ENVIRO 2 (2): 35-41, September 2002, ISSN: 1411-4402
 2002 PPLH-Lemlit UNS Surakarta.
Isolasi dan Seleksi Mikroorganisme Amilolitik serta Pemanfaatannya
dalam Pengolahan Limbah Cair Industri Tapioka
Isolation and selection of amylolitical microorganisms as well as their functions in
waste water processing of the tapioca industry
DWI PRIYANTO, WIRYANTO, RATNA SETYANINGSIH
Jurusan Biologi FMIPA Universitas Sebelas Maret Surakarta 57126.
Diterima: 13 September 2002. Disetujui: 30 September 2002.
Abstract. The aims of this research was to isolate
and to select amylum microorganisms found in the
waste water of tapioca industry as well as to find out
their ability to improve the efficiency of waste water
processing, especially in decreasing the COD and
BOD and in neutralizing the pH. Amylolitical
microorganisms were isolated and selected by
enrichment culture methods. The starch medium was
used as the selected medium to get the pure isolate
of amylolitical microorganisms. The isolates can be
tested by using them as inoculum in treatment of
wastewater processing of tapioca industry in order
to recognize their ability to improve the efficiency of
wastewater processing. The parameters measured
were COD, BOD and pH. The result of the research
shows that there are 11 amylolitical microorganism
isolates, five of which have a great amylolitical
capability. Based on the test of waste water
processing in laboratory scale, it can be concluded
that isolate 8 which used as inoculum on waste
water processing of tapioca industry in this research
has highest capability on improving the efficiency of
waste water processing, especially on the decrease
of COD and BOD. On the decrease of COD, isolate 8
has 92,4% efficiency and control has 76,6%. On the
decrease of BOD isolate 8 has 92,86% efficiency at 6
days and the efficiency of control is 78,31%. The
result of the characterization shows that amylolitical
microorganism isolate 8 is categorized into yeast, in
the form of short rod with ± 2 x 5 micron and ascus
with 4 spores in each ascus, the oval spores. The
proliferation is by fission and sporing.
Key word: amylolitical microorganisms, waste water,
tapioca industry.
PENDAHULUAN
Industri tapioka merupakan salah satu
industri pangan yang terdapat di Indonesia.
Bahan baku industri ini adalah umbi ketela
pohon (Manihot uttilissima) yang diolah
menjadi tepung tapioka. Menurut Pranoto
(2000), tepung tapioka merupakan salah satu
bahan baku maupun bahan pembantu untuk
keperluan industri makanan, industri tekstil,
industri kertas, dan lain-lain. Sedangkan
Syarifah (1996) menyatakan limbah industri
tapioka banyak mengandung amilum yang bila
terlarut dalam air akan menyebabkan turunnya
jumlah oksigen terlarut dan menimbulkan bau
busuk yang berasal dari proses degradasi
bahan organik yang kurang sempurna.
Meskipun Instalasi Pengolahan Limbah
sudah dimiliki oleh suatu industri, namun air
limbah yang dilepas ke badan air seringkali
masih kurang memenuhi persyaratan. Proses
purifikasi air limbah di dalam Instalasi Pengo-
lahan Air Limbah (IPAL) memerlukan biaya
operasional yang tinggi di samping lamanya
waktu yang dibutuhkan untuk mendegradasi
bahan organik di dalam air limbah tersebut.
Limbah cair industri tapioka banyak
mengandung pati terlarut, asam hidrosianat
yang mudah terurai menjadi sianida, nitrogen
dan fosfor, juga mengandung senyawa
organik yang cukup tinggi (Wiryanto, 1993).
Bahan-bahan organik tersebut akan
mengalami proses pembusukan oleh berbagai
mikroorganisme di dalam air, sehingga
terbentuk senyawa-senyawa lain yang lebih
sederhana. Untuk meningkatkan efisiensi dan
efektivitas pengolahan air limbah dari industri
tapioka, perlu dicari metode baru dan atau
pengembangan dari metode lama sehingga
penanganan limbah berlangsung lebih cepat
dan lebih baik. Menurut Mahida (1984), pada
prinsipnya penanganan limbah industri pangan
adalah mereduksi kandungan bahan organik
yang terlarut berdasarkan penanganan secara
biologis.
