Biochimia sngelui Sngele este un fluid care circul n interiorul sistemului cardiovascular.

mpreun cu limfa i lichidul intercelular, sngele constituie mediul intern al organismului. Volumul sangvin (volemia). Cantitatea total de snge din organism reprezint 7% din greutatea corpului. Volemia variaz, n condiii fiziologice, n funcie de sex (este mai mare la brbai), vrst (scade cu naintarea n vrst), mediul geografic (este mai mare la locuitorii podiurilor nalte). n repaus, o parte din masa sangvin a corpului stagneaz n teritorii venoase i capilarele din ficat, splin i esutul subcutanat. Acesta este volumul sangvin stagnant sau de rezerv, n cantitate de 2 litri. Restul de 3 litri l reprezint volumul circulant. Raportul dintre volumul circulant i volumul stagnant nu este fix, ci variaz n funcie de condiiile de existen. n cursul efortului fizic sau termoreglator are loc mobilizarea sngelui de rezerv, crescnd volumul circulant. Astfel, se asigur aprovizionarea optim cu oxigen i energie a organelor active. PROPRIETILE SNGELUI Culoarea. Sngele are culoarea roie. Aceasta se datoreaz hemoglobinei din eritrocite. Culoarea sngelui poate varia n condiii fiziologice sau patologice. Sngele recoltat din artere este rou-deschis (datorit oxihemoglobinei), iar sngele recoltat din vene este rou-nchis (datorit hemoglobinei reduse). Cnd cantitatea de hemoglobin din snge scade, culoarea devine rou-palid. Densitatea. Sngele este mai greu dect apa. Densitatea sngelui are valoarea 1055g/l. Plasma sangvin are o densitate de 1025g/l. Vscozitatea. Valoarea relativ a vscozitii sngelui este 4,5 fa de vscozitatea apei, considerat egal cu 1. Vscozitatea determin curgerea laminar (n straturi) a sngelui prin vase. Creterea vscozitii peste anumite valori este un factor de ngreunare a circulaiei. Presiunea osmotic (P. osm.). n orice soluie, apare o presiune static suplimentar ce poate fi pus n eviden separnd, printr-o membran semipermeabil,

solventul de soluia respectiv. Membrana semipermeabil permite trecerea solventului i mpiedic deplasarea substanei dizolvate de o parte i de cealalt a ei. n aceste condiii apare fenomenul de osmoz, ce const n deplasarea moleculelor solventului prin membran spre compartimentul ocupat de soluia respectiv. Valoarea presiunii osmotice a lichidelor corpului (mediul intern i lichidul intracelular) este de aproximativ 300 miliosmoli/l (72 atmosfere sau 5500 mmHg). Presiunea osmotic a substanelor coloidale (proteinele) se numete presiune coloid-osmotic i are valoare de 28 mmHg. Reacia sngelui este slab alcalin. Ea se exprim n uniti pH. PH-ul sangvin are valoare cuprins ntre 7,38 - 7,42, fiind meninut prin mecanisme fizico-chimice (sistemele tampon) i biologice (plmni, rinichi, hematie etc.). Sistemele tampon intervin prompt n neutralizarea acizilor i bazelor aprute n exces n mediul intern. Temperatura. La om i la animalele cu snge cald (homeoterme) temperatura sngelui variaz ntre 35C (n sngele din vasele pielii) i 39C (n sngele din organele abdominale). Deplasarea continu a sngelui prin organism contribuie la uniformizarea temperaturii corpului i ajut la transportul cldurii din viscere spre tegumente, unde are loc eliminarea acesteia prin iradiere. Sngele astfel rcit se rentoarce la organele profunde, unde se ncarc cu cldur i aa mai departe. COMPONENTELE SNGELUI Sngele tratat cu oxalat de sodiu 1% nu mai coaguleaz. Prin centrifugarea unei eprubete cu snge incoagulabil timp de 15 minute, la 3000 t/minut, se produce separarea sngelui n dou componente:

Elementele figurate ale sngelui, situate la fundul eprubetei, se prezint ca un Plasma sangvin, situat deasupra, este un lichid mai puin vscos, transparent,

lichid foarte vscos, de culoare roie-nchis;

de culoare galben-citrin.

