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oma c

TINCIN DE WRIGHT 1 1 WRIGHT BUFFER

Insertos Tinciones Hematolgicas

www.comacmexico.com 01 (55) 2163 4127 Lerdo # 30 Cuajimalpa Mxico, D.F 05000

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ANTES DE USAR: a) Dejar madurar el colorante de Wright 15 das despus de su elaboracin.

TCNICA 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Colocar el frotis perfectamente seco en la charola de tincin y cubrir con una capa gruesa de colorante (2 mL aproximadamente). Teir durante 5 minutos. Agregar solucin buffer hasta que se forme un menisco (+ 2.5 mL). Soplar con una pipeta suavemente para mezclar las soluciones. Teir durante 6 minutos. Lavar con agua destilada evitando la precipitacin del colorante. Secar al aire. Cubrir con resina sinttica (Permount) y cubreobjetos del No. 1.

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TINCIN PARA RETICULOCITOS, HEMOGLOBINA H Y HEMOGLOBINAS INESTABLES 1 SOLUCIN COLORANTE AZUL DE CRESILO BRILLANTE AL 1%

INDUCCIN DE DREPANOCITOS 1 Solucin de metabisulfito de sodio al 2%

TCNICA 1. 2. 3. 4. 5. 6. Colocar, en un tubo de ensayo 2 gotas de sangre y 2 gotas de la solucin colorante y mezclar. Incubar a 37 C manteniendo tapado el tubo para evitar la evaporacin. Realizar frotis de la mezcla a los 15 minutos, 1, 2, 3 y 4 horas de incubacin. Secar al aire. Cubrir con resina sinttica (Permount) y cubreobjetos del No. 1. Hacer conteo de reticulocitos en 1000 clulas de cada frotis. TCNICA 1. 3. 4. Colocar 1 gota de solucin de metabisulfito de sodio al 2% en un portaobjetos y una gota de sangre anticoagulada. Mezclar con un aplicador. Tomar una pequea porcin con la orilla de un cubreobjetos y colocar ste cuidadosamente sobre un portaobjetos, evitando la formacin de burbujas. Sellar las orillas del cubreobjetos con parafina fundida. Observar al microscopio a los 15, 30, 60 minutos, 2 horas y 24 horas Colocar en un tubo: a) Metabisulfito de sodio b) Agua destilada Preparar al momento de usarse 0.05gr 2.5 mL

NOTA: Correr la prueba paralelamente con una sangre normal. Reticulocitos en PORCENTAJE hacer la siguiente regla de tres 1000 clulas N de Reticulocitos contados 100% X

= Reticulocitos en porcentaje Reticulocitos ABSOLUTOS hacer la siguiente regla de tres Valor total de eritrocitos en BH X = Reticulocitos absolutos
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5. 6.

100% Valor de reticulocitos en porcentaje

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TINCIN DE PERLS 1 1 1 1 SOLUCIN A (FERROCIANURO DE POTASIO AL 4%) SOLUCIN B (HCL AL 4% ROJO RAPIDO NUCLEAR FORMOL (Conservacin de reactivos a temperatura ambiente en lugar fresco y seco) 1 1 1

TINCIN DE MIELOPEROXIDASA SOLUCIN FIJADORA SOLUCIN DE COLORANTE SOLUCIN DE SAFRANINA

Preparacin solucin C Colocar en un vaso de precipitado: - Solucin A (Ferrocianuro de potasio) - Solucin B (HCl al 4%) (Preparar la solucin al momento de usarse) 1. 2. Conservacin: 25 mL 25 mL Solucin fijadora a 4 C Colorantes a temperatura ambiente en lugar fresco y seco. Fijar los frotis con vapores de formol por 5 minutos ( aproximadamente de 6 a 8 gotas de Formol) Vaciar la mezcla de incubacin solucin C precalentada a 56 C en un vaso de Copplin, inmediatamente colocar los frotis (previamente fijados) y tapar Incubar por 30 minutos. Lavar con agua de la llave. Secar al aire. Contrateir con solucin de rojo rpido nuclear por 5 minutos. Lavar con agua de la llave. Secar al aire. Cubrir en resina sinttica (Permount) y cubreobjetos del No. 1. TCNICA 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. Fijar los frotis durante dos minutos (utilizar solucion fijadora a temperatura ambiente). Lavar con agua de la llave. Secar perfectamente al aire. Sumergir en la solucin colorante durante 30 segundos. Lavar con agua de la llave. Secar perfectamente al aire. Contrateir por 30 segundos con solucin de safranina. Lavar con agua de la llave. Secar al aire. Cubrir con resina sinttica (Permount) y cubreobjetos del No. 1.