36 ENVIRO 2 (2): 35-41, September 2002
Dalam penanganan air limbah, mikro-
organisme merupakan dasar fungsional untuk
sejumlah proses pengolahan. Hal utama
dalam penanganan air limbah adalah
pengembangan dan pemeliharaan kultur yang
cocok (Irianto dan Machbub, 1995). Menurut
Mason (1991), kultur untuk mendegradasi
limbah dapat dibuat dengan cara kultur
diperkaya (enrichment culture). Inokulan
diambil dari habitat terbuka yang mengandung
bahan limbah bersangkutan, kemudian dikultur
dan dibiakkan sehingga dapat digunakan
sebagai organisme pendegradasi air limbah.
BAHAN DAN METODE
Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini
meliputi bahan untuk isolasi mikroorganisme
amilolitik yaitu medium pati cair dan medium
pati agar dan sampel air limbah industri
tapioka. Bahan untuk pengukuran nilai BOD
dan COD yaitu larutan buffer fosfat, larutan
MgSO4, larutan CaCl2, larutan ferri chlorida,
larutan K2Cr2O7, H2SO4, Ag2SO4, indikator
feroin dan larutan Fe(NH4)2(SO4)2.
Cara kerja
Pengambilan sampel air limbah
Limbah cair industri tapioka diambil dari
kolam penampungan limbah PT Cahaya Surya
Tunas Tapioka Sonoharjo, Wonogiri.
Isolasi dan purifikasi mikrobia amilolitik
Kultur diperkaya. Air limbah sampel diino-
uasikan ke dalam medium pati cair yang
mengandung amilum sebagai satu-satunya
sumber karbon dan energi. Inkubasi dilakukan
pada suhu 34 ºC selama 48 jam (Bangun,
1989).
Isolasi bakteri amilolitik dari kultur diperkaya.
Mikroorganisme diisolasi dengan metode
taburan (cawan tuang) dengan menggunakan
medium pati agar. Inkubasi dilakukan pada
suhu 34 ºC selama 48 jam. Untuk memilih
mikroorganisme yang bersifat amilolitik,
medium yang telah ditumbuhi mikroorganisme
tersebut dituangi larutan JKJ. Koloni
mikroorganisme yang di sekelilingnya nampak
terang adalah mikroorganisme amilolitik,
koloni-koloni tersebut dipindahkan ke medium
agar miring dan diinkubasi pada suhu 34ºC
selama 24 jam (Bangun, 1989).
Uji aktivitas amilolitik untuk seleksi isolat
mikroorganisme. Isolat mikroorganisme
amilolitik diambil dari koloni yang terdapat
pada medium agar miring, dipindahkan ke
medium pati cair dan ditaburkan ke medium
pati agar, kemudian diinkubasi pada suhu
kamar selama 48 jam. Uji aktivitas daya
amilolitik dilakukan dengan cara menuangkan
larutan JKJ ke masing-masing koloni
mikroorganisme yang telah diisolasi. Koloni
mikroorganisme diseleksi untuk mendapatkan
mikroorganisme yang mampu memecah
amilum paling banyak dengan cara dipilih
koloni yang di sekelilingnya nampak terang
dengan diameter yang paling besar. Koloni
mikroorganisme yang mempunyai daya
amilolitik yang tinggi dipindahkan ke medium
agar miring dan diinkubasi pada suhu 34 ºC
selama 48 jam (Sembiring, 1991).
Pengolahan limbah cair industri tapioka
dengan isolat terseleksi
Masing-masing isolat mikroorganisme
ditumbuhkan dalam kultur cair dengan
medium pati cair sebanyak 100 ml pada suhu
34 ºC selama 96 jam. Kultur mikroorganisme
sebanyak 25 ml dari masing-masing isolat
diinokulasikan ke dalam sampel air limbah
sebanyak 225 ml. Nilai COD dan BOD air
limbah sampel sebelum diinokulasi ditetapkan
terlebih dahulu. Sampel air limbah yang telah
diinokulasi isolat mikroorganisme diinkubasi
pada suhu kamar dan tiap 48 jam dihitung nilai
COD dan BOD serta nilai pH sampel air
limbah tersebut. Kontrol perlakuan dilakukan
dengan menginkubasikan air limbah sampel
pada suhu kamar tanpa diinokulasi dengan
isolat mikroorganisme. Efisiensi penurunan
COD dan BOD pada masing-masing
perlakuan dihitung dengan rumus:
a−b
× 100% = c
a
a : Nilai COD/BOD awal
b : Nilai COD/BOD akhir
c : Efisiensi pengolahan limbah
(Sembiring, 1991)
Karakterisasi isolat terseleksi. Preparat dari
isolat yang terseleksi dibuat dan diamati de-
ngan mikroskop mulai dari perbesaran lemah
sampai perbesaran sedang, pengamatan awal
difokuskan pada bentuk dan ukuran sel.
