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Documentos 184
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Exemplares desta publicao podem ser adquiridos na: Embrapa Meio-Norte Av. Duque de Caxias, 5.650, Bairro Buenos Aires, Caixa Postal: 01 CEP 64006-220 Teresina, PI. Fone: (86) 3089-9100 Fax: (86) 3089-9130 Home page: www.cpamn.embrapa. Email: sac@pamn.embrapa.br Comit de Publicaes Presidente: Flvio Flavaro Blanco, Secretria Executiva: Lusa Maria Resende Gonalves Membros: Paulo Sarmanho da Costa Lima, Fbio Mendona Diniz, Cristina Arzabe, Eugnio Celso Emrito Arajo, Danielle Maria Machado Ribeiro Azevdo, Carlos Antnio Ferreira de Sousa, Jos Almeida Pereira e Maria Teresa do Rgo Lopes Supervisor editorial: Lgia Maria Rolim Bandeira Revisor de texto: Francisco David da Silva Normalizao bibliogrfica: Orlane da Silva Maia Editorao eletrnica: Jorim Marques Ferreira Foto da Capa:Aderson Soares de Andrade Jnior 1a edio 1a impresso (2008): 300 exemplares Todos os direitos reservados. A reproduo no-autorizada desta publicao, no todo ou em parte, constitui violao dos direitos autorais (Lei no 9.610). Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP) Embrapa Meio-Norte Ribeiro, Ricardo Pereira Delineamento de programas de melhoramento gentico de espcies aqcolas no Brasil / Ricardo Pereira Ribeiro e ngela Puchnick Legat. Teresina : Embrapa Meio-Norte, 2008. 25 p. ; 21 cm. - (Documentos / Embrapa Meio-Norte, ISSN 0104-866X ; 184). 1. Aquicultura. 2. Espcie. 3. Reproduo. 4. Linhagem. 5. Manejo. I. Legat, ngela Puchnick. II. Embrapa Meio-Norte. III. Srie.
CDD 639.8 (21. ed.)
Embrapa, 2008
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Autores
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Apresentao
A aplicao da tecnologia do melhoramento gentico em espcies de animais aquticos tem sido menor em comparao s espcies terrestres, mas existe um grande potencial para sua expanso vinculado ao aumento da demanda mundial por alimentos. Desta forma, justificam-se o planejamento, o desenho e a implantao de pesquisa, desenvolvimento e transferncia de tecnologia de programas de melhoramento em espcies aquticas. O projeto "Melhoramento de espcies aqcolas no Brasil", componente da Rede Aquabrasil "Bases tecnolgicas para o desenvolvimento sustentvel da aqicultura no Brasil", pertence programao atual de pesquisa da Embrapa, dentro do Macroprograma 1 "Desafios Nacionais" e vem sendo liderado pela Embrapa Meio-Norte desde 2007. Esse projeto tem como objetivo geral estabelecer e consolidar um programa nacional de reproduo seletiva para as espcies aquticas no pas e implementar estratgias para a disseminao dos indivduos de alto desempenho a aqicultores, integrando o uso das linhagens melhoradas s boas prticas de manejo embasadas na nutrio, biossegurana, conservao ambiental e produtos de valor agregado. Dentro desse objetivo, foram selecionadas quatro espcies de importncia para o Brasil: o camaro marinho do Pacfico (Litopenaeus vannamei), a tilpia do Nilo
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(Oreochromis niloticus), o tambaqui (Colossoma macropomum) e a cachara (Pseudoplatystoma reticulatum). Por meio dessa iniciativa, a Embrapa, em parceria com diversos rgospblicos e privados vem participando ativamente da implantao e conduo de programas de melhoramento, de modo a contribuir para o salto tecnolgico e o desenvolvimento sustentvel da aqicultura brasileira.
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Sumrio
Delineamento de Programas de Melhoramento Gentico de Espcies Aqcolas no Brasil ............ Introduo ...................................................... Componentes de um programa de melhoramento gentico ......................................................... Sistema de produo ........................................ Escolha da espcie, variedades e sistema de cruzamento..................................... ..................
