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ROTEIRO DE AULA PRTICA DIFERENAS ENTRE CLULAS ANIMAIS E VEGETAIS Prtica - Observao da mucosa bucal. Raspar a mucosa bucal com o auxlio de uma esptula de madeira. Com o material colhido fazer um esfregao fino e transparente sobre uma lmina seca. Deixar a lmina secar movimentando-a no ar. Corar o material com azul de metileno ou orcena actica durante 5 minutos. Cobrir com lamnula e observar ao microscpio com objetivas de 10x e 40x. Esquematizar o material observado. Prtica - Observao da epiderme de pimento (Capsicum annuum). Faa um corte fino, pequeno e transparente na casca do pimento. Deposite sobre a lmina e adicione uma gota de cloreto de zinco iodado. Cubra com lamnula (retirar excesso de corante com papel filtro se necessrio) e observe ao microscpio com objetivas de 10x e 40x. Na objetiva de 40x fechar levemente o diafragma. Faa outro corte, corando-o com hidrxido de amnia. Aguarde alguns segundos, cubra com lamnula (retirar excesso de corante com papel filtro se necessrio) e observe ao microscpio como anteriormente. Esquematize as observaes. ESTUDO DE CLULAS VEGETAIS Prtica - Clulas da epiderme inferior de Setcreasea purpurea. Retirar um pedao da epiderme inferior da folha de Setcreasea e colocar em uma lmina contendo uma gota de gua destilada. Cobrir com lamnula. Retirar o excesso de gua se necessrio. Observar ao microscpio com objetivas de 10x e 40x. Retirar a lmina do microscpio e pingar uma gota de cloreto de zinco iodado ao lado da lamnula. Sem retirar a lamnula e com o auxlio de papel filtro, faa o cloreto de zinco substituir a gua debaixo da lamnula. Aguarde alguns minutos e observe novamente ao microscpio. Esquematize as observaes. Prtica - Epiderme do catfilo de Allium cepa (cebola) Destacar um pedao da epiderme do catfilo da cebola e colocar em uma lmina contendo uma gota de cloreto de zinco iodado. No deixar o catfilo enrugado, esticando-o se necessrio. Cobrir com lamnula (retirar excesso de corante com papel filtro se necessrio) e observar ao microscpio com objetivas de 10x e 40x. Esquematize as observaes. Prtica - Folha de Anacharis sp (Eldea) Destacar um fololo de Anacharis e colocar em uma lmina contendo gua. Cobrir com lamnula e observar em objetiva de 10x e 40x. Esquematize as observaes. Relatrio: Entregar ao final da aula. Observar todas as lminas nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Desenhar com a objetiva de 40x, identificando as estruturas celulares observadas. OBSERVAO DE ORGANISMOS PROCARIONTES: Prtica - Bactria da coalhada (iogurte - Bacilo lacteo). Sob uma lmina coletar uma pequena poro de coalhada. Pingar uma gota de gua e dissolver bem. Fazer um esfregao, tomando-se o cuidado de identificar o lado da lmina no qual encontra-se o esfregao. Secar bem a lmina, podendo utilizar chapa aquecida. Pingar 3-4 gotas da mistura lcool-clorofrmio. Secar o preparado movimentando a lmina no ar. Em seguida, pingar 2 gotas de azul de metileno, espalhando-o pela lmina. Aguardar 5 minutos, lavando com gua destilada. Limpar o excesso de gua e levar ao microscpio para observao em objetiva de 10x e 40x. Fechar um pouco o diafragma aps a localizao do material. Represente o material observado. Prtica - Bactrias do vinagre (Acetobacter aceti). Sob uma lmina coletar pequena poro da madre do vinagre azedado (pelcula formada na superfcie) Faz-se um esfregao, secando-o lentamente em chama ou placa aquecida. Pingar 2-3 gotas de azul de metileno, fazendo-o correr pela lmina. Aguardar 10 minutos, e lavar a lmina em gua corrente. Adicionar glicerina e cobrir com lamnula. Observar em objetiva de 10x e 40x.
