BAB 3.

METODOLOGI

3.1 Waktu dan Tempat Praktikum Teknik Media Tanam acara 3 mengenai Pembuatan Preparat Awetan Nematoda Dan Pembuatan Biakan Murni Jamur dilaksanakan pada hari Kamis tanggal 18 April 2013 pukul 07.00 WIB di Labotratorium Hama dan Penyakit Tumbuhan, Fakultas Pertanian, Universitas Jember.

3.2 Alat dan Bahan 3.2.1 Alat 1. Mikroskop 2. Cawan Petri 3. Pipet 4. Tabung reaksi 5. Jarum Ose 6. Laminair air flow 7. Bunsen 8. Alat pancing nematoda 9. Preparat dan deglass

3.2.2

Bahan

1. Glasswol 2. Media agar miring 3. Suspensi nematoda 4. Laktofenol 5. Parafin 6. Cat kuku

3.3 Cara Kerja 3.3.1 Membuat Preparat Awetan Nematoda

1. Membuat lingkaran parafin pada preparat dan menetesi laktofenol secukupnya kurang lebih 1- 2 tetes. 2. Memancing nematoda pada suspensi dengan alat pancing nematoda di bawah mikroskop, mengusahakan memancing nematoda yang parasit. 3. Meletakkan nematoda yang telah terpancing di tengah-tengah lingkaran parafin dalam laktofenol. 4. Menutup dengan deglass 5. Memanaskan di atas lampu bunsen beberapa detik untuk mencairkan parafinnya lalu melapisi dengan cat kuku. 6. Memberi etiket tentang nama spesies, nama kolektor, tempat, waktu, dan lainlain. 7. Menyimpan dalam kotak preparat.

3.3.2 Membuat Biakan Murni Jamur 1. Mengambil cawan petri yang berisi hasil isolasi jamur, lalu menempatkan pada laminair air flow. 2. Mengamati jamur-jamur yang tumbuh. 3. Mengambil satu ose jamur dengan jarum ose steril. 4. Membuka kapas pada tabung reaksi yang berisi media agar miring dan memanasi ujungnya dengan lampu bunsen. 5. Menggoreskan 1 ose jamur pada media agar miring di dalam laminair air flow. 6. Menutup kembali tabung reaksi berisi media agar tersebut dengan kapas dan menyimpannya dalam laminair air flow. 7. Mengamati hasil biakan murni jamur apakah jamur tersebut tumbuh atau tidak.