ELEMENTELE FIGURATE ALE SNGELUI Reprezint 45% din volumul sangvin. Aceast valoare poart numele de hematocrit. Hematocritul variaz cu sexul (mai mic la femei), cu vrsta (scade cu vrsta) sau n funcie de factorii de mediu ambiant (cldura provocnd transpiraie duce la scderea apei din snge i creterea valorilor hematocritului) etc. Prin examenul microscopic al sngelui se observ trei tipuri de elemente figurate: - globulele roii (hematii sau eritrocite); - globulele albe (leucocitele); - plachetele sangvine (trombocitele). ERITROCITELE (hematiile): sunt celule fr nucleu, bogate n hemoglobin, o protein de culoare roie, cu un rol n transportul O2 i CO2; Numrul lor este considerabil:
-

4,2 4,8 milioane/mm3 la femeie; 4,5 5,5 milioane/mm3 la brbat; 5,5 6 milioane/mm3 la copilul mic; 8 milioane/mm3 la locuitorii podiurilor nalte.

Numrul hematiilor poate crete temporar prin golirea rezervoarelor de snge (mai bogate n hematii dect sngele circulant). Creteri de lung durat sunt poliglobulia de altitudine i poliglobulia unor bolnavi de plmni sau cu defecte congenitale ale inimii. Scderea numrului este consecina unei distrugeri exagerate sau a unei eritropoieze deficitare. LEUCOCITELE: sunt elemente figurate ale sngelui ce posed nucleu. Numrul lor este n medie ntre 4000 8000/mm3. Aceasta poate varia n condiii fiziologice sau patologice. Creterea numrului se numete leucocitoz, iar scderea leucopenie. Numrul leucocitelor poate varia n condiii normale cu 1000-3000 de elemente/mm3. Astfel, la un copil, se ntlnesc 8000-9000 leucocite/mm3, iar la btrni 3000-5000/mm3. n efortul fizic avem leucocitoz, iar dup un repaus prelungit leucopenie. Variaiile patologice sunt mult mai mari. n bolile infecioase microbiene, numrul leucocitelor poate crete pn la 15000-30000/mm3, iar n unele forme de cancer

(leucemii), numrul poate depi cteva sute de mii la un milimetru cub, nct sngele capt o culoare albicioas (snge alb). Grupa mononuclearelor cuprinde: limfocitele (25%) i monocitele (7%). Polinuclearele cuprind trei subgrupe celulare. Aceste celule se mai numesc i granulocite, dup granulaiile ce se observ n citoplasma lor. n funcie de afinitatea diferit a granulaiilor fa de colorani, polinuclearele se mpart n:

polinucleare neutrofile, ntlnite n proporie de 65%. Granulaiile acestora se

coloreaz bine cu colorani neutri; se mai numesc polimorfonucleare neutrofile (PMN);

polinuclearele eozinofile, n proporie de 2,5%, au granulaii ce se coloreaz cu

colorani acizi;

polinuclearele bazofile, n proporie de 0,5%, au granulaii cu afinitate pentru

coloranii bazici. Rolul leucocitelor este complex i diferit, dup tipul lor. Principala funcie a leucocitelor const n participarea acestora la reacia de aprare a organismului. Polinuclearele neutrofile au rol n fagocitoza agenilor patogeni. Datorit vitezei de diapedez i deplasrii rapide prin pseudopode, polinuclearele nu stau n snge mai mult de cteva ore. Ele ajung primele la locul infeciei, unde fagociteaz microbii, distrugndu-i. Datorit acestei aciuni, polinuclearele se mai numesc i microfage. Numrul lor crete mult n infecii acute. Eozinofilele au rol n reaciile alergice. Granulaiile lor conin histamin. Numrul lor crete n bolile parazitare i alergice. Bazofilele au rol n coagularea sngelui, prin intermediul unei substane anticoagulante, numit heparin, coninut n granulaii. Tot datorit heparinei, leucocitele bazofile au rol n metabolismul lipidelor, heparina favoriznd dizolvarea chilomicronilor i dispersia lor n particule fine, ce pot fi mai uor utilizate de ctre esuturi. Monocitele sunt leucocite capabile de fagocitoz, att direct, ct i n urma transformrii lor n macrofage, proces ce are loc dup ieirea monocitelor din vase n esuturi. Monocitele i macrofagele formeaz un singur sistem celular care fagociteaz