Estabelecimento de uma populao-base - O exemplo da tilpia do Nilo (Oreochromis niloticus), estoque GIFT, no Paran...................................
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Elaborao dos objetivos ou metas do cruzamento................................................ ........ Mtodo de seleo (desenvolvimento do critrio de seleo, desenho do sistema da avaliao gentica e seleo dos animais e sistema de acasalamento). ................................................
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Desenho do sistema de disseminao do estoque melhorado............................ ............................ Controle para estimar o ganho gentico (monitoramento)..................................... ........... Benefcios esperados de um programa de melhoramento ................................................. Referncias Bibliogrficas ........................................
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Introduo
O melhoramento gentico animal, apesar de ter a fundamentao terica desenvolvida h muitos anos, tem recentemente sido impulsionado pela demanda crescente por competitividade das atividades de produo e pela importncia cada vez maior, da qualidade do produto e da eficincia da produo nas mais diferentes espcies exploradas comercialmente (EUCLIDES FILHO, 1999). Nas espcies de animais terrestres (e.g. bovinos de leite, sunos e aves) os programas de melhoramento tm proporcionado uma contribuio substancial para a viabilidade e produtividade industrial. Por isso, o melhoramento gentico pode ser considerado como uma das aes propulsoras do desenvolvimento de uma atividade pecuria, pois os esforos concentrados nessa rea promovem a mudana nos gentipos existentes, de forma a permitir avanos produtivos e requerer novas pesquisas nas demais reas do conhecimento, como sanidade, alimentao-nutrio, reproduo e manejo (LBO, R.N.B.; LBO, A.M.B.O., 2007).
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A aplicao da tecnologia do melhoramento gentico em espcies de animais aquticos tem sido comparativamente menor, mas existe um grande potencial para expanso imposta pela crescente demanda mundial por alimentos. Desta forma, justificam-se o planejamento, o desenho e a implantao de pesquisa, desenvolvimento e transferncia de tecnologia de programas de melhoramento em espcies aquticas. Fundamentalmente, a melhoria gentica de qualquer espcie se processa com base na escolha correta daqueles animais que participam do processo de constituio da gerao seguinte. As ferramentas disponveis para isso so: seleo e cruzamento. A seleo, de modo geral, tem o objetivo de melhorar e/ou fixar alguma caracterstica de importncia, permitindo que os melhores indivduos de uma gerao sejam pais da gerao subseqente. O cruzamento uma forma de acasalamento entre indivduos dentro e entre espcies/variedades diferentes, que ocorre no sentido de alcanar incrementos de produo e de produtividade. A associao dessas duas ferramentas conduz a uma sinergia positiva nos programas de melhoramento para a orientao e sinalizao do sucesso dos cruzamentos. Os programas de melhoramento gentico apresentam atributos altamente desejveis: 1. O poder de modificar o animal para atendera um objetivo ou ao meio ambiente; 2. Melhoria da produtividade, confiana e consistncia da produo na medida emque o ganho pode ser permanente; 3. Aumento da tolerncia a patgenos existentes ou emergentes e a desafios ambientais; 4. Melhoria do retorno favorvel ao investimento;
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5. Diminuio da distncia entre oferta e demanda sem causar impacto ambiental negativo; 6. Ferramenta para o controle da consanginidade no sistema de produo. A experincia com a tilpia do Nilo (Oreochromis niloticus) e com outras espcies mostra que o melhoramento gentico na taxa de crescimento pode ser de 15% por gerao em programas bem conduzidos (PONZONI et al., 2005). O intervalo de gerao, isto , a mdia da idade dos reprodutores na primeira reproduo depender do tempo necessrio para atingir a maturidade sexual. desejvel manter o intervalo entre 9 a 12 meses para ter, no mnimo, uma gerao por ano.
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Geralmente essas etapas podem ser feitas nessa ordem, mas no necessariamente. Podem ocorrer interaes que provoquem modificaes e alterem o curso da ao. Deve-se notar que essencial dar ateno a todos esses aspectos para a conduo e implementao de um programa de melhoramento gentico efetivo.
