. 9:1-7. Calvet, C.; A. Camprubi, y R. Rodrguez-Kbana. 1996. Inclusion of arbuscular mycorrizal fungi in alginate films for experimental studies and plant inoculation. HortScience 31:285. Chamizo, C.A., R. Ferrera-Cerrato y L. Varela. 1998. Identificacin de especies de un consorcio del gnero Glomus. Rev. Mex. Micol. 14:37-40. Chen, N; Y.S. Wang, X.L. Li, M.Q. Zhang, L.J. Xing, G. Feng, y X.H. Ni. 2003. Effects of nutrient solution strength on development of arbuscular mycorrhizal fungi. Mycosistema 22:394401. Cooper, A.J. 1975. Crop production in re-circulation nutrient solutions. Sci. Hortic. 3:251-258. Dakessian, S.; M.S. Brown y G.J. Bethlenfalvay. 1986. Relationship of mycorrhizal growth enhancement and plant growth with soil water and texture. Plant Soil 94:439-443. Davies, Jr. F.T.; A.A. Estrada-Luna, T.L. Finnerty, y V. Olalde-Portugal. 2000. Applications of mycorrhizal fungi in plant propagation systems. In. A. Alarcn y R. Ferrera-Cerrato (Eds.).Ecologia, fisiologia y biotecnologa de la micorriza arbuscular. Ed. MundiPrensa. Mexico. pp. 123-140.

Declerck, S.; D.G. Strullu, C. Plenchette, y T. Guillemette. 1996. Entrapment of in vitro produced spores of Glomus versiforme, associated with Ri T-DNA transformed carrot roots. J. Biotechnol. 48:51-57. Declerck, S.; D. Dor, S. Cranenbrouck, y E. Le Bouleng. 2001. Modelling the sporulation dynamics of arbuscular mycorrhizal fungi in monoxenic culture. Mycorrhiza 11:225-230. Ferrera-Cerrato, R. 1995. Efecto de Rizosfera. In. R. Ferrera-Cerrato y J. Prez-Moreno (Eds.). Agromicrobiologa. Elemento til en la agricultura sustentable. Colegio de Postgraduados en Ciencias Agrcolas. Montecillo, Estado de Mxico. pp. 36-53. Ferrera-Cerrato, R y A. Alarcn. 1998. Importancia de la simbiosis en la agricultura.. Programa y Resmenes. II Symposium Nacional de la Simbiosis Micorrzica. Colima, Colima. Mxico. 4-6 de noviembre de 1998. pp. 1-2 Ferrera-Cerrato, R. y A. Alarcn. 2001. La microbiologa del suelo en la agricultura sostenible. Rev. Ciencia ErgoSum 8:175-183. Ferrera-Cerrato, R. y A. Alarcn. 2003. The effectiveness of a Mexican endogenous arbuscular mycorrhizal fungi consortium on two cultivars of Carica papaya L. depends on the interaction of its own three fungal components. In. Proceedings of the Fourth International Conference on Mycorrhizae. ICOM4 August 10-15, 2003. P. 167. Font Quer, P. 1982. Diccionario de Botnica. Editorial Labor. Barcelona. pp. 713-714. Gianinazzi-Pearson, V. y C. Azcn-Aguilar. 1991. Fisiologa de las micorrizas vesculoarbusculares. In. J. Olivares y J.M. Barea (Coordinadores) Fijacin y Movilizacin biolgica de nutrientes. Vol. 11 Fijacin de N y Micorrizas. Consejo Superior de Investigaciones Cientficas. Madrid, Espaa. pp. 175-202. Gonzlez, C.M.C y R. Ferrera-Cerrato. 1990. Effect of vesicular-arbuscular mycorrhizae on tissue culture derived plantlets of strawberry. HortScience 25:903-905. Gonzlez-Chvez, M.C. y R. Ferrera-Cerrato. 1996. Ecologa de la endomicorriza vesculoarbuscular en un agroecosistema sostenible de maz en el trpico hmedo de Mxico. Micol. Neotrop. Apl. 9:53-66. Gregory, J.P. 1992. Crecimiento y funcionamiento de las races. In. A. Wild (Coordinador) Condiciones del suelo y desarrollo de las plantas segn Russeli. Versin Espaola de P. Urbano T y C. Rojo H. Ediciones Mundi-Prensa. Madrid. pp. 121-175. Grundwaldt-Stocker, G. y H.W. Dehne. 1989. The use of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi on plant production. II. Characterization of inocula on inorganic carrier material. J. Plant Disease Protection. 96:615-626. Harinikumar, K.M. y D.J. Bagyaraj. 1994. Potential of earthworms, ants, millipedes, and termites for dissemination of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi in soil. Biol. Fertil. Soils 18:115-118. Heinzeman, J. y J. Weritz. 1990. Rockwool: a new carrier system for mass multiplication of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi. Angew. Botanik 64:271-274. Jaizme-Vega, M.C.; A.S. Rodrguez-Romero, C. Marn-Hermoso y S. Declerck. 2003. Growth of micropropagated bananas colonized by root-organ culture produced arbuscular mycorrhizal fungi entrapped in Ca-alginate beads. Plant and Soil 254:329-335. Jasfter, A.G. y D.M. Sylvia. 1992. Inoculum production and inoculation strategies for vesicular arbuscular mycorrhizal fungi. In. B. Metting (Ed.). Soil microbial ecology, application in agricultural and environmental management. Marcel Dekker, Inc. NY. pp. 349-377. Jeffries, P., S. Gianinazzi, S. Perotto, K. Turnau, y J.M. Barea. 2003. The contribution of arbuscular mycorrhizal fungi in sustainable maintenance of plant health and soil fertility. Biol. Fertil. Soils 37:1-16. Johnson, N.C., J.H. Graham, y F.A. Smith, 1997. Functioning of mycorrhizal associations along the mutualism-parasitism continuum. New Phytol. 135:575-586. Klironomos, J.N. 2003. Variation in plant response to native and exotic arbuscular mycorhizal fungi. Ecology 84:2292-2301. Lammes, J.P.; J. Jun, J. Abubaker, R. Arreola, A. Gopalan, B. Bago, C. Hernandez-Sebastia, J.W. Allen, D.D. Douds, P.E. Pfeffer, y Y. Sachar-Hill. 2001. The glyoxylate cycle in an arbuscular mycorrhizal fungus. Carbon flux and gene expression. Plant Physiol. 127:12871298.

Linderman, R.G. 1993. Effects of rnicrobial interactions in the mycorrhizosphere of plant growth and health. In. R. Ferrera-Cerrato y R. Quintero L. (Eds.). Agroecologa. Sostenibilidad y Educacin. Centro de Edafologa, Colegio de Postgraduados. Montecillo, Estado de Mxico. pp. 138-152. Mehrotra, V.S. y U. Baijal. 1995. Effects of single and mixed inocula of VAM fungi on the growth and yield of sunflower (Helianthus annuus L.). Philippine J. Sci. 124:183-201. Mosse, B. y J.P. Thompson. 1984. Vesicular-arbuscular endomycorrhizal inoculum production. I. Exploratory experiments with beans (Phaseouls vulgaris) in nutrient flow culture. Can. J. Bot. 62:1523-1530. Nadian, H.; S.E. Smith, A.M. Alston, R.S. Murray y D. Siebert. 1998. Effects of soil compaction on phosphorus uptake and growth of Trfolum subterraneum colonized by four species of vesicular- arbuscular mycorrhizal fungi. New Phytol. 139:155-165. Paiva, L.M., M.A. Silva, P.C. Silva, y L.C. Maia. 2003. Glomus clarum e Glomus etunicatum: cultivo em solo e aeroponia. Revista Brasil. Bot. 26:257-262. Rapparini, F.; R. Baraldi, G. Bertazza, B. Branzanti y S. Predieri. 1994. Vesicular-arbuscular mycorrhizal inoculation of micropropagated fruit trees. J. Hortic. Sci. 69:1101-1109. Rilling, M.C. y P.D. Steinberg. 2002. Glomalin production by an arbuscular mycorrhizal fungus: a mechanism of habitat modification. Soil Biol. Biochem. 34:1371-1374. Saito, M. 1990. Charcoal as a micro-habitat for VA mycorrhizal fungi, and its implication. Agric. Ecosyst. Environ. 29:341-344. Saito, M. y T. Marumoto. 2002. Inoculation with arbuscular mycorrhizal fungi: the status quo in Japan and the future prospects. Plant Soil 244:273-279. Sanders, I.R. y A.H. Fitter. 1992. The ecology and functioning of vesicular-arbuscular mycorrhizas in co-existing grassland species. New Phytol. 120:517-524. Schachtman, D.P.; R.J. Reid y S.M. Ayling. 1998. Phosphorus uptake by plants: from soil to cell. Plant Physiol. 116:447-453. Sieverding, E. 1991. Vesicular-arbuscular mycorrhiza management in tropical agrosystems. Technical Cooperation, GTZ. Eschborn, Germany. 371 p. Smith, S.E. y D.J. Read. 1997. Mycorrhizal symbiosis. 2nd Edition. Academic Press. London. Sylvia, D.M. 1999. Mycorrhizal symbiosis. In. Principles and applications of soil microbiology. D.M. Sylvia, J.J. Fuhrmann, P.G. Hartel, y D.A. Zuberer (Eds.) Prentice Hall. New Jersey, USA. pp. 409-426. Sylvia, D.M. y D.H. Hubbel. 1986. Growth and sporulation of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi in aeroponic and membrane systems. Symbiosis 1:259-267. Sylvia, D.M.; D.O. Wilson, J.H. Graham, J.J. Maddox, P. Millner, J.B. Morton, H.D. Skipper, S.F. Wright y A.G. Jarstfer. 1993. Evaluation of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi in diverse plants and soils. Soil Biol. Biochem. 25:705-713. Thimm. T. y O. Larink. 1994. Grazing preference of some collembola for endomycorrhizal fungi. Biol. Fertil. Soils 18:1-3. Trejo, A.D.; E. Hernndez A. y R. Ferrera-Cerrato 1998. Ecologa y comportamiento de la endomicorriza arbuscular en el cultivo del caf (Coffea arabica L.). In. R. Zulueta R., M.A. Escalona A. y D. Trejo A. (Eds.). Avances de la Investigacin Micorrzica en Mxico. Universidad Veracruzana. Mxico. pp. 41-52. Ulloa, M. 1991. Diccionario ilustrado de Micologa. UNAM. Mxico p. 185. Wu, C.G., Y.S. Liu, y L.L. Hung. 1995. Spore development of Entrophospora kentinensis in an aeroponic system. Mycologia 87:582-587. Zobel, R.W.; P.D. Tredice y J.G. Torrey. 1976. Methods for growing plants aeroponically. Plant Physiol. 57:344-346.

IMPACTO DE LA MICORRIZA ARBUSCULAR EN LA PRODUCTIVIDAD DEL SORGO EN TAMAULIPAS

Arturo Daz Franco, Idalia Garza Cano, Vctor Pecina Quintero y Agustn Magallanes Estala*
Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP. Apdo. Postal 172, Ro Bravo, Tam. 88900.

En la regin semirida del norte de Tamaulipas se siembra la mayor superficie de sorgo (Sorghum bicolor) en el pas, es un monocultivo que ocupa alrededor de 750 mil hectreas de temporal. Esta regin cuenta con suelos degradados, que en general son carentes de N, P y materia orgnica (Durn, 1992). Sin embargo, la fertilizacin qumica no es una prctica generalizada, y cuando se aplica, las dosis son inferiores a las requeridas, debido a que representa una inversin de alto costo y riesgo en la eficacia, por la errtica humedad en el suelo (Daz M., 2002). La alteracin del agroecosistema ha trado como consecuencia, que la productividad y rentabilidad del sorgo, haya decrecido de forma considerable (Salinas, 2002). La biofertilizacin incluye como agentes promotores del crecimiento vegetal, a hongos y bacterias benficas del suelo (micorrizas y rizobacterias), as como desechos orgnicos a travs de compostas y vermicompostas (Alarcn y Ferrara, 2000). Dentro de este contexto, las micorrizas vesculo arbusculares (MVA), han tenido tal repercusin que ya existen en el mercado diferentes productos comerciales (Sylvia, 1999, 2004), aunque muchos de ellos tienen un alto costo. Gonzlez (2002) seal que, como una aplicacin biotecnolgica, las plantas necesitan la reintroduccin de especies micorrzicas eficientes en situaciones como ausencia o baja poblacin de MVA nativas, en suelos erosionados, degradados, contaminados o en suelos con especies micorrzicas ineficientes. Por lo anterior, el propsito del presente documento es dar a conocer la influencia de la inoculacin de semilla de sorgo, con la MVA Glomus intraradices, su impacto en la productividad y experiencias en la validacin de esa tecnologa como una prctica para hacer una produccin sostenible. Caractersticas de las MVA La actividad de las MVA, a travs de la extensa red de hifas que los hongos generan, incrementa la superficie de exploracin radical y beneficia a la planta con una mayor absorcin de P y de microelementos; aunque de manera indirecta y en menor proporcin, tambin existe absorcin de N. En la simbiosis se establecen diversos procesos fisiolgicos y bioqumicos, de modo que la planta puede presentar cambios en la morfologa de la raz e incrementos de la actividad fotosinttica; otros aspectos relacionados es la capacidad de las MVA de producir hormonas como cido abscsico, giberelinas, auxinas y citoquininas (Alarcn y Ferrara, 1999; Smith y Gianinazzi, 1988; Sylvia, 2004). Tambin la colonizacin micorrzica contribuye a que la planta tolere condiciones adversas de humedad, salinidad, metales pesados, as como a la accin
*

A partir de julio de 2003 labora en el INIFAP-Campo Experimental Pachuca.

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protectora en contra de algunos fitopatgenos del suelo. Las respuestas pueden variar en funcin al grado de dependencia entre los endfitos y la planta hospedante, por lo que la efectividad micorrzica depende de la respuesta de la planta a la colonizacin (Alarcn y Ferrara, 1999; Sylvia, 2004). Los estudios locales con inoculacin de semilla de sorgo, han determinado que G. intraradices (cepa INIFAP), destac como un simbionte eficiente, no as cuando se combin con otros simbiontes o con fitohormona (Daz, 2003; Daz M., 2002; Garza et al., 2003; Magallanes y Daz, 2002). Tambin se ha demostrado su efectividad por el incremento en la produccin de otros cultivos regionales como maz (Zea mays) y okra (Abelmoschus esculentus) (Alvarado et al., 2003; Daz et al., 2002). De igual forma, en otras regiones del pas el mismo endfito fue promotor del crecimiento y de rendimiento, inclusive igual o superior a la fertilizacin qumica, en maz, trigo (Triticum aestivum), tomate (Lycopersicon esculentum), soya (Glycine max), frijol (Phaseolus vulgaris) y naranjo (Citrus sinensis) (Durn et al., 2001; Gonzlez et al., 2002; Irizar et al., 2003). El hongo MVA G. intraradices, pertenece a la clase Zygomicetos, orden Glomales, suborden Glomineae y a la familia Glomaceae. Posee esporas unicelulares que nacen de una sola hifa, son globosas o subglobosas (93 m), de color blanco, crema a amarillo-caf, cuentan con tres paredes; adems de tener hifas cilndricas (Morton, 2002). Actualmente la multiplicacin masiva de G. intraradices, as como el proceso para su comercializacin, la ha realizado la Dra. Ma. Pea del Ro en el Campo Experimental General Tern, INIFAP, General Tern, N. L., mediante camas reproductoras donde se utiliza sorgo como planta hospedera. Esta metodologa es descrita por Durn et al. (2001), y con ella se obtiene el sustrato infectado con una concentracin de 200 esporas g-1. Inoculacin de la semilla de sorgo La dosis de sustrato micorrzico utilizado para la inoculacin de semilla de sorgo ha sido la indicada por Irizar et al. (2003), quienes recomiendan 1 kg de sustrato para la semilla necesaria en una hectrea (aproximadamente 8 kg); y como adherente durante la mezcla, utilizan 60 ml de carboxi metil celulosa. La mezcla de la semilla puede ser en un tanque tratador de 200 Lt u otro tipo de mezcladora mecnica. El procedimiento sugerido para la inoculacin de la semilla de sorgo es: 1) se mezcla el adherente en 0.7 a 0.9 Lt de agua; 2) se vaca la semilla en la mezcladora y se adiciona la solucin del punto 1, posteriormente se mezcla; y 3) se agrega el sustrato micorrzico y se mezcla hasta que la semilla se cubra uniformemente. Aunque la inoculacin se puede realizar al momento de la siembra, es conveniente que sta se programe desde que el productor adquiere la semilla (uno o ms meses antes de la siembra); cuando ese sea el caso, se debe de secar la semilla bajo sombra antes de almacenarla. Influencia de Glomus intraradices en sorgo A) Resultados de invernadero. En un estudio de invernadero se evalu la inoculacin de la G. intraradices en nueve hbridos comerciales de sorgo: Asgrow Coral, RB-Patrn, RB-3030, Pioneer 83G66, 11

Pioneer 82G63, Pioneer 8443, DK-55, DK-52 y Wac 690. Los resultados mostraron que las variables altura de planta, la biomasa seca y el peso de raz de los nueve hbridos de sorgo, manifestaron un incremento significativo con la inoculacin micorrzica, comparado con el testigo, sin inoculacin. En promedio, el endfito increment 8.4% la altura de planta, 12.3% la biomasa seca, y 10.8% el peso de la raz (Cuadro 1). Cuadro 1. Influencia de la inoculacin con G. intraradices en algunas caractersticas de planta de nueve hbridos comerciales de sorgo en invernadero. Inoculacin Con Sin DMS (p<0.05) Altura de planta (cm) 46.29 42.70 1.78 Biomasa seca (g) 16.44 14.63 0.72 Peso de raz (g) 10.86 9.80 0.69

Por otro lado, el parmetro ndice de clorofila registr una respuesta variable entre el hbrido de sorgo y la inoculacin micorrzica (Cuadro 2); en todos los casos se acrecent el contenido de clorofila, aunque solamente en los hbridos RB-Patrn y Pioneer 83G66, el valor de la diferencia con y sin la inoculacin no fue significativa. Lo anterior demuestra que la manifestacin de la micorriza, en funcin a la clorofila, no presenta consistencia entre los hbridos de sorgo. Se registr la mayor colonizacin micorrzica radical en los hbridos Pioneer 8442 y Wac 690; sta colonizacin solo se correlacion significativamente (r=0.67*) con la diferencia obtenida en el ndice de clorofila con y sin la inoculacin (Cuadro 2). Otros estudios de invernadero han constatado que la inoculacin de MVA en sorgo promueve el crecimiento y desarrollo de la planta. Abdel y Mohamedin (2000) informaron que la inoculacin de sorgo con G. intraradices (cepa LAP8), increment significativamente el crecimiento, los pigmentos fotosintticos y la protena, comparado con el sorgo no inoculado. B) Evaluaciones en campo

El tipo de suelo y la micorrizacin. Para conocer la respuesta del sorgo a la inoculacin de G. intraradices en sorgo asociada con el tipo de suelo, se realiz un trabajo de campo, en condiciones de temporal, donde se seleccionaron dos suelos, uno de textura arcillosa y el otro migajn arcillo arenoso (Daz M., 2002). Sin embargo, ambos suelos fueron alcalinos (pH 8), con bajo contenido en materia orgnica, N, P y alto en K. En ese estudio se utilizaron como tratamientos, la dosis de fertilizacin qumica empleada por el productor, que consisti de la adicin en presiembra de 44 y 33 kg ha-1 de N y P, respectivamente, la semilla inoculada con G. intraradices y el testigo absoluto. Los resultados indicaron que el sorgo respondi de forma similar a los tratamientos independientemente de la textura del suelo; el promedio de las variables de ambos sitios se encuentran en el Cuadro 3. Con excepcin de la altura de planta, la inoculacin con el simbionte increment el peso de raz, la colonizacin micorrzica y el rendimiento de grano. Con relacin al rendimiento, la MVA igual o super a la fertilizacin qumica

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(Cuadro 3). La evaluacin de la colonizacin micorrzica bajo condiciones de campo demostr la capacidad de hongo micorrzico para competir con las poblaciones microbianas nativas. Lo anterior coincide con Sylvia et al. (1993) quienes concluyeron que distintas cepas de MVA evaluadas en sorgo mostraron efectividad semejante bajo diferentes condiciones edficas. Cuadro 2. ndice de clorofila en hbridos de sorgo y su respuesta con o sin la inoculacin de G. intraradices, as como la colonizacin micorrzica total en invernadero. Hbrido Con Asgrow Coral Pioneer 8443 RB-3030 RB-Patrn Wac 690 DK-55 Pioneer 83G66 Pioneer 82G63 DK-52 DMS (p<0.05)
Z

Inoculacin micorrzica Sin

Z

Colonizacin radical (%) 43.7 ab 49.5 a 35.0 c 35.9 c 49.1 a 43.7 ab 44.7 ab 44.0 ab 43.0 ab 4.3 3.90/* 2.52/* 1.58/* 0.24/
NS

Diferencia/Significancia

31.64

27.74 29.08 29.58 31.68 27.10 29.94 29.00 27.52 28.82

31.60 31.16 31.92 30.04 32.32 30.04 29.98 31.56

2.94/* 2.38/* 1.04/

NS

2.46/* 2.74/* 1.43

Valor obtenido mediante el medidor porttil Minolta SPAD 505.

Cuadro 3. Caractersticas de planta, grano y colonizacin micorrzica radical total, asociadas con la inoculacin del sorgo DK-55 y en dos tipos de suelo. Tratamiento Altura de planta (cm) Peso de raz (g) 22.6 a 16.2 b 18.0 ab Arcilloso G. intraradices 44-37-00 Testigo 127 a 122 a 124 a 11.4 a 8.2 b 9.2 b 51.8 a 41.9 b 42.4 b 4984 a 4270 ab 3870 b Colonizacin micorrzica (%) Rendimiento (kg ha-1) 2457 a 2599 a 1887 b

Migajn arecillo-arenoso G. intraradices 44-37-00 Testigo 107 a* 99 a 102 a 63.8 a 40.0 b 52.1 ab

* Denota diferencias significativas (DMS, p<0.05).

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La fertilizacin qumica y la micorrizacin. Se realiz un estudio en condiciones de temporal, para determinar la influencia de la fertilizacin qumica en la efectividad de la inoculacin micorrzica del sorgo. Los tratamientos fueron con o sin la inoculacin de la semilla sorgo con G. intraradices, los cuales se compararon en un suelo fertilizado en presiembra con la adicin de 60 y 40 kg ha-1 de N y P, respectivamente (Montes y Aguirre, 1992) y otro sin fertilizar. Los resultados indicaron que la efectividad de la MVA tuvo una respuesta significativa, favorable y similar en las dos condiciones de evaluacin. El hongo micorrzico fue capaz de incrementar el peso volumtrico y el rendimiento de grano de sorgo en el rango de 4.9-5.2% y 22-23%, respectivamente (Figura 1). Estos resultados son coincidentes con los de Montao et al. (2001), quienes indicaron que la actividad de MVA en trigo no estuvo influenciada por el nivel de N adicionado. Estudios de Bressan et al. (2001) informaron que la respuesta del sorgo vara segn el nivel de P en el suelo, as como la cepa de MVA inoculada. Por el contrario, Johnson y Pfleger (1992) y Garza (2002), concluyeron que G. intraradices es insensible a la fertilizacin qumica; en particular, Garza (2002) determin que el endfito aument significativamente el contenido de P foliar en sorgo, an en suelos deficientes de P. El riego restringido y la micorrizacin. La escasez de agua para uso agropecuario en la regin ha trado consigo restricciones en las reas irrigadas, dentro de estas medidas esta la aplicacin de un riego de auxilio o riego restringido para los cultivos. Por lo que se realiz un estudio para conocer la influencia del riego restringido y la inoculacin micorrzica de la semilla de sorgo (Daz, 2003). La inoculacin de semilla con G. intraradices; fertilizacin qumica a razn de 120 y 40 kg ha-1 de N y P, respectivamente (Aguirre et al., 1992); y el testigo absoluto, se evaluaron en condicin de riego restringido (riego en floracin) y en temporal. La mayor altura de planta en riego restringido la registraron la inoculacin de MVA y la fertilizacin qumica, mientras que en temporal, la mayor altura fue semejante entre el simbionte y el testigo; al parecer la disminucin de la altura en las plantas con fertilizacin qumica en temporal, se debi a la competitividad de la humedad entre la planta y el fertilizante, ya que ste presenta caractersticas higroscpicas. Este mismo efecto impact negativamente en el rendimiento de grano en temporal. Por el contrario, la micorrizacin increment significativamente en rendimiento de grano, comparado con la fertilizacin qumica y el testigo, en las dos condiciones de humedad evaluadas (Figura 2). En maz, Sylvia et al. (1993) informaron que la respuesta a la inoculacin con G. etunicatum, fue proporcional en los tres gradientes de humedad en el suelo estudiados.

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Fertilizado (60-40-00) 3000 2500 2000 Kg/ha 1500 1000 500 0 G. intraradices G. intraradices Testigo Kg/ha Peso vol. No fertilizado
3000 2500 80

82 a a b 80 gr 78 76 74

a a b
78

Kg/ha

2000 1500 1000

gr
76 74

500 0 G. intraradices G. intraradices

b
72 Testigo

Figura 1. Influencia de la micorrizacin en el rendimiento de grano (kg/ha) y el peso volumtrico (gr) de sorgo con o sin la adicin de fertilizante qumico. Letras distintas denotan diferencia significativa (DMS, p<0.05).

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5000 4000 3000 Kg/ha 2000 1000 0

Riego restringido a

111 108

b a

b 105 102 b 99

cm

G. intraradices G. intraradices

120-40-00

Testigo

Kg/ha Alt. Planta 110 100

Temporal 4000 3000 Kg/ha 2000 1000 0 G. intraradices 120-40-00 Testigo

a c b b

a 90 80 70 60 cm

Figura 2. Rendimiento de grano de sorgo (kg/ha) y altura de planta (cm), asociados con la micorrizacin y la fertilizacin qumica en dos condiciones de humedad. Letras distintas denotan diferencia significativa (DMS, p<0.05).

C) Manejo de la semilla inoculada en sembradoras mecnicas En la inoculacin micorrzica, el sustrato modifica la caracterstica fsica de la semilla, por lo que algunos productores han observado obstruccin o atascamiento de la semilla principalmente en las sembradoras mecnicas tipo International 82, tradicionales en la regin, cuando no es calibrada con semilla inoculada. Este fenmeno ocasiona desuniformidad y reduccin en la densidad de siembra con respecto a la semilla no 16

inoculada y un consecuente decremento en el rendimiento. Por lo anterior, se realiz un estudio (Daz y Pecina, 2003) donde se utiliz la sembradora International 82. En sta se evaluaron tres factores: 1) dos tamaos de semilla; 2) el tiempo de la inoculacin (0, 12 y 24 h); y 3) platos de siembra con 24, 30 y 40 orificios. Se consider como densidad testigo u ptima el tirar un rango de 25-27 semillas m1 lineal (Montes y Aguirre, 1992). Los resultados revelaron que los tres factores estn involucrados en la obstruccin de la semilla. Con la semilla ms grande de sorgo se registr mayor obstruccin. La inoculacin implica el humedecimiento de la semilla, por lo que al paso del tiempo esta se hidrata y tiende a hincharse, lo cual provoca la obstruccin de la semilla. Cuando se siembra semilla recin inoculada o sin inocular, no hay obstruccin al paso de la semilla, mientras que en semilla de 12 y 24 h despus de inoculada, la densidad de siembra se reduce a 20.8 y 13.9 semillas m-1, respectivamente. Tambin se demostr que un mayor nmero de orificios en los platos de siembra facilita que la semilla fluya sin obstruccin en la sembradora. Se observ que platos con un mnimo de 30 orificios resultaron ptimos para obtener la densidad de siembra esperada. Por lo anterior, se concluy que para obtener el nmero deseado de semillas de sorgo por metro lineal, la calibracin de la sembradora debe hacerse con semilla inoculada. Adicionalmente y en las mismas sembradoras mecnicas, dada la friccin con el sustrato, el productor ha experimentado que los platos de plstico se desgastan prematuramente despus de sembrar 120-140 hectreas; aunque el reemplazo de los platos tiene un bajo costo (aprox. $5.00 ha-1 para sembradora de seis botes), representa una desventaja. Para evitar el desgaste, el productor puede adicionar una taza de talco agrcola (aprox. 80 g) en cada bote de la sembradora. D) Resultados de validacin Durante el periodo de 2000 al 2003, se establecieron parcelas de validacin en el norte de Tamaulipas, bajo diferente condicin de humedad, adems de que el hbrido y el manejo del cultivo fue a criterio del productor. En cada parcela se compar la inoculacin micorrzica de la semilla de sorgo con un testigo absoluto y en la mayora de los casos con la fertilizacin qumica utilizada por el productor. Los resultados indicaron que la micorrizacin del sorgo aument de manera consistente la produccin de grano en el rango de 18 a 36%, con relacin al testigo, y en los casos donde se compar la fertilizacin qumica, el simbionte tambin igual o super el rendimiento con esa prctica (Cuadro 4). La informacin generada de las parcelas de validacin, constatan los resultados de campo experimentales sealados anteriormente. Adems, representan un mayor incremento en el rendimiento de grano de sorgo comparado con el 15% registrado por Acosta et al. (2001) en la regin, mediante la inoculacin mixta de Azospirillum brasilense y G. intraradices. Con relacin a la fertilizacin qumica, Durn et al. (2001), coinciden al informar que el hbrido de maz H-512 inoculado con G. intraradices, produjo 12% de incremento sobre el tratamiento con fertilizacin qumica, el cual llev 138 y 46 kg ha-1 de N y P, respectivamente. El anlisis econmico de la produccin en funcin al rendimiento promedio de grano de sorgo, obtenido de las parcelas de validacin, tanto en condiciones de riego restringido como de temporal, determin que la inoculacin de la semilla con G. intraradices fue una prctica redituable en la produccin de sorgo. En condiciones de riego restringido, la micorriza aument la rentabilidad de la produccin en 22% (relacin

17

costo/beneficio 1.16) comparado con el testigo; en temporal, el incremento fue de 26%, con un costo/beneficio de 1.38 (Cuadro 5). Cuadro 4. Rendimiento de grano de sorgo (kg ha1) comparativo entre la inoculacin con G. intraradices, la fertilizacin qumica y el testigo absoluto en parcelas de validacin. No. de parcela Condicin de humedad Testigo Tratamiento Fertilizacin qumica 2000-2001 1 2 3 4 5 Temporal Temporal Temporal Temporal RR** 1887 3870 2370 4284 4200 2599 (44-37-00)* 4270 (44-37-00) 2460 (44-37-00) -4536 (140-40-00) 2001-2002 6 7 8 9 Temporal Temporal Temporal RR 1771 2143 2181 3249 -2256 (60-40-00) 1883 (120-40-00) 3455 (120-40-00) 2002-2003 10 RR 3750 3960 (80-00-00) --4500 2909 4100 20 36 26 2132 2762 2929 4056 20 28 34 24 2457 4984 3135 5070 5106 30 28 32 18 21 Incremento sobre el G. intraradices testigo (%)

11 Temporal 2127 12 Temporal 3250 * Dosis de fertilizacin (N-P-K). ** Riego restringido.

Impacto en la produccin sostenible Los resultados de los estudios y experiencias obtenidas en sorgo, con el manejo benfico de la endomicorriza en las condiciones semiridas de la regin norte de Tamaulipas, han influido para que esta prctica empiece a extenderse a otras regiones del 18

centro y sur del estado. Lo que demuestra el inters y el potencial de implementar esa tecnologa dentro de un esquema de produccin sostenible. Al respecto, Ferrara y Gonzlez (1997) indicaron que la importancia de los hongos MVA en la agricultura sostenible, est basada en la funcin de unir a la planta con el suelo, al servir como agente de transporte nutrimental entre las dos partes, por lo que tiene un impacto en la conservacin del suelo y es el nico camino para recuperar el componente biolgico de la sostenibilidad. Aqu se destaca la necesidad del uso de la tecnologa micorrzica para favorecer tanto la productividad agrcola como la conservacin del suelo. Cuadro 5. Anlisis de rentabilidad de la produccin de sorgo, con relacin al rendimiento promedio de grano (kg ha-1) de las parcelas de validacin, en condiciones de riego restringido y temporal (2000-2003). Concepto Testigo Riego restringido Costo ($ ha-1) Rendimiento (ton ha ) Precio ($ ton-1)** Ingreso bruto ($ ha-1) Ingreso neto ($ ha ) Relacin costo-beneficio
-1 -1

G. intraradices

5449 3733 1400 5226 -223 0.95 Temporal

5479* 4554 1400 6375 896 1.16

Costo ($ ha-1) Rendimiento (ton ha ) Precio ($ ton-1)** Ingreso bruto ($ ha ) Ingreso neto ($ ha ) Relacin costo-beneficio
-1 -1 -1

3387 2653 1400 3714 327 1.09

3417* 3386 1400 4740 1323 1.38

*Costo del sustrato micorrzico $30.00 ha-1. ** Precio objetivo asignado por ACERCA-SAGARPA en el 2004.

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Literatura citada
Abdel, F.G. and Mohamedin, A.H. 2000. Interactions between a vesicular-arbuscular mycorrhizal fungus (Glomus intraradices) and Streptomyces and their effects on sorghum plants. Biol. & Fertility Soils 32(5): 401-409. Acosta N., S., A. Daz F., A. Magallanes E. y M. Silva S. 2001. La inoculacin de Azospirillum brasilense y Glomus intraradices en la produccin comercial de sorgo. Memorias XXVIII Congreso Nacional de Fitopatologa. Resumen F-15. Aguirre R., J., H. Williams A. y R. Rodrguez H. 1992. La produccin de sorgo de riego para el norte de Tamaulipas. En: Manual de Cultivos del Norte de Tamaulipas. SARH, INIFAP, PIFSV. Pp: 45-53. Alarcn A., y R. Ferrara C. 2000. Biofertilizantes: Importancia y utilizacin en la agricultura. Agr. Tc. Mx. 26(2): 191-203. Alarcn A., y R. Ferrara C. 1999. Manejo de la micorriza arbuscular en sistemas de propagacin de plantas frutcolas. Terra. 17(3): 179-191. Alvarado C., M., A. Daz F. y J. Morales B. 2002. Efecto de la aplicacin de simbiontes en la produccin de okra y maz para elote. Memoria XXXI Congreso Nacional de la Ciencia del Suelo. Bressan, W., Siquiera, J.O., Vasconcellos, C.A., Purcino, A.A. 2001. Mycorrhizal fungi and phosphorus on growth, yield and nutrition of intercropped grain sorghum and soybean. Pesquisa Agrop. Brasileira 36(2): 315-323. Daz F., A. 2003. Inoculacin de sorgo con Glomus intraradices y Azospirillum brasilense en riego restringido y temporal. Memoria de Resmenes VII Simposio Internacional y II Congreso Nacional de Agricultura Sostenible. P. 35. Daz F., A. y V. Pecina Q. 2004. Manejo ptimo de semilla de sorgo inoculada con micorriza durante la siembra. INIFAP- Campo Experimental Ro Bravo. Publicacin Especial No. 28. Pp: 20-21. Daz F., A., E. Tavrez L. y J. Ramrez. 2002. Validacin del efecto de simbiontes en la produccin comercial de elote. Biotam 13(2): (en impresin). Daz M., 2002. Influencia de la biofertilizacin en las caractersticas de planta, de grano e infeccin micorrzica del sorgo (Sorghum bicolor), en dos condiciones edficas. Tesis Lic. UAMRA, UAT. Durn A., M. 1992. Suelos. En: Hess M., L. y D. Prez D. (eds.). Manual de Cultivos del Norte de Tamaulipas. SARH-Patronato para la Investigacin, Fomento y Sanidad Vegetal. Pp: 1116. Durn P., A., J. Aguirre M., G. Gonzlez Cu., M. Pea R., y E. Schonhoven. 2001. Produccin in vivo de micorriza arbuscular Glomus intraradix con Brachiaria bryzantha como hospedero en camas reproductoras. INIFAP-Campo Experimental Cotaxtla. Folleto Tcnico 29. 28 p. Ferrara C., R. y M. C. Gonzlez C. 1997. La biotecnologa micorrzica en la produccin agrcola, frutcola y hortcola. En: Ruiz H., J., D. Guzmn y J. Pea C (eds.). Perspectivas de la Microbiologa en Mxico. IPN. P. 325-343. Garza C., I. 2002. Evaluacin de biofertilizantes en el cultivo de sorgo, como un recurso natural sostenible. Tesis MC. UAMRA, UAT. Garza C., I, A. Daz F., A. Ramrez L. e I. Machuca O. 2003. Validacin de Glomus intrardices y brassinoesteroides en la productividad de sorgo. Memoria de Resmenes VII Simposio Internacional y II Congreso Nacional de Agricultura Sostenible. P. 120.

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Gonzlez Ch., M. 2002. Produccin y control de calidad de inoculantes de hongos micorrzicos arbusculares. En: Prez M., J., J. Alvarado L. y R. Ferrara C. Produccin y Control de Calidad de Inoculantes Agrcolas y Forestales. Comit Mexicano de Inoculantes Agrcolas y Forestales. Pp. 36-46. Gonzlez S., D., G. Tsuzuki R. y R. Ramrez G. 2002. Efecto de la inoculacin de Azospirillum y hongos micorrzico arbusculares en el crecimiento de Lycopersicon esculentum. En: Prez M., J., J. Alvarado L. y R. Ferrara C. Produccin y Control de Calidad de Inoculantes Agrcolas y Forestales. Comit Mexicano de Inoculantes Agrcolas y Forestales. Pp. 100101. Irizar G., M., Vargas P., Garza D., Tut C., Rojas M., Trujillo A., Garca R., Aguirre D., Martnez J., Alvarado S., Grageda O., Valero J. y Aguirre J. 2003. Respuesta de cultivos agrcolas a los biofertilizantes en la regin central de Mxico. Agr. Tc. Mx. 29(2): 213-225. Johnson, C.N. and Pfleger, F.L. 1992. Vesicular-arbuscular micorrhizae and cultural stresses. In: Bethlenfalvay, G.J. and Linderman, R. G. Micorrhizae in Sustainable Agriculture. ASA Special Publication No. 54. Pp: 71-99. Magallanes E., A. y A. Daz F. 2002. Eficiencia de micorriza arbuscular y hormona esteroidal en la produccin de sorgo. Memoria XXXI Congreso Nacional de la Ciencia del Suelo. Montao A., N., Quiroz G. y Cruz, F., G. 2001. Colonizacin micorrzica arbuscular y fertilizacin mineral de genotipos de maz y trigo cultivados en un andisol. Terra 19(4): 337-344. Montes G., N. y J. Aguirre R. 1992. La produccin de sorgo de temporal en el norte de Tamaulipas. En: Manual de Cultivos del Norte de Tamaulipas. SARH-Patronato para la Investigacin, Fomento y Sanidad Vegetal. Pp: 54-63. Morton, B.J. 2002. Glomus intraradices (reference accession UT126). http://invam.caf.wvu.edu. Salinas G., J. 2002. Labranza de conservacin de suelo y agua en el norte de Tamaulipas. INIFAPCampo Experimental Ro Bravo. Publicacin Especial 25. Pp: 9-10. Smith, S.E. and Gianinazzi V. 1988. Physiological interactions between symbionts in vesiculararbuscular mycorrhizal plants. Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 39: 221-224. Sylvia, D.M. 1999. Fundamentals and applications of arbuscular mycorrhizae: A biofertilizer perspective. In: Siqueira, J.O. and Moreira F.M. Soil Fertility, Soil Biology, and Plant Nutrition Interrelationships. Sociedade Brasileira de Ciencia do Solo. Pp: 705-723. Sylvia, D.M., Hammond, L.C., Bennett, J.M., Hass, J.H., Linda, S.B. 1993. Field response of maize to a VAM fungus and water management. Agron. Jour. 85(2): 193-198. Sylvia, D.M. 2004. Overview of mycorrhizal symbioses. http://ifas.ufl.edu/mycorrhiza.htm. Sylvia, D.M., Wilson D.O., Graham, J.H., Madox, J.J., Millner, P., Morton J.B., Skipper, H.D., Wright, S.F., Jarstfer, A.G. 1993. Evaluation of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi in diverse plants and soils. Soil Biology & Biochemistry 25(6): 705-713

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BIOFERTILIZACION BACTERIANA DEL PASTO BUFFEL

Loredo Osti C.1, Espinosa V. D.2, Ferrera-Cerrato R.2, Castellanos R. J.3 y Prez J. J.4
1

C. Exp. San Luis del INIFAP (loredo.catarina@inifap.gob.mx); 2 Programa en Edafologa del Colegio de Postgraduados; 3 C. Exp. Bajo-INIFAP; 4 Programa en Ganadera del Colegio de Postgraduados

INTRODUCCIN El pasto Buffel (Cenchrus ciliaris L.) es la gramnea ms difundida en las resiembras de pastizales de zonas ridas y semiridas en Mxico (Alcal, 1995). Este pasto representa una opcin para incrementar la produccin de forraje en los agostaderos y en las tierras agrcolas marginales, de acuerdo a estudios realizados por el Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrcolas y Pecuarias (INIFAP) en San Luis Potos; su establecimiento ha sido validado con xito en el Proyecto Estatal de Reconversin Productiva (Beltrn y Loredo, 2002). Los principales problemas que enfrenta la siembra del pasto buffel en condiciones de temporal, son la escasa precipitacin y la baja fertilidad del suelo. A este respecto, el pasto demanda altas cantidades de nitrgeno durante su ciclo y existen evidencias favorables acerca de la respuesta que presenta a la fertilizacin nitrogenada (Gonzlez et al., 1990). No obstante, solamente se han reportado resultados exitosos con esta prctica, cuando la precipitacin anual es superior a 350 milmetros, lo que limita el uso de fertilizantes qumicos en zonas de escasa precipitacin. Adems, en esas zonas los productores enfrentan fuertes restricciones de capital y no pueden invertir en la aplicacin de fertilizantes nitrogenados orgnicos o inorgnicos. En las ltimas dcadas se han realizado diversas investigaciones que destacan la importancia de las bacterias de la rizosfera. Muchas de ellas estimulan el crecimiento de gramneas como caa de azcar, trigo, cebada, sorgo, maz y pastos tropicales. Los mecanismos de accin de las bacterias promotoras del crecimiento vegetal (BPCV) son variados e incluyen la fijacin biolgica de nitrgeno atmosfrico (Dbereiner et al., 1995), produccin de sustancias reguladoras del crecimiento (Arshad y Frankenberger, 1998), solubilizacin de minerales y nutrimentos (Crowley et al., 1991), incremento en el volumen de la raz (Bowen y Rovira, 1999), induccin de resistencia sistmica a patgenos (van Peer et al., 1991), inhibicin del crecimiento de organismos antagnicos (Utkhede et al., 1999) e interaccin sinrgica con otros microorganismos (Bashan et al., 1996). La informacin sobre el uso de BPCV en el establecimiento del pasto buffel en zonas ridas y semiridas es escasa. Tampoco hay estudios que indiquen cuales rizobacterias se asocian en forma natural a esta gramnea en condiciones de aridez. Sin embargo, la inoculacin del pasto buffel con BPCV, podra tener un impacto significativo en su establecimiento y produccin, dado el efecto favorable que se ha obtenido en otras gramneas. Adems, puede ser una opcin accesible a los productores de esas zonas, debido a su bajo costo, comparado con la fertilizacin qumica. Por lo anterior, se considera importante investigar el efecto de las BPCV en el establecimiento y produccin del pasto buffel en condiciones de temporal deficiente. Los objetivos de esta investigacin fueron:

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 Estimar el efecto rizosfrico del pasto buffel sobre las poblaciones de bacterias, hongos y actinomicetos. Evaluar y caracterizar bacterias fijadoras de nitrgeno atmosfrico (BFN) de la raz del pasto buffel, creciendo en condiciones de temporal deficiente. Determinar el efecto de la biofertilizacin con bacterias promotoras del crecimiento vegetal, sobre el desarrollo del pasto buffel y sobre su nutricin nitrogenada.

MATERIALES Y MTODOS Efecto rizosfrico del pasto buffel En el Campo Experimental San Luis del Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrcolas y Pecuarias (INIFAP) (precipitacin media anual: 240 mm, msnm: 1870, suelo franco-arenoso con densidad aparente: 1.2 g cm-3, C.E: 0.8 mmhos cm-1 y pH: 7.5), se obtuvieron veinte muestras de suelo y raz de pasto buffel. Se estimaron las poblaciones de microorganismos en el suelo libre de races (SLR), suelo rizosfrico (SR) y rizoplano (R), mediante la siembra en placa, de acuerdo a lo descrito por Zuberer (1994). Los medios de cultivo utilizados fueron agar nutritivo, Rennie, Papa Dextrosa Agar + Rosa de Bengala y Czapek, para bacterias totales, bacterias diazotrficas, hongos y actinomicetos respectivamente. Los cultivos se incubaron a 28oC. A los tres das se cuantificaron las unidades formadoras colonias (ufc) de bacterias y hongos y a los 10 das las ufc de actinomicetos. Para estimar el efecto rizosfrico, se obtuvo la relacin R/S (Barea y Azcn-Aguilar, 1982), considerando las ufc del R sobre SLR, as como las ufc del SR sobre SLR. Se realizaron anlisis de varianza bajo un diseo Completamente al Azar y pruebas de medias Tukey (=0.05). Evaluacin y caracterizacin de las poblaciones de bacterias de la raz del pasto buffel en el Altiplano Potosino En tres sitios del Altiplano Potosino localizados en los municipios de Villa Hidalgo, Villa de Reyes y Soledad de Graciano Snchez, S.L.P., se colectaron veinte plantas de pasto buffel con raz completa. En el laboratorio, se separ la raz de la parte area, se lav con agua corriente y se enjuag con agua destilada estril. Se pesaron por duplicado 10 g de raz. Los primeros 10 g fueron empleados para determinar materia seca (secado en horno a 65C, durante 48 h). En condiciones de asepsia, con los 10 g restantes, se prepararon diluciones (10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5 y 10-6), de acuerdo al procedimiento descrito por Zuberer (1994). De las diluciones 10-4, 10-5 y 10-6, se tom una alcuota de 0.1 ml y se verti sobre placas con medio de cultivo. Por cada dilucin se prepararon tres repeticiones. Los medios de cultivo utilizados fueron: medio de carbono combinado, libre de nitrgeno o medio Rennie (Rennie, 1981) medio para Azotobacter y Derxia (Kole et al., 1988), y medio para Pseudomonas (Holgun et al., 1996). Los cultivos se incubaron a 28oC. A los tres das se estimaron las poblaciones de bacterias (ufc g-1 de materia seca de raz). Se realizaron anlisis de varianza bajo un diseo factorial 3x4 completamente al azar y pruebas de medias (Tukey; =0.05). Con este procedimiento se obtuvieron 72 cepas. Para describir la morfologa colonial, cada cepa se resembr por triplicado en agar nutritivo, se incub a 28oC durante siete das; desde el primer da se llevaron registros para 23

conocer la velocidad de crecimiento. Una vez que el cultivo se desarroll, se describi considerando dimetro, color, consistencia, forma, elevacin y borde (Seeley y vanDemark, 1972; Carpenter, 1977). Para caracterizar morfologa microscpica, se realiz la tincin de Gram y frotis de cultivo fresco, observando las preparaciones en el microscopio (100x). Se evalu la produccin de indoles, mediante la prueba SIM (sulfuroindol-movilidad) (UASLP, 1995). Se estim la capacidad para fijar N2 con la prueba de reduccin de acetileno (C2H2) (Weaver y Danso, 1994). Para ello, una muestra de cada cultivo se sembr por triplicado en tubos que contenan medio semislido libre de N. Se incub a 28oC durante 24 h; enseguida se reemplaz el 10% del volumen de aire interno de cada tubo con C2H2 y nuevamente se incub por 24 h. Se extrajeron 5 ml de gas, que fueron depositados en tubos vacutainer al vaco de 5 ml; de ah se tom una muestra de 0.5 ml de gas la cual fue inyectada a un cromatgrafo de gases, equipado con un detector de conductividad trmica y un detector de ionizacin de flama. Los resultados se analizaron bajo un diseo completamente al azar con tres repeticiones, utilizando el procedimiento ANOVA del Statical Analysis System (SAS, 1989); cuando se encontraron diferencias estadsticas entre tratamientos se realizaron pruebas de comparacin de medias (Tukey, 0,05). Efecto de la inoculacin sobre el desarrollo y nutricin nitrogenada del pasto buffel El experimento se realiz en un invernadero del C. E. San Luis del INIFAP con temperatura promedio de 25oC. Los factores de prueba fueron dos: la inoculacin con cepas diazotrficas seleccionadas en la etapa anterior (1R2, 2CE3, 3R1 y testigo sin inocular) y dos niveles de fertilizacin (solucin nutritiva completa y solucin nutritiva sin nitrgeno). El inculo con concentracin de 1x107 clulas ml-1 de acuerdo a la escala de McFarland, se aplic a la base de la planta, el da del trasplante del pasto a macetas de polietileno negro de 22x12 cm, con 1.0 kg de arena de ro estril, cribada en tamiz de 2.0 mm de abertura. La solucin nutritiva se prepar con el procedimiento descrito por Snchez et al., (2001) y se aplic manteniendo la humedad por encima del 40% de humedad aprovechable. Se evalu altura de planta, nmero y dimetro de tallos, produccin de biomasa area, volumen de raz y biomasa radical, en muestreos destructivos realizados a los 15, 25, 32, 40, 68 y 82 das despus del trasplante. Para el anlisis estadstico se utiliz el procedimiento ANOVA del Sistema SAS, en un diseo completamente al azar, con arreglo factorial 4x2x6 (cepa x nitrgeno x fecha de evaluacin CxNxF). Para estimar el contenido de N, se utiliz un medidor porttil SPAD-502, cuyas lecturas tuvieron una correlacin alta con la concentracin de N (Loredo, 2004). La medicin de las unidades SPAD se hizo en la parte media de la hoja recientemente madura, localizada dos hojas abajo de la hoja bandera, durante seis evaluaciones (a los 15, 25, 32, 40, 68 y 81 das despus del trasplante). A las lecturas de unidades SPAD obtenidas de esta forma, se les aplic un modelo obtenido previamente (Loredo, 2004). Se utiliz un diseo factorial 4x2x6: (CxNxF; C = tres cepas y un testigo, N = con o sin nitrgeno y F = seis fechas de muestreo); se tuvieron cinco repeticiones y se realizaron pruebas de medias (Tukey; =0.05).