att microbii, ct i, mai ales, resturile celulare (leucocite, hematii etc.) i prin aceasta contribuie la curirea i vindecarea focarului inflamator. Limfocitele au rol considerabil n reacia de aprare specific. TROMBOCITELE sau plachetele sangvine. Sunt elemente figurate necelulare ale sngelui. Numrul lor variaz ntre 150000-300000/mm3. Creterea numrului trombocitelor peste 500000/mm3 se numete trombocitemie, iar scderea sub 100000/mm3 trombocitopenie (trombopenie). PLASMA SANGVIN Dup ndeprtarea elementelor figurate ale sngelui, rmne un lichid vscos, glbui, numit plasm. Plasma reprezint 55% din volumul sngelui. Proprietile plasmei sunt similare cu ale sngelui, difer doar valorile i culoarea (plasma este incolor). Compoziia plasmei sangvine este foarte heterogen. Proteinelor plasmatice le revin urmtoarele roluri:

Albuminele au rol de transport al unor substane minerale (Cu, Ca, Fe), hormoni,
pigmeni biliari, precum i rol n presiunea coloid-osmotic a sngelui. Scderea albuminelor compromite schimburile de la nivelul capilarelor.

Globulinele au rol n transportul substanelor prin snge, n coagularea acestuia i

contribuie, alturi de albumine, la presiunea coloid-osmotic. O anumit clas a gamaglobulinelor, numit clasa imunoglobulinelor, reprezint suportul chimic al anticorpilor.

Fibrinogenul are rol n coagularea sngelui, prin trecerea sa din starea solubil ntr-o
reea insolubil, numit cheag de fibrin.

Alte roluri ale proteinelor plasmatice: determinarea vscozitii i densitii plasmei,

reglarea echilibrului acido-bazic (proteinele sunt substane amfotere, adic au proprietatea de a se comporta att ca baze, ct i ca acizi, n funcie de pH-ul mediului, jucnd rol de sistem tampon).

Plasma conine proteine cu roluri specifice n reglarea funciilor (hematopoieza,

reglarea tensiunii arteriale, aprarea antiinfecioas etc.)

Substanele anorganice din plasm sunt reprezentate de sruri minerale. Ele se ntlnesc n dou forme principale: legate de proteinele plasmei (deci, nedifuzibile) i libere n plasm (difuzibile). Activitile chimice ale anionilor i cationilor plasmei sunt egale ntre ele i reprezint, n medie, cte 155 mEq/l. Dintre cationi, cei mai importani sunt Na+, K+, Ca2+ i Mg2+, iar dintre anioni Cl,CO3H, SO42, PO43.

Examene din snge Constante hematologice:

Hemoleucograma: se recolteaz, prin puncie venoas, 2ml de snge pe 0,5ml

anticoagulant EDTA. V.N.: - Eritrocite: brbai: 4,5-5,5 mil./mm3, femei: 4,2-4,8 mil./mm3 - Reticulocite: 10-15 - Hemoglobin (Hb.): brbai: 152 g/100ml, femei: 132 g/100ml - Leucocite: 4200-8000/mm3, din care: - polinucleare neutrofile nesegmentate: 0-5% (230/mm3) - polinucleare neutrofile segmentate:45-70% (4200/mm3) - eozinofile: 1-3% (200/mm3) - bazofile: 0-1% (40/mm3) - limfocite: 20-40% (2500/mm3) - monocite: 4-8% (300/mm3) - Trombocite: 150000-300000/mm3

Constante eritrocitare: se recolteaz, prin puncie venoas, 2ml de snge pe 0,5ml

anticoagulant EDTA. V.N.: - Hb. eritrocitar medie (HEM): 25-33g. - Concentraia eritrocitar medie a Hb. (CHEM): 32-37g% - Valoarea globular (VG): 1 - Volum eritrocitar mediu (VEM): 83-97cm3

