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6- MONOGRAFÍAS - ANALITOS Y TECNICAS TOXICOLOGICAS

Estas monografías dan la información práctica sobre la detección e


identificación de algunos venenos comunes o grupos de venenos.

ACIDO SALICÍLICO Y DERIVADOS

• Acido salicílico

Acido 2-hidroxibenzoico; C7H6O3; la masa molecular relativa, 138,

Figura 1 : ESTRUCTURA QUÍMICA

El ácido Salicilico se usa para tratar en forma de tópicos varias alteraciones


dermatológicas. Aparece en el plasma como el metabolito principal del ácido
acetilsalicílico y puede también provenir del salicilato de metilo y salicilamida. El
ácido salicílico es excretado en la orina, como un conjugado con glicina (ácido
salicilúrico).
Los derivados del ácido salicílico descriptos debajo son los que normalmente
se encuentran.-

• Acido Acetilsalicilico

Aspirina; C9H8O4; masa molecular relativa, 180,

Figura 2 : ESTRUCTURA QUÍMICA


El ácido acetilsalicílico es el más frecuentemente usado como derivado
de ácido salicílico. Se usa como un analgésico y también es el metabolito de
aloxiprina y benorilato. La dosis letal mínima estimada en un adulto es 15 g.

El ácido acetilsalicílico se metaboliza rápidamente por esterasas del


plasma in vivo a ácido salicílico quien a su vez se excreta principalmente por
la orina como un conjugado con glicina (el ácido salicilúrico).

Acido 4-Aminosalicilico

Acido p-Aminosalicilico PAS; ácido 4-amino-2-hidroxibenzoico:


C7H7NO3; masa molecular relativa, 151,

Figura 3: ESTRUCTURA QUÍMICA

El Acido 4-aminosalicilico se usa en el tratamiento de tuberculosis.

Metil salicilato

Metilo 2-hidroxibenzoato; ácido salicílico metil éster; C8H8O3;


masa molecular relativa, 152,

Figura 4: ESTRUCTURA QUÍMICA

El salicilato de metilo (aceite de wintergreen) es un líquido fuerte a


temperatura ambiente y es ampliamente usado en productos tópicos
medicinales. Cuando se ingiere es más tóxico que el ácido del acetilsalicílico
porque se absorbe más rápidamente. Las muertes han ocurrido en los niños
después de la ingestión de una dosis tan pequeña como 4 ml; en adultos la
dosis fatal es de 30 ml.
El salicilato de metilo se metaboliza parcialmente a ácido salicílico in vivo.-

• Salicilamida

2-Hidroxibenzamida; C7H7NO2; masa molecular relativa, 137,

Figura 5: ESTRUCTURA QUÍMICA

La salicilamida se usa como un analgésico. Con hidrólisis, forma el ácido


salicílico.
Los salicilatos dan un color púrpura con iones férricos y esta reacción es la
base de la prueba descripta.. Una simple prueba es colocar una tira que tiene
impregnado el ion férrico en la orina y da la reacción.-
En cambio el ácido Acetilsalicilico y salicilatos de metilo no se hacen
reaccionar con los iones férricos, ya que el contenido estomacal y residuos de
la escena deben ser hidrolizados antes que el análisis sea desarrollado. La
salicilamida es sólo detectable después de la hidrólisis incluso en muestras de
orina.-

Test cualitativo

Aplicable a orina, contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

Reactivo de Trinder. Mezcle 40 g de cloruro mercúrico disuelto en 850 ml de


agua destilada con 120 ml de solución acuosa de ácido clorhídrico (1 mol/l) y
40 g de nitrato férrico hidratado, y diluir a 1 litro con agua destilada.-

Método

Agregue 0.1 ml del reactivo de Trinder a 2 ml de muestra y mezcle para 5


segundos.
Para probar para ácido acetilsalicilico o salicilato de metilo en contenido
estomacal y residuos de la escena, y para salicilamida en orina, contenido
estomacal y residuos de la escena, primero hervir 1 ml de muestra con 1 ml de
solución acuosa de ácido clorhídrico (0.1 mol/l) durante 10 minutos, enfriar,
filtrar si fuera necesario, y entonces neutraliza con 1 ml de solución acuosa de
hidróxido de sodio (0.1 mol/l).

Resultados

Un color violeta fuerte indica la presencia de salicilatos.


Los preservantes azidas reaccionan fuertemente con este test y pueden dar
reacciones falsas positivas en orina conteniendo altas concentraciones de
cetonas (cuerpos cetónicos)
Esta prueba es sensible y detectará dosis terapéutica con ácido salicilico, el
ácido acetilsalicílico, 4-amonosalicílico, metilsalicilato y salcilamida.-

Sensibilidad

Salicilato, 10 mg/l.

Ensayo cuantitativo

Aplicable a plasma o suero (1 ml).

Reactivo

Reactivo de Trinder (vea anteriormente).

Estándares

Soluciones acuosas que contienen ácido salicilico en las siguientes


concentraciones de 0, 200, 400 y 800 mg/l. Mantener a 4°C cuando no se
use.-

Método

1. Agregue 5 ml del reactivo de Trinder a 1 ml de muestra o estándar.-

2. Mezclar en vortex por 30 segundos y centrifugar durante 5 minutos.

3. Medir la absorbancia del sobrenadante a 540 nm contra blanco del


plasma .

Resultados

Luego de graficar la curva con las concentraciones de los estándares, calcular


la concentración de salicilatos del plasma extrapolando en el gráfico. Algunos
metabolitos interfieren, pero las concentraciones en plasma de estos
compuestos son usualmente bajos. Por ejemplo, los oxalatos y los fluoruros en
la sangre cuando se agregan como anticoagulantes interfieren en esta prueba.-

Sensibilidad
Salicilatos, 50 mg/l.

Interpretación clínica

El uso tópico del ácido salicílico y salicilato de metilo y la ingestión de


salicilatos puede dar lugar a síntomas de salicilismo. La alcalosis respiratoria
seguida de acidosis metabólica es característica, aunque en la práctica es
frecuente un disturbio ácido base. Los resultados de gases en sangre son una
guía importante para intoxicaciones severas . Si se sospecha envenenamiento
agudo, la concentración de salicilatos en el plasma debe medirse usando el
método descrito anteriormente.

Dentro de las medidas para corregir el estado ácido-base se puede considerar


la alcalinización urinaria para reforzar la eliminación del venenoque va a
depender de la condición del paciente y la concentración de salicilato que haya
en el plasma. Se puede emplear dosis seriadas de carbón activado .
Las medidas seriadas de pH en orina y sangre es un buen monitoreo. Una guía
para la interpretación de los resultados de salicilatos en el plasma se da en la
Fig. 13. Concentraciones más altas que 300 mg/l durante la terapia en los
adultos.
ACIDO FÓRMICO Y FORMIATOS

El ácido fórmico (HCOOH; masa molecular relativa, 46), solución incolora muy
corrosiva.
Los formiatos como el formiato de sodio (HCOONa) se usan como sustancias
sintéticas intermedias en el tiñendo, imprimiendo en las industrias de
curtiembre

El ácido fórmico es un metabolito del metanol y formaldehído. La dosis letal


mínima de ácido fórmico en un adulto es aproximadamente 30 ml

La prueba inicial dada debajo debe usarse si se sospecha de ácido fórmico. En


la prueba de confirmación del ácido fórmico y formiatos están reducido a
formaldehído con que puede descubrirse entonces por la reacción del ácido
cromotrópico.

Prueba cualitativa

Muestra : contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

1. Reactivo ácido cítrico /acetamida. Ácido cítrico (5 g/l) y acetamida (100 g/l)
en propan-2-ol.

2. Solución de acetato de sodio (300 g/l).

3.Anhídrido acético.

Método

1.Agregar 0.5 ml de la solución de la muestra a 1 ml de reactivo ácido


cítrico/acetamida, luego agregar 0.1 ml de solución del acetato de sodio y 3.5
ml de anhídrido acético.

2.Mezclar durante 5 segundos y calentar en un baño de agua hirviente


durante10 minutos.

Resultados

Una coloración roja indica la presencia de ácido fórmico.


El formaldehído y las sales del formiato no reaccionan en esta prueba.

Sensibilidad

Ácido fórmico, 50 mg/l.

Prueba confirmatoria

Muestra : contenido estomacal y residuos de la escena.


Reactivos

1.Solución de ácido clorhídrico (2 mol/l).

2.Magnesio en polvo

3.Ácido cromotrópico (sólido).

4.Ácido sulfúrico concentrado(1.83).

Método

1. Agregar 0.1 ml de solución diluida de ácido clorhídrico a 0.1 ml de solución


de la muestra y mezclar durante 5 segundos.

2. Suavemente agregar aproximadamente 100 mg de polvo de magnesio hasta


que cese la emanación de gas.

3.Agregar aproximadamente 100 mg de ácido del cromotrópico y mezclar por 5


segundos

4. Cuidadosamente agregue 15 ml de ácido sulfúrico concentrado y caliente en


un baño de agua a 60°C durante 10 minutos.

Resultados

Un color púrpura-violeta indica la presencia de formiatos o ácido fórmico. El


formaldehído reacciona sin la reducción anterior.

Sensibilidad

Formiato, 50 mg/l.

Interpretación clínica

El ácido fórmico es muy corrosivo para los tejidos, y la ingestión puede causar
quemaduras y ulceración de boca y garganta, corrosión de glotis, esófago y
estómago, acidosis metabólica, hemólisis intravascular, hemolisis, coagulación
intravascular diseminada, fallo circulatorio, renal y respiratorio. El tratamiento
es sintomático y de sostén.
Alcanfor

Bornan-2-uno; C10H16O; masa molecular relativa, 152

Figura 6 : ESTRUCTURA QUIMICA

El alcanfor es un rubefaciente que es usado en bolitas para polillas. Este es


obtenido por destilación de la madera de campora cinnamomun o
sintéticamente y es metabolizado por hidroxilación y excretado como
glucurónidos por orina.- El envenenamiento por alcanfor es usualmente por
ingestión de combustibles. La dosis fatal en un adulto puede ser tanto como 4
g.

No hay un estudio simple cualitativo para este compuesto. Aunque el alcamfor


tiene un olor muy fuerte y la detección por el aliento o en orina puede ayudar al
diagnóstico.-

Interpretación clínica

La ingestión de alcanfor causa náusea, vómitos, dolor de cabeza, vértigo,


confusión, excitación, alucinaciones, pupilas dilatadas, en casos severos coma,
convulsiones y fallo hepatorrenal. El tratamiento es sintomático y de sostén.
AMINOFENAZONAS

Amidopirina, aminopirina, 4-dimetilamino -1,5-dimetil -2-fenil - 4-pirazolin-3-uno;


C13H17N3 O; masa molecular relativa: 231.

Figura 7 : ESTRUCTURA QUÍMICA

La Aminofenazona es un analgésico y antipirético poco utilizado en la


actualidad desde que se conoció su toxicidad potencial sobre la médula ósea
que provoca agranulocitosis y necrosis tubular renal pueden después de la
dosificación terapéutica. La ingestión de aproximadamente 10 g puede causar
severo envenenamiento agudo en un adulto.

Prueba cualitativa

Muestra: orina, contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

1. Solución de Hidróxido de sodio (1 mol/l).

2. Solución de nitrato de plata (100 g/l).

3. Solución de ácido clorhídrico (5 mol/l).

4. Nitrito de potasio (sólido).

Método

1. Agregar 1 ml de solución del hidróxido de sodio a 5 ml de muestra y


agregar 10 ml de cloroformo.

2. Mezclar durante 5 minutos, centrifugar y desechar la fase acuosa


superior.
3. Filtrar el extracto de cloroformo a través de papel de filtro a un tubo limpio,
evaporar a la sequedad bajo aire comprimido o nitrógeno, y reconstituir el
residuo con 1 ml de agua purificada.

4. Agregar 0.5 ml de solución del nitrato de plata a 0.5 ml del extracto


reconstituido.

5. Agregar 1 ml de ácido clorhídrico y aproximadamente 1 mg de nitrito de


potasio sólido a la porción restante del extracto.

Resultados

Con el agregado de nitrato de plata (paso 4), una solución azul que se torna
negra indica presencia de aminofenazona. En el paso 5, el nitrito de potasio
imparte una coloración azul-violeta que rápidamente desaparece.

La aminofenazona también puede detectarse por cromatografía capa delgada a


partir de un extracto básico de orina, contenido estomacal o residuos de la
escena, y esto siempre debe realizarse además de la prueba colorimétrica.

Sensibilidad

Aminofenazona, 50 mg/l.

Interpretación clínica

La sobredosis de aminofenazona puede causar hipotensión, convulsiones, y


delirio. El tratamiento es sintomático y de sostén. Determinaciones cuantitativas
no se requieren para el tratamiento.
AMITRIPTILINA

3-(10,11-dihidro-5H-dibenzo[a,d]cicloheptan-5-ylidene);C20H23N
masa molecular relativa: 277.

Figura 8 : ESTRUCTURA QUÍMICA

La amitriptilina es un antidepresivo triciclico ampliamente usado. Es


metabolizado por N-demetilación a nortriptilina que es un antidepresivo
propiamente dicho. La protriptolina es un análogo de amitriptilina.

No hay ninguna prueba cualitativa simple para la amitriptilina, pero este


compuesto y otros antidepresivos triciclicos pueden detectarse e identificarse
fácilmente por cromatografía en capa delgada a partir de un extracto de
solvente básico de orina, contenido estomacal o residuos de la escena

Interpretación clínica

El envenenamiento agudo con amitriptilina y otro antidepresivos triciclicos


pueden causar midriasis, hipotensión, hipotermia, arritmias cardíacas,
respiración deprimida, coma, convulsiones y fallo cardiorespiratorio. La
retención urinaria también es un rasgo de envenenamiento con estos
compuestos, y esto puede demorar la obtención de la muestra para el análisis
apropiado.

El tratamiento es generalmente sintomático y de sostén. El uso generalmente


de agentes antiarrítmicos deben evitarse, pero puede emplearse alcalinización
usando bicarbonato de sodio. La cuantificación en sangre normalmente no se
requiere para el manejo de esta intoxicación.
ANFETAMINAS

Alfa-Metilfenetilamina; C9H13N; Masa molecular relativa:135,

Figura 9: ESTRUCTURA QUÍMICA

La anfetamina y los análogos del N-metilo, la metanfetamina, son


estimulantes del sistema nerviosos central y se abusa ampliamente.
No hay ninguna prueba cualitativa simple para las anfetaminas, pero este y
otros compuestos similares pueden detectarse e identificarse por cromatografía
en capa delgada a partir de un extracto de solvente básico de orina, contenido
estomacal o residuos de la escena. Sin embargo, el extracto debe acidificarse
con el agregado de 0.5 ml de solución metanólica de ácido clorhídrico (2 ml/l)
para prevenir la pérdida de bases volátiles a la evaporación.-

Prueba cualitativa

Muestra: orina, contenido estomacal y residuos de la escena, polvos

A) Reactivo de Marquís

1. Solución de formaldehído al 40%


2. Ácido sulfúrico concentrado

Método

1. Colocar una pequeña cantidad de la muestra (1 a 2 mg de polvo o una o


dos gotas si se trata de un líquido) en una placa y agregar el reactivo de
Marquís gota a gota no más de tres gotas.-

Resultados

La aparición de un color anaranjado que cambia al pardo indica la presencia


de anfetamina como metanfetamina. -

Sensibilidad

Anfetaminas , 1 ug.