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RESULTADOS Y DISCUSIN Efecto rizosfrico del pasto buffel Se encontraron diferencias altamente significativas en todos los grupos microbianos para el nivel de poblaciones estimado. El rizoplano present el mayor nmero de poblaciones de microorganismos (con excepcin de las poblaciones de hongos), seguido del suelo rizosfrico (Cuadro 1). El de menor poblacin de microorganismos fue el suelo libre de races. Estos resultados indican que la poblacin de microorganismos si vara en funcin de la zona rizosfrica, lo cual concuerda con lo expresado por Ferrera-Cerrato (1995), quien seala que en la rizsfera existe un flujo de compuestos orgnicos producto de la fotosntesis, que son exudados por la raz, lo cual hace de este sitio una zona ideal para el crecimiento de microorganismos. Cuadro 1. Poblaciones microbianas en la rizosfera de pasto buffel. Unidades formadoras de colonias por gramo de suelo Hongos Actinomicetos Bacterias BFN Zona rizosfrica x102 x105 x105 x105 R 0.00 b 6.18 a 29.14 a 113.05 a SR 28.28 a 3.85 b 16.97 a 19.23 b S 6.20 b 2.96 b 2.41 b 1.38 b
R: Rizoplano; SR: Suelo rizosfrico; S: Suelo libre de races Valores con la misma literal entre filas no difieren estadsticamente; Tukey (=0.05).

Las diferencias entre las poblaciones de actinomicetos no fueron tan acentuadas; no se observ diferencia en el nivel de poblaciones entre el suelo rizosfrico y suelo sin races. El grupo de microorganismos ms numeroso fue el de las bacterias fijadoras de nitrgeno, incluso mayor que el de bacterias totales. Esto puede deberse a que el medio utilizado para evaluar bacterias totales no sea el ms conveniente, ya que de acuerdo a Buckman y Brady (1977), no todos los microorganismos crecen de igual forma en los medios de cultivo utilizados en el laboratorio, debido a que ciertas especies pueden vivir muy bien en el suelo y crecer precariamente en cualquiera de los medios utilizados. Cualquier modificacin de la humedad, la materia orgnica o el pH del suelo, puede influir para cambiar los clculos de 10 a 100 veces (Alexander, 1994) y uno de los factores de mayor influencia es el pH (Forster, 1995; Gregory y Hinsinger, 1999). Evaluacin de las poblaciones de bacterias de la raz del pasto buffel en el Altiplano Potosino Las poblaciones bacterianas en la raz del pasto buffel variaron de 6.3 x 106 a 1.26 x 10 ufc g-1 raz. Resultados similares fueron reportados por Malik et al., (1997) en pasto Kallar. Se encontraron diferencias estadsticas (=0.01), debidas al efecto del sitio de muestreo, medio de cultivo y a la interaccin de ambos factores (Cuadro 2).
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Cuadro 2. Poblaciones de bacterias de la raz del pasto buffel aisladas en tres sitios del Altiplano Potosino Medio de cultivo Poblaciones bacterianas (ufc x 106 g-1) Villa de Reyes Soledad de G. Snchez Villa Hidalgo 22.06 c 6.80 a 125.70 a Azotobacter 35.71 ab 7.30 a 121.97 a Derxia Rennie 40.48 a 7.81 a 108.94 a 25.40 bc 6.29 a 31.66 b Pseudomonas = 0.05 = 0.05 Caractersticas de = 0.05 la Prueba de CME = 16.078 CME = 0.6801 CME = 182.69 Medias (Tukey) DMS = 10.484 DMS = 2.1563 DMS = 35.34
Valores con la misma letra entre filas no difieren estadsticamente (Tukey, 0.05)

En Villa Hidalgo se encontr el mayor nmero de poblaciones, ah el pasto se encuentra establecido en un terreno que anteriormente se cultiv con maz y la vegetacin nativa corresponde a un mezquital. En Villa de Reyes el pasto se obtuvo en un agostadero, donde se removi la tierra para favorecer el establecimiento del pasto. El nivel de bacterias ms bajo fue el obtenido en Soledad de Graciano Snchez, con 7 ufc x 106 g-1 de raz. En este sitio el pasto se encuentra en un rea que antes estuvo ocupada por gobernadora (Larrea tridentata) y la vegetacin tipo, es matorral inerme parvifolio. En relacin a los medios de cultivo, el medio Rennie fue el ms eficiente para el aislamiento de BFN, seguido del medio para Derxia. La raz del pasto buffel en condiciones de temporal deficiente, si presenta condiciones favorables para el crecimiento de bacterias con potencial para fijar nitrgeno atmosfrico. La mayora de los aislamientos presentaron bordes enteros; la forma dominante fue la circular, seguida de las puntiformes, con diferentes elevaciones, convexa y pulvinada. La mayora de las colonias fueron brillantes, translcidas, con textura de suave a mucosa. El dimetro vari de 0.3 a 8 mm. En morfologa microscpica, la forma dominante fueron los bacilos cortos, ligeramente curvos; algunas presentaron presencia de grnulos y la longitud y grosor vari entre cepas. Se observaron tambin cocobacilos con extremos redondeados; dos cepas fueron identificadas como actinomicetos y otras dos tuvieron forma de espirilos largos. El 77% de las cepas fueron Gram negativas, 14% Gram positivas y 9% Gram variable. La mayora de las clulas presentaron movilidad. La cepa 3R5 fue positiva para la produccin de indoles. La fijacin de N2 present diferencias estadsticas ( = 0.01) debidas al efecto la cepa, obteniendo respuesta positiva en 36 cepas. La mejor cepa fue la 1R2 (55.19nmol cm-3 da-1 de etileno). Se identificaron como sobresalientes las cepas 1R2, 2CE3, PR6, 3R6, PCE1, 2VH4, 3R1, 3R2, 2CE2, 3VH12, 2CE1, 3VH5 y PCE3, las cuales pueden ser incluidas en futuros estudios agronmicos. Efecto de la inoculacin sobre el desarrollo y nutricin nitrogenada del pasto buffel En relacin a la nutricin nitrogenada, se encontraron diferencias estadsticas significativas entre tratamientos, debidas a los efectos de los factores C y N, a la interaccin CxN, as como a las interacciones C x fecha de muestreo y N por fecha de muestreo. Es decir, que el contenido de N en la planta, fue afectado por la fertilizacin con N y por la inoculacin bacteriana, que existi interaccin entre estos dos factores y que este efecto fue diferente de acuerdo al estado de desarrollo de la planta (Cuadro 3). 26

En trminos generales, los tratamientos que no recibieron N en la solucin nutritiva y que fueron inoculados con las cepas 1R2 y 2CE3, superaron ampliamente al testigo sin inocular. La concentracin de N en plantas inoculadas, obtenido va fijacin de N2, lleg a representar hasta un 47% ms, del total del N contenido en las plantas sin inocular. Los resultados indican que la inoculacin bacteriana favoreci el desarrollo del pasto buffel (p<0.01). En altura de planta, los tratamientos sin N, presentaron diferencias entre medias; la mejor cepa fue la 1R2 (57.66 cm), seguida de 2CE3 (44.33 cm) y 3R1 (41.66 cm) comparadas con el testigo sin inocular (29 cm). En las plantas fertilizadas con N, la altura vari de 82 a 90 cm, sin diferencia entre medias. En produccin de biomasa area, el peso promedio (g MS planta-1) al momento del trasplante fue de 0.13 g. Cuadro 3. Concentracin de N total (%), estimado con Unidades SPAD en pasto buffel inoculado con tres cepas de bacterias diazotrficas Concentracin de N (%) Tratamiento Das despus del trasplante N Cepa 15 32 68 81 T 2.2 a 2.1 a 2.9 a 2.7 ab Solucin 3R1 2.1 ab 2.2 a 2.8 a 2.4 b completa 1R2 1.9 bc 2.3 a 2.9 a 2.6 b 2CE3 1.9 abc 2.4 a 3.1 a 2.9 a T 1.7 c 1.4 b 0.7 d 0.5 d Solucin sin 3R1 2.0 ab 1.5 b 0.9 dc 0.8 d N 1R2 2.1 ab 1.6 b 1.1 c 1.1 c 2CE3 2.1 ab 1.6 b 1.4 b 1.2 c Significancia Factor N NS ** ** ** Factor C NS ** ** ** N*C ** NS ** **
Medias con la misma literal entre filas, no son significativamente diferentes (Tukey =0.05). NS = No significativo; (**) = Altamente significativo.

De acuerdo al ANVA para esta variable, se encontraron diferencias estadsticas entre tratamientos (=0.01), debidas a los efectos del Factor N y del Factor C, as como al efecto de la interaccin N x fecha de evaluacin. Esto indica que la produccin de materia seca durante el desarrollo del pasto buffel, fue afectada por la fertilizacin nitrogenada y por la inoculacin bacteriana, que estos efectos son independientes entre s, y que el efecto de la fertilizacin con nitrgeno es diferente conforme la planta se desarrolla. El testigo sin inocular present los valores ms bajos de produccin de biomasa area, a excepcin del primer corte, en donde el tratamiento inoculado con la cepa 3R1 y fertilizado con solucin completa, fue el tratamiento ms bajo con slo 0.15 g planta-1 (Figura 1). La produccin final de materia seca en las plantas fertilizadas con N fue de 9.40, sin diferencia estadstica entre medias debidas a C. Los tratamientos sin N, presentaron diferencias estadsticas entre medias debidas a C (Tukey = 0.05); la mejor cepa fue la 1R2 (2.9g), seguida de 2CE3 (2.8 g) y 3R1 (2.1 g) y el testigo (1.9 g). En el desarrollo de la raz, se encontraron diferencias entre tratamientos (=0.01), debidas a los efectos de C, N y a la interaccin N x F, es decir, que la produccin de biomasa radical, es afectada por la fertilizacin con N y por la inoculacin, sin embargo, estos efectos son independientes entre s. El tratamiento inoculado con la cepa 2CE3 y regado con solucin completa, provoc hasta un 57% de incremento en la biomasa radical en la fase de desarrollo y un 27

15% en la fase final. La prueba de medias (Tukey, =0.05), identific a este tratamiento como el mejor.

140 120 100 80 60 40 20 0 -20 -40 -60 0

% de incremento en rendimiento

2CE 3

3R 1

1R 2

20

40 Das despus del trasplante

60

80

140 % de incremento en rendimiento 120 100 80 60 40 20 0 -20 -40 -60 0 20 40 Das despus del trasplante 60 80 1R2 3R1 2CE3

Figura 1. Incremento (%) en rendimiento de pasto buffel inoculado con tres cepas diazotrficas (3R1, 1R2 y 2CE3) en relacin con el testigo sin inocular. (a). Tratamientos con solucin nutritiva completa; (b) Tratamientos con solucin nutritiva sin nitrgeno

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CONCLUSIONES
La rizosfera del pasto buffel tiene un efecto favorable para el crecimiento de los microorganismos. El efecto rizosfrico es ms evidente en las poblaciones de bacterias fijadoras de N2 y menos notorio en las poblaciones de actinomicetos y hongos. La inoculacin con bacterias diazotrficas incrementa la concentracin de N en la planta del pasto buffel, cuando las condiciones de N mineral son muy deficientes. Si la planta tiene cubiertos los requerimientos de N, el efecto de la inoculacin no es evidente sobre la concentracin de N. La inoculacin bacteriana favorece el desarrollo areo del pasto buffel en condiciones de deficiencia de N, sin embargo en la raz el crecimiento es favorecido independientemente de la condicin de N en el sustrato.

LITERATURA CITADA
Alcal, G. C. H. 1995. Origen geogrfico y caractersticas biolgicas del pasto buffel. pp 9-14. In: Gua para el establecimiento, manejo y utilizacin del zacate buffel. Patronato del Centro de Investigaciones Pecuarias del Estado de Sonora A. C. Hermosillo, Son. Mxico. Arshad, M. and W. T. Frankenberger Jr. 1998. Plant growth-regulating substances in the rhizosphere: Microbial production and functions. Advances in Agronomy 62: 45-151. Barea J. M. y Azcn-Aguilar C. 1982. La Rizosfera: Interacciones microbio-planta. Anales de Edafologa y Agrobiologa. XI.I (7-8): 1517-1532. Bashan, Y., Holgun G. y Ferrera-Cerrato R. 1996. Interacciones entre plantas y microorganismos benficos. II. Bacterias asociativas de la rizosfera. Terra 14 (2) 195-210. Beltrn, L. S. y Loredo, O. C. 2002. Reconversin de reas agrcolas marginales a praderas de pasto buffel. Pub. No. 36. SAGAR-INIFAP-Campo Experimental Palma de la Cruz. 16 p. Bowen G. D. y Rovira A. D. 1999. The Rhizosphere and Its Management to Improve Plant Growth. Advances in Agronomy V 66: 1-102. Carpenter, P. L. 1977. Microbiology. W.B. Sounders Company. Philadelphia. E.U.A. Crowley, D.E., Wang Y. C., Reid C.P.P. and Szaniszlo P.J. 1991. Mechanisms of iron acquisition from siderophores by microorganisms and plants. Plant and Soil 130: 179-198. Dbereiner, J., Urquiaga S., Boddey R.M. and Ahmad N. 1995. Alternatives for nitrogen of crops in tropical agriculture. Nitrogen economy in tropical soil. Fertilizer Research 42:339-346. Ferrera-Cerrato R. 1995. Efecto de Rizosfera. En: Ferrera-Cerrato R. y Prez M.,J. Editores. Agromicrobiologa, elemento til en la agricultura sustentable. Colegio de Postgraduados en Ciencias Agrcolas, Montecillo, Estado de Mxico. p 36-53. Gonzlez, A., Eguiarte, S. A. y Rodrguez R. P. 1990. Respuesta productiva durante cinco aos de fertilizacin al zacate buffel. En: Resmenes de las Memorias del VI Congreso Nacional sobre Manejo de Pastizales. Monterrey, N.L. p 20. Holgun, G., Bashan Y., y Ferrera-Cerrato R. 1996. Interacciones entre plantas y microorganismos benficos. III. Procedimientos para el aislamiento y caracterizacin de hongos micorrzicos y rizobacterias promotoras del crecimiento en plantas. Terra 14 (2) 211-224. Kole, M. M., Page, W. J. and Altosaar. 1988. Distribution of Azotobacter in Eastern Canadian soils and in association with plant rhizospheres. Canadian Journal of Microbiology 34:815-817

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Loredo O. C. 2004. Biofertilizacin bacteriana del pasto buffel en el Altiplano Potosino. Tesis de Doctorado. Colegio de Postgraduados. Malik, K. A., R, Bilal, S. Mehnaz, G. Rasul, M.S. Mirza and S. Ali. 1997. Association of nitrogenfixing, plant-growth-promoting rhizobacteria (PGPR) with kallar grass and rice. Plant and Soil 194:37-44. Rennie, R.J. 1981. A single medium for isolation of acetylene reduction (dinitrogenfixing) bacteria from soil. Can. J. Microbiol. 27:8-14.Rennie, 1981 Snchez, G.P., L. I. Trejo T., y L. Fernndez P. 2001. Manual de prcticas de nutricin vegetal. EDA-651. Colegio de Postgraduados. Especialidad de Edafologa. rea de nutricin vegetal. 32 p. SAS, 1989. SAS/STAT Users Guide. Release 6.12 ed. Statistical Analysis System Institute, Inc., Cary, N.C. Seeley, H. W. and P.J. VanDemark. 1972. Microbes in Action. A laboratory manual of microbiology. Ed. Freeman and Company. p 11-20 Utkhede, R. S., Koch C.A. and Menzies J.G. 1999. Rhizobacterial growth and yield promotion of cucumber plants inoculated with Pythium aphanidermatum. Can. J. Plant Pathol. 21: 265271. Van Peer, R., Niemann, G. J. and Schippers, B. 1991. Induced resistance and phytoalexin accumulation in biological control of Fusarium wilt of carnation by Pseudomonas sp. strain WCS417r. Phytopathology 81:728-734. Weaver, R. W. and S. K.A. Danso. 1994. Dinitrogen fixation. In: Methods of Soil Analysis. Part 2. Microbiological and Biochemical Properties. Soil Science Society of America, Inc. p 10191043. Zuberer D. A. 1994. Recovery and Enumeration of Viable Bacteria. In: Methods of Soil Analysis. Part 2. Microbiological and Biochemical Properties. P 119-144

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BIOFERTILIZANTES: MICORRIZAS Y BACTERIAS PROMOTORAS DE CRECIMIENTO

Vctor Olalde Portugal y Rosalinda Serratos CINVESTAV, Unidad Irapuato. Irapuato, Mxico. La produccin agrcola requiere de una gran cantidad de agroqumicos generalmente derivados del petroleo. En muchas de las ocasiones son contaminantes del ambiente y/o pueden generar daos a la salud de los animales incluido el hombre. Ejemplo de ello, es la fertilizacin con nitrgeno, el cual, no es aprovechado por la planta, algunos autores indican que en el mejor de los casos se aprovecha el 44%. El resto se puede lixiviar, volatilizar o realizar transformaciones que pueden dar origen a compuestos contaminantes, como las nitrosaminas. Estas nitrosaminas pueden originar cancer. Por otra parte, para el control de enfermedades se requiere de la aplicacin de pesticidas, dentro de estos los funguicidas son de los ms utilizados. Muchos de ellos, generan alteraciones muy graves al hombre. Existen alternativas para reducir los riesgos sin menos cabo de la productividad, stas en parte pueden ser utilizar microorganismos. Considerando que los microorganismos son los grandes actores del suelo y que pueden sustentar el desarrollo saludable de las plantas. Los microorganismos realizan diferentes reacciones qumicas, mineralizacin, inmovilizacin, oxidaciones, reducciones, fijaciones de algunos gases como nitrgeno, volatilizacin, solubilizacin etc. Estas reacciones finalmente se reflejan en las siguientes acciones; formacin de humus, degradacin de materia orgnica, control microbiano, fijar nitrgeno, etc. En esta ocasin me referir a las micorrizas y al control biolgico. De entre las diversas asociaciones mutualistas planta-microorganismo, la micorrcica es, con diferencia, la que se encuentra ms ampliamente extendida sobre la superficie terrestre (alrededor del 90% de las plantas terrestres descritas la forman, Smith y Read, 1997) y sin duda la ms antigua (400 millones de aos, Simon et al. 1993, Taylor et al., 1995). Existen diferentes tipos de micorrizas, sin embargo en esta ocasin describiremos a la arbuscular debido a su importancia en la agricultura. Las micorrizas arbusculares (MA), ocurren de manera natural en la gran mayora de las angiospermas, entre las que se incluyen plantas de alto inters agrcola, hortcola y de zonas templadas y tropicales (Smith y Read, 1997). En contraste con la enorme diversidad de las plantas husped potenciales, los hongos formadores de MA (HMF) se reducen a pocas familias y no mas de 130 especies (Walker, 1992). El ciclo de vida de los HMA se inicia con la germinacin en el suelo de sus propgulos o esporas, que desarrollan las conocidas como hifas o tubos de germinacin. Estas hifas germinativas crecen al azar en busca de una raz susceptible de ser colonizada. Las plantas durante su desarrollo estn expuestas a diferentes factores que influyen sobre su fisiologa. La planta ante estos factores realiza una serie de ajustes para tratar de mantener su salud y funcionalidad. Entre ellas la apertura de los estomas es de las mas

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activas y rpidas de las respuestas. Estas respuestas dependen del tipo de planta, de las condiciones en que se desarrollan etc. Por otra parte, se sabe que la mayora de las plantas se asocian con algunos hongos benficos. Estos hongos se ha mencionado le ayudaron a las plantas a invadir la tierra, lo que les permiti adaptarse y sobrevivir a la adversidad de las condiciones de esa poca. Se ha demostrado que las plantas que se encuentran en condiciones de estrs se logran desarrollar mejor cuando tienen micorriza. Las plantas que se encuentran creciendo en suelos deficientes en fsforo soluble, su gran mayora lo hace debido a su capacidad de asociarse a estos hongos. Se ha demostrado que plantas de jitomate y chile creciendo en 22 ppm de fsforo pero que presentan micorriza son del mismo vigor y contenido de fsforo que las plantas que crecen en 44 ppm de fsforo y que no tienen micorriza (Salas-Galvn, 2000.). Sin embargo, la fisiologa de las plantas de jitomate parece ser diferente, ya que las plantas con micorriza presentaron ms altas tasas fotosintticas. Tambin ajustan el metabolismo fotosinttico de tal suerte que las plantas con micorriza toleran mas los incrementos de temperatura, y por lo tanto reducen la fotorespiracin ( Luna y col, 2003). Como se mencion anteriormente, las plantas con micorriza pueden alterar la apertura de los estomas. Por lo que, otro beneficio de las plantas con micorriza es su capacidad para mejorar sus relaciones hdricas, por lo que hemos podido reducir un riego en trigo reduciendo adicionalmente el fsforo. Esta mejora, se debe a que las plantas con micorriza, ajustan la apertura de los estomas de tal suerte que la perdida de agua se reduce, tambin se incrementa que la concentracin de fitohormonas y los osmoreguladores. El resultado se refleja en el uso eficiente del agua, esto es un incremento de fotosntesis con un menor gasto de agua. Adicional a esto, tambin los hongos micorrcicos, mejoran la calidad de las plantas producidas in vitro, al momento del proceso de aclimatacin. En este sentido, el mejoramiento es debido a dos efectos al menos, incremento de la absorcin de nutrimentos y a la mas rpida actividad de los estomas. Cabe mencionar, que las plantas se desarrollan con mayor velocidad. Todos estos efectos no resultaran tan importantes, si esto no se reflejar el rendimiento y/o la calidad de los productos. Ejemplo de esto, es el jitomate cuyos frutos que provienen de plantas con micorriza tiene mas vida de anaquel, y mejor color. En cuanto a vida de anaquel estos frutos sufren menos contaminacin y por lo tanto deterioro y reducen menos su peso por prdida de agua. Cuando se evalu la expresin de genes de maduracin se observa que los frutos provenientes de plantas con micorrizas, la expresin de la poligalacturonasa (enzima involucrada en la degradacin de la pared celular) y de la ACC oxidasa (enzima involucrada en la produccin de etileno) se reducen. Esta reduccin en la expresin de estos genes se refleja en la mejor calidad de los frutos. Efectos parecidos se observaron en chile. Aunque estos ensayos se realizaron en condiciones adecuadas de humedad se realizaron otros ensayos en condiciones de estrs hdrico. Resultando que los frutos de chile pueden mantener una buena calidad, en plantas con algn tipo de hongo micorrcico. Tec-Myc puede mantener esta calidad, mientras que G.fasciculatum no la mantiene.

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Efectos adicionales y no por ello menos importantes es la resistencia a enfermedades que se genera por la colonizacin de las races por parte de estos hongos. Hemos reducido la incidencia de marchitez en chile en un 60%, pudricin blanca en ajo y cebolla en un 55%. Se tienen diferentes explicaciones a esta proteccin, un incremento de las defensas de la planta, como enzimas hidrolticas, un incremento de las fitoalexinas, competencia de por los sitios de infeccin, aumento de la raz y por lo tanto se tiene menor efecto de los patgenos sobre la planta (Rojas Andrade, y col 2003), Otro grupo microbiano, que incrementa el desarrollo y productividad de las plantas es el de las bacterias promotoras del crecimiento. Este grupo de bacterias puede estimular a las plantas de dos maneras; directa a travs de la produccin de metabolitos como la produccin de fitohormonas, fijacin de nitrgeno u otro, o uno indirecto en el que la bacteria controla patgenos de la planta. Este ltimo puede ser debido a la produccin de compuestos antifngicos, siderforos, enzimas lticas, incrementa los mecanismos de defensa de la planta, etc (Glick y col. 1999). En cuanto a la produccin de fitohormonas las ms estudiadas son las auxinas., las cuales estimulan el desarrollo de las races de las plantas. Otro mecanismos para estimular el desarrollo de la raz, es a travs de la disminucin del ACC que es precursor del etileno, hormona que detiene el crecimiento de la raz. Algunas bacterias promotoras del crecimiento pueden utilizar este substrato (ACC) como fuente de carbono y nitrgeno, por lo que se disminuye la produccin de etileno y por lo tanto la raz sigue creciendo. Otro mecanismo, que puede incrementar la estimulacin de la raz es a travs de pequeos pptidos que regulan en la planta la produccin de fitohormonas. En cuanto, a fijadores de nitrgeno existen algunas bacterias como Azospirillum que pueden fijar todo o casi todo el nitrgeno requerido por las plantas. Este proceso es debido a que bacterias tienen el equipo enzimtico necesario para tomar el N atmosfrico y lo transforman en nitrgeno asimilable por la planta. Por otra parte, pueden combatir enfermedades producidas por Fusarium, Rhizoctonia, Verticillium, Sclerotium etc. Esto se puede deber como se mencion en el prrafo anterior, estas bacterias pueden producir enzimas como las quitinasas o glucanasas que degradan la pared celular de estos hongos. Otro manera de impedir el ataque de los patgenos es a travs de la produccin de siderforos, compuestos que quelan el Fe, elemento necesario para que los patgenos ataquen las plantas. As mismo, algunas bacterias como Bacillus subtilis producen algunos pptidos con actividad antifngica. Finalmente, algunas otras bacterias pueden producir elicitores que estimulan los mecanismos de defensa de la planta, lo que se conoce como resistencia sistmica inducida. Estos efectos se pueden reflejar en incrementos en los rendimientos y acortar los tiempos de produccin. En el caso de papa, cuando se inocula un litro por hectrea se aumentan los rendimientos entre 8-10 ton por ha. Un 30 % en la produccin de jitomate y chile. Adicionalmente, hemos observado que se incrementa la calidad de los frutos. Finalmente, cuando se inoculan los dos tipos de microorganismos (hongos micorrcicos y bacterias promotoras de crecimiento) y los resultados son ms espectaculares. En chile se puede incrementar 40%, en un tiempo de cosecha menor. En pimiento morrn se incremento la calidad de estos en un 30% mas de los de calificacin de

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primera. Es reconocido que las bacterias promotoras de crecimiento se desarrollan de manera significativa en la denominada micorrizsfera. Cabe de mencionar que la productividad de manera sustentable puede ser una realidad con el tiempo, si dedicamos ms esfuerzos al estudio de la flora microbiana y otros productos de origen natural.

LITERATURA CITADA
1. Glick B.R., Patten C.L, Holguin G. Penrose D.m: 1999. Biochemical and Genetic Mechanisms Used by Plant Growth Promoting Bacteria. Imperial College Press. 2. Rojas-Andrade, C.M. Cerda-Garca-Rojas, J.T. Fras-Hernndez, L. Dendooven, V. OlaldePortugal and A. C. Ramos-Valdivia. 2003. Arbuscular mycorrhizal fungus induced changes in the concentration of trigonelline in a semi-arid leguminous plant (Prosopis laevigata) during the pre-symbiotic phase. Mycorrhiza:13:49-52. 3. Salas Galvn Ma.E. 2000. Crecimiento, intercambio de gases y carbohidratos en plantas de tomate con micorriza y diferentes niveles de fsforo. Tesis doctorado, CINVESTAV. 4. Simon L, Bousquet J, Lvesque R, Lalonde M. 1993. Origin and diversification of endomycorrhizal fungi and coincidence with vascular land plants. Nature 363: 67-69 5. Smith SE, Read DJ. 1997. Mycorrhizal symbiosis. Academic Press, San Diego. 6. Taylor TN, Remy W, Hass H, Kerp H .1995. Fossil arbuscular mycorrhizae from the early devonian. Mycologia 87: 560-573. 7. Vargas Luna, L. Madueo G. Gutierrez, JJ. Bernal Alvarado, M. Sosa, JL: Gonzalez, Solis., S. Snchez Rocha. S., Olalde Portugal V., JJ Alvardo Gil. P.Campos. 2003. Photorespiration and temperature dependence of oxigen evolution in tomato plants monitored by open photoacoustic technique. Review Scientific Instrument. 74:707-708. 8. Walker C. 1992. Systematics and taxonomy of the arbuscular endomycorrhizal fungi (Glomales) a possible way forward. Agronomie 12:.

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EFECTOS DE LABRANZA Y BIOFERTILIZACION EN PROPIEDADES DEL SUELO QUE AFECTAN LA SOSTENIBILIDAD DE PRODUCCIN DE FRIJOL
Jaime Roel Salinas Garca, Arturo Daz Franco, Idalia Garza Cano
Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP. Ro Bravo, Mxico.

INTRODUCCIN El frijol (Phaseolus vulgaris L.) es una leguminosa que ha estado presente en la dieta de muchos pueblos del mundo y forma, junto con otros productos, la base de su alimentacin desde siglos atrs. El consumo de frijol en el mundo no se ha generalizado como sucede con otros granos como el trigo o el maz, sino ms bien se trata de un grano cuyo consumo se encuentra localizado en algunos pases de Amrica y frica (ASERCA, 1997). El frijol es una de las fuentes de alimentacin mas importante por su gran valor alimenticio; el grano de frijol contiene un 20-25% de protenas, 1.6% de lpidos, cerca de 60% de hidratos de carbono y adems, minerales como calcio, fsforo, hierro, entre otros (SEP, 1991). En Mxico, el frijol ocupa el segundo lugar en superficie de siembra, despus del maz (Zea mays L.) (Williams et al., 1995). El frijol adquiere gran importancia en el norte de Tamaulipas, segn las demandas y precio en el mercado, por lo que se considera una alternativa de produccin dentro de una rotacin de cultivos (gramnea-leguminosa) ya que reporta utilidades econmicas y aporta nitrgeno al suelo (Daz y Reyes, 1993). En aos recientes se ha incrementado el inters por la sostenibilidad de la agricultura de la regin norte de Tamaulipas. Los sistemas de produccin de cultivos con manejo sostenible mantienen el suelo en una buena condicin fsica, biolgica y qumica. De acuerdo con el censo agropecuario de 1991, se resume que en Mxico, las estrategias de manejo de los cultivos varan dependiendo de las condiciones ambientales y socioeconmicas, ya que esto influye para la seleccin y rotacin de cultivos, mtodos de labranza y uso de fertilizantes (INEGI, 1991). El uso de sistemas de labranza de conservacin en Mxico se inici en la dcada de los setentas con el objetivo de promover la sostenibilidad de los agro ecosistemas agrcolas. En Mxico se siembran aproximadamente 650 mil hectreas con los sistemas de labranza de conservacin, lo que representa el 3.25% de la superficie cosechada (ClaveranAlonso et al., 2001). Labranza de conservacin se refiere a las diferentes prcticas de labranza que utilizan y manejan los residuos de cosecha para cubrir la superficie del suelo, alterando al mnimo posible la composicin, la estructura y la biodiversidad natural del suelo y lo protege de la degradacin por erosin. El empleo tradicional de fertilizantes qumicos, trae consecuencias directas en la contaminacin del suelo, subsuelo, agua y atmsfera (Pea y Grageda, 1997), efectos que no se le ha dado la importancia que se merece. La fertilizacin biolgica o biofertilizacin constituye una alternativa viable (Alarcn y Ferrera, 2000) que puede complementar o sustituir la fertilizacin qumica. Dentro de este concepto, las micorrizas vesculo-arbusculares son hongos que han tenido un impacto como biofertilizantes en la agricultura (Sylvia, 1999; Alarcn y Ferrera, 2000). El objetivo de esta investigacin fue

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evaluar el efecto de los sistemas de labranza y la biofertilizacin como prcticas de sostenibilidad en la produccin de frjol. MATERIALES Y MTODOS Descripcin del sitio Esta investigacin se condujo en el Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP, en el Municipio de Ro Bravo, Tamaulipas (25o 57 N 98o 01 O). El suelo es arcilloso (28% arena, 41% arcilla y 31% limo), con un contenido de materia orgnica de 1.2%, nitrgeno inorgnico (NO3) 25 p.p.m, fsforo disponible 12.3 p.p.m., potasio extractable 470 p.p.m. y un pH moderadamente alcalino 7.8 (1:2 suelo/agua). El clima es clido subtropical, con veranos hmedos y calurosos e inviernos secos, la temperatura media anual es de 23 oC, y la precipitacin media anual es de 635 mm. Diseo experimental En este sitio y durante lo ltimos tres aos se han evaluado cuatro tratamientos de labranza y en el presente ao, dos tratamientos de fertilizacin, en un diseo experimental de bloques al azar con arreglo de parcelas divididas. Los tratamientos de labranza constituyeron la parcela grande mientras que los tratamientos de fertilizacin constituyeron la parcela chica. Tratamientos de labranza: labranza tradicional (barbecho), labranza mnima (subsuelo-bordeo y destronque-bordeo) y labranza cero (herbicida-siembra). La preparacin del suelo en los tratamientos de labranza se realiz durante el mes de julio y agosto antes de que se iniciara el periodo de lluvias. En el tratamiento de labranza cero la maleza se control con dos aplicaciones de glifosato (600 g/ha i.a.) y 2-4 D Amina (600 g/ha i.a.) durante el periodo de descanso (julio-enero). Tratamientos de fertilizacin: fertilizacin qumica comprendi la aplicacin de la formula 40-20-00 en presiembra (Prez y Cortinas, 1994) y como fertilizacin biolgica, se inocul la semilla con el hongo micorrzico Glumus intraradices a razn de 1 kg del sustrato en 60 kg de semilla (ha), mezclada con 60 ml de adherente y 700 ml de agua. La siembra se realiz con humedad residual el 17 de febrero de 2003 con la variedad de frjol Pinto Anzalduas 91, a una densidad de siembra de 20 plantas por metro. Muestreo de suelo Se colect una muestra de suelo por unidad experimental en la etapa de floracin del frjol (abril 2003). Las muestras se tomaron en la parte central del surco utilizando una pala angosta y se dividieron en segmentos de 0 a 5, 5 a 10 y 10 a 15 cm de profundidad, se colocaron en bolsas de plstico y se trasladaron al laboratorio para su preparacin. Las muestras de suelo se secaron al aire y se molieron para ser tamizadas a travs de una malla de 2 mm para su anlisis qumico. Anlisis fisicoqumico del suelo El contenido de materia orgnica se determin por el mtodo de oxidacin hmeda con dicromato de potasio y el exceso de dicromato aadido es valorado con sulfato ferroso amoniacal (Nelson y Sommers, 1982). El contenido de nitrgeno inorgnico (NO3) se determin colorimetricamente con el mtodo fenol disulfonico, utilizando una solucin extractora de sulfato de plata y sulfato de cobre para extraer los nitratos, esta solucin se evapora a sequedad, posteriormente se disuelve y se trata con hidrxido de amonio, formando una solucin amarilla usada para la determinacin colorimtrica de los nitratos. El contenido de fsforo disponible se determin con el mtodo Olsen (Olsen el al., 1954).

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El potasio extractable (con acetato de amonio) se determino por el mtodo Peech (Pratt, 1965). La textura del suelo se determin con el mtodo del hidrmetro (Gee y Bauder, 1986). RESULTADOS Y DISCUSIN Materia orgnica Los tratamientos de labranza afectaron significativamente el contenido de materia orgnica (M.O.) en las tres profundidades de suelo (Cuadro 1). Los cambios se observaron principalmente en la primera profundidad de 0-5 cm. Donde el tratamiento de labranza cero fue estadsticamente superior al resto de los tratamientos, seguido por los tratamientos de labranza mnima (destronque-bordeo y subsuelo-bordeo) y el tratamiento de labranza barbecho que mostr los valores ms bajos. En las siguientes profundidades 5-10 y 10-15 cm el tratamiento de labranza-cero super en 22% en el contenido de M.O. al resto de los tratamientos. Debido a que no hubo inmersin de suelo que pudiera incorporar los residuos y con ello provocar una descomposicin ms acelerada. De acuerdo con Doran (1980), Maskina et al. (1993) y Salinas et al. (1997), los residuos de cosecha incorporados al suelo ayudan a mantener e incrementar la M.O., la cual es importante para la estructura del suelo, conservacin de humedad y la actividad microbiana; sin embargo el microambiente formado por la cobertura del suelo con residuos de cosecha es menos oxidativo (tratamiento de labranza cero) que donde los residuos son incorporados al suelo (labranza mnima y labranza convencional). Los tratamientos de fertilizantes no afectaron significativamente el contenido de M.O. en las tres profundidades de suelo (Cuadro 2). Probablemente debido a que las plantas tratadas con los fertilizantes produjeron similar cantidad de biomasa o rea foliar que las plantas fertilizadas. Nitratos Los tratamientos de labranza afectaron significativamente el contenido de nitratos en las tres profundidades de suelo (Cuadro 1). El tratamiento de labranza barbecho super a los dems tratamientos por 21.92 %, mientras que el tratamiento de labranza cero consistentemente mostr los valores mas bajos. La baja cantidad de nitratos en el tratamiento de labranza cero, indic que el proceso de incorporacin de los residuos de cosecha acelera la mineralizacin de la M.O. propiciando que los nitratos puedan perderse por precolacin o ser tomados, por la maleza, provocando una disminucin de estos, comparado con los otros tratamientos de labranza. Los niveles de nitratos son incrementados al sumarse tanto los nitratos mineralizados como el aplicado en forma de fertilizante. A pesar de que la tasa constante de mineralizacin orgnica es mayor en los suelos barbechados a mediano plazo, la acumulacin gradual de una mayor fuente de nitratos en los sistemas de labranza de conservacin puede compensar este efecto (Rice et al., 1986; Doran, 1987; Franzluebbers et al., 1995). Los tratamientos de fertilizantes no afectaron significativamente el contenido de nitratos en las tres profundidades de suelo (Cuadro 2). Aunque el tratamiento de fertilizante qumico fue ligeramente superior al fertilizante biolgico, esto es probable por la cantidad de nitratos aplicados en el fertilizante.

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Cuadro 1. Efecto de los mtodos de labranza en propiedades qumicas y nutrimentos del suelo.
Profundidad de Suelo (cm) Tratamientos 0-5 5-10 10-15 0-5 5-10 N-NO3 (p.p.m.) 31a 21c 24b 20c 24a 22b 21b 14c 21a 21a 18b 13c 10-15

Materia Orgnica (%) Barbecho Subsuelo-bordeo Destronque-bordeo Labranza cero 2.2d* 2.4c 2.6b 3.1a 2.4b 2.4b 2.5b 3.0a 2.2b 2.2b 2.3b 2.7a

P Disponible (p.p.m.) Barbecho Subsuelo-bordeo Destronque-bordeo Labranza cero 12.0a 11.5a 13.0a 11.6a 13.0a 11.5a 11.5a 11.0a 10.0c 12.5a 12.0a 11.0b

K Extractable (p.p.m.) 470a 490a 485a 500a 455b 470a 468a 430c 480a 489a 500a 490a

*Valores dentro de columnas seguidos por la misma letra no difieren significativamente (p<0.05) de acuerdo a la prueba de medias Duncan.

Fsforo disponible Los tratamientos de labranza slo afectaron significativamente en el contenido de fsforo disponible en la profundidad 10-15 cm del suelo. Los tratamientos de labranza mnima (subsuelo-bordeo y destronque-bordeo) fueron superiores en 13.6%, seguido por el tratamiento de labranza cero y el tratamiento de labranza barbecho que mostraron los valores ms bajos. La tendencia fue encontrar casi la misma proporcin de fsforo en la capa superior que en la inferior en los tratamientos de labranza mnima (Cuadro 1). Este efecto puede ser explicado por el aumento de la materia orgnica mediante la incorporacin de residuos que se practica en estos tratamientos de labranza con lo que se incrementa la solubilidad del fsforo, por lo que es fcilmente asimilado por las plantas (El-Baruni y Olsen, 1979; Elliot et al., 1987). Los tratamientos de fertilizantes afectaron significativamente el contenido de fsforo solamente en la primera profundidad 0-5 cm de suelo. En el cual la fertilizacin qumica, fue superior en 11.0% al fertilizante biolgico. Por el contrario, en las profundidades 5-10 y 10-15 cm no se registraron cambios significativos (Cuadro 2). Esto debido a que fue adicionado fertilizante fsforado y a la poca movilidad de este elemento en el suelo, lo hace que se acumule principalmente en los primeros centmetro del suelo. Resultados similares han sido reportados por Figueroa y Morales (1992) y Tracy et al. (1990).

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Cuadro 2. Efecto del tipo de fertilizacin en propiedades qumicas y nutrimentos del suelo.
Profundidad de Suelo (cm) Tratamientos 0-5 5-10 10-15 0-5 5-10 10-15

Materia Orgnica (%) Fertilizacin qumica Fertilizacin biolgica 2.7a* 2.6a 2.5a 2.4a 2.3a 2.2a 25a 23a

N-NO3 (p.p.m.) 23a 21a 20a 18a

P Disponible (p.p.m.) Fertilizacin qumica Fertilizacin biolgica 12.5a 11.0b 12.0a 11.0a 12.0a 11.0a

K Extractable (p.p.m.) 495a 490a 475a 460a 480a 475a

*Valores dentro de columnas seguidos por la misma letra no difieren significativamente (p<0.05) de acuerdo a la prueba de medias Duncan.

Potasio extractable Los tratamientos de labranza solo afectaron significativamente en el contenido de potasio en la profundidad 5-10 cm del suelo. En el que fueron superiores los tratamientos de labranza mnima (destronque-bordeo y subsuelo-bordeo) por 4.8%, seguido por el tratamiento de labranza barbecho y el tratamiento de labranza cero que mostr los valores mas bajos. En la primera y ltima profundidad no registraron diferencia significativa entre los tratamientos de labranza (Cuadro 1). Resultados similares han sido reportados por Muzilli (1983), quien mencion que la disponibilidad del potasio es menos afectada por los sistemas de labranza. Los tratamientos de fertilizantes no afectaron significativamente el contenido de potasio en las tres profundidades de suelo (Cuadro 2). Esto debido probablemente a que las micorrzas exudan sustancias qumicas al suelo, lo que ayuda a disolver algunos nutrientes como el fsforo y potasio (Robson et al. 1994).

CONCLUSIONES Los residuos de cosecha sobre la superficie del suelo, promovidos por los tratamientos de labranza de conservacin, mejoraron los indicadores de la sostenibilidad del suelo, respecto al tratamiento de labranza tradicional de barbecho. Los tratamientos de labranza de cero y mnima (subsuelo-bardeo y destronque-bordeo) incrementaron la concentracin de materia orgnica, nitratatos, fsforo y potasio, en la capa superficial del suelo (0-5 min). Los tratamientos de fertilizacin no afectaron estadsticamente, los indicadores de sostenibilidad del suelo (materia orgnica, nitratos, fsforo y potasio). Los tratamientos de labranza mnima subsuelo-bordeo y destronque-bordeo y el uso de fertilizantes biolgicos promueven la sostenibilidad del suelo.

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REFERENCIAS
Alarcn, A. y Ferrara-Cerrato, R. 2000. Biofertilizantes: Importancia y utilizacin en la agricultura. Agr. Tc. Mx. 26 (2): 191-203. ASERCA. 1997. Produccin mundial de frijol. Claridades Agropecuarias 44: 24-32. Claveran-Alonso, R., Fregoso-Tirado, L.E. and Snchez-Brito, C., 2001. La labranza conservacionista en Mxico. I World Congress on Conservation Agriculture. Madrid, Spain. Daz, F., A. y Reyes M.C.A. 1993. Situacin de la Agricultura en el Norte de Tamaulipas. IV Encuentro Internacional de Investigadores en Economa Agrcola. UAT. p. 280-290. Doran, J. W. 1980. Microbial changes associated whit residue management whit reduced tillage. Soil Sci. Am. J. 44:518-523 . Doran, J.W. 1987. Microbial biomass and mineralizable nitrogen distribution in no tillage and plowed sofis. Biol. Fertil. Soils. 5:68-75. El-Baruni, B., and S.R. Olsen 1979. Effects of manure on solubility of phosphorus in calcarcous sofis. Soil Sci. 12: 219-225. Elliot, L.F., R.I. Papendick and D.F. Bezdicek. 1987. Cropping practices using legumes with conservation tillage and soil benefits. P. 812-889. In J.F. Power (Ed.), The role of legumes in conservation tillage systems. Soil Conserv. Soc. Am., Ankeny, IA. Franzluebbers A. J., F. M. Hons and D. A. Zuberer. 1995. Tillage and crop effects on seasonal soil carbon and nitrogen dynamics. Soil Sci. Soc. Am. J. 59:1618-1624. Gee, G.W., Bander, J.W., 1986. Particle Size Analysis. In! Klute, A., Campbell, G.S., Jackson, R.D., Mortland, M.M., Nielson, D.R. (Eds) Methods of Soil Analysis, Part 1. Physical and Mineralogical Methods, 2nd Edition. Soil Sel. Soc. Am. Book Series, Number 5, Part 1, Madison, W.I. pp. 383-411. INEGI, 1991. VII Censo Agropecuario. Base de datos en disco compacto. Mxico. SSP. Maskina, M.S., J.F. Power., J.W. Doran and W.W. Wilhelm. 1993. Residual effects of notillage crop residue on com yield and nitrogen uptake. Soil Sci. Soc. Am. J. 57:1555-1560. Muzilli, O. 1983. Influencia do Sistema de Plantio Directo, Comparado ao Convencional, sobre a Fertilidade da Camada a Rvel do solo. R. Bras. Cl. Solo, Campinas. 7:95-102. Nelson, A.W., And L.E. Sommers. 1982. Total carbon, Organic Carbon and Organic Matter. P. 539-580. In A.L. Page, R.H. Miller, and A.R. Keeny (ed.) Methods of Soil Analysis. Partz, 2nd Ed. Asvon. Monogr. 9, ASA and SSSA, Madison, WI. Olsen, S.R., C.V. Cole, F.S. Watanable and L.A. Dean. 1954. Estimation of Available Phosphorus in Soils by Extraction sith Sodium Bicarbonate. USDA circular. 939:1-9. Pea C., J. y 0. Grageda C. 1997. Dinmica del nitrgeno en el ecosistema agrcola. En: Ruiz H., J., D. Guzmn P. y J. Pea C. (Ed). Perspectivas de la Microbiologa en Mxico. IPN. pp. 345-366. Prez G., P. y H. Cortinas E. 1994. Gua para cultivar frijol en el norte de Tamaulipas. Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP. Folleto 6. 18 p. Pratt P.F. 1965. Total Potassium, Exchangeable, Potassium and Availability Indexes. P.1022-1034. In C.A. Block, A.D. Evans, J.L. Write, L.E. Ensminger, and E. Clork (Ed) Methods of Soil Analysis. Part I. Agron. Monogr. 9. ASS and Ssa, Madison, WI.