Hematocrit (VET sau Ht.): se recolteaz, prin puncie venoas, 2ml de snge pe
0,5ml anticoagulant EDTA. V.N.: - brbai: 466%, femei: 415%

Viteza de sedimentare a hematiilor (VSH): se recolteaz, prin puncie venoas,

1,6ml de snge pe 0,4 ml citrat de sodiu. V.N.: - brbai: 1-10mm/1h, 7-15mm/2h - femei: 2-13mm/1h, 12-17mm/2h

 Rezistena globular: se recolteaz, prin puncie venoas, 5-6ml de snge pe 5-10

perle de sticl V N.: 0,42-0,34%

Timp de sngerare (T.S.): se recolteaz prin puncie capilar

V.N.: 2-4min.

Timp de coagulare (T.C.): se recolteaz prin puncie capilar

V.N.: 5-8min.

Timp Howell: se recolteaz, prin puncie venoas, 4,5ml de snge pe 0,5ml oxalat de
potasiu V.N.: 1-2min.

Timp Quick: se recolteaz, prin puncie venoas, 4,5ml de snge pe 0,5ml oxalat de
potasiu V.N.: 12-14sec. Constante biochimice: se recolteaz, prin puncie venoas, 5-10ml de snge fr anticoagulant. V.N.: - pH sangvin: 7,34-7,42 - uree: 20-40mg% - acid uric: 2-5mg% - creatinin: 0,6-1,2mg% - glicemie (se recolteaz 2ml de snge pe 4mg NaF): 80-110 mg% - rezerva alcalin (se recolteaz 5-10ml de snge n sticlue heparinate): 5865vol.CO2 - colesterol: 120-200mg%; HDL : 35-100mg% ; LDL: 120-170mg% ; VLDL : 5-12mg% - lipide: 600-800mg% - trigliceride: <150mg% la brbai < 100mg% la femei - bilirubin: total = 0,6-1mg%, direct = 0,1-0,4mg%, indirect = sub 0,8mg%

- fier - sideremie: (se recolteaz direct n eprubet, cu ac de platin) ; brbai: 100160g%, femei: 80-140g% - ionograma: - sodiu (Na+): 137-152mmoli/l (310-345mg%) - potasiu (K+): 3,8-5mmoli/l (15-21mg%) - calciu (Ca2+): 4,5-5,5mmoli/l (9 -12mg%) - clor (Cl): 94-111mmoli/l (345-395mg%) - magneziu (Mg2+): 1,6-2,3mmoli/l (1,6-2,55mg%) - fosfatemie: 2-4mg% - proteine totale: 7510g/l - electroforeza: - albumine: 40-50g/l - globuline: 20-25g/l: - 1: 0,9-2,5g/l - 2: 4,7-9,6g/l - : 5,3-10,8g/l : ig.A - 100-350mg% ig.D - < 8mg% ig.E - < 0,025mg% ig.G - 8-15g/l ig.M - 0,45-1,5g/l - : 5,6-13,6g/l - raportul A/G = 1,5-2 - fibrinogen: 200-400mg% - enzime: - amilaza: 8-32 u.W. (uniti Wolgemuth) - fosfataza alcalin: 2-4 u.B. ( unitiBodansky) - fosfataza acid: 0,1-0,9 u.B. - transaminaza oxalacetic (TGO): 2-20u/l. - transaminaza glutamopiruvic: (TGP): 2-16u/l - gama-glutamil transpeptidaza (GGT): brbai: 6-28 u/l femei: 4-18 u/l - lactodehidrogenaza (LDH): 200-680u/l

