El presente estudio conducted a la evaluacion de las propiedades de actividad antimicrobiana y antioxidante de aceite esencial y extractos metanolicos de planta de origanum

vulgare. La composicin quimica de acvite esencial obt5enido por hidrodestilacion fue analizado por un sistema GC/MS.Un total de 62 constituyentes fueron identificados. Caryophyllene y spathulenol fueron los principales componentes, seguidos de germacrene-D y un alfaterpineol. La actividad antioxidante se midi empleando dos mtodos a saber, la barredora de radicales libres DPPH y la inhibicin de la oxidacin del cido linoleico por extractos de metanol y el aceite esencial de O. vulgare ssp. vulgare. los estudios de antioxidante sugiere que el extracto de metanol se comport como un fuerte suministro de los radicales libres carroero IC 50 en slo 9,9 lg / ml, mientras que el acite mostro una actividad menor con IC 50 en 8,9 mg / ml. los compuestos fenolicos totales Totales sobre la base de cido glico equivalentes revel la presencia de compuestos fenlicos solubles totales en el extracto de 220 lg / mg de extracto seco (22% w / w) y, muy probablemente, que son responsables de la actividad radical de barrido de los extractos de metanol. Extracto metanlico efectivamente no era capaz de inhibir oxidacin de los cidos linoleico y slo el 32% de inhibicin se logr a 2 mg / ml de concentracin, muy por debajo del control positivo (butil hyroxytoluene, BHT), en la misma concentracin. Sin embargo, 2,2 mg / ml de aceite esencial de las soluciones previstas en el 50% de inhibicin la oxidacin de los cidos linoleico sistema de prueba. Los resultados de las pruebas de los antibiticos mostraron que el aceite esencial de O. vulgare ssp. vulgare tena un gran potencial de actividad antimicrobiana contra 10 bacterias, y 15 especies de hongos y levaduras prueba. En cambio, el extracto metanlico de la parte area de la planta de O. vulgare no mostraron actividad antimicrobiana. El resultado puede sugerir que el aceite esencial de O. vulgare ssp. vulgare posee compuestos con propiedades antimicrobianas, as como la actividad antioxidante y, por tanto, puede ser utilizado como un ingrediente natural conservante en los alimentos y / o industria farmacutica. 2003 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados. 1. Introduccin El Origanum (Labiatae) es un evento anual, perennNial hierbas y arbustos que es nativa de la mediterrneo, EuroSiberia y Irano-regiones de Siberia(Aligiannis, Kalpoutzakis, Mitaku, y Chinou, 2001). Un total de 38 especies de origanum son reconocidos en el mundo. la mayoria de las especies de Origanum, ms del 75%, se concentra en la subregin del Mediterrneo Oriental (Ietswaart,1980). De ellas, 16 especies son consideradas como endmicas para la flora de Turqua (Guner, Ozhatay, Ekim, y Baser,2000). Las especies de Origanum crecen abundantemente en laderas pedregosas rocosas y en las zonas de montaa en una amplia gama de altitudes (0-4000 m) (Snogerup, 1971). Debido a la variabilidad en las caractersticas qumicas y el aroma, plantas pertenecientes a diferentes especies de origanum y ecotipos (biotipos) son ampliamente utilizados en la agricultura y en la industrias farmacutica y cosmtica como hierba culinaria, sustancias aromatizantes de productos alimenticios, Bev-alcohlicas erages y perfumera por su fragancia picante (AliGiannis et al., 2001; Novak et al., 2000; Sivropoulou et al., 1996; Vera y Chan-Ming, 