B) Reactivo de ninhidrina
1.- Solución acetónica de ninhidrina (0,5 grs. de ninhidrina en 40 ml de
acetona)

Método

1. Colocar una pequeña cantidad de la muestra (1 a 2 mg de polvo o una o


dos gotas si se trata de un líquido) en un papel de filtro y agregar una gota
de reactivo. Calentar a 110°C sobre una plancha calefactora, con el calor el
color cambia a rosado-naranja. No es un ensayo muy sensible.-

Resultados

La aparición de un color rosado-anaranjado luego de calentar indica la


presencia de anfetaminas.-

C) Reactivo de Simon

1.- Solución acuosa de carbonato sódico al 20%.-

2.- Solución etanólica de acetaldehído al 50%.-

3.- Solución acuosa de nitroprusiato de sodio al 1%.-

Método

Colocar una pequeña cantidad de la muestra (1 a 2 mg de polvo o una o dos


gotas si se trata de un líquido) sobre una placa de ensayo y agregar una gota
de la solución 1, Agregar a continuación una gota de la solución 2 y unas
cuantas gotas de la solución 3 .

Resultados

Produce un color azul para la metanfetamina y otras aminas secundarias. La


anfetamina y otras aminas primarias producen un color rosado que cambia
lentamente a rojo cereza. Este ensayo puede utilizarse para diferenciar la
metanfetamina de la anfetamina. Algunos agentes reductores pueden dar
falsos negativos.- -

D) Cromatografía de capa delgada (CCD)

Disolventes de desarrollo
1.-Sistema A (metanol:amoníaco concentrado) (100:1,5)
2.-Sistema B (ciclohexano:tolueno:dietilamina) (75:15:10)
SOLUCIONES ACUOSAS DE LAS MUESTRAS

Aplicar las muestras y testigos sobre las placas de TLC. Colocar en las cubas
de cromatografía en los dos solventes utilizados.

Soluciones patrones

Anfetaminas 5mg /ml en metanol

VISUALIZACION

Las placas deben secarse antes del examen visual a temperatura ambiente o
utilizado corriente de aire se debe eliminar todo vestigio de amoníaco en la
placa.-

Metodos de visualización

1.- Luz ultravioleta a 254 nm


2.- Reactivo de ninhidrina.( 0.1% en alcohol isopropílico)
3,.-Reactivo de yodoplatínato potásico acidificado. (0.25 grs de cloruro platínico
más 5 grs de yoduro potásico llevar a 100 ml con agua destilada y agregar 2 ml
de ácido clorhídrico concentrado)

Primero se observa la placa al UV. Pulverizar con ninhidrina y calentar en un


horno a 110°C durante 5 minutos. Las aminas primarias como las anfetaminas
producen manchas violetas o rosadas, mientras que las aminas secundarias
como la metanfetamina, produce manchas de color más claro. A continuación
se pulveriza con solución de iodoplatínato acidificado. Las anfetaminas y
metanfetaminas dan un color gris-violeta –pardo sobre un fondo rosado.-

Advertencia: Tener mucho cuidado porque la volatilidad de las bases libres de


anfetaminas, a la temperatura empleada en los disolventes de evaporación de
la placa se puede perder la muestra.-

Interpretación clínica

La sobredosis de anfetaminas oral o intravenosos pueden causar hipertermia,


convulsiones, coma, falla respiratoria y/o cardíaca, pero muerte por intoxicación
aguda por anfetaminas es raro. El tratamiento es generalmente sintomático y
de sostén. La cuantificación en sangre normalmente no se requiere para el
manejo de esta intoxicación.
ANILINA

Fenilamina; C6H5NH2; masa molecular relativa: 93.

La anilina se usa principalmente como un intermediario en la fabricación de las


tinturas y otros químicos. Se metaboliza a p-aminofenol y p-acetamidofenol que
se excreta en orina como sulfato y glucurónidos conjugados. Por la hidrólisis
de la orina, el p-aminofenol es reformado, y puede detectarse usando la prueba
del o-cresol/amoniaco. La anilina y otras aminas aromáticos primarias forman
diazo compuestos con el ácido nitroso los cuales se unen con
1-naftiletilendiamina para formar derivados muy coloreados. Esta reacción es la
base de la prueba confirmatoria descripta a continuación.

Prueba cualitativa

Muestra: orina.

Prueba: o-cresol/amoniaco.

Reactivos

1. Acido clorhídrico concentrado (densidad relativa 1.18).

2. Solución de o-cresol (10 g/l).

3. Solución de hidróxido del amonio (4 mol/l).

Método

1. Agregar 0.5 ml de ácido clorhídrico a 0.5 ml de muestra, hervir por 10


minutos y enfriar.

2. Agregar 1 ml de solución del o-cresol a 0.2 ml del hidrolizado.

3. Agregar 2 ml de solución de hidróxido de amonio y mezclar durante 5


segundos.

Resultados

Una coloración azul fuerte, desarrollada rápidamente indica la presencia de


p-aminofenol. Metabolitos del paracetamol (y fenacetina) y los nitrobencenos
también dan p-aminofenol en la hidrólisis y pueden interferir. El etilenediamino
(por ejemplo de la aminofilina da un color verde con esta prueba.

Sensibilidad

p-Aminofenol, 10 mg/l.
Prueba confirmatoria

Muestra: Contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

1. Solución de nitrito de sodio (2 g/l, preparar en el momento).

2. Solución de ácido clorhídrico (2 mol/l).

3. Solución acuosa de sulfato de amonio (10 g/l).

4. Solución dihidroclorhídrica de N-(1-naftil)etilendiamina (2 g/l, preparar en


el momento).

Método

1. Mezclar 0.1 ml de solución del nitrito de sodio y 0.2 ml de ácido clorhídrico


diluido en un tubo de prueba de 5 ml.

2. Agregar 0.1 ml de muestra, mezclar y dejar descansar 2 minutos.

3. Agregar 0.2 ml de solución de sulfato de amonio seguidos por 0.1 ml de


solución N-(1-naftil)etilendiamina dihidroclorhídrica.

Resultados

Una coloración purpúrea después de 1 minuto indica la presencia de anilina.

Sensibilidad

Anilina, 10 mg/l.

Interpretación clínica

Normalmente el envenenamiento con anilina es el resultado de la inhalación o


la absorción dérmica. Los síntomas ocurren dentro de 1-3 horas de exposición
e incluyen confusión, náuseas, vómitos y diarrea, convulsiones, coma y daño
hepático y renal en los casos severos. Hemólisis, metahemoglobinemia (sangre
color chocolate) puede observarse .
Las pruebas de la función hepáticas y renales son esenciales, sin embargo el
tratamiento puede incluir azul de metileno intravenoso, pero esto está
contraindica en pacientes con deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa,
por el alto riesgo de inducir hemólisis.
ANTIMONIO

Las sales de antimonio (Sb) trivalente y el pentavalente se usan


parenteralmente en el tratamiento de esquistosomiasis y leishmaniasis.
También se usan las sales del antimonio en los pigmentos y abrasivos. El
antimonio como el bismuto, mercurio y el arsénico pueden investigarse en la
prueba de Reinsch.

Prueba cualitativa

Muestra: Orina, contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

1. Ácido clorhídrico concentrado (densidad relativa 1.18).

2. Solución de ácido clorhídrico (2 mol/l).

3. Lamina o malla de cobre (5 Î 10 mm) o alambre (2-3 centímetro).

4. Solución del ácido nítrico (500 ml/l).

Método

1. Inmediatamente antes de usar, limpie la lamina, malla o alambre con ácido


nítrico hasta que el cobre adquiere una superficie luminosa.

2. Enjuague el cobre con el agua destilada y agregue 10 ml de ácido


clorhídrico concentrado y 20 ml de solución de la prueba en un frasco cónico de
100 ml.

3. Calentar en un baño de agua hirviente durante 1 hora. Mantenga el


volumen de la solución agregando ácido clorhídrico diluido cuando sea
necesario.

4. Enfriar y suavemente lavar la laminilla de cobre con el agua destilada.

Resultados

Las manchas en el cobre pueden interpretarse como sigue:

Negro purpúreo - Antimonio

Negro embotado - Arsénico

Negro brillante - Bismuto


Plateado - Mercurio

El selenio y el telurio también pueden dar depósitos oscuros, mientras que


concentraciones elevadas de azufre pueden dar una apariencia manchada a la
lamina de cobre.

Una estimación de la concentración de antimonio en la muestra puede


realizarse por la comparación del depósito en la lámina de cobre con el
obtenido con una solución que contiene una concentración conocida del
elemento.

Sensibilidad

Antimonio, aproximadamente 2 mg/l.

Prueba confirmatoria

Aplicable a la laminilla de cobre (negro purpúreo) de la prueba anterior.

Reactivos

1. Solución de cianuro de potasio (100 g/l)..

2. Solución del sulfito de sodio (50 g/l, recientemente preparada).

3. Solución de ácido nítrico (3 mol/l).

4. Reactivo de Quinina/ yoduro de potasio. Disuelva 1 g de sulfato de quinina


en 100 ml de agua destilada que contiene 0.5 ml de ácido nítrico concentrado
(densidad 1.42 relativa). Cuando la quinina este completamente disuelto,
agregue 2 g de yoduro de potasio.

Método

1.Colocar la laminilla de cobre en la solución de cianuro de potasio y dejar


10 minutos.

2. Lavar cualquier mancha no disuelta con agua destilada y agregar 1 ml de


la solución del sulfito de sodio y 1 ml de solución de ácido nítrico.

3. Agitar frecuentemente durante 5 minutos y agregar 1 ml de agua destilada


y 1 ml de reactivo de Quinina/ yoduro de potasio.
Resultados

Las manchas debido al arsénico se disuelven en la solución de cianuro de


potasio, mientras que las manchas de bismuto y antimonio no lo hacen. El
bismuto en forma lenta forma una suspensión anaranjada – marrón con el
reactivo de Quinina/ yoduro de potasio.

Sensibilidad

Antimonio, aproximadamente 2 mg/l.

Otra prueba

La lámina de cobre se introduce en un tubo de ensayo, cuyo fondo se calienta


vigorosamente; se extrae la laminilla y se deja enfriar bien. Luego se agrega al
tubo una gota de ácido clorhídrico concentrado, una gota de nitrito de sodio al
30%. Agitar y dejar dos minutos. Luego tres gotas de rodamina B. Si hay
Antimonio se observa coloración violeta. Compare con el color del reactivo.
Esta reacción se puede sensibilizar agregando benceno o tolueno y 1ml de
agua, agitar, la coloración violeta pasa a la fase bencénica, mientras que la
coloración debida al reactivo desaparece luego de un cierto tiempo. La reacción
expuesta debe ser llevada paralelamente con un ensayo de blanco para
apreciar debidamente la variación de color

Interpretación clínica

La administración parenteral de sales del antimonio puede llevar a


cardiotoxicidad, colapso y muerte por shock anafiláctico. El envenenamiento
industrial es normalmente debido a la inhalación de vapores o polvos de los
compuestos de antimonio Los síntomas de una intoxicación aguda por
antimonio se parecen a la intoxicación aguda por arsénico e incluye dolor
abdominal, vómitos y diarrea. La cuantificación de las concentraciones del
antimonio en sangre es útil en el diagnostico de la intoxicación aguda, pero
esto requiere espectrofotometría y de absorción atómica.
ARSÉNICO

Varios pesticidas contienen arsénico (As) en la forma de ácido, el ácido


dimetilarsenico, arsenito, arseniato y sales de metaarseneato. Los compuestos
arseniacales también se usan en la fabricación de cerámicas y de vidrio. El gas
arsina (AsH3) se usa en ciertos procesos industriales y también puede ser
liberado accidentalmente de otros productos arsenicales.

Como con el antimonio, bismuto y el mercurio, el arsénico puede detectarse e


identificarse con la prueba de Reinsch. El método descripto a continuación es
el ensayo cuantitativo para medir las concentraciones de arsénico urinario. Es
un procedimiento modificado por Gutzeit. La arsina se genera por la reacción
de los compuestos que contienen arsénico en la muestra con hidrógeno
naciente.
La arsina es transportada en corriente de hidrógeno a través de un filtro
impregnado con acetato de plomo (para eliminar los sulfidrilos), y el arsénico es
atrapado en un tubo acodado con solución de dietilditiocarbamato de plata en
piridina.

Prueba cualitativa

Aplicable a orina, contenido estomacal y residuos de la escena.

Prueba de Reinsch – ver monografía de antimonio

Sensibilidad

Arsénico, aproximadamente 5 mg/l.

Prueba confirmatoria.

Reactivo

Solución de cianuro de potasio (100 g/l).

Método

Colocar la laminilla de cobre en la solución de cianuro de potasio y dejar por


10 minutos.

Resultados

Las manchas de arsénico se disuelven en la solución de cianuro de potasio


mientras las manchas debido al bismuto y antimonio no lo hacen.
Sensibilidad

Arsénico, aproximadamente 5 mg/l.

Ensayo cuantitativo

Aplicable a orina.

Reactivos

1. Solución del dietilditiocarbamato de plata (5 g/l) en piridina.

2. Solución de acetato de plomo (200 g/l).

3. Cloruro de estaño (II) (330 g/l) en solución de ácido clorhídrico (200 ml/l).

4. Ácido clorhídrico concentrado (densidad 1.18 relativa).

5. Yoduro de potasio (sólido).

6. Cinc granulado.

Estándar.

Disolver 2.4 g de tricloruro de arsénico en 1 litro de ácido clorhídrico diluido


(1mol/l); esto da una solución que contiene una concentración de arsénico de 1
g/l. Diluir con agua destilada para dar soluciones que contienen
concentraciones de arsénico de 0.5, 2.0, 5.0 y 10.0 mg/l.

Método.

1. Limpiar el aparato de Gutzeit modificado con acetona y secar.

2. Embeber un tapón de lana de vidrio en solución de acetato de plomo y


dejar que se seque a temperatura ambiente.

3. Colocar la lana de vidrio tratada en la parte superior del extremo del tubo
de seguridad (capilar).

4. Colocar 3.0 ml de solución de dietilditiocarbamato de plata en el tubo


acodado.

5. Agregar 2 g de yoduro de potasio y 50 ml de muestra en un frasco cónico


de 100 ml, mezclar hasta disolución, agregar 2 ml de la solución del cloruro de
estaño y 10 ml de ácido clorhídrico concentrado.

6. Mezclar bien, agregar 10 g de cinc granulado y rápidamente armar el


aparato controlando que no halla pérdida en las uniones.

7. Dejar desprender hidrógeno durante 45 minutos a temperatura ambiente.

8. Desconectar el equipo y suavemente disolver cualquier complejo formado


en las paredes, mezclar la solución.

Resultados

En presencia de arsenamina el reactivo argéntico modifica paulatinamente su


color hasta adquirir un tono rojo.
Determinar la absorbancia de la solución a 540 nm contra blanco de reactivo y
calcular la concentración de arsénico usando una curva de calibración
previamente preparado. Es lineal hasta concentraciones de arsénico de 10
mg/l.
El germanio y antimonio interfieren en este ensayo.

Sensibilidad

Arsénico, 0.5 mg/l.

Interpretación clínica

La ingestión aguda de sales arsenicales produce dolor abdominal, vómitos y


diarrea copiosa, sangrienta. La muerte es por colapso circulatorio. La
inhalación de arsina produce hemólisis masiva y fallo renal. El tratamiento con
agentes quelantes está indicado.
ATENOLOL

2-[-4-(2-hidroxi-3-isopropilaminopropoxi)fenil]acetamida;C14H22N2O3;
masa molecular relativa:266,

Figura 10 : ESTRUCTURA QUÍMICA

El atenolol es un ß-adrenoceptor cardioselectivo que bloquea a agentes


ß-bloqueantes utilizados en el tratamiento de la hipertensión.

