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CAPÍTULO
60
INSULINA, HIPOGLUCEMIANTESORALES Y PROPIEDADESFARMACOLÓGICAS DELPÁNCREAS ENDOCRINO
 Stephen N. Davis
INSULINA
En años recientes, las naciones desarrolladas han sido testi-gos del incremento explosivo de la prevalencia de diabetesmellitus (DM), vinculada predominantemente con modifica-ciones del modo de vida y el aumento extraordinario en laobesidad que lleva consigo. Las consecuencias metabólicase la hiperglucemia y la dislipidemia duraderas que incluyenaceleración de la ateroesclerosis, nefropatías crónicas y ce-guera, imponen una carga extraordinaria a las personas coniabetes mellitus y al sistema de salud pública. Son de sumaimportancia para superar este grave reto, ampliar los conoci-mientos sobre la patogenia de la enfermedad y sus compli-caciones, así como sobre el tratamiento y la prevención dela diabetes.
Historia.
Pocos sucesos en la historia de la medicina son más notoriosque el descubrimiento de la insulina. Aun cuando el descubrimiento seatribuye de manera apropiada a Banting y Best, otros investigadoresy colaboradores proporcionaron observaciones y técnicas importantesque lo hicieron posible. En 1869, un estudiante de medicina alemán,Paul Langerhans, notó que el páncreas contiene dos grupos de células:las acinares, que secretan enzimas digestivas, y las que están agrupadasen islas, o islotes, que sugirió tenían una segunda función. Las pruebasdirectas de esta función se obtuvieron en 1889, cuando Minkowski yvon Mering mostraron que los perros con pancreatectomía muestran unsíndrome similar al de la diabetes en seres humanos.Se hicieron muchos intentos por extraer la sustancia pancretica quese encarga de la regulacin de la glucemia. A principios del decenio de1900, Gurg Zuelzer, un internista en Berlín, intent tratar a un diabéticocon extractos de pncreas. Si bien el paciente mostrómejoría temporal,volvia caer en coma y muricuando se agotóel abasto de extracto.Un estudiante en la University of Chicago, E. L. Scott, hizo otro intentotemprano por aislar un principio activo en 1911. Con el uso de extractoslcohólicos del páncreas (no muy diferentes de los usados a la postrepor Banting y Best), Scott trata varios perros diabéticos con resul-tados alentadores; empero, careció de medidas claras de control de lalucemia, y su profesor consider que los experimentos no eran conclu-entes en el mejor de los casos. Entre 1916 y 1920, un fisiólogo ruma-no, Nicolas Paulesco, efectuó una serie de experimentos en los cualese encontró que las inyecciones de extractos pancreáticos redujeron elzúcar y las cetonas urinarias en perros diabéticos. Aunque public losresultados de sus experimentos, su importancia slo se apreció por com-pleto muchos añs más tarde.Frederick G. Banting, un joven cirujano canadiense que desconocíaran parte de este trabajo previo, convenció un profesor de fisiologían Toronto, J.J.R. Macleod, para que le permitiera tener acceso a unlaboratorio con el fin de investigar el principio antidiabético del p-reas. Banting supuso que los tejidos de los islotes secretaban insuli-na, pero que la hormona quedaba destruida por digestión proteolíticantes de la extracción o durante la misma. Junto con un estudiante demedicina de 40 años, Charles Best, intentósuperar el problema al atarlos conductos pancreáticos. El tejido acinar mostró degeneración y losislotes quedaron sin alteraciones; a continuaci, se extrajo el tejidorestante con etanol yácido. De este modo, Banting y Best obtuvieronun extracto pancretico que fue eficaz para disminuir la glucemia enperros diabéticos.El primer paciente que recibió los extractos activos preparados porBanting y Best fue Leonard Thompson, de 14 años de edad. Este sujetoacudió al Toronto General Hospital con glucemia de 500 mg/100 ml (28mM) y estaba excretando 3 a 5 L/día de orina. A pesar de control rígidoe la dieta (450 kcal/día), siguió excretando cantidades grandes de glu-osa y, sin insulina, el pronóstico más probable era la muerte despuése algunos meses. La administración de los extractos fabricados porBanting y Best indujo reducción de la concentración plasmática de glu-osa y de la excreción urinaria de la misma. Se aplicaban inyeccionesiariamente. La excreción de glucosa disminuyó de más de 100 a inclu-so 7.5 g/día y la persona mostró mejoría clínica extraordinaria. De estemodo, el tratamiento de restitución con la hormona recién descubierta,insulina, había interrumpido lo que era claramente un trastorno meta-bólico por lo demás letal. Banting y Best encararon muchos estudios ytribulaciones durante el año subsecuente. Fue difícil obtener extractosactivos de manera reproducible. Esto condujo a una mayor participacióne Macleod; Banting también buscó la ayuda de J.B. Collip, un químicoon experiencia en la extracción de adrenalina y la purificación de la mis-ma. A la postre se obtuvieron extractos estables, y pacientes de muchasregiones de la parte no latina de América pronto recibieron tratamiento
