Welcome to Scribd, the world's digital library. Read, publish, and share books and documents. See more
Download
Standard view
Full view
of .
Look up keyword
Like this
784Activity
0 of .
Results for:
No results containing your search query
P. 1
5.- Cromatografia en Capa Fina

5.- Cromatografia en Capa Fina

Ratings:

3.5

(2)
|Views: 78,615 |Likes:
Conocer y aplicar la técnica de cromatografía en capa fina, c.c.f., sus características y los factores que en ella intervienen.
Calcular valores de Rf de varias sustancias.
Deducir, a través del Rf la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados.
Aplicar la técnica de c.c.f. como criterio de pureza e identificación de las sustancias.
Conocer y aplicar la técnica de cromatografía en capa fina, c.c.f., sus características y los factores que en ella intervienen.
Calcular valores de Rf de varias sustancias.
Deducir, a través del Rf la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados.
Aplicar la técnica de c.c.f. como criterio de pureza e identificación de las sustancias.

More info:

Categories:Types, Research, Science
Published by: .:("*"BLacK BuLLeT"*"):. on Apr 13, 2009
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as DOC, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

10/27/2014

pdf

text

original

 
PRÁCTICA # 5“CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA”
OBJETIVOS:
°
Conocer y aplicar la técnica de cromatografía en capa fina, c.c.f., sus características y los factores que en ellaintervienen.
°
Calcular valores de R
de varias sustancias.
°
Deducir, a través del R
la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de loseluyentes utilizados.
°
Aplicar la técnica de c.c.f. como criterio de pureza e identificación de las sustancias.
INTRODUCCIÓN:
El botánico ruso Mikhail Tswett estableció las ventajas de la cromatografía y fue el primero en utilizar estetérmino. Es recordado como el Padre de la Cromatografía. Ismailov y Scraiber utilizaron láminas de vidrio paracolocar capas muy delgadas de alúmina y luego aplicaron extractos vegetales, dando así la primera forma deCromatografía de Capa Fina. Egon Stahl (1956) dio el nombre de Cromatografía de Capa Fina. Estandarizó losprocedimientos, equipos y adsorbentes dando un auge a la técnica simple, a bajo costo y eficiente.La cromatografía es una técnica de separación extraordinariamente versátil que presenta distintas variantes. Entoda separación cromatográfica hay dos fases (sólida, líquida o gas) una móvil y otra estacionaria, que semueven una con respecto de la otra manteniendo un contacto íntimo. La muestra se introduce en la fase móvil ylos componentes de la muestra se distribuyen entre la fase estacionaria y la móvil. Los componentes de lamezcla a separar invierten un tiempo diferente en recorrer cada una de las fases, con lo que se produce laseparación. Si un componente está la mayor parte del tiempo en la fase móvil el producto se mueverápidamente, mientras que si se encuentra la mayor parte en la fase estacionaria, el producto queda retenido ysu salida es mucho más lenta.TIPOFASE ESTACIONARIAFASE MÓVILLÍQUIDO - SÓLIDOSólido inerte como gel de sílice o alúminadisolventesINTERCAMBIO IÓNICOResina cambiadoraDisoluciones acuosasLÍQUIDO LÍQUIDOLíquido adsorbido en un soporte sólidoLíquidoGAS - LÍQUIDOPelícula de líquido adsorbida sobre un soporte sólidogas
Cromatografía de Capa Fina (TLC ó CCF)
La cromatograa de capa fina se conoce normalmente por sus siglas en inglés (TLC, thin layer chromatography). Es una técnica muy utilizada para la identificación y determinación de pureza de compuestosTambién puede utilizarse como técnica de separación (cromatografía de capa fina TLC preparativa) a muypequeña escala.En esta técnica la fase estacionaria es una capa fina de gel de sílice u otro soporte con propiedadesadsorbentes (en nuestro caso de 25 mm de espesor) dispuesta sobre un soporte de vidrio o aluminio quedenominaremos
 placa
. El eluyente o fase móvil será la mezcla de disolventes adecuada.La cromatografía de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar moléculas relativamentepequeñas. La separación de mezclas de moléculas mediante la cromatografía de capa fina se basa en elprincipio del reparto entre dos fases. Al igual que otras cromatografías, consiste de una fase estacionaria y unafase móvil y el principio es el mismo: la sustancia de interés se adherirá a la fase estacionaria o se moverá conla fase móvil, viajando una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria. Lafase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un gel de silicato (vidrio molido bienfino) unido a una superficie sólida (una placa de vidrio, aluminio, plástico o papel). Esta superficie sólida puedeser rígida o flexible. El tipo de fase estacionaria que se utilice en un experimento dependerá del tipo demoléculas que se quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores fluorescentes. La faseestacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente orgánico o una mezcla de ambos.El procedimiento es sencillo: Se colocan las muestras a un centímetro del borde en uno de los extremos de laplaca, se deja secar, se coloca la placa en un envase (tanque de desarrollo) que ya contiene una pequeñacantidad del solvente, se tapa y se deja correr por un rato. El solvente subirá por capilaridad e irá arrastrando lasmoléculas, las cuales se moverán según la afinidad que muestren por la fase estacionaria. Si la mezcla demuestras que se está analizando presenta color, se verán los distintos colores migrando a distintas velocidades.Si son incoloras hay que someter la placa a algún tratamiento con una sustancia desarrolladora (developer)
1
 