1999). Tambin se ha utilizado sido como un remedio tradicional para el tratamiento de diversas dolencias como una espasmdica, antimicrobianos, expectoran Carminativas y aromticas para whooping y tos convulsiva trastornos digestivos y problemas menstruales (Aligiannis et al., 2001; Daferera, Albahaca, Ziogas, y de Polissiou, 2003; Daferera, Ziogas, y Polissiou, 2000; Dmetzos, Perdetzoglou, y Tan, 2001; Dorman y Decanos, 2000; Ryman, 1992; Sokovic, Tzakou, Pitarokili, Y Couladis, 2002; Tabanca, Demirci, Ozek, Tumen, y Baser, 2001). En estudios anteriores, se ha demostrado que la contenido de aceites esenciales y extractos de plantas medicinales Origanum como especies que contengan antibiticos, antioxidante y otras actividades biolgicas puede cambiar basado en sobre las diferencias en el cultivo, el origen, la etapa vegetativa y temporadas de crecimiento de las plantas(Decanos, Svoboda, Gundidza, y Brechany, 1992; Kustrak, Kuftinec, Blaz - evic, y Maffei, 1996; Leung & Foster, 1996; Milos, Mastelic, y Jerkovic, 2000; Muller-Riebau, Berger, y Yegen, 1995). Origanum. vulgare ssp. vulgare es una de la ms ampliamente distribuida que crece en la subespecie Regin oriental de Anatolia de Turqua. Sin embargo, hasta ahora no se ha estudiado la composicin qumica y actividades biolgicas de los aceites esenciales y extractos de O. vulgare ssp. Vulgare plantas recogidos en la oriental Regin de Anatolia de Turqua. En los ltimos aos, mltiples drogas y resistencia qumica en tanto humanos como microorganismos patgenos de plantas se han desarrollado debido al uso indiscriminado de los antibiticos comerciales medicamentos y productos qumicos utilizados en el tratamiento de la enfermedades infecciosas enfermedades (Davis, 1994; Lpez et al., 1991, Service, 1995). Por otro lado, estn las enfermedades de transmisin alimentaria que siguen siendo un problema importante en el mundo, incluso en pases desarrollados, como EE.UU. (Mead et al., 1999). el deterioro de comida causado por una variedad de microorganismos a menudo ha sido reconocido como un inconveniente y una de las preocupacin mas importante para la industria alimentaria. Hasta la fecha, numerosas especies de bacterias(Escherichia coli, Enterobacter spp., Bacillus spp. Salmonella spp., Staphylococcus aureus,

Klebsiella pneumoniae, Listeria monocytogenes y Campylobacter jejuni), levaduras y hongos (Candida spp. Zygosacchar - omyces spp. Fusarium spp., Aspergillus spp., Rhizopus spp., y Penicillium spp.) han sido sealada como los agentes causales de enfermedades transmitidas por los alimentos y / o alimentos deterioro (Betts, Linton, y Betteridge, 1999; Deak y Beuchat, 1996; Pitt y Hocking, 1997; Walker, 1988). La contaminacin de las materias primas y / o alimentos elaborados con microflora puede tener lugar en diversas etapas de la produccin venta y distribucin. (Deak y Beu - chat, 1996). Por lo tanto, la industria alimentaria en la actualidad utiliza qumicos preservativos para prevenir el crecimiento de los microbios en los alimentos microbios (Sa y gdc Ozcan, 2003). Debido al efecto econmico de los alimentos en malas condiciones y la preocupacin por el consumidor por la seguridad de los alimentos que contengan productos sintetizados qumicamente, una gran cantidad de atencin se ha prestado a compuestos de origen natural o derivados de productos naturales (Alzoreky y Nakahara, 2003; Hsieh, Mau, & Huang, 2001). Recientemente, ha habido