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ALREDEDORES
ALREDEDORES SISTEMA
Sistema se encuentra separado de los alrededores, los cuales son el resto del universo. El limite del sistema puede ser real como las paredes de un fermentador o imaginario.
SISTEMA ESTACIONARIO
Cuando todas las propieades del sistema como son temperatura, presion, concentracion, volumen, masa, etc no varian con el tiempo.
Las clulas procariticas bacterianas se reproducen por fisin binaria sin que sea posible diferenciar una clula madre de una clula hija. Edad mxima c/clula es el lapso comprendido entre dos replicaciones sucesivas Edad de cultivo es el tiempo transcurrido desde la inoculacin.
Las bacterianas se presentan en forma individual o en asociaciones dbiles de pocos individuos,pudiendo ser dispersadas homogneamente en el medio de cultivo Las eucariticas como levaduras se desarrollan en clulas individuales fcilmente dispersables que se reproducen por gemacin produciendo una clula hija y una clula madre.
Cultivo de levaduras es heterogneo en cuanto a la edad y por lo tanto el estado fisiolgico de las clulas que lo componen. Los hongos por crecimiento apical formando hifas Caractersticas reolgicas nonewtonianas.
Mtodo
Fundamento
Observaciones
Conteo directo No Recuento en celda de clulas Requiere clulas individuales Nefelometra N.M.P. Peso Seco Turbimetra Vol. empacado Fsico Qumicos Conteo directo No RCI Influencias de las condiciones de incubacin de clulas Dispersin de luz Requiere cultivo homog. y traslcido Estadstico Transmisin de luz Centrifugacin Variados indirectos RCI y medio limpio RCI y medio limpio Poco preciso
dX = .X dt
X
0
dX X
t = . dt 0
X = Xo. e.t
1 dX d(lnX) (lnX) = . = = X dt dt t
X = Xo. e.t
1 dX d(lnX) . = X dt dt
(lnX) t
Ln X
X celulas/ml 4.50E+05 5.20E+05 3 6.50E+05 8.10E+05 1.22E+06 3.5 4 4.5 3.55E+06 4.02E+06 3.77E+06 2.20E+06 2 2.5 1.77E+06 2.13E+06
a) Calcular la velocidad especfica del crecimiento celular durante la fase de crecimiento b) El tiempo de duplicacin del cultivo
Ln X
15.5 15 14.5
Ln (X)
14 13.5 13 12.5 0 0.5 1 1.5 2 2.5 Tiempo (dias) 3 3.5 ln X = 13.01+0.67 t R2 = 0.99
El crecimiento de las clulas obedece la ley de Conservacin de Energa y Materia Los tomos de (C), (O), (N) y otros elementos consumidos durante el crecimiento se incorporan a las nuevas clulas o se expulsan como productos
SUSTRATO
Fuente de N
N O H P
20 14 8 3 1 1
Ca Mg Cl Fe Otros
Calculo de Coeficientes
CwHxOyNz + aO2 + b HgOhNi c CHON +dCO2 + eH2O Balance de C Balance de H Balance de O Balance de N COEFICIENTE RESPIRACION
:
(I)
w = c + d x + b g = c + 2e
:
y + 2a + bh = c + 2d + e z + bi = c
a b c d e
Debemos estar seguros que el sustrato no se utiliza para sintetizar otros productos extracelulares que no sean CO2 y H2O
Las bacterias tienden a tener contenidos de nitrogeno ligeramente mayores (11-14%). Los hongos tiene (6.3 9%) Cuando no se dispone de la composicin puede utilizarse como formula general : CH1.8O0. 5N1.2
C,H,O,N es por lo tanto 24.6, aunque existe normalmente un 5 - 10% de ceniza residual que no se incluye en la formula.