Pengukuran terhadap sel dilakukan dengan
 PRIYANTO dkk. – Mikroorganisme amilolitik limbah tapioka 37

menggunakan mikrometer (Jutono, dkk., jernih di sekitar koloni menunjukkan bahwa

1973). Karakterisasi pada tahap berikutnya medium jernih tersebut sudah tidak mengan-
disesuaikan dengan golongan mikroorganisme dung amilum. Koloni-koloni yang mampu
yang ditemukan berdasarkan bentuk dan membentuk zona jernih setelah penetesan
ukuran sel isolat terseleksi. larutan JKJ diambil dan dibiakkan sebagai
Analisis hasil. Perlakuan diberikan dengan kultur murni pada medium agar miring.
inokulan kultur murni dan dihitung perubahan Seleksi mikroorganisme amilolitik dilakukan
nilai COD dan BOD serta pH tiap selang waktu berdasarkan luas zona jernih yang terbentuk
48 jam untuk mengetahui kecepatan di sekitar koloninya setelah ditetesi dengan
perombakan dari pengolahan air limbah larutan JKJ. Pada proses seleksi ini diambil
dengan masing-masing perlakuan tersebut. lima isolat yang mempunyai daya amilolitik
Efisiensi penurunan nilai COD dan BOD antar lebih tinggi dibanding isolat lainnya yaitu isolat
perlakuan dan selang waktu dianalisis dengan 1, isolat 5, isolat 6, isolat 8 dan isolat 10.
Rancangan Acak Kelompok Lengkap dan Selanjutnya kelima isolat ini digunakan
apabila ada beda nyata maka dilanjutkan sebagai perlakuan dalam tahap pengolahan
dengan uji Duncan’s Multiple Range Test. limbah cair industri tapioka skala laboratorium.
Karakterisasi dilakukan terhadap isolat yang Perlakuan dalam tahap ini merupakan proses
mempunyai efektivitas paling tinggi dalam seleksi secara kuantitatif yang dilakukan
perbaikan kualitas limbah cair industri tapioka. berdasarkan pada pengaruh masing-masing
isolat dalam meningkatkan efisiensi
pengolahan limbah cair industri tapioka,
HASIL DAN PEMBAHASAN khususnya dalam menetralkan keasaman dan
penurunan nilai COD dan BOD-nya.
Isolasi dan seleksi mikrobia amilolitik
Menurut Mason (1991), kultur untuk Pengolahan limbah cair industri tapioka
mendegradasi limbah dapat dibuat dengan dengan perlakuan isolat terseleksi
cara kultur diperkaya (enrichment culture),
inokulan diambil dari habitat terbuka yang Nilai COD dan BOD
mengandung bahan limbah yang bersang- Pengaruh perlakuan penambahan isolat
kutan. Parameter yang digunakan pada mikroorganisme amilolitik dan waktu terhadap
proses isolasi adalah kemampuan isolat kadar COD limbah cair industri tapioka
mikroorganisme amilolitik dalam membentuk disajikan pada Tabel 1. Uji jarak berganda
zona jernih pada medium pati agar setelah Duncan taraf 5% menunjukkan bahwa
ditetesi dengan larutan JKJ. Menurut perlakuan penambahan mikroorganisme
Hadioetomo (1990), JKJ merupakan larutan amilolitik isolat 8 memberikan nilai COD rata-
yang bereaksi dengan amilum secara cepat rata yang terendah yaitu 590,31 mg/liter.
membentuk kompleks warna biru atau ungu. Sedangkan nilai COD rata-rata tertinggi
Dari proses isolasi dida-
patkan 11 koloni mikroor-
ganisme amilolitik yang Tabel 1. Nilai COD limbah cair industri tapioka dengan perlakuan
pada tahap selanjutnya penambahan isolat mikroorganisme amilolitik dan waktu.