O sistema de produo
A identificao do sistema de produo para o qual se procura o melhoramento gentico importante porque influencia a escolha do ambiente no qual o programa ser conduzido. A princpio, o programa de melhoramento gentico dever ser conduzido em um ambiente o mais semelhante possvel com o sistema de produo no qual os peixes sero cultivados. Isso assegura que o ganho gentico obtido no centro de cruzamento tambm ser conseguido em tanques de produo. Se o ambiente no qual foi feita a seleo muito diferente ou seja, muito melhor, h o risco de que parte do ganho obtido no centro de cruzamento no seja manifestada no ambiente de produo. Evidncias experimentais, entretanto, mostram que afortunadamente os peixes superiores em um ambiente so, muitas vezes, superiores em outros ambientes, ou, em termos tcnicos, que o gentipo pelo ambiente relativamente pouco importante (PONZONI, 2006; PONZONI et al., 2005). De qualquer forma, a lgica indica que o programa de melhoramento gentico dever ser conduzido em ambiente semelhante ao(s) sistema(s) de produo pretendido(s).
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Estabelecimento de uma populao base para melhoramento o exemplo da tilpia do Nilo (Oreochromis niloticus), estoque GIFT, no Paran
A partir do estoque importado da Malsia (WordFish Center) em 2005 e instalado na Estao de Piscicultura da Universidade Estadual de Maring (PR), um total de 480 reprodutores foram mantidos em tanques-rede ("hapas"), separados por famlia e marcados individualmente com "chips" eletrnicos ("tags"). Desses reprodutores, foram selecionados pelo peso aos sete meses, 60 machos e 60 fmeas, que foram distribudos em tanques-rede de 1 m3, de modo que se formaram 60 casais, sendo que machos de uma famlia foram acasalados com fmeas de outra famlia para aumentar a variabilidade gentica e o controle da consanginidade. Desse modo, foram formadas 60 famlias, as quais deram origem populao base de primeira gerao. A partir dessa populao base, os machos e as fmeas utilizados como reprodutores foram separados antes do cruzamento. Uma fmea foi estocada em cada um dos 60 hapas de cruzamento (tamanho de 1x1x1 m3) instalados no mesmo tanque. Cada macho foi utilizado com uma fmea para produzir grupos de famlias completas. Todos os hapas foram inspecionados uma vez por semana para a identificao de larvas. As larvas foram coletadas separadamente de cada hapa e transferidas para uma densidade padro (200 larvas) para hapas "creches" (tamanho de 1x1x1 m3) localizados no mesmo tanque. A data de coleta das larvas foi registrada e foi possvel usar dois ou mais hapas para cada grupo familiar. Isso resultou em aproximadamente 90 famlias completas. Depois de trs ou quatro semanas nos hapas "creches", as larvas foram transferidas para uma densidade menor para hapas "B-net" at atingir em um peso de 3 a 5 g. Um total de 60 alevinos foram identificados individualmente de cada famlia, totalizando 3600 alevinos em cada gerao, e estocados comunitariamente em um tanque com manejo semi-intensivo.
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De cada famlia, aos trs meses, foram selecionados quatro machos e quatro fmeas de melhor crescimento, que foram acasalados em 120 hapas (um por casal) de 1 m3, fixando-se para as geraes seguintes uma populao base de 120 casais (famlias). A partir dessa gerao, os casais foram formados por estimativas de parmetros genticos baseados em dados de parentesco.