un considerable inters en los extractos y aceites esenciales de plantas aromticas con actividades antimicrobiana para el control de patgenos y / o la produccin de toxina de microorganismos en los alimentos (y Alzoreky Nakahara, 2003; y Badeaa Soliman, 2002; y Valero Salmeron, 2003). Por lo tanto, los objetivos de este estudio fueron: (1) analizar la composicin qumica de una hidrodestilacion aceite esencial de O. vulgare ssp. vulgare recogidos a partir de la Regin oriental de Anatolia de Turqua por un sistema GC / MS a fin de que determine el aceite esencial quimiotipo; (2) investigar la actividad antioxidante y antimicrobiana de aceite esencial y extractos de metanol O. vulgare ssp. Vulgare plantas. 2. Materiales y mtodos 2.1. Material vegetal O. vulgare ssp. Vulgare plantas en floracin se recogida de Oltu valle (1200 m), Erzurum, Turqua. La identificacin taxonmica de las plantas se confirmado por un alto planta taxonomista, Meryem Ul Seng , en el Departamento de Biologa, Universidad Atat Urk, Erzurum, Turqua. Materiales vegetales recolectados se secaron en la sombra, y las hojas de la planta fueron separados de el tallo, y en un terreno con un triturador de 2 mm de dimetro malla. El bono muestra ha sido depositado en la Herbario del Departamento de Biologa, Atat Urk Universidad, Erzurum, Turqua (ATA. Herb. 9731). 2.2. Preparacin de los extractos 2.2.1. El aislamiento del aceite esencial El secado al aire y en tierra partes areas de las plantas co seleccionados fueron presentados durante 3 h para la destilacin de agua mediante un aparato de tipo Clevenger (rendimiento de 2,31% v / w). El aceite esencial obtenido(EO) se seca con sulfato de sodio anhidro , despus de la filtracin, se almacenan en 4 C hasta ser probado y analizado. 2.2.2. Preparacin de los extractos de metanol (MeOH) Hojas secas y en polvo (500 g) se extrajeron sucesivamente con 1 l de metanol mediante un Soxhlet extractor de 72 horas a una temperatura no superior al punto de ebullicin del disolvente (Lin et al., 1999). El extracto se filtra usando papel de filtro Whatman (nm. 1) y luego se concentr en vaco a 40 C por medio de un rotavapor Los residuos obtenidos fueron almacenados en un congelador a) 80 C hasta ms pruebas. 2.3. GC-MS anlisis condiciones El anlisis del aceite esencial se realiz con una Hewlett Packard 5890 GC II, equipado con una HP-5 MS columna capilar (30 mm de dimetro 0,25 m, 0,25 ml) y HP 5972 un detector selectivo de masas. GC-MS para deteccin del sistema de ionizacin de un electrn con la energa de ionizacin de 70 eV se utiliz. El helio es el gas portador, con un flujo velocidad de 1 ml / min. Inyector y MS transferencia lnea temperaturas se fijaron en 220 y 290 C, respectivamente. Temperatura de la columna fue inicialmente a 50 C durante 3 min, y luego aument gradualmente a 150 C a 3 C / min tasa, que se celebr durante 10 minutos y, finalmente, elevado a 250 C a 10 C / min. Muestras diluidas (1 / 100 en acetona, v / v) de 1,0 ll manualmente y se inyectaron en el modo splitless. El componentes fueron identificados sobre la base de la comparacin de su tiempo de retencin relativo y con los espectros de masa de las normas, NBS75K biblioteca de datos de la GC-MS sistema y los datos de la literatura (Adams, 2001). Los resultados Tambin se confirma por la comparacin de los com libra orden de elucin con sus ndices de retencin relativo en las fases no polares en la literatura (Adams, 2001).