Biochimia urinei PROPRIETI FIZICE - culoare glbuie; mai nchis daca urina este concentrat sau n cazul administrrii unor medicamente; culoare roie n boli n care se elimin snge, brun-negricioas n boli de ficat - miros specific; n diabet aceton, la alcoolici alcool, n infecii n care au loc fermentaii ammoniac - transparena este caracteristica urinei proaspete; dup cteva ore se tulbur datorit precipitrii srurilor minerale; urina este tulbure n infecii, consum mare de alimente bogate n Ca, carne - cantitatea de urin in 24 de ore 1,5 2l; este mai redus vara, n febr, vrsturi, diaree, deshidratare, consum redus de lichide, oc produs de hemoragii mari, arsuri, traumatisme, insuficien renal, infecii renale, insuficien cardiac, ciroz hepatic, calculi urinari; cantitatea de urin crete n frig, emoii, tratamante cu diuretice, consum mare de lichide, alimente srate, alcool, boli cronice care nu mai permit reabsorbia apei. - densitatea 1015 1030; scade cnd se consum multe lichide, crete cnd concentraia urinar este mai mare; o densitate sub 1012 arat c rinichii nu mai au capacitatea de a produce o urin concentrat, iar o densitate mai mare de 1030 indic o deshidratare a organismului, diabet zaharat - pH-ul urinar 5,5 6,5; scade n alimentaie bogat n carne, medicamente acide (sare, vitamin C), crete n regim alimentar vegetarian, medicamente alkaline (bicarbonate, ap mineral), infecii; dac urina este prea acid sau prea alcalin determin formarea de calculi urinari. D.p.d.v. biochimic:
-

albuminele trebuie s fie absente; poate aprea albuminurie tranzitorie n efort, frig, stri emoionale sau albuminurie permanent n TBC renal, nefroz, cistit, glomerulonefrit, HTA, diabet, infecii

10

glucoza trebuie s fie absent; poate aprea glucozurie n diabet, consum exagerat de dulciuri, diferite medicamente, la femei gravide, tratament cu hormoni

corpii cetonici trebuie sa fie abseni; cetonurie apare n diabet zaharat netratat, infecii, diferite regimuri alimentare, sarcin

pigmenii biliari trebuie sa fie abseni; sunt prezeni n boli de ficat urobilinogenul este prezent n cantitate mic; crete n boli hepatice, intestinale mineralele sunt n concentraie mai mare dect n snge acid uric, creatinin, uree prezente D.p.d.v. microscopic:

celule epiteliale rare; cresc n infecii ale rinichilor, vezicii urinare leucocite absente; apar n infecii urinare hematii absente; apar n infecii urinare sau n hematuria congenital cilindrii urinari apar n glomerulonefrit cristale urinare de natur organic sau mineral, apar la toate persoanele; la persoanele care elimin permanent cristale de acid uric i oxalate de Ca, mai ales cnd urina este prea concentrat exist pericolul formrii calculilor biliari

microbii apar n infecii urinare

11

sediment urinar se numr elementele celulare V.N.: - leucocite 2500/ml urin/minut - eritrocite 3000/ml urin/minut Examene din urin

Examenul sumar: se recolteaz 100-150ml de urin, din urina de diminea. Normal, n urin, albuminele i glucoza trebuie s lipseasc. n sediment se pot evidenia rare leucocite, rare celule epiteliale. Urocultura: se recolteaz urina din jetul mijlociu, dup efectuarea toaletei locale, n recipiente sterile. Urina normal este steril. Pn la 1000 de germeni/ml = urina este contaminat. ntre 1000 i 10000 germeni/ml = suprainfecie. ntre 10000 i 100000 germeni/ml = dubios. Peste 100000 germeni/ml = infecie urinar. Biochimia materiilor fecale Materiile fecale sunt materii neabsorbabile de ctre organism, formate din reziduuri ale digestiei i excretate la sfritul tranzitului digestiv. Fecalele sunt formate din: ap materii uscate - reziduuri alimentare (n special celulozice) - celule intestinale descuamate - bacterii Greutate normal: 100 150g Analiza: - coprocultura cutarea germenilor - fecalograma analiza chimic pentru a decela tulburri de absorbie i ale digestiei intestinale.