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O objetivo do cruzamento pode incluir caractersticas como: tamanho ou taxa de crescimento, idade de maturidade sexual, resistncia s doenas, tolerncia temperatura, salinidade ou outros atributos da gua, qualidade do fil e converso alimentar. Destas, a taxa de crescimento (ou tamanho numa determinada idade) tem sido a mais popular devido sua importncia no sistema de produo. Num ciclo de produo de durao fixa, uma grande taxa de crescimento resulta em peixes grandes. Quando queremos peixes de um determinado tamanho, o rpido crescimento permite a sua produo em um perodo menor de tempo. Nas duas situaes h vantagens para o produtor. Temos que admitir que a taxa de crescimento tem sido a caracterstica preferida, pois o seu impacto percebido facilmente e pode ser medido. H riscos, entretanto, em simplificar o objetivo do cruzamento a uma caracterstica, pois podem ocorrer respostas correlacionadas desfavorveis. Mesmo quando no for includo formalmente o objetivo do cruzamento, as caractersticas importantes percebidas no sistema de produo devero ser monitoradas cuidadosamente.
Mtodo de seleo (desenvolvimento do critrio de seleo, desenho do sistema da avaliao gentica e seleo dos animais e sistema de acasalamento)
O critrio de seleo o processo de medio de uma caracterstica ou de um conjunto de caractersticas, a partir das quai, ser feita a escolha dos indivduos. Tem caractersticas estreitamente relacionadas, mas no necessariamente idnticas s caractersticas do objetivo do cruzamento. O objetivo do cruzamento significa "aonde vamos" com o programa de melhoramento gentico, enquanto o critrio de seleo significa "como atingiremos isso". O critrio de seleo representa as caractersticas que usaremos na estimativa dos valores de cruzamento e o mrito gentico geral dos animais para o retorno econmico da seleo.
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O critrio de seleo pode ser diferente das caractersticas do objetivo do cruzamento. Por exemplo, podemos estar interessados no aumento do peso na comercializao, mas podemos usar como base na nossa seleo os pesos obtidos em idade anterior quela ao atingir o peso do mercado, numa tentativa de acelerar o processo de seleo, escolhendo mais cedo os animais para o cruzamento. Nesse caso, devemos ser capazes de selecionar os peixes quando eles tiverem, ou se aproximarem do peso de comercializao, onde o critrio de seleo dever ser o mesmo que a caracterstica do objetivo do cruzamento. O sistema de avaliao gentica pode variar de algo muito simples, envolvendo seleo massal, at algo muito mais complexo, envolvendo a adaptao de um modelo animal para os dados. Como os peixes sero identificados individualmente ("tagged"), seremos capazes de manter informaes dos "pedigrees" e a utilizao do procedimento BLUP ("best linear unbiased prediction"), estimando os valores de cruzamento (EBVs "estimated breeding values") combinando a informao disponvel. BLUP um mtodo estatstico de predio de variveis aleatrias, como os valores genticos e genotpicos, que incorpora os registros de desempenho dos indivduos a partir de informaes sobre seus parentes, levando em considerao a tendncia gentica ao longo do tempo e as fontes de variao genticas e ambientais existentes. O procedimento BLUP uma alternativa melhor que a seleo massal ou a seleo clssica entre e dentro das famlias. Na estimativa dos valores de cruzamento (EBVs) pelo BLUP, utilizada a informao tanto de cada individuo como daqueles relacionados na populao. O ideal seria somente reproduzir os "melhores" indivduos. Na prtica, precisamos assumir um compromisso entre a intensidade de seleo e o tamanho efetivo da populao para manejar o risco da consanginidade. O aumento da consanginidade proporcional a Ne, onde Ne o tamanho efetivo da populao. necessrio um Ne relativamente grande para:
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- Manter a variao gentica na populao em longo prazo; - Manejar a consanginidade; - Aumentar o limite de seleo; - Ter respostas previsveis para a seleo. Com a informao do "pedigree" completo, a consanginidade poder ser manejada de forma mais efetiva, evitando-se o cruzamento de indivduos estreitamente relacionados. O "software" permite a seleo para altos EBVs e, ao mesmo tempo, restringe a taxa de consanginidade em um valor pr-determinado (PONZONI; JAMES, 1978). Depois do acasalamento inicial para estabelecer a populao base, sero utilizados 50 machos e 100 fmeas de cada gerao. Uma vez que um grande nmero desses acasalamentos tenha sucesso, isso permitir um satisfatrio tamanho efetivo da populao, o qual, integrado com medidas para evitar a consanginidade, produzir um ganho gentico sustentado durante vrias geraes.