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Rice, C.W., M.S. Smith and R.L. Blevins. 1986. soil nitrogen availability after long term continuos no-tillege and conventional tillage corn production. Soil Sci. Soc. Am. J. 50:1206-1210. Robson, A.D., L.K. Abbott, And N. Malajezuk. 1994. Management of Micorrizas in Agriculture, Horticulture and Forestry. Kluwer Academic Publishers, Boston. Salinas-Garcia, J. R., J. E. Matocha and F. M. Hons. 1997. Long-term tillage and nitrogen fertilization effects on soil properties of an Alfisol under dryland corn/cotton producction. Soil Tillage Res. 42:79-93. SEP. 1991. Frijol y chcharo. David B. Parsons. 2 Ed. Mxico: Trillas. Sylvia, D.M. 1999. Fundamentals and applications of arbuscular mycorrhizae: A biofertilizer perspective. In: Siqueira, J.O. and Moreira F.M. (eds.). Soil Fertility, Soil Biology, and Plant Nutrition Interrelationships. Sociedade Brasileira de Ciencia do Solo, pp: 705-723. Tracy, P. W., D. G. Westfall, E. T. Elliot, G. A. Peterson and C. V. Cole. 1990. Carbon, nitrogen, phosfhorus and sulfur mineralization in plow and no.till cultivation. Soil Sci. Soc. Am. J. 54:457-461. Williams, A., H., Rodrguez, R., H. y Montes G. N. 1995. 20 aos de investigacin en sorgo en el campo experimental Ro Bravo, Tamaulipas Mxico. Germen. 8:35.

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RESPUESTA DE LA BIOFERTILIZACIN EN EL CRECIMIENTO Y RENDIMIENTO DE SORGO DE GRANO EN LINARES, NUEVO LEON

Juan Martnez Medina Campo Experimental General Tern. General Tern, Nuevo Len, Mxico

INTRODUCCION En Mxico millones de hectreas sembradas por campesinos de subsistencia se fertilizan muy poco o incluso nada, lo cual reduce de manera importante los rendimientos potenciales de los cultivos; sin embargo, la solucin a este problema no es fcil ya que los fertilizantes industriales, a pesar de las ventajas, su excesivo uso ha causado efectos negativos de contaminacin del ambiente y a la vez el encarecimiento de los productos agropecuarios. Uno de los retos tecnolgicos que enfrenta la agricultura es conseguir alternativas que permitan reducir las aplicaciones de fertilizantes qumicos, sin afectar los niveles de productividad y rentabilidad de los cultivos. Actualmente existe un concepto de agricultura basada en sistemas biolgicos, en el cual se considera la produccin y conservacin de los recursos de una manera sostenible. En este contexto se encuentran los biofertilizantes los cuales son microorganismos que viven en el suelo asociados directa o indirectamente a las races de las plantas, capaces de fijar nitrgeno ya sea en forma simbitica o libre, solubilizar el fsforo, producir estimuladores de crecimiento y reducir enfermedades fungosas causadas por nemtodos. Los principales microorganismos utilizados como biofertilizantes son bacterias (Azospirillum, Rhizobium y Bradyrhizobium), y hongos micorrzicos del gnero Glomus (Quilambo, 2003; Bashan y Olguin, 1997; Bashan, 1998; Bashan y Levanony; 1990). En las gramneas el Azospirillum es una bacteria que vive en asociacin con las plantas en la zona radical que es capaz de infectar diversos cultivos de importancia como trigo, maz, arroz, sorgo y mijo; uno de los principales mecanismos a travs de los cuales esta bacteria promueve el crecimiento de las plantas es su capacidad para producir hormonas de crecimiento vegetal, adems de que fija nitrgeno en bajas cantidades. Por su parte, el trmino micorriza significa literalmente hongo-raz y se refiere a una estructura radicular resultado de una asociacin entre los pelos radiculares de una planta y hongos especficos del suelo; casi todas las plantas forman micorrizas y el principal beneficio es incrementar la longevidad de los pelos radicales e incrementar el rea de absorcin de nutrientes mayores y menores, especialmente P, K, Cu y Zn, confiriendo adems tolerancia a condiciones adversas. En general, los biofertilizantes permiten poner al alcance de los agricultores, productos con alta efectividad, con los que se sustituye hasta 50% del fertilizante nitrogenado industrial en el caso de los fijadores asociativos, hasta el 80% en el de los simbiticos, mientras que los microorganismo solubilizadores de fsforo permiten sustituir hasta el 70% del fertilizante fosfrico; en trminos de produccin, los rendimientos se incrementan hasta en un 30%. (INIFAP s/f)

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As, la biofertilizacin es una forma viable, sostenible y econmica de mejorar la fertilidad del suelo y elevar la produccin, por lo que la Secretara de Agricultura, Ganadera y Desarrollo Rural a travs del Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrcolas y Pecuarias, puso en marcha un Programa de Biofertilizacin, iniciando con 750,000 ha de maz, trigo, cebada, sorgo, soya y frijol en 1999. En Nuevo Len, en el 2000 dicho programa tuvo una cobertura de 1,000 hectreas en la zona sur, a base de Azospirillum aplicado principalmente en tierras de temporal de productores de maz de escasos recursos. En el resto de la entidad, el INIFAP estableci parcelas de validacin principalmente en sorgo y maz tanto en condiciones de riego como de temporal, usando como biofertilizante Azospirillum y Micorriza (Glomus intraradices); en menor escala se ha usado Rhizobium en el cultivo de frijol. Aunque los resultados han sido variables en trminos de rendimiento, las respuestas en el crecimiento y desarrollo de plantas y races han sido ms evidentes a favor de los biofertilizantes. En este contexto, el propsito del trabajo fue evaluar el efecto de la aplicacin de Azospirillum brasilense y Micorriza (Glomus intraradices) en el crecimiento y rendimiento de sorgo para grano, en parcelas comerciales de productores en la zona centro de Nuevo Len. METODOLOGA Localizacin. El trabajo se desarroll en el Ejido La Petaca, Linares, N.L.; se encuentra ubicado geogrficamente entre las coordenadas 24o 51, 24o 52 de latitud norte y 99o 31, 99o 32 de longitud oeste, a 300 msnm. Los suelos son vertisoles, profundos, y de buen drenaje; la precipitacin anual es de 586 mm (1985-1998), temperatura mxima de 20.5oC a 36.3oC y mnima de 9.2oC a 23.9oC, con una evaporacin de 2,035 mm anuales. Seleccin de las parcelas y establecimiento del cultivo. En la localidad existen productores ejidales con un patrn de cultivos de sorgo, maz y trigo con superficies promedio de 3 ha, en condiciones de riego restringido (generalmente con un riego de auxilio). Fueron seleccionados tres productores que mostraron inters por la biofertilizacin en el cultivo de sorgo grano; las fechas de siembra fueron el 12 de febrero, 16 de febrero y 2 de marzo de 2000, las cuales se identificaron como Parcela 1, 2 y 3, respectivamente. En todos los casos se utiliz la mezcla de Micorriza (Glomus intraradices) y Azospirillum brasilense aplicada directamente a la semilla para sembrar una hectrea (con biofertilizante). Esta superficie fue cubierta con una bolsa de cada biofertilizante con un peso aproximado de 1 kg y 380 g para Micorriza y Azospirillum, respectivamente; la superficie restante (aproximadamente 2 ha) fue sembrada sin biofertilizante (tratamiento testigo). En el caso de la Parcela 1, adems de la mezcla, se incluyeron tratamientos correspondiendo a semilla inoculada con Micorriza y Azospirillum en forma separada. La variedad de sorgo fue GS-66-Y.

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Manejo del cultivo y variables de respuesta. En la zona, las siembras se realizan en forma tradicional consistente en dos pasos de rastra, surcado, riego, rastreo, siembra y cultivo (escarda); con est secuencia se manejaron dos lotes, mientras que en la Parcela 1 se us labranza de conservacin. En todos los casos se aplic solo el riego para la siembra, manejndose luego bajo temporal. Se realizaron muestreos para estimar la altura de planta, peso seco total y peso seco de raz (en la Parcela 2 en etapa de grano lechoso-masoso, en la Parcela 3 la planta estaba en la fase de embuche); esta determinacin se realiz en cinco puntos tomando tres plantas en cada uno. Al final del ciclo, en las tres Parcelas, para estimar rendimiento de grano se cosecharon las panojas existentes en 5 metros de surco, repetido 4 veces en cada tratamiento; de cada muestra fueron seleccionadas 10 plantas a las que les registr la altura, longitud de panoja, peso seco total, peso seco de la parte area, peso seco de panoja, peso seco de hojas y tallo, peso seco de raz. La informacin fue analizada con un modelo estadstico completamente al azar, utilizando el Paquete de Diseos Experimentales FAUANL, Versin 2.5 (Olivares, 1995). Este anlisis no se realiz en la Parcela 1 para los pesos secos total, de panoja y raz debido a que los datos se tomaron solo en una muestra por tratamiento.

RESULTADOS Y DISCUSIN Efecto del biofertilizante en etapa vegetativa del sorgo. De acuerdo con los anlisis de varianza, se encontraron diferencias estadsticas en las variables medidas, lo anterior se observa en el Cuadro 1 en el que se consignan los valores de los cuadrados medios y los coeficientes de variacin. Cuadro 1. Cuadrados medios y coeficiente de variacin para variables medidas. INIFAPCEGET, 2000.
Parcela 2 Variabe Altura P.seco total P. seco raz Area foliar C.M. Trat. 327.195313 * 483024414 * 18.496017 * 214154.2500* C.M. Error 17.260742 7.335510 0.253500 7310.9375 C.V. (%) 4.8 12.4 14.6 14.6 C.M. Trat. 39.606445 * 18.911255 * 0.319988 * Parcela 3 C.M. Error 5.424967 1.776225 0.046667 C.V. (%) 7.1 11.7 8.4

* Significativo al 0.05 Los resultados de los anlisis de varianza son indicativos de un comportamiento diferencial de la planta de sorgo al ser sometida a los tratamientos considerados. Los efectos expresados favorecieron a las plantas que estuvieron con biofertilizacin; en el Cuadro 2 se presentan los valores numricos mostrados por las plantas en cada tratamiento en las Parcelas 2 y 3.

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Cuadro 2. Efecto de la biofertilizacin en algunas caractersticas de la planta de sorgo en etapa vegetiva. INIFAP-CEGET, 2000.
Variable Sin Biofert. Altura de planta (cm) Peso seco total (g) Peso seco raz (g) Area foliar (cm )
2

Parcela 2 Con Biofert. 91.8 a 28.6 a 4.8 a 732.0 a % 14.1 94.5 140.0 66.6 Sin Biofert. 30.9 b 9.8 b 2.3 b -

Parcela 3 Con Biofert. 34.9 a 12.9 a 2.7 a % 12.9 31.6 17.3 -

80.4 b 14.7 b 2.0 b 439.3 b

De acuerdo con los datos, los efectos combinados de los biofertilizantes posibilitaron que las plantas de ambas parcelas acumularon una mayor cantidad de materia seca total y que fueran capaces de desarrollar mayor masa radical, los incrementos fueron del orden de 94.5% y de 140% para esas caractersticas respectivamente, en una de las parcelas; las plantas de la Parcela 3, mostraron incrementos menos espectaculares. El efecto de los biofertilizantes en el incremento de la altura de la planta fue ms estable en ambas parcelas. En la Figura 1 se muestra grficamente lo anterior.

Fig. 1 Etapa vegetativa en la parcela 2 y 3.

Efecto del biofertilizante en el comportamiento final del sorgo. No se encontraron diferencias estadsticas en los atributos considerados en las plantas de las Parcelas 1 y 2; sin embargo, las diferencias si se detectaron cuando se analizaron las plantas de la Parcela 3, excepto en las variables de rendimiento de grano/parcela y panojas cosechadas. Como se recordar, en la Parcela 1 se consideraron 3 tratamientos de biofertilizacin mas el testigo, en el Cuadro 3 se presentan los valores promedio para cada una de las caractersticas consideradas.

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Cuadro 3. Efecto del biofertilizante en el comportamiento final de la planta de sorgo en la parcela 1. INIFAP-CEGET, 2000.
Trat. Altura (cm) Peso Seco/planta (g) Total Azospirillum Micorriza Azosp.+Micorr. Testigo DMS 96.9 101.9 102.0 101.0 63.0 56.1 44.4 46.1 Raz 10.2 8.0 8.2 6.2 Long. (cm) 18.9 18.6 20.0 18.4 Panoja Peso (g) 26.3 27.3 28.7 20.8 Cosech. 43.0 b 55.0 ab 47.0 b 70.0 a 16.6 816.7 956.0 933.5 812.0 Rend/parc (g)

En trminos generales, para el caso de la Parcela 1, existi una respuesta favorable en el comportamiento final de la planta cuando se aplic biofertilizantes (Cuadro 3); los datos sugieren que las plantas utilizan dichos productos para incrementar la materia seca tanto total como de raz y de la panoja, parece ser que esta ltima caracterstica es determinante en el rendimiento de grano. As, la planta increment su peso seco total entre 21.6 y 36.6% cuando se us Micorriza y Azospirillum, respectivamente, aumentando su masa radical en 29 y 64%; cuando se us la mezcla de esos productos se obtuvo un 37.9% de incremento en el peso de la panoja y un 14.9% en el peso de grano por parcela; este rendimiento de grano fue de 17.7% con el uso de biofertilizante a base de Micorriza y apenas de 0.5% cuando se aplic Azospirillum. Existen muchos reportes que indican la capacidad del gnero Azospirillum para promover el crecimiento en las gramneas (Dbereiner, 1983); de la misma manera son mltiples los trabajos realizados sobre el papel de las micorrizas en la nutricin (mejorando la disponibilidad del P) y en la eficiencia en el uso del agua en un amplio rango de cultivos (Daft and Nicolson 1969, Bethenfalvay et al. 1982, Abbott et al. 1983, Diederichs 1990). Sin embargo, relativamente poca investigacin se ha realizada para evaluar el efecto combinado de la inoculacin con micorrizas y Azospirillum. El hecho de que el tratamiento Azospirillum + micorriza haya tenido menor efecto en el peso seco total por planta en relacin a la inoculacin individual, es consistente con lo sealado por Diederichs y Manske (1990) para trigo, sin embargo, en sorgo y mijo para el mismo carcter, observaron un efecto sinrgico cuando se aplicaron ambos microorganismos al momento de la siembra. En relacin al rendimiento de grano en las ltimas especies sealadas, fue menor, sugiriendo una competencia por la misma fuente de carbohidratos entre la bacteria y el hongo. En la Figura 2 se muestra el efecto a nivel de panoja de cada tratamiento.

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Fig. 2. Efecto de la aplicacin de biofertilizantes en la panoja de sorgo. A, Azospirillum; B, Micorriza; C, Azospirillum+Micorriza; D, Testigo.

Lo encontrado en la Parcela 1 es consistente con el comportamiento mostrado por el sorgo en la Parcela 3, tal como se aprecia en el Cuadro 4.

Cuadro 4. Efecto del biofertilizante en el comportamiento final de la planta de sorgo en la parcela 3. INIFAP-CEGET, 2000.
Trat. Altura (cm) Total Con Biofert. Sin Biofert DMS 63.7a 55.6b 7.8 41.7a 24.6b 10.2 Peso seco/planta (g) Panoja Rend. parcela (g)

Area 35.9a 21.6b 8.7

T. hojas Panoja 19.0a 12.5b 6.0 16.9a 9.12b 3.6

Raz 5.7a 2.9b 1.7

Long. (cm) 17.0a 13.6b 1.6

Cosech. 28.0 25.0 213.0 134.2

T. hojas =Tallo y hojas

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El incremento en el peso seco total, de la raz y de la panoja fueron los mas favorecidos por la aplicacin de biofertilizante: 69.5%, 85.5% y 96%, respectivamente, en comparacin al testigo; el peso de grano por parcela fue superior en un 58.7%. En la Figura 3 se observa el efecto a nivel de raz y de planta completa.

Fig. 3. Efecto de la biofertilizacin en el desarrollo de raz y de planta de sorgo, parcela 3.

No obstante lo anterior, aunque el patrn general de la respuesta en el comportamiento final de la planta de sorgo en la 2 fue igual en trminos estadsticos en ambos tratamientos, se observ un ligero incremento en las caractersticas relacionadas con el peso seco de la planta y en el tamao de la panoja donde no se aplic biofertilizante (Cuadro 5). En la Figura 4 se aprecian los efectos sealados. Cuadro 5. Efecto del biofertilizante en el comportamiento final de la planta de sorgo en la parcela 2. INIFAP-CEGET, 2000.
Trat. Total Con Biofert. Sin Biofert 34.5 40.0 Peso seco/planta (g) Area 29.3 34.4 T. hojas Panoja 18.5 21.9 10.7 12.4 Raz 5.2 5.6 Panoja Long. (cm) 16.2 16.9 Cosech. 41.0 43.0 240.2 229.5 Rend. parcela (g)

T. hojas =Tallo y hojas

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Fig. 4. Efecto de la biofertilizacin en el desarrollo de raz y planta de sorgo, parcela 2. Sin embargo, el efecto de la aplicacin del biofertilizante fue positivo en el rendimiento de grano en un 4.6%, la explicacin posible para este comportamiento pudiera relacionarse con un tamao mas grande del grano considerando que se cosecharon una menor cantidad de panojas.

El impacto en el rendimiento de grano de sorgo por efecto del biofertilizante. En relacin al rendimiento de grano, aun y la ausencia de evidencia estadstica, fue favorable con la biofertilizacin (Azospirillum + Micorriza); aunque el incremento vari en cada una de las parcela (5.5, 14.9 y 58.7%) el promedi fue de 27%. En el Cuadro 6 y en la Figura 5 muestra el rendimiento de grano por hectrea en cada parcela. Cuadro 6. Rendimiento de grano (kg ha-1) de sorgo por efecto de la biofertilizacin con Azospirillum y micorriza. INIFAP-CEGET, 2000. Tratamiento 1 Azospirillum Micorriza Azospirillum+Micorriza Testigo 2,040 2,390 2,332 2,030 677 572 532 335 Parcelas 2 3

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La diferencia en el rendimiento de grano de la Parcela 1 con respecto a las otras es explicable si se considera el manejo distinto (labranza de conservacin) y los beneficios que dicha prctica conlleva. En las otras parcelas los niveles de produccin observados reflejan el temporal crtico durante el ciclo del cultivo, pues la precipitacin fue de 172.1 mm. Los rendimientos de las parcelas 2 y 3 aunque distan mucho de ser competitivos, sin duda que el uso de la biofertilizacin permiti una mejor expresin del mismo.

Con Biof

Sin Biof

2.5 2 Rend (Ton/ha) 1.5 1 0.5 0 Parcela 1 Parcela 2 Parcela 3

Figura 5. Efecto de la biofertilizacin en el rendimiento (ton ha-1) de grano de sorgo.

Aunque se ha demostrado los efectos de la biofertilizacin en el rendimiento de grano en algunas especies agrcolas, los resultados han sido variables en funcin del sistema de produccin (Irizar, et al., 2003; Alarcn y Ferrera-Cerrato, 1999; Montao, et al., 1997; Daz, 2003; Prez, et al., 2003; Garza, et al., 2003), representan una estrategia viable y sustentable en la agricultura mexicana.

CONCLUSIONES De acuerdo con los resultados obtenidos y considerando las condiciones en que se desarroll el trabajo, se plantean las conclusiones preliminares siguientes:

En etapa vegetativa la planta del sorgo increment hasta en un 94.5% su peso seco total cuando se inocul la semilla con la mezcla de Azospirillum+Micorriza; el peso seco de raz se increment hasta en 140%. En la etapa de madurez fisiolgica, los incrementos en los pesos secos total de la planta y de la raz mostraron los valores mas altos cuando se aplic biofertilizante, los aumentos fueron del orden de 39.5 a 36% y de 52 a 64%, respectivamente. La aplicacin de los biofertilizantes permitieron aumentar el rendimiento hasta un 58.7%, ese aumento parece ser que est relacionado con el incremento del peso seco de la panoja y de la mayor cantidad de rea foliar. 50

El uso de los biofertilizantes potencializa la produccin de grano bajo el sistema de labranza de conservacin, donde es posible obtener hasta 2,390 kg ha-1 contra 667 kg ha-1 en el sistema tradicional, con un riego de presiembra y 172 mm de precipitacin

BIBLIOGRAFIA
Abbot, L.K., A.D. Robson and I.R. Hall. 1983. Introduction of Vesicular-arbuscular Micorrhizal Fungi into Agricultural Soils. Australian J. Agric. Res. 34:741. Alarcn, A. y R. Ferrera-Cerrato. 1999. Manejo de la Micorriza Arbuscular en Sistemas de Propagacin de Plantas Frutcolas. Terra 17: 179: 191 Bashan, Y. 1998. Inoculants of Plant Growth-Promoting bacteria for Use in Agricultura. Biotechnology Advences, 16 (4): 729-770. Bashan, Y y Holguin G. 1997. Azospirillum-Plant Relationships: Enviromental and Physiological Advances (1990-1996). Can. J. Microbiol. 43: 103-121. Bethlenfalvay, G.S. and R.N. Ames. 1987. Comparison of two Methods for Quantifying Extraradical Mycelium of Versicular-arbuscular Micorrhizal Fungi. Soil Sci. Soc. Am. J. 51:834837. Daft, M.J. and T.H. Nicolson. 1969. Effect of Endogone Mycorrhizae on Plant Growth. II. Influence of Soluble Phosphate on Endophyte and Host in Maize. New Phytol. 68:945-952. Daz, F. A. 2003. Inoculacin de Sorgo con Glomus intraradices y Azospirillum brasilense en Riego Restringido y Temporal. Memoria de Resmenes, VII Simposio Internacional y II Congreso Nacional de Agricultura Sostenible. Diederichs, C. 1990. Improved Growth of Cajanus cajan L. In an Unsterile Tropical Soil by three Mycorrhizal Fungi. Plant and Soil. 123:261-266. Diederichs and G.G. B. Manske. 1991. The Role of Micorrhizal Fungi in Crop Nutrition in the Warmer Regions. In: Wheat for Nontraditional, Warm Areas. A Proceedings of the International Conference, july 29-august 3, 1990, Foz do Iguacu, Brazil. Dobereiner, J. 1983. Ten Years of Azospirillum. Experentia Suplementum 48:9-23. Garza, C. I., A. Daz F. A. Ramrez de L e I. Machuca O. 2003. Memoria de Resmenes, VII Simposio Internacional y II Congreso Nacional de Agricultura Sostenible. INIFAP. S/f. Biofertilizante. Irizar, G. M.B., P. Vargas V., D. Garza G., C. Tut., I. Rojas M., A. Trujillo C., R. Garca S., D. Aguirre M., J.C. Martnez G., S. Alvarado M., O. Grajeda C., J. valero G y J.F. Aguirre M. 2003. Respuesta de cultivos agrcolas a los biofertilizantes en la regin central de Mxico. Agric. Tec. Mx. 29: 213-225. Montao, A. N.M. 2001. Colonizacin micorrzica arbuscular y fertilizacin mineral de genotipos de maz y trigo cultivados en un andisol. Terra 19: 337-344.

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Olivares S, E. 1995. Notas de Diseos Experimentales con Aplicacin a la Experimentacin Agrcola y Pecuaria. Facultad de Agronoma, UANL. Marn, N.L. Prez, G. P., A. Daz F., A. Ramrez de L e I. Garza C. 2003. Efecto de Biofertilizantes sobre el Rendimiento y Protena de Soya. Memoria de Resmenes, VII Simposio Internacional y II Congreso Nacional de Agricultura Sostenible Quilambo, O.A. 2003. The Vesicular-arbuscular Mycorrhizal Simbiosis. Afr. J. Biotechnol. Vol 2 (12): 539-546.

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BIOTECNOLOGA DE LOS HONGOS ECTOMICORRZICOS

Jess Prez-Moreno
Microbiologa, Edafologa-IRENAT, Colegio de Postgraduados, Montecillo, Texcoco, Estado de Mxico. CP 56230. MEXICO. jperezm@colpos.mx

Introduccin La produccin de inoculantes basados en hongos ectomicorrzicos (ECM), ha cobrado una enorme importancia a nivel mundial por diversas razones, dentro de las que se incluyen de manera importante las siguientes: i) existe una bsqueda de tecnologas que originen un menor deterioro ambiental, y se ha intentado entonces buscar alternativas biolgicas, al utilizar microorganismos benficos importantes para la nutricin vegetal y evitar as la utilizacin excesiva de fertilizantes qumicos (Prez-Moreno y FerreraCerrato, 1996); ii) se ha demostrado que los hongos ECM juegan un importante papel tanto en la nutricin de las plantas (Read y Prez-Moreno, 2003) como en su proteccin contra patgenos (Whipps, 2004); y iii) estudios bsicos desarrollados en el ltimo siglo han permitido cultivar algunos hongos ECM en medios sintticos, lo que ha facilitado su manipulacin (Prez-Moreno et al., 2002). As, a la fecha la produccin de inoculantes basados en hongos ECM ha cobrado una enorme importancia en los pases con tradicin forestal, como Suecia, Finlandia, Canad y Estados Unidos de Amrica. En pases como Mxico, este tipo de acercamiento se encuentra en desarrollo y posee un enorme potencial, como ser discutido en el presente escrito. En trminos generales, la micorriza es una de las asociaciones simbiticas de mayor importancia ecolgica y fisiolgica establecida por las races de las plantas. Las asociaciones micorrzicas se encuentran distribuidas actualmente, en todos los ecosistemas terrestres. En ellos, estas simbiosis juegan un importante papel en su funcionamiento y mantenimiento, tanto en las regiones templadas (Allen, 1993; Heijden et al., 1998; Read y Prez-Moreno, 2003) como en las tropicales (Newberry et al., 1997; Moyersoen et al., 1998 a y b; Prez Moreno y Ferrera-Cerrato, 1997). Una de las asociaciones micorrzicas ms importantes es la ectomicorriza, trmino propuesto por Peyronel et al. (1969). En esta simbiosis, el hongo asociado cubre las races cortas, formando un manto (o vaina). Las hifas crecen, de este manto, hacia afuera en el sustrato y hacia dentro, entre los espacios intersticiales de las clulas corticales de la raz, as forman, un complejo sistema intercelular denominadored de Hartig. Generalmente, no existe penetracin intracelular a las plantas asociadas (Smith y Read, 1997). Por lo tanto, las estructuras diagnsticas, de este tipo de micorriza son: i) el manto fngico, ii) la red de Hartig y iii) el micelio externo vegetativo que emerge a partir de las races. El presente escrito presenta informacin relacionada con la distribucin biogeogrfica y relevancia ecolgica de la simbiosis ECM. Posteriormente, se presentan aspectos generales de la biotecnologa de los hongos ECM, se describen los principales tipos de inculo ECM, se discuten las ventajas y limitaciones del uso de cada uno de ellos y finalmente se analizan sus perspectivas en Mxico.

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Distribucin biogeogrfica y relevancia ecolgica de los hongos ECM La simbiosis ECM se establece principalmente entre alrededor de 3000 especies de plantas angiospermas y gimnospermas y 5000 especies de hongos, principalmente de los grupos de los Basidiomycetes y Ascomycetes (Malloch et al., 1980; Molina et al., 1992). Esta simbiosis es caracterstica de familias de rboles y arbustos, los cuales incluyen a especies pertenecientes a las familias Pinaceae, Cupressaceae, Fagaceae, Betulaceae y Salicaceae (Malloch et al., 1980). La mayora de las plantas que forman ectomicorriza, son especies dominantes en los bosques templados boreales y australes del globo (Cuadro 1, Figura 1). As, grandes zonas del Hemisferio Norte se encuentran cubiertas por pinceas que forman simbiosis ECM, principalmente adscritas a los gneros Abies, Larix, Pinus y Picea. En dichas reas la ECM es la simbiosis dominante en biomas donde dominan suelos tipo moder o mull, con altos contenidos orgnicos, lo que ha promovido cierta capacidad saproftica en ellos (Prez-Moreno y Read, 2000, 2001a y b). En zonas ms cercanas al Ecuador se encuentran Cedrus, Juniperus y Quercus. Algunas angiospermas de estas zonas, como Alnus, Betula, Carpinus, Carya, Castanea, Fagus, Ostrya, Populus, Quercus, Tylia y Salix, tambin son ECM (Harley y Smith, 1983; Smith y Read, 1997). Las plantas que establecen la simbiosis ECM forman una franja que va desde Japn, a travs de Eurasia, hasta Norteamrica (Read et al., 2004). En el continente asitico, esta distribucin incluye zonas del Himalaya, China, Indonesia y Australia (Figura 1). En el continente americano, se ha reconocido que todas las especies de Nothofagus de Sudamrica son ECM (Meyer, 1973; Palfner, 2001). Adems, algunos rboles tropicales y subtropicales en Amrica, Africa, Asia y Australia tambin establecen simbiosis ECM. En los trpicos, por lo menos, se han reportado 46 gneros, distribuidos en 13 familias (Cuadro 2), capaces de formar ectomicorriza (Alexander y Hgberg, 1986; Lee et al., 1997; Moyersoen et al., 1998a y b; Prez-Moreno, 1998; Newberry et al., 2000). Dentro de las especies de hongos ECM, se incluyen todas las especies pertenecientes a importantes familias de Basidiomycetes dentro de las que se incluyen Amanitaceae, Russulaceae, Paxillaceae, Boletaceae y Strobilomycetaceae, las cuales parecen haber evolucionado como micobiontes. Algunas especies, como Pisolithus tinctorius (Pers.) Cooker, tienen la habilidad de formar simbiosis ECM con una gran cantidad de plantas, incluyendo especies vegetales de diferentes familias. En contraste, otras especies fngicas se asocian con un restringido nmero de especies vegetales que integran a un gnero o una familia; por ejemplo, Suillus coloniza y forma simbiosis restringida en la familia Pinaceae (Molina et al., 1992). Existen estudios de campo en donde se estima que de 10 a 15% de la produccin total de los fotosintatos de los fitobiontes de ecosistemas templados se transfiere a los simbiontes fngicos (Vogt et al., 1991). A pesar de este elevado costo energtico, la presencia de los micobiontes es obligada en los bosques naturales templados, lo cual denota la relevancia de la simbiosis para el mantenimiento de estos sistemas (Brundett, 1991). Una de las principales razones de esta presencia obligada, se fundamenta en la actividad de la ectomicorriza en la absorcin nutrimental en los rboles de zonas templadas (Vogt et al., 1982). Adems, dicha simbiosis proporciona a los fitobiontes mayor captacin de agua, fitohormonas (Harley y Smith, 1983; Marks y Kozlowski, 1973; Smith y Read, 1997), incremento en la longevidad de las races (Marshall y Perry, 1987) y proteccin contra patgenos (Whipps, 2004). Esta estrecha relacin entre simbiontes origina, frecuentemente, una dependencia de las plantas asociadas, lo que origina que la ECM usualmente es una relacin obligada. Gneros completos de rboles como Abies, Betula, Pinus, Picea, Fagus y Quercus, que cubren extensas reas del planeta, no podran

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sobrevivir en condiciones naturales en ausencia de la simbiosis ECM (Meyer, 1973; Smith y Read, 1997; Prez-Moreno, 1998).

Figura 1. Distribucin de los principales biomas terrestres y tipos de micorrriza dominantes en cada uno de ellos. ECM = ectomicorriza, MER = micorriza ericoide, NM = no micorrzicas, MA= micorriza arbuscular. Aprciese que los dos tipos de micorriza ms importantes desde el punto de vista biogeogrfico, a nivel mundial, son la ectomicorriza y la micorriza arbuscular (Fuente: Read, Leake y Prez-Moreno, 2004).

Aspectos biotecnolgicos Desde el siglo XVIII se efectuaron intentos para utilizar hongos especficos para formar ectomicorrizas en plntulas de encinos en Europa. El objetivo inicial de dichas inoculaciones fue incrementar la produccin natural de trufas, que son hongos que tradicionalmente han tenido un alto valor econmico por su enorme importancia gastronmica en pases mediterrneos como Italia, Espaa y Francia y que se asocian con dichos rboles. Las trufas eran colocadas en los cajetes donde las plntulas de los encinos eran sembradas en nuevas plantaciones (Malencon, 1938; Trappe, 1977). Interesantemente esto ocurri mucho antes de que el mismo vocablo micorriza fuera acuado, hecho que se dio en 1885 (Frank, 1885). Desde esta fecha, hasta finales de 1970 el inters de la aplicacin prctica de los hongos micorrzicos, en general, se concentr principalmente en la utilizacin de los hongos ECM en la produccin forestal (Mikola, 1980). Las fuentes principales de inculo ECM que han sido utilizadas,

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estuvieron constituidas en un inicio, por las esporas o los carpforos ECM molidos, frescos o secos, y despus por cultivos miceliales (Vozzo and Hackslayo, 1971; Marx, 1980; Mikola, 1980; Brundrett et al,. 1996). En el caso de los inoculantes basados en esporas, se han utilizado principalmente Gasteromycetes, debido al gran nmero de esporas que pueden llegar a producir, el cual pueden ser del orden de 106 a 109 esporas por gramo de cuerpos fructferos molidos (Marx y Bryan, 1975).

Cuadro 1. Gneros tpicos de plantas y hongos de zonas templadas y boreales que establecen simbiosis ectomicorrzicas. * Hongos asociados Plantas asociadas

Basidiomycotina Alpova, Amanita, Astraeus, Boletus Cantharellus, Cortinarius, Entoloma Gastroboletus, Gauteria, Gomphidius, Hebeloma, Hygrophorus, Hymenogaster, Hysterangium, Inocybe, Laccaria, Lactarius, Leccinum, Lycoperdon, Martellia, Paxillus, Pisolithus, Rhizopogon, Rozites, Russula, Scleroderman, Suillus, Tylopilus, Tricholoma, Xerocomus Ascomycotina Balsamia, Elaphomyces, Genea, Geopora, Helvella, Hydnotria, Sphaerosporella, Tuber Zygomycotina Endogone Deuteromycotina Cenococcum

Abies, Alnus, Betula Corylus, Eucalyptus, Fagus, Larix, Picea, Pinus, Populus, Pseudotsuga, Quercus, Salix, Tsuga

Abies, Betula, Corylus, Eucalyptus, Fagus, Larix, Pinus, Populus, Pseudotsuga, Quercus, Salix, Tsuga,

Eucalyptus, Pinus, Pseudotsuga

Abies, Larix, Pinus, Polygonum, Pseudotsuga * Basado principalmente en Harley y Smith (1983), Miller (1984), Castellano y Molina (1989) y Smith y Read (1997).

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Cuadro 2. Familias y gneros de plantas tropicales que establecen simbiosis ectomicorrzicas y hongos asociados.*
Plantas asociadas Leguminosae Acacia, Afzelia Aldinia, Anthonota, Aphanocalyx, Berlinia, Brachystegia, Didolotia, Eperua, Gilbertiodendron, Inga, Instia, Isoberlinia, Julbernardia, Macrolobium, Microberlinia, Monopetalanthus, Ormosia , Paraberlinia, Paramacrolobium, Pericopsis, Tetraberlinia Casuarinaceae Casuarina, Allocasuarina Dipterocarpaceae Anisoptera, Dipterocarpus, Dryobalanopus, Hopea, Marquesia, Monotes, Shorea, Vateria Euphorbiaceae Uapaca Hongos asociados Amanita, Cantharellus, Gyrodon,Gyroporus, Inocybe,Lactarius, Porphyrellus, Russula, Scleroderma, Sclerogaster, Strobilomyces, Xerocomus

Amanita , Elaphomyces, Hysterangium, Laccaria, Paxillus, Pisolithus, Scleroderma, Thelephora

Agaricus, Amanita, Boletus, Cantharellus, Geastrum, Lactarius, Russula, Sclerodema Amanita, Austrogautieria, Boletellus, Cantharellus, Coltricia, Elasmomyces, Lactarius, Pulveroboletus, Russula, Scleroderma, Tubosaeta, Xerocomus Boletus, Boletellus, Gyroporus, Leccinum, Tylopilus nr Cenococcum, Hebeloma, Laccaria, Pisolithus, Scleroderma, Setchelliogaster, nr Cantharellus

Fagaceae Castaneopsis, Quercus, Lithocarpus, Pasania Gnetaceae Gnetum

Myrtaceae Campomanesia, Eucalyptus, Eugenia, Melaleuca, Tristania Nyctaginaceae Neea, Pisonia, Torrubia Polygonaceae Coccoloba Pinaceae Pinus

Amanita, Boletus, Coltricia, Gyroporus, Hebeloma, Lycoperdon, Pisolithus, Rhizopogon, Scleroderma, Suillus, Thelephora, Tylopilus Proteaceae Faurea Nr Sapotaceae Glycoxylon nr Sapindaceae Allophyllus, Nephelium nr * Recopilado principalmente de Alexander (1985; 1990), Alexander y Hgberg (1986); Amakiri y Ojobo (1985), Ba et al.(1990), Cabrera et al. (1990), Ekwebelam y Odeyinde (1985), Founoune et al. (2002); Green y Newbery (2001a y b); Hgberg (1982), Hgberg y Piearce (1986), Ivory (1980), Janos (1983; 1985), Lee et al., (1990; 1997); Moyersoen et al. (1998a y b), Muchovej et. al. (1990), Newberry et al. (2000), Onguene y Kuyper (2002), Prez-Moreno (1998), Rives et al. (1990); Theodorou y Redell (1991), Thoen y Ducousso (1990). nr= no reportados.

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Actualmente, en la preparacin de inoculantes comerciales basados en hongos ECM, se continan utilizando diversas especies de hongos Gasteromycetes, dentro de los gneros Pisolithus, Scleroderma y Rhizopogon, y adicionalmente algunos Agaricales, dentro de los gneros Laccaria, Suillus y Paxillus (Cuadro 3). Tanto las esporas como los cultivos miceliales de dichos hongos han sido utilizados para inocular semillas o plantas de importancia forestal tanto en regiones templadas como tropicales (Mikola, 1980; Castellano y Molina, 1989; Brundrett et al., 1996). A la fecha existen diversas compaas a nivel mundial que efectan la comercializacin de diversos productos que contienen propgulos de diversos hongos ECM. Sin embargo, el hongo ECM que ha sido utilizado con mayor frecuencia en la preparacin de dichos inoculantes comerciales, es Pisolithus tinctorius (Pers.) Coker et Couch (sinnimo P. arhizus (Scop.: Pers.) Rauschert). Este tiene una amplia distribucin a nivel mundial, y forma simbiosis ECM con una gran cantidad de gneros de angiospermas y gimnospermas (Cairney y Chambers, 1997), dentro de los cuales se incluyen, principalmente, Abies (Vaario et al., 1999), Acacia (Duponnois y Plenchette, 2003), Afzelia (Ba et al., 1994), Castanea (Martins et al., 1996; 1997), Castanopsis (Tam y Griffiths, 1994), Dipterocarp (Kanchanaprayudh et al., 2003), Eucalyptus (Dell et al., 1994; Xianheng et al., 1998), Picea (Vodnik y Gogala, 1994), Pinus (Tam y Griffiths, 1994; Rincn et al., 2001), Pseudotsuga (Parlad et al., 1995) y Shorea (Kanchanaprayudh et al., 2003). Como podra esperarse, este hongo ha sido localizado asociado con dichas plantas, en un amplio espectro de habitats, los cuales incluyen bosques, reas urbanas, huertos y suelos erosionados, mineros o con altas concentraciones salinas (Malloch y Kuja, 1979). La amplia plasticidad ecolgica de esta especie, ha sido uno de los factores de xito de su utilizacin biotecnolgica en productos comerciales. Esta especie, que segn la evidencia experimental ms reciente es al parecer en realidad un complejo de especies (Anderson et al., 1998), ha sido utilizada ampliamente en programas de inoculacin forestal durante ms de 30 aos y ha demostrado ser particularmente efectiva en mejorar el crecimiento vegetal en sitios con baja precipitacin o que presentan altas temperaturas (Mikola, 1980; Marx et al., 1985). En Mxico, en el Colegio de Postgraduados, se han efectuado diversas investigaciones tendientes a la utilizacin de cepas nativas de hongos ECM tendientes a su utilizacin en plantaciones comerciales, principalmente de pinos y eucaliptos, y en programas de reforestacin. Los hongos que han sido estudiados han incluido principalmente: Amanita caesarea, Amanita rubescens, Boletus edulis, Laccaria laccata, Lactarius deliciosus, Lactarius salmonicolor, Hebeloma fastibile, Suillus Tipos de inoculantes ECM Debido al carcter obligatorio de la simbiosis ECM con la mayora de la plantas con las que se establece, desde principios de siglo se ha intentado su inoculacin controlada (Norkrans, 1950, 1953; Melin y Nilsson, 1950, 1953; Mikola, 1970). Para inducir la micorrizacin en especies de importancia forestal, se han utilizado principalmente tres tipos de inculo: i) tierra de monte, ii) esporas de hongos ECM y iii) micelio ECM. Enseguida se describen cada uno de ellos y las posibles ventajas o desventajas de los mismos.

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Cuadro 3. Inoculantes comerciales existentes en el mercado actualmente, basados en hongos ectomicorrzicos (ECM) y compaas productoras. _______________________________________________________________________________ Nombre Comercial del inoculante Contenido de especies de hongos ECM Compaa y pas de origen

AgBioectos Ascend EM Biogrow Diehard Ecto Root Dip Ectospor

Pisolithus tinctorius y Rhizopogon spp. Pisolithus tinctorius Rhizopogon sp.

Agbio, Inc. Colorado, EUA Bioscientific, Inc. Arizona, EUA Mycorrhizal Applications, Oregon, EUA Horticultural Allliance, Florida, EUA Tecnologa Naturales Internacional, Mxico, D.F. Antoniucci vivero forestal, Argentina

Pisolithus tinctorius, Rhizopogon spp. Laccaria sp., Scleroderma sp. Pisolithus tinctorius, Laccaria spp. y Scleroderma spp. Scleroderma vulgare, Rhizopongon luteolus, Pisolithus tinctorius, Boletus edulis y Suillus luteus Laccaria spp. Pisolithus tinctorius, Rhizopogon spp, Scleroderma spp. Pisolithus tinctorius y Scleroderma texensis Pisolithus tinctorius Amanita muscaria y Amanita pantherina

Micorriza

Mycorrhizal Landscape Inoculant MycorTree- EctoInyectable Ecto-Rhyza Sporeprints Terravital -Bioremed -Boreal

Bioorganics, Oregon, EUA Plant Health Care, Pittsburg, EUA Plant Health Care, Pittsburg, EUA The Sporeworks, Tennessee, EUA

Laccaria laccata, Plant Works Ltd, Paxillus involutus Kent, Inglaterra Hebeloma sp., Scleroderma citrinum _______________________________________________________________________________ EUA= Estados Unidos de Amrica pseudobrevipes, Russula brevipes y Pisolithus tinctorius (Prez.Moreno, 1992; Prez-Moreno et al., 2002; Martnez-Reyes et al., 2002; Carrera-Nieva, 2004; Garca-Rodrguez, 2004).

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i) Tierra de monte. Las capas superficiales del suelo forestal (por lo comn, el material orgnico que abarca los primeros 10 cm) se han utilizado por mucho tiempo como fuente de inculo ECM, en los pases denominados del tercer mundo. Esta es la fuente que tradicionalmente ha sido usada en Mxico con mayor frecuencia. Las principales desventajas de esta fuente son las siguientes: 1) necesidad de grandes cantidades de suelo, con la subsecuente erosin y deterioro ambiental en las reas de extraccin; 2) inconsistencia en la calidad del inculo, debido principalmente a la distribucin heterognea de los propgulos micorrzicos en condiciones naturales; y 3) probabilidad de introduccin de microorganismos patgenos y malezas en las reas de produccin de plntulas (Prez-Moreno et al., 2002). Por estas razones, diversos autores (e. gr. Castellano y Molina, 1989) consideran que este mtodo no resulta recomendable, a menos que no se cuente con otras formas de inculo. ii) Esporas de hongos ECM. Las esporas de hongos ECM se han usado ampliamente en la produccin de plantas en los denominados pases desarrollados (Castellano, 1994). Con mayor frecuencia, se han utilizado cuerpos fructferos de Gasteromycetes, como Pisolithus, Scleroderma o Rhizopogon, los cuales se producen en abundancia y contienen grandes cantidades de esporas. En el caso de hongos que producen esporas en menor cantidad, como Russula, Suillus, Laccaria, Hebeloma, Boletus y Amanita, existe el potencial de utilizar, de manera adicional a las esporas, los pleos de los cuerpos fructferos como fuente de inculo. En este sentido, en el Colegio de Postgraduados, el autor del presente escrito desarrolla una lnea de investigacin que tiene como objetivo generar informacin bsica, relacionada con el uso de esporas para especies de hongos y plantas ECM mexicanas, tendiente al desarrollo de esta biotecnologa en Mxico. Por lo general, se recomienda el uso de esporas frescas siempre que sea posible; sin embargo, se ha demostrado que esporas refrigeradas a 5C pueden mantener una viabilidad aceptable hasta por un periodo de un ao. Las esporas de los hongos ECM se han aplicado en soluciones con agua destilada estril, mezcladas con arena (usualmente en proporciones 1/100, peso/peso), como recubrimientos en semillas o comprimidas con arcillas que actan como acarreadores (Brundett et al., 1996). En todos los casos, resulta importante hacer conteos del nmero de esporas aplicadas, mediante el uso de un contador de glbulos rojos o hematocitmetro. Un criterio, recomendado por Trappe (1977), al seleccionar las especies a emplearse como fuente de inculo ECM, es la comestibilidad de las mismas. En Mxico, se conocen ms de 220 especies de hongos comestibles silvestres (Villarreal y Prez Moreno, 1989). Ms de 100 de estas especies son objeto de autoconsumo, principalmente en la poblacin rural del pas; y ms de diez de ellas, tienen un alto valor en los mercados internacionales en Estados Unidos de Amrica, Canad y diversos pases europeos y del sureste asitico (Prez Moreno y Ferrera-Cerrato, 1996). Si se desarrollara un programa de inoculacin con especies de hongos comestibles en las especies de rboles utilizadas en plantaciones o reforestaciones, se podra tener, previo a los aprovechamientos forestales, un producto forestal no maderable de alto valor como alimento. Las principales desventajas de la utilizacin de esporas como fuente de inculo son la corta disponibilidad de cuerpos fructferos durante el ao, alrededor de dos a tres meses, y las posibles variaciones genticas de las esporas al variar el sitio o temporada de recoleccin. A pesar de ello esta fuente de inculo tiene amplias perspectivas de uso en Mxico, debido principalmente a su bajo costo y a su relativa facilidad de manejo. iii) Micelio de hongos ECM. Esta es una de las fuentes de inculo que ha recibido mayor atencin en las ltimas dcadas. El micelio fngico producido en condiciones de cultivo estriles puede utilizarse directamente como inculo o puede mezclarse con

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diversos acarreadores inertes como granos de cereales, mezclas de turba o vermiculita (Brundett et al., 1996) o arcillas. La principal limitacin de esta tcnica, junto con su alto costo, es que el aislamiento de los hongos ECM en medios sintticos se encuentra, a la fecha, muy limitado. De alrededor de 5000 especies de hongos ECM conocidos ( Molina et al., 1992), menos de 2% se han aislado exitosamente. Dentro de gneros ECM importantes, como Cortinarius, Russula, Lactarius e Inocybe, se han aislado slo un nmero reducido de especies. A pesar de ello, esta fuente de inculo es la que ms se emplea actualmente en los pases con amplia tradicin forestal. La principal desventaja de esta fuente de inculo ECM es su alto costo. Sin embargo, tiene la ventaja de que puede disponerse de inculo en cualquier poca del ao, lo cual facilita su manejo y aplicacin prctica. Actualmente, existen diversas compaas internacionales que comercializan micelio de hongos ECM, esporas o una mezcla de ambos (Cuadro 3). Independientemente de las limitaciones que pudiera tener la produccin de inoculantes basados en micelio o esporas de hongos ECM, las ventajas que presentan, originan que esta biotecnologa tiene un gran potencial de aplicacin en Mxico. Literatura Citada
Alexander, I.J. 1985. Mycorrhizas of West African forest trees. In Molina R. (Ed.) Proceedings of the 6th North American Conference on Mycorrhizae. Oregon State University and United States Department of Agriculture, Corvallis, Oregon, EEUU. pp. 447. Alexander, I.J. 1990. The ecology of ectomycorrhizal legumes in Africa. In: 8th North American Conference on Mycorrhizae. Jackson, Wyoming, EEUU. pp. 1. Alexander, I.J. and P. Hgberg. 1986. Ectomycorrhizas of tropical angiospermous trees. New Phytol. 102: 541-549. Allen, M. 1993. The ecology of mycorrhizae. Cambridge University Press. Cambridge, England. Amakiri, M.A. and L.I. Ojobo. 1985. Nitrogen, fertilization and ectomycorrhizal formation of Pinus caribea (Morelet) seedlings. In Molina R. (Ed.) Proceedings of the 6th North American Conference on Mycorrhizae. Oregon State University and United States Department of Agriculture, Corvallis, Oregon, EEUU. pp. 33. Anderson, I.C., S.M. Chambers and J.W.G. Cairney. 1998. Molecular determination of genetic variation in Pisolithus isolates from a defined region in New South Wales, Australia. New Phytol. 138: 151-162. Ba, A.M., J. Garbaye and J. Dexheimer. 1990. Influence of soil propagules on the sequence of ectomycorrhizal infection on Afzelia africana Sm. seedlings. In 8th North American Conference on Mycorrhizae. Jackson, Wyoming. EEUU. pp. 11. Ba, A.M., J. Garbaye and J. Dexheimer. 1994. The influence of culture conditions on mycorrhiza formation between the ectomycorrhizal fungus Pisolithus sp. and Afzelia africana Sm. Seedlings. Mycorrhiza 4: 121-129. Brundett, M. 1991. Mycorrhizas in natural ecosystems. Adv. Ecol. Res. 21: 171- 313. Brundett, M., N. Bougher, B. Dell, T. Grove and N. Malajczuk. 1996. Working with mycorrhizas in forestry and agriculture. Australian Center for International Agricultural Research. Canberra, Australia. Cabrera, T., H. Iglesias, M. Ruiz, S. Herrera y A.M. Sotolongo. 1990. Micorrizas de Coccoloba uvifera Jacq. En Resmenes del V Congreso Latinoamericano de Botnica, La Habana, Cuba. pp. 26. Cairney, J.W.G. and S.M. Chambers. 1997. Interactions between Pisolithus tinctorius and its hosts: a review of current knowledge. Mycorrhiza 7: 117-131. Carrera-Nieva, A. 2004. Inoculacin con hongos ectomicorrzicos en Pinus patula Schl. et Cham. y Pinus greggii Engelm. en invernadero. Universidad Autnoma Chapingo, Tesis de Maestra en Ciencias Forestales, Chapingo, Mxico. 195 pp.