koloni-koloni ini dianggap
Nilai COD sampel limbah cair tapioka (mg/liter)
sebagai isolat. Kandungan Jenis Isolat
Hari ke-0 Hari ke-2 Hari ke-4 Hari ke-6 Rata-rata
amilum dalam medium pati
Kontrol 1280 1122 609 299 827,48 C
agar digunakan oleh mikro-
Isolat 1 1280 1032 600 412 830,96 C
organisme amilolitik Isolat 5 1280 1062 705 297 836,11 C
sebagai sumber energi dan Isolat 6 1280 942 561 242 756,18 C
karbon, sehingga setelah Isolat 8 1280 672 312 97 590,31 A
diinkubasi selama bebe- Isolat 10 1280 982 456 185 725,63 B
rapa waktu, kandungan Rata-rata 1280 d 968.67 c 540.5 b 255,28 a
amilum di sekitar koloni
akan habis terdegradasi Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama menunjukkan tidak
oleh aktivitas mikroorganis- berbeda nyata pada uji jarak berganda Duncan taraf 5%. Huruf besar
me ini. Pembentukan zona notasi untuk faktor jenis isolat. Huruf kecil notasi untuk faktor waktu.
38 ENVIRO 2 (2): 35-41, September 2002

terdapat pada perlakuan dengan isolat 5 yaitu selama masa perlakuan. Tabel 4 menunjukkan
836,11 mg/liter. Hal ini menunjukkan bahwa bahwa mikroorganisme amilolitik isolat 8
perlakuan dengan menggunakan isolat 8 mempunyai efisiensi tertinggi dalam
memberikan hasil yang paling efektif dalam menurunkan nilai BOD limbah cair industri
menurunkan nilai COD. Hari ke 6 memberikan tapioka selama perlakuan enam hari yaitu
nilai COD rata-rata paling rendah yaitu 255,28 92,86%. Efisiensi penurunan nilai BOD limbah
mg/liter. Hal ini diduga karena mikroorganisme cair industri tapioka pada kontrol perlakuan
amilolitik telah mendegradasi kandungan hari ke 6 merupakan yang paling rendah yaitu
bahan organik terlarut dalam limbah cair 78,31%.
industri tapioka seiring dengan waktu.
Tabel 3. Nilai BOD limbah cair industri tapioka
Tabel 2. Prosentase penurunan nilai COD limbah dengan perlakuan penambahan isolat mikro-
cair industri tapioka selama perlakuan dengan organisme amilolitik dan waktu.
isolat mikroorganisme amilolitik
Nilai BOD dalam sampel limbah cair
Hari ke-2 Hari ke-4 Hari ke-6 Jenis industri tapioka (mg/liter)
Perlakuan
(%) (%) (%) Isolat Hari Hari Hari Hari
Kontrol 12,3 52,4 76,6 Rata-rata
ke-0 ke-2 ke-4 ke-6
Isolat 1 19,4 76,2 88,3 Kontrol 500,2 430,1 304,4 108,5 335,79 D
Isolat 5 17,0 44,9 76,8 Isolat 1 500,2 423,5 271,2 95,3 321 D
Isolat 6 26,4 56,2 81,1 Isolat 5 500,2 403,6 264,7 82,1 312,63 C
Isolat 8 47,5 75,6 92,4 Isolat 6 500,2 410,3 251,5 82,1 311 C
Isolat 10 23,3 64,4 85,6 Isolat 8 500,2 363,9 205,1 35,7 276,24 A
Isolat 10 500,2 390,4 231,6 55,6 294.43 B
Tabel 2 menunjukkan bahwa mikro- Rata-
organisme amilolitik isolat 8 mempunyai 500,2 d 403,6 c 254,74 b 76,56 a
rata
efisiensi paling tinggi dalam menurunkan nilai
COD pada proses pengolahan limbah cair Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama
industri tapioka yaitu 92,4% pada waktu akhir menunjukkan tidak beda nyata pada uji jarak
perlakuan. Pada kontrol perlakuan, efisiensi berganda Duncan taraf 5%. Huruf besar notasi
penurunan nilai COD limbah cair industri untuk faktor jenis isolat. Huruf kecil notasi untuk
tapioka pada hari ke 6 merupakan yang paling faktor waktu.
rendah yaitu 76,6%. Pengaruh perlakuan
Tabel 4. Prosentase penurunan nilai BOD limbah
penambahan isolat mikroorganisme amilolitik cair industri tapioka selama perlakuan dengan
dan waktu terhadap nilai BOD limbah cair isolat mikroorganisme amilolitik
industri tapioka disajikan pada Tabel 4.