Prtica - Reconhecimento de bactria e algas azuis. Prepare as culturas A e B com antecedncia de 3 a 4 dias. No frasco A coloque cerca de 10 gro de pimenta do reino e 100ml de gua filtrada. Fechar o frasco, deixando-o em local pouco iluminado. No frasco B coloque grama com raiz, bem picada, forrando o fundo do frasco. Acrescente 100 ml de gua filtrada. Deixar o frasco aberto em local areja do e iluminado. Coloque uma gota de cada cultura, tomando-se o cuidado de no misturar os conta-gotas, em lminas (diferentes) limpas, cobrindo-as com lamnula. Observe ao microscpio em objetiva de 10x e 40x. Faa esquemas do que encontrar. OBSERVAO DE ORGANISMOS EUCARIONTES: Prtica - Clulas de levedo. Tome uma poro de fermento de po, dissolvendo-o em gua morna. Junte acar, deixando descansar por 15 a 20 minutos. Pingue uma gota da suspenso sobre uma lmina, cubra com lamnula e observe ao microscpio. Em seguida, fixe o material passando a lmina sobre uma chama. Corar 5 minutos com violeta genciana. Lavar rapidamente em gua corrente, cobrir com lamnula e observar ao microscpio com as objetivas de 10x e 40x. Esquematize as observaes. Prtica - Identificao de vrios tipos de protistas. Com antecedncia de 6 a 7 dias prepare as culturas A e B. Coloque alface picada em uma frasco (A) e grama picada em outro (B). Acrescente a ambos alguns gros de arroz cru e 100 ml de gua filtrada. Deixe os frascos em local arejado e iluminado, sem exposio direta ao sol. Depois de alguns dias cobrir os frascos com papel filtro ou algodo. Coloque uma gota da cultura (A ou B - colha a pelcula que se forma na superfcie ou o sedimento do fundo) em uma lmina, cubra com lamnula e observe ao microscpio com objetivas de 10x e 40x. Esquematize as observaes. Relatrio: Entregar ao final da aula. Observar todas as lminas nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Desenhar com a objetiva de 40x, identificando as estruturas celulares observadas. Roteiro de aula prtica IDENTIFICAO DE COMPONENTES QUMICOS CELULARES Extrao de DNA Material: cebola grande - 250 gramas; Sal de cozinha - 3gramas; Detergente neutro - 10ml; lcool etlico o 95% gelado; Papel filtro, tubos de ensaio, funil banho-maria a 60 C Metodologia: Picar a cebola em pedaos pequenos. Bater no liqidificador e reservar 25g Preparar 100ml da soluo de extrao: 3g de sal, 10ml de detergente. Completar com gua destilada at 100ml. o Junte a cebola com a soluo de extrao em um frasco e deixar em banho-maria a 60 C durante 15 minutos. Em seguida, resfrie colocando o recipiente em gelo. Coe a mistura em papel filtro e recolha o filtrado em um tubo de ensaio. Despeje, delicadamente, o etanol 95% no tubo de ensaio. O DNA sobe para o etanol, no qual insolvel, ficando preservado e visvel Roteiro de aula prtica IDENTIFICAO DE COMPONENTES QUMICOS CELULARES Carboidratos: O amido um polissacardeo cuja unidade monossacardica a glicose. Apresenta-se sob duas formas: amilose, que consiste de longas cadeias no ramificadas e que na presena de iodo, do colorao roxoazulada, e amilopectina, que contm cadeias altamente ramificadas e do colorao marrom-avermelhada. Ambas esto presentes em propores variveis nos tecidos vegetais de reserva. 01 - Teste de colorao do amido - Tuberculus tuberosae (batata inglesa) Cortar, com a gilete, um pedao muito fino e pequeno do interior da batata e colocar sobre uma lmina. Corar o material com Lugol por 5 minutos. Cobrir com lamnula. Observar. 02 - Euforbia splendens (coroa de Cristo) Pingar sobre a lmina uma gota de ltex da coroa de Cristo dissolvido em gua. Pingar uma gota de Lugol. Cobrir com lamnula. Observar.
Lipdios Os lipdio se classificam em simples e compostos. Entre os compostos podem ser diferenciados os lipdios figurados, que so visveis em forma de gotas refringentes e os mascarados, que so demonstrados por anlises qumicas. 03 - Citrus sp (laranja e limo) Fazer um corte tangencial bem fino na casca da laranja ou limo de maneira que possa passar a luz que nele incidir. Colocar sobre um vidro de relgio e pingar algumas gotas de Sudan IV e corar por sete minutos. Retirar o corte com um pincel e coloc-lo sobre uma lmina. Cobrir com lamnula. Observar. Protenas Reao de biureto: o sulfato de cobre (CuSO4) em meio alcalino reage com compostos contendo duas ou mais ligaes peptdicas, resultando um complexo de colorao violeta. A intensidade da cor proporcional ao nmero de ligaes peptdicas existentes. 04 - Leite e clara de ovo Pipetar 0,5ml de: 1)soluo de clara de ovo diluda em gua; 2)leite; 3)gua e 4)gelatina. Colocar em tubos de ensaios separados. Adicionar 05 gotas de CuSO4 a 1% e 05 gotas de NaOH 2,5N. Observar se ocorrem alteraes de cores e explicar. Reao Xantoproteica: o cido ntrico (HNO3) reage com os anis benznicos dos aminocidos triptofano, tirosina e fenilalanina, formando nitro compostos amarelos em meio alcalino. Realizar em conjunto com a prtica 06. 05 - Leite e clara de ovo Pipetar 0,5ml de: 1) soluo de clara de ovo diluda em gua; 2)leite; 3)gua e 4)gelatina. Colocar em tubos de ensaios separados. Adicionar 05 gotas de HNO3 concentrado e 05 gotas de NaOH 20%. Observar se ocorrem alteraes de cores e explicar. OBS.: Evitar respirar os odores (gases) liberados pelo HNO3. Manuseie-o com cuidado!! Realizar em conjunto com a prtica 06. Identificao de pH Para determinar o pH de solues usamos indicadores e uma tabela de pH. Os valores da escala (0-14) + referem-se as propores de H e de OH presentes na soluo. 06 - Molhar as fitas de papel tornassol nas solues qumicas separadas e misturadas utilizadas nas prticas anteriores (04 e 05). Observar a colorao das fitas e explicar. Relatrio: Entregar ao final da aula. Observar todas as lminas nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Desenhar com a objetiva de 40x, identificando as estruturas celulares observadas. Identificar os amiloplastos e a morfologia dos gros de amido. Identificar as bolsas de leo ou depsitos de lipdios e verificar se a concentrao de lipdios a mesma em todas a sua extenso.