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DESOVA E FERTILIZAO NATURAL MF No. 1 M F No. 2 .... HAPAS DE REPRODUO ..... M F No. 60
T. CRESCIMENTO
T. CRESCIMENTO
T. CRESCIMENTO
Figura 1. Acasalamento do estoque parental e criao da prognie para a prxima gerao de seleo. Fonte: Ponzoni et al. (2005), adaptada pelos autores.
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ESTOCAGEM DOS 1/3 DOS MELHORES REPRODUTORES PARA A PRODUO DE ALEVINOS EM MASSA
REPRODUTORES J UTILIZADOS
FIGURA 2
CULTIVO DE ESTOQUE DE REPRODUTORES MELHORADOS E PRODUO EM MASSA DE ALEVINOS PARA ALEVINOCULTORES E ESTAES DE ALEVINAGEM PROGNIE DE 120 FAMLIAS DE IRMOS COMPLETOS PARA TESTE
Figura 2. Seleo de reprodutores e disseminao de peixes melhorados a produtores. Fonte: Ponzoni et al. (2005), adaptada pelos autores.
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Estabelecer um procedimento de controle do ganho gentico em um programa de melhoramento no um requerimento obrigatrio para se obter resposta seleo. Incluir uma rotina para o controle do ganho gentico pode, todavia, tornar possvel a checagem para avaliar-se o que foi feito foi vlido ou no, ou se o programa precisa de ajustes por outras razes. Ao mesmo tempo em que reprodutores grandes so selecionados, 20 machos maduros com o peso mdio da populao de machos e 20 fmeas maduras com o peso mdio da populao de fmeas sero selecionados (a mdia dever ser determinada de uma amostra de 200 peixes). Esses reprodutores sero utilizados como grupo controle. Suas prognies sero usadas para estimar o ganho gentico de cada gerao de seleo. Aps a prognie de um casal do grupo selecionado e de um casal do grupo controle ter sido cultivado na fase de larvicultura, em separado 30 larvas de cada hapa contendo prognies de cada par do grupo selecionado e 150 larvas de cada hapa contendo prognies de cada par do grupo controle devero ser criadas, como mostra a Figura 3. O mesmo procedimento poder ser repetido com 3000 (20 x 150) prognies dos reprodutores do grupo controle (Figura 3). Os seis hapas de larvicultura devero estar no mesmo tanque para fornecer o mesmo ambiente para todos os animais. Na fase de alevinagem, cerca de 330 alevinos de cada hapa de larvicultura sero transferidos para hapas de crescimento, onde sero criados at a fase de juvenis. Os juvenis sero criados em hapas at poderem ser marcados individualmente e separados em dois grupos independentes, sendo um para a populao controle e outro para a populao selecionada. Os indivduos dos dois grupos devero ser marcados da mesma forma para isolar esse efeito sobre o crescimento. Cerca de 100 juvenis marcados
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para cada hapa, isto , 300 amostrados aleatoriamente da prognie do estoque de selecionados e 300 da prognie da populao controle, sero estocados em um viveiro comunitrio de crescimento at atingirem cerca de 400 a 450g. Os peixes sero estocados em baixa densidade e alimentados ad libitum, duas vezes ao dia, para permitir um bom desempenho de crescimento. A diferena no peso corporal mdio entre os dois grupos representar a resposta seleo da gerao anterior. O procedimento ser repetido em cada gerao.
Mdia (20 machos e 20 fmeas)
1000 LARVAS
1000 LARVAS
1000 LARVAS
1000 LARVAS
1000 LARVAS
1000 LARVAS
HAPAS DE LARVICULTURA
300 ALEVINOS
300 ALEVINOS
300 ALEVINOS
300 ALEVINOS
300 ALEVINOS
300 ALEVINOS
HAPAS DE CRIAO
Figura 3. Controle do ganho gentico. Comparao da prognie de reprodutores selecionados com a prognie do grupo controle. Fonte: Ponzoni et al. (2005), adaptada pelos autores.
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Referncias
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