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Table Of Contents

1.1. La famiglia delle ribonucleasi
1.5. Azione citotossica delle Ribonucleasi
1.7. Ingegneria dei tessuti e angiogenesi
2. PARTE SPERIMENTALE
2.1. Isolamento e purificazione delle proteine
2.1.1. Isolamento delle proteine da latte vaccino fresco
2.1.2. Purificazione delle proteine
2.3. Analisi spettroscopiche
2.3.1. Spettroscopia di assorbimento UV
2.3.2. Determinazioni tramite spettroscopia in fluorescenza
2.3.3. Analisi di dicroismo circolare
2.4.1.Preparazione dei peptidi 103-124 e 56-61dal peptide triptico n°9
2.5. Saggio di attività ribonucleolitica
2.6. Preparazione di soluzioni delle proteine e dei peptidi
2.7. Colture cellulari
2.7.1.1. Estrazione di cellule endoteliali da vena di cordone ombelicale
2.7.2. Colture di linee cellulari
2.7.3. Isolamento e coltura di preadipociti umani
2.8. Valutazione dell’effetto citotossico su colture cellulari
2.8.1. Valutazione della vitalità cellulare
2.8.2. Valutazione della necrosi
2.8.3. Valutazione dell’apoptosi
2.11. Saggio di migrazione cellulare
2.14. Sistemi di coltura tridimensionali
2.14.1.1. Preparazione della matrice di policaprolattone
2.14.2.1. Sistema di coltura tridimensionale in Puramatrix
2.14.2.2. Saggio di vitalità cellulare
2.15. Valutazione della citotossicità su colture cellulari non endoteliali
3. RISULTATI E DISCUSSIONE
3.1 Isolamento e purificazione delle proteine da latte vaccino
3.3. Analisi Spettroscopiche
3.3.1. Spettri di assorbimento UV
3.3.2. Spettri in emissione di fluorescenza
3.3.4. Spettri di Dicroismo Circolare
3.4.2. Preparazione dl peptide RCM-I e RCM-II
3.6.2. Isolamento e caratterizzazione di preadipociti umani
3.7. Studio dell’effetto citotossico su colture di cellule HUVEC
3.7.1. Saggio di vitalità cellulare MTS
3.7.2. Analisi dell’induzione di apoptosi e necrosi
3.8. Valutazione della proliferazione cellulare
3.9. Saggio di angiogenesi in vitro su Matrigel
3.10. Saggio di migrazione e invasione cellulare
3.12. Sistemi di coltura tridimensionale
3.12.1. Colture di cellule HUVEC su supporti di PCL
3.12.2. Colture di cellule HUVEC incapsulate in Puramatrix®
3.13.1. Citotossicità su cellule di linea tumorali
3.13.2. Citotossicità su pre-adipociti umani
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TESI_MariaLetiziaFinezzo

TESI_MariaLetiziaFinezzo

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12/01/2013

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