1613
 
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Sección XII / Hormonas y sus antagonistas
con insulina de fuentes porcinas y bovinas. En la actualidad, como re-sultado de la tecnología de DNA recombinante, se utiliza insulina hu-mana para la terapéutica.En 1923 se otorgó con notoria rapidez el Premio Nobel de Medicinao Fisiología a Banting y Macleod, y de inmediato surgió un furor porel crédito. Banting anunció que compartiría la mitad de su premio conBest, y Macleod hizo lo mismo con Collip.
Propiedades clínicas
. La insulina fue purificada y cristalizada porAbel unos años después de haber sido descubierta. Sanger definió lasecuencia de aminoácidos de dicha hormona en 1960 y fue sintetizadaen 1963; en 1972 Hodgkin
t al
., dilucidaron su estructura tridimensio-nal. La insulina fue la hormona con la cual Yalow y Berson crearon sutécnica de radioinmunoensayo (Kahn y Roth, 2004).Las células
β 
(o B) de los islotes pancreáticos sintetizan insulinaa partir de un precursor de cadena única de 110 aminoácidos llama-do
 preproinsulina.
Después de translocación a través de la membranadel retículo endoplásmico rugoso, el péptido señal N-terminal de 24aminoácidos de la preproinsulina se desdobla con rapidez hasta formarproinsulina (fig. 60-1). Aquí, la molécula se pliega y se forman enlacesdisulfuro. En el momento de la conversión de la proinsulina humana eninsulina en el complejo de Golgi, se eliminan mediante proteólisis cua-tro aminoácidos básicos y el conector restante o péptido C. Esto da lu-gar a las dos cadenas de péptidos (A y B) de la molécula de insulina, quecontiene un enlace disulfuro al interior de la subunidad (A) y dos entreambas subunidades (A y B). La cadena A por lo general está compuestade 21 residuos de aminoácidos y la cadena B tiene 30; de este modo,la masa molecular es de unos 5 734 daltones. Aun cuando la secuenciade aminoácidos de la insulina ha conservado mucha homogeneidad enel transcurso de la evolución, hay variaciones importantes que explicandiferencias tanto de la potencia biológica como de la inmunogenicidad(De Meyts, 1994). En casi todas las especies hay un gen único que co-difica para la insulina, y un producto proteínico único. Empero, las ratasy los ratones tienen dos genes que codifican para la insulina y sintetizandos moléculas que difieren entre sí por dos residuos de aminoácidos enla cadena B.La estructura cristalina revela que las dos cadenas de insulina for-man una estructura muy ordenada, con varias regiones helicoidales
α
enlas cadenas tanto A como B. Las cadenas aisladas de insulina son inac-tivas. En solución, la insulina puede existir como un monómero, dímeroo hexámero. Dos moléculas de Zn
2
están coordinadas en el hexámero,y esta forma de insulina quizá se almacena en los gránulos de la célula
 β 
pancreática. Se cree que el Zn
2
tiene una participación funcional enla formación de cristales, y que la cristalización facilita la conversiónde proinsulina en insulina, así como el almacenamiento de la hormona.Tradicionalmente, la insulina es hexamérica en las preparaciones dema-iado concentradas que se utilizan en terapéutica. Cuando la hormonae absorbe, y la concentración disminuye hasta cifras fisiológicas (na-nomolares), se disocia hacia monómeros, y lo más probable es que elmonómero sea la forma biológicamente activa de la insulina. Ahora sedispone de insulina monomérica para tratamiento.Por medio de estudios de insulinas purificadas a partir de una am-plia variedad de especies, y mediante modificación de la molécula, seha obtenido mucha información acerca de la relación entre estructuray actividad de la insulina. Una docena de residuos no variables en lascadenas A y B forman una superficie que interactúa con el receptor deinsulina (fig. 60-2). Esos residuos, Gli
A1
, Glu
A4
, Gln
A5
, Tir
19
, Asn
A21
,Val
B12
, Tir
B16
, Gli
B23
, Fen
B24
, Fen
B25
y Tir
B26
, se superponen con do-minios que también participan en la dimerización de la insulina (DeMeyts, 1994). Los residuos Leu
A13
y Leu
B17
quizá formen parte de una
Figura 60-1.
