www.clopotel.

ro

NOIUNI DE GENETIC UMAN Scurt istoric Primele observaii asupra unor maladii i malformaii ereditare la om au fost fcute nc n antichitate de ctre Hippocrates (460-370 .e.n.), ntemeietorul medicinei, care a remarcat c unele marformaii au o frecven mult mai mare n unele familii. n secolul XVIII-lea medicul P. Maupertius a nceput unele cercetri privind incidena familial pe baze statistice a unor malformaii cum este polidactilia, sau a unor maladii ereditare cum este albinismul. n secolul al XIX-lea F. Galton a elaborat metoda studiului gemenilor monozigoi. Redescoperirea legilor lui Mendel la nceputul secolului XX a determinat avntul cercetrilor de genetic uman i au dus la descoperirea faptului c unele caractere ereditare se transmit dup tipul mendelian. O contribuie remarcabil la dezvoltarea cercetrilor de genetic uman a avut medicul englez A.E. Garrod, care a descoperit existena unor maladii metabolice ereditare. Dezvoltarea citogeneticii a dus, printre altele, i la studiul amnunit al cromozomilor umani. Astfel, n anul 1956 doi cercettori suedezi au publicat un articol n care artau c numrul cromozomilor n celulele umane este de 46, ca urmare a studiilor ntreprinse asupra a peste 265 de celule embrionare cultivate artificial. n anul 1958, odat cu descoperirea c fitohemaglutinina, o substan extras din fasole, este capabil s induc diviziunea leucocitelor, a devenit posibil cultura de snge periferic, metod rapid i foarte eficient de studiu a cromozomilor umani. n anul 1959, J.Lejeune, M.Gautier i R.Turpin au descoperit c sindromul Down, cunoscut nc din secolul XIX, este cauzat de trisomia 21. Din acest moment se poate spune c citogenetica uman a devenit o disciplin medical. Ulterior, o dat cu elaborarea metodelor de bandare cromozomial s-au fcut progrese importante n studiul cariotipului uman, n identitatea restructurrilor numerice i structurale ale cromozomilor, corelat cu diverse maladii ereditare i malformaii congenitale. Cercetrile de genetic uman au luat n ultima vreme amploare, astfel c s-a reuit identificarea a cca 2500 de maladii ereditare, numr n continu cretere. S-au fcut progrese n elaborarea hrii genetice a omului, pn n prezent reuindu-se plasarea exact a ctorva sute de gene pe diferii

www.clopotel.ro

cromozomi, precum i n studiul comparativ al cariotipului uman i a diferitelor specii de primate. Pentru elaborarea hrilor cromozomiale se folosesc urmtoarele metode: - Metode citogenetice, prin care se coreleaz prezena diverselor gene cu diferite restructurri cromozomiale (deleii, duplicaii, inversii, translocaii) sau cu aneuploidii; - Hibridarea celular care se bazeaz pe eliminarea difereniat a cromozomilor umani din celulele hibride i corelarea prezenei genelor cu anumii cromozomi neeliminai. Prin iradiere se pot produce rupturi ale cromozomi umani neeliminai astfel c genele se pot plasa chiar pe anumite segmente ale unui cromozom; - Hibridarea molecular a unui anumit tip de ARN marcat cu izotopi, cu o anumit regiune cromozomial. Prin microautoradiografie este apoi posibil identificarea poziiei genei care determin sinteza ARN-m, pe baz de complementaritate. De asemenea, s-a elaborat o metod rapid i foarte eficient de determinare a sexului genetic, prin testul cromatinei sexuale, iar dezvoltarea geneticii medicale a permis punerea pe baze tiinifice a consultaiilor genetice. Deoarece n prezent se admite c circa 12% din populaie este constituit din indivizi cu maladii genetice sau parial genetice, problema profilaxiei maladiilor ereditare, precum i a prognozei apariiei lor are o importan deosebit. Ca urmare au aprut i s-au extins clinicile de boli ereditare, precum i centrele de sfaturi genetice, care permit stabilirea unui diagnostic corect al maladiilor ereditare, detectarea purttorilor etc.

Determinismul genetic al unor caractere ereditare normale

Studiile de genetic uman au artat modul cum se transmit la descendeni o seam de caractere normale i patologice. Astfel s-a dovedit c mutaiile genelor nu determin ntotdeauna maladii ereditare. n multe cazuri ele determin apariia unor genotipuri i respectiv fenotipuri variate, fapt care mrete variabilitatea n interiorul speciei umane. Existena unei mari variabiliti intraspecifice contribuie la realizarea unei adaptri mai bune la condiiile schimbtoare ale mediului. De exemplu, existena unor gene pentru pigmentaie cu caracter aditiv, mrete posibilitiile de adaptare uman la condiii variate de insolaie existente pe glob. Un capitol bine studiat l constituie determinismul genetic al grupelor sanguine i frecvena lor n cadrul speciei umane. nc din anul 1900,

www.clopotel.ro

K.Landsteiner a remarcat c prin amestecarea globulelor roii ale sngelui de la o persoan, cu serul sanguin de la alt persoan, n unele cazuri se observ fenomenul de aglutinare, iar n altele nu. Pe baza a numeroase cercetri s-a ajuns la concluzia c oamenii aparin la 4 grupe de snge: A, B, AB, i 0. S-a descoperit c la oameni exist dou tipuri de anticorpi A i B n serul sngelui i dou tipuri de antigene A i B n globule roii. Indivizii din grupa de snge A posed antigene A i anticorpi B, cei din grupa B posed anticorpi A, cei din grupa AB posed antigene A i B dar nu posed anticorpi, iar indivizii din grupa 0 nu posed antigene, dar posed ambele tipuri de anticorpi A i B.