61

Castellano M. A. 1994. Current status of outplanting studies using ectomycorrhiza-inoculated forest trees. pp. 261-281. In: Pfleger F., Linderman B. (eds.) The American Phytopathological Society, St. Paul, Minnessota. Castellano M.A. and R. Molina. 1989. The biological component: nursery pests and mycorrhizae. pp. 101-167. In: Landis T.D., R.W. Tinus, S.E. McDonald and J.P. Barnett (eds.). The container tree nursery manual, Vol 5. USDA, Washington, D.C. Dell, B., N. Malajczuk , N. L. Bougher and G. Thomson. 1994. Development and function of Pisolithus and Scleroderma ectomycorrhizas formed in vivo with Allocasuarina, Casuarina and Eucalyptus. Mycorrhiza 5: 129-138. Duponnois, R. and C. Plenchette. 2003. A mycorrhiza helper bacterium enhances ectomycorrhizal and endomycorrhizal symbiosis of Australian Acacia species. Mycorrhiza 13: 85 91. Ekwebelam, S.A. and M.A. Odeyinde. 1985. Field response of Pinus species inocu1ated with ectomycorrhizal fungi in Nigeria. En Molina R. (Ed.) Proceedings of the 6th North American Conference on Mycorrhizae. Oregon State University and United States Department of Agriculture, Corvallis, Oregon, EEUU. pp. 220. Founoune, H., R. Duponnois, A.M. Ba and F. El Bouami F. 2002. Influence of the dual arbuscular endomycorrhizal/ectomycorrhizal symbiosis on the growth of Acacia holosericea (A. Cunn. ex G. Don) in glasshouse conditions. Annals of Forest Science 59 : 93-98. Frank, A.B. 1885. Ueber die auf Wurzelsymbiose beruhende Ernhrung gewisser Baume durch unterirdische Pilze (On the root-symbiosis-depending nutrition through hypogeous fungi of certain trees). Ber. Deut. Bot. Gesell. 3: 128-145 (traducido por by J.M.Trappe, Proc. 6th N. Amer. Conf. Myc.:18-25). Garcia-Rodrguez, L. 2004. Propagacin micelial del hongo ectomicorrzico Pisolithus tinctorius, e inoculacin de brinzales de Eucalyptus urophylla S.T. Blake. Tesis de Maestra, Colegio de Postgraduados, Montecillo, Mxico (por concluirse). Green, J.J. and D.M. Newbery. 2001a. Light and seed size affect establishment of grove-forming ectomycorrhizal rain forest tree species. New Phytologist 151 : 271-289. Green, J.J. and D.M. Newbery. 2001b. Shade and leaf loss establishment of grove-forming ectomycorrhizal rain forest tree species. New Phytologist 151 : 291-309. Harley, J. L. and S. E. Smith. 1983. Mycorrhizal symbiosis. Academic Press. London. Heijden, M. G., A. van der, J.N. Klironomos, M. Ursic, P. Moutoglis, R. Streitwolf-Engell, T. Boller, A. Wiemken and I.R. Sanders. 1998. Mycorrhizal fungal diversity determines plant biodiversity, ecosystem variability and productivity. Nature 396: 69-72. Hgberg, P. 1982. Mycorrhizal associations in some woodland and forest trees and shrubs in Tanzania. New Phytol. 92: 407-415. Hgberg, P. and O.D. Piearce. 1986. Mycorrhizas in Zambian trees in relation to host taxonomy, vegetation type and successionaI patterns. J. Ecol. 74: 775-785. Ivory, M.H. 1980. Ectomycorrhizal fungi of lowland tropical pines in natural forests and exotic plantations. In Mikola P. (Ed.) Tropical Mycorrhizal Research. Clarendon Press, Oxford, Reino Unido. pp. 107-117. Janos, D.P. 1983. Tropical mycorrhizas, nutrient cycles and plant growth. In Sutton, S.L., T.C. Whitmore and A.C. Chadwick (Eds.) Tropical rain forest: ecology and management. Blackwell Scientific Publications. Oxford, Reino Unido. pp. 327-345. Janos, D.P. 1985. Mycorrhizal fungi: agents or symptoms of tropical community composition. In Molina, R. (Ed.) Proceedings of the 6th North American Conference on Mycorrhizae. Oregon State University and United States Department of Agriculture, Corvallis, Oregon, EEUU. pp.98-103. Kanchanaprayudh, J., Z. Zhou, S. Yomyart, P. Sihanonth and T. Hogetsu. 2003. Molecular phylogeny of ectomycorrhizal Pisolithus fungi associated with pine, dipterocarp, and eucalyptus trees in Thailand. Mycoscience 44: 287 294. Lee, S.S. 1990. The mycorrhizal association of the Dipterocarpaceae in the tropical rain forests of Malaysia. Ambio 19: 383-385. Lee, L.S., I.J. Alexander and R. Watling. 1997. Ectomycorrhizas and putative ectomycorrhizal fungi of Shorea leprosula Miq (Dipterocarpaceae). Mycorrhiza 7: 63-81.

62

Malencon, G. 1938. Les truffes europennes. Revue Mycologie 3 : 1-92. Malloch, D. and A.L. Kuja. 1979. Occurrence of the ectomycorrhizal fungus Pisolithus tinctorius in Ontario. Canadian Journal of Botany 57: 1848- 1849. Malloch, D.W., K.A. Pirozynski and P.H. Raven. 1980. Ecological and evolutionary significance of mycorrhizal symbioses in vascular plants (A review). Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 21132118. Marks, G.C. and T.T. Kozlowski. (eds.) 1973. Ectomycorrhizae: their ecology and physiology. Academic Press, New York. Martinez-Reyes, M., J. Prez-Moreno, A. Aldrete y V.M. Cetina-Alcala. 2002. Potencial biotecnolgico de especies mexicanas de hongos etomicorrzicos comestibles para inoculantes forestales a base de esporas. In: Prez-Moreno J., J. Alvarado-Lpez R. Ferrera-Cerrato (Eds.) Produccin y control de calidad de inoculantes agrcolas y forestales. Colegio de Postgraduados y Comit Mexicano de Inoculantes Agrcolas y Forestales. Montecillo, Texcoco, Estado de Mxico. pp. 103-104. Martins, A., A. Casimiro and M.S. Pais. 1997. Influence of mycorrhization on physiological parameters of micropropagated Castanea sativa Mill. Plants. Mycorrhiza 7: 161- 165. Martins, A., J. Barroso and M.S. Pais. 1996. Effect of ectomycorrhizal fungi on survival and growth of micropropagated plants and seedlings of Castanea sativa Mill. Mycorrhiza 6: 265-270. Marx, D.H. 1980. Ectomycorrhizal fungus inoculations: a tool for improving forestation practices. In: Mikola, P. (ed.) Tropical mycorrhizal research. Oxford University Press, Oxford, United Kingdom. pp. 13-71. Marx, D.H. and W.C. Bryan. 1975. Growth and ectomycorrhizal development of loblolly pine seedlings in fumigated soil infested with the fungal symbiont Pisolithus tinctorius. Forest Science 21: 245-254. Marx, D.H., A. Hedin and S.F.P. Toe. 1985. Field performance of Pinus caribaea var. hondurensis seedlings with specific ectomycorrhizae and fertilizer after three yr on a savanna site in Liberia. Forest Ecology and Management 13: 1-25. Melin, E. and H. Nilssson. 1950. Transfer of radioactive phosphorus to pine seedlings by means of mycorrhizal hyphae. Physiologia Plantarum 3: 88-92. Melin, E. and H. Nilssson. 1953. Transfer of labeled nitrogen from glutamic acid to pine seedlings through the mycelium of Boletinus variegatus (S.W.) Fr. Nature 171: 134. Meyer, F.H. 1973. Distribution of ectomycorrhizae in native and man-made forests. pp. 79-105. In: Marks, G.C. and T.T. Kozlowski. (eds.). Ectomycorrhizae: their ecology and physiology. Academic Press. New York. Mikola, P. 1970. Mycorrhizal inoculation in afforestation. International Review of Forest Research 3: 123-196. Mikola, P. (Ed.). 1980. Tropical mycorrhizal research. Oxford University Press, Oxford, United Kingdom. Miller, O.K. Jr. 1984. Taxonomy of ecto and ectendomycorrhizal fungi. In: N.C. Shenck (Ed.) Methods and principles of mycorrhizal research. 2nd edition. The American Phytopathological Society, Saint Paul, Minnesota. pp. 91-102. Molina, R., H. Massicote and J.M. Trappe. 1992. Specificity phenomena in mycorrhizal symbioses: community-ecological consequences and practical implications. pp. 357-423. In: Allen, M.F. (ed.). Mycorrhizal functioning an integrative plant-fungal process. Chapman and Hall, New York. Moyersoen, B., A.H. Fitter and I.J. Alexander. 1998a. Spatial distribution of ectomycorrhizas and arbuscular mycorrhizas in Korup National Park rain forest, Cameroon, in relation to edaphic parameters. New Phytol. 139: 311-320. Moyersoen, B., I.J. Alexander and A.H. Fitter. 1998b. Phosphorus nutrition of ectomycorrhizal and arbuscular mycorrhizal tree seedlings from a lowland tropical rainforest in Korup National Park, Cameroon. J. Trop. Ecol. 14: 47-61.

63

Muchovej, R.M.C., M.C.M. Kasaya and J.J. Muchovej. 1990. Effect of time of inoculation on ectomycorrhizal colonization of Eucalyptus grandis by Pisolithus tinctorius or Paxillus involutus. In 8th North American Conference on Mycorrhizae. Jackson, Wyoming, EEUU. pp. 219. Newberry, D.M., I.J. Alexander and J.A. Rother. 1997. Phosphorus dynamics in a lowland African rain forest. The influence of ectomycorrhizal trees. Ecol. Monogr. 67: 367-409. Newberry, D.M., I.J. Alexander and J.A. Rother. 2000. Does proximity to conspecific adults influence the establishment of ectomycorrhizal trees in rain forest? New Phytol. 147: 401409. Norkrans, B. 1950. Studies in growth and cellulolytic enzymes of Tricholoma. Symbolae Botanicae Upsaliensis 11.pp. 126. Norkrans, B. 1953. The effect of glutamic acid, aspartic acid, and related compounds on the growth of certain Tricholoma species. Physiol. Plant. 6: 584-593. Onguene, N.A. and T.W. Kuyper. 2002. Importance of the ectomycorrhizal network for seedling survival and ectomycorrhiza formation in rain forests of south Cameroon. Mycorrhiza 12: 13-17. Palfner, G. 2001. Taxonomische studien an ektomykorrhizen aus den Nothofagus-Wldern Mittelsdchiles. Bibliotheca Mycologica Band 190. J. Cramer: Berlin, Stuttgart. Parlad, J., I. F. lvarez and J. Pera. 1995. Ability of native ectomycorrhizal fungi from northern Spain to colonize Douglas-fir and other introduced conifers. Mycorrhiza 6: 51-55. Prez-Moreno, J. 1992. Aspectos ecolgicos, aislamiento de cepas, sntesis de micorriza y pruebas in vitro contra patgenos de diversos hongos ectomicorrzicos del Parque Nacional Zoquiapan, Edo. de Mxico. Tesis de maestra en Ciencias, Colegio de Postgraduados, Montecillo, Texcoco, Estado de Mxico. Perez-Moreno, J. 1998. La ectomicorriza una simbiosis mutualista en el sostenimiento de Gaia, el planeta viviente. pp. 93-120. In: Ferrera-Cerrato, R. y J. Perez-Moreno. (eds.). Manejo de agroecosistemas sostenibles. Universidad Veracruzana. Xalapa, Ver. Prez-Moreno, J. and D. J. Read. 2000. Mobilization and transfer of nutrients from litter to tree seedlings via the vegetative mycelium of ectomycorrhizal plants. New Phytol. 145: 301309. Prez-Moreno, J. and D. J. Read. 2001b. Nutrient transfer from soil nematodes to plants: a direct pathway provided by the mycorrhizal mycelial network. Plant Cell Environ. 24: 12191226. Prez-Moreno, J. and D. J. Read. 2001a. Exploitation of pollen by mycorrhizal mycelial systems with special reference to nutrient recycling in boreal forests. Proc. R. Soc. London B 268: 1329-1335. Prez-Moreno, J. and R. Ferrera-Cerrato. 1996. (eds.). Nuevos horizontes en agricultura: agroecologa y desarrollo sostenible. Colegio de Postgraduados. Montecillo, estado de Mxico. Prez-Moreno, J. and R. Ferrera-Cerrato. 1996. Sustainability and economic importance of the edible ectomycorrhizal mushrooms. pp. 172-183. In: J. Prez-Moreno y R. Ferrera-Cerrato. (eds.). Nuevos horizontes en agricultura: agroecologa y desarrollo sostenible. Colegio de Postgraduados. Montecillo, estado de Mxico. Prez-Moreno, J. and R. Ferrera-Cerrato. 1997. Mycorrhizal interactions with plants and soil organisms in sustainable agroecosystems. pp. 91-112. In: Brussaard, L. y R. Ferrera Cerrato. (eds.). Soil ecology in sustainable agricultural systems. CRC Lewis Publishers, Boca Raton, Florida. Prez-Moreno, J., J. Alvarado-Lopez y R. Ferrera-Cerrato (Eds.). 2002. Produccin y control de calidad de inoculantes agrcolas y forestales. Colegio de Postgraduados y Comit Mexicano de Inoculantes Agrcolas y Forestales. Montecillo, Texcoco, Estado de Mxico.107 pp. Peyronel, B., B. Fassi, A. Fontana and J.M. Trappe. 1969. Terminology of mycorrhizae. Mycologia 61: 410-411. Read, D.J. and J. Prez-Moreno., 2003. Mycorrhizas and nutrient cycling in ecosystems a journey toward relevance? New Phytologist 157: 475-492.

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Read, D.J., J.R. Leake and J. Prez-Moreno. 2004. Mycorrhizal fungi as drivers of ecosystem processes in heathland and boreal forest biomes. Can. J. Bot. 82: 1243-1263. Rincn, A., I.F. Alvarez and J. Pera. 2001. Inoculation of containerized Pinus pinea L. seedlings with seven ectomycorrhizal fungi. Mycorrhiza 11: 265 271. Rives, C., F. Herrera, F. Ruiz, J.L. Ortz, C. Gonzlez y O. Alvarez. 1990. Produccin del hongo comestible Cantharellus cinnabarinus (Schw.) Schw. en uverales de la isla de la Juventud, Cuba. En Resmenes del V Congreso Latinoamericano de Botnica. La Habana, Cuba. pp. 196. Smith, S.E. and D.J. Read. 1997. Mycorrhizal symbiosis. 2nd edition. Academic Press. London. Tam, P.C.F. and D. A. Griffiths. 1994. Mycorrhizal associations in Hong Kong Fagaceae VI. Growth and nutrient uptake by Castanopsis fissaseedlings inoculated with ectomycorrhizal fungi. Mycorrhiza 4: 169 172. Theodorou, C. and P. Redell. 1991. In vitro synthesis of ectomycorrhizas on Casuarinaceae with a range of mycorrhizal fungi. New Phytol. 118: 279-288. Thoen, D. and M. Ducousso. 1989. Mycorrhizal habit and sc1erogenesis of Phlebopus sudanicus (Gyrodontaceae) in Senegal. Agric. Ecosystems Environ. 28: 519-523. Trappe J.M.1977. Selection of fungi for ectomycorrhizal inoculation in nurseries. Ann. Rev. Phytopathol. 15: 203-222. Trappe, J. M. 1977. Selection of fungi for ectomycorrhizal inoculation in nurseries. Annual Review of Phytopathology 15: 203-222. Vaario, L.M., M. Tanaka, Y. Ide, W.M. Gill and K. Suzuki. 1999. In vitro ectomycorrhiza formation between Abies firma and Pisolithus tinctorius. Mycorrhiza 9: 177 183. Villarreal, L. and J. Prez Moreno. 1989. Los hongos comestibles silvestres de Mxico, un enfoque integral. Micol. Neotrop. Apl. 2: 77-114. Vodnik, D. and N. Gogala. 1994. Seasonal fluctuations of photosynthesis and its pigments in 1year mycorrhized spruce seedlings. Mycorrhiza 4: 277-281. Vogt K.A:, D.A: Publicover, D.J. Vogt. 1991. A critique of the role of ectomycorrhizas in forest ecology. Agric. Ecosystems Environ. 35: 171-190. Vogt, K.A., C.E. Grier, C.E. Meier and R.L. Edmons. 1982. Mycorrhizal role in net primary production and nutrient cycling in Abies amabilis ecosystems in Western Washington. Ecology 63: 370-380. Vozzo, J. A. and E. Hacskaylo. 1971. Inoculation of Pinus caribaea with ectomycorrhizal fungi in Puerto Rico. Forest Science 17: 239-245. Whipps, J.M. 2004. Prospects and limitations for mycorrhizas in biocontrol of root pathogens. Can. J. Bot. 82: 1198-1227. Xianheng L., N. Malajczuk and B. Dell. 1998. Mycorrhiza formation and growth of Eucalyptus globulus seedlings inoculated with spores of various ectomycorrhizal fungi. Mycorrhiza 8: 81 86.

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EVALUACIN DE LA INOCULACIN DE SIMBIONTES EN SOYA (Glycine max) BAJO CONDICIONES DE CAMPO

Ponciano Prez Garca, Arturo Daz Franco y Nicols Maldonado Moreno.
INIFAP-Campo Experimental Ro Bravo. Apdo. 172, Ro Bravo, Tam., Mxico, 88900. faarb@mcirb.net

INTRODUCCION Una de las estrategias para diversificar la agricultura en la zona norte de Tamaulipas, lo representa la soya (Glycine max L. Merrill), un cultivo viable y con antecedentes de buena productividad; aunado a esto, se dispone con la tecnologa de produccin para las reas potenciales de la zona. Actualmente tiene un mercado asegurado, as como diversos apoyos para su comercializacin; esto representa un incentivo para el productor. Adems, un punto importante de este cultivo es que, por su fecha de siembra y cosecha (julio-noviembre), bajo condiciones de riego y buen temporal, no afecta la siembra de maz o sorgo en el ciclo de otoo-invierno, logrndose la rotacin ideal, gramnea leguminosa. De las prcticas agronmicas de produccin de soya, la inoculacin de la semilla con la rizobacteria fijadora de nitrgeno Bradyrhizobium japonium (Elizondo, 1999 y Jimnez et al., 1991) y el tratamiento de la semilla con fungicidas para la proteccin de la plntula contra el complejo de patgenos del suelo (Maldonado, 2002, Sine, 1993 y Wendell, 1988), son procedimientos comunes en las regiones productoras de soya. La efectividad protectora de los fungicidas est bien documentada, en especial cuando se mezclan dos o ms de ellos (Sine, 1993 y Wendell, 1988). No obstante, la efectividad de la simbiosis con B. japonium, puede tener una respuesta variable y depende de diversos factores, como el ambiente, el genotipo y la cepa utilizada (Jimnez et al., 1991 y Tarafdar y Rao, 1997). Por otro lado, el beneficio de la inoculacin de la semilla asociado con el tratamiento con fungicidas no est claro (Revellin et al., 1993). La inoculacin de micorriza vesculo arbuscular (MVA), representa una prctica poco comn en soya. Durn et al. (2001), sealaron que la MVA Glomus intraradices en la variedad Huastecas-200, produjo 21.6% ms rendimiento que el tratamiento con fertilizacin qumica (60-40-00). Adems, existen evidencias de que la combinacin de MVA y B. japonium inducen una sinergia (Crop Watch, 2002; Dubey, 1999 y Young et al., 1988 ). Considerando la escasa informacin de estos simbiontes en soya y en esta zona, as como aprovechando siembras comerciales de este cultivo durante el ciclo primavera-verano, se realiz la presente validacin para determinar el efecto de la inoculacin de los simbiontes y el tratamiento a la semilla, sobre la productividad de la soya en campo.

MATERIALES Y MTODOS El estudio se estableci en dos localidades bajo condiciones de temporal, en el Pozo 4, Valle Hermoso y en La Jarita, Matamoros, Tam., el 19 y 24 de julio de 2003, respectivamente. La siembra fue mecanizada en suelos sin fertilizacin qumica y en

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ambos sitios se us la variedad Huasteca-200. Los tratamientos evaluados fueron: 1) inoculacin a la semilla con B. japonium (Nitragin, Liphatech Inc.) a razn de 400 g/ha (B); 2) inoculacin a la semilla con MVA Glomus intraradices (INIFAP) a dosis de 1 kg/ha (M); 3) Vitavax 200 (20% carboxin y 20% thiram), 250 ml en 100 kg de semilla (V); 4) combinacin de B + M; 5) combinacin de V + B; 6) combinacin de B + M + V; y 7) el testigo absoluto. Los tratamientos se distribuyeron en franjas en una superficie de 16 surcos (0.86 m) de 150 m de longitud en la La Jarita y de seis surcos (0.86 m) por 250 m de longitud en el Pozo 4. La densidad de poblacin en la primera localidad fue de 18 plantas/m lineal (208,800 plantas/ha), mientras que en la segunda fue de 20 plantas/m (232,000 plantas/ha). Dentro de cada tratamiento se marcaron ocho y cinco subparcelas (repeticiones) de cuatro surcos de 5.0 m de longitud, en La Jarita y Pozo 4, respectivamente. En floracin, se realiz un muestreo destructivo de cinco plantas en los surcos laterales de cada subparcela, en ellas se cuantific la biomasa fresca, el nmero y peso de ndulos y biomasa seca. En madurez, se determin la altura de planta, el nmero de vainas y el rendimiento de grano. Los valores del nmero y peso de los ndulos se transformaron mediante x+1. La productividad (kg/ha) se determin cosechando los dos surcos centrales (0.86 m) por 5.00 m de longitud (8.6 m 2). El anlisis estadstico se realiz mediante comparaciones de parcelas apareadas (prueba de t, p < 0.05).

RESULTADOS Y DISCUSIN En el Cuadro 1 se anotan las caractersticas de planta y rendimiento de soya con la variedad Huasteca-200, asociadas con la inoculacin de simbiontes en las dos localidades del norte de Tamaulipas. Se observa que en las dos localidades, la biomasa fresca y seca se incrementaron significativamente con los simbiontes, cuando fueron inoculados solos o en combinacin. La diferencia en promedio de biomasa fresca y seca entre la localidad La Jarita (104.33 y 28.87) y la de Pozo 4 (74.56 y 18.70) se atribuye a la diferencia en el vigor o grosor del tallo entre una y otra localidad, esto debido principalmente a que en La Jarita la poblacin promedio de plantas por metro lineal fue de 18 y en el Pozo 4 fue de 20. Adems se refleja en la altura de planta promedio registrada en una y otra localidad, que para La Jarita fue de 64.03 y para el Pozo 4 de 90.16 cm. El mayor nmero y peso de ndulos en ambas localidades se registraron en los tratamientos con simbiontes solos y asociados; y los menores valores se observan para el tratamiento con el fungicida Vitavax 200 y el testigo absoluto, esto se debe a la pobre poblacin de cepas afines al cultivo, debido a la ausencia de siembras de soya en esta regin. Este fenmeno tambin se ha observado en soya en otras regiones donde tradicionalmente no se siembra este cultivo (Jimnez et al., 1991). Respecto al tratamiento de Vitavax 200, puede anotarse que es evidente que cuando se combin con los simbiontes, se redujo significativamente el nmero y peso de los ndulos, y en la mayora de los casos, el fungicida influy negativamente en las dems variables observadas. El Vitavax 200 es de uso comn para el control de dampig-off en algunas regiones productoras de soya (Revellin et al., 1993; Wendell, 1988 y Maldonado, 2002). Sin embargo, existen evidencias de que algunos fungicidas tienen un alto nivel de toxicidad, como el thiram y captan, que afectan la multiplicacin de B. japonicum, por el contrario,

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fungicidas como el metalaxyl no tienen efecto adverso sobre la bacteria fijadora de nitrgeno (Crop Watch, 2002). Respecto al nmero de vainas en ambas localidades, los menores valores se observaron para el tratamiento con Vitavax 200 y el testigo absoluto; los mayores valores se registraron en los tratamientos con simbiontes solos o asociados. En la localidad La Jarita, la combinacin de simbiontes (B + M) incrementaron el rendimiento de grano en un 271 % en relacin al testigo absoluto. Lo anterior coincide con lo informado por Young et al., (1988) quienes consignaron un incremento del 126 % con la mezcla de los dos simbiontes. Otros autores han informado un efecto sinrgico con la combinacin de rizobacteria-micorriza MVA en soya y otras leguminosas. En la localidad del Pozo 4, el incremento de la misma combinacin, fue de 398 % en relacin al testigo absoluto.

CONCLUSIONES 1) De acuerdo con el rendimiento reportado con algunos tratamientos (1954 kg/ha), el cual es similar al de otras regiones productoras de soya, se reafirma que este cultivo representa un alternativa potencial para el norte de Tamaulipas. 2) La literatura lo anota y los datos de este estudio lo confirman, que el efecto antagnico del fungicida Vitavax 200, principalmente con base de thiram, cuestiona el uso de este fungicida para el tratamiento a la semilla en esta y otras zonas productoras de soya. 3) Por la importancia adquirida y su efecto sinrgico de la MVA, se sugiere la evaluacin de estos productos bajo diferentes condiciones ambientales para generar una recomendacin especfica para la zona norte de Tamaulipas.

REFERENCIAS
Crop Watch. 2002. Focus on soybean production, plus army cutworm. http://cropwatch.unl.edu/archives/2002/crop02-5.htm Danielshylton, K.D.M. and Ahmad, M.H. 1994. Inoculation response in kidney beans (Phaseolus vulgarus) to vesicular-arbuscular mycorrhizal and rhizobia in non-sterilized soil. Biol & Fert. Soils. 18(2): 95-98. Dubey, S.K. 1999. Response of soybean (Glycine max) to biofertilizers with and without nitrogen, phosphorus and potassium on swell-shrink soil. Indian J. Agron. 43 (3): 546549. Elizondo B., J. 1999. Uso de biofertilizantes a base de Bradyrhizobium japonicum para mejorar la produccin de soya. Campo Experimental Sur de Tamaulipas. INIFAP. Desplegable N 3. Jimnez J. A., Olalde P. V. y Pea C. 1991. Evaluacin en campo de Bradyrhizobium japonicum en dos variedades de soya (Glycine max). Terra 9 (1): 79-86. Maldonado M. N. 2002. El cultivo de soya de invierno en el sur de Tamaulipas. Campo Experimental Sur de Tamaulipas, INIFAP. Desplegable para productores N 2. Revellin C., Leterme, P. and Catroux, G. 1993. Effect of some fungicides treatments on the survival of Bradyrhizobium japonicum and on the nodulation and yield of soybean. Biol. & Fert. Soils. 16: 211-214. Sine, C . 1993. Plant Health Guide. Meister Publishing Co. 178 p.

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Cuadro 1. Caractersticas de planta y rendimiento de soya Huastecas 200, asociadas con la inoculacin de simbiontes en las dos localidades del norte de Tamaulipas. Tratamiento Peso fresco Peso seco A. planta No. ndulos* P. ndulos* No. vainas Kg/ha Localidad La Jarita B. japonicum (B) G. intraradices (M) B+M Vitavax (V) B+V B+M+V Testigo 127.4 ab** 123.8 ab 139.0 a 79.8 c 76.1 c 98.4 bc 85.8 c 34.4 a 36.7 a 33.7 a 23.6 b 23.4 b 28.7 ab 21.6 b 65.5 b 65.8 b 76.1 a 59.2 b 61.2 b 60.4 b 60.0 b 6.6 a 3.6 b 4.0 ab 0.6 c 1.7 bc 1.6 bc 0.2 c 1.1 a 0.9 ab 1.0 ab 0.1 d 0.5 c 0.7 bc 0.05 d 56.2 a 47.2 ab 59.2 a 33.2 bc 45.4 ab 36.6 bc 31.0 c 1548 b 1318 bc 1954 a 830 de 1072 c 1023 cd 719 e

Localidad Pozo 4 B. japonicum (B) 81.2 ab 20.0 ab 93.5 G. intraradices (M) 85.5 ab 21.1 a 97.5 B+M 88.0 a 22.3 a 90.5 Vitavax (V) 64.5 d 15.8 c 87.0 B+V 64.2 d 16.4 bc 80.7 B+M+V 67.0 cd 18.2 bc 93.7 Testigo 71.5 bcd 17.1 bc 88.2 * Valores transformados a x+1. ** Comparaciones mediante parcelas apareadas (prueba de t, p<0.05). 13.2 a 12.1 a 10.4 ab 3.1 c 3.3 bc 6.4 bc 0.8 c 1.2 a 0.9 a 0.9 a 0.2 b 0.4 b 0.4 b 0.3 b 41.8 ab 48.2 a 39.8 ab 24.6 c 31.6 bc 31.7 bc 21.2 c 1988 a 2053 a 1982 a 899 d 1241 c 1656 b 498 e

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Tarafdar, J. C. and Rao, A. V. 1997. Response of arid legumes to VAM fungal inoculation. Simbiosis 22 (3): 265-274. Wendell, H. C. 1988. Texas Plant Disease Control Handbook Chemical Control Supplement. Texas Agr. Ext. Serv. and Texas A & M University System. Publ. B-1140 A. Young, C. C., T. C. Juang, and C. C. Chao. 1988. Effects of Rhizobium and vesiculararbuscular mycorrhiza inoculations on nodulation, symbiotic nitrogen fixation, and soybean yield in subtropical-tropical field. Biol. & Fertil. Soils 6: 165-169.

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BIOFERTILIZANTES MICROBIANOS: ANTECEDENTES DEL PROGRAMA Y RESULTADOS DE VALIDACIN EN MXICO

Juan Francisco Aguirre Medina

Campo Experimental Rosario Izapa, INIFAP

Introduccin La agricultura siempre ha estado relacionada con la sociedad para satisfacer sus necesidades alimenticias (Hernndez, 1988) y en la actualidad, la bsqueda de una mayor productividad por unidad de rea, como consecuencia del incremento de nuestra poblacin, ha originado la alteracin de las comunidades vegetales. Esta actividad antropocntrica ha acelerado la degradacin de los sistemas agrcolas y como consecuencia, los sistemas de produccin enfrentan el reto de mantener una produccin sostenida. Describir y entender los sistemas biolgicos de cada cultivo para lograr un impacto en la produccin y conservar el medio, consolida la importancia de estudiar el sistema planta-microsimbionte. La unidad e interdependencia de esta relacin es poco conocida y poco apreciada. El sistema radical ha sido llamado, el componente olvidado (Davidson, 1978), la mitad escondida (Waisel et al., 2002), aunque para muchas plantas representa mucho ms que la parte area. El sistema radical, adems de las funciones de absorcin y transporte de agua y nutrientes al sistema vascular y el anclaje, pone a la planta en contacto con la rizosfera. Esta regin es el nico ambiente bajo la influencia de las races de las plantas (Alexander, 1977) que favorecen la proliferacin de microorganismos (Balandreau y Knowles, 1978). Existen evidencias que la relacin se ha desarrollado desde que inici la colonizacin de la superficie terrestre por las plantas y, algunas de las primeras algas en ocupar la tierra, estaban asociadas a microorganismos, entre los cuales se encontraban los que seran las micorrizas (Azcn y Barea, 1980; Selosse y Le Tacon, 1998). La relacin simbitica planta-microorganismo ha contribuido al mantenimiento, funcionamiento y la estabilidad de los ecosistemas mediante su influencia en la diversidad de las especies en las comunidades vegetales (Read, 1998), sin embargo la actividad agrcola, ha sido una prueba crucial para la recirculacin de los componentes de la naturaleza (Altieri et al, 1984), como es el caso de los nutrimentos. La nutricin de las plantas se ha estudiado y desarrollado con mayor entusiasmo en dos grandes vertientes, una de ellas, la ms tradicional en los ltimos 50 aos, mediante productos qumicos sintticos y la otra, explorando la capacidad que tienen algunos microorganismos para fijar nitrgeno y transportar fsforo y otros nutrimentos. ltimamente adems, se ha puesto de manifiesto el inters por la fermentacin de los residuos orgnicos para abonar los cultivos mediante el desarrollo de compostas o bien con la utilizacin de lombrices para producir la vermicomposta. De los nutrimentos esenciales para el desarrollo de las plantas, el nitrgeno es el ms importante y el ms utilizado en la agricultura. An cuando, abunda en la atmsfera terrestre, es inerte y solamente puede ser aprovechado cuando se combina industrialmente 71

con ciertos elementos, como el hidrgeno, mediante la utilizacin de altas cantidades de energa proveniente del petrleo el carbn, o bien, mediante su incorporacin a los sistemas biolgicos cuando es fijado por algunos microorganismos que realizan una simbiosis mutualstica con las plantas superiores. En este caso, la energa utilizada proviene del sol, va la fotosntesis de las plantas. Los fertilizantes qumicos sintticos utilizados para la produccin de alimentos, han estado cumpliendo su funcin hasta cierto lmite. Han sido fundamentales en el abastecimiento de la demanda alimenticia de nuestra creciente poblacin nacional, sin embargo, en la ltima dcada nuestra sociedad reclama mayor produccin de alimentos de alta calidad protenica, pero, producidos sin agroqumicos. Esta nueva aptitud ha favorecido el desarrollo de tecnologas de produccin menos contaminantes y ecolgicamente ms racionales. Con estos antecedentes y despus de la crisis energtica mundial de los aos setenta, el estudio de las bacterias asociadas a las plantas avanz rpidamente en algunos pases europeos y asiticos y en menor grado en Mxico y otros pases latinoamericanos (Okon y Labandera, 1994). Sin embargo en los ltimos aos, se han obtenido resultados satisfactorios en Mxico con la aplicacin masiva de diversos microorganismos en campo en cultivos anuales (Aguirre, 2001) y algunos perennes tropicales en vivero con Azospirillum, y hongos micorrizgenos (Mendoza y Aguirre, 2002; Moroyoqui y Aguirre, 2002). El uso de los recursos microbiolgicos del suelo en los sistemas agrcolas son una alternativas para mejorar el balance biolgico en el suelo y reducir el uso de fertilizantes qumicos y de otros agroqumicos en los sistemas de produccin, principalmente los fertilizantes nitrogenados y fosfatados. En este sentido, el uso de microorganismos en la agricultura han sido denominado inoculantes (Sylvester-Bradley et al., 1985), fertilizantes bacterianos (Dommergues, 1978) y ltimamente biofertilizantes. En general constituyen un componente vital de los sistemas sostenibles al crear un medio econmicamente atractivo y ecolgicamente aceptable de reducir las aplicaciones de algunos agroqumicos y de mejorar, y hacer ms eficientes, los nutrientes disponibles en cada hbitat. Realizan un amplio rango de actividades, como mejorar la disponibilidad y transporte de nutrimentos, favorecer el crecimiento de las races, la fijacin del nitrgeno, la solubilizacin de minerales, la produccin de estimuladores del crecimiento vegetal y el biocontrol de patgenos. (Barea y Azcn, 1983; Rovira et al., 1983). Los biofertilizantes microbianos pueden utilizarse en los cultivos anuales, las praderas de gramneas y leguminosas, hortalizas y frutales. Son una alternativa de gran validez para los campesinos que no fertilizan o lo hacen con pequeas cantidades. Estos productos son recomendados en la Agenda 21 como resultado de la llamada Cumbre de la Tierra, firmada en Ro de Janeiro en 1992. Son considerados como biotecnologas apropiables, que es un trmino creado para las herramientas biotecnolgicas que contribuyen al desarrollo sostenible por ser tcnicamente factibles dentro del nivel cientfico-tcnico de un pas y que proveen beneficios tangibles a los destinatarios y adems por ser ambientalmente seguras y socioeconmica y culturalmente aceptables.

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Antecedentes del programa La agricultura nacional se desarrolla en poco mas de 17 millones de hectreas en cultivos anuales, de las cuales 11 millones (65%) se cultivan bajo temporal (SAGAR, 1997). El 79 % de la superficie se cultiva con gramneas como maz, sorgo, avena, cebada, trigo y arroz que en su conjunto cubren cerca del 79% de la superficie nacional de temporal. Si consideramos al frijol en este anlisis, la superficie supera el 95%, con excepcin de las reas de temporal con alto potencial productivo. Bajo estas condiciones de agricultura de temporal que la mayora es de subsistencia con suelos marginales, los productores no aplican fertilizantes qumicos a sus cultivos o lo hacen en pequeas cantidades y, es en estos sistemas de produccin donde se presenta la alternativa de utilizar algunos recursos microbiolgicos del suelo para favorecer la nutricin mineral de las plantas y reducir o hacer ms eficiente, cuando sea el caso, los fertilizantes qumicos que se utilizan en diferentes sistemas agroecolgicos. Los biofertilizantes en Mxico han sido poco utilizados por los agricultores, su uso en la produccin agrcola nacional ha tenido su mayor relevancia en las leguminosas, como el caso de la soya y en algunos casos el frijol. Las gramneas no haban sido sometidas en grandes extensiones con alguna simbiosis va comercial en su sistema radical. La aplicacin de estos productos, los biofertilizantes, que integran los microorganismos, Azospirillum brasilense, Rhizobium etli, Bradyrhizobium japonicum y el hongo micorrzico Glomus intraradices, en las reas menos favorecidas, representan una oportunidad para incrementar la produccin y productividad de los cultivos a bajo costo sin la contaminacin de los mantos freticos y a la vez favorecer la conservacin de los recursos naturales. La amplia exploracin en ambientes y sistemas de manejo son una excelente herramienta para la promocin de esta componente ante los diferentes agentes de cambio en el pas, autoridades del sector y por supuesto ante los productores de los diferentes cultivos. En todos los casos se pretende establecer un vnculo ms directo entre el sector productivo y la nueva opcin tecnolgica que se les presenta. Este proceso, pretendi adems, mostrar las ventajas y eficiencias en el desarrollo vegetal (areo y radical) y reproductivo de los cultivos biofertilizados con alguno de los microsimbiontes o con ambos, en comparacin con los diferentes testigos seleccionados por los investigadores, que pueden ser la reduccin de la fertilizacin qumica la suspensin total de la misma. Las validaciones se desarrollaron de acuerdo a la pertinencia con algn productor junto o por separados los microsimbiontes, en varios cultivos, y en diferentes ambientes agroecolgicos y sistemas de produccin. Desarrollo del programa La validacin de una componente tecnolgica tiene la caracterstica de realizarse en superficies ms grandes que las desarrolladas en los procesos experimentales y adems, de ser manejada agronmicamente por el productor. En este caso, la componente biofertilizantes microbianos se implement como seguimiento al Programa Nacional de Biofertilizantes desarrollado por le Gobierno Federal a partir de 1999. Este programa se origin como una alternativa para favorecer la nutricin de las plantas por medios biolgicos mediante el planteamiento de diferentes estrategias, entre las cuales se consider la exploracin de diversas regiones agroecolgicas de Mxico. El proceso de produccin de 73

biofertilizantes se realiz a travs de la Fundacin Mexicana para la Investigacin Agropecuaria y Forestal A.C., y su distribucin a los productores, mediante el programa del Gobierno Federal Alianza para el Campo. Los microorganismos utilizados masivamente como biofertilizante fueron las bacterias Azospirillum brasilense2, Rhizobium etli1, Bradyrhizobium japonicum y el hongo micorrizgeno Glomus intraradices. Se evaluaron durante los ciclos agrcolas Primavera-Verano de 1999, Otoo-Invierno 1999-2000 y Primavera-Verano 2000. El nmero de parcelas por estado y ciclo agrcola se presenta en el Cuadro 1.

Metodologa de evaluacin Las inoculaciones de la semilla se hicieron al momento de la siembra utilizndose carboxi metil celulosa como adherente. La cantidad de biofertilizante fue de 280 g por 2025 kg de semilla, para el caso de las bacterias y de 1-2 kg de micorriza-arbuscular para la misma cantidad de semilla. El nmero de bacterias contenido en el producto fue de al menos 100 x 106 y la micorriza con 1000 esporas/gramo de suelo y 90-95 % de infeccin en races. Los tratamientos evaluados fueron el biofertilizante con un microorganismo o bien la combinacin de dos de ellos. En algunos casos, se aplic una dosis de fertilidad recomendada por el INIFAP en la regin, una parte de la misma o bien sin aplicacin de fertilizante qumico. Las parcelas fueron de al menos una hectrea y se establecieron bajo condiciones de temporal. En todos los casos el manejo del cultivo estuvo a cargo del productor cooperante y los cientficos del INIFAP solo dieron seguimiento tcnico a las parcelas. Las variedades utilizadas fueron diferentes entre localidades de acuerdo a la decisin del productor. Resultados Se presentan los resultados de rendimiento por cultivo en las diferentes regiones donde se ejecut el programa. Frijol El rendimiento de las diferentes variedades de frijol fue superior cuando se biofertiliz con un microorganismo o la combinacin de dos de ellos, Rhizobium etli y/o Glomus intraradices en comparacin, con el testigo sin aplicacin de biofertilizante. Las diferencias encontradas en porcentaje van del 16 al 70% con algn microsimbionte solo. Resultados importantes sin la aplicacin de fertilizante han sido obtenidas en diversas regiones de Mxico, como en Chiapas (Camas, 2000), en Guerrero (Cruzaley, 2000), Veracruz (Durn et al., 2001), Coahuila (Covarrubias, et al., 2000) y Yucatn (Uribe,
2

Proporcionadas por el Centro Nacional de Fijacin de Nitrgeno-UNAM, mediante convenio.

74

2000). Cuando se aplic alguna dosis de fertilidad ms los biofertilizantes, las diferencias ms contrastantes se encontraron en el Pacfico Sur, en el estado de Guerrero (Cruzaley, 2000). La respuesta a Rhizobium ha sido muy variable en los resultados de investigacin (Grajeda-Cabrera, 1990), sin embargo en Quertaro la respuesta a la cepa Rhizobium etli fue superior en 31% al testigo sin biofertilizar. Glomus intraradices indujo incrementos que van de 17 y 25 % en el rendimiento del frijol en el Estado de Mxico y Tlaxcala respectivamente (Figura 1). El incremento en la biomasa, el contenido de fsforo y el rendimiento del frijol ha sido consignado por Aguirre y Kohashi, (2002) y Aguirre et al. (2004) en condiciones de invernadero. En el Noreste de Mxico y en el Pacfico Sur, donde se valid la biofertilizacin dual, los rendimientos ms altos se lograron con los microorganismos Rhizobium-Glomus. El efecto benfico de la simbiosis doble en frijol tambin ha sido consignado por otros investigadores en Mxico (Camas, 2000; Uribe, 2000) o en otras plantas, como Leucaena (Aguirre y Velazco, 1994).
Cuadro 1. Parcelas de validacin en diversos cultivos anuales desarrolladas en Mxico. Parcelas establecidas Total Estado PV 1999 OI 99-2000 PV 2000 Chihuahua 12 12 Aguascalientes 2 2 Durango 6 6 Regin Lagunera 3 3 Zacatecas 6 6 Tamaulipas 14 7 4 25 Coahuila 10 6 16 Nuevo Len 1 3 9 13 San Luis Potos 6 7 1 14 Jalisco 10 12 22 Colima 6 6 Michoacn 12 12 Nayarit 3 3 Guanajuato 10 10 Tlaxcala 9 9 Hidalgo 7 7 Morelos 10 10 Mxico 8 8 Quertaro 2 2 Distrito Federal 2 2 Puebla 15 15 Oaxaca 22 8 30 Guerrero 9 11 20 Chiapas 18 18 Veracruz 8 6 11 25 Tabasco 6 6 Campeche 15 15 Quintana Roo 8 14 22 Yucatn 4 4 8 Sinaloa 160 160 244 23 240 507 Total

75

Cuadro 2. Nmero de parcelas de validacin por cultivo y ciclo agrcola.