Hasil uji jarak berganda Duncan taraf 5% Hari ke-2 Hari ke-4 Hari ke-6
Perlakuan
pada Tabel 4 menunjukkan bahwa perlakuan (%) (%) (%)
dengan isolat mikroorganisme amilolitik isolat Kontrol 14,01 39,14 78,31
8 memperlihatkan nilai BOD rata-rata yang Isolat 1 15,34 45,77 82,27
paling rendah yakni 276,24 mg/liter. Nilai BOD Isolat 5 19,31 47,09 83,59
rata-rata paling tinggi terdapat pada kontrol Isolat 6 17,98 49,73 83,60
perlakuan yaitu 335,79 mg/liter. Hasil ini Isolat 8 27,75 58,99 92,86
menunjukkan bahwa perlakuan dengan Isolat 10 21,96 53,70 88,89
menggunakan isolat 8 memberikan hasil
paling efektif dalam pengolahan limbah cair Mikroorganisme yang terdapat dalam
industri tapioka. Proses pengolahan limbah limbah menggunakan limbah tersebut untuk
pada hari ke 6 memberikan nilai BOD rata-rata mensintesis bahan seluler baru dan
paling rendah 76,56 mg/liter dan nilai paling menyediakan energi untuk sintesis.
tinggi pada hari ke 0 yaitu 500,2 mg/liter. Hal Mikroorganisme tersebut memetabolisme
ini menunjukkan bahwa seiring dengan waktu limbah untuk melangsungkan proses
maka kualitas limbah cair industri tapioka akan kehidupannya (Jenie dan Rahayu, 1993).
semakin membaik. Proses ini disebabkan Pada air limbah, mikroorganisme terdapat
adanya aktivitas dari mikroorganisme amilolitik sebagai campuran dari berbagai macam
yang mendegradasikan amilum terlarut
 PRIYANTO dkk. – Mikroorganisme amilolitik limbah tapioka 39

spesies yang semuanya berinteraksi secara BOD yang tinggi pula. Secara alamiah limbah
alami. Proses kompetisi membuat ini akan didegradasi dengan sendirinya oleh
mikroorganisme yang dominan akan lebih mikroorganisme yang ada dalam
mampu bertahan hidup (Mason, 1991). Pada penampungan limbah. Pada penelitian ini,
penelitian ini limbah cair industri tapioka diberi kontrol perlakuan juga memberikan hasil yang
perlakuan penambahan isolat murni signifikan pada hari yang bertambah. Ini
mikroorganisme amilolitik. Hal ini bertujuan menunjukkan meskipun tidak diberi inokulum
agar isolat murni tersebut menjadi lebih isolat murni mikroorganisme amilolitik, proses
dominan aktivitasnya sehingga mampu pendegradasian limbah tetap berlangsung.
mempercepat laju degradasi limbah. Menurut Gordon dkk (1971), proses purifikasi
Hal utama dalam penanganan air limbah alami tidak pernah berlangsung cepat. Hal ini
adalah pengembangan dan pemeliharaan juga terjadi pada penelitian ini, kontrol tanpa
kultur mikroorganisme yang cocok (Jenie dan perlakuan memberikan efisiensi perbaikan
Rahayu, 1993). Dari hasil uji jarak berganda limbah yang lebih rendah.