Maladii metabolice ereditare

n anul 1909 Garrod emite ipoteza c patru maladii (albinismul, alcaptonuria, cistinuria i pentosuria) se datoresc unor deficiene enzimatice ereditare. Aceast ipotez s-a dovedit corect, maladiile respective fiind datorate unor mutaii genice ce determin sinteza unor enzime inactive sau cu activitate redus. Acest tip de maladii au primit numele de enzimopatii. Mutaiile genelor la om pot provoca tulburri grave ale metabolismului celular. Pn n prezent au fost identificate peste 2500 de maladii ereditare. Cele mai cunoscute sunt tulburrile nnscute n metabolismul enzimelor i proteinelor, dei au fost identificate tulburri i n metabolismul glucidelor, lipidelor i mineral. Exemple: oligofrenia fenil piruvic (fenilcetonuria), albinismul, cretinismul sporadic cu gue, hemoglobinopatiile, intolerana la fructoz cu hipoglicemie, diabetul zaharat, hiperlipemia idiopatic, hemocromatoza, etc. ngineria genetic Este una din cele mai moderne ramuri ale biologiei, a crei apariie a fost determinat de aprofundarea cunotiinelor de genetic la nivel molecular, de dezvoltarea cercetrilor privind genele, cromozomii i n general materialul genetic al vieuitoarelor, fapt care a permis elaborarea unor metode complet noi de izolare i de sintez a genelor, de transfer de la o specie la alta, de cultur in vitro a celulelor i de hibridare celular. Ingineria genetic poate fi definit ca un ansamblu de metode i tehnici prin care este posibil manipularea materialului genetic la nivel celular i molecular.

www.clopotel.ro

Astfel, prin cultura in vitro de celule vegetale este posibil obinerea de organisme haploide i diploide pornind de la o singur celul, transferul de gene n celulele lipsite de peretele celuler (protoplati) sau chiar hibridarea ntre celule vegetale, ntre celule animale sau celule vegetale sau animale. Ingineria genetic la nivel molecular se realizeaz prin izolarea i sinteza artificial de gene, realizarea de ADN recombinat i transferul de gene de la un organism la altul (de la procariote la eurocariote i invers). Astfel, prin acionarea la nivel celular i molecular se pot produce artificial genotipuri noi cu caracteristici determinate anticipat. Primele cercetri de inginerie genetic s-au realizat nc din anul 1944 cnd O.T.Avery, C.M.Mac Leod i M.Mac Carty au reuit transferarea genetic la bacterii, adic transferul artificial al unor gene de la un tip de pneumococi la altul,prin intermediul ADN. Aceste cercetri au constituit prima experien de genetic i biologie molecular, tiina care studiaz ereditatea la nivel molecular. Ulterior, experiene de transformare genetic s-au realizat la alte bacterii, precum i la organismele mai evoluate de tip eucariot. Un alt domeniu al ingineriei genetice n care s-a realizat unele cercetri valoroase l constituie aa-numita chirurgie cromozomial, prin care s-a reuit transferarea de cromozomi sau segmente cromozomiale de la o specie la alta. Primele cercetri n aceast direcie au fost efectuate de geneticianul J.G.OMara (1940), care a elaborat o metod de combinare a caracterelor a dou specii prin transferul unuia sau mai multor cromozomi de la o specie la alta. Izolarea i sinteza artificial a genelor Progresele mari realizate n studiul structurii moleculare i funciei genelor au fost posibile izolarea i sinteza lor artificial. S vedem mai nti cum s-a efectuat izolarea artificial a genelor. Operaia izolrii genei a fost realizat n anul 1969 la Universitatea Havard din Statele Unite de ctre J.Beckwith i colaboratorii si. Cercetrile, publicate n revista englez Nature, din noiembrie 1969, s-a efectuat pe bacteria Escherichia coli, care are un singur cromozom de form circular pe care se gsesc circa 3000 de gene. Printre acestea se afl trei gene notate cu literele x,y,i a ce determin sinteza a trei enzime: -galactozidaza, galactozid-permeaza i transacetilaza, care intervin n procesul de metabolizare a lactozei, zahr ce se gsete n lapte. Aceste gene fac parte dintr-o unitate genetic mai mare denumit operonul lactozei (prescurtat

www.clopotel.ro

lac), din care mai fac parte i alte trei gene care intervin n reglajul genetic al operonului respectiv. Transferul interspecific al genelor Pn recent, transferul de informaie genetic, de gene i cromozomi, s-a realizat pe cale sexuat. Ca urmare, geneticienii i amelioratorii de plante i animale aveau posibilitatea s realizeze organisme hibride care conineau informaie genetic provenit de la doi sau mai muli genitori. Prin recombinare genetic s-au creat numeroase forme noi de plante i animale utile pentru practic, organisme care prezentau noi combinaii de gene. n ultimii ani, mai ales dup descoperirea faptului c genele sunt constituite din ADN, s-a dezvoltat noi tehnici prin care este posibil in vitro ruperea i realipirea moleculelor de ADN, crearea de molecule hibride. Aceasta nseamn c recombinarea genetic se poate realiza la nivelul ADN, fr a mai fi necesar procesul sexual. De asemenea s-a reuit transferarea genelor de la o specie la alta, prin acionare la nivel molecular. Hibridarea celular la animale