3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.

Precaucin: La solucin de tincin deber ser manejada con cuidado por contener material cancergeno.

NOTA: La solucin C debe ser desechada en residuos txicos

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ALFA NAFTIL ACETATO ESTERASA (ANAE) 1 1 1 1 1 1 1 1 Solucin fijadora (Mantener a 4 C) a-Naphthyl acetato (Mantener a 4 C) Etilen glicol monometil ter Nitrito de sodio Solucin de pararosanilina Amortiguador de fosfatos pH 7.6 Verde de Metilo al 1% Hidroxido de sodio NaOH

TINCIN DE PAShiff 1 1 1 1 SOLUCIN FIJADORA SOLUCIN DE CIDO PERYDICO AL 1% REACTIVO DE SHIFF REACTIVO DE HEMATOXILINA DE GILL

SOLUCIN DE INCUBACIN Conservacin a 4 C: - Solucin fijadora - Solucin de cido perydico al 1% - Reactivo de shiff - Hematoxilina de Gill a temperatura ambiente en un lugar fresco y seco. TCNICA 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. Fijar los frotis por 5 minutos (utilizar la solucin fijadora a temperatura ambiente). Lavar con agua de la llave. Secar al aire. Colocar en cido perydico durante 10 minutos (utilizar la solucin a temperatura ambiente) Lavar con agua de la llave y secar perfectamente. Sumergir en el reactivo de Shiff por 20 minutos. (utilizar el reactivo a temperatura ambiente). Lavar con agua de la llave y secar perfectamente. Contrateir con hematoxilina de Gill por 10 minutos. Lavar con agua de la llave y secar perfectamente. Cubrir con resina sinttica (Permount) y cubreobjetos del No. 1.
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Preparacin Nitrito de sodio 4% (Agregar al tubo 1) Nitrito de sodio Agua Destilada Tubo 1 Preparacin de Solucin de pararosanilina hexazotizada Solucin de pararosanilina Nitrito de sodio al 4% (Preparar en cada ocasin) Tubo 2 Preparacin de Solucin de -Naphthyl acetato -Naphthyl acetato Etiln glicol monometil eter (Preparar en cada ocasin) Colocar en un matraz Erlenmeyer en orden los siguientes reactivos: a. b. c. d.

0.0300 gr 750 L

750 L 750 L

25 mg 1.25 mL

Amortiguador de fosfatos 1/15 M, pH 7.6 22.5 mL Tubo 1: Solucin de pararosanilina hexazotizada 1.5 mL Tubo 2: Solucin de -Naphthyl acetato 1.25 mL Agregar 4 gotas de NaOH 1N y filtrar (en una caja para 5 portalaminillas)

TCNICA 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Fijar los frotis con solucin fijadora a 4 C por 30 segundos. Lavar con agua de la llave. Secar a temperatura ambiente. Colocar los frotis en la mezcla de incubacin a 37 C por 45 minutos en la oscuridad. Lavar con agua de la llave. Contrateir con verde de metilo al 1% durante 5 minutos. Lavar con agua de la llave. Secar a temperatura ambiente. Cubrir con resina sinttica (Permount) y cubreobjetos del No. 1. hoja 7 de 12