No hay ninguna prueba cualitativa simple para el atenolol, pero puede ser
identificado por cromatografía en capa delgada a partir del producto original de
una extracción con solventes de la orina, contenido estomacal o residuos de la
escena .-

Interpretación clínica

En dosis excesiva, el atenolol pueden causar broncoconstricción, hipotensión y


fallo cardíaco. El tratamiento es sintomático y de sostén, y puede incluirse el
uso de ß-agonistas. No se requiere normalmente la cuantificación en sangre de
este compuesto para su tratamiento.
ATROPINA

(1R,3R,5S)-tropan-3-YL(±)- tropato , C17H23NO3, masa molecular relativa:289.

Figura 11 : ESTRUCTURA QUÍMICA

La atropina es un alcaloide que se encuentra en las plantas como Atropa


Belladona y Datura Stramonium. Tiene actividad anticolinérgica potente y
produce reducción de las secreciones bronquiales y salivales antes de la
anestesia. Se la utiliza para tratar los espasmos gastrointestinales y para
producir midriasis en procedimientos oftálmicos.
La atropina también se usa como antídoto en envenenamientos con inhibidores
de colinesterasa, como pesticidas organofosforados y carbamatos y algunos
agentes químicos de guerra.
La atropina es muy potente y la dosis de 10 mg o más pueden causar severo
envenenamiento.

No hay ninguna prueba cualitativa simple para la atropina, pero puede ser
identificado por cromatografía en capa delgada a partir del producto original de
una extracción con solventes de la orina, contenido estomacal o residuos de la
escena .

Interpretación clínica

La dosis excesiva de atropina puede causar taquicardia, hipertensión, pirexia,


delirio y alucinaciones. La fisostigmina es un eficaz antídoto.No se requiere
normalmente la cuantificación en sangre de este compuesto para su
tratamiento.
BARBITÚRICOS

Los barbitúricos son un derivado del 5,5'-disubstituído del ácido barbitúrico.


Además, el átomo de nitrógeno en posición 1 puede estar metilado como en el
metilfenobarbital, mientras la substitución de azufre por el oxígeno en posición
2 da el tiobarbiturato como el tiopental.

Figura 12 : ESTRUCTURA QUÍMICA


Acido Barbitúrico

Algunos barbitúricos encontrados se listan en la Tabla 18.


Otros barbitúricos que se pueden encontrar incluyen el ciclobarbital, el
ciclopentobarbital, heptabarbital, hexobarbital, metohexital y el vinbarbital. El
ácido barbitúrico ya no se usa como droga tal.

Tabla 18. Hipnóticos barbitúrico

Nombre de Químico Compuesto masa


molecular

Amobarbital 5-etilo- 5 - ácido isopentilbarbiturico 226


Barbital Acido dietilbarbiturico 184
Pentobarbital 5-etilo- 5 (1-metilbutil) ácido barbiturico 226
Fenobarbital 5-etilo- 5 - ácido fenilbarbitúrico 232
Secobutabarbital 5-n-Butil- 5 - ácido etilbarbitúrico 212
Secobarbital 5-Alil-5-(1-metilbutil) ácido barbitúrico 238
Tiopental 5-etilo-5-(1-metilbutil)-2- ácido tiobarbitúrico 242

Los barbitúricos son hipnóticos y sedantes potentes, pero en muchos países


sólo el fenobarbital y el tiopental (intravenoso) se utilizan. También pueden
usarse los barbitúricos para eutanasia en medicina veterinaria, y se usa el
barbital sódico como buffer en los laboratorios.

En el envenenamiento agudo puede ser importante determinar si el barbitúrico


implicado es un barbital o fenobarbital (barbitúricos llamados de acción larga), o
se ha tomado compuestos de acción corta o media. Esto es importante
porque una diuresis alcalina puede reforzar la excreción del barbital y del
fenobarbital, pero no de otros barbitúricos.
No hay ninguna prueba simple fiable para estos compuestos y un análisis
cualitativo se realiza mejor por cromatografía en capa delgada a partir de un
extracto con solvente de orina, contenido estomacal o residuos de la escena .
Esto también debe permitir la identificación del tipo de barbitúrico presente.

El método dado debajo permitirá medir el barbitúrico total en un extracto


solvente del espécimen, y ver el cambio espectral característico mostrado por
los barbitúricos que va de pH 11 a pH 2, para lo cual se necesita un
espectrofotómetro uv-visible. Para tener la medida exacta de un barbitúrico en
un individuo se requiere cromatografía gas-líquido o cromatografía HPLC de
alto rendimiento.-

Ensayo cuantitativo

Aplicable a sangre entera, plasma o suero (5 ml).

Reactivos

1. Buffer borato, pH 8.4. Mezclar 22.4 g de tetraborato disodico con 76 ml


de solución acuosa de ácido clorhídrico (1 mol/l) y diluir a 2 litros con el agua
destilada.

2. Solución acuosa de ácido clorhídrico (2 mol/l).

3. Acido sulfúrico concentrado (densidad relativa 1.83).

4.Hidroxido de amonio concentrado (densidad relativa 0.88).

5.Mezclar sulfato de sodio/carbón activado. Agregue 100 mg de carbón


activado a 100 g de sulfato de sodio anhidro, mezcle completamente y caliente
en una cubeta evaporándose a 100°C durante 8 horas. Enfriar y guardar en
un frasco hermético oscuro.

Estandares

Soluciones que contienen barbital en las concentraciones de 5, 10, 25 y 50


mg/l en el plasma humano pálido, preparar una dilución acuosa de barbital
sódico (1.12 g/l, equivalente al ácido dietilbarbiturico a una concentración de
1.00 g/l).

Método

1. agregue 5 ml de muestra, 2 ml de ácido clorhídrico y 60 ml de éter dietílico


(con cuidado) a una ampolla de decantación de 250-ml de capacidad.

2. Lubricar con agua destilada el tapón del embudo tapar y mezclar por
inversión durante 2 minutos.

3. Dejar descansar 5 minutos, y entonces deseche la capa de abajo fase


acuosa por la parte de abajo del embudo donde está la válvula.
4. Agregue el extracto de éter dietílico a 10 ml de buffer borato en un
segundo el embudo de separación y mezclar durante 1 minuto.

5. Dejar descansar 5 minutos y de nuevo desechar la fase acuosa la de


abajo por la parte de debajo de la ampolla.-

6. Lavar el embudo con 5 ml de agua destilada, dejar decantar 5 minutos y


de nuevo desechar por abajo la fase acuosa.

7. Agregue aproximadamente 4 g de mezcla de sulfato de sodio/carbón


activado al éter que está en la ampolla , agite, y fíltre el extracto a través de
papel de filtro en un frasco de 150-ml cónico de capacidad.-

8. Agregue 20 ml de éter dietilico a la ampolla de decantación, agite y


agregue al extracto en el frasco a través de papel de filtro.

9. Evapore el extracto a sequedad en un baño de agua a 40°C o bajo una


corriente de aire comprimido o nitrógeno.

10.-Agregue 5.0 ml de agua destilada al extracto seco en el frasco,


mezclar suavemente y dejar descansar 5 minutos.

11. - Fíltrese el extracto reconstituido a través de papel de filtro en un tubo


de 12.5-centímetro.

12. Verifique que el espectrofotometro esté en 0 a 240 nm con agua


destilada tanto en la muestra como en los estándares

13. Agregue 4 ml de filtrado de la prueba en una cubeta limpia y seca,


agregue 50 µl de hidróxido del amonio concentrado y mezclar con una varilla
de plástico. Chequear que el pH esté en aproximadamente 10 (con papel
indicador universal).

14. Rápidamente mida la absorbancia a 240 nm contra el blanco de agua


destilada . Si fuera necesario, diluir una porción del extracto con agua destilada
y leer nuevamente. Si tiene un espectrofotómetro de barrido espectral hacerlo
entre 200 –450 nm.-

15. Repita la lectura o examine después de 5 minutos.

16. Agregue 0.1 ml de ácido sulfúrico concentrado a la cubeta, mezclar


usando, una varilla plástica y chequear el pH a aproximadamente 2 (con papel
indicador universal ).

17. Repita la lectura (240 nm) o scannear entre (200-450 nm).


Resultados

Varios compuestos pueden interferir. Glutetimida es hidrolisada


rápidamente a valores de pH alcalinos, al igual que la absorbancia a 240
decrecerá notablemente después de 5 minutos a pH 11 (paso 15 de arriba) si
este compuesto está presente. La presencia de otros compuestos, como
metacualona o fenazona (por ejemplo, dicloralfenazona), puede revelarse
escanneando en la región 200-450 nm. Agregando 0.1 ml de hidróxido de
sodio acuoso (2 mol/l) al extracto amoniacal (paso 14 ) produce un cambio
espectral característico (Fig. 10) que puede ser útil en el trabajo cualitativo.

Imagen: FIGURA 10

Para realizar la medida cuantitativa, medir la diferencia entre la absorbancia a


pH 10 y a pH 2, construya un gráfico de calibración con el análisis de las
soluciones estándares del barbitúrico, y calcular la concentración del barbitúrico
en la muestra.

Alternativamente, use la siguiente fórmula :

(absorbancia a pH 10) - ( absorbancia a pH 2)) x el factor de dilución


(cualquiera) x 25 = barbitúrico ( mg/l)

Pruebe los volúmenes de no menos de 5 ml , ya que el espectrofotómetro no lo


leerá salvo que haya uno que lea menos cantidad de muestra.-.

Sensibilidad

Barbitúrico, 2 mg/l.
Interpretación clínica

Los barbitúricos son muy tóxicos en dosis excesiva y puede causar


vasodilatación periférica, hipotensión, shock, hipoventilación, hipotermia,
coma, convulsiones y fracaso renal agudo. La muerte normalmente
sobreviene por paro respiratorio o cardiorespiratorio o complicaciones
respiratorias. Las concentraciones de barbitúrico en plasma mayores que 10
mg/l (50 mg/l de barbital y fenobarbital) puede asociarse con toxicidad aguda.
Las dosis orales repetidas de carbón activada y/o diuresis alcalina pueden
ser importantes en el envenenamiento severo con el barbital y fenobarbital.
La hemoperfusión del carbón activado ha sido usado para tratar el
envenenamiento agudo - y los barbitúricos .-
BARIO

La fuente más importante de bario (Ba) es el sulfato del bario (BaSO4) que es
sumamente insoluble en agua. Las sales de bario, como el nitrato del bario
(BaNO3) y el cloruro del bario (BaCl2), son más solubles y tienen varios usos
industriales y son relativamente tóxicas. El sulfuro de bario (BaS) ha sido
empleado como agente depilatorio.

No existe un método simple para la medición de Bario en material biológico. De


todos modos la prueba descripta a continuación puede utilizarse para indicar la
presencia de sales de bario en contenido estomacal u otras muestras que
contienen relativamente concentraciones altas de este elemento.

La prueba confirmatoria se basa en el hecho que el sulfato de plomo es


relativamente soluble en ácido acético diluido pero se precipita en presencia
de sales de bario solubles. Esto refuerza eficazmente la sensibilidad de la
reacción entre el bario y los iones sulfato.

Prueba cualitativa

Aplicable a contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

1. Acido clorhídrico concentrado (densidad relativa 1.18).

2. Alambre de platino.

Método

1. Introducir el extremo del alambre de platino en el ácido concentrado.

2. El extremo humedecido del alambre se lo introduce en el material de la


prueba.

3. Colocar el material en la parte caliente de la llama en un mechero de


Bunsen.

Resultados

Una llama amarillo verdosa indica presencia de sales del bario.


Sales de cobre y de talio dan una llama verde en esta prueba.
Si existen concentraciones elevadas de sales de sodio, una coloración amarillo
anaranjada disimulará todo lo demás.
Sensibilidad

Bario, 50 mg/l.

Prueba Confirmatoria

Aplicable para digerir volúmenes y residuos de la escena.

Reactivos

1. Solución acuosa de ácido sulfúrico (1 mol/l).

2. Solución de acetato de plomo (100 g/l).

3. Solución de ácido acético (50 ml/l).

4. Acetato de amonio (sólido).

Método

1. Mezclar 2 ml de solución de acetato de plomo y 2 ml de ácido sulfúrico


diluido, agregar acetato de amonio suficiente para disolver el precipitado sulfato
de plomo.

2. Agregar 0.1 ml de ácido acético diluido a 1 ml de muestra, agregar 1 ml de


la solución de sulfo-acetato de plomo (del paso 1), mezclar por 5 segundos.

3. Centrifugar durante 2 minutos y observar el tubo sobre fondo negro.

Resultados

Una turbiedad blanca o un precipitado blanco indica la presencia de bario. El


calcio y estroncio interfieren en esta prueba.

Sensibilidad

Bario, 100 mg/l.

Interpretación clínica

La ingestión de sales del bario solubles puede producir gastroenteritis,


fibrilación ventricular y parálisis muscular. La hipocalemia es un rasgo
importante en envenenamientos severos de bario .
BENZODIAZEPINAS

Estructura general de las benzodiacepinas.

Figura 13 : ESTRUCTURA QUÍMICA

Algunas benzodiacepinas comunes se listan en tabla 19. Alprazolam,


camazepam, clorazepate, flunitrazepam, ketazolam, loprazolam,
lormetazepam, medazepam, midazolam, prazepam y triazolam son entre
los 60 miembros de este grupo.

Tabla 19. Benzodiazepinas más comunes.

Compuesto Nombre químico masa molecular

Clordiazepoxido 7-Cloro-2-metilamino-5-fenil-3H1,4-benzodiazepina 4-óxido 300

Clobazam 7-Cloro-1-metil-5-fenil-1H-1,5 benzodiazepina-2,4(3H,5H)-diona 301

Clonazepam 5-(2-Clorofenil)-1,3-dihidro-7-nitro-2H1,4-benzodiazepina-2-uno 316

Diazepam 7-Cloro-1,3-dihidro-1-metil-5-fenil 2H-1,4-benzodiazepina-2-uno 285

Flurazepam 7-Cloro-1-(2-dietilaminoetil)-5-(2fluorofenil) 1,3-dihidro-2H-1,4 benzodiazepina-


2uno ..........................................................................................................................................388

Lorazepam 7-Cloro-5-(2-clorofenil)-1,3-dihidro 3-hidroxi-2,H-1,4-benzodiazepina-2-uno 321

Nitrazepam .....1,3-Dihidro-7-nitro-5-fenil-2H-1,4 benzodiazepina-2-uno ................................281

Oxazepam 7-Cloro-1,3-dihidro-3-hidroxi-5 fenil-2H-1,4-benzodiazepina-2-uno ................287

Temazepam 7-Cloro-1,3-dihidro-3-hidroxi-1-metilo 5-fenil-2H-1,4-benzodiazepina-2-uno. 301

Las benzodiazepinas se utilizan como tranquilizantes, como clobazam,


clonazepam, y también se usa diazepam como anticonvulsivantes. Con el
temazepam se ha abusado, a menudo junto con otras drogas. La mayoría
de las benzodiazepinas se metabolizan completamente y muchos miembros de
estos grupos son metabolitos de otros compuestos. Así, diazepam da
nordazepam, oxazepam (3-hydroxynordazepam), y temazepam (3-
hidroxidiazepan), que se excreta en la orina como glucuronido o sulfatos
conjugados.-
No hay ninguna prueba de color fiable para estos compuestos. Sin embargo, la
hidrólisis de la mayoría de las benzodiazepinas y su conjugado da lugar a
aminobenzofenonas que puede extraerse y puede analizarse por cromatografía
de capa delgada. Se usan dos reactivos diferentes para aumentar el poder que
distingue finamente del método, el p-dimethylaminocinnamaldeido, y el acido
nitroso N-(1-naftil)etilendiamina

Prueba cualitativa

Aplicable a la orina, contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

1. -Acido clorhídrico concentrado ( densidad relativa 1.18 ).