12

Biochimia digestiei Sucul gastric

-

compoziie - ap - 99% - reziduu uscat - substane organice (mucus, enzime) - substane anorganice: HCl, NaCl, KCl, CaPO4, MgPO4

pH 1 1,5 HCl

activeaz enzimele proteolitice din sucul gastric acioneaz asupra proteinelor alimentare fcndu-le mai uor digerabile stimuleaz evacuarea gastric mpiedic dezvoltarea germenilor introdui n stomac o dat cu alimentele ingerate (aciune antiseptic) Enzimele

pepsina este secretat sub form inactiv de pepsinogen i activat de HCl; hidrolizeaz proteinele pn la peptide de dimensiuni mai mici labfermentul secretat la sugari, absent la aduli; determin coagularea laptelui prin transformarea cazeinogenului solubil n paracazein care n prezena ionilor de Ca se transform n paracazeinat de Na. Are importan la sugar, mpiedicnd trecerea rapid a laptelui n intestine

lipaza gastric desface lipidele fin emulsionate (din lapte, glbenu de ou, fric) gelatinaza lichefiaz gelatina Mucusul gastric

protejeaz mucoasa gastric de aciunea HCl, a pepsinei Sucul gastric se recolteaz prin tubaj gastric. Se poate analiza d.p.d.v.

macroscopic, microscopic, al chimusmului, bacteriologic, parazitologic.

13

Sucul pancreatic compoziie - ap - reziduu uscat - substane organice (enzime) - substane anorganice: bicarbonatul contribuie la neutralizarea chimului gastric pH 7 8 Enzimele - amilaza pancreatic are aciune mai puternic dect cea salivar; hidrolizeaz amidonul pn la dizaharide
-

lipaza pancreatic hidrolizeaz lipidele pn la acizi grai i glicerol - tripsina secretat sub forma inactiv de tripsinogen i activat de enterochinaz (enzim secretat de mucoasa duodenal) - chimotripsina secretat sub form inactiv de chimotripsonogen i activat de tripsin Tripsina i chimotripsina acioneaz asupra proteinelor neatacate de pepsina gastric i asupra produilor de scindare ai pepsinei gastrice pe care i degradeaz pn la oligopeptide (di, tri i tetrapeptide) - carboxipeptidazele activate de tripsin; degradeaz oligopeptidele n peptide mai mici - elastaza activate de tripsin, degradeaz proteinele fibroase Sucul intestinal

- proteaze:

este bogat n mucus i bicarbonat mucusul protejeaz mucoasa intestinal de aciunea HCl enzimele nu sunt eliberate n lumenul intestinal ci sunt asociate celulelor mucoasei intestinale - peptidaze desfac di, tri, tetrapeptidele pn la AA - dizaharidazele actioneaz asupra dizaharidelor ( zaharoz, lactoz, maltoz) transformndu-le n monozaharide (glucoz, fructoz, galactoz)

14

- lipaza acioneaz asupra lipidelor transformndu-le pn la acizi grai i glicerol Bila este secretat de hepatocite (250 1100ml/zi) este un lichid galben sau verde, pH = 7 8 este necesar pentru digestia i absorbia lipidelor i pentru excreia unor substane insolubile n ap (colesterol, bilirubin) este secretat continuu i depozitat in perioadele interdigestive in vezica biliar este eliberat n douden n perioadele digestive, numai dup ce chimul a declanat secreia de colecistochinin care determin relaxarea sfincterului Oddi i contracia vezicii urinare Compoziie 97 98% ap electrolii pigmeni biliari bilirubin i biliveridin, produi de degradare ai hemoglobinei sruri biliare colesterol, lecitin Roluri prin srurile biliare reduce tensiunea superficial i determin emulsionarea lipidelor n picturi foarte fine activeaz lipazele din intestine favorizeaz absorbia acizilor grai pigmenii biliari - dau culoarea fecalelor, a urinei colesterolul, lecitina asigur absorbia lipidelor absorbia vitaminelor liposolubile (A, D, K) eliminarea unor substane (colesterolul) Se recolteaz prin tubaj duodenal.

15

Biochimia lichidului cefalorahidian LCR-ul este coninut n ventriculii cerebrali, canalul ependimar spinal, spaiul subarahnoidian cerebral i spinal. Se recolteaz prin puncie lombar sau suboccipital, n eprubete sterile. Se analizeaz d.p.d.v. macroscopic (n mod normal este incolor, limpede ca apa), chimismul (glicorahia, proteinorahia, clorurorahia), microscopic (bacteriologic i citologic).

16