Duncan dapat disimpulkan bahwa perlakuan
dengan menggunakan isolat 8 menghasilkan Perubahan Nilai pH
proses pendegradasian limbah cair industri Hasil pengamatan perubahan nilai pH
tapioka yang paling cepat. Ini berarti limbah cair industri tapioka terdapat pada
pemberian isolat 8 ke dalam limbah cair Tabel 5.
industri tapioka memberikan pengaruh yang
paling besar dalam mempercepat proses Tabel 5. Nilai pH limbah cair industri tapioka
pendegradasian limbah. Kultur murni ini selama perlakuan penambahan isolat
mampu memetabolisme pati terlarut dalam mikroorganisme amilolitik dan waktu
limbah untuk digunakan sebagai sumber
energi dan karbon dalam waktu yang lebih Nilai pH sampel limbah cair
cepat dibanding jenis mikroorganisme lain Perlakuan industri tapioka
yang secara alami terdapat di dalam limbah Hari ke-0 Hari ke-2 Hari ke-4 Hari ke-6
cair industri tapioka. Dengan adanya bahan Kontrol 4,15 a 4,85 c 4,91 c 5,29 e
limbah, metabolisme mikroorganisme akan Isolat 1 4,15 a 4,77 c 5,29 e 5,33 e
menghasilkan energi dan nutrien sehingga
Isolat 5 4,25 a 4,73 b 5,28 d 5,38 e
dapat digunakan untuk memproduksi sel-sel
baru. Isolat 6 4,20 a 4,81 c 5,34 e 5,32 e
Tingginya nilai COD dan BOD Isolat 8 4,05 a 4,87 c 5,49 f 5,56 f
mengindikasikan bahwa dalam sistem Isolat 10 4,20 a 4,94 c 5,60 f 5,51 f
perairan tersebut banyak terlarut zat-zat
organik. Jadi nilai COD dan BOD berbanding Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama
lurus dengan banyaknya zat organik yang menunjukkan tidak berbeda nyata pada uji jarak
terlarut (Mahida, 1984). Mikroorganisme berganda Duncan taraf 5%.
menggunakan zat organik terlarut tersebut
sebagai sumber makanan, sehingga Hasil uji jarak berganda Duncan
aktivitasnya dalam memetabolisme makanan menunjukkan bahwa perlakuan waktu hari ke-
dapat mengurangi konsentrasi zat organik 6 pada semua perlakuan dengan isolat
terlarut. Hal ini berarti nilai COD dan BOD mikroorganisme amilolitik maupun pada
akan menurun seiring dengan kecepatan kontrol menunjukkan hasil perubahan nilai pH
mikroorganisme dalam mendegradasikan zat yang paling besar. Hal ini terjadi karena pada
organik terlarut dalam air limbah. air limbah terjadi proses purifikasi alami.
Zat organik spesifik yang terlarut dalam Sampel air limbah yang digunakan dalam
limbah cair industri tapioka adalah pati penelitian ini diambil dari kolam penampungan
(Wiryanto, 1993). Pati atau amilum ini dapat limbah yang kedua, sehingga dimungkinkan
digunakan sebagai sumber karbon dan energi terdapat mikroorganisme yang mampu hidup
oleh jenis mikroorganisme tertentu yang dan menggunakan bahan organik terlarut di
disebut mikroorganisme amilolitik. Tingginya dalamnya sebagai sumber karbon dan
konsentrasi pati terlarut dalam limbah cair energinya. Aktivitas mikroorganisme yang
industri tapioka menyebabkan nilai COD dan secara alami terdapat di dalam air limbah
40 ENVIRO 2 (2): 35-41, September 2002
menyebabkan proses perbaikan kualitas air
limbah. Mikroorganisme dalam air limbah
mempunyai keterbatasan dalam hal
menguraikan bahan-bahan organik terlarut
sehingga proses alami tidak berlangsung
secara cepat. Seiring dengan waktu,
kandungan bahan organik terlarut dalam air
limbah semakin berkurang sehingga kualitas
air limbah semakin meningkat.
Limbah cair industri tapioka mempunyai
nilai pH yang rendah karena di dalamnya
terlarut senyawa-senyawa organik yang
bersifat asam. Asam hidrosianat (HCN) yang
terkandung dalam umbi ketela pohon
merupakan senyawa utama dan paling
dominan yang berpotensi menyebabkan
rendahnya nilai pH limbah cair industri tapioka.
Menurut Pranoto (2000), terdapat beberapa
mikroorganisme yang secara alami ada di
dalam limbah cair industri tapioka yang
mampu menguraikan sianida dalam arti
menggunakan senyawa ini sebagai sumber
karbon dan energinya. Mikroorganisme terse-
but antara lain Escherichia coli, Pseudomonas
maltophila dan Enterobacter aerogenes.