2. Eter de petróleo (ebulle a 40-60°C ).

3. Cromatografía de capa delgada ( vea sección 4.4.1).

4. Solución acuosa de Acido clorhídrico (1 mol/l).

5. Tolueno:acido acético glacial (97:3).

6. Solución acuosa de p-dimetilaminocinnamaldehido (5 g/l).

7. Solución acuosa de ácido tricloroacetico (500 g/l).

8. Solución acuosa de ácido sulfúrico (500 ml/l).

9. Solución acuosa de nitrito de sodio (10 g/l, recientemente preparado).

10. Solución acuosa de sulfamato de amonio (50 g/l).

11. Hidrocloride de N-(1-Naphthyl)etilenediamino (10 g/l) en acetona: agua


(4:1).

Estandares

Flurazepam y nitrazepam, ambas en concentraciones de 100 mg/l en


ácido clorhídrico diluído (1 mol/l).

1. Mezclar 3 ml de ácido clorhídrico concentrado y 10 ml de muestra o


estándar en un tubo de vidrio de 30-ml de capacidad con tapón .

2. Colocar bajo campana en agua hirviente durante 30 minutos.

3. Enfriar y agregar 10 ml de éter de petróleo, tapar el tubo y rotar


cuidadosamente durante 10 minutos.
4. Centrífugar durante 5 minutos y transferir la capa superior, orgánica a un
tubo limpio.

5. Evaporar el extracto a sequedad bajo una corriente de aire comprimido


o nitrógeno a 60°C.

Cromatografía en capa delgada

1. Reconstituir el extracto en 100 µl de éter de petróleo.

2. Sembrar aproximadamente 25-µl de cada uno de los estándares y de los


extractos de las muestras .-

3. Desarrolle el cromatograma (dejar correr 10 cm) usando como solvente de


corrida tolueno:acido acetico (saturar la cuba).-

4. Sacar la placa y dejar secar.-

Tener mucho cuidado ya que todos los reactivos que se utilizan de revelado
son muy tóxicos. Cuando se revelan las placas se deben hacer bajo campana.-

5. Primero revelar con solución de p-dimetilaminocinnamaldehido seguido


por ácido tricloroacetico.

6. Rociar con los siguientes reactivos, secando entre cada fase,: ácido
sulfúrico, solución de nitrito de sodio, solución de sulfamato de amonio y
solución de naftiletilenediamina.

Resultados
Tabla 20
Valores de Rf y reacciones de color de las benzofenonas más comunes.

Benzofenonas Derivado Origen hRf color

Aa Bb

Metilaminocloro - Diazepam Diazepam 66 Púrpura Rosa


Ketazolam
Medazepam

Aminocloro - Oxazepam Oxazepam 40 Púrpura Púrpura


Diazepam
Medazepam
Ketazolam
Chlordiazepoxide
Clorazepato dipotasico

Aminodicloro -Lorazepam Lorazepam 45 Púrpura Purpura


Lormetazepam
Aminoclorofluoro - Desalquilflurazepam Flurazepam 31 Púrpura Púrpura

Aminonitro - Nitrazepam Nitrazepam 34 Púrpura Rosa

Diamino - 7-Aminonitrazepam Nitrazepam 52 Azul Purpura

Aminonitrocloro - Clonazepam Clonazepam 34 Azul Rosa


Loprazolam y Loprazolam
metabolitos

a) Reactivo de Visualización: solución de p-dimetilaminocinnamaldehido


seguida por ácido tricloroacetico.

b) Reactivo de Visualización: ácido sulfúrico seguido por la solución del nitrito


de sodio, solución de sulfamato de amonio y solución del naftilletilendiamino .-

La interferencia de otros productos de hidrolisis puede minimizarse


extrayendo el extracto de éter de petróleo (paso 4) con solución de hidróxido de
sodio (2 mol/l) mezclando durante 5 minutos. Luego separar las fases por
centrifugación durante 5 minutos, y evaporar el extracto de éter de petróleo a
sequedad como fue descrito anteriormente (paso 5).
La interpretación de los resultados puede ser difícil ya que muchos
compuestos dan metilaminoclorobenzofenonas y/o el aminoclorobenzofenona
por hidrolisis de orina. Por ejemplo, puede que no sea posible diferenciar
entre temazepam u oxazepam y diazepam o nordazepam ya que estos
compuestos dan un modelo similar del benzofenonas.

Los siguientes compuestos no se forman benzofenones por hidrolisis: el


medazepam, el triazolam, el clobazam, el norclobazam, y midazolam.

Sensibilidad

Nordazepam (como el aminoclorobenzofenona), 1 mg/l.

Interpretación clínica

El envenenamiento agudo con benzodiazepinas es común pero, en los


adultos, causa sólo adormecimiento, confusión, ataxia, alteración en el habla,
incoordinación y a veces coma. La depresión respiratoria es rara en los
adultos exceptuando el flurazepam. Sin embargo, la depresión respiratoria
puede ocurrir si la enfermedad respiratoria ya está presente, y en los niños
pequeños y ancianos. Las Benzodiazepinas también tienen efecto de
depresión respiratoria sinergista que se produce cuando se ingiere etanol u otro
depresor del sistema nervioso central.

El tratamiento es sintomático y de sostén, aunque pueden usarse


flumazenil como un antagonista específico . No es muy importante medir las
concentraciones de benzodiazepinas en el plasma en el envenenamiento
agudo.
BISMUTO

El bismuto (Bi) tiene usos industriales en pigmentos y en la producción de


aleaciones. En medicina, las principales aplicaciones son las sales del bismuto,
tal como el subsalicilato de bismuto, para el tratamiento gastrointestinal de
gastritis, úlcera péptica y diarrea. Como con el antimonio, el arsénico y el
mercurio el bismuto puede identificarse con la prueba de Reinsch.

Prueba cualitativa

Aplicable a orina, contenido estomacal y residuos de la escena.

La Prueba Reinsch: ver monografía de antimonio: sección 6.5

Sensibilidad

Bismuto, aproximadamente 2 mg/l.

Interpretación clínica

El envenenamiento agudo con el bismuto puede causar daño renal,


encefalopatías y neuropatías periféricas. También se puede observar
neurotoxicidad después del tratamiento crónico con sales de bismuto, pero es
reversible si se suspende la medicación.
Bisulfuro de Carbono

El bisulfuro de carbono (CS2)es usado como un intermediario sintético , un


solvente ( especialmente en manufactura del rayón) en granos y fumigantes de
tierra, como insecticida, inhibidor de corrosión y desengrasado. Unos 50-90%
de una dosis ingerida de bisulfuro de carbono se metaboliza y es excretado en
la orina como sulfato inorgánico, tiourea, 2-mercapto-2 -uno y 2-tiotiazolidina-
4-ácido carboxílico (TTCA).El bisulfuro de carbono tiene un olor particularmente
picante. La ingestión de 15 ml pueden provocar la muerte en un adulto.
No hay ningún método simple para identificar el bisulfuro del carbono en las
muestras biológicas , por el olor puede identificarse. Sin embargo, el método
dado debajo puede usarse para evaluar la exposición y puede ponerse en
evidencia en el hecho que TTCA de que cataliza la decoloración de una
solución de yodo por la azida de sodio.

Test cualitativo

Aplicable a la orina.

Reactivos

1. Rreactivo de ioduro-azida. Disolver 3 g de azida de sodio en 25 ml de


agua destilada y agregar 50 ml de una solución acuosa de ioduro (24.5 g/l) y
ioduro de potasio (50 g/l),y diluir a 100 ml.

2. Solución acuosa de ortofosfato de sodio dihidratado. (110 g/l).

Método

1. Agregar 0.2 ml de solución de ortofosfato de sodio dihidratado a 1 ml de


orina y a 1 ml de blanco de orina en tubos separados.-

2. Mezclar por 2 segundos, y agregar 20 µl de azida de ioduro a cada tubo y


otra vez mezclar por 2 segundos.-

Resultados

El color amarillo-marrón de ioduro es decolorado en 30 segundos con la


presencia de TTCA a temperatura ambiente. Esto es especialmente importante
para analizar el blanco de orina tanto como el testigo de orina la orina toma un
color amarillo-marrón.

Sensibilidad

TTCA, 10 mg/l.

Interpretación clínica

El bisulfuro de carbono es un solvente excelente para la grasa, y el contacto


dérmico puede causar enrojecimiento, quemaduras, se siente crujir la piel y se
pela. En el envenenamiento agudo por ingestión o la o por inhalación puede
dar irritación de membranas mucosas, visión borrosa, dolor de cabeza,
náuseas, vómitos, coma, convulsiones y paro cardiorespiratorio.
La exposición crónica sigue con neuropatía periférica, fatiga, sueño,
perturbación, anorexia, pérdida de peso, depresión, diabetes mellitus y
puede ocurrir enfermedad isquémica del corazón.
El tratamiento es generalmente sintomático y de sostén.-
BROMATOS

Los bromatos, como el bromato de sodio (NaBrO3), se usan como ingrediente


en los equipos para permanente del pelo y son agentes oxidantes fuertes. La
prueba de difenilamina identifica otros compuestos similares como cloratos,
hipocloritos, yodados, nitratos y nitritos.

Prueba cualitativa

Aplicable a contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivo

Difenilamina (10 g/l) en ácido sulfúrico concentrado (densidad 1.83).

Método

1. Filtrar, 5 ml del contenido estomacal en un tubo de ensayo de 10 ml

2. Agregar 0.5 ml del filtrado o residuo de la escena a un tubo limpio y


lentamente agregar 0.5 ml de solución del difenilamina por las paredes del tubo
de modo que se forme una capa debajo de la muestra.

Resultados

Un resultado positivo se indica por una coloración azul fuerte que se desarrolla
inmediatamente en la unión de las dos capas. Una coloración azul suave se
producirá por la mayoría de las muestras de contenido estomacal y se debe a
presencia de material orgánico. Los agentes oxidantes fuertes son
rápidamente reducidos en las muestras biológicas, por lo que la determinación
debe realizarse tan pronto como sea posible después de recibida la muestra.

Sensibilidad

Bromato, 10 mg/l.

Prueba confirmatoria

Aplicable a orina, contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

1. Solución acuosa de ácido nítrico (2 mol/l).

2. Solución acuosa de nitrato de plata (10 g/l).


3. Solución acuosa de nitrito de sodio (50 g/l, recientemente preparado).

4. Hidróxido de amonio concentrado (densidad relativa 0.88).

Método

1. A 1 ml de la muestra agregar 0.2 ml de ácido nítrico diluido y 0.2 ml de


solución del nitrato de plata y mezclar durante 5 segundos.

2. Si se forma un precipitado, centrifugar durante 1 minuto y mantener el


sobrenadante claro.

3. Agregar más solución de nitrato de plata, dejar caer gota a gota, para
asegurar la eliminación completa de cualquier precipitado, y luego agregar 0.2
ml de solución de nitrito de sodio.

4. Si se formas precipitado agregan 0.2 ml de hidróxido de amonio


concentrado.

Resultados

Un precipitado cremoso débilmente soluble en hidróxido de amonio indica la


presencia de bromato.

Sensibilidad

Bromato, 10 mg/l.

Interpretación clínica

El envenenamiento agudo de bromatos pueden causar náusea, vómitos,


diarrea, dolor abdominal, confusión, coma y convulsiones. Se produce a
menudo metahemoglobinemia y esto puede indicarse por el color chocolate de
la sangre .-
El tratamiento es sintomático y de sostén.
BROMUROS

Las sales como el bromuro de sodio (NaBr) son empleadas en el proceso


fotográfico. El bromuro del metilo se usa como un fumigante en naves y silos
de grano, y sé metaboliza en parte al ion del bromuro in vivo.
La prueba cualitativa indica la presencia de bromuro inorgánico o yoduro.

Prueba cualitativa

Aplicable a la orina, volúmenes del estómago y residuos de la escena.

Reactivos

1. Solución acuosa de ácido nítrico (2 mol/l).

2. Solución acuosa de nitrato de plata (10 g/l).

3. Hidróxido del amonio concentrado (densidad relativa 0.88).

Método

1. Agregar 0.1 ml de ácido nítrico a 1 ml de solución de la prueba , mezclar


por 5 segundos y agregar 0.1 ml de solución del nitrato de plata.

2. Centrifugar para separar cualquier precipitado significante, decantar y


tratar con 0.1 ml de hidróxido del amonio concentrado.

Resultados

Un precipitado blanco soluble con el hidróxido de amonio indica presencia de


cloruros, un precipitado blanquecino en hidróxido amonio indica presencia
bromuros, y un precipitado amarillo cremoso, insoluble indica yoduro.

Sensibilidad

Bromuro, 50 mg/l.

Prueban confirmatoria

Aplicable a orina, volúmenes del estómago y residuos de la escena.


Reactivos

1. Solución saturada de fluoresceína en solución de ácido acético (600


ml/l).

2. Acido sulfúrico concentrado (densidad relativa 1.83).

3. Permanganato de potasio (sólido)

Método

1. Embeber una tira de papel de filtro en la solución de fluoresceína.

2. Agregar aproximadamente 50 mg de permanganato de potasio a 2 ml de


la solución de prueba en un tubo de 10 ml.

3. Agregar 0.2 ml de ácido sulfúrico concentrado y sostener el papel de filtro


impregnado en la fluoresceína en la boca del tubo.

Resultados

El bromuro se oxida al bromo libre. Esto reacciona con el amarillo de la


fluoresceína para dar eosina (tetrabromofluoresceina) que tiene un color
rosado a rojo.

Sensibilidad

Bromuro, 50 mg/l.

Ensayo cuantitativo

Aplicable a plasma o suero (2 ml).

Reactivos

1. Acido acuosa cloroaurica. Disolver 0.5 g de ácido cloroaurico (cloruro de


oro, HAuCl4 x H2O) en 100 ml de agua destilada.

2. Solución de ácido tricloroacetico (200 g/l).


Estándares

Disolver 1.29 g de bromuro de sodio en 500 ml de agua destilada (ion bromuro


2g/l). Preparar una serie de diluciones en agua destilada conteniendo
concentraciones de ion de bromuro de 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.2 y 1.6 g/l.

Método

1. Agregar 6 ml de solución ácida de tricloroacetico a 2 ml de muestra en un


tubo de 10 ml, mezclar durante 30 segundos y dejar descansar por 15
minutos.

2. Centrifugar durante 5 minutos y filtrar el sobrenadante a través del papel de


filtro en un tubo.

3. Agregar 1 ml de la solución cloroaurica ácida a 4 ml del sobrenadante claro


mezclar durante 5 segundos.

4. Registrar la absorbancia a 440 nm contra un blanco de agua destilada .

Resultados

Construya un gráfico de calibración de concentración del bromuro contra


absorbancia, y calcule la concentración de ion del bromuro en la muestra. La
calibración es lineal para concentraciones de 25 mg/l a 2.5 g/l. Este método no
es fiable con muestras que den turbio o en los sobrenadantes, por ejemplo
muestras de cadáveres.

Sensibilidad

Bromuro, 25 mg/l.

