Metabolismo de Bases Nitrogenadas: Purinas e Pirimidinas

Selma M.B. Jeronimo Departamento de Bioqumica, CB, UFRN

I. Bases nitrogenadas
NH2

Bases nitrogenadas (purinas e pirimidinas) so encontradas na clulas na forma de nucleosdeo (ligao bglicosdica entre a base e a pentose/fosfato). Biossntese endgena, no aproveitamento daquelas contidas na dieta.

NH

O H3C NH NH O

II. Nucleosdeos de purinas e pirimidinas: Funes

1. Precursor monomrico de cidos nuclicos: Nucleosdeo trifosfato 2. Armazenamento de energia e ativador substncias: ATP, GTP, CTP e UTP 3. Efetor alostrico: vias metablicas 4. Transferncia de grupos qumicos: UDPglicose, PAPS, CDP-colina, S-adenosil metionina.

III. Metabolismo

I. Biossntese:

Via de novo Via de salvao Bases Pricas: excreo como c. rico Bases Pirimdicas: reutilao de parte da cadeia carbonada.

II. Catabolismo

IV. Distribuio diferencial celular

Hemcias: derivados de adenina Fgado: derivados de uracila e outros Ribonucleosdeos: concentrao celular milimolar Desoxiribonucleosdeos: concentrao micromolar

V. Qumica

1. Nomenclatura

T
H3C

A) Base nitrogenada (Prica e Pirimdica)

O
NH2

O NH NH O

NH NH O

NH

NH2 N NH O

O
O

N NH N

G
NH

N NH N

NH NH2

V. Qumica

B) Nucleosdeo (Base + pentose) C) Nucleotdeo (Base + pentose + fosfato)

NH2

NH2 N
N

NH

NH

HO

HO P O OH

OH

OH

OH

OH

Nucleosdeo trifosfato
NH2 N N

NH

OH OH O HO P O P O P OH OH O O

Propriedades

Absoro no UV Solubilidade

Metabolismo de Bases Pricas: Biossntese

Sntese de novo A. Formao de Inosina Monofosfato (IMP)

1. Formao de fosforibosil-pirofosfato:

Ribose + ATP
PRPP + Gln

PRPP
Glu + PP + 5-fosfo-b-ribosilamina

2. Formao da ligao glicosdica:

3. 5-fosfo-b-ribosilamina + Gli + ATP Ribonucleotdeo-glicinamida + ADP + P

Biossntese bases Pricas

4. Ribonucleotdeo-glicinamida + N10 formilH4 Folato Ribonucleotdeo-formil-glicinamida + H4 Folato

5. Ribonucleotdeo-formil-glicinamida + Gln + ATP Ribonucleotdeo-formil-glicinamidina + Glu + ADP + P

6. Ribonucleotdeo-formil-glicinamidina + ATP
Ribonucleotdeo 5-aminoimidazol + ADP + P + H2O

7. Ribonucleotdeo 5-aminoimidazol + CO2 + Biotina

Ribonucleotdeo 5-aminoimidazol-4-carboxaminoimidazol +

Biossntese Bases Pricas

8. Ribonucleotdeo 5-aminoimidazol-4-carboxaminoimidazol + ASP + ATP
Ribonucleotdeo N-succinil-5-aminoimidazol-4-carboxamida

9. Ribonucleotdeo N-succinil-5-aminoimidazol-4-carboxamida
Ribonucleotdeo 5-aminoimidazol-4-carboxamida + Fumarato

10. Ribonucleotdeo 5-aminoimidazol-4-carboxamida + N10 formilH4 Folato Ribonucleotdeo N-formilaminoimidazol-4-carboxamida 11. Ribonucleotdeo N-formilaminoimidazol-4-carboxamida + H2O Inosinato (IMP)

H2C O P P O O H OH ATP P O CH2 AMP O H Glutamina Glutamato PP O P O P PP-Ribose-P-GlutamilAmidotransferase OH O