Berkurangnya konsentrasi senyawa asam
dalam limbah cair industri tapioka karena
didegradasi oleh mikroorganisme inilah yang
menyebabkan nilai pHnya berangsur-angsur
naik mendekati nilai pH netral.
Karakterisasi isolat terseleksi
Isolat 8 dalam media pati agar miring dibuat
preparat dan difiksasi di atas nyala api bunsen
kemudian diamati di bawah mikroskop.
Tampak sel-sel dari isolat tersebut berbentuk
batang pendek. Dari morfologi dan ukuran
selnya ( ± 2 x 5 mikron), diketahui bahwa
mikroorganisme amilolitik isolat 8 tersebut
adalah khamir. Karakter dari isolat 8 tersebut
tercantum dalam Tabel 8.
Tabel 7. Karakterisasi sifat mikroorganisme
amilolitik isolat 8.
Karakter Isolat Keterangan
Bentuk sel Batang Pendek
Ukuran sel ± 2 x 5 mikron
Bentuk spora Bulat
Jumlah spora dalam askus 4
Cara perkembangbiakan - Spora
- Membelah diri
Pati adalah poliglukosida berbobot molekul
tinggi. Pati dapat dihidrolisis oleh enzim
amilase menghasilkan campuran maltosa dan
glukosa (Stanley dkk., 1988). Menurut
Schleigel dan Schmidt (1985), fungi dan
bakteri mampu memproduksi α-amilase
sehingga mampu menghidrolisis pati menjadi
bentuk yang lebih sederhana.
Enzim α-amilase merupakan enzim
hidrolitik yang bekerja di luar sel, bekerja pada
banyak ikatan α-1,4 serta yang berada di
bagian dalam makromolekul. Reaksi hidrolisis
amilum menghasilkan maltosa dan oligomer-
oligomer yang terdiri dari 3-7 buah sisa
glukosa (Schleigel dan Schmidt, 1985).
Khamir merupakan fungi uniseluler yang
mikroskopik dan tidak membentuk percabang-
an permanen. Ukuran khamir 4-20 kali lebih
besar daripada ukuran bakteri yaitu berkisar
antara 1-9 mikron x 2-20 mikron tergantung
pada spesiesnya (Jenie dan Rahayu, 1993).
Menurut Jutono dkk. (1971), beberapa khamir
tertentu dapat mengalami dimorfisme yaitu
mengalami fase Y (yeast, khamir, bentuk sel
tunggal) dan fase F (filamen, bentuk benang).
Khamir tidak mempunyai flagella sehingga
tidak mampu bergerak aktif.
Menurut Jenie dan Rahayu (1993), bakteri
dan khamir dapat memetabolisme bahan
organik dari jenis yang sama. Kondisi
lingkungan akan menentukan kelompok
organisme yang akan dominan di suatu
habitat. Khamir banyak terdapat pada limbah
yang mempunyai nilai pH rendah, kadar
nitrogen rendah dan bila nutrien tertentu tidak
ada. Sebagian besar khamir tumbuh pada pH
4-5, dalam kondisi ini bakteri sulit untuk
berkompetisi.
Limbah tapioka bersifat asam sehingga
memungkinkan khamir terdapat lebih dominan
daripada bakteri. Proses isolasi menghasilkan
isolat khamir sebagai mikroorganisme pende-
gradasi amilum dalam limbah cair industri
tapioka. Pada penelitian ini khamir isolat 8
mempunyai aktivitas amilolitik paling besar
dalam pengolahan limbah cair industri tapioka.
KESIMPULAN
Terdapat 11 isolat mikroorganisme yang
mampu mendegradasi amilum dalam limbah
cair industri tapioka. Isolat 8 yang digunakan
sebagai inokulum dalam pengolahan limbah
 PRIYANTO dkk. – Mikroorganisme amilolitik limbah tapioka
cair industri tapioka dalam penelitian ini
memiliki kemampuan paling tinggi dalam
meningkatkan efisiensi penurunan COD dan
BOD. Pada penurunan nilai COD, perlakuan
dengan isolat 8 pada hari ke 6 mempunyai
efisiensi 92,4% sedangkan pada kontrol
perlakuan efisiensinya adalah 76,6%. Pada
penurunan nilai BOD, perlakuan dengan isolat
8 pada hari ke 6 mempunyai efisiensi 92,86%
sedangkan efisiensi pada kontrol perlakuan
adalah 78,31%. Mikroorganisme amilolitik
isolat 8 tergolong sebagai khamir berbentuk
batang pendek, ukuran selnya ± 2x5
mikronmeter, menghasilkan askus dengan 4
spora tiap askus, spora berbentuk bulat. Cara
perkembangbiakan sel adalah dengan spora
dan membelah diri.