Solo Biofertilizante Cultivo PV 1999 62 28 16 1 4 3 1 115 1 17 10 64 OI 992000 7 3 6 PV 2000 32 6 15 1 Total 101 37 37 2 4 3 12 196 Biofertilizante + Fertilizante qumico PV 1999 69 26 14 12 3 2 3 129 6 176 6 OI 992000 PV 2000 24 6 145 1 Total 93 38 159 13 3 2 3 311 194 75 196 15 7 5 15 507 Total de 3 ciclos

Maz Frijol Sorgo Trigo Cebada Avena Otros Total

En la actualidad, la inoculacin doble en las leguminosas con Rhizobium y otras bacterias promotoras del crecimiento vegetal, como Azospirillum, han tenido una interaccin positiva en el desarrollo radical y del vstago del frijol (Okn y Itzigsohn, 1995; Burdman, et al., 1996 a; Aguirre et al., 2004), con micorriza en la toma de agua y de nutrientes (Aug et al., 1994), especialmente fsforo (Aguirre y Kohashi, 2002) y en general se favorece la nodulacin y fijacin de nitrgeno de las leguminosas (Burdman et al., 1996b). Las parcelas desarrolladas con la caracterstica de haber incluido el nivel de fertilidad de 40-40-00, adems de los microsimbiontes, produjeron ms y, los rendimientos se redujeron con la aplicacin solamente del nivel de fertilidad, inclusive fueron inferiores al testigo en dos sitios de evaluacin. En Morelos, en la localidad de Yecapixtla, la diferencia en rendimiento entre el tratamiento a base de Rhizobium solo y Rhizobium fertilizado, fue de 3-13% en comparacin al tratamiento solo con Rhizobium. En Tlayacapn y Zacatepec las diferencias ms altas fueron con la combinacin Rhizobium + fertilizante qumico. En el caso de Puebla, la reduccin en el rendimiento fue de 14-22 % cuando se fertiliz el frijol adems de incluir a Rhizobium y Glomus, en comparacin a la biofertilizacin solamente de los dos microsimbiontes. El hongo micorrizico, puede transportar este nutrimento al sistema radical de las plantas y hacer ms eficiente la utilizacin de la fertilizacin qumica (Sutton, 1973; Barea y Azcn-Aguilar, 1983; Read, 1998; Selosse y Le Tacn.) Cuando se utilizan altos niveles de nitrgeno es ms oportuno aplicar solamente el hongo micorrizco. Con alta disponibilidad de nitrgeno en el suelo, las bacterias fijadoras de nitrgeno no cumplen con su funcin de fijar el nitrgeno atmosfrico sino que, toman el disponible en el suelo y el proceso simbitico es menos probable que se establezca (Schwenke et al., 1997, Wani, et al., 1997).

76

1200 900 600

Testigo +40-40-00 prom. 1007 Kg Rhizobium etli prom. 968 Kg Testigo prom. 780 Kg Rhizobium etli+ 40-40-00 prom. 1084 Kg

1200 900 600 300

G. intraradices prom. 833 Kg R. etli prom. 674 Kg Testigo prom. 567 kg

-1

Kg.ha

Kg.ha

-1

300

Produccin de frijol en 11 parcelas de validacin en el Centro de Mxico en los estados de, Mxico, Tlaxcala, Guanajuato, Morelos y Quertaro.

Produccin de frijol en 5 parcelas de validacin en el Noreste Mexicano, en los estados de Coahuila y Tamaulipas.

1200

1800 1500

Kg.ha-1

-1

G. intraradices + R. etli + 40 N prom. 1870 Kg

900 600
Testigo promedio 479 kg Rhizobium etli promedio 641 Kg

Kg.ha

900
Rhizobium etli prom. 1054 Kg G. intraradices prom. 1335 Kg Testigo prom. 910 kg

600 300

300

Produccin de frijol en 23 parcelas de validacin en la Regin Semirida en los estados de Chihuahua, Durango, Zacatecas, Aguascalientes y La Laguna.

Produccin de frijol en 9 parcelas de validacin en el Sureste Mexicano en los estados de Chiapas, Guerrero y Oaxaca.

Figura 1. Produccin de frijol en diversas parcelas de validacin con Biofertilizantes desarrolladas en Mxico durante el ciclo agrcola PV 1999. Los biofertilizantes se aplicaron solos y combinados con alguna dosis de fertilidad. Se utilizaron diferentes variedades recomendadas por el INIFAP en cada regin agroecolgica. La lnea vertical indica error estndar.

La interaccin microorganismo-ambiente ha sido estudiada por diversos investigadores (Mosse, 1973; Khan, 1977; Dommergues, 1978; Caballero-Mellado,1991; Okon y Kapulnik, 1986) o su interaccin con algunos microorganismos cuando se introducen por primera vez en un ambiente determinado (Matuz et al., 1990; AguirreMedina et al., 1988), es importante estudiar ms esta relacin y sus implicaciones en el desarrollo vegetal y reproductivo del frijol. An cuando existen evidencias experimentales consignadas por Pea-Cabriales y Castellanos (1995) relativas el bajo nivel de respuesta del frijol a la inoculacin con Rhizobium, la significancia agronmica de los resultados obtenidos en el programa de biofertilizantes con diversos microsimbiontes establecen una nueva oportunidad para su utilizacin por los productores en Mxico. La expresin de la simbiosis planta microorganismo durante el ciclo agrcola de primavera-verano confirman la alta calidad de las cepa de microorganismos utilizados. Fueron capaces de incrementar el rendimiento del frijol bajo diferentes ambientes agroecolgicos, de manejo y con distintos materiales de frijol en el pas.

77

Testigo Fertilizado 40-40-00 prom. 1659 kg

1200

G. intraradices +R. etli + 40-40-00 prom. 973 Kg

Testigo Fertilizado 40-40-00 prom. 754 kg

Maz El rendimiento promedio de los maces criollos biofertilizados con algn microsimbionte en 32 parcelas de validacin en Mxico fue superior en 21-24 % con relacin al testigo absoluto. Las parcelas se desarrollaron en los ciclos PV 1999 y PV 2000.

2500

2000

Kg.ha -1

1500

1000
Testigo Rend. prom. 1762 kg A. brasilense Rend. prom. 2133 kg G. intraradices Rend. prom. 2256 kg A. brasilense + G. intraradices Rend. prom. 2189 kg

500

Figura 2. Produccin de maces criollos en diversas parcelas de validacin con Biofertilizantes desarrolladas en Mxico durante el ciclo agrcola PV 1999 y PV 2000. La lnea vertical indica error estndar de 32 parcelas.

En Mxico se han consignado incrementos en el rendimiento de maz entre el 3070% en diferentes regiones donde el uso de los fertilizantes es nulo (Caballero-Mellado, 1991). En Latinoamrica, Okn y Labandera (1994) citan resultados favorables en rendimiento con la simbiosis Azospirillum-gramnea en el 70% de los resultados de investigacin realizados de 1974 a 1994. Con relacin a Mxico y otras regiones del mundo, Dobbelaere et al. (2001) consignan efectos positivos de la inoculacin para el 6295 % de los casos. Los resultados sealados por Okn y Labandera (1994) con relacin a los rendimientos promedio en Amrica Latina fluctan en el rango de 5 a 30 %, semejantes a lo consignado en este anlisis. En Oaxaca, Arredondo y Luevanos (2000) encontraron incrementos del 11 % en el rendimiento de grano de maz con la biofertilizacin de A. brasilense y Glomus intraradices. Resultados semejantes consignan Hernndez et al. (2000) cuando se biofertiliz el mismo cultivo con los dos microsimbiontes. Por su parte, Tavrez (2001) obtuvo los mejores rendimientos en maz con la biofertilizacin independiente de cada microsimbionte y, el mayor increment se alcanz con A. brasilense. Acosta et al. (2001), realizaron un muestreo regional en Rio Bravo, Tamps. en parcelas de productores, para conocer el efecto de la aplicacin de los microorganismos, A. brasilense y G. intraradices en el rendimiento comercial del sorgo (Sorghum bicolor L. Moench) y encontraron aumentos de rendimiento de grano superiores a 400 kg.ha-1 en el 68 % de las localidades muestreadas. En el 27.2 %, los rendimientos fueron superiores a 800 kg ha-1 y estadsticamente diferentes. En el Centro de Mxico, Irizar et al. (2003) citan incrementos en el rendimiento del maz con la biofertilizacin de A. brasilense y/o G. intraradices. 78

Es de esperarse, que la expresin del potencial de la micorriza o de las rizobacterias en el maz pueda variar segn la afinidad del simbionte y el genotipo (Arsac et al., 1990; Boucher et al., 1999; Khalil et al., 1994) y las condiciones ambientales (Chatel y Parker, 1973). Otro grupo de parcelas de validacin se desarrollaron con la misma componente pero adems, se incluy alguna dosis de fertilidad a base de N-P. Los resultados se presentan en la figura 3. Los niveles de fertilidad se aplicaron principalmente a maces hbridos en el Centro del pas, Pacfico Centro y Pacfico sur. En el Sureste se desarrollaron las parcelas fertilizadas con dosis baja de nitrgeno y fsforo en maces criollos. Las diferencias en rendimiento entre tratamientos con alto contenido de nitrgeno y maces hbridos son menos contrastantes en comparacin con los niveles bajos de nitrgeno y maces criollos (Figura 3).

7000 6000 5000

-1

7000 6000 5000

Kg.ha
-1

Kg.ha

4000 3000
Rend. promedio 5557 kg Rend. promedio 6759 kg

4000 3000
Rend. promedio 4683 kg

Rend. promedio 6160 kg

Rend. promedio 6357 kg

1000

1000

Testigo fertilizado 180-60-00

A. brasilense + 180-60-00

G. intraradices + 180-60-00

Rend. promedio 5739 kg

A. brasilense + G. intraradices + 180-60-00

Testigo fertilizado 140-60-00

A. brasilense +140-60-00

G. intraradices +140-60-00

A. brasilense + G. intraradices +140-60-00

Rendimiento del maiz H 313 biofertilizado en Michoacn y Jalisco. Los valores son promedios de cuatro parcelas error estndar.

Produccin del maz H-40 biofertilizado en los estados de Puebla, Tlaxcala y Mxico.Los valores son promedios de cuatro parcelas error estndar.

7000 6000

2500

2000 5000
-1 -1

Kg.ha

Kg.ha

4000 3000

1500

1000
Rend. promedio 5787 kg Rend. promedio 6611 kg Rend. promedio 6989 kg Rend. promedio 6497 kg Rend. promedio 1232 kg Rend. promedio 2008 kg Rend. promedio 2344 kg Rend. promedio 2456 kg A. brasilense + G. intraradices + 30-30-00

2000 1000

500

Testigo fertilizado 150 de N

A. brasilense +150 de N

G. intraradices +150 de N

A. brasilense +G. intraradices +150 de N

Testigo fertilizado 30-30-00

A. brasilense + 30-30-00

G. intraradices + 30-30-00

Rendimiento del maz H-515 biofertilizado en los estados de Chiapas y Guerrero.Los valores son promedios de siete parcelas error estndar.

Rendimiento de maices criollos biofertilizados en Quintana Roo. Los valores son promedios de cuatro parcelas error estndar.

Figura 3. Produccin de maces hbridos y maz criollo en diversas parcelas de validacin con Biofertilizantes ms una dosis de fertilidad desarrolladas en Mxico durante el ciclo agrcola PV 1999 y PV 2000. La lnea vertical indica error estndar.

79

Rend. promedio 4624 kg

2000

2000

Rend. promedio 4559 kg

En Michoacn y Jalisco, con el hbrido H 313 y 180-60-00 la diferencia con el testigo fue 3-9% con G. intraradices y la simbiosis doble, pero inferior con la inclusin solamente de A. brasilense. En cambio con H-40 en la regin central de Mxico, el mayor incremento en rendimiento se alcanz con A. brasilense. En el Pacfico Sur, en Chiapas y Guerrero, los incrementos en rendimiento con H-515 fueron superiores en los tratamientos biofertilizados. Los resultados anteriores parecen estar ms influenciados por el nivel de fertilidad que por el microorganismo. Los efectos de los altos niveles de fertilidad y su interaccin con la disminucin de la simbiosis con los microsimbiontes han sido consignadas (Barea y Azcn-Aguilar, 1983; Cejudo y Paneque, 1986; Schwenke et al, 1997, Wani et al., 1997). Los niveles bajos de fertilidad utilizados en Quintana Roo con maces criollos explican la influencia de los microsimbiontes en el rendimiento del maz en la pennsula. Estos resultados con los ms altos registrados a nivel nacional. Valores semejantes fueron obtenidos por los Tcnicos PEAT, en la misma regin (De Alba, 2001). Trigo, cebada y sorgo. Las parcelas de validacin de biofertilizantes en trigo se realizaron con la aplicacin de altos niveles de nitrgeno. Los resultados ms sobresalientes bajo esta condicin se presentaron con A. brasilense (Figura 4).

4000

3000 Kg.ha-1 2000

Azospirillum brasilense Azospirillum brasilense Azospirillum brasilense + Glomus intraradices Glomus intraradices

Testigo

Testigo

110-50-00 en Puebla y Mxico. Pavn, Salamanca y Romoga

120-90-00 en Michoacn y Jalisco. Saturno, Arandas y Romoga

80-60-00 en Oaxaca Temporalera y Bacanora

Figura 4. Rendimiento de grano de trigo en diversas parcelas de validacin con Biofertilizantes ms una dosis de fertilidad desarrolladas en Mxico durante el ciclo agrcola PV 1999. La lnea vertical indica error estndar.

80

Testigo

A. brasilense

1000

En el caso de cebada se utiliz la variedad esmeralda en todas las parcelas de validacin con las dos modalidades, con y sin fertilizante qumico. Donde no se utiliz fertilizante qumico y se incluy A. brasilense, el rendimiento fue superior en 39% en comparacin con el testigo. En la combinacin nivel de fertilidad-microorganismo los resultados ms altos en rendimiento se encontraron con la simbiosis doble (Figura 5).

4000 3500 3000 Kg.ha-1 2500

Azospirillum brasilense + Fertilizante prom. 3000 kg.

2000
Azospirillum brasilense prom. 2321 kg.

Glomus intraradices + fertilizante prom. 3000 kg.

1500 1000
Testigo 1666 kg.

500

Testigo Fertilizado 2900kg.

Sin fertilizante qumico

Con 110-50-00

Figura 5. Rendimiento de la variedad esmeralda de cebada en diversas parcelas de validacin con Biofertilizantes desarrolladas en Mxico durante el ciclo agrcola PV 1999. La lnea vertical indica error estndar.

Las parcelas de validacin en sorgo se desarrollaron principalmente en la regin de Tamaulipas y Sinaloa en otoo-invierno 99-2000 y PV 2000. En todos los casos se increment el rendimiento de sorgo con la biofertilizacin de los microorganismos. Los incrementos en rendimiento ms importantes se obtuvieron con la biofertilizacin dual, es decir, con A. brasilense y G. intraradices en las dos poca de siembra (Figura 6). En los tres cultivos, trigo, cebada y sorgo, la respuesta de los microorganismos en el rendimiento fue ms determinante cuando no se utiliz ningn nivel de fertilidad a base de fertilizante qumico sinttico. Existen evidencias en diversas plantas del mejor desarrollo de la actividad simbitica planta-microorganismos y su efecto en el rendimiento en suelos de baja fertilidad (Barea y Azcn, 1983; Dart, 1986; Alexander y Zuberer, 1988; Aguirre y Velazco, 1994; Tawaraga et al., 1994; Aguirre y Kohashi, 2002). En forma general, los resultados de Validacin del presente programa con la componente biofertilizante solos, combinados, o bien en la misma forma de aplicacin, ms un nivel de fertilidad a base de fertilizantes qumicos sintticos, muestran los mejores rendimientos en todos los cultivos evaluados y bajo los diferentes sistemas de manejo. Se establece amplio potencial de utilizar alguno de los microsimbiontes, o dos de ellos, como alternativa para nutrir por medios biolgicos los cultivos. Es claro, que en algunos sitios, se encontr una respuesta diferencial de las plantas a la interaccin con los microorganismos. Estos resultados eran de esperarse al considerar la incidencia de diversos factores ambientales y de manejo en el rendimiento. 81

Azospirillum brasilense + Glomus intraradices prom. 3625 kg.

Los niveles de fertilidad menores a 100 kg de N/ha tuvieron una buena respuesta cuando fueron combinados con los biofertilizantes. Los niveles superiores a los 100 kg de N/ha en todos los cultivos donde se aplicaron, las diferencias que se presentaron fueron menores con los tratamientos biofertilizados.

2500

2000 Kg.ha-1

1500

Azospirillum brasilense + Glomus intraradices prom. 2423 kg.

Azospirillum brasilense prom. 2182 kg

1000

500
Testigo 1937 kg.

Glomus intraradices prom. 2353 kg

Testigo 1346 kg.

OI 99-200

PV 2000

Figura 6. Rendimiento sorgo en diversas parcelas de validacin con Biofertilizantes desarrolladas en Mxico. La lnea vertical indica error estndar de 14 parcelas en OI 99-2000 y de 154 en PV 2000.

Conclusiones Los microsimbiontes indujeron mayor rendimiento en los cultivos evaluados bajo las diferentes condiciones agroclimticas y de manejo en todo el pas. Se encontr una respuesta diferencial en el rendimiento con la inoculacin de los microorganismos y los mejores resultados fueron con la simbiosis doble Azospirillum brasilense-Glomus intraradices. Los altos niveles de fertilidad a base de nitrgeno utilizados en algunas regiones del pas, confirman la inhibicin del proceso biolgico simbitico planta-microorganismo. En el desarrollo vegetal de los cultivos se observ un incremento del sistema radical, de biomasa area, rea foliar y contenido de clorofila en las plantas donde se utilizaron los biofertilizantes en comparacin con los testigos sin inocular ni fertilizar.

Literatura Citada
Acosta N., S., Daz F., A.; Magallanes E., A. y M. Silva S. 2001. La inoculacin de Azospirillum brasilense y Glomus intraradix en la produccin comercial de sorgo. Memorias XXVIII Congreso Nacional de Fitopatologa. p. F-15.

82

Azospirillum brasilense + Glomus intraradices prom. 1863 kg.

Aguirre, M.J.F., M. Valds y R.M. Silvester-Bradley. 1988. Simbiosis entre rizobios y cuatro leguminosas tropicales adaptadas en Chiapas, Mxico. Pasturas Tropicales. Vol. 10 (3): 1821. Aguirre-Medina, J. F. y E. Velazco-Zebadua. 1994. Componentes morfolgicos y fisiolgicos del rendimiento en Leucaena leucocephala al inocularse con micorriza VA y/o Rhizobium loti J . Agricultura Tcnica en Mxico. Vol. 20 (1) : 43-45. Aguirre, M. J. F. 2001. Programa Nacional de Biofertilizantes del INIFAP. Informe de labores. Direccin General de la Divisin Agrcola. Mxico, D. F. (Impreso). Aguirre, M.J.F. y J. Kohashi-Shibata. 2002. Dinmica de la colonizacin micorrzica y su efecto sobre los componentes del rendimiento y el contenido de fsforo en frijol comn. Agricultura Tcnica en Mxico. Vol 28 (1): 23-33. Aguirre, M.J.F., J. Kohashi-Shibata, Trejo-Lpez, C., Acosta-Gallegos, J.A. y Cadena-Iiguez, J. 2004. La inoculacin de Phaseolus vulgaris L. con tres microorganismos y su efecto en la tolerancia a la sequa (en prensa). Alexander, M. 1977. Introduction to soil microbiology. Second edition. John Wiley and Sons. U.S.A. p. 423-437. Altieri, M.A., K.D. Letourneau and J.R. Davies. 1984. The requirements of sustainable agro ecosystems. In: Agricultural sustainability in changing world order. G.R. Douglass (ed). Westview Press. Boulder Colorado. USA. p. 175-189. Alexander, D. B. and D. A. Zuberer. 1988. 15N2 Fixation by bacteria associated with maize roots at a low partial O2 pressure. Applied and Environmental Microbiology. p. 1748-1753. Arredondo V., C. y Luevanos A., A. 2000. Inoculacin con Azospirillum brasilense y Glomus intraradices en maz de temporal en los valles centrales de Oaxaca. Memoria XVIII Congreso Nacional de Fitogenetica. p. 151. Arsac, J. F., Lamothe, C., Mulard, D. and Fages, J. 1990. Growth enhancement of maize (Zea mays L.) through Azospirillum lipoferum inoculations: effect of plant genotype and bacterial concentration. Agronomie 10: 640-654. Azcn-G. de Aguilar, C. y Barea, J.M. 1980. Micorrizas. Investigacin y Ciencia. Barcelona, Espaa. 47: 8-16 p. Balandreau, J. and R. Knowles. 1978. The rhizosphere. In: Interactions between non-pathogenic soil microorganisms and plants. Y.R. Dommergues and S.V. Krupa (eds). Elsevier. The Netherlands. p. 243-268. Barea, J.M., and C. Azcn. 1983. Mycorrhiza and their significance on nodulating nitrogen fixing plants. Advances in agronomy. 36: 1-54. Boucher, A.; Dalpe, Y. and Charest, C. 1999. Effect of arbuscular mycorrhizal colonization of four species of Glomus on physiological responses of maize. Jornal of Plant Nutrition. 22(4):783-797. Burdman, S., S. Sarig, J. Kigel and Y. Okon. 1996a. Field inoculation of common bean(Phaseolus vulgaris L.) and chick pea (Cicer arietinum L.) with Azospirillum brasilense strain Cd. Symbiosis. 21, 41-48. Burdman, S., H. Volpin, J. Kigel, Y. Kapulnik and Y. Okon. 1996b. Promotion of nodgene inducers and nodulation in common bean (Phaseolus vulgaris) roots inoculated with Azospirillum brasilense Cd. Applied and Environmental Microbiology 62, 3030-3033. Caballero-Mellado, J. 1991. Experiencias de inoculacin de maz y trigo con Azospirillum a nivel intensivo y de investigacin. En: Memorias del III congreso Nacional de la Fijacin Biolgica del Nitrgeno, efectuada del 2 al 5 de diciembre de 1991. Centro de Fijacin Biolgica del Nitrgeno. UNAM. Cuernavaca Morelos, Mx. p. 20-24.

83

Camas, G. R. 2000. Programa de Validacin de Biofertilizantes en Chiapas. En; Informe anual de labores PV 1999, OI 1999-2000. Campo Experimental Centro de Chiapas. Centro de Investigacin Regional del Pacfico Sur. (Impreso). Cejudo, J. F. and A. Paneque. 1986. Short-term nitrate (nitrite) inhibiting of nitrogen fixation in Azotobacter chroococcum. Journal of Bacteriology 165: 240-243. Chatel, D.L. and Parker, C.A. 1973. Survival of field-grown rhizobia over the dry summer period in Western Australia. Soil Biology and Biochemistry 5, 415-423. Cruzaley, S. R. 2000. Validacin de Biofertilizantes en cultivos bsicos en el Estado de Guerrero. En: Informe anual de labores de la Direccin de Vinculacin del INIFAP en el Estado de Guerrero. Centro de Investigacin Regional del Pacfico Sur. (Impreso). Covarrubias, R.J. M., I. Snchez, V. y E. Rodrguez, C. 2000. Biofertilizantes: Simbiosis doble Azospirillum-Micorriza-arbuscular y Rhizobium-Micorriza en trigo, maz y frijol en Coahuila. In; Informe anual de Labores del Campo Experimental Zaragoza, Coah. Centro de Investigacin Regional del Norte Centro. (Impreso). Davidson, R.L. 1978. Root systems. The forgotten component of pastures. In: Plant relations in pastures. J.R. Wilson (ed) CSIRO. Australia. p. 86-94. Dart, P. J. 1986. Nitrogen fixation associated with non leguumes in agriculture. Plant and Soil. 90:303 334. De Alba, R. 2000. Programa de Validacin de Biofertilizantes en el CIRSE. En; Informe anual de labores PV 1999, OI 1999-2000. Centro de Investigacin Regional del sureste. (Impreso). Dobbelaere, S., Croonenborghs, A., Thys, A., Ptacek, D., Vanderleyden, J., Dutto, P., LabanderaGonzalez, C., Caballero-Mellado, J., Aguirre Juan Francisco, Kapulnik, Y., Brener, S., Burdman, s., Kadouri, D., Sang, S. and Okn J. 2001. Responses of agronomically important crops to inoculation with Azospirillum. Aust. J. Plant Physiol.. 28 (9): 871-879. Dommergues Y.R. 1978. Impact on soil management and plant growth. In: Interactions between non-pathogenic soil microorganisms and plants. Y.R. Dommergues and S.V. Krupa (eds). Elsevier. The Netherlands. p. 443-458. Durn, P. A., J.F. Aguirre-Medina y V. Lpez, G. 2001. Modulo de Investigacin en frijol ciclo otoo-invierno 2000-2001. En; Informe anual de labores del Campo Experimental Cotaxtla. Centro de Investigacin Regional del Golfo. (Impreso). Grajeda-Cabrera.O.A., 1990. Cintica de la fijacin de nitrgeno en frijol comn Phaseolus vulgaris L. Tesis de Maestra en Ciencias. Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados del Instituto Politcnico Nacional. Unidad Irapuato. 115 p. Hernndez, X. E. 1988. Biologa Agrcola. Los conocimientos biolgicos y su aplicacin a la Agricultura. Consejo Nacional para la Enseanza de la Biologa A.C. CECSA. Mxico, DF. 62 p. Hernndez M., L.; Trejo A., D.; Quinto T., Y. y Escalona A., M. 2000. Interaccin entre Azospirillum brasilense y hongos micorrzicos arbusculares en el rendimiento de maz bajo condiciones de campo. Resmenes Reunin Iberoamericana y III Simposio Nacional Sobre Simbiosis Micorrzica. p. 33. Irizar-Garza, M.B.G., P. Vargas-Vzquez, D. Garza-Garca, C. Tut y Couoh, I. Rojas-Marnez, A. Trujillo-Campos, R. Garca-Silva, D. Aguirre-Montoya, J.C. Martnez-Gonzlez, S. Alvarado-Mendoza, O. Grajeda-Cabrera, J. Valero-Garza, y J.F. Aguirre-Medina. 2003. Respuesta de cultivos agrcolas a los biofertilizantes en la regin central de Mxico. Agricultura Tcnica en Mxico. Vol 29(2): 213-225. Khan, A.G. 1977. Growth effects of VA mycorrhiza on crops in the field. In: Endomycorrhizas. F.S. Sanders, B. Mosse and P.B. Tinker, P.B. (eds.), Academic Press. London. p. 419-435. Khalil, S., Loynachan, T. and Tabatabai, M. 1994. Mycorrhizal dependency and nutrient-uptake by improved and unimproved corn and soybean cultivars. Agr. J. 86: 949-958.

84

Matus, J.M., M. Valds y J.F. Aguirre-Medina. 1990. Capacidad competitiva de cepas de rizobio en la formacin de ndulos en Leucaena leucocephala. Pasturas Tropicales. Vol. 12 (3): 22-24. Mendoza, L.A. y Aguirre M.J.F. La biofertilizacoin del cacao Theobroma cacao L. con Azospirillum brasilense y Glomus intraradices en etapa de vivero. Avances de resultados. Primer Congreso Internacional de Investigacin y Transferencia de Tecnologa Agropecuaria Chiapas 2002. Realizado del 19 al 22 de febrero del 2002 en Tuxtla Gutirrez, Chiapas (Memorias). Moroyoqui-Ovilla, D.M. y Aguirre, M.J.F. 2002. Avances en el desarrollo vegetativo del caf var. Oro azteca con diferentes sustratos y dos microsimbiontes en vivero. Primer Congreso Internacional de Investigacin y Transferencia de Tecnologa Agropecuaria Chiapas 2002. Realizado del 19 al 22 de febrero del 2002 en Tuxtla Gutirrez, Chiapas (Memorias). Mosse, B. 1973. Advances in the study of vesicular-arbuscular mycorrhiza. Annual Review of Phytophatology. II . 171-196. Okon, Y. and Y. Kapulnik. 1986. Development and function of Azospirillum-inoculated roots. Plant and Soil. 90, 3-16. Okon, Y. and C. Labandera. 1994. Agronomic Applications of Azospirillum evaluation of 20 years world wide field inoculation. Soil Biology. 26 (12): 1591-1601. Okon, Y. and R. Itzigsohn. 1995. The development of Azospirillum as a commercial inoculant for improving crop yields. Biotechnology Advances 13, 415-424. Pea-Cabriales J. J. and J. Z. Castellanos. 1993. Effects of water stress on N2 fixation and grain yield of Phaseolus vulgaris L. Plant and Soil 152(1): 151-155. Read, D. 1998. Plants on the web. Nature. 396: 22-23. Rovira, A. D.; G.D. Bowen and R.C. Foster. 1983. The significance of rhizosphere microflora and mycorrhizas in plant nutrition. In: Encyclopaedia of plants. Spring Verlag. p. 61-93. Schwenke, G.D., D.F. Herridge., R.D. Murison, W. Felton and H. Marcellos. 1997. Management of crop residues and nitrogen fertility for improved dryland cereal production can benefit soil organic fertility. In: Extending nitrogen fixation research to farmer s fields. Procc. Of a International Workshop on Managing Legume Nitrogen Fixation in the Cropping systems of Asia, 20-24 Aug 1996. ICRISAT, Asia Center. Rupela, O., Johansen, C and Herridge, D.F. (eds) Andhra Pradesh. India. p. 154-165. Selosse, M.A. and Le Tacon, F. 1998. The land flora: a phototroph-fungus partnership? Tree: 15-20. Sylvester-Bradley, R., J.A. Kipe-Nolt, y D.J. Harris. 1985. Evaluacin, seleccin y manejo de sistemas leguminosa-rizobio para aumentar la fijacin de nitrgeno. Gua de Estudio del Curso Intensivo realizado del 18 de noviembre al 13 de diciembre de 1985 en la Universidad Federal de Ro Grande do Sul. Departamento do solos. Faculdade do agronoma. Porto Alegre, Brasil. 79 p. Sutton, C.J. 1973. Development of Vesicular-arbuscular mycorrhizae in crop plant. Canadian Journal of Botany . 51 (12): 2487-2493. Tavrez L., E. 2001. Inoculacin de los simbiontes Azospirillum brasilense y Glomus intraradices y su efecto en la productividad del maz en Ro Bravo, Tamaulipas. Tesis Profesional. UAMRA, Universidad Autnoma de Tamaulipas. 59 p. Uribe, V.G. 2000. Parcelas de Validacin establecidas por Tcnicos PEAT, ZINDER e Investigadores del INIFAP en Yucatn. En: Informe anual de Labores del Campo Experimental Mococh. Centro de Investigacin Regional del Sureste. (Impreso). Waisel, Y., A. Eshell and U. Kafkafi. 2002. Plant roots. The hidden half. Third edition revised and expanded. Marcel Dekker New York. 1120 p. Wani, S. P., O.P. Rupela and K.K. Lee. 1997. soil mineral nitrogen concentration and its influence on biological nitrogen fixation of grain legumes. In: Extending nitrogen fixation research to farmer s fields. Procc. Of a International Workshop on Managing Legume Nitrogen

85

Fixation in the Cropping systems of Asia, 20-24 Aug 1996. ICRISAT, Asia Center. Rupela, O., Johansen, C. and Herridge, D.F. (eds) Andhra Pradesh. India. p. 183-198. Tawaraga, K., K. Sasai and T. Wagatsuma. 1994. Effect of phosphorus application on the contents of aminoacids and reducing surged in the rhizosphere and vesicular arbuscular mycorrhizal infection of white clover. Soil Science and Plant Nutrition 4: 539-543.

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AISLAMIENTO, SELECCIN, PRODUCCIN Y EVALUACIN DE UN INOCULANTE BASADO EN CEPAS NATIVAS DE Azospirillum EN EL NORTE DE TAMAULIPAS
Mendoza H. Alberto1, Cruz M. Antonia1, Jacques-Hernndez Cuauhtmoc2.
(1) Lab. Biotecnologa Vegetal I, (2) Transferencia de Tecnologa, Instituto Politcnico Nacional, Centro de Biotecnologa Genmica, Reynosa, Tamps. Mxico. aguilaquecae@yahoo.com

RESUMEN La generacin de desarrollos tecnolgicos basados en oportunidades o necesidades reales de los diferentes sectores productivos es uno de los objetivos torales del Centro de Biotecnologa Genmica (CBG). Desde la creacin del CBG, el laboratorio de Biotecnologa Vegetal I cuyo responsable es el Dr. Alberto Mendoza, defini como una lnea de investigacin el aprovechamiento de microorganismos benficos del suelo y uno de los resultados tangibles fue el aislamiento de diversas cepas de bacterias Gram (-) del gnero Azospirillum. Est ampliamente documentado que estas bacterias colonizan la rizsfera de las gramneas y estimulan el crecimiento de los cultivos debido a su capacidad de produccin de sustancias promotoras de crecimiento y al incremento en la fijacin de nitrgeno atmosfrico (Iglesias et. al. 2001). En el presente trabajo se resumen los resultados ms relevantes obtenidos en el CBG. De ellos se subraya, el aislamiento de un grupo de bacterias de la especie Azospirillum brasilense con caractersticas superiores en condiciones in vitro (BV-112, BV-191, BV-180, BV-181 y CBG-497), la produccin de biomasa bacteriana de la cepa CBG-497, la formulacin de inoculantes semislidos con estas cepas, la evaluacin en campo del mismo grupo de cepas, as como la evaluacin extensiva de la cepa CBG-497 en una superficie superior a las 2000 ha de sorgo, para determinar su efecto sobre el rendimiento de grano. Concluyendo que con los resultados obtenidos se tienen suficientes elementos para definir una tecnologa de fabricacin de inoculantes bacterianos rentable, con posibilidad de ser aprovechada en beneficio del agricultor.

INTRODUCCIN La fijacin biolgica de N2 por leguminosas en simbiosis con Rhizobium spp. ha sido estudiada por mas de un siglo, desde su descubrimiento por Hellriegel y Wilfarth (Bhote et. al., 1998). Reportes espordicos de fijacin de N2 (no simbitico) asociado con pastos tropicales aparecieron hace ms de dos dcadas, pero su descubrimiento qued en 87

duda hasta el desarrollo de la tcnica de reduccin de acetileno que permiti la estimacin precisa in situ de la actividad de la nitrogenasa (Graham et al. 1998). Numerosas bacterias diaztrofas fijadoras de N2 han sido identificadas y clasificadas en diversos gneros incluyendo Klebsiella, Azobacter, Azospirillum, Clostridium, Pseudomonas entre otras. Estas bacterias han sido aisladas de rizosfera, suelo, superficie de raz y del interior de la raz donde ocasionalmente se encuentran en gran cantidad (Bashan y Holguin, 1997). Bacterias del gnero Azospirillum son organismos fijadores de nitrgeno que viven en asociacin cercana con la rizsfera de las plantas (Bashan, et al. 1993). En muchas especies de plantas estudiadas la colonizacin bacteriana se localiza en la zona de elongacin de la raz. Miembros de Azospirillum estimulan la densidad y longitud de los pelos radiculares, la taza de aparicin de races laterales y la superficie del rea de la raz. La intensidad de sus efectos en la morfologa de la raz es dependiente de la especie de la planta y del cultivar pero sobre todo de la concentracin del inculo de Azospirillum. En muchos casos, la concentracin mnima es de 1 x 107 colonias formando unidades (UFC) por semilla (Bashan, 1998). Los efectos de la inoculacin por Azospirillum parecen estar determinados principalmente por los estados tempranos del desarrollo de la planta durante las primeras semanas despus de la colonizacin ptima de las races (Burdman, et al. 2000). Sin embargo, la inoculacin con Azospirillum puede producir aumentos significativos en la produccin bajo ciertos ambientes y condiciones de suelo aun en la ausencia de una eficiente fijacin de N2. Consecuentemente, los estudios en busca de efectos benficos adicionales gracias a las inoculaciones con Azospirillum para crecimiento de plantas han aumentado. Actualmente, el nfasis se ha puesto en la asociacin de la bacteria con las races de las plantas y en elucidar los mecanismos de la mutua interaccin (Bashan y Holguin, 1997). Azospirillum ha sido un organismo modelo para el estudio de las interacciones planta-bacteria y es probablemente la bacteria de la rizsfera no-simbitica ms estudiada. Azospirillum ha sido aislada de una amplia variedad de plantas incluyendo muchos pastos y cereales en todo el mundo, de climas tropicales, templados y fros; plantas desrticas, cultivos de maz inundados y suelos afectados por sales (Neyra, 1981). Las asociaciones pueden ser descritas como una colonizacin de rizsfera, rizoplano y el interior de la raz. Esta colonizacin es el resultado de un enriquecimiento selectivo del microorganismo mejor adaptado al nicho ecolgico formado por la raz ambiental (Bashan y Holguin, 1997). Azospirilla es quimiotcticamente atrado hacia la rizsfera por un exudado radicular y su alto mecanismo verstil le permite sobrevivir bajo condiciones ampliamente variantes que ocurren en el suelo. Azospirillum spp; puede adherirse a la superficie celular de la raz, penetrar y colonizar espacios intercelulares dentro del interior de la raz (Bashan y Holguin, 1994). Las cepas de Azospirillum tienen potencial para producir bacteriocinas las cuales inhiben componentes de la microflora. Tambin, ellas producen siderforos los cuales son 88

muy eficientes para la adquisicin de Fe++. Algunas cepas de Azospirillum penetran las races de su hospedero y enseguida se establecen en gran nmero en los espacios intercelulares entre la epidermis y el cortex o en las capas corticales (Okon et al., 1997) y aun en el sistema vascular (Patriquin et al.; 1983). En adicin, varios Azospirilla son dotados con una muy eficiente asimilacin de Fe en la rizsfera, por medio de eso toman este elemento no disponible para otros microorganismos sin capacidad siderfora (Kloepper, et al., 1980). El fenmeno de promocin de crecimiento de la planta debido a la asociacin de la bacteria Azospirillum con las races de las plantas es de considerable inters econmico y cientfico. Hasta ahora beneficios de Azospirillum en Poaceae tales como maz, sorgo y trigo han sido bien establecidos y los resultados de muchos experimentos con al respecto han sido publicados. Sin embargo, la mayora de los estudios de campo han sido desarrollados en zonas templadas y suelos con alto contenido orgnico, por lo tanto en suelos cidos, esos suelos son los ms comunes en los cuales Azospirillum spp ha sido reportado en la naturaleza (Glick, 1995). Adems, los mejores resultados han sido obtenidos con cepas aisladas del mismo hospedero en este ambiente adaptado (cepas homlogas) y experimentos no comparativos se han realizado usando diferentes cepas bajo diferentes condiciones ambientales (Bashan y Holguin, 1997). El mayor problema que ha impedido la aplicacin a gran escala de Azospirillum como un Biofertilizante es que los efectos benficos en las semillas dependen de mltiples factores, muchos de los cuales no son conocidos o sujetos de controlar bajo condiciones de campo (ejemplo: temperatura, lluvia, difusin de O2, pH del suelo, suelos pobres y la presencia de microorganismos competentes, entre otros). Como lo mencionado por Okon y Labandera, (1994), esto es una falta de informacin importante que por otro lado puede indicar un suceso de fracaso de Biofertilizantes concerniente a su promocin o capacidad de produccin. Esto tambin ha sugerido que muchas ms cepas necesitan ser estudiadas para cada cereal (Caballero et al., 1992).

OBJETIVO El objetivo de este trabajo fue aislar, seleccionar y evaluar cepas de Azospirillum brasilense nativas de suelos alcalinos tpicos del noreste del pas, que sean la base de productos formulados que a manera de fertilizantes biolgicos, bioestimulantes o inoculantes demuestren en evaluaciones en campo, una clara capacidad para favorecer el desarrollo vegetativo e incrementar la productividad en gramneas, principalmente del sorgo y maz que se cultivan en las diferentes condiciones agro ecolgicas tpicas (regin semirida y suelos alcalinos) del norte del Estado de Tamaulipas. Es necesario destacar que se pretende que el conjunto de metodologas empleadas este proyecto sean reproducibles en diversas zonas de siembra de los cultivos de inters.

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MATERIALES Y MTODOS Muestras de suelo y tejido para aislamiento de cepas de Azospirillum El aislamiento de la bacteria se realiz a partir de muestras suelos, races y tejido de maz y sorgo, en ambos ciclos de siembra (Primavera-Verano y Otoo-Invierno), de parcelas de temporal y riego, donde se sembraron los hbridos Asgrow-Jaguar (maz) y Pioneer-3025 (sorgo), localizadas en los municipios Tamaulipecos de Ro Bravo, Daz Ordaz y Miguel Alemn. Se colectaron muestras de suelo (arcillo-arenoso, materia orgnica baja <1%, pH 7.8) y de raz de cada planta, se guardaron en bolsas limpias de polietileno y se transportaron inmediatamente al laboratorio donde fueron procesadas. Se colectaron plantas adultas de los cultivos dentro de un rea de 30,000 m2, con una distancia aproximada de 75 a 100 m. entre plantas. Aislamiento de cepas de Azospirillum El aislamiento de Azospirillum de suelo se realiz haciendo diluciones en una solucin estril de NaCl2 al 0.85%. Las diluciones de 10-3 y 10-4 fueron plaqueadas por triplicado en medio Rojo Congo. Para el aislamiento de rizsfera se tom un gramo de raz; el suelo intacto adherido a la raz fue resuspendido en 1 ml de solucin estril de NaCl2 0.85% (Baldini y Dobereiner, 1980). El aislamiento de Azospirillum de tejido de plantas fue hecho de 5 g de tejido molido con 5 ml de NaCl2 al 0.85% estril y plaqueado en cantidades iguales en Rojo Congo (Caballero et al 1992). Estos cultivos fueron incubados a 30C por 48-72 horas. Se hicieron dos diferentes pruebas despus para verificar las colonias tpicas de Azospirilla. Despus de 72 horas, se observaron pequeas colonias rojas representativas, indicando la presencia de Azospirillum spp. (Rodrguez Cceres, 1982) y las colonias del primer aislamiento fueron inoculadas en condiciones de microaeroflicas, en el medio NFB (Caballero et al., 1992). Identificacin de cepas de Azospirillum La identificacin fenotpica de las cepas obtenidas fue realizada de acuerdo a los criterios aceptados para el gnero (Tarrand et al. 1978) y fue confirmado por el anlisis gentico descrito por Giovannetti en 1990, y Han & New en, 1998, el cual consiste en hacer un anlisis tipo Fingerprint del ADN del 16S rDNA mediante la digestin del gen con la enzima AluI y los perfiles genticos se observaron en geles de agarosa al 1%, teidos con bromuro de etidio. Determinacin de la actividad nitrogenasa Para determinar la actividad de nitrogenasa, se utiliz el mtodo de la reduccin de acetileno en medio NFb semigelificado (Dobereiner y Marriel, 1976) mediante cromatografa de gases de acuerdo a las condiciones descritas por Mascara-Esparza et al (1988).

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Produccin in vitro de cido Indol Actico (AIA) A la fecha existe poca informacin disponible sobre variaciones en la produccin de la fitohormona responsable del beneficio en promocin del crecimiento en gramneas como lo es el cido-indol actico (AIA), por lo cual se evalu la produccin de sta fitohormona en las cepas de Azospirillum aisladas. Cada cepa de A. brasilense se creci durante 18 h a 32 C en medio de malato adicionado con 0.2% de NH4Cl. Posteriormente cada aislamiento de A. brasilense se inocul en matraces de 125 ml conteniendo 50 ml de caldo succinatofructuosa de sales adicionado con 100 mg de triptofano y crecido durante 48 h a 30 C (Jain y Patriquin, 1985). Las condiciones de cultivo de A. brasilense, extraccin y cuantificacin del AIA se hizo de acuerdo al mtodo descrito por Mascara-Esparza, et al., en 1988 y FuentesRamrez et al., 1993. Produccin de la biomasa bacteriana La cepa de Azospirillum CBG-497, seleccionada por su capacidad de produccin de cido-indol actico in vitro y la capacidad de incrementar la produccin de sorgo en bioensayos, fue elegida para aplicacin extensiva con motivos de evaluacin. Esta cepa fue multiplicada en medio lquido Luria Bertani (LB) suplementado con succinato de sodio en matraces Erlenmeyer y en fermentadores de 3 y 20 L. Los matraces inoculados con la bacteria se agitaron a 250 rpm a 30 C hasta que el crecimiento alcanz la fase estacionaria. En el fermentador se emple un inculo de 2% v/v preparado en matraz Erlenmeyer y transferido al fermentador en fase logartmica, cosechando la bacteria en el estado estacionario, cuando la fuente de carbono se agot. El oxgeno disuelto se mantuvo a un mnimo de 15%, manipulando la agitacin y la aireacin de acuerdo a lo requerido. El pH al inicio de la fermentacin se ajust a 7.0 y no se control en las corridas batch, solo en una corrida donde se control con hidrxido de amonio. En las corridas Fed-Batch fueron pH-Stat, ya que el pH se emple como parmetro de control para adicin de la fuente de carbono que consisti en una solucin de cido succnico / succinato de sodio a un pH de 2.5. La temperatura se control a 29 C. El crecimiento de la bacteria durante el curso de la fermentacin se monitore determinando la densidad ptica de caldo de fermentacin a una longitud de onda de 660 nm. Cada punto de densidad ptica equivale a 8x109 UFC/ml. Produccin del Biofertilizante Se elabor el volumen de inoculante para un total de 2150 Ha. La presentacin del inoculante fue en turba (Redi earth Marca Scott) como soporte previamente esterilizado y posteriormente inoculado con la bacteria de manera tal que al momento de la preparacin se tena 1x106 UFC/semilla para sorgo y 6x107 UFC/semilla para maz (UFC = Unidades Formadoras de Colonias o Bacterias). La presentacin final fue en cajas con 10 dosis de 420 gr. y cada dosis fue suficiente para tratar un saco de 50 lb. (22.7 Kg.) de semilla de sorgo o dos sacos de 50 lb. de maz (de 60000 semillas) de maz. Distribucin y aplicacin de Biofertilizante La evaluacin del inoculante o Biofertilizante en el ciclo Otoo-Invierno 20022003, se entregaron un total de 860 dosis para su aplicacin de una dosis por saco de 91

semilla que equivale a 2150 hectreas de acuerdo con una densidad de siembra promedio de 2.5 Ha/saco. La distribucin se realiz a travs de Patronato para la Investigacin Fomento y Sanidad Vegetal (PIFSV) y de los Centros de Apoyo de Desarrollo Rural (CADERs) de manera tal que se establecieron parcelas con el inoculante en los municipios de Reynosa, Matamoros, Ro Bravo, Valle Hermoso, San Fernando y Abasolo. Determinacin del rendimiento de grano Se seleccionaron parcelas donde se realizaron muestreos para estimar el rendimiento. Se establecieron las coordenadas geogrficas de cada parcela con un geoposicionador global marca Garmin modelo e-trex. Se colectaron las plantas de 5 metros lineales seleccionados al azar de la superficie sin y con el inoculante. Se contaron las plantas, se pes la planta y la panoja, se midi el tallo y la altura de la planta. Con estos datos se realiz una estimacin de la produccin escalada a toneladas de grano/ hectrea convertido a porcentaje de incremento con respecto a su testigo y estos datos son los reportados. Evaluacin de cepas de Azospirillum en CBTa 98 Alternativamente se evaluaron diferentes cepas de Azospirillum que mostraron alto potencial in vitro y en bioensayos en invernadero. Esta evaluacin se realiz en condiciones ms controladas en la parcela del CBTa 98 en el vaso en Villa Crdenas, municipio de Matamoros (97 48.945' latitud norte, 25 54.735' longitud oeste y altitud promedio 11 metros sobre el nivel del mar). Las cepas evaluadas fueron; BV-112, BV-191, BV-180, BV-181 y CBG-497, empleando el hbrido de sorgo Dekalb DK-52.

RESULTADOS Aislamiento de Azospirillum de suelo y rizsfera de maz En la figura 1, se muestra la forma tpica de las colonias de Azospirillum brasilense obtenidas empleando en el medio de selectivo Rojo Congo. La determinacin de poblaciones de Azospirillum en esos suelos orgnicos pobres y alcalinos (pH 7.8) arroj un promedio de 3 x 105 UFC por gramo de suelo. Esta concentracin fue ms baja que la reportada en suelos ricos, predominantemente cidos, de zonas templadas. En muchos casos, la concentracin mnima de la bacteria requiere de establecer una efectiva interaccin planta-microorganismo reportndose que sea de 1 x 107 UFC/planta.