Interpretación clínica

La intoxicación aguda con bromuros pueden causar náusea, vómitos y


diarrea, pero la absorción es pobre y la toxicidad sistémica es más común
después de ingestión o exposición crónica. En estos casos se observa, fatiga,
irritabilidad, anorexia, dolor abdominal, pigmentación superficial,
alucinaciones visuales i auditivas, delirio, temblor, ataxia y coma .
Las concentraciones normales de bromuro en suero son de 10 mg/l pero
administraciones terapeúticas continuas con bromuros pueden llegar
concentraciones del orden de 80 mg/l.
La toxicidad normalmente se asocia con concentraciones del bromuro
mayores a 500 mg/l.
El Tratamiento normalmente es sintomático y de sostén.
Bromuro de metilo

El bromuro de metilo es usado como un fumigante bodegas de buques


(CH3Br), en grandes silos y otras áreas cerradas. El bromuro de metilo sufre un
metabolismo parcial dando bromuro inorgánico in vivo. Desde las
concentraciones de estos iones encontrados en intoxicaciones de bromuro de
metilo son mucho menos que las intoxicaciones serias con bromuros
inorgánicos, esto es porque el bromuro de metilo asímismo es un tóxico
primario.-
El test cualitativo dado abajo sirve para indicar la presencia de bromuros
inorgánciso o iodados, y la confirmación apropiada es usar un test en sangre
para medir bromuros. No hay un método simple para medir sin cambios el
bromuro de metilo.

Test cualitativo

Aplicable a orina. Detecta bromuros inorgánicos.-

Reactivos

1. Solución acuosa de ácido nítrico (2 mol/l).

2. Solución acuosa de nitrato de plata (10 g/l).

3. Hidróxido de amonio concentrado (densidad relativa 0.88).

Método

1. Agregar 0.1 ml de ácido nítrico a 1 ml de test de solución limpia, mezclar


por 5 segundos y agregar 0.1 ml de solución de nitrato de plata.-

2. Centrifugar para aislar alguna precipitación significativa y tratar con 0.1


ml de hidróxido de amonio concentrado.-

Resultados

Un precipitado blanco soluble en hidróxido de amonio indica la presencia de


cloruros, y un precipitado grisáceo parcialmente soluble en hidróxido de
amonio indica la presencia de bromuro y un precipitado insoluble crema
amarillento indica ioduros.-

Sensibilidad

Bromuro, 50 mg/l.

Test confirmatorio

Aplicable a orina. Detecta bromuros inorgánicos.


Reactivos

1. Solución acuosa de ácido acético saturado con fluoresceína. (600 ml/l).


2. Acido sulfúrico concentrado (densidad relativa 1.83).
3. Permanganato de potasio (sólido)

Método

1. Impregnar un papel de filtro con solución de fluoresceína.

2. Agregar cerca de 50 mg de permanganato de potasio a 2 ml de solución


de test en un tubo de 10 ml.

2. Agregar 0.2 ml de sulfúrico concentrado y colgar el papel de filtro


impregnado con fluoresceína en un tubo de boca ancha.

Resultados

El bromuro se oxida al bromo libre. Este reacciona con la fluoresceína de


color amarillo para dar eosina (tetrabromofluoresceina) qué tiene color rosa-
rojo.-

Sensibilidad

El bromuro, 50 mg/l.

Ensayo cuantitativo

Aplicable a plasma o suero (2 ml).

Reactivos

1. Acido acuoso cloroaurico. Disuelva 0.5 g de ácido cloroaurico (cloruro de


oro, HAuCl4ÀxH2O) en 100 ml de agua destilada.-

2. Acido tricloroacetico acuoso (200 g/l).

Estándares

Disuelva 1.288 g de bromuro de sodio en 500 ml de agua destilada ( ion


del bromuro 2 g/l). Preparar las diluciones de serie en el agua destilada
conteniendo concentraciones de ion de bromuro de 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.2 y 1.6
g/l.

Método

1. Agregue 6 ml de tricloroacetico solución ácida a 2 ml de muestra en un


tubo de 10-ml de capacidad, mezclar en vortex durante 30 segundos y dejar en
reposo 15 minutos.
2. Centrífugar durante 5 minutos y filtrar el sobrenadante a través del filtro
de papel en un tubo limpio.

3. Agregar 1 ml de cloroaurico de la solución ácida a 4 ml del sobrenadante,


mezclar en vortex durante 5 segundos.

4. Registrar la absorbancia a 440 nm leyendo contra un blanco de agua


destilada.-.

Resultados

Construya un gráfico de calibración de concentración del bromuro vs


absorbancia de acuerdo a las lecturas de bromuros, y calcular la concentración
de ion del bromuro en la muestra. La calibración es lineal para las
concentraciones de 25 mg/l a 2.5 g/l.
Este método no es confiable con muestras que pueden dar turbio el
sobrenadante, por ejemplo las muestras obtenidas por necropsia.

Sensibilidad

Bromuro, 25 mg/l.

Interpretación clínica

Los síntomas de envenenamiento debido a bromuro del metilo se


desarrollan luego de varias horas después de la exposición e incluye confusión,
vértigo, dolor de cabeza, náuseas, vómitos, dolor abdominal, visión borrosa,
hiporeflexia y parestesia. El coma y las convulsiones pueden ocurrir en los
casos severos, y también se han descripto edema pulmonar, ictericia y oliguria.
El tratamiento es sintomático y de sostén.-
Las concentraciones de bromuro en sueros normales están por debajo
de 10 mg/l. Después de la administración terapéutica de bromuros inorgánicos,
las concentraciones, pueden aumentar hasta 80 mg/l; la toxicidad está
normalmente asociada con las concentraciones mayores a 500 mg/l. por otro
lado, se han informado concentraciones de 90-400 mg/l en la sangre en
envenenamientos graves con bromuro de metilo.-
CADMIO

El cadmio (Cd) forma las sales no coloreadas con propiedades químicas


similares a compuestos de cinc. El óxido del cadmio y sales del cadmio se
usan en aleaciones como níquel-cadmio en productos como baterías secas,
soldadura, pintura y pigmentos plásticos.
El envenenamiento agudo debido al cadmio es sumamente raro, pero la
toxicidad crónica ha sido vista después de la exposición profesional y en
algunos casos después de una contaminación a través de la dieta o el
suministro de agua como sucedió en Japón con la enfermedad de itai-itai .

No hay ninguna prueba cualitativa simple para cadmio que pueda ser realizada
en muestras biológicas o residuos de la escena.

Interpretación clínica

La exposición crónica al cadmio puede llevar al daño tubular renal y daño en la


función pulmonar. Se han observado casos de osteomalacia en aquellos
pacientes con dietas deficientes en el calcio. La ingestión de sales del cadmio
causan dolor abdominal, vómitos y diarrea, hipotensión, acidosis metabólica,
respiración deprimida, edema pulmonar, oliguria y muerte en casos severos.
El tratamiento es sintomático y de sostén, y puede incluir terapia de quelación.
Cafeína

Metilteobromina, 7-metilteofilina, 1,3,7-trimetilxantina; C8H10N4O2; masa


molecular relativa, 194

Figura 14 : ESTRUCTURA QUIMICA

La cafeína es un alcaloide que está presente en el té, café , cola y otros


brebajes. Una taza de té o café contiene aproximadamente 100 mg de la
droga.- La cafeína es un ingrediente con propiedad estimulante en
preparaciones y también es usado para el tratamiento de apnea neonatal. Las
reacciones metabólicas incluyen N-demetilación y oxidación a derivados del
ácido úrico. Aproximadamente el 85% de una dosis oral es excretada sin
cambios en la orina. La cafeína es un metabolito importante de teofilina en
neonatos, y en adultos con hábitos de drogas emparentadas.-
No hay un análisis simple para detectar cafeína, pero este compuesto puede
ser detectado e identificado por cromatografía de capa delgada en extractos de
solventes básicos de orina, contenidos estomacales, y residuos de la escena .
Aunque la cafeína se visualiza con el reactivo de iodoplatinato acidificado esta
sensibilidad es pobre.-

Interpretación clínica.

La sobredosis con cafeína puede causar palpitaciones, hipertensión, diuresis,


estimulación del sistema nervioso central, náuseas, vómitos, marcada
hipocalemia, acidosis metabólica y convulsiones. El tratamiento es sintomático
y de sostén.-
Carbamatos pesticidas

Estos compuestos tienen la fórmula general que se muestra debajo. La


substitución de azufre por el oxígeno, hace que tenga la actividad insecticida
más baja. Algunos carbamatos más comunes se encuentran listados en la
tabla 21.-

Figura 15 : ESTRUCTURA QUÍMICA

Tabla 21. Algunos pesticida derivados del carbamato

Nombre R1 R2 R3 Compuesto químico Masa molecular

ALDICARB H CH3 CH3SC(CH3)2CH:N 190


CARBARYL H CH3 1-NAPHTHYL 201
METHIOCARB H CH3 3,5-DIMETHYL-4-(METHYLTHIO)PHENYL
225
PIRIMICARB CH3 CH3 2-DIMETHYLAMINO-5,6 -
dimethylpyrimidin-4-yl 238
PROMECARB H CH3 3-ISOPROPYL-5-METHYLPHENYL 207
PROPOXUR H CH3 2-ISOPROPOXYPHENYL 209

Los carbamatos son usados ampliamente como insecticidas, herbicidas y


fungicidas. Los insecticidas de Carbamatos inhiben la acetilcolinesterasa y así
la evidencia de exposición al producto puede obtenerse midiendo la actividad
de la colinesterasa .
Los carbamatos herbicidas y fungicida, como el ditiocarbamatos, no producen
inhibición tan importante de la colinesterasa por lo que lo hacen menos tóxicos
en los humanos. La prueba descripta aquí está basada en una reacción
general del carbamatos con el furfuraldehido con la presencia de cloruro de
hidrógeno.

Prueba cualitativa

Aplicable a contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

1. Solución de ácido clorhídrico (2 mol/l).


2. Solución de Furfuraldehido (100 ml/l) en metanol, recientemente
preparado.

3. Acido clorhídrico concentrado (densidad relativa 1.18 ).

Método:

1. Acidificar 1 ml de muestra con 0.5 ml de dilución de ácido clorhídrico y


extrae con 4 ml de cloroformo y mezclar cuidadosamente por 5 minutos.

2. Centrifugar durante 5 minutos, desechar la capa superior acuosa y filtrar el


extracto del cloroformo a través de un papel de filtro en un tubo limpio.

3. Evapore el extracto a sequedad bajo una corriente de aire o nitrógeno a


40°C.

4. Disolver el residuo en 0.1 ml de metanol, aplicar una mancha de la


solución en un papel de filtro dejar secar.

5. Aplicar 0.1 ml de la solución de furfuraldehido a la mancha, dejar secar


y exponer el papel a los humos del ácido clorhídricos concentrados por 5
minutos bajo campana.-

Resultados

Los carbamatos dan una mancha negra. El meprobamato y otros carbamatos


no-pesticida interfieren en esta prueba.

Sensibilidad

Carbamato, 100 mg/l.

Interpretación clínica

La exposición a carbamatos puede causar anorexia, dolor abdominal,


náuseas, vómitos, diarrea, lagrimeos, hipersalivación, sudor, ansiedad, ataxia y
edema pulmonar agudo. Para la terapia puede indicarse la Atropina que es un
antídoto, la pralidoxima no deben ser usada.
Carbamazepina

5H-Dibenz[b,f]azepine-5-carboxamide; C15H12N2O; relativa


molecular masa, 236

Figura 16 : ESTRUCTURA QUIMICA

Las Carbamazepina son ampliamente usadas como anticonvulsivantes. Las


reacciones metabólicas incluyen epoxidación dando carbamazepina-10,11-
epoxido (que es farmacológicamente activo), formación diol, hidroxilación y
conjugación. Menos del 10% de una dosis se excreta por orina como
compuestos similares. La dosis letal mínima estimada en un adulto es de 5
grs.-

Test cualitativo

Aplicable a contenido estomacal y residuos de la escena.-

Reactivos

1. Solución acuosa de ácido clorhídrico (2 mol/l).

3. Reactivo de hipobromito de sodio. Disolver 0.5 ml de bromo elemental


cuidadosamente y enfriando en 5 ml de solución de hidróxido de sodio
(400 g/l). Recientemente preparada.-

Método

1. Agregar 1 ml de la solución de ácido clorhídrico a 5 ml de cloroformo,


mezclar por 1 minutos y centrifugar por 5 minutos.-

2. Descartar la capa superior acuosa y agregar el cloroformo a 0.2 ml de


agua de bromo en un tubo limpio y mezclar por 30 segundos.-

Resultados

Un color azul-violeta en la capa del cloroformo indica la presencia de


carbamazepina. Este compuesto y sus metabolitos puede también ser
detectados por cromatografía de capa delgada en extracto solvente ácido de
orina (ver secciòn 5.2.3).
Sensibilidad

Carbamazepina, 250 mg/l.

Interpretación clínica

El envenenamiento por carbamazepina puede causar dolor de cabeza, vómitos,


dolor abdominal, diarrea, constipación ataxia, nistagmus, diplopía, hipotensión,
coma, convulsiones, y depresión respiratoria. El tratamiento es sintomático y de
sostén.-
CIANURO

El envenenamiento agudo con cianuro (CN -) puede producirse después de la


inhalación de cianuro de hidrógeno (HCN) o después de la ingestión de ácido
cianhídrico o cianuro de potasio o de sodio. Las soluciones complejas de
cianuro se usan en galvanoplastia y la acidificación de tales soluciones a
menudo las llevan a la producción de cianuro de hidrógeno. Los glicosidos
cianogenéticos y otros compuestos que contienen nitrilos, como la amigdalina,
que libera cianuro en el organismo ocurra también en varios tejidos de la
planta, incluso el melocotón y los granos del albaricoque, raíz de la yuca y
frijoles de la lima.

Los insecticidas con tiocianato (tiocianato de etilo, tiocianato del metilo)


también se metabolizan a ion cianuro en el organismo y pueden causar serios
problemas de toxicidad. El cianuro también es un metabolito del nitroprusiato
de sodio (usado como vasodilatador) y otros compuestos que contienen nitrilos,
pero envenenamientos con cianuro en estos casos son raros.
El tiocianato inorgánico y las sales de ferricianuro y de ferrocianuro no liberan
cianuro en el organismo y es relativamente poco tóxico.

Prueba cualitativa

Se basa en la formación de un complejo azul de ferriferrocianuro (azul de


Prusia) con los iones ferrosos.

Muestra

Contenido estomacal y residuos de la escena.


Tener cuidado con las muestras que contienen cianuros ya que liberan ácido
cianhídrico si se acidifica.

Reactivos

1- Solución acuosa de hidróxido de sodio (100 g/l).

2- Solución acuosa de sulfato ferroso (100 g/l) recientemente preparada.

3- Solución acuosa de ácido clorhídrico (100 ml/l).

Método

1. Diluir 1 ml de muestra con 2 ml de solución del hidróxido de sodio.

2. Agregar 2 ml de solución de sulfato ferroso


3. Agregar ácido clorhídrico suficiente para disolver el precipitado de hidróxido
ferroso.

Resultado

Un color azul indica la presencia de cianuro. No existen fuentes comunes de


interferencia.

Sensibilidad

Cianuro, 10 mg/l.

Ensayos cuantitativos

Muerta: sangre entera heparinizada (0.1 - 1.0 ml) que puede ser guardada a
4°C durante 1-2 días si el análisis se tarda por cualquier razón.
(El cianuro en sangre es menos estable si se guarda a temperatura ambiente o
a -20°C.)

Método de microdifusión

Se basa en la liberación de cianuro de hidrógeno y la formación subsecuente


de un complejo coloreado:

A - Método del p-nitrobenzaldehido / o-dinitrobenceno, puede usarse para


dar un resultado rápido semicuantitativo

B - Método de la piridina / ácido barbitúrico. Método para un análisis


cuantitativo.