DAFTAR PUSTAKA
Alaerts, G. dan S.S. Santika. 1984. Metode Penelitian
Air. Surabaya: Penerbit Usaha Nasional.
Bangun, A. 1989. Isolasi dan Identifikasi. Yogyakarta:
PAU-Bioteknologi Universitas Gadjah Mada.
Carlile, M.J. and S.C. Watkinson. 1995. The Fungi.
London: Academic Press Inc, Hartcourt Brace and
Company, Publishers.
Gordon, M.K., J.K. Geyer and D.A. Okun. 1971.
Elements of Water Supply and Waste Water
Disposal. New York: John Wiley and Sons, Inc.
Hadioetomo, R.S. 1990. Mikrobiologi Dasar Dalam
Praktek. Jakarta: Penerbit PT Gramedia.
Irianto, E.W. dan B. Machbub. 1995. “Pengolahan Air
Limbah Industri Secara Gabungan Pada Daerah
Industri Cimahi Selatan”. Jurnal Penelitian dan
Pengembangan Pengairan No.34 Th. 10- Kw. I.
Jenie, B.S.R. dan Rahayu, W.P. 1993. Penanganan
Limbah Industri Pangan. Yogyakarta: Penerbit
Kanisius.
41
Jutono, Joedoro, S., Sri Hartadi, Siti Kabirun, S., Suhadi,
D. dan Soesanto. 1973. Pedoman Praktikum
Mikrobiologi Umum. Yogyakarta: Departemen
Mikrobiologi Fakultas Pertanian Universitas Gadjah
Mada.
Mahida, U.N. 1984. Pencemaran Air dan Pemanfaatan
Limbah Industri. Jakarta: Penerbit CV. Rajawali.
Mason, C.F. 1991. Biology of Freshwater Pollution.
Second Edition. Singapore: Longman Scientific of
Technical.
Odum, E.P. 1993. Dasar-dasar Ekologi (diterjemahkan
oleh Tjahyono Samingan dan Srigandono).
Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Pelczar, M.J. and E.C.S. Chan. 1988. Dasar-dasar
Mikrobiologi (diterjemahkan oleh R.S. Hadioetomo,
Teja Imas, S.S. Tjitrosomo dan Sri Lestari Angka).
Jakarta: Penerbit UI-Press.
Pranoto. 2000. Metode Alternatif Meminimalisasi Limbah
−
Sianida (CN ) Pada Pabrik Tapioka. Surakarta:
Jurusan Kimia Fakultas MIPA Universitas Sebelas
Maret.
Schleigel, H.G. and K. Schmidt. 1985. Mikrobiologi
Umum (diterjemahkan oleh R.M. Tedjo Baskoro)
Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Sembiring, L. 1991. Pemanfaatan Isolat Bakteri Amilolitik
Dalam Pengolahan Air Limbah Industri Tekstil.
Yogyakarta: Fakultas Biologi Universitas Gadjah
Mada.
Stanley, H.P., J.B. Hendrickson, D.J. Cram and G.S.
Hammond. 1988. Kimia Organik 2 (diterjemahkan
oleh Roehyati, J. dan Susanti, W.P.H.). Bandung:
Penerbit ITB Bandung.
Syarifah, I. 1996. Uji Hayati Limbah Cair Industri Tapioka
terhadap Ikan Nila. Surakarta: Universitas Sebelas
Maret.
Wainwright, M. 1992. An Introduction to Fungal
Biotechnology. Chicester, England: John Wiley and
Sons, Ltd.
Wardhana, W.A. 1995. Dampak Pencemaran
Lingkungan. Yogyakarta: Penerbit Andi Offset.
Wiryanto. 1993. Industri Tepung Tapioka dan Upaya
Pencegahan Pencemaran Lingkungan Oleh Limbah
Industri Tapioka. Surakarta: Universitas Sebelas
Maret.