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Figura. 1. Tpicas colonias de Azospirillum brasilense en el medio de selectivo Rojo Congo. El nmero de Azospirilla adherido a la rizsfera fue determinado durante un periodo de 10 semanas, con un muestreo tomado durante un perodo de 15 das. La concentracin de Azospirillum adheridos a la raz fue de 5 x 105 lo cual demuestra la capacidad de estas bacterias para interactuar con los hbridos de maz y sorgo de esta regin (figura 2). El nmero de bacterias capaces de invadir el tejido interno fue analizado, se encontr que el mximo nmero de bacterias por gramo de tejido fue de 1 x 103. Esta concentracin fue decayendo mientras que las plantas llegaban a la madurez.

Figura. 2. Poblacin de Azospirillum en suelo y rizsfera de maz. Promedio de clulas de Azospirilla formando unidades (UFC) obtenido de nueve muestras por tratamiento y analizado como se describe en Materiales y Mtodos. : Promedio de Azospirilla por gramo de suelo de nueve aislamientos de suelo. : Promedio de Azospirilla adherida a la rizsfera (T-0). : Promedio de Azospirilla adherida a la rizsfera (T-1). : Promedio de Azospirillum adherido a la rizsfera (T-2). Cada punto indica el promedio de Azospirillum en la rizsfera. Las muestras de races de maz fueron tomadas cada 2 semanas despus de 20 das de post-inoculacin. 93

Produccin in vitro de cido Indol Actico (AIA) Se obtuvieron en el orden de 200 aislados, mismos a los que se determin su produccin de cido-indol actico, de acuerdo a la metodologa arriba descrita. Se aislaron cepas que incluso no producan esta fitohormona. Las cepas o aislados ms destacados se muestran en la figura 3.

Figura. 3. Produccin de cido indol actico (AIA) de los aislados o cepas destacadas. La cepa CBG 497 se le seleccion tomando entre otros parmetros, esta caracterstica destacada. Produccin de la biomasa bacteriana Cintica de crecimiento de Azospirillum en bioreactores de 3 y 20 litros se muestra en la figura 4. Empleando el sistema Fed-batch se logr la concentracin mxima de biomasa bacteriana, de 9 unidades de densidad ptica, equivalente a 7.2x1010 bacterias/ml, y el mnimo fue 7.5 de densidad ptica equivalente a 6x1010 bacterias/ml logrado en sistema batch. Aunque estas concentraciones bacterianas son suficientes para hacer rentable la produccin de inoculantes basados en esta bacteria, la etapa de fermentacin debe ser estudiada a profundidad ya que aun existen muchos elementos que pueden ser sujetos a optimizacin, por ejemplo, el rgimen Fed-batch, que hemos iniciado a estudiar como un sistema idneo para incrementar sustancialmente la biomasa bacteriana.

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Figura. 4. Produccin de la biomasa bacteriana. Cintica de crecimiento de Azospirillum en bioreactores de 3 y 20 litros. Cada unidad de densidad ptica (OD) a 660 nm equivale a 8x109 bacterias/ml. Las corridas F20L se realizaron en un fermentador de 20 litros nominal con 14 litros de volumen de operacin, con control de pH ( ) y sin control de pH ( ). Las corridas F3L se realizaron en un fermentador de 3 litros nominal con 1.5 litros de volumen de operacin, con control de pH o pH-Stat ( ) y sin control de pH ( ). Resultados de parcelas selectas Los resultados de las diferentes localidades con la cepa CBG-497 se muestran en la figura 5, el porcentaje mostrado es con relacin al testigo de cada localidad y son datos promedios de las parcelas de los municipios indicados. Con excepcin de Abasolo, la evaluacin se realiz en sorgo grano en los diferentes municipios. En Abasolo se evalu en maz nicamente. Aunque los resultados se estimaron en base a una metodologa para la determinacin del rendimiento y no por pasaje con carro bscula, estos son indicativos del efecto del Biofertilizante, donde claramente se observa un efecto positivo. Los resultados son el promedio de las parcelas donde se realiz el seguimiento y se muestre para la estimacin del rendimiento en cada municipio.

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Figura. 5. Incremento en el rendimiento de produccin de grano (datos estimados) cepa CBG-497. Porcentaje con respecto al Testigo.

El anlisis estadstico por la prueba de medias de Tukey se muestra en la Tabla 1. El incremento observado en el rendimiento de grano fue estadsticamente significativo en los diferentes municipios donde se realiz la evaluacin. Es necesario subrayar que en ninguna parcela se observaron resultados negativos. Tabla 1. Prueba de medias por prueba de Tukey para la evaluacin en municipios Tratamiento Kg. grano Ha-1 %Incre.* Ro Bravo 4687 a 4.6 Matamoros 4687 a 11.6 Valle Hermoso 4581 b 7.2 Reynosa 4240 c 15.0 Promedio 4296 c 12.5 Testigo (promedio) 3773 d San Fernando 3284** e 23.5 *Incremento en el rendimiento de grano con respecto al testigo. ** En San Fernando en rendimiento en el testigo fue de 2235 Kg./Ha Valores con las mismas letras son estadsticamente iguales (Tukey, =0.05)

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Resultados de parcela del CBTa 98 Los resultados obtenidos en la parcela del CBTa 98 se muestran en la siguiente Figura 6. Se incluy para fines comparativos el Biofertilizante del INIFAP tambin distribuido por el PIFSV que est formulado con el hongo endomicorrzico arbuscular Glomus intraradix.

Figura. 6. Incremento en el rendimiento de produccin de sorgo. Porcentaje con respecto al Testigo. Evaluacin realizada en parcela del CBTa 98, localizada en el vaso en Villa Crdenas, municipio de Matamoros (97 48.945' latitud norte, 25 54.735' longitud oeste y altitud promedio 11 metros sobre el nivel del mar). El anlisis estadstico por la prueba de medias de Tukey se muestra en la Tabla 2. El incremento observado en el rendimiento de grano fue estadsticamente significativo en los formulados elaborados con las cepas CBG-497, BV-180, BV-181, Micorriza y Micorriza + CBG-497, por otro lado, a pesar de que el incremento en el rendimiento observado por el formulado multicepa fue de 6.7% con respecto al testigo, este resultado fue estadsticamente no significativo o dicho de otra manera, fue estadsticamente igual que el testigo. Aqu es claro que no todas las cepas que en experimentos in vitro pueden ser potencialmente elegibles, muestran resultados positivos en pruebas de campo. En esta evaluacin se demuestra que el Laboratorio Vegetal I del CBG cuenta con un mayor nmero de cepas biolgicamente eficientes en la estimulacin del desarrollo y produccin de grano de sorgo. Tambin se confirma que el rendimiento de grano fue menor en la aplicacin conjunta de Micorriza Glomus intraradix y Azospirillum cepa CBG 497 (al menos bajo las condiciones de esta evaluacin) que en las aplicaciones individuales de ambos microorganismos.

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Tabla 2. Prueba de medias por prueba de Tukey para la evaluacin en CBTa 98 Tratamiento Kg. grano Ha-1 %Incre.* BV- 181 4313 a 12.7 BV- 180 4367 a 13.3 Micorriza 4264 a 11.8 CBG-497 4240 b 10.4 Micorriza +CBG-497 4133 c 7.4 BV- 191 3813 d -0.2 Multicepa 4080 d 6.7 Testigo 3800 d BV- 112 3727 e -2.2 * Incremento en el rendimiento de grano con respecto al testigo. Valores con las mismas letras son estadsticamente iguales (Tukey, =0.05)

DISCUSIN Se cree que las cepas nativas de Azospirillum presentes en esos suelos pueden jugar un rol en un la produccin de grano como una consecuencia simbitica debida al aumento de la asimilacin de minerales del suelo (Pacovsky et al., 1985). La adhesin de Azospirillum en la races es esencial para el establecimiento de la asociacin con la planta hospedera. Adems, para ser efectivo, en la aplicacin de la bacteria Azospirillum stas deben ser capaces de establecerse ellas mismas en un alto nmero en la rizsfera de plantas inoculadas. Esto es bien conocido, que la habilidad competitiva de Azospirillum disminuye en suelos pobres en contenido orgnico (Fallik et al., 1989). Adicionalmente, se ha observado que races de maz inoculadas con Azospirillum muestran una mejor respuesta a pH 5.8 a 7.0 (Eory et al., 1995) mientras que en estas regiones el pH del suelo es de 7.8. Se ha observado un establecimiento simbitico adecuado cuando se realizan inoculaciones bacterianas usando cepas nativas de Azospirillum aisladas del mismo genotipo de maz (J. Caballero comunicacin personal). Los resultados muestran que el nmero de bacterias de Azospirillum en el suelo fue mas bajo que el ptimo (107 UFC) necesario para inducir un efecto simbitico en las plantas hospederas (Okon y Labandera, 1994). Los Azospirilla detectados en el suelo fue de solo 3 x 105 UFC/g de suelo y el nmero de Azospirillum presente en la rizsfera fueron completamente similares. Esto postula que al menos dos factores estn involucrados: 1) el nmero inicial de bacterias en el suelo; y 2) la adaptacin de la bacteria a condiciones ambientales prevalecientes en zonas ridas. En conclusin, esto fundamenta que la introduccin de una cepa competente de Azospirillum en un medio ambiente completamente diferente no asegura el mismo incremento en el comportamiento simbitico como se espera en su nicho original.

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El porcentaje de incremento en el rendimiento de grano de sorgo con respecto al testigo en la evaluacin con la cepa CBG-497 en las parcelas seleccionadas de los diferentes municipios fue del orden de 10%, similar al resultado en la evaluacin realizada bajo condiciones mas controladas en la parcela del CBTa 98, donde el peso de grano fue obtenido por pesaje con carro bscula. Por lo que se asume que el procedimiento de estimacin por muestreo al azar de cinco metros lineales tiene un aceptable porcentaje de error y es representativo. En maz donde se cont con riego en el desarrollo del cultivo, el efecto de la cepa CBG-497 sobre el rendimiento fue muy significativo. Con respecto a los resultados obtenidos de rendimiento de grano y tipo de suelo, los resultados ms bajos en porcentaje de incremento en produccin de grano con respecto a su testigo, fueron en Ro Bravo y Valle Hermoso, municipios donde las parcelas evaluadas se realizaron en suelo arenoso y no franco limoso como en el resto de las parcelas. De aqu surge la pregunta; la eficacia biolgica de la cepa CBG-497 es menor en suelos arenosos con respecto a su eficacia biolgica en suelos francos limosos?. Esta pregunta puede ser contestada definitivamente si se contina la evaluacin en campo de la cepa CBG-497 y se realiza igual manera la evaluacin de las cepas que mostraron buenos resultados (BV-180 y 181). En la evaluacin realizada del CBTa 98, se encontr que las cepas BV-181 y BV180 tienen comportamiento igual o mejor que la cepa CBG-497 y la Micorriza INIFAP (Glomus intraradix). De igual manera a la informacin proporcionada por personal del CERIB-INIFAP, se confirma el rendimiento de grano fue menor en la aplicacin conjunta de Micorriza Glomus intraradix y Azospirillum cepa CBG 497. En caso de la formulacin multicepa, el rendimiento de grano fue mayor que el testigo, pero inferior a los mejores resultados, probablemente sea el reflejo del empleo de las cepas BV-112 y BV-191 que no tuvieron un efecto positivo sobre el cultivo, ya que el incremento en el rendimiento porcentual promedio de efecto individual de la cuatro cepas que constituyeron la formulacin multicepa, es similar al incremento en rendimiento porcentual observado de este tratamiento con la formulacin multicepa (5.9% vs. 6.7% respectivamente). Los resultados indican que el empleo de un inoculante basado en Azospirillum es una adecuada alternativa para obtener un incremento mnimo del 10% en rendimiento de grano por hectrea sin emplear fertilizacin nitrogenada. Por lo anterior es necesario continuar con la evaluacin en campo de inoculantes o Biofertilizantes formulados para confirmar los resultados obtenidos. Esto nos dar la oportunidad de poder profundizar en el conocimiento de la produccin microbiana en bioreactores de mayor escala, as como en las diferentes alternativas de formulacin, por ejemplo; el desarrollo de inoculantes lquidos que resuelvan los problemas de aplicacin o formulados multicepa y multiespecie. Tambin se podrn evaluar en mayor superficie las cepas que mostraron buenos resultados de productividad adems de la influencia de los factores agrobiolgicos con los hbridos de sorgo y maz ms comnmente empleados. Finalmente el continuar con actividades en campo empleando Biofertilizantes, promover el empleo de estos productos por parte de los agricultores en beneficio directo a la produccin agrcola. 99

REFERENCIAS
Baldini VLD Dbereiner J. (1980). Hots-plant specificity in the infection of cereals with Azospirillum spp. Soil Biol Biochem. 12:433-439. Bashan Y, Holguin G, Lifshitz R .(1993). Isolation and characterization of plant growth-promoting rhizobacteria. In: Glick BR, Thompsom JE (eds) Methods in plant molecular biology and biotechnology. CRC, Boca Raton, Fla. Pp 331-345. Bashan Y, Holguin G. (1994). Root-to-root travel of the beneficial bacterium Azospirillum brasilense. Appl Environ Microbiol 60:2120-2131. Bashan Y, Holguin G. (1997). Azospirillum-plant relationships: environmental and physiological advances (1990-1996). Can J Microbiol 43:103-121. Bashan Y. (1998). Inoculants of plant growth-promoting bacteria for use in agriculture. Biotechnol Adv 16:729-770. Bothe H., Krsgen, H., Lehmacher, T., and Hundeshagen, B. (1992). Differential effects of Azospirillum, auxins and combined nitrogen on the growth of the roots. Burdman S,Okon Y, Jurkevitch E, (2000). Surface characteristics of Azospirillum brasilense in relation to cell aggregation and attachment to plant roots. Crit. Rev. Microbiol 26:91-110 Caballero-Mellado J, Carcao Montiel M. G, Mascarua-Esparza M. A. (1992). Field Inoculation of Wheat (Triticum aestivum) with Azospirillum brasilense under temperate climate. Symbiosis 13:243-253. Dobereiner J, IE Marriel (1976). Ecological distribution of Spirillum lipoferum Beijerinck, Can J Microbiol 22: 1464-1473 Eory VJ, Momo FR, Alvarez M. (1995). Growth and survival of Azospirillum in roots and maize rhizospheres with different leaves of acidity. Rev. Argent. Microbiol 27: 99-105 Fallik E, Okon Y, Epstein E, Goldman A, Fischer M. (1989). Identification and quantification of IAA and IBA in Azospirillum brasilense inoculated maize roots. Soil Biol. Biochem 21:147-153 Fuentes-Ramrez LE, T.Jimnez-Salgado, I.R Abarca-Ocampo, J Caballero-Mellado. (1993). Acetobacter diazotrophicus, an indoleacetic acid producing bacterium isolated from sugarcane cultivars of Mexico. Plant and Soil. 154: 145-150 Glick R. (1995). The enhancement of plant growth by free-living bacteria. Can J. Microbiol 41:109-117 Graham PH, J Bale, D Baker, M Fried, J Roskoski, KT Mackay , E. Craswell (1998) The contribution of biological nitrogen fixation to plant production: An overview of the symposium and its implications. Plant and Soil 108: 1-6. Iglesias, Mara C. Cracogna, Mariano F. Fogar, Mariela N. Romero, Edgar. (2001). Inoculacin con Azospirillum ssp. en cultivos comerciales de girasol en una media loma baja. Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas. Univ. Nac. Del Nordeste. Republica de La Argentina. Boletn. 75. Jain, D.K. D.G. Patrinquin. (1985). Characterization of a substance produced by Azospirillum which causes branching of wheat root hair. Can J. Microbiol. 31:206-210. Kloepper JW, Leong J, Teintze M, Schroth MN. (1980). Enhanced plant growth by siderophores produced by plant growth-promoting rhizobacteria. Nature 286:885-886.

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Mascara-Esparza, R. Villa-Gonzlez and J. Caballero-Mellado. (1988). Acetylene reduction and indoleacetic acid production by Azospirillum isolates from Cactaceous plants. Plant and Soil 106: 91-95. Neyra, C.A., L. De Vasconcelos, and L. Miller, (1980). Related Articles, Links Free-living and symbiotic characteristics of chlorate resistant mutants of Rhizobium. Can J Microbiol. 26(3):338-42. Okon Y, Albrecht SL, Burris RH. (1977). Methods for growing Spirillum lipoferum and for counting it in pure culture and in association with plants. Appl. Environ Microbiol 33:8588. Okon Y, Labandera-Gonzales CA. (1994). Agronomic applications of Azospirillum: an evaluation of 20 years worldwide field inoculations. Soil Biol Biochem 26:1591-1601. Pacovsky R S, Paul E A , Bethlenfalvay G J. (1985). Nutrition of sorghum plants fertilized with nitrogen or inoculated with Azospirillum brasilense. Plant Soil 85:145-148. Patriquin, DG, Dbereiner, J Jain, D K. (1983). Sites and processes of association between diazotrophs and grasses. Can J Microbiol 29:900-915. Rodriguez Cceres EA. (1982). Improved medium for isolation of Azospirillum spp. Appl. Environ. Microbiol 44, 990-991. Tarrand, J. J., N.R. Krieg and J. A Dbereiner. (1978). Taxonomic study of the Spirillum lipoferum. group, with description of a new genus Azospirillum gen. nov. and two species. Azospirillum lipoferum (Beijerinck) comb. nov. and Azospirillum brasilense sp. nov. Can. J. Microbiol. 24: 967-980.

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Respuesta de Variedades de Cacahuate (Arachis hypogaea L.) a la Fertilizacin Qumica y Biolgica en un Suelo Regosol
Arturo Durn Prado1*, Victor Lpez Galvn1 y Oscar Hugo Tosquy Valle1 INTRODUCCION. El cultivo de cacahuate se siembra en Mxico en 70,858 ha con una produccin de 91,453 toneladas y un rendimiento promedio de 1.7 ton/ha. Para cubrir la demanda nacional se importan anualmente ms de 7,000 toneladas. Veracruz cuenta con 213,000 ha de suelos regosoles apropiados para la produccin de esta oleaginosa, sin embargo, en este tipo de suelo la concentracin de los nutrimentos es sub-ptima, por lo que la inoculacin con micorriza representa una alternativa para mejorar el desarrollo de las plantas, adems de que se pueden reducir las dosis de fertilizante qumico. La estrategia para lograr una eficiente manipulacin de la asociacin Rhizobium-razmicorriza consta de los siguientes pasos: 1) Inoculacin con cepas de micorriza seleccionada, 2) Seleccin de genotipos que respondan favorablemente a la colonizacin con cepas seleccionadas, y 3) Establecer los cultivos en suelos apropiados para la proliferacin de micorriza en la rhizosfera y con alto potencial para la funcin simbitica (Lee y Wani, 1991). El objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta de cinco variedades de cacahuate a la biofertilizacin con micorriza Glomus intraradix. MATERIALES Y MTODOS. En el ciclo primaveraverano 2001 en el ejido Las Lomas municipio de rsulo Galvn, Ver., se estableci un experimento para evaluar cinco variedades de cacahuate y dos tipos de fertilizacin. Se empleo el diseo experimental de bloques al azar con cuatro repeticiones y arreglo de tratamientos en factorial 5X2. Las variedades evaluadas fueron. 1) Ro Balsas (erecta), 2) A-18 (erecta), 3) Ranferi Daz (erecta), 4) RF-214 (semi-rastrera) y 5) Huitzuco-93 (rastrera). Los tratamientos de fertilizacin consistieron en: 1) Fertilizacin qumica (40-40-00 kg/ha de N, P2O5 y K2O, respectivamente), empleando como fuentes sulfato de amonio (20.5% de N) y superfosfato de calcio simple (19.5% de P2O5) antes de la siembra y 2) Biofertilizacin con micorriza-arbuscular (Glomus intraradix) en dosis de 1.0 kg/ha aplicada a la semilla antes de la siembra + 1/3 de fertilizacin qumica. Como parmetro de respuesta se consider el rendimiento de grano ajustado al 8% de humedad. Se realiz anlisis de varianza y para determinar la rentabilidad de los tratamientos de fertilizacin Campo Experimental Cotaxtla. INIFAP. Apdo. Postal # 429, Veracruz, Ver. dur@yahoo.com.mx
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se utiliz el anlisis de beneficios brutos y netos propuesto por Perrin y Anderson (1988). RESULTADOS Y DISCUSION. Se detect significancia (=0.01) en el factor Variedad y no hubo efecto significativo para el factor Tipo de Fertilizacin, ni para la interaccin Variedad x Tipo de Fertilizacin. El mximo rendimiento de cacahuate con cscara, se obtuvo con la variedad erecta Ro Balsas con 2,281 kg/ha, la cual fue estadsticamente similar a la variedad semi-rastrera RF-214 con 1,936 kg/ha y superior en 100% a Huitzuco-93 en 117% a la variedad A-18 y en 126% a Ranferi Daz. El costo del tratamiento de fertilizacin qumica 40-40-00, cubierto con las fuentes: sulfato de amonio ($400.00/ha) y superfosfato de calcio triple ($200.00/ha) y dos jornales para su aplicacin ($70.00/jornal) fue de $740.00. Por su parte, el tratamiento de G. intraradix + 1/3 de fertilizacin qumica tuvo un costo total de $281.99/ha, que considera $133.00/ha de fertilizante nitrogenado + $66.66/ha de fertilizante fosfatado + $12.00/ha del costo de la micorriza-arbuscular. El costo total de produccin del cultivo de cacahuate con fertilizacin qumica fue de $4,708.00/ha y de $4,250.00 empleando G. intraradix inoculado a la semilla + 1/3 de la fertilizacin qumica. Con una utilidad neta de $ 13, 040.00/ha y una relacin beneficio/costo de 1: 4.06, el mejor tratamiento fue sembrar la variedad erecta Ro Balsas con semilla inoculada con Glomus intraradix + 1/3 de la fertilizacin qumica. CONCLUSIONES. Las mejores variedades en cuanto al rendimiento fueron Ro Balsas y la lnea RF-214. Los rendimiento de cacahuate no se afectan si en lugar de la dosis normal de fertilizacin NPK (40-40-00) se utiliza biofertilizante Glomus intraradix + 13-13-00 de N, P2O5 y K2O, lo que permite reducir el costo de esta practica en 62%. La mejor opcin econmica fue la combinacin de Rio Balsas biofertilizada con Glomus intraradix + 1/3 de la dosis de fertilizacin qumica.

LITERATURA CITADA Lee, K. K. and P. Wani, S. 1991. Possibilities for Manipulating Mycorrhizal Assocciations in Crops. In: ICRISAT (International Crops Research Institute for the Semi-Arid Tropics), Phosphorus nutrition of grain legumes en the semi-arid tropics. (Johansen, C, Lee, K. K., and Sahrawat, K. L. eds.). Patancheru, India. p. 107-116. Perrin, R. y J. Anderson, 1988. CIMMYT. Manual Metodolgico de Evaluacin Econmica. La formulacin de recomendaciones a partir de datos agronmicos. 78 p.

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Respuesta de Germoplasma de Frijol a la Fertilizacin Qumica y Biolgica

Arturo Durn Prado1* Vctor Lpez Galvn1 y Javier Cumpin Gutirrez2 INTRODUCCION. El frijol (Phaseolus vulgaris L.) se cultiva en suelos marginales de baja fertilidad y con bajo fsforo y pH (4.5), adems se fertiliza slo el 25% de la superficie sembrada anualmente en el estado de Veracruz, el cual produce un promedio de 25,506 ton/ao con un dficit anual de ms de las 100 mil toneladas de grano. En condiciones de temporal, en promedio, para el ciclo de primavera-verano se siembran 11,825 ha con un rendimiento de 591 kg/ha y en el ciclo otoo-invierno 35,151ha con un rendimiento de 620 kg/ha. El nitrgeno atmosfrico puede ser fijado por el frijol para maximizar los rendimientos, Acua et. al, (1995) reportan a las cepas de Rhizobium leguminosarum biovar phaseoli 4050, CR 477 y BAT 761 como responsables en el incremento de la produccin de frijol de 30% a 60% a travs de ambientes y pases centroamericanos. Existe evidencia de la variacin gentica del frijol en cuanto a su eficiencia en el uso del fsforo del suelo y tolerancia a la toxicidad de aluminio y manganeso como lo citan Thung et. al, (1990). El objetivo de este trabajo fue identificar la respuesta de 46 genotipos de frijol a la biofertilizacin con bacterias Rhizobium leguminosarum biovar phaseoli y fertilizacin qumica. MATERIALES Y MTODOS. En un suelo acrisol (pH= 4.5) del Campo Experimental Papaloapan se estableci el 11 de octubre, en el ciclo O-I 1996-1997, un experimento parcelas divididas con 3 repeticiones. En la parcela grande se utilizaron tres tratamientos: 1) Biofertilizacin con Rhizobium leguminosarum biovar phaseoli (151+ CR 477+613) en dosis de 1.0 kg/ha inoculada a la semilla antes de la siembra, recomendadas por Acua (1995) + (00-120-00 kg/ha de N, P2O5 y K2O respectivamente); 2) Fertilizacin qumica (F. Q.) (90-120-00 kg/ha de N, P2O5 y K2O respectivamente) y 3) Fertilizacin qumica (120-120-00 kg/ha de N, P2O5 y K2O respectivamente). En las parcelas chicas se probaron 46 genotipos tolerantes a bajo fsforo. RESULTADOS. Los resultados del anlisis de varianza report diferencias significativas (=0.05) en rendimiento de grano para el tratamiento 2) Fertilizacin qumica (90-12000) con 1365 kg/ha, y 3) Fertilizacin qumica (120-120-00) con 1299 kg/ha mientras que el tratamiento biofertilizacin + (00-120-00) fue de 963 kg/ha. Los resultados indican que hay tres genotipos eficientes en la fijacin de N2 con aumentos Campo Experimental Cotaxtla. INIFAP. Apdo. Postal # 429, Veracruz, Ver. dur@yahoo.com.mx
2 1

de rendimiento de 15.45% para BAT-1467 sobre el mismo genotipo en el tratamiento 3 (120-120-00) y de 14.25% para TLP-22 en el mismo genotipo sobre el tratamiento 2 (90-12000); DOR-446 igual al tratamiento 2 de F. Q. (90-120-00), los genotipos fueron BAT-1467 con 1596 kg/ha; TLP-22 con 1411 kg/ha y DOR-446 con 1278 kg/ha. El genotipo menos eficiente con estas cepas fue 632 con 779 kg/ha el cual fue superado en 105%; 81.12% y 64.05% respectivamente. Los genotipos que reportaron el mayor rendimiento con el tratamiento 3) F. Q. (120-120-00) fueron NAG-161 y 632 ambos con 1953 kg/ha; DOR-446 con 1799 kg/ha y A-774 con 1783 kg/ha superaron al genotipo G-3513 que menor respuesta produjo 1227 kg/ha en 59.16%; 59.16% y 46.61% y 45.31% respectivamente (Cuadro 1).
Cuadro 1. Respuesta en rendimiento (kg/ha) de genotipos de frijol a la biofertilizacin y fertilizacin qumica. Genotipo A-774 NAG-161 Sequa-12 BAT-1467 TLP-18 N. Tacan DOR-446 Sesentano DOR-60 CHIS 3A-1 632 TLP-22 G-3513 T1 1345 1076 1407 1596 1142 1122 1278 1027 1107 1021 779 1411 1113 T2 1818 1781 1748 1768 2140 1945 1279 1393 1813 1619 1314 1235 1615 T3 1783 1953 1597 1386 1368 1502 1799 1596 1243 1458 1953 1382 1227 Contraste* a,b a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,c a,c

*)= Significativo al 5%. a= T1 vs. T2; b= T1 vs. T3 y c= T2 vs. T3.

CONCLUSIONES. Se identificaron tres genotipos eficientes en la fijacin biolgica de N2: BAT-1467, TLP-22 y DOR-446. La fertilizacin qumica logra en general mayor rendimiento que la biofertilizacin en el germoplasma evaluado. Con los genotipos seleccionados se puede sustituir del 50% al 100% la F. Q. nitrogenada al suelo, mediante el uso del biofertilizante Rhizobium. LITERATURA CITADA Acua, et al. 1995. Evaluacin y validacin de cepas de Rhizobium bajo condiciones limitantes. En: Proyecto R4. Informe tcnico. PROFRIJOL. 9 p. Thung, M.; J. Ortega y O. Erazo. 1990. Metodologa de seleccin por eficiencia en el uso de fsforo y por tolerancia a la toxicidad por aluminio y del manganese en el frijol (Phaseolus vulgaris L.). En: Sorgo para sueloa cidos. Salinas et al. (eds.) INTSORMIL. ICRISAT. CIAT. p. 210.

CE Papaloapan. INIFAP.

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Respuesta de Variedades de Frijol a la Fertilizacin Qumica y Biolgica en un Suelo Fluvisol de Veracruz

Arturo Durn Prado1*, Vctor Lpez Galvn1 y Oscar Hugo Tosquy Valle1 INTRODUCCION. El frijol (Phaseolus vulgaris L.) es la leguminosa de ms baja capacidad de nodulacin y fijacin de N2 atmosfrico (Burdman et al., 2000). Adems las variedades varan en su habilidad para fijar el nitrgeno atmosfrico y para sustraer el fsforo y otros nutrimentos del suelo (Graham, 1981), lo que aunado a deficientes prcticas de fertilizacin, ya que la mayora de los productores no fertilizan o lo hacen de forma inadecuada, provocan que los genotipos no puedan maximizar sus rendimientos (Piha y Munns, 1987). Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue determinar la respuesta de seis variedades de frijol a la biofertilizacin con bacterias Rhizobium leguminosarum biovar phaseoli y micorriza-arbuscular Glomus intraradix. MATERIALES Y MTODOS. Durante el ciclo O-I 20002001, se estableci un experimento en un suelo fluvisol del Campo Experimental Cotaxtla. El diseo estadstico utilizado fue bloques al azar con cuatro repeticiones y arreglo de tratamientos en parcelas divididas. En la parcela grande se utilizaron seis genotipos de frijol: 1) Negro INIFAP, 2) Negro Medelln, 3) Negro Tropical, 4) Negro Tacan, 5) Lnea UCR-55 y 6) Lnea DOR-448. En la parcela chica se probaron siete tratamientos de fertilizacin: 1) Rhizobium + Glomus intraradix + 2/3 de la fertilizacin qumica recomendada (26-26-00 kg/ha de N, P2O5 y K2O, respectivamente); 2) Sin biofertilizantes + 40-40-00 kg/ha de N, P2O5 y K2O; 3) Testigo absoluto no fertilizado; 4) Rhizobium + G. intraradix sin Fertilizacin qumica; 5) Rhizobium + G. intraradix + 1/3 de fertilizacin qumica (13-13-00 kg/ha de N, P2O5 y K2O), 6) Rhizobium (Sin fertilizacin qumica) y 7) G. intraradix (Sin fertilizacin qumica). Para Rhizobium la dosis fue de 300 g/ha y para G. intraradix fue de 1.0 kg/ha, inoculando la semilla antes de la siembra. Se midi y analiz el rendimiento de grano y como prueba de separacin de medias se utiliz Tukey al 5%. RESULTADOS. Se detectaron diferencias altamente significativas (= 0.05) para Genotipos, Fertilizacin y su interaccin. Con rendimientos superiores a 1000 kg/ha, los mejores genotipos fueron: Negro Tacan, Negro INIFAP y DOR-448. A su vez, el tratamiento de fertilizacin que proporcion el mayor rendimiento de grano fue Rhizobium + G. intraradix + 26-26-00 con 1226 kg/ha, el cual fue estadsticamente similar a 40-40-00 de N, P2O5 con 1103 Campo Experimental Cotaxtla. INIFAP. Apdo. Postal # 429, Veracruz, Ver. dur@yahoo.com.mx
1

kg/ha y superior al resto de los tratamientos. Estos dos tratamientos superaron en 16.9 y 14.2%, respectivamente, al testigo no fertilizado (Cuadro 1). Cuadro 1. Rendimiento promedio de grano (kg/ha) de tratamientos de fertilizacin. Ciclo O-I 2000-2001. Tratamiento Rhizobium + G. intraradix + 2/3 de fertilizacin qumica Fertilizacin qumica (40-40-00) Rhizobium + G. intraradix + 1/3 de fertilizacin qumica Rhizobium + G. intraradix Testigo absoluto (no fertilizado) Rhizobium G. intraradix
1

Tukey (0.05)1 1226 a 1103 a b 977 b c 968 b c 966 b c 809 801 c c

Los tratamientos con letras similares son estadsticamente iguales.

La accin conjunta de ambos factores tuvo como mejores combinaciones a Negro Medelln biofertilizado con Rhizobium + G. intraradix + 26-26-00 con 1389 kg/ha, Negro Tacan no biofertilizado + 40-40-00 con 1310 kg/ha y esta misma variedad biofertilizada con los dos microorganismos + 26-26-00, al igual que los genotipos Negro INIFAP y DOR-448 que obtuvieron ambos un rendimiento de 1250 kg/ha. La lnea UCR-55, fue el genotipo que menos respondi a la biofertilizacin.

CONCLUSIONES. La respuesta a la fertilizacin biolgica y qumica fue diferente para algunos genotipos. Los mayores rendimientos de grano se obtuvieron con Negro Medelln y Negro Tacan, inoculadas con ambos biofertilizantes y fertilizadas con 2/3 de la dosis de fertilizacin qumica recomendada.

LITERATURA CITADA Graham, P. H. 1981. Some problems of nodulation and symbiotic nitrogen fixation in Phaseolus vulgaris. A review Field Crops Res. 4: 93-112. Piha, M. I. and D. N. Munns. 1987. Nitrogen fixation capacity of field-grown bean compared to other grain legumes. Agronomy Journal. 79: 690-696. Burdman, S. et al. 2000. Improvement of legume crop yields by co-inoculation with Azospirillium and Rhizobium. The Otto Warburg Center for Agricultural Biotechnology. The Hebrew University of Jerusalem, Israel.

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Respuesta de Variedades de Soya a la Inoculacin con Micorriza Glomus intraradix en Veracruz

Arturo Durn Prado1*, Oscar Hugo Tosquy Valle1 y Vctor Lpez Galvn1 INTRODUCCIN. La micorriza arbuscular debe tener la capacidad para sobrevivir bajo condiciones ambientales cambiantes, incluso durante perodos de tiempo cuando las plantas hospederas estn ausentes (Abbott y Robson, 1985). Para las regiones tropicales hmedas, se ha establecido la hiptesis, de que debido a la existencia de una diversidad de plantas y cultivos que pueden servir como hospederos de la micorriza, la capacidad de la micorriza para permanecer en estado latente a largo plazo, no se ha expresado completamente y que los cultivos afectan de manera diferenciada las poblaciones de micorriza. Por lo tanto se necesita entender mejor todos los factores que afectan la asociacin con micorriza para optimizar su eficiencia en la promocin del crecimiento de los cultivos (Troeh y Loynachan, 2003). El objetivo de este trabajo fue conocer la respuesta de dos variedades de soya a la aplicacin del biofertilizante Glomus intraradix, en un suelo utilizado alternadamente con soya y maz. MATERIALES Y MTODOS. El experimento se estableci el 24 de julio de 2003, en el municipio de Medelln de Bravo, Ver., en un suelo de textura migajn arcillosa, ligeramente cido y con niveles medio y bajo de nitrgeno y fsforo, respectivamente. Se evaluaron dos variedades comerciales de soya: Huasteca 100 y Huasteca 200, generadas por el Campo Experimental Sur de Tamaulipas del INIFAP; y dos tratamientos de fertilizacin: 60-40-00 de N, P y K, respectivamente y 60-00-00 + Glomus intraradix inoculado a la semilla previo a la siembra en dosis de 1 kg ha-1. Se midi el rendimiento de grano (RG), el cual se transform en kilogramos por hectrea ajustado al 14 % de humedad. Este parmetro se analiz utilizando el diseo de bloques al azar con cuatro repeticiones en factorial completo regular 2 x 2 y en cada uno de los factores y su accin conjunta en que se detect significancia se aplic la prueba de Tukey al 0.05. RESULTADOS Y DISCUSIN. Se detect efecto significativo en los factor Variedad y en la interaccin Variedad x Fertilizacin. El Cuadro 1 muestra que la variedad ms productiva fue Huasteca 200 que super en 9.5% el rendimiento obtenido por Huasteca 100. Ambas fuentes de fertilizacin fosfatada proporcionaron un rendimiento estadsticamente similar. Sin embargo, la mejor alternativa de aplicacin es la micorriza, ya que los fertilizantes qumicos adems de ser costosos, contaminan el suelo y el ambiente (Castellanos, 1995). Campo Experimental Cotaxtla. INIFAP. Apdo. Postal # 429, Veracruz, Ver. dur@yahoo.com.mx
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Cuadro 1. Efecto de variedad y fertilizacin en el rendimiento de grano de soya. Factor Rendimiento (kg ha-1) Variedad Huasteca 200 3399.3 a Huasteca 100 3077.2 b Fertilizacin 60-00-00 + G. intraradix 3324.3 a 60-40-00 3152.2 a Comparador Tukey 0.05 309.2 La respuesta a la inoculacin con G. intraradix en sustitucin de la fertilizacin fosfatada slo fue significativa en la variedad Huasteca 200 que increment su rendimiento de grano en 557 kg ha-1 (Figura 1).
4000 3500 RG (kg ha )
-1

3000 2500 2000 1500 sin G. intraradix con

Huasteca 100 Huasteca 200

Figura 1. Efecto de la biofertilizacin con G. intraradix en el rendimiento de dos variedades de soya.

CONCLUSIONES. Las variedades varan en su respuesta a la inoculacin con G. intraradix. Huasteca 200 biofertilizada produjo rendimientos superiores que con la fertilizacin fosfatada, mientras que Huasteca 100 obtuvo rendimientos similares con ambas fuentes de fertilizacin. LITERATURA CITADA Abbott, L. K. and A. D. Robson. 1985. Assessing the potential for widescale VA mycorrhizal inoculation. In: R. Molina (ed.) Proc. North Am. Conf. on Mycorrizae, 6th, Bend, OR. 25-29 June 1984. Forest Res. Lab.; Oregon State Univ., Corvallis. p. 76-79. Castellanos, J. Z. 1995. Potencial de la fijacin biolgica de nitrgeno en las leguminosas de grano y su influencia en los sistemas de cultivo. In: Memoria del IV Congreso Nacional de la Fijacin Biolgica de Nitrgeno. Cuernavaca, Mor. p. 25. Troeh, Z. I. and T. E. Loynachan. 2003. Endomycorrhizal fungal survival in continuos corn, soybean and fallow. Agronomy Journal 95: 224-230.

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Efectividad de Micorriza Arbuscular en Genotipos de Pasto Buffel (Cenchrus ciliaris)

Arturo Daz Franco1*, Idalia Garza Cano1 y Asuncin Mndez Rodrguez1 INTRODUCCIN. El deterioro de 300 mil hectreas de los suelos agrcolas en el norte de Tamaulipas, ha causado que la rentabilidad del sorgo (Sorghum bicolor) llegue a un punto crtico para el productor. Por esta razn, se ha promovido el cambio de uso de suelo y como alternativa se cuenta con el establecimiento de pasto buffel (Cenchrus ciliaris) para la produccin de forraje. Existe informacin sobre el efecto benfico de hongos micorrzicos vesculo arbusculares (MVA) en especies de pastos (Malcova et al., 2003; Pelletier y Dionne, 2004; Podeszfinski et al., 2004; Fras et al., 1998). En la regin, el uso de MVA Glomus intraradices, ha incrementado el rendimiento de sorgo y maz (Daz, 2002). En pasto buffel no se cuenta con precedentes al respecto, por lo que el propsito fue conocer la efectividad de la inoculacin con MVA en esta gramnea. MATERIALES Y MTODOS. El estudio se realiz en el invernadero del INIFAP-CERIB, cuya siembra fue el 3 de abril de 2003. El suelo esterilizado (con bromuro de metilo) fue de textura franco arenoso. Los genotipos de pasto buffel utilizados fueron: PI409443, PI409275, Formidable, Zaragoza 115 y Comn (T-4464) (testigo regional). Cada genotipo fue o no inoculado con el hongo MVA G. intraradices, a dosis de 10 g de sustrato (200 esporas/g) debajo de la semilla (25-30 semillas por maceta). Las macetas fueron de 24.5 cm de dimetro y de 28 cm de alto. La unidad experimental fue la maceta con cuatro a siete plantas, y en total fueron cinco macetas (repeticiones) para el inoculado y cinco para el testigo, en un diseo factorial A x B completamente al azar. Se realizaron dos cortes, el primero el 2 de agosto y el segundo el 8 de octubre. La informacin obtenida fue biomasa seca (BS) y contenido de protena (CP) foliar (%) (slo en el 2 corte). Se realizaron dos muestreos de clorofila el 21 de septiembre y 22 de diciembre mediante el determinador digital Minolta SPAD 501. Se realiz anlisis de varianza y la separacin entre medias fue a travs de DMS (p<0.05). RESULTADOS Y DISCUSIN. Los resultados indicaron que la BS por maceta mostr variaciones significativas (p<0.001) entre los genotipos y solamente la BS del segundo corte indic diferencias significativas (p<0.05) para la inoculacin. Para el caso del CP, todas las fuentes de variacin mostraron diferencias significativas (Cuadro 1).
1

Cuadro 1. Caractersticas de los genotipos de buffel con o sin la inoculacin de MVA G. intraradices.
Variable MVA (M) Con Sin
Significancia F

BS (g) 1er/corte 2/corte 19.0 18.1 NS 19.3 17.6 *

ndice de clorofila 1er/corte 2/corte 19.0 19.2 NS 21.5 20.6 **

CP (%) 5.9 4.4 **

23.3 22.0 18.0 14.7 14.5 Significancia F *** DMS(p<0.05) 1.7 MxG NS NS, , , * ** ***No significancia 0.001, respectivamente.

Genotipo (G) P1409443 Formidable P1409275 Zaragoza 115 Comn

20.1 20.2 19.6 20.0 19.3 19.1 19.1 18.8 17.2 17.3 *** ** 0.7 0.85 NS NS o significancia a nivel

22.1 5.9 21.8 6.1 21.0 5.2 20.4 4.7 19.7 3.8 *** *** 0.96 0.78 NS *** de p<0.05, 0.01 y

La inoculacin de G. intraradices increment el rendimiento de BS en los cinco genotipos de pasto buffel en el segundo corte, donde el simbionte super al testigo con 9.6%. Dentro de los genotipos, PI409443 y Formidable, destacaron por su mayor rendimiento en BS (Cuadro 1). Existi una correlacin entre el CP y BS del 1 (r=0.83) y 2 (r=0.89) corte, tambin con el ndice de clorofila del 1 (r=0.82) y 2 (r=0.96) corte. El CP entre la inoculacin y los cinco genotipos de buffel, mostr que el hongo micorrzico fue capaz de incrementar significativamente su contenido en PI409443, Formidable y Comn (Cuadro 2). Cliquet et al. (1997) informaron que la MVA G. fasciculatum mejor la asimilacin de nitratos en ryegrass (Lolium perenne). Cuadro 2. CP foliar (%) con o sin la inoculacin de G. intraradices en genotipos de pasto buffel.
MVA Genotipos P1409443 Formidable P140975 Zaragoza115 Comn Con 7.6 6.7 5.4 5.0 4.7 Sin 4.2 5.5 5.1 4.4 2.9 DMS, p<0.05 * * NS NS * NS, , * No significancia o significancia a nivel de p<0.05, respectivamente.

CONCLUSIN. Los resultados obtenidos ponen en evidencia que la actividad de la MVA G. intraradices en pasto buffel, promovi la produccin de forraje y el ndice de clorofila, as como el CP en tres de los cinco genotipos. LITERATURA CITADA Cliquet, J.B. et al.1997. New Phytol. 137: 345-349. Daz F., A. 2002. En: Publ. Esp. 25. INIFAP. p.13. Fras H., J. et al. 1998. In: Avances de la Investigacin Micorrzica en Mxico. Univ. Veracruzana. p. 189-200. Malcova, R. et al. 2003. Appl. Soil Ecol. 23: 55-67. Pelletier, S. and Dionne, J. 2004. Crop. Sci. 44: 335-338. Podeszfinki, C. et al. 2004. http://mycorrhiza.ag. utk.edu/latest/icoms.

Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP. Apdo. Postal 172, Ro Bravo, Tam. diaz.arturo@inifap.gob.mx

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Influencia de Micorriza Arbuscular en el Crecimiento y Rendimiento de Crtamo

Arturo Daz Franco1*, Alfredo Ortegn Morales1 e Idalia Garza Cano1 INTRODUCCIN. El crtamo (Carthamus tinctorius) es un cultivo de invierno con potencial para entrar en el sistema de produccin agrcola del norte de Tamaulipas; con ello se tendra una alternativa de cultivo diferente al monocultivo de sorgo (Sorghum bicolor). Aunque se cuenta con informacin sobre la produccin de crtamo (Ortegn, 2003), se desconoce el efecto de la micorrizacin sobre la productividad del cultivo. En esta regin, la micorriza vesculo arbuscular (MVA) Glomus intraradices ha tenido un impacto favorable en la produccin de sorgo y maz, al incrementar sus rendimientos (Daz F., 2002; Daz M., 2002). Por lo anterior, el propsito del estudio fue el de conocer, en condiciones de campo, el efecto de la inoculacin de MVA en dos variedades de crtamo. MATERIALES Y MTODOS. Dos experimentos se establecieron el 29 de noviembre y 6 de diciembre de 2001 en Matamoros (El Vaso, temporal) y Ro Bravo, Tam. (CERIB, riego restringido), respectivamente. El diseo fue parcelas divididas en bloques al azar con cuatro repeticiones. En cada localidad se evaluaron las variedades de crtamo Guayalejo y Tantoan 91, como parcelas grandes; en las parcelas chicas se incluyeron los tratamientos: a) MVA G. intraradices, 1 kg/ha, inoculacin a la semilla; b) fertilizacin qumica, 100-4000 (urea y superfosfato, respectivamente); y c) testigo absoluto. La parcela experimental fue de tres surcos de 6 m y 0.82 m de ancho. La aplicacin de la fertilizacin qumica se realiz durante la siembra. En la localidad Ro Bravo un riego de auxilio se aplic en floracin. Los datos obtenidos por planta fueron: altura, nmero de capullos, peso de grano y colonizacin micorrzica radical (%). Adems, el rendimiento de grano por parcela. Se realiz anlisis conjunto de las dos localidades. RESULTADOS Y DISCUSIN. Los resultados del anlisis de varianza combinado, indicaron que para las variables de planta, no existieron diferencias significativas entre tratamientos, variedades ni en las interacciones, y slo se observaron diferencias significativas entre las localidades (p<0.001), excepto en el porcentaje de colonizacin micorrzica (Cuadro 1). Esta fluctu de 1422% y es considerada baja comparativamente con la registrada por Daz M. (2002) en sorgo (52%), en la misma regin, donde la MVA promovi el crecimiento y el rendimiento de ese cultivo. Para el rendimiento de grano se
1 Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP. Apdo. Postal 172, Ro Bravo, Tam. diaz.arturo@inifap.gob.mx

observaron diferencias significativas en las localidades y entre las variedades; no obstante, la separacin de medias (DMS, p<0.05) no diferenci el rendimiento de las variedades (Cuadro 2). Cuadro 1. Caractersticas de crtamo en las localidades del norte de Tamaulipas. Promedio de las vars. Guayalejo y Tantoan 91.
Localidad Altura (cm) Planta Col. No. micor. capullos (%) Peso de grano (g)

Matamoros Ro Bravo
Diferencia F

77.8 113.1 ***

15 18
NS

14.1 19.3 ***

15.7 20.1 ***

***Denota diferencias a nivel de p<0.001.

Cuadro 2. Rendimiento de grano en las variedades de crtamo obtenido de las dos localidades. Variable Rendimiento (kg/ha) Localidad Matamoros 678 bZ Ro Bravo 1094 a Variedad Guayalejo 779 a Tantoan 91 873 a
Z

Valores con la misma letra no denotan diferencias (DMS, p<0.05).