2.4. Actividad antimicrobiana 2.4.1. Cepas microbianas Los extractos de metanol y el aceite esencial y su fracciones de la O. vulgare ssp. vulgare fueron individualmente a prueba contra un rango de 40 microorganismos, entre a 24 bacterias y 15 especies de hongos y levaduras. La lista de microorganismos se utilizan en los cuadros 3 y 4. Los microorganismos fueron proporcionados por el Departamento de Microbiologa Clnica, Facultad de Medicina, y las plantas Diagnstico de laboratorio de la Facultad de Agricultura en Atat Urk University, Erzurum, Turqua. Identidad de la microorganismos utilizados en este estudio fue confirmado por Sistema de identificacin microbiana de la Biotecnologa Ap - Centro de Investigacin y aplicacin en Atat Urk Universidad. 2.4.2. Disco-difusin de ensayo Los extractos de plantas secas se disolvieron en el mismo disolvente (metanol) a una concentracin final de 30 mg / ml esterilizado por filtracin y el 0,45 lm Millipore filtros. Antimicrobianos pruebas fueron llevadas a cabo por disco mtodo de difusin (Murray, Baron, Pfaller, Tenover, y Yolke, 1995) con 100 ll de la suspensin que contenga 10 8 UFC / ml de bacterias, 10 6 UFC / ml de levadura y 10 4 esporas / ml propagacin de hongos en agar nutriente (AN), Sabouraud agar de dextrosa (SDA) y la patata dextrosa agar (PDA) medio, respectivamente. Los discos (6 mm de dimetro) se impregnado con 10 ll de aceite esencial o los 30 mg / ml extractos (300 lg / disco) en el agar inoculado. Controles negativos se prepararon utilizando el mismo disolventes empleado para disolver los extractos de plantas. Ofloxacina (10 lg / disco), sulbactam (30 lg) + cefoperazona (75 lg) (105 lg / disco) y / o netilmicin (30 lg / disco) fueron utilizados como po - sensibles normas de referencia para determinar la sensibilidad de una cepa / aislar especies microbianas en cada prueba. El placas inoculadas fueron incubadas a 37 C durante 24 h para clnicos de cepas bacterianas, 48 h en el caso de la levadura y 72 h para los hongos aislados. Planta de microorganismos asociados se se incuba a 27 C. Se evalu la actividad antimicrobiana mediante la medicin de la zona de inhibicin en contra de la prueba o nismos. Cada ensayo, en este experimento se repiti dos veces. 2.4.3. Microwell dilucin de ensayo La concentracin mnima de inhibicin (CMI) valores Se determin el contenido bacteriano de las cepas que se sensible a los aceites esenciales y / o extractos del disco en dife - fusin de ensayo. Los inculos de las cepas bacterianas se preparado a partir de 12 h de caldo de las culturas y las suspensiones se ajustado a 0,5 McFarland de turbidez estndar. El es - cin de aceites y extractos de O. vulgare ssp. vulgare dis - resuelto en el 10% dimetilsulfxido (DMSO), fueron los primeros diluida a la concentracin ms alta (500 lg / ml), que se prueba y, a continuacin, doble diluciones seriadas se realizaron en para obtener una concentracin de 7,8 a 500 lg / ml en 10 ml de tubos de ensayo estriles que contienen nutrientes caldo. Valores de MIC O. vulgare ssp. vulgare extractos contra cepas bacterianas y los aislados de Candida albicans se determin con base en un mtodo de dilucin microwell (Zgoda & Porter, 2001) con algunas modificaciones. La placas de 96 pocillos fueron preparados por la dispensacin en cada 95 y ll de caldo nutriente y 5 ll de la inocu - lums. A 100 ll de las soluciones madre de O. vulgare ssp. vulgare aceites esenciales y extractos inicialmente preparado en la concentracin de 500 lg / ml, se aadi en la primera los pozos. Luego, 100 ll de sus diluciones seriadas se transferido a seis pozos. La ltima y que contiene 195 ll de caldo nutriente sin compuestos y 5 de la ll inoculums en cada franja se utiliz como control negativo. El volumen final en cada pocillo fue de 200 ll. Maxipime (Bristol-Myers Squibb) en la concentracin cin de la gama 500-7.8 lg / ml fue preparado en nutrientes caldo y se utiliza como estndar para el control positivo de drogas. La placa se cubre con una placa de sellador estril. Con - tiendas de campaa de cada bien se