14 12
10 8 6 4 2 0 0
10
20
30
Sustra to [g/l]
Rendimiento de biomasa
( Yx/s)
DURANTE el CRECIMIENTO existe una relacin lineal entre [Biomasa] producida y el [Sustrato] consumido
MWClulas Yx/s = c MW Sustrato
Yx/s = k durante el crecimiento, su valor deter. experim. puede utilizarse para calcular el coef. estequiom. C Mw = peso molecular. Para utilizar esta ecuacin el sustrato no se debe utilizar para sintetizar otros productos que no sean CO2 y H2O.
(II)
Fuente de N
Biomasa
Producto
Yp/s
Y p/s
MW = f MW
roducto
Sustrato
Se debe asegurare de que el sistema experimental utilizado para medir Yp/s corresponde a la ecuacin (II) No puede aplicarse a la produccin metablica secundaria como la fermentacin de la penicilina Formacin de producto debe estar asociado directamente con el crecimiento celular
[H2O]= k
Electrones disponibles
Al nmero de electrones disponibles para transferir al O2 en la combustin del sustrato a CO2, H2O y compuestos que contengan nitrgeno
C H O P
4 1 -2 5
6 -3 NH3 N2 NO3
0 5
Grado de reduccin
4 + - 2 - 3 4w + x - 2y - 3z 4j + k - 2l 3m
4+ -2-3
(4w + x 2y-3z)/w (4j + k - 2l - 3m)/j
Composicin elemental y grado de reduccin para algunos microorganismos (en relacin al NH3)
Cuando existe sntesis de producto, como el representado por la ecuacin (II) el balance de electrones es:
w s 4 a = c B +f j p a = ( w s - c B - f j p)
(1) (2)
La Ec.(2) es muy til porque si se conoce el microorganismo (B), el sustrato (w y s) y el producto (j y p) involucrados en el cultivo celular, y el rendimiento de biomasa (c ) y de producto (f), la demanda de oxgeno (a) puede calcularse rpidamente. a puede determ. resolviendo los coef. Esteq.de la ecuacin (II). La ec. (2) permite una evaluacin ms rpida y no es necesario conocer las cantidades de NH3, CO2 y H2O involucrados.
4a w. s ( s)
B w. s ( B)
f.j. p = 1 w. s (P)
Fraccion de e transferidos al Producto w s f max = j p
fraccin de e fraccin de e disponibles transf disponibles transf desde el Sust al O2 a la Biomasa w s c max = B
para la construccin de una nueva clula esta contenida en los cromosomas. La materia debe ser suministrada a travs de los componentes del medio de cultivo. La E se obtiene del catabolismo de la fuente de C de cultivo. Crecimiento microbiano una ecuacin qumica. C, H, O y N y Mg, S, P,Ca, Na y K Otros compuestos a niveles muy bajos y deben ser suministrados como compuestos aptos para ser metabolizados. La fuente de C: Carbohidrato-orgnico, CO2, CO3-2 HCO3-1 (caso de clulas quimioautotrficas o fotosintticas). La fuente de N : Amonio, nitrgeno amino de aminocidos y protenas, rea, nitrato o nitrgeno elemental
Medios complejos
Son formulados en base a desechos, subproductos y extractos naturales. la melaza, licor de maceracin de maz, extracto de levadura y otros Su composicin qumica es compleja y variable. Contiene varias fuentes de cada elemento. Pueden requerir ser suplementados con compuestos que proporcionen cantidades adicionales de algunos elementos, tales como, N, Mg y P Muy utilizados en microbiologa bsica (taxonoma, fisiologa y gentica), microb. analtica, produccin de algas, alimentos, suelos y en fermentaciones industriales
Mejores rendimientos
Medios definidos
Se formulan en base a compuestos puros, tales como la glucosa, sulfato de amonio, metionina, fosfatos, etc composicin qumica es conocida y reproducible. fuentes de cada elemento y los nutriente esenciales que pueden ser requeridos. investigacin y desarrollo de Proceso de fermentacin. permiten un mejor control de las condiciones ambientales de crecimiento y produccin. resultan ms productivas cuando se utilizan medios definidos.
Continua.