H2C O P NH2 + H2C NH3 O C OH ATP O

NH3

CH2 N5, N10 O C Metanil - H4 Folato

H N
H4 - Folato

H2C C

CH O NH

H ADP+ Pi OH OH Formil- transferase O

Mg Pi PP-Ribose -P - Sintetase OH

OH

OH

OH

OH

Ribose -5-P Formiglicina - midarribosil - 5-P

Glutamina

-D-Ribose-5-P

P-Ribose-5-P -Sintetase

Glutamato O O O
-

N N C CH C Biotina H2N C N CO2 HC CH

O CH2 CH NH

C C

N Aspartato CH C H2O

C HO

H2O H2C ATP, Mg2 Fechamento do Anel HN C

H N CH O NH

O O C

H2C H2N

H2N

Ribose -5-P Aminoimidazol - Succinil Carboxilatorribosol - 5 -P

Fumarato Adenilsuccinase

Ribose -5-P Aminoimidazol Carboxilatorribosol - 5 -P

Ribose -5-P Aminoimidazoliribosil-5-P

Ribose -5-P Formiglicina - midarribosil - 5-P

O C H2N C CH C H2N N Transformilase O CH N

N10 -Formil H4 - Foleto H4 - Folato H2N

O C C CH C NH N Fechamento do Anel HC N H2O NH

O C C CH C N N N

IMP

Ribose -5-P

Ribose -5-P

Ribose -5-P

Sntese de Adenina e Guanina

IMP
XMP Adenilosuccinato

GMP
GDP GTP

AMP
ADP ATP

Via de salvao

Enzima: Hipoxantina-guanina fosforibosil transferase

Guanina + PRPP Hipoxantina + PRPP GMP + PPi IMP + PPi

Enzima Adenina-fosforibosil transferase

Adenina + PRPP AMP + PPi

Sntese de Pirimidinas

Sntese de orotato Adio de PRPP Formao de uracila Formao de timina e citosina

Sntese de desoxiribonucleosdeos trifosfatos

Reduo dos ribonucleosdeos

Avaliar o papel da ribonucleotdeo redutase Folato Inibidores

O O P O

Converso de ribonucleotdeos em desoxirribonucleotdeos O Base

O
CH2 C H O O H C C H OH
ATP dATP

Base CH2 C H O H C

P
O

H C OH

Ribonucleotdeo redutase

H C OH

C H H

Nucleotdeo 5-difosfato

Deoxinucleotdeo 5-difosfato

Subunidade B1 dATP ATP SH

Subunidade B1 dATP ATP SH SH

ATIVA
Inibe

Nucleotdeo 5-difosfato

SH

CTP CTP UTP ATP GTP CTP CTP UTP ATP GTP UTP UTP ATP ATP Subunidade Subunidade dATP dUTP dCTP dGTPB2 dATP B2 dUTP dCTP dGTP Ribonucleotdeo redutase

Deoxinucleotdeo 5-difosfato

Converso de ribonucleotdeos em desoxirribonucleotdeos 2 stios de dGTP estimula a ATP estimula a

reduo de ADP reduo de CDP e UDP especificidade dGTP inibe a reduo de UDP e CDP dTTP inibe a reduo de UDP e CDP dTTP estimula a reduo de GDP

R1 b1

R2 b2
ATP ativa 2 stios de atividade

Sitios alostricos

ATP ativa

O ATP ativa a reduo de pirimidinas.

dATP inibe H-S H-S S-H S-H

Tyr Fe 1 Glu Glu Fe 2 His Tyr

dATP inibe

Stios de ligao do substrato

Asp His

Glu

R 2 1

R 2 2

dATP inibe a atividade cataltica geral da enzima.Isto explica a toxicidade dos nveis aumentados de dATP observada na deficincia de adenosina deaminase

Origem da timina
ADP

dUDP + ATP
Nucleosdeo difosfato quinase

+ H2O

dUTP
dUTP difosfohidrolase

dUMP + PPi

H H2N C N C OH N5, N10-metileno H4 folato H N C C N C N C C H H CH2 N C H C H C O H COO

C C H C H

C
CH2 CH2 COO

H
Timidilato sintase

O
FdUMP

dTTP
C C F O

HN C N

C
C

CH3

+ diidrofolato

dUMP
Inibio da sntese de timidilato na terapia contra o cncer

C HN O C N

dRibose fosfato
Excees: medula ssea(tecido formador do sangue e da maior parte do sistema imune, mucosa intestinal, folculos pilosos. Clulas em crescimento rpido necessitam de suprimento contnuo de dTMP, clulas normais no.