A. Método del p-nitrobenzaldehído / o-dinitrobenceno

Reactivos

1. Solución acuosa de hidróxido de sodio (0.5 mol/l).

2. Solución acuosa de ácido sulfúrico (3.6 mol/l).

3. p-nitrobenzaldehído (0.05 mol/l) en 2-metoxietanol.

4. o-dinitrobenceno (0.05 mol/l) en 2-metoxietanol.


Estándares

Solución acuosa de cianuro de potasio (10 mg/l, es decir, la concentración del


ion de cianuro, 4 mg/l.

Método

1- Tomar tres cápsulas de microdifusión y agregar cada uno en la parte


central:

(a) 0.5 ml de solución del p-nitrobenzaldehido.


(b) 0.5 ml de solución del o-dinitrobenceno.
(c) 0.1 ml de solución del hidróxido de sodio.

2. En la parte exterior agregar 0.1 ml de:

Cápsula Nº 1- agua destilada


Cápsula Nº 2 solución de cianuro de potasio
Cápsula Nº 3 Muestra de sangre problema

3. A cada cápsula en la parte exterior agregar 0.5 ml de agua destilada y en el


lado opuesto del mismo sector, 1.0 ml de ácido sulfúrico diluido.

4. Se tapa cada cápsula usando silicona y cuidadosamente se mezclan los


componentes de la parte externa.

5. Incubar a temperatura ambiente durante 20 minutos y agregar 1 ml de


solución acuosa de metanol (1:1) a la parte central.

6. Transferir las sustancias de la parte central de la cámara a un tubo


volumétrico de 5.0 ml y llevar a volumen con solución acuosa de metanol
(1:1).

Resultados

El color rojo obtenido con las soluciones que contienen cianuro son estables
durante aproximadamente 15 minutos. Medir la absorbancia de las soluciones
de las cámaras 2 y 3 a 560 nm contra blanco de agua destilada
(cápsula Nº 1). Calcular la concentración del ion cianuro en la muestra por la
comparación con la lectura obtenida de los estándares.

Sensibilidad

El cianuro, 0.5 mg/l.


B. Método Piridina / ácido barbitúrico

Reactivos

1. Solución acuosa de oxido de sodio (0.1 mol/l)

2. Solución acuosa de cloramina T (2.5 g/l). (La Cloramina T sólida es


inestable, las soluciones deben prepararse en el momento de usar.).

3. Solución acuosa de ortofosfato de hidrógeno de sodio (1 mol/l.

4. Reactivo Piridina - Ácido barbitúrico: Disolver 6 g de ácido barbitúrico (no el


dietil del ácido barbitúrico, en 6 ml de ácido clorhídrico concentrado
(densidad relativa 1.18), y diluir con 30 ml de piridina. Diluir la solución
resultante a 100 ml con el agua destilada. Esta solución debe ser preparada
en el momento de la reacción.

5. Solución acuosa de ácido sulfúrico (1 mol/l).

Estándares

1..Solución estándar de cianuro. Disolver 50 mg de cianuro de potasio en 100


ml de solución acuosa de hidróxido de sodio (0.1 mol/l):Concentración del ion
de cianuro : 200 mg/l.
Tener precaución cuando se usan soluciones de cianuro..

2.. Solución de calibración de cianuro: Diluir (1:99) la solución estándar del ion
cianuro (200 mg/l) en solución acuosa de hidróxido de sodio
(0.1 mol/l); obteniendo una solución de concentración de ion cianuro de 2 mg/l.

Método

1. Rotular siete cápsulas de microdifusión desde (a) a (g) y agregar los


reactivos que se muestran en la tabla 25. en la parte exterior de la cápsula, y
reactivo 5 (ácido sulfúrico diluido) en el lado opuesto de la misma.

2. Agregar 2 ml de solución del hidróxido de sodio al compartimiento interno.


Se tapa cada cápsula usando silicona y cuidadosamente se mezclan los
componentes de la parte externa y se incuban a temperatura ambiente durante
20 minutos.

3. Pipetear 1.0 ml de la solución del hidróxido de sodio de cada uno de los


compartimentos internos en tubos enumerados.
4. Agregar los reactivos siguientes secuencialmente y agitar para mezclarlos.

(a) 2 ml de Buffer fosfato


(b) 1 ml de solución de cloramina T
(c) 3 ml de reactivo piridina - ácido barbitúrico.

Tabla 25.

Cápsula Solución de Agua (ml) Acido Sangre


Cianuro Sulfúrico (ml)
(ml) (ml)

(a) Blanco de reactivo -------- 2.0 0.5 ---------


(b) Muestra problema -------- 1.0 0.5 1.0
(c) Muestra problema -------- 1.0 0.5 1.0
(d) Cianuro, 0.2 mg/l 0.1 1.9 0.5 ---------
(e) Cianuro, 1.0 mg/l 0.5 1.5 0.5 ---------
(f ) Cianuro, 2.0 mg/l 1.0 1.0 0.5 ---------
(g) Cianuro, 4.0 mg/l 2.0 ----- 0.5 ---------

Resultados

La presencia de cianuro se indica por un color rojo/azulado. Medir la


absorbancia a 587 nm de cada solución contra los blancos de agua diluyendo
si necesario para permitir que entre en escala. Construya un gráfico de la
calibración con las concentraciones que se obtuvieron de las soluciones
estándar de cianuro y calcular la concentración de cianuro en la muestra.

Sensibilidad

Cianuro, 0.2 mg/l.

3. DETERMINACION CUANTITATIVA DE CN POR MICRODIFUSION


(Método de Tompsett)

Reactivos:
SO4 H2 6N:16ml de ácido sulfúrico concentrado llevarlo a 100ml con agua
destilada.
NaOH : disolver 4g de NaOH llevando a 100ml con agua destilada.
Agua de bromo a saturación.
Ácido acético puro.
Solución de arsenito de sodio: disuelva 1g de As2O3 en el mínimo volumen
posible de solución de NaOH 2 N y completar luego a 50ml.
Reactivo piridina – bencidina: disuelva 0,36g de bencidina en 10ml de HCL
0,5N. Por otra parte en una probeta se colocan 12 ml de piridina pura y se
llevan a 20 ml con agua destilada agregando luego 2 ml de HCL concentrado.
El reactivo se prepara agregando 5ml de la solución de bencidina a 20ml de la
solución de piridina ácida. La mezcla debe prepararse en el momento de su
uso.

Técnica:
En una cámara de Conway convenientemente preparada colocar en
el compartimiento interno 1ml de NaOH 1 N y en el compartimiento externo 2ml
de sangre (puede adaptarse al método utilizando en lugar de sangre 1 a 2g de
macerado de tejido). Cubrir la cámara con la tapa de vidrio dejando únicamente
el lugar necesario para agregar 0,5ml de SO4H2 6N al compartimiento externo.
Una vez agregado el sulfúrico tapar inmediatamente y mezclar con cuidado.
Dejar en reposo a temperatura ambiente durante 2 horas. Transcurrido dicho
lapso agregar en el compartimiento interno 0,1 ml de arsenito de sodio.
Después de la reducción total del bromo agregar 0,5ml del reactivo piridina –
bencidina. Mezclar bien y con una pipeta o gotero se transfiere la solución
coloreada a un tubo de ensayo. Se efectúan dos lavados del compartimento
interno con 0,6ml de agua destilada cada vez juntando estos lavados
cuantitativamente con la solución del tubo de ensayo. Se mezcla y se deja en
reposo durante 15 minutos a temperatura ambiente. Se determina la
absorbancia a 520nm contra un blanco de reactivos.

Testigo:
Utilice un testigo de sangre que contenga 10ug de NaCN por cada 2ml
de sangre.
Dos mililitros de ese testigo se procesan de la misma manera y
simultáneamente con la muestra problema. (En otra cámara).

Preparación de la sangre testigo:

Solución madre de NaCN: pesar 100mg de NaCN, disuelva y lleve a


100 ml en matraz aforado con agua destilada.
Solución hija de NaCN: se toman 10ml de la solución madre y se llevan
a 100 ml en matraz aforado con agua destilada. Esta solución contiene 100ug
de NaCN por mililitro.
En un tubo de ensayo se colocan 9,5 ml de sangre y se agregan 0,5ml
de la solución hija. Mezclar.
Nota:
Debe tenerse la precaución de utilizar un NaCN de buena calidad.
Además el frasco que lo contiene debe haber estado perfectamente tapado
puesto de no ser así, en función del tiempo, se produce una carbonización con
liberación de HCN.

Resultado:
Exprese el resultado como ug de NaCN por 100ml de sangre. En las
intoxicaciones por inhalación de HCN pueden registrarse valores de 100ug o
más por 100 ml de sangre.
En los casos de muerte por ingestión de dosis elevadas (200mg de
NaCN) la concentración sanguínea puede ser del orden de los miligramos por
100ml.

Mecanismo de la reacción:

El agregado del ácido sulfúrico a la sangre hace


que se libere HCN que difunde en la atmósfera de la cámara. El hidróxido de
sodio del compartimiento interno fija el HCN formando NaCN.
El bromo actúa sobre el cianuro dando bromuro de cianógeno:

CN- + Br2 BrCN + Br-

Este bromuro de cianógeno reacciona con la piridina para originar el bromuro


de cianopiridina:

Br CN + N Br-

N +
CN

Este compuesto por hidrólisis sufre la apertura del anillo piridina dando lugar al
aldemidoglutacónico:

Br - + H2O O + Br - + H+ + NH2 CN
N+ HOHC C
H
CN

Si este derivado se acopla a aminas cíclicas (bencidina, anilina, etc.). Se


obtienen compuestos coloreados (bases de Schiff):

+ 2 R – NH2 + 2 H2O

O HN – HC CH = N - R
HO HC O
H
Interpretación clínica

El envenenamiento agudo con cianuro se caracteriza por ataxia, dolor de


cabeza, ansiedad, disnea, confusión, coma, colapso, acidosis metabólica,
edema pulmonar y paro respiratorio. La cianosis puede no estar presente.
El tratamiento de soporte incluye la administración de oxígeno. Un número de
antídotos se ha usado, incluso la hidroxocobalamina, nitrito de sodio y tiosulfato
de sodio, edetato de dicobalto.

En el envenenamiento agudo con sales de cianuro o ácido cianhídrico, las


concentraciones del ion cianuro en sangre normalmente son del orden de 2-10
mg/l. La prueba cualitativa descripta anteriormente tiene insuficiente
sensibilidad para descubrir estas concentraciones y sólo deben usarse para
contenido estomacal y residuos de la escena. Las medidas cuantitativas de
cianuros tienen muy poca relevancia en la intoxicaciones agudas ya que la
terapia debe comenzare tan pronto como sea posible.

El cianuro también puede estar presente en la sangre de víctimas de incendios


debido a la inhalación de cianuro de hidrógeno de la combustión parcial de
lana, seda y los polímeros sintéticos como poliuretanos y poliacriilonitrilos. En
tales casos, las concentraciones de cianuro en sangres pueden ir desde 0.2 a
1.0 mg/l. El monóxido del Carbono puede también estar presente. Las
concentraciones de cianuro en sangre en los grandes fumadores de cigarrillos
puede ser tan alto como 0.3 mg/l.
Clormetiazole

Clormetiazole; 5-(2-cloroethl)-4-metiltiazole; C6H8ClNS;


la masa molecular relativa, 162,

Figura 17 : ESTRUCTURA QUÍMICA

El clometiazol se usa como un hipnótico en paciente mayores como un


anticonvulsivante, y en el tratamiento de dependencia al alcohol y droga.
Menos del 5% de una dosis oral se excreta sin alteración en la orina, y un
número grande de metabolitos. El clometiazol tiene un olor característico en la
respiración y en el contenido estomacal.-

No hay ninguna prueba cualitativa simple para investigar el clometiazol, pero


este compuesto y sus metabolitos pueden identificarse por cromatografía en
capa delgada en un extracto solvente básico de orina .-

Interpretación clínica

El envenenamiento agudo con el clometiazol puede causar estornudos,


aumento de la salivación, irritación de la conjuntiva, hipotensión, hipotermia,
coma, depresión respiratoria. El etanol potencia los efectos depresivos del
clometiazol en el sistema nervioso central, y estos compuestos se encuentra
a menudo juntos en los casos fatales. El tratamiento es sintomático y de
sostén.-
Cloratos

El clorato de sodio (NaClO3) se usa como un herbicida y fósforos, fuegos


artificiales. También se usan los cloratos en cantidades pequeñas en gárgaras
y pastas dentífricas. En un adulto, el envenenamiento agudo puede seguir
luego de la ingestión de 15 g de clorato de sodio. Los cloratos son muy buenos
agentes oxidantes y la prueba dada debajo también descubrirá los compuestos
con similares propiedades, como los bromatos, hipocloritos, yodatos, nitratos,
y nitritos.

Prueba cualitativa

Aplicable para contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

Difenilamina (10 g/l) en ácido sulfúrico concentrado ( densidad 1.83).

Método

1. Filtrar 5 ml de contenido estomacal en un tubo de vidrio de 10-ml

2. Agregue 0.5 ml del filtrado o residuo de la escena a un tubo limpio y


agregue cuidadosamente 0.5 ml de solución de difenilamina por las paredes del
tubo para que forme una capa bajo la muestra.

Resultados

Un verdadero positivo se indica por un color azules fuertes que desarrolla


inmediatamente a la unión de las dos capas. Un azul más claro serán dados
por la mayoría de las muestras de contenidos estomacal que tiene presencia
de material orgánico. Debido a que es un agente fuertemente oxidante en
muestras biológicas la prueba tiene que realizarse tan pronto como sea
posible.-

Sensibilidad

Clorato, 10 mg/l.

Prueba confirmatoria

Aplicable para contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

1. Reactivo de sulfato manganoso. Mezclar sulfato de manganeso saturado


con ácido o-fosfórico (1:1).

2. Difenilcarbazida (10 g/l) en metanol.


Método

1. a 0.1 ml de solución de la prueba agregar 0.2 ml del reactivo de sulfato de


manganeso y calentar brevemente con lámpara .

2. Enfriar y agregar 0.1 ml de solución del difenilcarbazida.-

Resultados

Un color púrpura-violeta que se intensifican después de enfriar y agregar


la difenilcarbazida indica la presencia de clorato.
Los persulfatos y periodatos dan una reacción similar; el persulfato puede
eliminarse evaporando la solución de la prueba con 0.1 ml de ácido sulfúrico
concentrado ( densidad relativa 1.83 ) y 0.1 ml de solución de nitrato de plata
(10 g/l).

Sensibilidad

Clorato, 100 mg/l.

Interpretación clínica

El envenenamiento agudo con los cloratos puede causar náuseas, vómitos,


diarrea, dolor abdominal, confusión, coma y convulsiones.
La metahemoglobinemia se produce a menudo y esto puede indicarse por el
color de la sangre chocolate . La metahemoglobina en sangre pueden medirse
pero es inestable si no se guardó en heladera.-
El tratamiento es sintomático y de sostén.
Cloralose

alfa-Cloralose; (R)-1,2-O-(2,2,2-tricloroetilideno)-alfa-D -
el glucofuranosa; C8H11Cl3O6; la masa molecular relativa, 310,

Figura 18: ESTRUCTURA QUÍMICA

El cloralose es una droga hipnótica y se ha usado como anestésico en cirugía


de animales del laboratorio. También se usa como repelente para granos de
semilla de pájaro , como un rodenticide, sobre todo contra los ratones, en
refrigeración. La dosis asociada con la toxicidad en los adultos es
aproximadamente 1 g.
El cloralose puede ser oxidado con ácido periódico a acido tricloroacético,
quien puede ser detectado por el método de Fujiwara como el tetracloruro de
carbono. Se piensa que el chloralose sufre una hidrólisis en el ser vivo, y en la
orina de pacientes que habían ingerido el cloralose da una reacción positiva sin
la oxidación del periodato. Sin embargo, trabajo recientes sugieren que éste no
sea el caso.