para poder determinar la presencia de sustancias sobre el silicato. El tipo de desarrollador dependerá del tipo demoléculas que se analizan.La separación de mezclas complejas de productos y el aislamiento y purificación de los componentesindividuales es de gran importancia en la química orgánica. La cromatografía constituye una importanteherramienta en este sentido, complementaria con las técnicas clásicas: cristalización, destilación, etc.En la actualidad existe una gran variedad de técnicas cromatográficas a disposición del químico, desde algunasmuy simples: Cromatografía de capa fina (TLC), cromatografía de columna a técnicas mucho más sofisticadasque requieren equipos de elevado costo: Cromatografía de gases (GC), cromatografía de Líquidos (LC) HPLC,etc. No obstante, el fundamento de la mayor parte de las técnicas cromatográficas es similar, y su conocimientofacilita la comprensión de todas ellas.Proceso de Adsorción: La muestra aplicada en la capa es adsorbida en la superficie del material por la acciónde fuerzas electrostáticas (fuerzas de Van der Waals, puentes de Hidrógeno, efectos inductivos, etc.). Luego,cuando la capa es expuesta a un flujo por acción capilar, se inicia una competencia de enlaces entre los sitiosactivos del adsorbente y la sustancia con el solvente. Los adsorbentes más utilizados en la Cromatografía deCapa Fina son:
°
Sílica gel (se utiliza en el 80% de las separaciones)
°
Óxido de Aluminio ó Alúmina (ácida, neutra ó básica)
°
Tierra Silícea ó Kieselguhr 
°
Celulosa (Nativa o micro-cristalina)
°
PoliamidasEstos adsorbentes deber tener las siguientes características:
°
Tamaño de Partícula
°
Volumen de Poro
 
°
Diámetro de Poro
 
°
 Área Superficial 
 
°
Homogeneidad
°
Pureza
1. Aplicación de la muestra
La introducción de la muestra se realiza utilizando un tubo capilar. Para ello se ha de disolver una pequeñacantidad de la muestra a analizar en un disolvente volátil. A continuación, el extremo del tubo capilar seintroduce en la disolución. La disolución ascenderá por el tubo por capilaridad. En uno de los lados de la placa,aproximadamente a 3 mm del borde, se ha de trazar a lápiz una línea recta,
línea base
, y sobre ella unos puntosde referencia. Sobre dichos puntos se
 pincha
con el tubo capilar, de modo que una pequeña cantidad de ladisolución pase a la placa. De esta manera, la muestra queda adsorbida por el soporte sólido en la placa.
2. Realización del cromatograma: Correr una placa.
El cromatograma se realiza en una cubeta que contiene el eluyente elegido. El nivel del eluyente debe de ser menor que la separación entre el borde de la placa y la línea base el lugar donde se ha efectuado el
 pinchazo
.La placa se introduce en la cubeta y se tapa. El eluyente asciende por la placa por capilaridad, arrastrando a supaso a los componentes de la mezcla. Naturalmente los componentes de la mezcla son arrastrados condiferente velocidad, de acuerdo con su distinta polaridad. Cuando el
frente
del eluyente llega casi al bordesuperior de la placa, esta se extrae de la cubeta. Se debe de trazar una nueva línea a lápiz indicando el nivelhasta el que el ha ascendido el eluyente.
3. Revelado del cromatograma
Una vez que el eluyente sobre la placa se ha secado se ha de proceder a la visualización del cromatograma. Endeterminados casos, si los compuestos son coloreados esto puede realizarse de forma directa. Sin embargo,para compuestos incoloros es necesario utilizar diferentes técnicas de revelado.Las placas de cromatografía comerciales portan un agente fluorescente inorgánico en la fase estacionaria. Ellopermite visualizar el cromatograma iluminando la placa con una lámpara de luz ultravioleta UV. Los diferentescompuestos aparecen en la placa como
manchas
circulares. Las distintas manchas deben de marcarse a lápizsobre la placa para su estudio posterior.Diferentes reactivos orgánicos también permiten el revelado permanente de la placa, obteniéndose manchascoloreadas en ella. De entre los métodos más comunes puede destacarse la utilización del Iodo. Para ello laplaca se introduce en una cubeta que contiene cristales con Iodo y se deja estar en ella durante unos minutos.Los vapores de iodo se disuelven en las manchas de los compuestos orgánicos tiñéndolas de color marrón.
4. Interpretación: factor de retención R 
2
 