dRibose fosfato

Bases nitrogenadas - catabolismo

NH2 N

NH2
N

Adenina

N NH O

Citosina

NH

O N NH N NH

Guanina
NH2

O H3C NH NH O

Timina

Distrbio gnico bases nitrogenadas

Doena
Gota Lesch Nyhan

Defeito Efeito enzimtico

PRPP HGPRTasse Vm Parcial

Manifestao
c. rico Superproduo e excreo de purina; paralisia cerebral e automutilao Imunodeficincia TeB Litase renal e hipouricemia

Herana
X X

Imunodeficincia combinada Xantinria

Adenosina deaminase Xantina oxidase

Deficincia grave Deficincia completa

Autossmico recessiva Autossmico recessiva

Catabolismo Purinas
NH2
NH2

O N

adenosina
N N

1. 5-nucleotidase
N

N NH O N

N
O HO P O OH O

NH

O HO P O OH

NH

NH2

NH

2. ADA
OH OH
O HN N

OH OH

OH OH

inosina
NH

hipoxantina O
HN N

Xantina
O N HN

c.rico
O H N O HN

OH OH

NH

NH O NH

NH

NH

NH

3. nucleosidase

4.Xantina oxidase

5. Xantina oxidase

Catabolismo de pirimidinas nos animais

O

C
HN

O C C CH3 H
NADPH + H+ Dihidrouracil desidrogenase NADP+

C HN O C N

CH3

H H C H

TIMINA

DIHIDROTIMINA

H2O
Dihidropiriminidase

O
H2N C N

H H C C

O C O

H2O

H4N+ HCO3

b-uredopropionase

H3N

H H C C H

O C CH3 O

H CH3 H UREIDOISOBUTIRATO

-AMINOISOBUTIRATO

-CETOGLUTARATO

GLUTAMATO

O O

C C H

Coenzima B12

CH3

METILMALONIL-CoA MUTASE

METILMALONIL SEMIALDEDO

SuccinilCoA possvel sintetizar glicose

com produtos da degradao de pirimidinas?

Via da Salvao de bases

imunodeficincia doena auto-imune: Hashimoto e Graves

Karbownik M, J. Cell. Biochem. 89:250-256, 2003

Karbownik M, J. Cell. Biochem. 89:250-256, 2003

Via de Salvao

ADA

Karbownik M, J. Cell. Biochem. 89:250-256, 2003

Causas de hiperuricemia e Classificao de gota

Hiperuricemia

Gota

Dieta Superproduo de urato Baixa secreo de uratos

Primria

A maioria dos pacientes excretam baixa quantidade c. rico, poucos produzem excesso

Secundria

Baixa secreo: insuficincia renal ou uso de diurtico Superproduo Doenas mieloproliferativas

5-Fosforibosil 1-pirofosfato
c. Nucleico PRPP-GLN c. Nucleico
c. Guanlico c. Inosnico c. Adenlico

Adenina

Formao do clculo

Podagra -

Leso ssea por processo inflamatrio repetido

Tofo gotoso

Depsito de c. rico e inflamao

Depsito de c. rico e inflamao

Depsito de c. rico e inflamao

Depsito de c. rico e inflamao

Depsito de c. rico e inflamao

Depsito de c. rico e inflamao e erisipela

Objetivos

1. Compreender a biossntese de novo das bases nitrogenadas. 2. Compreender o papel de aminociodos e de micronutrientes na biossntese das bases. 3. Papel da nutrio 4. Regulao da sntese de bases e interrelao com a biossntese de aminocidos. 5. Compreender a Formao de desoribunocleosdeos. 6. Compreender o catabolismo de bases nitrogenadas 7. Compreender o racional de anlagos de aminocidos e nucleosdeos em teraputica antimicrobiana e anti-neoplsica. 8. Compreender as doenas relacionadas ao metabolismo de bases (deficincia de adenosina deaminase, gota, Lesch Nyhan, por exemplo). 9. Compreender como cido rico induz inflamao.