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ESTERSAS DOBLES 1 1 1 1 1 1 1 Solucin fijadora (Mantener a 4 C) a-Naphthyl acetato (Mantener a 4 C) Etilen glicol monometil ter Nitrito de sodio Solucin de pararosanilina Amortiguador de fosfatos pH 7.6 Hidroxido de sodio NaOH 1 1 1 1 Amortiguador de Fosfatos pH 7.4 NN. Dimetilformamida Naftol ASD (Mantener a 4 C) Fast Blue BBN (Mantener a 4 C) SOLUCIN DE INCUBACIN 2 Tubo 3 (Colocar los reactivos en el siguiente orden y disolver perfectamente) NN. Dimetilformamida Naftol ASD Fast Blue BBN Colocar en un matraz Erlenmeyer en orden los siguientes reactivos SOLUCIN DE INCUBACIN 1 Preparacin Nitrito de sodio 4% (Agregar al tubo 1) Nitrito de sodio Agua Destilada Tubo 1 Preparacin de Solucin de pararosanilina hexazotizada Solucin de pararosanilina Nitrito de sodio al 4% recin preparado (Preparar en cada ocasin) Tubo 2 Preparacin de Solucin de -Naphthyl acetato -Naphthyl acetato Etiln glicol monometil ter (Preparar en cada ocasin) 50 mg 1.25 mL 750 L 750 L 0.0300 gr 750 L a. b. c. PASO 2 7. 8. 9. Introducir los frotis ya tratados con ANAE en la solucin de incubacin 2, e incubar por 25 minutos a 37 C en la oscuridad. Enjuagar y dejar secar a temperatura ambiente. Cubrir con resina sinttica (Permount) y cubreobjetos del No. 1. Amortiguador de fosfatos 1/15M pH 7.4 Tubo 3 Mezclar y filtrar (en una caja para 5 portalaminillas) 23.5 mL 1.25 mL 1.25 mL 0.005 g 0.025 g

Colocar en un matraz Erlenmeyer en orden los siguientes reactivos a. Amortiguador de fosfatos 1/15 M, pH 7.6 22.5 mL b. Tubo 1: Solucin de pararosanilina hexazotizada 1.5 mL c. Tubo 2: Solucin de -Naphthyl acetato 1.25 mL d. Agregar 4 gotas de NaOH 1N y filtrar (en una caja para 5 portalaminillas) PASO 1 1. 2. 3. 4. 5. 6. Fijar los frotis con solucin fijadora a 4 C por 30 segundos. Lavar con agua de la llave. Secar a temperatura ambiente. Colocar los frotis en la mezcla de incubacin a 37 C por 45 minutos en la oscuridad. Lavar con agua de la llave. Secar a termperatura ambiente
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La esencia del diagnstico hematolgico se encuentra en el laboratorio

COMAC MEXICO es una empresa mexicana dedicada a la fabricacin y distribucin de reactivos y material de laboratorio clnico en todo el territorio nacional. Fundada en el ao 2009 con la finalidad de suministrar reactivos de la ms alta calidad que permitan llegar al diagnstico hematolgico correcto.

Los asistentes al curso de Tinciones Hematolgicas podrn obtener nuestros colorantes a un costo especial, les adjunto el costo que normalmente cuestan: Precios de lista Wright con Buffer 1000mL Wrjgth con Buffer 500mL Citoquimica para Mieloperoxidasa 100mL Paschif 100mL Perls 100mL Azul de cresilo brillante 100ml Esterasas (ANAE) 3 pruebas Total Precios mas el 16% de IVA $700.00 $440.00 $1,000.00 $1,000.00 $1,000.00 $500.00 $700.00 $5,340.00

KENDALL
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Sabemos que un colorante debe ser de excelente calidad en el rea de hematologa para poder observar la morfologa de serie roja y serie blanca, y poder llegar a un diagnostico preciso, recordando la infinidad de patologas que podemos encontrar y algunas no poderlas diagnosticar por una mala tincin. En el laboratorio utilizamos el colorante de Wright de la familia de Romanosky, si su elaboracin se realiza con los materiales adecuados como son el colorante de Wright en polvo, metanol y un buffer con pH especifico tendremos la coloracin correcta en cada estructura. Le ofrecemos a usted un costo especial para el laboratorio de consumos frecuentes de este colorante.

Cantidad 1 2 1 2

Descripcin Wright preparado 500mL Buffer 6.8 pH para Wright 500mL Wright preparado 500mL Buffer 6.8 pH para Wright 500mL Wright preparado 1000mL Buffer 6.8 pH para Wright 1000mL Wright preparado 1000mL Buffer 6.8 pH para Wright 1000mL

Catalogo CM500WR-C CM500WR-BF CM500WR-C CM500WR-BF CM1000WR-C CM1000WR-BF CM1000WR-C CM1000WR-BF

Costo Unitario $440,00 $200,00 $700,00 $350,00

Total $440,00 $400,00 $700,00 $700,00

Nota: Para respetar el costo especial, el consumo mnimo es de 2 L por mes.