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Esterilización_por_filtración

Esterilización_por_filtración

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Published by: Ing Norbert Jr Perez Ramirez on Feb 08, 2013
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12/06/2013

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 Introducción
 Objetivo
 Fundamento
 Procedimiento
 Resultados
 Conclusiones
 Bibliografía
INTRODUCCIÓN
La esterilización por filtración se logra por el paso deun líquido o un gas a través de un material capaz deretener los microorganismos presentes.La esterilización por filtración se emplea para mate-riales sensibles al calor, tales como ciertos medios decultivo, azúcares, soluciones de antibióticos y otrosmedicamentos, etc.TIPOS DE FILTROSHay varios tipos de filtros, entre ellos los que más seusan son los filtros de profundidad y los filtros de su-perficie o filtros de membrana.Filtros de profundidadEstos filtros están elaborados por un material fibroso(papel, asbesto o fibra de vidrio) dispuesto al azar, demanera que dentro de la estructura del filtro se creanvías tortuosas donde pueden quedar retenidos la ma-yoría de los contaminantes presentes.
Trabajo Práctico Nº 9
ESTERILIZACIÓNPOR FILTRACIÓN
 
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA – ESTERILIZACIÓN POR FILTRACIÓN _________________________________________________________________________________________________ 
14. 2
Entre sus ventajas se encuentran su alta capacidadde retención de partículas sobre su superficie y através de toda su estructura y que permiten filtrargrandes volúmenes. Sin embargo, tienen como des-ventajas que no presentan un tamaño de poro uni-forme y existe la posibilidad de liberación, hacia elmaterial filtrado, de partículas y microorganismosque hayan crecido dentro del filtro.Dadas sus características los filtros de profundidad se usan principalmente comoprefiltros, ya que permiten eliminar las partículas grandes pero no la eliminacióntotal de los microorganismos.Filtros de superficieSon filtros elaborados generalmente de acetatode celulosa o nitrato de celulosa y contienen po-ros de tamaño uniforme. Este tipo de filtro tienecomo ventaja que, al conocer exactamente eltamaño de poro que presentan, se pueden selec-cionar filtros capaces de retener la totalidad delos microorganismos presentes en una solución.Sin embargo, se saturan rápidamente y la veloci-dad de filtración a través de ellos es lenta.Para la filtración esterilizante se pueden usar combinaciones de un filtro de pro-fundidad con un filtro de superficie que tenga un tamaño de poro de 0.22 µm. Lamayor parte de los filtros de membrana se pueden esterilizar en autoclave y luegose manipulan asépticamente al ensamblar el equipo.EQUIPOS DE FILTRACIÓNExisten diferentes equipos de filtración, la se-lección del mismo está determinado principal-mente por el volumen de líquido a filtrar. Asítenemos equipos de filtración para pequeñosvolúmenes, los cuales generalmente se esteri-lizan por separado y se ensamblan aséptica-mente en el momento de la filtración. Cuandose requiere filtrar volúmenes mayores, el filtrode membrana se dispone en un cartucho y secoloca en un estuche de acero inoxidable.También existen pequeños cartuchos de plás-tico que se pueden esterilizar después de lainserción de un filtro de membrana; con estos dispositivos la filtración se hace utili-zando una jeringa que permite forzar el líquido a filtrar a través del filtro hasta unrecipiente estéril.
 
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA – ESTERILIZACIÓN POR FILTRACIÓN _________________________________________________________________________________________________ 
14. 3
Antes de utilizar cualquier sistema de filtración hay que determinar que los filtrosno presenten ninguna ruptura, ya que esto puede ocasionar fallas en el proceso defiltración.
OBJETIVO
Al finalizar el trabajo práctico el estudiante estará en capacidad de:Demostrar la esterilización de un medio de cultivo al pasarlo a través de un filtrode membrana de 0,22
μ
m.
FUNDAMENTO
Al pasar un medio de cultivo a través de un filtro de membrana de 0,22
μ
m todoslos microorganismos quedan retenidos sobre la superficie del mismo.
PROCEDIMIENTO
1. Separar el medio de cultivo en dos porciones.2. Pasar la porción A a través del equipo de filtración preparado con un filtro demembrana de 0,22
μ
m.3. Recoger el líquido filtrado en un recipiente estéril y rotular.4. Colocar la porción B directamente en un recipiente estéril y rotular.5. Incubar ambas porciones a 32,5ºC +/- 2,5ºC durante 24 horas.
RESULTADOS
Observar ambas porciones después del periodo de incubación y anotar sus obser-vaciones.Aspecto de la porción A: ______________________________________________ Aspecto de la porción B: ______________________________________________ 

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