Las escasas precipitaciones registradas (<85 mm) en las localidades durante el ciclo fueron determinantes para que en la de Ro Bravo, donde se aplic un riego de auxilio, el crtamo manifestara el mayor crecimiento y rendimiento. En esa condicin se registraron los valores ms altos en las variables estudiadas (Cuadro 1 y 2). CONCLUSIONES. Los resultados indicaron que la inoculacin de G. intraradices o la fertilizacin qumica en crtamo, no tuvieron influencia en el crecimiento y rendimiento. Por el contrario, el crtamo mostr una respuesta esperada en funcin a la humedad donde fue cultivado. LITERATURA CITADA Daz F., A. 2002. Incremento de la productividad del sorgo y maz mediante la biofertilizacin. En: Publ. Esp. No. 25. INIFAP-CERIB. p. 13-14 Daz M., R. 2002. La biofertilizacin en las caractersticas de planta, de grano e infeccin micorrzica del sorgo, en dos condiciones edficas. Tesis Profesional. UAMRA, UAT. 62 p. Ortegn M., A. 2003. Crtamo: Cultivo de alternativa para el norte de Tamaulipas. Desplegable No. 25. INIFAPCERIB.

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Biofertirrigacin: Tecnologa Sustentable del Siglo XXI

Lina Hernndez Flores 1, Juan M. Covarrubias Ramrez2, Rodrigo Aveldao Salazar1 y Juan Jos Pea Cabriales3. INTRODUCCION. Para el ao 2040 la poblacin mundial ser de 7.7 billones de personas y se necesitaran 2,500 millones de toneladas de alimentos para ella; la produccin de alimentos requiere de 108 millones de toneladas de nitrgeno (N), pero para producir industrialmente este volumen se necesita de un volumen considerable de combustible. Como consecuencia, se incrementan los costos de produccin de N y se aumenta la contaminacin ambiental cuando algunos fertilizantes industriales son usados inadecuadamente ya que generan contaminacin por volatilizacin y lixiviacin (Covarrubias et al., 2002). En fertirrigacin, los fertilizantes lquidos o solubles tienen un costo superior de cuatro a seis veces por kilogramo de nutrimento respecto a los fertilizantes slidos tradicionales. El uso de microorganismos promotores del crecimiento (BPC) aplicados en solucin a travs del sistema de riego, pero sin fertilizacin, se define como biofertirriego (Gonzlez, 1999), pero estos microorganismos no proporcionan el total de la demanda nutrimental del cultivo, por lo que implica la necesidad de aplicar fertilizantes en forma alterna a los microorganismos y/o aplicarlos durante la siembra o al inicio del desarrollo vegetativo del cultivo, etapas donde la colonizacin en la raz es ms exitosa por la exudacin de cidos orgnicos como malato y citrato (Vessey, 2003). El objetivo es dar a conocer esta nueva tecnologa utilizada en varios cultivos, con sus logros y problemas encontrados en la agricultura de Mxico. RESULTADOS Y DISCUSION. En maz, con fertilizaciones de 140-80-00 en Villadiego, Gto, de 12080-00 en El CEPAB, Ags, y de 80-00-00 en El CESAJ, Mich. se han aislado organismos diaztrofos como Azospirillum brasilense con una capacidad de fijar N2 de 9.5; 26.9 y 30.3 nMol h-1 mL-1, respectivamente (Hernndez, y Covarrubias, 2004). Bajo biofertilizacin, fertirrigacin y biofertirrigacin, la fertirrigacin tuvo 4.8 % mayor rendimiento de grano que la biofertilizacin y la biofertirrigacin es mayor en 1.2 % que la biofertilizacin, pero los costos de produccin son menores en 25 % que la fertirrigacin. Se utiliz 1x109 mL-1 de A. brasilense aplicando 1 L cada 7 das en 6 ocasiones (Covarrubias et al., 2002). En papa, con fertilizaciones de 150-400-200 en El Tunal, y de 120-400-200 en el CESAL, ambos en Arteaga, Coah., se aisl A. brasilense con 21 y 26 nMol h-1 mL-1, respectivamente (Hernndez y Covarrubias, 2004). La biofertirrigacin mostr un rendimiento de 32.9 t ha-1
1

versus 27.9 t ha-1 (15.2 % menos) que la fertirrigacin, se aplico 1x105 UFC mL-1 de A. brasilense; 1x108 UFC mL-1 de Bacillus licheniformes y 1x109 UFC mL-1 de Pseudomonas aureofaciens, P. fluorescens y P. putida a una dosis de 2 L por aplicacin (Covarrubias et al., 2002). Inoculando papa con Bacillus subtilis en un suelo rico en fsforo (865 kg P2O5 ha-1) con 1x103 UFC mL-1, a una dosis de 4 mL por planta, se increment la biomasa en 31.7 % y la absorcin de P en 27.5 %, respecto al suelo sin BPC (Covarrubias et al., 2004). En manzano, bajo fertirrigacin con 80-80-80-14S en los Lirios, Arteaga, Coah., se aisl A. brasilense con 18.9 nMol h-1 mL-1 (Hernndez y Covarrubias, 2004). En esta huerta la fertirrigacin (FER) se compar con la biofertirrigacin (BIO) aplicando A. brasilense y Glomus intraradices, a razn de 1.5x105 UFC g-1de turba para la bacteria en bolsa de 0.38 kg y el hongo con 20 % de inculo en suelo en bolsa de 1 kg, ambas bolsas disueltas en 20 L de agua y aplicando 0.6 L por rbol a 0.3 m de profundidad (Covarrubias et al., 2003); en rendimiento se present diferencia significativa a favor de BIO respecto a FER, en 2001 con 8.4 % (86.3 vs.79.6 kg rbol-1) y en 2002 con 11.8 % (97.7 vs. 87.4 kg rbol-1). CONCLUSIONES. La biofertirrigacin es una opcin tecnolgica que favorece la agricultura sustentable. LITERATURA CITADA Covarrubias R., J.M.; R. Nez E. y L. Hernndez F. 2002. Biofertigation: A new sustainable technology. In: IV International symposium on cleaner bioprocesses and sustainable development. Veracruz, Ver. CD-ROM. Covarrubias R., J. M.; L. Hernndez F. y R. Aveldao S. 2003. Biofertirrigacion del manzano en la Sierra de Arteaga, Coahuila. En: Memoria X Congreso Nal. Ciencias Hortcolas, Chapingo, Mex. 10: 297. Covarrubias R., J. M.; S. Castillo A.; J. A. Vera N.; R. Nez E.; P. Snchez G.; R. Aveldao S. y J.J. Pea C. 2004. Medicin de la absorcin y eficiencia en el uso de fsforo en papa cv. Alpha con 32P. Agrociencia. En prensa. Gonzlez M., A. 1999. Biofertirriego, un nuevo concepto en la agricultura. En: Memoria 4 Simposium internacional de fertirrigacin. ICID, A.C. ed. Guadalajara, Jal. p 195. Hernndez F., L. y J. M. Covarrubias R. 2004. Biodiversidad gentica de Azospirillum brasilense en maz, manzano y papa. Agricultura Tcnica de Mxico. En prensa. Vessey, J. K. 2003. Plant growth promoting rhizobacteria as biofertilizers. Plant and Soil 255:571-586.

linhf5@yahoo.com 2 bioqpm@yahoo.com jjpena@ira.cinvestav.ipn

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Respuesta del Maz y Sorgo a la Fertilizacin Biolgica

Vctor Pecina Quintero1*, Arturo Daz Franco1 e Idalia Garza Cano1 Agustn Magallanes Estala INTRODUCCIN. En el norte de Tamaulipas a pesar de que se ha observado un impacto favorable de los biofertilizantes en la produccin de sorgo y maz, este efecto ha sido inconsistente debido probablemente al tipo de suelo y cepa de microorganismo utilizado en la inoculacin, ya que los incrementos en los rendimientos han variado de un 13 al 30 % (Rodelas et al., 1999; Daz, 2002). Por lo anterior y debido a que existen en el mercado diferentes tipos de biofertilizantes y hormonas vegetales, fue de nuestro inters realizar el presente estudio con el objetivo de conocer la respuesta del sorgo y maz a diferentes fertilizantes biolgicos MATERIALES Y MTODOS. El presente estudio se realiz en la localidad Pedro Ochoa del Municipio de Ro Bravo, Tam., el 27 de enero del 2002, para lo cual se establecieron dos ensayos. En el primero se utiliz el hbrido de maz Pioneer 3025 y se evaluaron siete tratamientos: 1) micorriza vesculo arbuscular (MVA) G. intraradices ( 200 esporas g-1 de suelo e infecciones del 95%) en dosis de 1000 g para 20 kg de semilla ha-1; 2) dos aspersiones de brassinoesteroides CIDEF-4 (B) antes de floracin; 3) mezcla de MVA+B; 4) Flower Saver a razn de 1 kg ha-1; 5) Burize, 40 g de esporas ha-1; 6) fertilizacin qumica a la siembra (120 kg ha-1 de N y 40 kg ha-1 de P; y 7) testigo absoluto. En el caso de sorgo se utiliz el hbrido Asgrow Coral y se evaluaron los tratamientos 1,2,3,4,6, y 7, anteriormente descritos. El diseo fue de bloques al azar con cinco repeticiones. La parcela experimental de maz fue de seis surcos (0.84 m) de 8 m de longitud; mientras que la de sorgo fue de cuatro surcos de 5 m. En maz los cuatro surcos centrales se dividieron entre dos para cuantificar peso de elote y rendimiento de grano. En sorgo se midi el rendimiento de grano y se muestrearon cinco plantas por parcela para estimar el porcentaje de colonizacin micorrzica en ambos cultivos. Se realiz un anlisis de varianza y la diferenciacin entre medias fue mediante DMS (p<0.05). RESULTADOS Y DISCUSIN. En maz, el anlisis de varianza para rendimiento de elote indic diferencias estadsticas entre tratamientos de biofertilizantes como ha sido reportado (Rodelas et al., 1999), resultando la MVA y la fertilizacin qumica estadsticamente iguales, superando a los dems tratamientos incluyendo al testigo (Cuadro 1). Mientras que en rendimiento de grano los tratamientos de MVA, brassinoesteroides, fertilizacin qumica y Burize superaron a la mezcla MVA+B, Flower Saver y testigo. Con excepcin del Flower Saver todos los

tratamientos de biofertilizantes incrementaron la colonizacin micorrzica. En sorgo, el rendimiento de grano se increment significativamente con la inoculacin de la MVA presentando el mayor rendimiento (29%) sobre el testigo aunque fue estadsticamente igual con los dems tratamientos de fertilizantes biolgicos. As mismo el mayor porcentaje de colonizacin micorrzica la present la MVA (Cuadro 2).
Cuadro 1. Productividad de maz y colonizacin micorrzica asociados a la aplicacin de diferentes fertilizantes biolgicos. Tratamiento Rendimiento (kg ha-1) Infeccin elote grano radical (%) MVA (M) 13,450 a 3896 a 49.0 a Brassino. (B) 12,175 b 3370 ab 47.9 a M+B 12,425 b 2972 b 47.8 a Fert. Qumica 12,748 ab 3481 ab 45.4 a Flower Saver 12,075 b 3314 b 38.8 b Burize 12,500 b 3526 ab 43.5 a Testigo 11,225 c 3277 b 37.7 b DMS (p<0.05) 728 558 5.7 * Valores con la misma letra no denotan diferencias (DMS, p<0.05). Cuadro 2. Productividad de sorgo y colonizacin micorrzica asociados a la aplicacin de diferentes fertilizantes biolgicos. Infeccin radical Tratamiento Rendimiento grano (%) (kg ha-1) MVA (M) 4018 a 64.3 a Brassino. (B) 3647 a 60.9 b M+B 3990 a 62.4 b Fert. Qumica 3669 a 56.4 c Flower Saver 3523 a 55.1 c Testigo 3082 b 50.2 d DMS (p<0.05) 540 1.8 * Valores con la misma letra no denotan diferencias (DMS, p<0.05).

CONCLUSIONES. Los resultados indicaron diferencias significativas entre los diferentes fertilizantes biolgicos comerciales, observndose una mejor respuesta de los cultivos de maz y sorgo a G. intraradices. Adems, la MVA siempre fue igual estadsticamente a la fertilizacin qumica, lo que corrobora que la prctica de inoculacin a la semilla con la MVA, puede ser un manejo rutinario que ayude a ser sostenible la produccin de maz y sorgo en la zona norte de Tamaulipas. LITERATURA CITADA Daz F., A. 2002. Incremento de la productividad de sorgo y maz mediante la biofertilizacin. En: Publ. Esp. No. 25. INIFAP-CERIB. p. 13-14. Rodelas, M. B.; Gonzlez. J.; Martnez, M. V.; Pozo, C. y Salmeron, V. 1999. Influence of Rhizobium-Azospirillum and Rhizobium-Azotobacter combined inoculation on mineral composition of faba bean (Vicia faba L.). http://link.springerny.com/link/service/journals/00374/bibs /9029002/90290165.htm.

1 Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP. Apdo. Postal 172, Ro Bravo, Tam. pecina.victor@inifap.gob.mx

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Efecto de la Micorriza Arbuscular en Sorgo Bajo Dos Condiciones de Humedad

Vctor Pecina Quintero1*, Arturo Daz Franco1 e Idalia Garza Cano1 INTRODUCCIN. Se ha observado que la micorriza vesculo arbuscular (MVA) promueve el rendimiento, el rea foliar, la longitud y peso de raz, en diferentes cultivos como maz, cilandro, betabel, haba, etc., no detectndose diferencias estadsticas en comparacin con la fertilizacin qumica (Snchez, 2004). En esta regin, la MVA Glomus intraradices ha tenido un impacto favorable en la produccin de sorgo y maz, al incrementar los rendimientos de un 13 a 30 % (Daz, 2002). No obstante que los estudios se han realizado bajo condiciones de temporal no existe informacin del efecto que puede tener la MVA bajo diferentes condiciones de humedad. Por lo anterior, el objetivo del presente estudio fue el de conocer el efecto de la inoculacin de MVA en sorgo bajo dos condiciones de humedad. MATERIALES Y MTODOS. El presente estudio se realiz en terrenos del Campo Experimental Ro Bravo, el 6 de febrero del 2003, para lo cual se utiliz el hbrido de sorgo RB-Patrn. El diseo experimental fue parcelas divididas en bloques al azar con cuatro repeticiones. La parcela mayor represent la condicin de humedad: a) un riego de auxilio en hoja bandera y b) temporal. La parcela menor los tratamientos de fertilizacin: a) MVA G. intraradices ( 200 esporas g-1 de suelo e infecciones del 95%) en dosis de 1000 g para 8 kg de semilla ha-1; b) fertilizacin qumica (80 kg ha-1 de N) y c) testigo absoluto. La parcela experimental fue de cuatro surcos de 6 m y 0.80 m de ancho. La fertilizacin qumica se realiz durante el ltimo cultivo con amoniaco anhdro previo al riego de auxilio, prctica comn en la regin. Los datos obtenidos fueron altura de planta, dimetro del tallo, el rendimiento y porcentaje de protena del grano. Se realiz anlisis de varianza y la diferenciacin entre medias fue mediante DMS (p<0.05). RESULTADOS Y DISCUSIN. El anlisis de varianza indic diferencias significativas en altura de planta, rendimiento de grano y porcentaje de protena para la condicin de humedad (H), mientras que entre tratamientos de fertilizacin (F), solo hubo diferencias estadsticas en rendimiento y porcentaje de protena, no as en la interaccin (HxF) (Cuadro 1). La altura del sorgo se increment cuando fue aplicado el riego de auxilio independientemente del tratamiento de fertilizacin, lo que demuestra que la humedad es un factor limitante en la asimilacin de nutrientes, que se refleja en el desarrollo de las plantas (Cuadro 2). Por el contrario el dimetro de tallo permaneci constante con relacin a la condicin de

humedad y tratamiento de fertilizacin (Cuadro 1). As mismo como era de esperarse, la aplicacin de un riego de auxilio durante la etapa de hoja bandera increment el rendimiento de grano comparativamente con el testigo bajo temporal (Cuadro 2). Result evidente la efectividad de la inoculacin a la semilla con la MVA G intraradices en ambas condiciones de humedad, ya que increment significativamente el rendimiento de grano en 21% en funcin al testigo. La adicin de N durante el ltimo cultivo con amoniaco anhdro antes del riego de auxilio no tuvo impacto en el rendimiento y fue semejante su respuesta a la del testigo, lo que demuestra lo ineficiente de la fertilizacin qumica en esta etapa. De igual forma la disponibilidad de humedad increment el contenido de protena en el grano hasta un 28% en comparacin con el testigo (Cuadro 2), y no hubo diferencias estadsticas entre la inoculacin con la MVA y la fertilizacin qumica, lo que coincide con lo reportado por Snchez (2004). Cuadro 1. Cuadrados medios del anlisis de varianza para cuatro caractersticas agronmicas de sorgo evaluadas en el norte de Tamaulipas.
Fuente de Altura Dimetro Protena Rendto variacin planta de tallo (%) kg ha-1 Humedad (H) 48.5** 0.003 10.7* 37.5** Fertilizacin (F) 0.6 0.12 6.8** 7.9** HxF 0.006 0.14 0.4 1.2 *, ** Significativo a nivel de p<0.05 y p<0.01, respectivamente.

Cuadro 2. Principales parmetros evaluados en sorgo en funcin de los tratamientos y condicin de humedad.
Condicin de Humedad Temporal Riego restringido DMS p<0.05 Altura (cm) 115 b 129 a 10.8 Protena (%) 7.3 b 9.4 a 2 Rendimiento Kg ha-1 3227 b 4966 a 887

CONCLUSIONES. Los resultados indicaron que inoculacin de la semilla de sorgo con la MVA intraradices tiende a incrementar el rendimiento porcentaje de protena en el grano y es efectiva tanto riego restringido como temporal.

la G. y en

LITERATURA CITADA Daz F., A. 2002. Incremento de la productividad de sorgo y maz mediante la biofertilizacin. En: Publ. Esp. No. 25. INIFAP-CERIB. p. 13-14. Snchez, C. Ma. de Jess. Efecto de las micorrizas arbusculares en el desarrollo de los cultivos agrcolas. XV Congreso Mexicano de Botnica y Micologa. http://www.socbot.org.mx/resumenes/resumen529.html.

1 Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP. Apdo. Postal 172, Ro Bravo, Tam. pecina.victor@inifap.gob.mx

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Efecto de una Composta y Acidos flvicos en la Produccin de lilies (Lilium sp) en el sureste de Coahuila
Ma. del Rosario Ziga Estrada1*, Juan M. Covarrubias Ramrez2 y Rubn Lpez Cervantes3 INTRODUCCION. El lilies (Lilium sp) es un cultivo ornamental que representa una alternativa de produccin para los agricultores de las comunidades rurales del sureste de Coahuila, por su alta demanda en el mercado regional, debido a su gran variedad de colores y su durabilidad en florero. Sin embargo, se ha detectado que uno de los factores que influye de manera determinante en la calidad de la flor es el manejo adecuado de la nutricin y las caractersticas del suelo en que se desarrolla el cultivo (1). Es conocido que la adicin de materia orgnica al suelo, aumenta el contenido de este compuesto, mejora la estabilidad estructural e incrementa el contenido de poros, por donde circula el agua y por consiguiente provoca una mayor disponibilidad de elementos nutritivos para las plantas (2). Por lo anterior, el propsito del estudio fue evaluar el efecto de una composta, elaborada a base de gallinaza y los cidos flvicos extrada de ella, en la calidad de la flor de corte de lilies MATERIALES Y METODOS. El trabajo se estableci en el ejido Guadalupe Victoria, mpio. de Saltillo. Coah. en febrero de 2004 bajo condiciones de invernadero rstico. Se utilizaron bulbos del tipo asitico cv. Elite a una densidad de 50 bulbos/m2. Se evaluaron tres dosis de composta (0.5; 1.0 y 1.5 t ha-1) y tres de cidos flvicos (0.2; 0.4 y 0.6 mL L-1 de agua) combinados con fertilizacin qumica: 100-120-80 (N-P2O5-K2O). El diseo fue completamente al azar con arreglo factorial completo. El anlisis estadstico fue a travs de un anlisis de varianza (ANVA) y la prueba de medias por Tukey (p 0.05). Se us el paquete para computador MINITAB, versin 13 para WINDOWS. Las variables evaluadas fueron: das a brotacin, longitud de tallo, de inflorescencia y de primer botn, dimetro de primera flor, nmero de flores abiertas y nmero de botones por planta. RESULTADOS Y DISCUSION. El anlisis de varianza indic que las variables das a brotacin, dimetro de primera flor y nmero de flores abiertas, no presentaron diferencia significativa entre tratamientos ni en las interacciones. Sin embargo, las variables longitud de tallo, de inflorescencia, de primer botn y nmero total de botones por planta si presentan diferencia significativa ____________________________
MC. Investigador del Campo Exp. Saltillo-CIRNE-INIFAP silzun2@yahoo.com 2 MC. Estudiante de Doctorado. CIRNE-INIFAP. 3 Dr. Profesor-Investigador del Departamento de Suelos.
1

(Cuadro 1); donde se observa que el tratamiento con la mayor dosis de composta (1.5 t ha-1) y cidos flvicos (0.6 mL L-1) tuvo el mayor efecto en las caractersticas de calidad de la flor de lilies demandadas por el mercado: longitud de tallo y nmero total de flores por planta; esto puede deberse a que al mezclar composta en la capa superior del suelo, en donde se desarrollan las races de los bulbos (20 cm), se logra tener una capa superficial con adecuada capacidad de retencin de humedad y mayor porosidad, lo que permiti mayor disponibilidad de nutrimentos a la planta. El anlisis econmico, mostr que la cosecha realizada a las 10 semanas despus de la siembra, coincidi con una de las fechas en donde la flor de corte alcanza el mayor precio de venta (10 de mayo). Cuadro 1. Resultados de variables vegetativas y productivas en lilies asitico cv. Elite INIFAP - CIRNECESAL. 2004.
Longitud (cm) Factor Composta t ha
-1

Dosis 1.5* 1 0.5

Tallo 91.0 a 88.4 b 87.2 b

Inflorescencia 10.9 a 9.3 b 8.0 c

Botn 8.8 a 7.7 b 6.2 c

Nmero Botones/ planta 9a 7b 7b

Acidos Flvicos mL L-1

0.6 0.4

93.0 a 88.6 b

9.9 a 9.4 b

8.1a 7.4 b

8 .3 a 7 .3 b

0.2 85.1 c 8.9 b 7.1 b 7 .3 b * Diferente literal entre columnas indica diferencia significativa

CONCLUSIONES. 1). Con la adicin de 1.5 t ha-1 y 0.6 mL L-1 se obtienen las mejores caractersticas de calidad en la flor de lilies como son: longitud de tallo y nmero de botones por planta. 2). La produccin de lilies demostr ser una alternativa viable para los productores rurales del sureste de Coahuila.

BIBLIOGRAFIA 1. Collicut, M. L. and Ronald W. G. 1995. Northern Beauty Lily. HortScience 30 (3): 652-653 2. Kikuchi, K. 2003. Evaluation of organic materials and their effective use in a era sustanaible agriculture. Hohhado International Centre, Obihiro (HICO) p. 1-15.

UAAAN. ruloce@yahoo.com

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Transferencia Tecnolgica del Maz QPM y el Biofertilizante en la Huasteca Hidalguense

Juan Pablo Prez Camarillo1*, Guadalupe Zacatenco Gonzlez1, Ren Galvn Parra2 y Rodrigo Aveldao Salazar3 INTRODUCCIN. En la Huasteca Hidalguense se siembran aproximadamente 31 mil hectreas de maz bajo condiciones de temporal, (SAGARPA, 2002). La precipitacin pluvial supera los 1,500 mm anuales y posee suelos aptos para la agricultura (INEGI, 1992), no obstante el rendimiento promedio es de 1.7 t/ha. Esta regin es considerada como de alta y muy alta marginacin donde el uso de fertilizantes es nulo, y los problemas de desnutricin son severos (INCMNSZ, 2000). En este contexto, el Gobierno del Estado a partir del ao 2000 implement un programa agroalimentario basado en la distribucin del maz QPM (V-537C) y Azospirillum spp. (Az) como biofertilizante, llegndose a sembrar, ms de dos mil hectreas en la regin Huasteca en el ciclo P.V. 2003. En este perodo, el INIFAP emprendi una evaluacin con el objeto de conocer el impacto productivo del programa en esta regin. MATERIALES Y MTODOS. La evaluacin se llev a cabo en seis municipios de la Huasteca Hidalguense, ubicada en la porcin nortenoreste del estado. Se dio seguimiento a 25 parcelas y en cada una de ellas se consideraron cinco sitios de muestreo, acopiando informacin del rendimiento y de costos por tonelada. Para estimar el rendimiento (R), se seleccion al azar por sitio de muestro, un tramo de surco de 10 m de largo, donde se tomaron los datos siguientes: Ancho de surco (D), nmero total de mazorcas en el tramo (T), peso promedio de campo de 22 mazorcas (X), factor de desgranado (FDG) que se obtuvo al dividir el peso de grano de cinco mazorcas entre el peso total de las cinco mazorcas, y el porcentaje de humedad del grano (PHG). El dato del rendimiento calcul con la frmula siguiente: R = X * T * (100 PHG)/86 * FDG * 1000/D La evaluacin de la rentabilidad se realiz mediante el anlisis del costo por tonelada (CT), que se obtuvo al dividir el costo del cultivo (CC) sobre el rendimiento de grano (R) estimado al 14% de humedad (Prez, 2001). RESULTADOS Y DISCUSIN. En el Cuadro 1 se denota que a nivel promedio en la Huasteca Hidalguense, el rendimiento alcanzado por la variedad V-537C con Az, ______________________________________________
1 Campo Experimental Pachuca, INIFAP. Carr. Pachuca-Cd. Sahagn Km 3.6 Pachuca, Hgo. perez.juan@inifap.gob.mx 2 SAGEH, Blvd. Felipe ngeles s/n Pachuca, Hgo. 3 ASIA Biofbrica Siglo XXI. Cuautla, Mor.

tuvo un porcentaje de incremento del 88.2% con respecto al rendimiento promedio regional obtenido con semilla criolla sin fertilizante (CR/SF), siendo Huautla el municipio donde se observ el mayor impacto al obtener un incremento del orden del 211.8%. No obstante que Huazalingo fue el municipio con menor rendimiento, logr superar a la media regional (CR/SF) con 23.5% de incremento.
Cuadro 1. Impacto en rendimiento (R) y costo por tonelada (CT) del maz QPM V-537C con Az en la Huasteca Hidalguense Municipio R Dif. Inc. CT Dif. Dec. t/ha t/ha % $/ha $/t % Huazalingo 2.1 0.4 23.5 2014 580 22.3 Jaltocan 2.5 0.8 47.1 1703 891 34.4 Xochiatipan 2.7 1.0 58.8 1586 1008 38.9 Huejutla 3.0 1.3 76.5 1428 1166 44.9 Orizatln 3.2 1.5 88.2 1348 1246 48.0 Huautla 5.3 3.6 211.8 811 1783 68.7 V-537C Az 3.2 1.5 88.2 1348 1246 48.0 CR/SF 1.7 2594 Dif.=Diferencia, Inc.=Incremento, Dec.=Decremento con respecto a CR/SF

Con respecto a la rentabilidad, en el cuadro de referencia se puede observar que el costo por tonelada promedio obtenido con el V-537C Az a nivel de la Huasteca Hidalguense, fue menor que el obtenido con (CR/SF) en un 48%. El municipio de Huautla fue el que mostr una mayor rentabilidad al obtener un costo por tonelada menor que el (CR/SF) en un 68.7%. Huazalingo fue el municipio donde se evidenci una menor rentabilidad, no obstante super al (CR/SF) al tener un decremento del costo por tonelada del orden del 22.3% CONCLUSIONES. Los resultados de la evaluacin sealaron que en el rea donde oper el programa agroalimentario en la Huasteca Hidalguense, se logr incrementar el rendimiento en un 88.2% y se decrement el costo por tonelada en un 48% a nivel promedio, al establecer el maz QPM V-537C manejado con el biofertilizante Azospirillum spp., reflejando con ello el impacto productivo potencial de esta regin para la produccin sustentable de maz grano de buena calidad, mediante el uso de biofertilizante. LITERATURA CITADA INCMNSZ, 2000. Distribucin de la Desnutricin en Mxico. INEGI, 1992. Sntesis Geogrfica del estado de Hidalgo. Aguascalientes, Ags. Prez, C.J.P. 2001. Metodologa para la Evaluacin de Cosecha de Maz en Parcelas Comerciales. INIFAP. C.E. Pachuca. Desplegable para Productores No. 5. SAGARPA, Subdelegacin Agropecuaria 2002. Uso Actual del Suelo de los DDRs de Hidalgo.

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Produccin y Evaluacin de un Biofertilizante (Azospirillum spp.) Para el Noreste de Mxico IPN-CBG

Jess G. Garca1*, Alberto Mendoza1, Cuauhtemoc Jacques1, Antonia Cruz1, Felipe Serrano1

factores que actan en el proceso de produccin en fermentador. En cuanto al proceso de divulgacin de aplicacin de esta tcnica, prepar material documental del uso, manejo y aplicacin del biofertilizante, el cual fue promovido reuniones tcnicas donde asistieron productores y personal tcnico del PIFSV y de SAGARPA. RESULTADOS. En el ciclo O.I 2002-2003 se presento un incremento en el rendimiento de grano/ha en los diferentes municipios con un promedio de 12.6% para el cultivo de sorgo, y 30% para el cultivo de maz, al que se le aplico fertilizacin nitrogenada. En el ciclo O.I. 2003-2004 el comportamiento de los materiales de sorgo no present aumentos en el rendimiento, nicamente se encontr un aumento del 5% de rendimiento para el hbrido 83G15. En cuanto a los lotes de maz evaluados en los diferentes municipios, presentan un 10% promedio de incremento. El cuanto al comportamiento de la cepas evaluadas en los dos ciclos, presentaran incrementos del 18% en el ciclo 20022003 y de 12% para el ciclo 2003-2004 con respecto al testigo.

INTRODUCCIN. Estudios diversos con microorganismos del suelo han demostrado que bacterias del genero Azospirillum spp, pueden aportar del 30 al 50% de los requerimientos de nitrgeno para algunas plantas de importancia econmica como son el maz, sorgo y caa de azcar (1). Estas bacterias tambin producen fitohormonas naturales que provocan un mayor crecimiento de la raz y permite una mayor rea de asimilacin de nutrientes (2 y 3). El empleo de las diversas especies de Azospirillum, ha sido reportado para varios cultivos, donde se han obtenido una amplia gama de resultados positivos, y donde se ha llegado a contundentes conclusiones, entre las que se destaca el mnimo nmero de bacterias por gramo o mililitro de formulado situado en 109 cfu/g (4). MATERIALES Y MTODOS. En el presente trabajo, se realiz la evaluacin en campo de un biofertilizante elaborado con la cepa CBG-497 de Azospirillum brasilense, que fue aislada en el laboratorio de Biotecnologa Vegetal CBG, a partir de suelo de rizosfera y tallo de cereales de la regin, en los ciclos O.I. 20022004 en diferentes municipios, en lotes representativos de las diferentes condiciones agro ecolgicas tpicas de zona Norte del Estado de Tamaulipas. La cepa CBG-497, fue seleccionada por su capacidad de produccin in vitro de cido Indol Actico se inocul para su evaluacin en campo en una superficie del orden de 2000 hectreas, en el ciclo O.I. 2002-2003. El biofertilizante fue formulado en turba a una concentracin de 1x106 bacterias por semilla. En el ciclo O.I. 2003-2004 la superficie sembrada con el biofertilizante fue con la Tecnologa aplicada por la empresa Biotec Internacional, la cual se realizo un proceso de liofilizacin, obteniendo concentraciones de 1 x 108 colonias formando unidades (cfu/g). El producto se aplico en 3000 hectreas. Conjuntamente con la evaluacin de campo se establecieron experimentos con diferentes cepas de Azospirillum brasilense en sorgo. Simultneamente con las evaluaciones agronmicas de la cepa CBG-497, se realizaron diferentes trabajos sobre el escalamiento para la produccin y elaboracin del Biofertilizante, encontrndose los parmetros ptimos para produccin de esta bacteria, optimizndose medios de cultivo y dems Centro de Biotecnologa Genmica, Instituto Politcnico Nacional. Blvd. del Maestro. Col. Narciso Mendoza. Reynosa, Tam. 77810. E-mail garciag@mail.cbg.ipn.mx
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CONCLUSIONES. El uso de Azospirillum como biofertilizante, puede ser benfico para tener incrementos en los rendimientos de grano en los cultivos de sorgo y maz, mayormente si para la elaboracin de los biofertilizantes se utilizan cepas nativas. Finalmente, es necesario continuar con evaluaciones en campo lo que, promover el empleo de estos productos por parte de los agricultores en beneficio directo a la produccin agrcola.

BIBLIOGRAFA. 1. Bashan, Y. and Holguin, G. (1994). Root-to Root travel of the beneficial bacterium. Applied and Environmental Microbiology. Vol. 60. No. 6: 2120-2131. 2. Eory, V.J., Momo, F.R. & lvarez, M. (1995). Growth and survival of Azospirillum in roots and maize rhizospheres with different leaves of acidity. Rev. Argent. Microbial. 27: 99-105. 3. Vande Broek, A., Lambertch, M. & Vanderleyden, J. (1999) Auxins upregulate expression of the indole-3pyruvate decarboxylase gene in Azospirillum brasilense. J. Bacteriol. 181: 1338-1342. 4. Okon, Y and Itzigshon, R. (1995). The development of Azospirillum as a commercial inoculant for improving crops yields. Biotechnology Advances. Vol. 13. No. 4: 415-424.

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Respuesta del Sorgo a la Inoculacin de Glomus intraradices en Campo

Agustn Magallanes Estala1* INTRODUCCIN. Los estudios realizados con la inoculacin micorrzica del hongo vescilo arbuscular Glomus intraradices en semilla de sorgo, han mostrado efectividad de la prctica con manifestaciones variables en la promocin del crecimiento de raz, aumento de clorofila, de P foliar, de biomasa, de infeccin micorrzica radical y adems, incremento del rendimiento de grano. Con el propsito de darle seguimiento a los resultados obtenidos en sorgo, se realiz un estudio de validacin comercial de la inoculacin micorrzica, comparativamente con la aplicacin de Biozyme a la semilla, prctica comn en la regin. MATERIALES Y MTODOS. Con el apoyo del Sr. Daniel Bone, productor cooperante, se estableci una parcela de validacin en un suelo de textura migajn arenoso, pH ligeramente alcalino, alto en nitrgeno y mediano en fsforo. en el poblado de Anahuac, municipio de Valle Hermoso, Tam. La siembra fue mecanizada, con sembradora International 82 y sta se estableci el 3 y 4 de febrero de 2003 en un terreno sin fertilizacin qumica, en la cual se utiliz el hbrido de sorgo 83G63. Los tratamientos fueron a) inoculacin a la semilla de G. intraradices, a razn de 1 kg de sustrato, 60 ml de adherente y 700 ml de agua, en 8 kg de semilla utilizada por hectrea; b) Biozyme a dosis de 200 ml/100 kg de semilla; y c) testigo absoluto. Cada tratamiento se sembr en franjas y ocup una superficie de 24 surcos de 0.86 m y 1000 m de largo (1020.64 m2). En madurez se realizaron cinco submuestreos en parcelas de dos surcos de 3 m de longitud donde se midi la altura en 10 plantas y se estim el rendimiento de grano, ajustado al 12% de humedad. Los datos se analizaron estadsticamente. RESULTADOS Y DISCUSIN. La mayor promocin en la altura de planta se observ con el tratamiento consistente en la inoculacin de G. intraradices en la semilla de sorgo. Sin embargo, ese tratamiento y la aplicacin de Biozyme en la semilla, incrementaron significativamente y de manera similar el rendimiento de grano con relacin al testigo absoluto (Cuadro 1). Los resultados son coincidentes con los obtenidos con anterioridad y demuestran la efectividad de la inoculacin micorrzica en sorgo. Existen antecedentes de que el Biozyme tiene impacto en la produccin, lo cual fue confirmado en el presente estudio. No obstante, el costo del producto es superior al del sustrato micorrzico utilizado.
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Cuadro 1. Altura de planta y rendimiento de grano de sorgo (83G63) influenciados por los tratamientos en la localidad Anhuac, Valle Hermoso, Tam. Ciclo O-I 2003. Tratamiento Altura de Rendimiento planta (cm) (kg/ha) G. intraradices 123 a 2909 a Biozyme 114 b 2813 a Testigo 118 b 2127 c Prueba de t * **
*,** Significancia a nivel de p<0.05 y 0.01, respectivamente

CONCLUSONES. De acuerdo a los resultados obtenidos del presente estudio se observ la efectividad de la aplicacin micorrzica en sorgo. Para el rendimiento de grano no existieron diferencias significativas con respecto a la inoculacin micorrzica y la aplicacin de Biozyme, con la desventaja de este ltimo de presentar un costo mayor a la del sustrato micorrzico utilizado, lo cual impacta considerablemente en los costos de produccin del cultivo.

LITERATURA CITADA. 1) Acosta N., S., Daz F., A., Magallanes E., A., y Silva S., M. 2000. La biofertilizacin en el norte de Tamaulipas. Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP. Informe 1999/2000. 9 p. 2) Garza C., I., Daz F., A., Pecina Q., V., Ramrez L., A., y Olalde P., V. 2001. Evaluacin de simbiontes y hormona esteroidal en sorgo. Memorias XXVIII Congreso Nacional Fitopatologa. P. F-14.

Campo Experimental Pachuca-INIFAP.

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Rentabilidad del Sorgo Mediante la Inoculacin de Simbiontes en Suelo Con y Sin Fertilizacin Qumica
Agustn Magallanes Estala1 *, Arturo Daz Franco2 y Vctor Olalde Prtugal3 INTRODUCCIN. El cultivo de sorgo para grano constituye una actividad agrcola intensiva en la zona norte de Tamaulipas. Su rentabilidad depende del uso de insumos que incrementan sus costos tales como la fertilizacin qumica. La bsqueda de nuevas opciones que favorezcan su rentabilidad se ven orientadas al uso de insumos que tengan la misma funcin pero con menor costo como lo constituyen los biofertilizantes, que adems evitan problemas posteriores de contaminacin en el suelo por ser de origen orgnico. El objetivo del presente trabajo fue evaluar diferentes simbiontes y analizar la rentabilidad del sorgo con el uso de los mismos. MATERIALES Y MTODOS. Se seleccion una parcela sin fertilizar con un periodo de tres aos, ubicada en El Goliat, Matamoros, Tam., para validar la inoculacin de diferentes simbionte. Se utiliz el hbrido 83G63, el cual se sembr el 28 de enero de 2002 en condiciones de manejo comercial y de temporal. Los tratamientos evaluados fueron: a) inoculacin de la semilla con G. intraradices (M); b) inoculacin con A. brasilense, cepa INIFAP (A); c) combinacin de A + M; d) inoculacin del complejo micorrzico CINVESTAV; y c) testigo. Dichos tratamientos se evaluaron en un terreno fertilizado en presiembra con la frmula 60-40-00, y otro sin fertilizacin qumica. Los tratamientos con micorrizas se inocularon con una mezcla de 1 kg del sustrato en 7 kg/ha de semilla y 0.5 kg/ha de la bacteria Los tratamientos se sembraron mecnicamente en franjas de una superficie de entre 12 y 24 surcos de 200 m de longitud (2,040-4,080 m2). La medicin del rendimiento de grano se realiz en subparcelas de tres surcos de 6 m de largo (15.3 m2) y en tres repeticiones; la humedad del grano se ajust al 12%. La comparacin de los promedios se realiz mediante la prueba de t, entre los tratamientos y entre la fertilizacin y sin fertilizacin. Se realiz un anlisis econmico considerando un precio rural de sorgo de $1050.00/ton. RESULTADOS Y DISCUSIN. La aplicacin del fertilizante qumico, con un costo estimado de $500.00/ha, result una prctica ineficiente ya que no tuvo impacto sobre la produccin de sorgo. Los endfitos influyeron en la promocin del rendimiento de grano de sorgo, con o sin fertilizacin qumica. Result evidente el incremento
INIFAP-Pachuca, INIFAP-Ro Bravo, CINVESTAVIrapuato, respectivamente.
1,2,3

significativo del rendimiento con cualquiera de los tratamientos de simbiontes y la similitud de respuesta entre ellos (Cuadro 1). Otros resultados semejantes han sido tambin obtenidos en la regin (1, 2). Cuadro 1. Influencia de la inoculacin de simbiontes en el rendimiento de sorgo 83G63 .
Tratamiento A. brasilense (A) 60-40-00 2674 * No Fertilizado Kg/ha 2987 * Promedio 2830 */NS

Micorrizas CINVESTAV 2641 * 2776 * 2708 */NS G. intraradices (M) 2762 * 2648 * 2705 */NS A+M 2900 * 2640 * 2770 */NS Testigo 2256 2143 2199 NS */NS Significacin (p<0.05) con relacin al testigo (similitud entre tratamientos) y no significacin segn prueba de t, por columna y entre columnas, respectivamente.

El anlisis econmico se realiz en funcin al rendimiento promedio obtenido en las dos condiciones de fertilizacin. Debido a los incrementos de rendimiento registrados con los simbiontes (506-631 kg/ha), as como el bajo costo de los mismos, la rentabilidad de la produccin fue acrecentada y esta le represent para el productor un ingreso adicional en el rango de $531-$628/ha (Cuadro 2).
Cuadro 2. Anlisis econmico de la rentabilidad con la inoculacin de diferentes simbiontes en el sorgo 83G63.
Variable Kg/ha Testigo (kg/ha) Diferencia (kg/ha) U. bruta ($/ha) Costo/trat. ($/ha) U. neta ($/ha) A. brasilense (A) 2830 M. CINVESTAV 2708 2199 631 663 35 628 509 535 35 535 571 600 20 600 506 531 55 531 G. intraradices (M) 2770 A + M 2705

CONCLUSIONES El presente estudio demostr la efectividad de la inoculacin del sorgo con simbiontes y la ineficiencia de la fertilizacin qumica, manejo que significa una alta inversin. LITERATURA CITADA 1. Garza C., I, et al. 2003. Evaluacin de Glomus intraradices y brassinoesteroides en la productividad de sorgo. Memoria de Resmenes del VII Simposio Int. y II Congreso Nal. de Agr. Sostenible, p. 120. 2. Daz M., R. 2002. Influencia de la biofertilizacin en las caractersticas de planta, de grano e infeccin micorrzica del sorgo, en dos condiciones edficas. Tesis Profesional. UAMRA-UAT.

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Evaluacin de Biofertilizantes en Crtamo

Agustn Magallanes Estala1*, Alfredo S. Ortegn Morales 2 y Arturo Daz Franco 2 INTRODUCCION. El cultivo de crtamo en la regin es considerado como una alternativa de produccin entre los productores. Para hacerlo mas rentable, se han estado evaluando diversos biofertilizantes cuyo fin es hacer la misma funcin que los fertilizantes qumicos con la ventaja de ser de menor costo, factor de importancia en la produccin de los cultivos para analizar su rentabilidad. El objetivo fue evaluar la respuesta del crtamo a la inoculacin de los biofertilizantes en diferentes fechas de siembra en condiciones de riego y temporal. MATERIALES Y METODOS. En la localidad CERIB se establecieron tres parcelas de validacin de biofertilizantes en crtamo, una en temporal y dos en riego restringido (un riego de auxilio). En la parcela de temporal, sembrada el 7 de diciembre del 2001, se evaluaron las variedades Bacum-92, T-3 y Sonora 92, en cada una se aplicaron los tratamientos: a) Glomus intraradices, 1 kg/ha inoculacin a la semilla; b) Azospirillum brasilense (INIFAP), 0.5 kg/ha inoculacin a la semilla; c) fertilizacin qumica (100-40-00); y d) testigo. Bajo riego restringido, el 28 de noviembre, se sembr con las variedades M-81, Tantoan 91 y T-21; en ellas se inocul G. intraradices y se dej un testigo. En riego restringido se sembr el 5 de diciembre, donde en las variedades T-3, Tantoan 91, M-81, T-21 y Sonora 92, se aplicaron los tratamientos: G. intraradices, A. brasilense (INIFAP), fertilizacin qumica (100-40-00) y el testigo. En todos los casos, la fertilizacin qumica se hizo durante la siembra y el rendimiento se obtuvo de cinco parcelas de tres surcos de 5 m de longitud. Los datos se analizaron estadsticamente mediante la prueba de t. RESULTADOS Y DISCUSION. El rendimiento obtenido en condiciones de temporal indic que los tratamientos evaluados no tuvieron efecto significativo en las tres variedades de crtamo consideradas (Cuadro 1). Cuadro 1. Rendimiento de grano (kg/ha) en las variedades de crtamo asociadas a la aplicacin de biofertilizantes. CERIB, temporal.
Tratamiento G. intraradcesx A. brasilense 100-40-00 Testigo Prueba de t Bacum-92 308 228 259 340 NS T-3 268 305 381 390 NS Sonora 92 433 438 405 462 NS

de G. intraradices, pero solamente en la variedad Tantoan 91, donde el rendimiento se increment aprox. 300 kg (Cuadro 2). Cuadro 2. Rendimiento (kg/ha) obtenido de tres variedades de crtamo y su influencia con la inoculacin de G. intraradices. CERIB, fecha de siembra 28-nov-01.
Tratamiento G. intraradices Testigo Prueba de t M-81 792 712 NS Tantoan 91 693 394 ** T-21 651 746 NS

Los resultados obtenidos de la parcela sembrada el 5 de diciembre, demostraron que los tratamientos no tuvieron un efecto significativo sobre el rendimiento de las cinco variedades estudiadas (Cuadro 3). Cuadro 3. Rendimiento de grano (kg/ha) de las cinco variedades de crtamo validadas con la aplicacin de biofertilizantes. CERIB, fecha de siembra 5-dic-01.
Tratamiento G. intraradices A. brasilense 100-40-00 Testigo Prueba de t T-3 494 453 482 445 NS Tantoan 91 441 402 474 516 NS M-81 500 495 552 454 NS T-21 472 395 442 425 NS Sonora 92 363 457 495 396 NS

Solamente se observ respuesta a la inoculacin de G. intraradices una de las dos parcelas donde se incluy la variedad Tantoan 91. Por otro lado, la fertilizacin qumica result una prctica ineficiente en la dosis utilizada. CONCLUSIONES. No se observ respuesta a la inoculacin del crtamo con los biofertilizantes evaluados en condiciones de temporal. Sin embargo, bajo condiciones de riego restringido (28 de nov.) se observ significancia a la inoculacin de G. intraradices en la variedad Tantean 91, en un 57% de diferencia en el rendimiento. En general, el crtamo no present respuesta a la inoculacin y a la fertilizacin qumica. LITERATURA CITADA Acosta N., S., Daz F., A., Magallanes E., A. y Silva S., M.M. 2000. La biofertlizacin en el Norte de Tam. Campo Experimental Ro Bravo. INIFAP. Informe 1999/2000. 9 p. Garza C., I. Daz, F., A., Pecina Q., V., Ramrez L., A.. y Olalde P., V. 2001. Evaluacin de simbiontes y hormona esferoidal en sorgo. Memorias XXVIII Congreso Nacional de Fitopatologa.

En la parcela de riego restringido del 28 de noviembre, se observ un efecto benfico significativo con la inoculacin 1,2 INIFAP-Pachuca y Ro Bravo, respectivamente.

