Introduccin

El msculo liso del intestino est organizado en capas circulares y longitudinales, la contraccin alternada de dichas capas permite que el msculo tenga un movimiento denominado ondas peristlticas, encargadas de impulsar el contenido del intestino en direccin de la motilidad. A pesar de que el msculo liso no contiene sarcmeros si posee una gran cantidad de fibras de actina y algunas de miosina (en una relacin de 16 a 1, respectivamente). A diferencia del msculo estriado en el que los filamentos delgados de actina son relativamente cortos (extendindose desde el disco z al extremo del sarcmero, los filamentos de actina de msculo liso son largos debido a que estn enlazados a regiones de la membrana plasmtica de la clula muscular y a unas estructuras proteicas en su citoplasma denominadas cuerpos densos. (Fox, 2004) En el msculo liso las fibras gruesas de miosina estn dispuestas verticalmente de manera que interactan perpendicularmente con las de actina, de esta manera las cabezas de los filamentos de miosina forman puentes . Esta forma de organizacin entre las fibras musculares es necesaria para que el msculo liso cumpla adecuadamente su funcin, pues le permite contraerse incluso cuando est estirado (por ejemplo en el caso de la vejiga o el tero) a diferencia del msculo estriado, en el cual al estar estirado las fibras de actina y miosina no alcanzan a interactuar. (Fox, 2004) Existen dos tipos de msculo liso, el visceral o tambin denominado unitario, encontrado en la piel, en las paredes de arteriolas, venas y en rganos blandos como el estmago, intestinos y tero. Al igual que las fibras del corazn es autortmico, y las fibras estn conectadas unas con otras, formando una red a travs de la cual el impulso nervios puede difundirse rpidamente. Un segundo tipo de msculo liso es el multiunitario, que consiste en fibras individuales cada una de las cuales posee su propia terminal motora neuronal. A diferencia de las fibras unitarias no estn conectadas entre si, por lo que la estimulacin de una fibra multiunitaria no estimula a las que le rodean. Pueden ser encontradas en las paredes de arterias largas como la aorta y la pulmonar, en los msculos que estn unidos a folculos capilares, en el msculo el iris encargado de regular el dimetro de la pupila y en los cuerpos ciliados que enfocan las imgenes en el ojo. (Tortora y Derrickson, 2012) Una fibra de msculo liso relajada tiene alrededor de 30 a 200 micrmetros de largo, es ms gruesa en la parte media y delgada por los extremos, dentro de ella hay un solo ncleo central. El sarcoplasma de sus clulas contiene fibras delgadas y gruesas. Debido a que no presentan un patrn ordenado no hay uniones visibles entre ellas y es por ello que se denomina msculo liso. Las clulas de este tipo de tejido muscular carecen de tbulos transversos y tienen un retculo sarcoplsmico poco desarrollado, en lugar de estas estructuras estn presentes una serie de invaginaciones denominadas caveolas, encargadas de almacenar los iones de calcio extracelular usados para la contraccin muscular. (Tortora y Derrickson, 2012) Las diferencias fisiolgicas entre la interaccin de las fibras de actina en los msculos estriado y liso causan que la contraccin de ste ltimo sea ms lenta, que dure ms y que logre una

contraccin/expansin mayor que la que ocurre en el msculo estriado. La presencia prolongada de iones Ca2+ es el factor que le confiere el tono al msculo liso, un estado de contraccin parcial continuada. La mayor parte de las fibras de msculo liso se contraen o relajan en respuesta a potenciales de accin producidos por el sistema nervioso autnomo adems reaccionan tambin como respuesta a hormonas, teniendo una respuesta especfica ante cada hormona, por ejemplo la epinefrina causa la dilatacin y relajacin en las paredes de los vasos sanguneos, mientras que la serotonina genera el efecto contrario. (Tortora y Derrickson, 2012)

Procedimiento
Montar el dispositivo para registrar la actividad del msculo liso, sujetar a un soporte universal un transductor de fuerza, bajo este posicionar una cmara para aislamiento de rganos y alinearlos de manera que quede justamente abajo del migrafo, conectar el sistema de tubos de desague y sujetarlos con las pinzas proporcionadas, ajustar el dispositivo de burbujeo en la entrada correcta y conectarlo a la bomba de aire. Por ltimo conectar el cable VGA del transductor de fuerza al canal 1 de la unidad de adquisicin y ejecutar el software BSL PRO. Realizar la calibracin como est especificado en el manual de prctica. Una vez que el dispositivo est montado y funcionando administrar pentobarbital a la rata y sacrificarla por dislocacin cervical. Una vez que la rata fue sacrificada realizar un corte en la lnea media abdominal, levantar la piel, seccionar la cavidad abdominal hasta encontrar el intestino delgado y cortarlo de los extremos pldoro-duodenal e leo-cecal. Tomar un tramo de duodeno aproximadamente de 3cm y colocarlo en una solucin salina de Tyrode para mamferos a 37C. Con cuidado y empleando guantes hacer un nudo en el extremo de la seccin de intestino y pasarlo a travs del lumen hasta el otro extremo dejando suelta una cantidad de hilo, introducir el intestino sujetndolo por el hilo a la cmara de aislamiento de rganos y anudarlo al gancho que cuelga de uno de los terminales del migrafo. Verificar que las mangueras del sistema de desague estn bien sujetas y verter solucin de Tyrode a 37C, encender inmediatamente el sistema de aireacin (regulando que se libere aproximadamente una burbuja por segundo) y llenar el compartimento externo de la cmara de aislamiento con agua tambin a 37C. Comenzar el registro de la actividad del msculo liso en el programa BSL PRO dando click en Start, en el extremo inferior derecho de la ventana del software, registrar la actividad basal del intestino por aproximadamente 30 segundos, repetir este proceso cada vez que se cambie el agua o la solucin de tyrode. Aadir 5 gotas de una disolucin de citrato de Calcio y registrar el efecto producido por aproximadamente 60 segundos, proseguir de la misma manera con la adicin de 5 gotas de Acetilcolina, antes de cada medicin registrar por 30 segundos actividad basal del intestino. Efectuar este procedimiento para el registro de la actividad tras la adicin de epinefrina, tensin, aeracin y temperatura, no mover el tramo de intestino ni recargarse sobre la mesa durante el desarrollo del experimento. Una vez que las mediciones finalizaron solicitar al profesor que guarde el archivo.