 Proinsulina humana y su conversión en insulina.
Se muestra la secuencia de aminocidos de la proinsulina humana. Me-diante desdoblamiento proteolítico, se eliminan cuatro aminoácidos básicos (residuos 31, 32, 64, 65) y el péptido conector, lo que conviertea la proinsulina en insulina. Se muestran los sitios de accin de las endopeptidasas PC2 y PC3.
  P
 é
 p
  t
  i
 d
 o
c
o
n
e
r  
C
a
 d
 e
 n
 a
A
a
B
 
Capítulo 60 / Insulina, hipoglucemiantes orales y propiedades farmacológicas del páncreas endocrino
 
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segunda superficie de unión. La insulina se une a superficies localizadasen las regiones N-terminal y C-terminal de la subunidad del receptor,incluida una región con alto contenido de cisteína en la cadenadelreceptor. En la mayor parte de los casos hay correlación muy estrechaentre la afinidad de una insulina por el receptor de la misma y su po-tencia para desencadenar efectos sobre el metabolismo de la glucosa.Las insulinas humana, bovina y porcina son equipotentes; la de cobayosudamericano es mucho menos potente, en tanto algunas provenientesde aves son mucho más.La insulina es miembro de una familia de péptidos relacionadosdenominada
 factores del crecimiento insulinoides
(
nsulinlike growth factors
, IGF). Dos de estos factores (1 y 2) tienen masas molecularesde unos 7 500 daltones, y estructuras homólogas a la de la proinsulina.Empero, los equivalentes cortos del péptido C en la proinsulina no seeliminan a partir los IGF. En contraste con la insulina, dichos factoresse producen en muchos tejidos y pueden tener una función de mayorimportancia en la regulación del crecimiento que en la del metabolismo.Esos péptidos, en particular el IGF-1, son los mediadores probables delefecto de la hormona del crecimiento, originalmente llamados
somato-medinas.
La
relaxina
, hormona uterina, pudiera ser un pariente lejanoen esta familia de polipéptidos, aunque netamente su receptor es dife-rente de los de la insulina y del factor del crecimiento insulinoide 1.Los receptores para insulina y el IGF-1 también muestran relaciónestrecha (Nakae
et al.
, 2001). De este modo, la insulina puede unirseal receptor de IGF-1 con afinidad baja y
viceversa
. Las acciones de lainsulina favorecedoras del crecimiento parecen estar mediadas en partepor el receptor de IGF-1, y es posible que haya discordancia entre lapotencia metabólica de un análogo de la insulina y su capacidad parafavorecer el crecimiento. Por ejemplo, la proinsulina sólo tiene 2% dela potencia metabólica de la insulina
in vitro
, pero tiene 50% menospotencia que la insulina como estimulante de la mitogénesis.
Síntesis, secreción, distribución y desinte-gración de la insulina
Producción de insulina.