mezclan en un plato agitador a 300 rpm s de 20 y luego se incuba a la temperatura adecuada durante 24 h. Crecimiento microbiano en cada medio se determi - minadas mediante la lectura de los respectivos absorbancia (Abs) a 600 nm y utilizar la ELX 800 universal lector de microplacas (Biotek Instrument Inc., Highland Park, Vermont, EE.UU.) y confirmado por forro ll 5 muestras procedentes de los pozos en claro medio de agar nutriente. El extracto de la prueba en este estudio se proyect dos veces en contra de cada organismo. El MIC se defini como la concentracin ms baja de la com libras para inhibir el crecimiento de microorganismos. 2.4.4. Centro de ensayo de dilucin en agar MIC valores aislados de los hongos se han estudiado de determinada mediante el mtodo de dilucin en agar, que se describen anteriormente (Gul, Ojanen, y Hnninen, 2002). El es cin de aceites de O. vulgare ssp. vulgare se aadieron ASEP mente estril fundido para PDA soporte de Tween 20 (Sigma 0,5%, v / v) en el volumen adecuado

para producir la gama de concentracin de 7.8-500 lg / ml. El PDA agar resultante se vierte en las soluciones de Petri platos inmediatamente despus de agitacin. Las placas fueron in situinoculadas con 5 ll (10 4 esporas / ml) de cada uno de los hongos aislados tarde. Anfotericina B (Sigma A 4888) se utiliz como de referencia de medicamentos antifngicos. Los platos fueron inoculados 27 y se incuba a 37 C durante 72 horas para la planta y clnica hongos aislados, respectivamente. Al final de la incubacin perodo, las placas fueron evaluados para detectar la presencia o falta de crecimiento. MIC se determinaron los valores como la concentracin ms baja de los aceites esenciales en caso de ausencia de crecimiento ha sido registrada. Cada ensayo repetido por lo menos dos veces. 2.5. Actividad antioxidante 2.5.1. Ensayo DPPH Los tomos de hidrgeno o electrones capacidad de donacin y los correspondientes extractos de algunos compuestos puros se midi a partir de la decoloracin de color morado solucin de metanol DPPH. Este espectrofotomtrico ensayo de los usos estables diphenylpicrylhydrazyl radical (DPPH) como un reactivo (Burits y Bucar, 2000; Cuendet, Hostett - mann, y Potterat, 1997). Cincuenta microlitros de diversos concentraciones de los extractos en metanol se aadi a 5 ml de metanol, un 0,004% de solucin de DPPH. Despus de 30 min perodo de incubacin a temperatura ambiente la absor Bance fue ledo en contra de un blanco a 517 nm. Inhibicin los radicales libres DPPH en porcentaje (% I) se calcul en el siguiente manera: I% A en blanco A A muestra = A en blanco 100 donde A en blanco es la absorbancia del control de la reaccin (que contiene todos los reactivos, excepto el de ensayo), y Un muestra es la absorbancia del compuesto problema. Extracto concentracin de proporcionar el 50% de inhibicin (CI 50 ) Se calcula a partir de la grfica de porcentaje de inhibicin de trazado contra la concentracin de extracto. Antioxidante sinttico nuevo agente butil hyroxytoluene (BHT) se utiliz como po - sensibles y el control de todas las pruebas se realizaron por triplicado. 2.5.2. B-caroteno-cido linoleico ensayo En este ensayo se determina la capacidad antioxidante de la medicin de la inhibicin de la com-orgnicos voltiles libras y el conjugado dieno hidroperxidos por cin de la oxidacin del cido linoleico (Dapkevicius, Venskutonis, Van Beek, y Linssen, 1998). Un balance tan - solucin de b-caroteno-cido linoleico mezcla se prepar de la siguiente manera: 0,5 mg de b-caroteno se disolvi en 1 ml de cloroformo (grado HPLC), 25 de ll de cido linoleico y 200 Tween 40 mg fue aadida. Cloroformo fue completamente evaporado mediante un evaporador al vaco. Luego de 100 ml agua destilada saturada con oxgeno (30 min 100 ml / min) se aadi con una vigorosa agitacin. 