Prueba cualitativa

Aplicable a plasma o suero, orina, contenido estomacal y residuos de la


escena
Esta prueba debe realizarse bajo una campana.-

Reactivos

1. Reactivo del ácido periódico. Mezcle 3 g de periodato de sodio y 3 ml de


solución acuosa de ácido sulfúrico (0.5 mol/l) y diluir a 100 ml con agua
destilada.-

2. Solución acuosa de hidróxido de sodio (5 mol/l, es decir, 200 g/l).

3. Solución acuosa del ácido tricloroacetico (10 mg/l).

Método
1. Agregue 1 ml de reactivo ácido periódico a 1 ml de solución de la prueba (o a
una porción de un residuo sólido extraído con 1 ml de agua) en un tubo de
vidrio de 10-ml de capacidad.-

2. Mezclar y dejar reposar 5 minutos.

3. Separar los tubos y agregar 2 ml de:

(a) solución testigo;

(b) agua destilada;

(c) solución acuosa del ácido tricloroacético

4. Agregue 1 ml de solución de hidróxido de sodio y 1 ml de piridina a todos


los tubos (cuatro) mezcle suavemente y tapar con tapón algo suelto.-

5. Calentar en baño de agua hirviente durante 2 minutos.

Resultados

Un intenso color rojo púrpura en la capa superior de piridina en el tubo


periodato tratado indica la presencia de cloralose. El tubo que tiene la prueba
del análisis sin el periodato se realiza para excluir la presencia de los
compuestos, como hidrato de cloral que da lugar al tricloroacético, el ácido en
el ser vivo. El tubo del análisis blanco excluye la contaminación clorofórmica
de la atmósfera del laboratorio.

Sensibilidad

Tricloroacetato, 1 mg/l.

Interpretación clínica

La ingestión de cloralose puede causar adormecimiento, hipotonía y


coma.
El tratamiento es generalmente sintomático y de sostén.-
Cloroformo

Triclorometano; CHCl3;masa molecular relativa 119

El cloroformo fue usado como un anestésico y como solvente en general, pero


es relativamente tóxico desde que es metabolizado a fosgeno (COCl2)que es
un potente tóxico hepatorrenal.-
El cloroformo puede ser detectado usando el reactivo de Fujiwara.
Aunque este test detectará la ingestión o exposición de cualquier compuesto
que sea metabolizado a ácido tricloroacético como el hidrato de cloral,
dicloroalfenazona y tricloroetileno.

Test cualitativo

Aplicable a orina. Reactivo de Fujiwara -ver monografía de tetracloruro


de carbono. Este test debe ser realizado bajo campana.-

Resultados
Un intenso color rojo/púrpura en la capa superior de piridina indica la presencia
de compuestos del tricloro. El blanco con agua destilada excluye la
contaminación con los compuestos como el cloroformo de la atmósfera del
laboratorio. Otros compuestos reaccionan con esta prueba pero el
tricloroacético es el más común.

Sensibilidad

Tricloroacetato, 1 mg/l.

Interpretación clínica

La intoxicación aguda con cloroformo es rara. Los síntomas clínicos


incluyen ataxia, nauseas, vómitos, coma, convulsiones, depresión respiratoria,
arritmias cardíacas y daño hepatorrenal. El tratamiento es sintomático y de
sostén. La acetilcisteína protege para el daño hepatorrenal. (ver Tabla 4).
Clorofenoxi Herbicidas

Estos compuestos tienen una fórmula general que se muestra abajo.


Algunos herbicidas clorofenoxi más comunes se muestran en la tabla 23.-

Figura 19 : ESTRUCTURA QUIMICA

2,4-D (no debe ser confundido con DNOC, i.e. dinitro-o-cresol, estos
compuestos son usados en el control de extensiones en los céspedes y
cosechas de cereal y control de vegetación para que no crezca mucho. Se
encuentran como mezclas, ambos con otros miembros de este grupo y con
otros pesticidas.

Test cualitativo

Aplicable a contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos

1. Solución acuosa de ácido clorhídrico (1 mol/l).

2. Nitrito de sodio (100 g/l) en ácido sulfúrico concentrado (densidad relativa


1.83), recientemente preparada. Tener cuidado porque liberan humos de
dióxido de nitrógeno.-

3. Acido cromotrópico (2,5-dihidroxinaftaleno-2,7-ácido disulfónico)(2 g/l) en


ácido sulfúrico concentrado (densidad relativa 1.83).

Tabla 23. Algunos herbicidas clorofenoxidos

Compuesto Nombre químico R1 R2 R3 Masa Molecular

2,4-D 2,4-acido-diclorofenoxiacetico Cl H CH2COOH 221


2,4-DP 2-(2,4-acido Diclorofenoxi) Cl H CH(CH3)COOH 235
MCPA 4-Cloro-2-acidometilfenoxiacetico CH3 H CH2COOH 201
MCPP acido(4-Cloro-2-metilfenoxipropiònico)CH3 H CH(CH3)COOH 215
2,4,5-T 2,4,5-acido Triclorofenoxiacetico Cl Cl CH2COOH 256
2,4,5-TP 2-(2,4,5-acidoTriclorofenoxipropìonico)Cl Cl CH(CH3)COOH 270
Metodo

1. Agregue 1 ml de solución de ácido clorhídrico a 10 ml de muestra, y


extraer con 20 ml de tolueno mezclar durante 5 minutos.

2. Centrífugar durante 5 minutos, sacar la parte superior de tolueno y extraer


el residuo con una segunda porción de 20-ml de tolueno.

3. Combinar el extracto de tolueno y evaporar a sequedad bajo un


corriente de aire comprimido o nitrógeno en un baño de agua a 60°C.

4. Disolver el residuo en 0.2 ml de ácido sulfúrico concentrado y dividir entre


dos pocillos de porcelana .

5. Agregar 0.1 ml de solución de nitrito de sodio a uno y 0.1 ml de solución


de ácido cromotrópico al otro pocillo.

6. Calentar la placa de porcelana con una tapa en baño de agua hirviente a


80°C.

Resultados

Los colores dados por algunos compuestos de clorofenoxi más comúnes


son indicados en la tabla 24. Estas pruebas no son específicas y sólo pueden
usarse para indicar la presencia de compuestos del clorofenoxi.

Tabla 24. Reacciones de color de algunos compuestos de clorofenoxi

Compuesto Con nitrito de sodio Con acido cromotrópico

2,4-D marrón púrpura


2,4,-DP marrón oscuro púrpura claro
MCPA marrón claro púrpura claro
MCPP marrón claro púrpura
2,4,5-T no reacciona púrpura
2,4,5-TP no reacciona rosa claro/púrpura

Nombre químico ver tabla 23

Sensibilidad

Compuestos clorofenoxi , 500 mg/l.

Interpretación clínica

La absorción de herbicidas clorofenoxi producen vómitos, diarrea, arreflexia,


calambres musculares, edema pulmonar, y coma, con muerte en casos
severos.- La alcalinización incrementa la excreción renal de 2,4-D y otros
compuestos clorofenoxi y lo que protege la toxicidad sistémica.
Cloroquina

7-Cloro-4-(4-dietilamino-1-metilbutilamino)quinolona; C18H26ClN3;
la masa molecular relativa, 320,

Figura 20 : ESTRUCTURA QUÍMICA

La cloroquina es un derivado de 4-aminoquinolina y normalmente se usa en el


tratamiento de la malaria. La Cloroquina tiene una vida media larga en el
cuerpo (25-60 días) y se forman varios productos metabólicos, inicialmente por
N-dealquilación y deaminacion. Una dois tan pequeña como 1 g de cloroquina
puede causar la muerte en un niño joven, y las fatalidades en los adultos han
ocurrido después de la ingestión de entre 3 y 44 g.

No hay ninguna prueba simple para identifica la cloroquina en fluidos


biológicos, pero este compuesto y sus metabolitos pueden ser identificados por
cromatografía en capa delgada en un extracto solvente básico de orina . Una
vez que la placa se saca del tanque cromatografíco se seca y observa al UV
(254 nm y 366 nm)en donde la quinina, el cloroquina tienen fluorescencia lo
que representa, una característica adicional para ayudar la identificación.

Interpretación clínica

Los envenenamientos agudos por cloroquinas pueden aparecer luego de 30


minutos de la ingestión. Los síntomas clínicos incluyen náuseas, vómitos,
dolor abdominal, diarrea, tinnitus, visión borrosa, vértigo, agitación,
hipotensión, coma, convulsiones y depresión respiratoria. La muerte súbita y el
fallo cardiorespiratorio puede ocurrir en los casos severos. El tratamiento es
sintomático y de sostén, aunque la combinación específica de diazepam y
epinefrina ha demostrado ser eficaz.-
COBRE

Las sales de cobre como el sulfato, cloruro, y carbonato de cobre(II) las sales
de cupramonio como el carbamato de cupramonio (Cu(NH3)2CO3) se usan
como insecticidas y fungicidas. Como con las sales de hierro, las sales de
cobre imparten a menudo un color azul o verde en el contenido estomacal.
Las sales de Cupramonio son mucho más tóxico que sales de cobre debido a
la rápida absorción y a la toxicidad intrínseca del ion del cupramonio.
El envenenamiento agudo también puede producirse por inhalación de humos
de cobre metálicos o el polvo.

Prueba cualitativa

Aplicable al contenido estomacal y a residuos de la escena.

Reactivos

1. Ditiooxamida en el metanol (10 g/l).

2. Hidróxido del amonio concentrado (densidad relativa 0.88).

Método

1. Suavemente colocar 0.1 ml de muestra en un papel de filtro para producir


una mancha no mayor de 1 centímetro de diámetro, secando con secador
si es necesario.

2. Exponer la mancha a vapores de hidróxido de amonio concentrado en


campana y agregar 0.1 ml de ditiooxamida para la resolución de la
mancha.

Resultados

Las sales de cobre dan una mancha color verde - aceituna. Las sales del
cromo también dan una mancha verde que es normalmente visible antes del
agregado de ditiooxamida. Varios otros metales dan amarillo- castaño o colores
del rojo-castaño con este reactivo.

Sensibilidad

Cobre, 1 mg/l.

Prueba confirmatoria

Aplicable para contenido estomacal y residuos de la escena.

Reactivos
1. Solución acuosa de acetato de cinc (10 g/l).

2. Reactivo de mercuritiocianato de amonio. Mezcle 8 g de cloruro mercúrico y


9 g de tiocianato de amonio en 100 ml de agua destilada.

3. Solución acuosa de ácido clorhídrico (0.01 mol/l).

Método

1. Colocar 0.1 ml de muestra en un pocillo de placas de toque de porcelana y


agregar 0.05 ml de ácido clorhídrico diluido.

2. Mezclar 0.1 ml de reactivo de mercuritiocianato de amonio con 0.1 ml de la


solución de acetato de cinc y agregársela al pocillo con la muestra.

Resultado

Un precipitado violeta de mercuritiocianato de cinc indica presencia de sales de


cobre.

Sensibilidad.

Cobre, 50 mg/l.

Ensayo cuantitativo.

Aplicable a plasma o suero (1 ml).

Reactivos.

1. Reactivo de Oxalil dihidrazida


Mezclar 8 ml de oxalil dihidrazida acuoso saturado con, 12 ml de hidróxido de
amonio concentrado (densidad 0.88), 20 ml de acetaldehido (400 ml/l) y 20 ml
de agua destilada.

2. Solución acuosa de ácido tricloroacetico (200 g/l).

3. Solución acuosa de ácido clorhídrico (2 mol/l).

Estándar

Disuelva 1.00 g de la lamina de cobre, malla o alambre en un volumen mínimo


de ácido nítrico (500 ml/l) y llevar a 1 litro con ácido nítrico diluido (10 ml/l).
Diluya porciones de esta solución con agua para dar soluciones que
contengan concentraciones del ion cobre de 1.0, 2.0 y 5.0 mg/l.

Método

1. Agregar 0.7 ml de ácido clorhídrico a 1 ml de muestra y al estándar en un


tubo del centrífugo plástico, mezclar y dejar reposar por 15 minutos.

2. Agregar 1 ml de solución de ácido tricloroacetico y mezclar.

3. Esperar 15 minutos y centrifugar durante 5 minutos.

4. Agregar 3 ml de reactivo de oxalil dihidrazida a 1 ml del sobrenadante.


Dejar descansar por 20 minutos.

Resultados

Leer la absorbancia de la solución a 542 nm contra un blanco de agua (ver


sección 4.5.2)
Trazar una curva de absorbancia vs concentración de cobre de las soluciones
estándar, interpolar el valor hallado de absorbancia en la curva de calibración y
calcular la concentración en la muestra. El gráfico es lineal para las
concentraciones de cobre de 1-25 mg/l.

Sensibilidad

Cobre, 1 mg/l.

Interpretación clínica

La ingestión de cobre o sales de cupramonio producen inicialmente síntomas


gastrointestinales (sabor metálico, náuseas, vómitos, dolor epigástrico y
diarrea). En los casos severos, daño hepático (particularmente en los niños),
daño renal, hemolisis, coma y colapso circulatorio. Las concentraciones
normales de cobre en suero son de 0.7-1.6 mg/l, pero en envenenamiento
agudos severos concentraciones mayores de 5 mg/l pueden encontrarse. El
tratamiento es sintomático y de soporte pero también puede incluir terapia del
quelacion.
Cocaina

Metil benzoilecgonina; (1R,2R,3s,5S)-2-metoxicarboniltropan- 3-yl benzoato;


C17H21NO4;masa molecular relativa , 303

Figura 21 : ESTRUCTURA QUIMICA

La cocaína es un alcaloide obtenido de la coca, las hojas secas de Erythroxylon


y otras especies de Erythroxylon, o por la síntesis de ecgonina. La sal
hidroclorhídrica es un anestésico local muy eficaz , el anestésico se usa en
concentraciones de 10-200 g/l, pero normalmente es aplicado en forma de
tópicos debido al riesgo de toxicidad sistémica.
El abuso de cocaína frecuentemente es por inyección o inhalación (aspirando);
la cocaína ingerida tiene menos efecto porque se hidroliza en el tracto
gastrointestinal.;. La base libre (crack) es rápidamente absorbido cuando fue
inhalado por vía nasal o fumado. La dosis mínima fatal en un adulto es de 1-2
g, pero en un adicto debe tolerar por encima de 5 g/día. El metabolito principal
es la benzolilecgonina, ecgonina y metil ester ecgonina..Sólo el 1-9% de una
dosis intravenosa es excretada en la orina como cocaína, mientras que el 35-
55% es excretado como benzoilecgonina.-
No hay ninguna prueba cualitativa simple para identificar la cocaína, pero este
compuesto y sus metabolitos pueden determinarse por cromatografía de
capa delgada en un extracto solvente básico de orina con testigos indubitables
. Por métodos inmunoquìmicos.-

Interpretación clínica

Los envenenamientos agudos por cocaína causan euforia, inquietud,


vómitos, pirexia, midriasis, delirio, temblor, hiperreflexia, hipertensión,
hiperventilation, convulsiones y fallo cardiorespiratorio. El tratamiento es
sintomático y de sostén.-
Codeina

Metil éster morfina; 3-O-metilmorfina monohidratada; C18H21NO3ÀH2O;


masa molecular relativa 317

Figura 22 : ESTRUCTURA QUIMICA

La codeína es un analgésico narcótico obtenido del opio o por DImetIlacion de


la morfina. La codeína es metabolizada por O-demetilacion y N-demetilacion
para dar morfina y norcodeina, respectivamente, y por conjugación forma
glucuronidos y sulfatos de ambas drogas y metabolitos. La dosis fatal estimada
de codeína en un adulto es 800 mg., aunque la codeína es mucho menos
tóxica que la morfina, la muerte por codeína es rara.
No hay ninguna prueba cualitativa simple para la identificar codeína, pero
pueden determinarse este compuesto y norcodeina por cromatografía en capa
delgada en un extracto solvente básico de orina .-

Interpretación clínica

La sobredosis aguda de codeína produce pupilas mióticas, hipotensión,


hipotermia, coma, convulsiones, edema pulmonar y arritmias cardíacas. La
muerte puede ocurrir por depresión respiratorio profunda. La Naloxona revierte
rápidamente el efecto tóxico central de la codeína.(ver sección 2.2.2).
Actividad de la colinesterasa

Algunos insecticidas como los carbamatos y organofosforados interfieren en la


transmisión nerviosa inhibiendo la acetilcolinesterasa. La medida
semicuantitativa en el plasma de la actividad de la colinesterasa es una medida
simple de exposición a estos compuestos.-

Método cualitativo

Aplicable a plasma o suero.