Una vez que la placa ha sido revelada nos encontramos con una serie de manchas circulares. Si la separaciónha sido buena cada una de ellas se corresponderá a un único compuesto de la mezcla inicial.Es importante tener en cuenta que un mismo compuesto corre siempre de la misma forma en cromatogramasrealizados en las mismas condiciones (mismo soporte y mismo eluyente). Para describir las propiedadescromatográficas de cada compuesto se define el
factor de retención R 
.
El factor R
es el cociente de la distancia recorrida por el compuesto (d
c
) entre la distancia recorrida por eleluyente (d
e
). Obviamente el
toma valores entre 0.0 y 1.0. Siempre ha de indicarse el eluyente y el soporte enel que se ha determinado.
dedc R
 f  
=
FACTORES QUE INFLUYEN EN LA SEPARACIÓN POR CROMATOGRAFÍA:
Polaridad 
La mayor o menor velocidad de desplazamiento a lo largo de la columna depende directamente de la estructurade cada molécula así como de los grupos funcionales que pueda poseer. El motivo principal es su diferentepolaridad. Moléculas más polares quedan más retenidas en la
fase estacionaria
, es decir "corren menos",mientras que las moléculas menos polares se ven menos retenidas y avanzan a mayor velocidad arrastradaspor eluyente.
Elección del eluyente
La polaridad de la mezcla de disolventes -
eluyente
- utilizado es clave para obtener una buena separación.Eluyentes más polares arrastran más fácilmente a los compuestos, es decir los compuestos "corren más" eneluyentes más polares. Por el contrario, mezclas de disolventes con poca polaridad desplazan los compuestos através de la columna con mayor lentitud.La polaridad relativa de los disolventes más usuales se encuentra relacionada en una tabla denominada "serieeluotrópica" (polaridad creciente de izquierda a derecha): hexano, ciclohexano, tolueno, éter, cloroformo,diclorometano, THF, acetato de etilo, acetona, etanol, metanol, agua.De nuevo, es importante recordar que en la elección adecuada de la mezcla de disolventes radica el éxito de laseparación en la cromatografía de revelado.Las placas de cromatografía comerciales portan un agente fluorescente inorgánico en la fase estacionaria. Ellopermite visualizar el cromatograma iluminando la placa con una lámpara de luz ultravioleta UV. Los diferentescompuestos aparecen en la placa como
manchas
circulares. Las distintas manchasPor su simplicidad y rapidez, la cromatografía de capa fina es una herramienta muy valiosa en el análisis en ellaboratorio de química orgánica. Algunas de sus aplicaciones son:
La identificación de compuestos conocidos en una mezcla por comparación del cromatograma de la mezclacon el del compuesto conocido.
La determinación del final de una reacción química: la desaparición de la mancha correspondiente al productode partida indica la conclusión de la reacción.
Criterio de pureza: la existencia de una o varias manchas en el cromatograma indica la presencia de uno ovarios productos.= PARTE EXPERIMENTAL=
MATERIALCANTIDADMATERIALCANTIDAD
Placas p/cromatografía (portaobjetos)Matraces erlenmeyer de 10 ml ovialesPipeta graduada de 10 ml652Probeta de 25 mlFrasco cámaraAgitador devidrioCapilaresEspátula15141
SUSTANCIAS
3

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->