2500 II de la presente mezcla de reaccin fue dispersada a los tubos de ensayo y 350 ll partes de los extractos en etanol elaborado a 2 g / l concentraciones y se han aadido emulsin sistema incubadas hasta 48 horas a temperatura ambiente. Mismo procedimiento se repiti con control positivo y un BHT en blanco. Despus de este perodo de incubacin de la absorbancia las mezclas se midieron a 490 nm. Antioxidante ca - pacities de los extractos se compararon con los BHT en la misma concentracin que consiste en blanco y slo 350 ll etanol. 2.5.3. Ensayo para el total de fenlicos Fenlicos totales de los componentes del extracto de metanol de O. vulgare ssp. Vulgare fue determinada mediante el empleo de la mtodos que figuran en la literatura (Chandler y Dodds 1983; Slinkard y Singleton, 1997) la participacin de Folin - Ciocalteu reactivo y cido glico como estndar. 0,1 ml de la solucin que contiene extracto lg 1000 fue tomada en un matraz aforado, 46 ml de agua destilada y 1 ml de Folin - Ciocalteu reactivo y se aadieron matraz se Shaked a fondo. Despus de 3 minutos, 3 ml de solucin 2% de Na 2 C 3 se aadi la mezcla y se le permiti presentarse a las 2 h con agitacin intermitente. Absorbancia se midi en 760 nm. El mismo procedimiento se repiti a todas las normas soluciones estndar de cido glico (0-1000 g/0.1 ml A1 ) Y nor - curva estndar se obtuvo que la ecuacin que se indican a continuacin: Absorbancia: 0:0012 cido glico lg 0:0033 3. Resultados y discusin 3.1. Composicin qumica del aceite esencial La composicin de O. vulgare ssp. vulgare esencial aceite se analiz por medio de GC-MS, lo que lleva a comparar los tiempos relativos de retencin y la masa espectros de los componentes de petrleo con las de los autnticos-sam principios y datos de espectros de masa biblioteca. Como se muestra en la Tabla 1, GC / MS anlisis del petrleo crudo result en la identificacin de 62 compuestos represen - que representan alrededor del 89% del petrleo. Caryophyllene (14,4%) y spathulenol (11,6%) fueron los ms destacados compuestos, seguido por germacrene-D (8,1%) y un terpineol (7,5%). Como se inform anteriormente, dos grandes chemotypes se postula

para los aceites esenciales de Origanum varias especies, consiste principalmente en un mono - terpeno alcoholes, por ejemplo, terpinen-4-ol, ya sea solo o con junto con cis - y trans-hidrato sabinene y la otros ricos en fenoles, a saber, el timol y / o el carvacrol (Aligiannis et al., 2001; Sarer, Schefler, y Baerheim, 1982; Sivropoulou et al., 1996). Adems, se sabe que la especie O. vulgare presenta una gran variabilidad en su aceite esencial de composicin debido a la existencia de diferentes subespecies, sino tambin a uno de los numerosos parmetros que principalmente son las condiciones ambientales y climticas. En el caso de O. vulgare ssp. vulgare, el conocido chemotypes del aceite esencial son los que contienen como principales componentes los fenoles timol y / o el carvacrol (Fleisher y Fleisher, 1991) y los que contienen germac rene-D y terpinen-4-ol (Aligiannis et al., 2001; Sivr opoulou et al., 1996). Aparentemente, nuestros resultados muestran una aceite nuevo quimiotipo se compone principalmente de caryophyllene / spathulenol y en segundo lugar germacrene-D. En lo que respecta al rendimiento de aceite esencial, el de los aceites esenciales de organo que pertenecen al timol y / o el carvacrol quimiotipo presentar los rendimientos altos del petrleo, en contraste con los otros quepresentar valores muy inferiores (Kokkini, Karousou, y Vo - kou, 1994; Sezik, T umen, Kirimer, Ozek, y Baser, 1993). En nuestro caso, es de destacar el alto aceite esencial rendimiento de O. vulgare ssp. vulgare, a pesar de la falta de composicin fenlica del aceite. 3.2. Monto total de compuestos fenlicos Sobre la base de valor de la absorbancia de la ex-metanol tracto solucin, reaccion con reactivo Folin-Ciocalteu y en comparacin con las soluciones patrn de cido glico equivalentes segn lo descrito anteriormente, el importe del total fenlicos se estim en 220 lg / mg de extracto seco (22%, w / w). 