Reactivos

1. Reactivo ditiobisnitrobenzoato . 5,5'-Ditiobis(más 2-nitrobenzoico) (0.2


g/l) en buffer ortofosfato de sodio dihirogenado (0.1 mol/l, pH 7.4).

2. Solución acuosa de acetiltiocolina iodada (5 g/l).

3. Solución acuosa de cloruro de pralidoxima (200 g/l).

4. Plasma o suero de un expuesto (control plasma).

Método
1. Agregar 2.0 ml de reactivo de ditiobisnitrobenzoato y 1.0 ml de solución de
acetilcolina iodada en cada uno de los tres tubos de 10 ml.-

2. Agregar 20 µl del plasma control a uno tubo y 20 µl del plasma testigo a


un segundo tubo.-

3. Agregar 20 µl de solución de pralidoxima y 20 µl de plasma testigo al


tercer tubo.

4. Mezclar el contenido de todos los tres tubos y dejar descansar a


temperatura ambiente por 2 minutos.-

Resultados

La presencia de un inhibidor de acetilcolinesterasa se indica con el color


amarillo en el tubo testigo y es más profundo que en el tubo problema.- Si el
color en el tubo que contiene la pralidoxima es similar al tubo testigo, esto
proporciona la confirmación extensa que un inhibidor de acetilcolinesterasa
está presente en la muestra .-

Interpretación clínica

La exposición a los pesticida organofosforados puede causar


broncorrea, dolor respiratorio, salivación excesiva, náuseas, debilidad
muscular, y finalmente la parálisis. El tratamiento es de sostén, pero también
debe incluirse la administración de atropina y pralidoxima.-

La exposición a los pesticidas carbamatos causa anorexia, dolor


abdominal, náusea, vómitos, diarrea, lagrimación, aumento de la salivación,
sudor profuso, ansiedad, ataxia y edema pulmonar agudo. La terapia con
antídoto es con atropina , pero la pralidoxima no deben ser usada.-

Método cuantitativo

SECCIÓN DEL PROCEDIMIENTO

1. Aplicación

1.1 Este método es aplicable a la determinación de acetilcolinesterasa


(AcChe) en muestras de sangre.

1.2 El límite de detección de este método es el resultante de considerar el


absorbancia del equipo (en la mayoría de los casos es igual a 0,001 y
corresponde a 287 UI/l)

1.3 El coeficiente de variación se considera aceptable cuando es menor o


igual al 5%.

1.4 Mediante este método se puede determinar la actividad de la


acetilcolinesterasa en un rango de 287 a mayor de 11760 UI/l.

2. Resumen del método

2.1 La AcChe hidroliza a la acetiltiocolina siendo los productos de hidrólisis


acetato y tiocolina. La tiocolina reacciona con el ácido 5,5-ditiobis-2 nitro
benzoico (DTNB) formando el compuesto coloreado 2-nitro-5-
mercaptobenzoato, el cual puede medirse espectrofotométricamente a
405 nm.

2.2 La actividad de la enzima varía con la temperatura por lo cual se


recomienda efectuar la determinación a temperatura constante ± 2º C

2.3 Las temperaturas recomendadas: 25 ó 30º C.

3. Precauciones de seguridad

3.1 Se requiere guantes, anteojos de protección y todas las medidas de


precaución adecuadas para el manipuleo de muestras biológicas.

3.2 Material adecuado para el descarte del material biológico.


3.3 Cada reactivo debe ser considerado como un peligro potencial a la salud
y la exposición a estos compuestos debe ser minimizada por buenas
prácticas de laboratorio.

4. Precauciones

4.1 Solución Tampón- cromógeno: ácido 5,5'-ditiobis-2 nitro benzoico


(DTNB) : 0,26 mmol/l
Conservar en heladera y al abrigo de la luz. Estabilidad 1 mes
aproximadamente.

4.2 Solución de yoduro de acetil tiocolina (sustrato) 156 mmol/l.


Mantener al abrigo de la luz y en heladera. En estas condiciones es
estable durante 7 a 12 días.

4.3 Verificar que la celda de vidrio esté limpia y no presente rayaduras e


imperfecciones.

4.4 Se recomienda efectuar determinaciones con muestras controles cada


vez que los reactivos son renovados.

4.5 Lavado del material de vidrio


Los frascos utilizados para el almacenamiento de las muestras pueden
ser de vidrio borosilicato o polietileno y deben ser lavados y enjuagados
de la siguiente manera:

a) Se lava con solución de detergente especial (extrán alcalino Merck o


similar) para limpieza de material de vidrio.
b) Se enjuaga con abundante agua de grifo para remover los residuos
de detergente.
c) Se enjuaga finalmente con agua destilada.
d) Se seca en estufa a 50 º C.

5. Instrumental/materiales

5.1 Espectrofotómetro UV-Visible con celda portacubeta termostatizada.

5.2 Pehachímetro. Precisión : ± 0,1 unidad de pH.

5.3 Frascos de vidrio de 100 ml y 50 ml.

5.4 Probetas de 100 y 50 ml.

5.5 Pipetas graduadas de 50 y 0,2 ml.

5.6 Pipetas automáticas de 100 y 20 l

5.7 Frascos volumétricos de 50 y 100 ml.


6. Reactivos

Nota: Se debe utilizar reactivos de grado analítico o superior y que


cumplan con normas internacionales de calidad (ACS, ISO).

Nota: Todos los reactivos se deben almacenar en recipientes


adecuados, provistos de etiquetas indicando el nombre del reactivo,
fecha de preparación e iniciales del analista.

6.1 Solución de Na2HPO4 .12H2O 52 mmol/l.


Pesar 1,86 g de la droga sólida y llevar a 100 ml con agua destilada.

6.2 Solución de NaH2PO4 .2H2O 52 mmol/l.


Pesar 0,405 g de la droga sólida y llevar a 50 ml con agua destilada.

6.3 Solución Tampón fosfato: Na2HPO4 / NaH2PO4 : 52 mmol/l pH= 7,2


Colocar aproximadamente 65 ml de la solución de Na2HPO4 y 35 ml de
la solución de NaH2PO4 en un vaso de precipitado de 250 ml. Ajustar el
pH a 7,2.

6.4 Solución Tampón- cromógeno: ácido 5,5-ditiobis-2 nitro benzoico


(DTNB) : 0,26 mmol/l
Pesar 10,3 mg del DTNB y disolverlos en 100 ml de la solución tampón.

6.5 Solución de yoduro de acetil tiocolina (sustrato) (Sigma - Nº de catálogo


A 5751) 156 mmol/l.
Pesar 90 mg de la droga sólida y disolverla en 2 ml de agua destilada.

7. Calibración del equipo

7.1 Para el manejo del espectrofotómetro UV-visible, consúltese el manual


de operación del equipo.

7.2 Se enciende la computadora

7.3 Se enciende el espectrofotómetro UV-visible, el monitor y la impresora.

7.4 Se ingresa el nombre del analista.

7.5 Se introducen los siguientes datos:

a) Longitud de onda (λ): 405.0 nm.


b) Nombre del analito:acetilcolinesterasa.
c) Tipo de reacción: cinética.
d) Reporte de datos:delta absorbancia / minuto.

7.6 Se coloca la celda de vidrio con los reactivos excepto la solución de


sustrato y se ajusta la temperatura a 25 ó 30 º C. Esperar que la
temperatura se estabilice.
7.7 Agregar la solución del sustrato. Agitar bien.

7.8 Se realizan las lecturas de absorbancia cada 30 segundos o por minuto.

8. Muestra

8.1 Sangre entera heparinizada (5 ml). Otros anticoagulantes como citrato,


fluoruro u oxalato producen una leve inhibición de las enzimas.

8.2 Centrifugar la muestra de sangre a fin de separar el suero del paquete


globular.

8.3 Lavar el paquete globular 3 veces con solución fisiológica, centrifugando


cada vez la suspensión y descartar los líquidos de lavado.

8.4 Tomar 100 l del paquete globular de la parte media del centrifugado,
colocarlo en otro tubo y agregarle 2,4 ml de agua destilada a fin de
obtener una dilución 1/25.

8.5 Se produce en estas condiciones la hemólisis de los glóbulos rojos.


Homogeinizar bien.

9. Procedimiento de análisis

9.1 En la cubeta del espectrofotómetro mantenida a 25º ó 30º C colocar 3 ml


de la solución tampón fosfato - cromógeno y 20 l del hemolisado de la
muestra

9.2 Se agita y se Incuba durante 3 minutos.

9.3 Si agregan 100 l de la Solución de yoduro de acetil tiocolina (sustrato)


y se mezcla bien.

9.4 Leer la absorbancia inicial y cada 30 segundos durante 2 -3 minutos a


405 nm

Tampón fosfato - 3 ml
cromógeno
Hemolisado de la muestra 20 l
Incubar 3-4 minutos
Sustrato 100 l
Mezclar bien
Leer a 405 nm
10. Análisis de datos

10.1 La actividad de la acetilcolinesterasa se expresa en UI/l según el


siguiente cálculo:

UI/l = Abs/min. x106x vol. final del ensayo (l) x f de dil.


 x paso óptico(cm) x vol. de muestra (l)

Vol. final del ensayo = 0.00312 l


Vol. de muestra = 0.000020 l
Paso óptico = 1 cm
f. de dil. = factor de dilución
=coeficiente de extinción molar =13600 l /mol x cm
106 = por pasar micromoles a moles

UI/l = Abs/min x106x 0.00312 x f dil


13600x1 x 0.00002 (l)

UI/l = Abs/min x 11470x f dil.

10.2 Valores de Referencia (30 ºC): 7120 – 11760 U/l

SECCIÓN DE CONTROL DE CALIDAD

1. Control de la exactitud

Para comprobar la exactitud del análisis se puede usar una muestra de


control externo de la actividad de la esterásica y/o de control interno, (un
pool de plasma o suero de individuos sanos no expuestos a sustancias
inhibidoras de las enzimas colinesterasas). Se compara el resultado con
su valor de referencia y límites de aceptación. Cuando el resultado no se
encuentre dentro del rango de los límites, se debe revisar el
procedimiento y repetir el análisis.

2. Control de la precisión

En el caso del análisis de una serie de muestras, se debe realizar un


duplicado en cada lote de 6 muestras. La diferencia entre la muestra y el
duplicado no debe ser mayor de 15 %.

3. Cartas de control

Se debe mantener al día las cartas de control para las muestras


duplicadas y el estándar de control interno.
CUMARINA (ANTICOGULANTE)

Fenprocoumon:4-hidroxi-3-(1-fenilpropil)cumarina:C18H16O3; masa molecular


relativa:280 y warfarina (4-hidroxi-3-(3-0xi-1fenilbutil)cumarina, C19H16O4; masa
molecular relativa:308) son sustituidos por 4-hidroxicumarina.

Figura 23 : ESTRUCTURA QUÍMICA

Estos compuestos se usan ampliamente como agentes terapéuticos. La


warfarina es también usada como un rodenticida. Las dos sustancias inhiben la
coagulación de la sangre por interferencia de la síntesis de los factores de
coagulación vitamina-K-dependiente
Su acción es acumulativa por lo tanto la toxicidad normalmente resulta de la
administración crónica. En el contraste, la toxicidad aguda puede ocurrir con
una sola dosis grande de un rodenticida "superwarfarinico" como el
difenacuom o brodifacuom.

El tiempo de protombina proporciona un método simple no especifico de


medición de la severidad de envenenamientos de anticoagulantes y para el
monitoreo del tratamiento. El método siguiente puede usarse para evaluar las
concentraciones en plasma de fenprocoumon y warfarina.

Prueba cualitativa

Aplicable a plasma o suero (1.0 ml).

Reactivos

1. Solución acuosa de ácido clorhídrico (1 mol/l).

2. n- butil acetato: cloroformo : solución acuosa de ácido fórmico(850 ml/l)


(60:40: 10).

3. Trietilamina (50 g/l) en n-hexano.

4. Cromatografía en capa fina .

Estándares

Suero de concentraciones de fenprocoumon o de warfarina de 0,1, 5 y 10 mg/l.


Método

1. A 1.0 ml de la muestra o estándar se agrega 0.9 ml de ácido clorhídrico


diluido, 0.1 ml de acetona y 5 ml de cloroformo.

2. Mezclar durante 2 minutos en un agitador mecánico y centrifuga por 10


minutos.

3. Retira la capa superior acuosa, filtrar el extracto a través de papel de filtro.El


extracto se evapora a sequedad bajo aire comprimido o nitrógeno.

Cromatografia en capa delgada.

1. Disolver el residuos en 50 µl de cloroformo, sembrar en la placa y


desarrollarla hasta una altura de 10 centímetros.
Solvente de corrida: n-butil acetato: cloroformo: ácido fórmico.
Saturar la cuba .

2. Permitir que el solvente se evapore completamente, desarrollar de nuevo


en
Solvente de corrida: Trietilamina:n-hexano, observar bajo la luz ultravioleta
(366 nm).

Resultados

La Warfarina (Rf aproximadamente 87) muestra una fluorescencia purpúrea


oscura, el fenprocoumon (Rf aproximadamente 95) una púrpura más brillante.
Las concentraciones plasmáticas de cualquier compuesto pueden ser
evaluadas por la comparación con los resultados obtenidos de las estándares
normales

Sensibilidad

Warfarina o fenprocoumon 0.5 mg/l.

Interpretación clínica

Las características de envenenamiento agudo con los anticoagulantes incluyen


la aparición de petequias, formación del hematomas y hemorragia franca,
sobre todo de los tractos genitourinarios y gastrointestinales. Las
concentraciones de suero de cualquier compuesto mayor que 5 mg/l son
acompañados a menudo por complicaciones hemorrágicas. El fenprocoumon y
la warfarina tienen una vida media en plasma larga (6 - 7 días y 0.5 - 3 días
respectivamente), y pacientes con concentraciones altas en el suero deben
tratarse rápidamente. La terapia consiste en suplementacion con vitamina K
hasta que el tiempo de protombina llegue al rango normal. En los casos muy
severos pueden considerarse la administración intravenosa de plasma fresco
o los factores de la coagulación purificados.

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