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Interaccin de Azospirillum brasilense, Nitrgeno y Azcar en Canola de Riego Bajo Labranza Convencional y de Conservacin
Mario Cepeda Villegas1*, Eulalio Venegas Gonzlez1 y Blanca Gmez Lucatero1

INTRODUCCIN. En la regin templada del centro de Mxico, en el ciclo otoo invierno, se practican las siembras mas tecnificadas, donde se utilizan elevadas dosis de fertilizante qumico nitrogenado, del cual altos niveles son lavados por las lluvias o los excesos de agua de riego, provocando la contaminacin de los drenes y cuerpos de agua. La labranza reducida provoca cambios en las propiedades de los suelos y la actividad de los microorganismos como las micorrizas y los hongos patgenos del suelo y modificar la absorcin de nutrientes (Mozafar et al., 2000). La inoculacin de Azospirillum brasilense y niveles bajos de fertilizante increment el rendimiento de maz y trigo duro en 80 y 30 % respectivamente y en girasol el efecto fue solo del 15 %, sin embargo con la bacteria y niveles altos de fertilizacin nitrogenada el efecto fue negativo en maz y trigo duro (Palazzo et al 1997). La aplicacin de 100 kg/ha de azcar en maz de temporal bajo labranza de conservacin incremento el rendimiento hasta en 900 kg (Cepeda et al 1999). Por lo anterior el objetivo fue determinar la respuesta de la canola a la aplicacin de A. brasilense, nitrgeno y azcar en riego bajo labranza de convencional y de conservacin MATERIALES Y MTODOS. En el Centro Nacional de Investigacin Disciplinaria en Produccin Sostenible (INIFAP-CENAPROS) en la parte baja de la Cuenca Hidrolgica de Cuitzeo en Michoacn, se establecieron dos trabajos en riego con el genotipo Hyola 401, el 18 de diciebre de 2001, bajo los sistemas de labranza convencional y de conservacin donde se evaluaron los factores: a) Con y sin A. brasilense b). Nitrgeno 60 kg/ha con biofertilizante y 160 kg/ha sin biofertilizante c). Azcar de 50, 100 y 150 kg/ha y testigo. En un diseo bloques completos al azar en parcelas divididas con cuatro repeticiones, donde parcela grande fue biofertilizante y parcela chica azcar, la parcela experimental fue de 4 surcos de 5 m y 0.8 m de ancho. RESULTADOS Y DISCUSIN. En la emergencia de la planta se presentaron fallas en ambos sistemas de siembra, pero fue mayor en labranza de conservacin, lo que afect el rendimiento (Cuadro 1). El anlisis estadstico para la variable de rendimiento al ocho porciento de humedad, en labranza de conservacin, se detectaron diferencias 1 Centro Nacional de Investigacin Disciplinaria en Produccin Sostenible-INIFAP. Morelia, Michoacn. cepeda.mario@inifap.gob.mx

estadsticas significativas para azcar y en la interaccin biofertilizante x azcar, en tanto en labranza convencional, las diferencias estadsticas fueron para azcar y no significativas para biofertilizante y la interaccin. En labranza convencional se observ que con el biofertilizante y 60 kg de N2 se pueden sustituir 100 kg de N2 sin que disminuya el rendimiento y con la aplicacin de 50 kg de azcar el rendimiento se increment en 662 kg/ha (Cuadro 2). Cuadro 1. Rendimiento de canola bajo labranza de conservacin con biofertilizante y azcar. Trat. Semilla Sin biofert Con biofert 0 1664 943 50 1221 870 100 1296 1178 150 1793 1364 labranza 150 1893 1593

Cuadro 2. Rendimiento de canola bajo convencional con biofertilizante y azcar. Trat. Semilla Sin biofert Con biofert 0 1621 1693 50 2126 2355 100 2190 1759

Econmicamente el mejor tratamiento fue labranza convencional con biofertilizante y 50 kg de azcar con ingreso bruto de $ 6147.00/ha El mayor contenido de aceite fue de 45.07% en labranza de conservacin sin biofertilizante y 100 kg de azcar Cuadro 3. Contenido de aceite en grano de canola.
Tratamientos Conservacin sin biofert Conservacin con biofert Convencional sin biofert Convencional con biofert 0 40.7 44.1 38.9 40.7 50 42.6 44.2 41.2 39.1 100 40.1 45.7 40.2 35.6 150 43.9 40.7 36.9 36.5

CONCLUSIONES * En canola el biofertilizante permiti sustituir parte del nitrgeno y obtener un rendimiento similar. * La canola present respuesta positiva a la aplicacin de azcar. * La aplicacin de azcar modific el contenido de aceite en el grano de canola. LITERATURA CITADA Cepeda V.M.A., E Venegas G. y B.L Gmez, L. 1999. Desplegable para productores N 1.INIFAP-CENAPROS Mozafar A; T Anken; R Ruh and E Frossard. 2000. Agronomy Journal 92: 1117-1124. Palazzo D., G Capotorti, F Montemurro and F Sunseri. 1997. Informatore-Agrario. 1997, 53: 12, 53-55.

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Respuesta del Maz al Tratamiento con

Azospirillum brasilense y Nitrgeno Bajo

Labranza de Conservacin
Mario Cepeda Villegas1* y Eulalio Venegas Gonzlez1 INTRODUCCIN. En las regiones mas tecnificadas del pas donde se cultiva maz en ambos ciclos primavera verano y otoo invierno, bajo los diferentes regmenes de humedad, los principales costos de cultivo son la preparacin del suelo, la fertilizacin nitrogenada y la semilla certificada, lo que provoca una baja rentabilidad del cultivo. En el maz Bacco, la inoculacin con Azospirillum y la aplicacin del nivel mas bajo de nitrgeno fraccionado en tres aplicaciones produce los mejores rendimientos (Raso 1996). En plantas de maz inoculado con A. brasilense, con 100 kg de nitrgeno, presentaron la mayor acumulacin de materia seca y el rendimiento de grano fue igual el de plantas inoculadas y 100 kg/ha de nitrgeno con el de 200 kg/ha sin inoculacin (Stancheva et al. 1992) por lo anterior el objetivo fue determinar la interaccin del biofertilizante y el nitrgeno en maz de temporal bajo labranza de conservacin MATERIALES Y MTODOS. En el Centro Nacional de Investigacin Disciplinaria en Produccin Sostenible, en el ciclo primavera verano, en temporal y bajo labranza de conservacin con matillo de trigo, se evaluaron bajo un diseo de bloques completos al azar con tres repeticiones, los tratamientos generados en base a biofertilizante (A. brasilense), nitrgeno (urea) y testigo (Cuadro 1). Cuadro 1 Tratamientos evaluados en maz de temporal bajo labranza de conservacin. N 1 2 3 4 5 Tratamiento Biofertilizante Fertilizacin qumica Con 210-30 Con 60-30 Con 00-00 Sin 210-30 Sin 00-00

Los mejores rendimientos se obtuvieron con biofertilizante con 210-30 y 60-30 con 5604 y 5300 kg/ha respectivamente (Cuadro 2). Esta respuesta aparentemente difiere con Raso 1996 y Stancheva et al. 1992 quienes reportaron que dosis bajas de nitrgeno e inoculacin se tienen los mejores rendimientos, pero bajo labranza convencional, en tanto en labranza de conservacin se establece una competencia por el nitrgeno entre el mantillo y el cultivo. Cuadro 2. Rendimiento de grano de maz bajo labranza de conservacin. Tratamiento Biofertilizante + 210-30 Biofertilizante + 60 30 Fertilizacin 210-30 Solo biofertilizante Testigo(sin fert. sin biofert) Kg ha-1 5604 5300 5240 4294 3613 Tukey a a a a b b

El anlisis econmico mostr como mejor tratamiento por beneficio neto fue biofertilizante con 60 unidades de nitrgeno (Cuadro 3). Cuadro 3. Anlisis econmico de los tratamientos evaluados en maz de temporal. Tratamiento 210-30-00 + biofer 60 -30-00 + biofer Fertilizacin normal 210-30-00 Solo biofertilizante Testigo(sin fert. sin biofert) Kg ha-1 5604 5300 5240 4294 3613 Ingreso bruto 7285.20 6890.00 6812.00 5582.20 4696.90 Beneficio neto 2654.16 2935.85 2202.96 2145.20 1281.90

Se utiliz el genotipo de maz HV-313 de ciclo precoz, en una densidad de poblacin de 55 mil plantas por hectrea. La siembra y el tratamiento a la semilla fue el 9 de junio de 2000. RESULTADOS Y DISCUSIN. El anlisis de varianza para la variable rendimiento mostr diferencias altamente significativas entre tratamientos. 1 Centro Nacional de Investigacin Disciplinaria en Produccin Sostenible-INIFAP. Morelia, Michoacn. cepeda.mario@inifap.gob.mx

CONCLUSIONES * La combinacin de Azospirillum y fertilizacin qumica incrementa el rendimiento de maz de temporal bajo labranza de conservacin. * Econmicamente el mejor tratamiento fue Azospirillum con 60 unidades de nitrgeno y 30 de fsforo. * Con la aplicacin de biofertilizante es factible disminuir la contaminacin que provoca la fertilizacin nitrogenada en por lo menos un 50 %. LITERATURA CITADA Raso E. 1996. Rivista-di-Agronomia. 30: 4, 580-586. Firenze, Italy Stancheva I., Dimitrov I., Kaloyanova N., Dimitrova A. and Angelov M. 1992. Agronomie 12: (4) 319-324.

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Efecto Estimulante de Bacterias Esporuladas sobre Crecimiento y Desarrollo del Chile Jalapeo (Capsicum annuum), en Invernadero y Campo
Nicolasa Garca Licona1, Gabriel Gallegos Morales1*, Melchor Cepeda Siller1 y Fco. Daniel Hernndez Castillo1

corresponda al lugar marcado y a la repeticin que le corresponda. El experimento fue planteado completamente al azar y las variables medidas fueron produccin total por planta y numero de plantas muertas, tamao y rendimiento. RESULTADOS. Se encontr que los rendimiento de chile jalapeo (Capsisum annuum) por planta muestran de manera clara que las bacterias del tipo de Bacillus promueven el rendimiento de esta especie (Cuadro 1).

INTRODUCCIN. El cultivo del chile jalapeo es de suma importancia en nuestro pas, ya que es un producto indispensable en la alimentacin del mexicano como verdura fresca y procesado en salsas, polvo o en curtidos por lo que tiene una amplia distribucin en todo el pas, cultivndose en diferentes tipos, formas, tamaos, colores y sabores muy variables siendo los de mayor importancia los chiles anchos, jalapeos, serranos, pasilla (Anaheim) y en menor proporcin los chiles dulces, de los cuales un gran numero se utiliza con fines de exportacin. (Barreiro, 1998). El cultivo del chile se ve afectado por una serie de enfermedades entre ellas el complejo de hongos del suelo que causan marchitamiento a la planta, originando perdidas econmicas considerables. Los mtodos de control varan considerablemente de una enfermedad a otra, dependiendo del tipo de patgeno, del hospedante y la interaccin que existen entre los dos (Agrios, 1996). En la actualidad el control biolgico ha sido enfocado principalmente a fitopatgenos habitantes del suelo (rizosfera); es ampliamente aceptado como uno de los mtodos ms antiguos y ms eficaces para el control de plagas y enfermedades de las plantas. El mtodo biolgico es econmico, especifico, evita desarrollo de resistencia y no es residual (Zavaleta, 1994). Se planteo evaluar tres cepas aisladas de rizosfera y una comercial de Bacillus esporulados sobre el desarrollo y produccin de chile jalapeo. MATERIALES Y MTODOS. El experimento se ubico en el lugar conocido como bajo de la Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro en Saltillo, Coahuila. Las bacterias esporuladas del fueron propagadas en placas de agar nutritivo en el laboratorio de fitopatologa del Dpto. de Parasitologa de esta institucin. Para realizar la inoculacin al suelo se prepararon las concentraciones de las bacterias esporuladas; Bacillus polymixa, B. Pumillus y Bacillus subtilis a 1x108, una mezcla y un testigo. Se utilizaron seis surcos cada uno a una distancia de 80cm, transplantadas con plntulas de chile jalapeo sembradas a una distancia de 30cm c/u en zix - zag, cada tratamiento se dividi con estacas a lo largo de 3mts, cada estaca, ya marcado, se seleccion al azar cada espacio y al ir sorteando cada rea se le aplic cada bacteria segn le 1 Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro, Departamento de Parasitologa, Saltillo, Coahuila. ggalmor@uaaan.mx.

TRATAMIENTO MEZCLA TESTIGO B. subtilis1 B. subtilis B. polymixa B. . pumillus

R1* 1700 1000 1620 1350 1750 1235

R2* 1250 1200 1525 1800 1625 1635

R3* 1825 1545 1200 1200 1345 1895

R4* 1325 1235 1465 1215 1235 1260

TOTAL* 6100 4980 5560 5565 5955 6025

X* 1525 A 1245 B 1390 C 1391 C 1488.A 1506. A

* Media del rendimiento de tres cortes en gramos/planta Acorde al anlisis de varianza en un diseo completamente al azar (Tukey P = 0.5 ) con las medias de cada tratamiento se observa que no presentan diferencia estadstica sinnificancias en rendimiento de chile en las bacterias Bacillus polymixa, B. Pumillus y la mezcal de ambas en comparacin con el testigo. CONCLUSIONES. Las bacterias antagnicas tienen efecto sobre el crecimiento, desarrollo y `produccin de la planta del Chile as como tambin en el control o inhibicin de las enfermedades conocidas como secadera o marchitamiento del suelo provocadas por Phythopthora, Fusarium, Phytium y Rhizoctonia. LITERATURA CITADA Agrios, G. N. 1996 Fitopatologa. Limusa. Mxico. 838 p. Barreiro, P. M. 1998. El chile y su trascendencia cultural. Claridades Agropecuarias. pp. 1-17 Zavaleta. M.E. 1994. Control Biolgico de Fitopatgenos con Origen en el Suelo y Perspectiva. Revista Mexicana de Fitopatologa. 256 pp.

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Resultados Preliminares de la Evaluacin de Biofertilizantes en Maz QPM

Jos Ernesto Cervantes Martnez1* INTRODUCCION. El maz como la mayora de gramneas, demanda alta fertilizacin N-P para proporcionar altos rendimientos. Dado el alto costo de dicho insumo, ste es mas usado en aquellas reas dotadas de riego y donde el clima es ms favorable para obtener rendimientos altamente rentables; sin embargo, en otras reas donde el clima no es tan favorable para alta productividad de maz y el agua es restringida o usada en cultivos ms rentables, la fertilizacin es mnima y frecuentemente nula. Por lo tanto, es importante buscar otras opciones de fertilizacin baratas y efectivas que complementen las necesidades del maz para que su cultivo sea rentable an en condiciones de estrs por clima y suelo que caracterizan a la mayor parte de los sistemas de produccin de maz mexicanas, una de las cuales es el sur de Tamaulipas. Con base en lo anterior y tomando en cuenta ciertos antecedentes del efecto positivo de la aplicacin de biofertilizantes sobre la produccin de maz y sorgo (Daz, 2002), algodn (Salgado, 2000) y soya (Elizondo, 2000), se consider prudente inocular semilla de maz con algunos de tales biofertilizantes y evaluar su respuesta en el rendimiento de elote y grano de maz QPM en condiciones de campo bajo riego. MATERIALES Y METODOS. El estudio se realiz en terrenos del Campo Experimental Sur de Tamaulipas ubicado en el km. 55 a 2 km. de Est. Cuauhtmoc, Tam. La fecha de siembra fue el 14 de octubre de 1999, la cual fue mecanizada. Se utiliz un diseo de bloques completos al azar con cinco repeticiones en parcelas de ocho surcos de 16.0 m de longitud a 0.90 m de ancho. Los tratamientos (800 g/ha inoculacin a la semilla) fueron: 1. Azospirillum sp., 2. micorriza arbuscular, 3. Azospirillum + micorriza, 4. Brassinoesteroides (fitohormona), y 5. testigo sin biofertilizante. Se utiliz un hbrido trilineal de maz QPM (CML176 x CML149 x CML186) y se fertiliz con 12040-0, aplicando la mitad a la siembra y la otra distribuida en los dos riegos de auxilio proporcionados. Se obtuvo informacin sobre rendimiento de elote (dos surcos de parcela til, 9.0 m2) y de grano seco (14% de humedad). RESULTADOS Y DISCUSION. Los resultados del anlisis de varianza (datos no presentados) mostraron que para rendimiento de elote y grano hubo diferencias significativas entre tratamientos (P0.05). Los valores medios de elote y grano aparecen en el Cuadro 1, donde se puede apreciar que el mejor tratamiento correspondi a Campo Experimental Sur de Tamaulipas, INIFAP. Apdo. Postal 31, Altamira, Tam. 89610. cervantes.ernesto@inifap.gob.mx
1

Brassinoesteroides con rendimiento de 17.1 y 7.2 t/ha de elote y grano, respectivamente. Estos rendimientos corresponden a 15.3 y 14.8% de incremento con relacin al testigo sin biofertilizante. Azospirillum fue el tratamiento que le sigui en rendimientos al promediar 17.0 y 6.9 t/ha de elote y grano, respectivamente.
Cuadro 1. Rendimiento de elote y grano (t/ha) de maz de calidad proteica inoculado con varios biofertilizantes. Biofertilizante Azospirillum (Azos) Micorriza (Mico) Azos + Mico Brassinoesteroides Testigo Elote 17.0 a* 14.3 16.4 b 17.1 a 14.8 c c Rendimiento % Grano 14.7 3.7 10.4 15.3 6.9 a 5.5 c % 10.2 12.0 6.3 14.8 -

5.9 bc 7.2 a 6.2 b

* Rendimientos con la misma letra no son diferentes significativamente segn la prueba de Tukey (P<0.05).

El tratamiento con micorriza tuvo los promedios de rendimiento ms bajos junto con la combinacin de Azospirillum ms micorriza. De acuerdo a lo observado (datos no presentados), la semilla tratada con micorriza tuvo problemas para germinar, razn por la cual la poblacin de plantas fue inferior a la emergida con los otros tratamientos. Esto se debi a que los platos de la sembradora depositaron menos semilla por metro lineal, dado que el biefertilizante adherido aumento su tamao. Por otro lado, los tratamientos con Brassionesteroides y Azospirillum (solo) no tuvieron ese problema porque tales productos son ms solubles y no aumenta el volumen de la semilla como en el caso de micorriza. Por el contrario, en ambos tratamientos el maz mostr buena poblacin de plantas y en general buen vigor y porte agronmico.

CONCLUSIONES. Brassinoesteroides y Azospirillum provocaron incrementos en rendimiento de elote y grano de aproximadamente 15%. Dichos incrementos pueden considerarse sustanciales si se corroboran los resultados en ms evaluaciones; razn por la cual es necesario reforzar la investigacin en biofertilizantes y determinar la factibilidad de su uso como fertilizacin complementaria en maz.

LITERATURA CITADA Daz F., A. 2002 Incremento en la productividad del sorgo y maz mediante biofertilizacin. Publ. Esp. No. 25 INIFAP-CERIB. P 13-14. Elizondo B., J. 2000. Evaluacin de biofertilizantes Bradirrizobium japonicum, Glomus intradices y una hormona esteroidal en soya. En: 12. Encuentro de Investigacin Cientfica y Tecnolgica de Golfo de Mxico. P 6. Salgado S., E. 2000. Evaluacin de biofertilizantes en Algodonero. En: 12. Encuentro de Investigacin Cientfica y Tecnolgica de Golfo de Mxico. P 8.

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Efecto de Biofertilizantes Sobre el Rendimiento del Maz

Csar A Reyes Mndez1* y Miguel Angel Cant Almaguer1 INTRODUCCIN. El maz ocupa el 43% de la superficie cultivada en Mxico (7.9 millones de hectreas), donde el principal problema es el temporal irregular que provoca rendimientos de grano bajos. En el norte de Tamailipas con el propsito de hacer ms eficiente la nutricin del maz bajo condiciones de temporal, se estn aplicando biofertilizantes como un recurso para incrementar los rendimientos de este cereal y bajar los costos de produccin. Estudios iniciales en esta regin, indican que la aplicacin de micorriza vesculo arbuscular (MVA) y Glomus intraradices ha tenido un impacto favorable en la produccin de sorgo y maz, al incrementar sus rendimientos (Daz F., 2002; Daz M., 2002). Por lo anterior, el objetivo del presente trabajo fue el de conocer, en condiciones de campo, el efecto de los biofertilizantes sobre el rendimiento del grano de maz. MATERIALES Y MTODOS. En la localidad de Ro Bravo, Tam. bajo condiciones de temporal, se evalu el efecto de los biofertilizantes. El diseo fue de bloques al azar con cuatro repeticiones. Se utiliz el hbrido de maz H-437, donde se estudiaron los siguientes tratamientos: a) fertilizacin qumica (140-40-00); b) fertilizacin qumica ms MVA G. intraradices, 1 kg/ha, inoculacin a la semilla; c) fertilizacin qumica ms Azospirillum brasilense; d) MVA G. intraradices; e) Azospirillum brasilense; y f) testigo absoluto. La parcela experimental fue de cuatro surcos de 5 m y 0.82 m de ancho. La fertilizacin qumica fue a base de urea y superfosfato de calcio triple, aplicndose esta durante la siembra. Los datos obtenidos por planta fueron: floracin masculina y femenina, altura de planta y mazorca, calificacin de sanidad de mazorca, porciento de acame de tallo y rendimiento de grano por parcela. El anlisis estadstico se realiz mediante el sistema SAS (SAS, 1996). RESULTADOS Y DISCUSIN. Los resultados del anlisis de varianza indicaron, que para las variables estudiadas se encontraron diferencias significativas entre tratamientos, (Cuadro 1), excepto la altura de planta y el porcentaje de mazorcas sanas. Los bajos coeficientes de variacin nos indican la confiabilidad de los resultados obtenidos. Los mejores rendimientos de grano se obtuvieron al aplicar la fertilizacin qumica, sola o combinada con alguno de los biofertilizantes mientras que al aplicar solamente Glomus o Azospirillum el rendimiento se abati en 9.8% y 34.2% respectivamente, Investigadores del Campo Experimental Ro Bravo, INIFAP. Apdo. Postal 172, Ro Bravo, Tam. reyes.cesar@inifap.gob.mx
1

(Cuadro 2). La aplicacin de Azospirillum como nica fuente de nutrimento present los ms bajos rendimientos de grano, inclusive que el testigo absoluto, sin embargo no mostr sntomas de deficiencias nutricionales en el follaje, mientras que el testigo s las present. Cuadro 1. Nivel de significancia y coeficiente de variacin de diferentes variables agronmicas. Variables Significancia C.V % Rendimiento ** 9.2 Floracin ** 0.8 Altura de planta * 2.4 Altura de mazorca NS 9.9 Acame de tallo ** 38.8 Mazorcas sanas NS 21.8 **Diferencia altamente significativa, *Diferencia significativa, NS sin diferencias significativas. Cuadro 2. Respuesta de los biofertilizantes sobre el rendimiento del maz. Ro Bravo. OI.02-03 Tratamiento Rendimiento (t ha-1 ) 140-40-00 5.26 140-40-00 + Azospirillum 5.06 140-40-00 + Glomus 4.86 Azospirillum 4.79 0.05 Testigo absoluto 4.52 Glomus 3.92 * Valores unidos por la lnea no difieren estadsticamente (DMS, p<0.05). La asociacin de fertilizante qumico mas biofertilizante ya sea Azospirillum o Glomus no favorece la produccin de maz ya que su rendimiento de grano se ve afectado en 3.84% y 7.67%, respectivamente, sin afectarse sus componentes del rendimiento, observando adems que la aplicacin de biofertilizante si tiene efecto sobre algunos de los componentes del rendimiento en comparacin al testigo absoluto. CONCLUSIONES. Los mejores rendimientos de grano se debieron a la aplicacin de la fertilizacin qumica. El uso de G. intraradices o de A .brasilense no presentan efecto sobre el incremento del rendimiento en maz, ni en sus componentes. LITERATURA CITADA Daz F., A. 2002. Incremento de la productividad del sorgo y maz mediante la biofertilizacin. En: Publ. Esp. No. 25. INIFAP-CERIB. p. 13-14 Daz M., R. 2002. La biofertilizacin en las caractersticas de planta, de grano e infeccin micorrzica del sorgo, en dos condiciones edficas. Tesis Profesional. UAMRA, UAT. 62 p. Statistical Analysis Systems Institute (SAS Institute). 1996. SAS/STAT Users Guide. Release 6.12. SAS, Cary, N.C., USA.

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Evaluacin Combinada de Inoculantes Microbiolgicos y Fertilizantes Qumicos en el Cultivo de Sorgo

Carrillo Rendn Othn Martn1*, Salazar Durn Mara Esther1, Machuca Orta Ismael1, Jaques-Hernndez Cuauhtmoc1

Rendimiento, Ton Ha -1

INTRODUCCIN. La aplicacin de la bacteria Azospirillum y otros microorganismos en el suelo tiene como finalidad estimular el crecimiento de las plantas con las cuales est en contacto, principalmente a nivel de la rizsfera. Estos microorganismos tienen la facultad de interactuar con los vegetales a modo tal que incrementan su capacidad de fijacin de nitrgeno atmosfrico (1,2), as como la cantidad de ste mismo elemento en el grano (3). La inoculacin de Azospirillum con otros microorganismos permite a las plantas tener un mayor balance nutricional, mejorando adems la absorcin de fsforo y otros nutrientes minerales (4). Adems la actividad combinada de la bacteria con nutrientes ha reportado resultados favorables en algunos cultivos, lo que hace posible reducir la dosis de fertilizacin. El objetivo del presente estudio fue comparar el efecto de tres cepas de la bacteria Azospirillum en formas individuales y combinadas con fertilizantes qumicos en el cultivo de sorgo. MATERIALES Y MTODOS. El trabajo fue desarrollado en el CBTa No. 98 de Matamoros, Tam. Se utilizaron tres cepas de la bacteria Azospirillum: CBG-497, BV-180, y la cepa BV-181, La formulacin fue de 1x106 bacterias. Se evalu el efecto de cada cepa en forma individual y combinada con la dosis completa de fertilizacin recomendada para la regin 90-40-00 (N-P-K) y la dosis al 50 %, obteniendo para efectos comparativos de las cepas 9 tratamientos y 3 testigos. El diseo experimental fue un bloques al azar con un arreglo factorial 4 X 3 y cuatro repeticiones, donde el factor A correspondi a la cepa biolgica y el factor B a la dosis de fertilizante. La unidad experimental consisti en tres surcos de cinco metros de largo, utilizando el surco central como parcela til. El anlisis estadstico (SAS) fue a partir de los datos obtenidos de las variables estudiadas: dimetro de tallo, altura de planta, peso verde y peso seco del follaje, peso de raz y rendimiento de grano en t ha-1. RESULTADOS Y DISCUSIN. Los anlisis de varianza realizados para cada variable mostraron que no existe efecto significativo entre tratamientos (R2 =0.51 y CV=22.1%). Los valores medios por tratamiento fueron obtenidos para evaluar la efectividad biolgica de cada cepa con respecto a los testigos (T1 sin inoculante y sin 1 Centro de Bachillerato Tecnolgico Agropecuario Nm. 98. Matamoros, Tam. carrillo@latinmail.com

fertilizante; T2 fertilizacin al 50 %; T3 fertilizacin al 100 %). Los valores para altura de planta, peso verde, peso seco, dimetro de tallo, longitud de panoja, muestran que las mejores combinaciones se dieron con el tratamiento de inoculante con media dosis de fertilizacin (45-20-00), con excepcin de la cepa BV-180 que tuvo un mejor comportamiento cuando se aplic sin fertilizante. En la combinacin del inoculante con la dosis alta de fertilizante 90-40-00 (T6, T9 y T12), los rendimientos fueron inferiores que en T3. El rendimiento de grano en los tratamientos 4, 7 y 10, que corresponden a las cepas individuales, al compararse con el T1 muestran que la cepa BV-180 es superior en un 17 %, mientras que la cepa CBG-497 y la BV-181 se comportan igual que ste (Figura 1). Los tratamientos 7 y 3 correspondientes a la cepa BV-180 sin fertilizacin y el testigo con fertilizacin alta obtuvieron los valores ms altos (5.1 t ha-1).
5.5 5 4.5 4 3.5 3 2.5 0 45-20-00 Dosis de fertilizacin
TESTIGO B V-1 80 CB G-497 B V-1 81

90-40-00

Figura 1. Rendimiento de grano como respuesta a la inoculacin de

cepas de Azospirillum; con dosis completa, media dosis y sin fertilizacin qumica.

CONCLUSIONES. El rendimiento de los tratamientos indica que la combinacin de inoculante, ms dosis baja de fertilizante promueve un mejor desarrollo sobre las variables medidas en las plantas. La diversidad de las cepas de Azospirillum es tal que de acuerdo a este trabajo pueden tener comportamiento distinto bajo condiciones similares, de esta manera la cepa BV-180 aplicada en forma individual y combinada con dosis baja de fertilizante fue la que mejor efecto tuvo sobre el rendimiento LITERATURA CITADA.
1. Steenhoudt, O. and J. Vanderleyden. 2000. FEEMS Microbiol. Rev. (24): 487-506; 2. Perotti, E. y A. Pidelo. 1999. II Reunin Cient. Tc. de Biol. Suelo. FCA-UN de Catamarca. pp. 181-184; 3. Rodriguez, O., A. et. al.. 2000. Pesq. Agropec. (35): 14731481; 4. Bashan, Y. and G. Holguin. 1997. Can. Jour. Microbiol. (43): 103-121.

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Biofertilizacion en Sorgo de Temporal en la Zona Media de San Luis Potos

Andrs Ramiro Crdova1* Cesario Jasso Chaverria1 INTRODUCCION. En el estado de San Luis Potos el sorgo ocupa una superficie que varia de 8,500 a 9,000 ha anualmente, bajo condiciones de temporal con un rendimiento de 950 a 1,000 kg/ha. Para la siembra se utiliza semilla hbrida y una mecanizacin de la siembra a la cosecha; se puede encontrar como monocultivo, o bien en la rotacin sorgo-maz. Dentro de los factores que afectan la produccin, se encuentra el poco o nulo uso de fertilizantes durante el desarrollo del cultivo, afectando la produccin de grano, esto es debido a los costos del fertilizante y a lo incierto del temporal en la regin. Una buena opcin para incrementar la produccin de este cultivo es la utilizacin de biofertilizantes o fertilizantes biolgicos aplicados al momento de la siembra. Bashan y Ferrera en 1996 indican que la inoculacin con la bacteria Azospirillum tiene un efecto favorable al utilizarse como inoculante en muchas especies vegetales. As tambin las bacterias Azotobacter y Rhizobium contribuyen en la capacidad de sintetizar hormonas vegetales reguladoras de crecimiento. Los hongos micorrzicos viven en simbiosis con la raz y su funcin consiste en contribuir eficazmente a solubilizar el fsforo existente en el suelo (Gianinazzi, 1986 citado por Aguirre 1999). Este estudio tuvo como propsito validar la aplicacin de biofertilizantes en el cultivo de sorgo. MATERIALES Y METODOS. La parcela de validacin (una ha) se estableci en el municipio de Cerritos, S.L.P. La siembra se realiz el 21 de julio de 1999; se utiliz el Hbrido de se sorgo Esmeralda. La distancia entre surcos fue de 0.84 m y la densidad de poblacin de 160 000 plantas por ha. Los tratamientos de biofertilizantes utilizados fueron: 1) Inoculacin con Azospirillum, 2) Inoculacin con hongo micorrzico, 3) Inoculacin con Azospirillum+ hongo micorrzico, 4) Inoculacin con Brassinoesteroide y 5) Testigo sin biofertilizantes y sin fertilizacin qumico. La aplicacin del biofertilizante Azospirillum y hongo micorrzico, as como la mezcla de ambos se realiz al momento de la siembra, mientras que el Brassionoesteroide se aplic con aspersora manual en la etapa de floracin es decir a los 72 das despus de la siembra. No se aplicaron fertilizantes convencionales en la siembra ni durante el desarrollo del cultivo. La precipitacin pluvial ocurrida de enero a octubre fue de 306.5 mm, de los cuales 90.5 mm ocurrieron en mayo y junio, 192.5 mm en Julio y 114 mm se presentaron en el periodo de agosto-octubre. El tipo de suelo fue un vertisol de textura arcillosa, pH alcalino, materia orgnica de 5.5%, fsforo aprovechable de 14 ppm y 0.26% de nitrgeno total. Se utiliz como parcela til 2 surcos de 5 m de 1 Campo Experimental San Luis, INIFAP.

total. Se utiliz como parcela til 2 surcos de 5 m de longitud con 5 repeticiones seleccionadas al azar y el anlisis se efectu bajo un diseo completamente al azar. Los parmetros evaluados fueron altura de planta, longitud y dimetro de panoja, das a floracin, rendimiento de grano y rendimiento de forraje verde. RESULTADOS Y DISCUSION. Los resultados obtenidos nos indican que para las variables rendimiento de grano y forraje (Cuadro 1) los tratamientos con biofertilizantes fueron estadsticamente superiores al testigo (P<0.05).
Cuadro 1. Produccin de grano y forraje en sorgo de temporal con el uso de biofertilizantes en San Luis Potos. Rendimiento grano (t ha-1) 4.18 a 4.22 a 4.30 a 4.14 a 3.07 b Rendimiento forraje verde (t ha-1) 11.6 a 11.3 a 11.7 a 13.9 a 9.2 b

Tratamiento Azospirillum Hongo micorrzico Azospirillun + hongo micorrzico Brassinoesteroide Testigo

* Valores con la misma letra no denotan diferencias (DMS. P<0.05)

Para la variable longitud de panoja los tratamientos con biofertilizantes alcanzaron de 23.4 a 24.3 cm de largo mientras que el testigo obtuvo 20.7 cm. El ancho de panoja tambin manifest una tendencia positiva en los tratamientos con biofertilizantes siendo Azospirillum y el hongo micorrzico los ms sobresalientes con 5.4 y 5.0 cm de ancho de panoja mientras que el testigo alcanzo un promedio de 4.3 cm. En el rendimiento de forraje verde se present una tendencia similar a las dems variables medidas.

LITERATURA CITADA
Aguirre M. J. F. 1999. Micorriza-Arbuscular. Revisin bibliogrfica. INIFAP 18 pp. Bashan, Y., Holgun. G y Ferrera-Cerrato. R 1996 (b) Interacciones entre plantas y microorganismos benficos. II. Bacterias asociativas de la rizosfera. Terra 14: 195-210. Gianinazzi-Pearson 1986. The physiology of improved phosphorus nutrition in micorrizal plants. In: Physiological and Genetics Aspect of Mycorrhizae. INRA. Pars. pp 101-109.

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Simbiosis Rhizobium-Micorriza Arbuscular y Uso de Brassinoesteroides en Frijol

Cesario Jasso Chaverra1 y Miguel A. Martnez Gamio1 INTRODUCCION. El frijol (Phaseolus vulgaris) es el cultivo de mayor importancia econmica y social en el estado de San Luis Potos. La superficie sembrada anualmente en riego es de 10,500 ha; con rendimiento medio de 1.15 ton ha-1. Esta produccin es considerada baja, dado el potencial de rendimiento de las variedades que actualmente existen el mercado y a las condiciones agro-climticas de las zonas productoras de frjol en el estado. En su produccin destaca el escaso uso de fertilizantes qumicos y an ms limitado, es el uso de fertilizantes de tipo biolgico como las bacterias fijadoras de nitrgeno y hongos que solubilizan algunos nutrientes del suelo. Bashan et al, en 1996 indican que la inoculacin mixta de Azotobacter con Rhizobium o Azospirillum incrementa el desarrollo de planta, as como tambin incrementa la fijacin de nitrgeno. Las hormonas ms conocidas como las auxinas, citocininas, giberelinas, etileno y cido abscsico han sido utilizadas de manera extensiva en varios cultivos, los Brassinoesteroides son el primer miembro de un nuevo grupo de substancias reguladoras del crecimiento que se encuentran en las plantas y promueven su crecimiento (Gregory, 1981; Clouse y Sasse, 1998), son un grupo de productos naturales biolgicamente activos basados en una estructura esteroidal. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la aplicacin de dos microorganismos y una hormona esteroidal en el rendimiento de frijol. MATERIALES Y METODOS. El trabajo se realiz durante la primavera de 1999, en la localidad El Refugio, Ciudad Fernndez, S.L.P. Los tratamientos evaluados fueron: 1. Rhizobium, 2. Micorriza arbuscular, 3. Brassinoesteroide, 4. Rhizobium + micorriza arbuscular, 5. Rhizobium + Brassinoesteroide, 6. Micorriza arbuscular + Brassinoesteroide, 7. Micorriza arbuscular + Rhizobium + Brassinoesteroide y 8. Testigo. El diseo experimental fue bloques al azar con cuatro repeticiones. La aplicacin de los tratamientos de inoculacin se realiz a la semilla al momento de la siembra y el brassinoesteroide en la antesis del cultivo. Para la siembra se utiliz la variedad Negro Huasteco 81 con densidad de 180 mil plantas ha-1. Las principales variables registradas fueron: das a floracin, das a madures fisiolgica, altura de planta, cobertura, vainas por planta, granos por vaina, peso de 100 granos y rendimiento de grano. Campo Experimental San Luis, INIFAP. Apdo. Postal 1538-B, San Luis Potos, SLP. jasso.cesario@inifap.gob.mx
1

RESULTADOS Y DISCUSION. Los resultados mostraron diferencias estadsticas significativas (p0.05) para altura de planta, nmero de vainas por planta y para el rendimiento de grano. Al realizar la prueba de Tukey (p0.05) se encontr que la altura de planta se increment significativamente al inocular la semilla con Rhizobium, una situacin similar ocurri al aplicar Brassinoesteroide o bien con la combinacin Micorriza arbuscular + brassinoesteroide.
Cuadro 1. Altura de planta y rendimiento de grano en frijol de riego con la aplicacin de dos microorganismos y una hormona esteroidal. Altura de planta Tratamiento Rhizobium Micorriza arbuscular Brassinoesteroide Rhizobium + Micorriza arbuscular Rhizobium + brassinoesteroide Micorriza arbuscular + brassinoesteroide Micorriza arbuscular + Rhizobium+ brassinoesteroide Testigo (cm) 52.3a 51.7ab 52.9a 51.0ab 50.4ab 52.9a 48.9ab 46.9b Grano (t ha-1) 2.701a 2.728a 2.560 a 2.472 a 2.428a 2.466a 2.623a 1.680b

* Valores con la misma literal no son estadsticamente diferentes (Tukey P<0.05)

Para la variable rendimiento de grano, los tratamiento con microorganismos y brassinoesteroide fueron estadsticamente superiores al testigo, presentndose el mayor rendimiento en el tratamiento de micorriza arbuscular, cuyo valor super en 68.38% al rendimiento del tratamiento testigo. CONCLUSIONES. La inoculacin de microorganismos y la aplicacin de brassinoesteroides en frijol de riego, contribuyeron significativamente a incrementar el rendimiento de grano.

LITERATURA CITADA Bashan, Y., G. Holguin. y R. Ferrera-Cerrato. 1996 (b) Interacciones entre plantas y microorganismos benficos. II. Bacterias asociativas de la rizosfera. Terra 14 (2) 195-210; Clouse, S.D. and J. Sause. M. 1998. Brassinoesteroids: Essential regulators of plant growth and development. Annual Review of Plant Physiology and Plan Molecular Biology. 49: 427-451; Gregory, L.E. 1981. Scceleration of plant growth throught sedd treatment with brassinoesteroids. American Journal of Botany. 68: 586588.

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Efecto del Biofertilizante y la Preparacin del Suelo en la Produccin de Maz, Sorgo y Sorgo x Sudn en la Zona Media Potosina
Miguel Angel Martnez Gamio1 y Cesario Jasso Chaverra1 INTRODUCCION. El uso de fertilizantes qumicos en cultivos de temporal incrementa el riesgo financiero dada la incertidumbre de obtener cosechas debido a lo aleatorio de las lluvias. En la Zona Media de San Luis Potos, la mayora de los productores no fertiliza por esta razn, an cuando se tiene informacin cientfica de la bondad del fertilizante en el rendimiento de los cultivos. Los biofertilizantes son una alternativa para incrementar el rendimiento sin necesidad de arriesgar por el alto costo del producto. Por otra parte, la preparacin del suelo debe ser reorientada hacia prcticas que no destruyan su estructura y que permitan mantener los actuales rendimientos pero con menor costo (Abelson, 1995; Hamblin, 1995). El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto en el uso de biofertilizantes con mtodos de preparacin del suelo bajo condiciones de temporal en la produccin de maz, sorgo y sorgo x sudn en la Zona Media de San Luis Potos. MATERIALES Y METODOS. El trabajo se estableci en el Municipio de Cerritos, S.L.P., en un suelo tipo Vertisol. La precipitacin media anual es de 550 mm y la temperatura media es de 20oC. Se evalu un biofertilizante, producido por INIFAP, para gramneas en base a Azospirillum, en dosis de un kilo de producto por la cantidad de semilla a emplear de maz, sorgo y sorgo x sudn por hectrea. Para maz se sembr un genotipo criollo regional 12 kg ha-1, en sorgo se emple el hbrido Esmeralda 10 kg ha-1 y en sorgo x sudn Sweet Siux 12 kg ha-1. .Se combinaron los tratamientos con y sin biofertilizantes con los siguientes mtodos de preparacin del suelo: 1). labranza tradicional (LT) consistente en un barbecho + rastra, 2). labranza reducida (LR) con un solo paso de rastra y 3). labranza de conservacin (LC) con el uso del multiarado. Cada tratamiento de labranza se estableci en parcelas de 3,333 m2, las cuales se subdividieron con los dos tratamientos de biofertilizantes. En todos los tratamientos no se aplic fertilizante qumico. El rendimiento de grano y rastrojo se evalu de cinco puntos de muestreo seleccionados al azar en cada tratamiento y los datos se analizaron estadsticamente de acuerdo a un diseo completamente al azar. RESULTADOS Y DISCUSION. No se detectaron diferencias estadsticas (p0.05) entre los tratamientos (Cuadro 1). En sorgo x sudn, el rendimiento de forraje en los tratamientos con biofertilizante super en promedio con 738 kg ha-1 al obtenido en los tratamientos sin
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biofertilizante. Esta diferencia es atractiva para los productores dado que el costo del producto fue de 40 pesos por hectrea. En maz, la produccin de forraje tuvo una tendencia favorable en un 35% con el uso del biofertilizante, mientras que este efecto fue de solo 5% en el cultivo de sorgo. En los mtodos de labranza rastra fue la opcin ms rentable al ahorrarse el costo del barbecho. Este tratamiento presenta la desventaja de generar una capa compacta a 20 cm de profundidad, mientras que el multiarado tiene la ventaja de no invertir el suelo, favorecer la infiltracin del agua de lluvia y evitar la compactacin que se genera al usar nicamente la rastra. Cuadro 1. Rendimiento de sorgo, maz y sorgo x sudn con biofertilizante y diferentes mtodos de labranza. Tratamientos Sorgo Maz Sorgo grano forraje x sudn t ha-1 Multiarado con biofertilizante 1.364a 1.227a 2.981a Multiarado sin biofertilizante 1.451a 1.028a 2.425a Rastra con Biofertilizante 1.767a 1.350a 3.131a Rastra sin biofertilizante 1.484a 0.787a 1.896a B+R con biofertilizante 1.506a 1.083a 3.318a B+R sin biofertilizante 1.456a 0.890a 2.892a Medias con la misma literal son estadsticamente iguales, (p0.05). CONCLUSIONES. No se detectaron diferencias en el uso del biofertilizante con diferentes mtodos de preparacin del suelo, an cuando se observ una respuesta favorable. LITERATURA CITADA Abelson, P.H. 1995. Sustainable agriculture and the 1995 Farm Bill. Science 267:943. Hamblin, A. 1995. The Concept of Agricultural Sustainability. In. Andews, J.H. and I. Tommerup (eds). Advances in Plant Pathology, Vol. 11. Academic Press, New York. P 1-19.

Campo Experimental San martinez.miguelangel@inifap.gob.mx

Luis,

INIFAP.

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Biofertirrigacin por Goteo a Base de Guano en Cultivos Diversos Bajo un Sistema Hidropnico con Produccin de Tilapia en Xalisco, Nayarit
Alberto Betancourt Vallejo1*; Pedro D. Flores Pea1, Vctor M. Gonzlez Velsquez1, Rafael Quezada Morales1, Vctor Jimnez Garca1 y Roberto Gmez Aguilar1 INTRODUCCION. En funcin directa del crecimiento demogrfico del pas, se necesita hacer mas eficiente la utilizacin de los recursos suelo y agua. Una de las alternativas viables es la biofertirrigacin en sistema hidropnico (Resh, 2001), su principal ventaja es la simplicidad, dado que no se utilizan formulas qumicas en el substrato sino guano como base del sistema en riego por goteo y complementado con fertilizacin foliar a base de urea. El sistema hidropnico tradicional se aplica usando los elementos mayores y micro elementos en substratos inertes (Resh, 2001), estos ocasionan acidez de la solucin, desbalance de los elementos y dificultades de manejo. Por la razn anterior se propone utilizar una solucin orgnica que permita adems de la produccin de cultivos diversos la produccin de peces de valor comercial como la Tilapia que es de fcil manejo y reproduccin con los objetivos siguientes: a) establecer un diseo en riego por goteo de bajo costo y con estructura de una tecnologa moderna; b) utilizar guano en la solucin nutritiva, adicionado con un catalizador orgnico y complementado con fertilizacin foliar; c) capacitar a estudiantes y profesionales en las etapas de un diseo en riego por goteo de alta eficacia, sencillo en su operacin y con la carga hidrosttica adecuada para el control de riego contra reloj; y d) producir en pequea escala la Tilapia. MATERIALES Y METODOS. El sistema se estableci en cuatro mdulos tipo invernadero en el ao 2004 localizadas en la Unidad Acadmica de Agricultura de la Universidad Autnoma de Nayarit. El agua de riego proviene de un pozo profundo de buena calidad fsica, qumica y bacteriolgica. Se utilizo tubera de color negro resistentes a los rayos UV, la lnea principal de poliducto negro hidrulico de 50.8 mm de dimetro, el tanque fertilizador con vlvulas de control y de paso para agua de entrada y de salida, con filtro de mallas, la cintilla es del tipo T tape 5000 de 5/8 de dimetro con emisiones cada 30 cm. En cada uno de los cuatro mdulos se dispone de 80 lneas de riego de 6 m de longitud, esta 80 lneas se fraccionan para la operacin equilibrada y esttica de la carga hidrulica por lo que se divide este mdulo en cuatro secciones de riego donde cada seccin de riego se controle
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con un Piezometro, una vlvula de paso y 20 lneas de riego (Losada, 2000). Los cultivos establecidos en octubre 1 del 2004 fueron: jitomate variedad Tequila de hbito indeterminado, un jitomate de habito determinado, chile serrano, y pepino tipo criollo, en botes circulares de 20 litros y aserrn como sustrato. Otros cultivos se irn adicionando bajo el sistema de cultivos acompaantes para evitar daos de plagas y enfermedades, las Tilapias por requerir temperaturas del agua de 28C se establecern el mes de marzo del 2005. RESULTADOS Y DISCUSION. Los cuatro cultivos establecidos mostraron hasta la fecha muy buen aspecto, crecimiento y sanidad, con la salvedad de que en el sustrato de aserrn se mostraron pequeas deficiencias de N que fueron corregidas con aplicaciones foliares de la frmula lquida 20-10-2 en proporcin 1:20, estos resultados preliminares concuerdan con (Resh, 2001), las mejores respuestas se observaron en aserrn con guano dejado a la intemperie 15-30 das previo al transplante. CONCLUSIONES. De acuerdo a los objetivos planteados, el sistema es promisorio para productores que requieran de un sistema simplificado de produccin de cultivos orgnicos bajo riego por goteo, dado que se puede producir eficientemente con costos bajos de operacin y manejo. LITERATURA CITADA Resh, H. M. 2001 Cultivos hidropnicos. Nuevas tcnicas de produccin. Ediciones Mundi-Prensa. 5a. Ed. p 285314. Losada Villasante A. 2000. El riego. Fundamentos hidrulicos. Ediciones Mundi-Prensa 3a. Ed. 1-18

Facultad de Agricultura, Universidad Autnoma de Nayarit. betancourt_45@hotmail.com

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