3.4. Actividad antimicrobiana La actividad antimicrobiana de O. vulgare ssp. vulgare aceites esenciales y extractos de microorganismos contra los ex examinado en el presente estudio y su potencia se cualitativa y cuantitativamente evaluada por la presencia o la ausencia de zonas y la zona de inhibicin de dimetro, y MIC valores. Los resultados se indican en los cuadros 3-6. El resultados mostraron que el aceite esencial de O. vulgare ssp. vulgare tenido de actividad antimicrobiana contra 10 bacterias, y 15 de hongos y levaduras una especie estudiada. Encendido otra parte, el extracto metanlico de la parte area de O. vulgare ssp. Vulgare plantas no mostraron los antimicrobianos actividades (Tablas 3-5). La mxima inhibicin de las zonas y los valores de MIC cepas bacterianas, que son sensibles a los aceites esenciales de O. vulgare ssp. vulgare, fueron en el rango de 10-33 mm, y 15.62-125 ll / ml (Tablas 3-5). La mxima inhibi - cin zonas y los valores de MIC de la levadura y los hongos de especies sensible a los aceites esenciales de O. vulgare ssp. vulgare, 13-35 mm y se 31.25-125 ll / ml, respectivamente (Ta - BLES 3 y 5). Con base en estos resultados, es posible concluir que el aceite esencial ms fuerte y ms amplia espectro de actividad antimicrobiana en comparacin con el extracto metanlico prueba. Esta observacin confirma la las pruebas en un estudio anterior informa de que los principales aceite de incluir ms sustancias antimicrobianas de medici - nal que otros extractos de plantas como el agua, el metanol, el etanol y el hexano (Ahmad, Mehmood, y Mohammad, Cuadro 4 Actividad antimicrobiana de Origanum vulgare ssp. vulgare y extraer aceite esencial contra la levadura y los hongos aislados de la prueba basada en la difusin de disco mtodo Levaduras y hongos de especies Zona de inhibicin de dimetro (mm) alrededor de los discos impregnados con 10 ll de extractos y aceites esenciales (300 lg / disco) Aceite esencial (10 ll / disco) Extractos de plantas MeOH Control negativo MeOH Estndar de discos de antibiticos un un OFX ofloxacina (10 lg / disco); CCAH sulbactam (30 lg) + cefoperazona (75 lg) (105 lg / disco); NET netilmicin (30 lg / disco) fueron utilizados como positiva normas de referencia de los discos de antibiticos (Oxoid). Cuadro 5 Los valores de MIC Origanum vulgare ssp. Vulgare del aceite esencial en contra de la prueba en cepas bacterianas microdilucin ensayo (lg / ml) Especies de bacterias Aceite esencial de la norma de drogas (maxipime) 1998; Eloff, 1998). Conclusiones de este estudio apoya la observaciones de otros investigadores sobre O. vulgare ssp. vulgare que contienen algunas sustancias con antibacte - propiedades de materiales (Decanos y Svoboda, 1990; Leung & Foster, 1996; Zargari, 1990). Este es el primer estudio para proporcionar datos acerca de los extractos y aceites esenciales de O. vulgare ssp. vulgare plantas evaluadas contra una amplia gama de micro - organismos poseen potencial antibacterianos, antifngicos y anticandidal activities. This result may indicate that es- sential oil of O. vulgare ssp. vulgare can be used as nat- ural preservatives in food against the well known causal agents of foodborne diseases and food spoilage such as E. coli , Enterobacter spp., Bacillus spp., Salmonella spp., Staphylococcus aureus , Candida spp., Fusarium spp., Aspergillus spp., Rhizopus spp., and Penicillium spp. isolates. Our data confirmed the findings of the previous studies reported that caryophyllene and germacrene-D, the main constituents of O. vulgare , and some other medicinal plants, have significant antibacterial and antifungal activities (Kalodera, Pepeljnjak, Blazevic, & Petrac, 1997; Kazarinova et al., 2002; Simic, Palic, Vajs, Milosavljevic, &

Djkovic,2002). Therefore, the results may suggest that O. vulgare ssp. vulgare possess compounds with antimicrobial and an- tioxidant properties which can be used for preservation and/or extension the self-life of raw and processed foods as well as pharmaceuticals and natural therapies of in- fectious diseases in human, and management of plant enfermedades. In addition, the data in the present study are supporting the use of O. vulgare ssp. vulgare plants as tea or additive in foods, and traditional remedies for the treatment of infectious diseases.