Los fenómenos moleculares y ce-lulares que participan en la síntesis, el almacenamiento y lasecreción de insulina por la célula
β 
 
, y la desintegración finalde la hormona por sus tejidos blanco se han estudiado en grandetalle y han servido como un modelo en el estudio de otrostipos de células en los islotes pancreáticos. El islote de Lan-gerhans está compuesto de cuatro tipos de células, cada unade las cuales sintetiza y secreta una hormona polipeptídicaistinta: insulina en la célula
β 
(B),
glucagon
en la célula(A),
somatostatina
en la célula (D), y polipéptido pancreá-tico en la célula PP o F. Las célulasconforman hasta 60 a80% del islote y constituyen su centro. Las células, y Fforman un manto discontinuo, de una a tres células de grosor,alrededor de este centro.
Las células en el islote estn conectadas por uniones estrechas quepermiten el paso de moléculas pequeñas y hacen posible el control co-rdinado de grupo de las clulas. Las arteriolas entran en los islotes yse ramifican hacia la masa capilar parecida a glomrulo en el centro delas células
 β 
 
. A continuación, los capilares pasan al anillo del islote ypresentan coalescencia hacia vénulas recolectaras. La sangre fluye en elislote desde las células
β 
hacia las y . De este modo, la clula
β 
es eletector primario de glucosa para el islote, y los otros tipos de célulasprobablemente quedan expuestas a concentraciones en particular altase insulina.Como se mencionó, la insulina se sintetiza como un precursor deadenaúnica en el cual las subunidades A y B están conectadas por elpptido C. El producto de traducción inicial
,
preproinsulina, contieneuna secuencia de 24 residuos de aminocidos principalmente hidrófo-bos, fijos al amino terminal N de la cadena B. Esta secuencia sel serequiere para la relación y penetración de la preproinsulina naciente enla luz del retíulo endoplásmico rugoso; se desdobla con rapidez, y aontinuación se transporta la proinsulina en vesículas pequeñas hacia elomplejo de Golgi, donde se tapona en grnulos secretores junto con lanzima o las enzimas que se encargan de su conversión en insulina.La conversión de proinsulina en insulina empieza en el complejoe Golgi, continúa en los gránulos secretores, y es casi completa en elmomento de la secreción. De este modo, se liberan hacia la circulaciónvolúmenes equimolares de péptido C e insulina. El péptido C no poseefunción biológica identificada, pero constituye un índice útil de secre-ión de insulina para diferenciar entre los individuos que se han aplica-o en forma facticia insulina, y los tumores insulinógenos. A partir delas células
β 
también se liberan pequeñas cantidades de proinsulina ye proinsulina des-31,32. Esto quizá manifiesta dos fenómenos: exoci-tosis de gránulos en que la conversión de proinsulina en insulina no esompleta, o secreción por otra vía. Puesto que la vida media de la proin-sulina en la circulación es mucho más prolongada que la de la insulina,hasta 20% de la insulina inmunorreactiva en plasma es, en realidad,proinsulina e intermediarios.Dos endopeptidasas dependientes de Ca
2
, que se encuentran en losrnulos de las clulas de los islotes y en otras clulas neuroendocrinas,se encargan de la conversión de proinsulina en insulina. Esas endopro-teasas, PC2 y PC3, tienen dominios catalíticos relacionados con los dela subtilisina y causan desdoblamiento en las secuencias de lisina-argi-nina (Lys-Arg) o arginina-arginina (Arg-Arg) (Steiner
et al.
, 1996). LaPC2 desdobla de modo selectivo la unión entre el péptido C y la cadenaA (fig. 60-1). La PC3 desdobla de modo preferencial la unión entre elpptido C y la cadena B, pero también posee alguna acción en la union la cadena A. Aunque hay al menos otros dos miembros de la familiae las endoproteasas (PC1 y furina), PC2 y PC3 parecen ser las enzimase las cuales depende el procesamiento de proinsulina hacia insulina.
 Regulación de la secreción de insulina
La secreción de insulinas un proceso regulado de manera estrecha, diseñado para proporcionaroncentraciones estables de glucosa en la sangre tanto en ayuno comon la alimentación. Esta regulación se logra por medio de la interre-lación coordinada de diversos nutrimentos, hormonas gastrointestina-les, hormonas pancreáticas y neurotransmisores del sistema nervioso
Figura 60-2.
 Modelo de la estructura tridimensional de la in- sulina.
Elárea sombreada indica la cara de unión a receptor de lamolécula de insulina.
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