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tpn°2 - dosage des protéines plamatique

tpn°2 - dosage des protéines plamatique

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R\u00e9publique alg\u00e9rienne d\u00e9mocratique et populaire.
Universit\u00e9 Djillali Liabes
Facult\u00e9 de M\u00e9decine
D\u00e9partement de Pharmacie

Ann\u00e9e universitaire : 2008 / 2009
R\u00e9alis\u00e9e par:

\u2022 GHERMI Mohamed.
\u2022 TAHRI Mahmoud.
\u2022 CHAREF KHODJA Meriem.
\u2022 BETTAYEB Mohamed Amine.

4 \u00e8me ann\u00e9e pharmacie G05.
TP N\u00b002
TP N\u00b002
TP N\u00b002

TP N\u00b002
Dosage des prot\u00e9ines
totales plasmatique.

TP N\u00b0 02
DOSAGE DES PROTEINES TOTALES PALSMATIQUES
1
RAFUNIT\u00a9 - UDL - Pharmacie.
I-
G\u00e9n\u00e9ralit\u00e9s :

Les prot\u00e9ines repr\u00e9sentent la plus grande partie des mati\u00e8res solides du plasma. En dehors
du fibrinog\u00e8ne, prot\u00e9ine fibreuse, ce sont toutes des prot\u00e9ines globulaires. Seule la s\u00e9rum-
albumine est une holoprot\u00e9ine, toutes les autres \u00e9tant des h\u00e9t\u00e9roprot\u00e9ines pouvant
contenir des lipides (lipoprot\u00e9ines), des m\u00e9taux (m\u00e9talloprot\u00e9ines) et surtout des glucides, la
plupart des prot\u00e9ines plasmatiques sont en effet des glycoprot\u00e9ines.

Leurs propri\u00e9t\u00e9s sont tr\u00e8s variables : transporteurs, anticorps, enzymes, agents de pression
oncotique, marqueurs de l'inflammation, marqueurs tumoraux, agents de la coagulation,
facteurs de croissance, etc. Mais il faudra diff\u00e9rencier les prot\u00e9ines toujours pr\u00e9sentes dans
le plasma, \u00e9l\u00e9ments constitutifs de celui-ci et celles, d'origine cellulaire, n'y apparaissant que
transitoirement.

\ue000Maintien de la pression oncotique.
\u2022
Mol\u00e9cules pr\u00e9sentent en grande quantit\u00e9
\u2022
Mol\u00e9cules ayant des propri\u00e9t\u00e9s physico-chimiques particuli\u00e8res.
\u2022
Repr\u00e9sentant principal est la s\u00e9rum albumine, les globulines et notamment l\u2019\u03b1-
globulines.
\ue000Fonction de transport.
\u2022
Assur\u00e9e par l\u2019albumine et de nombreuses globulines relativement sp\u00e9cifiques vis-\u00e0-
vis de leur ligand plus ou moins sp\u00e9cifique.
\u2022
Les globulines sont plus sp\u00e9cifiques dans leur ligand.
\ue000R\u00f4le inhibiteur de prot\u00e9ases
\u2022
Permettent de limiter l\u2019action des prot\u00e9ases lib\u00e9r\u00e9es dans le sang par des cellules.
\u2022
Inhibent des prot\u00e9ases par des m\u00e9canismes diverses.
\ue000 R\u00f4le de cofacteur d\u2019enzyme.
\u2022
Exemple : \u03b11-glycoproteine acide ou orosomuco\u00efde : Cofacteur de la lipoprot\u00e9ine
lipase.
TP N\u00b0 02
DOSAGE DES PROTEINES TOTALES PALSMATIQUES
2
RAFUNIT\u00a9 - UDL - Pharmacie.
\ue000R\u00f4le dans la coagulation.
\u2022
Exemple :

- Le fibrinog\u00e8ne : glycoprot\u00e9ine asym\u00e9trique et de grande taille.
- Prot\u00e9ines C,
- Prot\u00e9ines S,

- \u2026 etc.
\ue000R\u00f4le dans l\u2019immunit\u00e9.
\u2022
Les immunoglobulines.
\u2022
Les fractions prot\u00e9iques du compl\u00e9ment.
\u2022
Toutes les prot\u00e9ines impliqu\u00e9es dans la transmission de l\u2019information.
II- Exploration des prot\u00e9ines :

L'exploration des prot\u00e9ines plasmatiques est r\u00e9alis\u00e9e par le dosage individueld e
telle ou telle prot\u00e9ine, par le regroupement de quelques dosages, sous le terme
de profil prot\u00e9ique, par l'\u00e9lectrophor\u00e8se qui peut \u00eatre faite sur des supports
diff\u00e9rents et enfin par l'\u00e9tude \u00e9ventuelle d'une prot\u00e9inurie.

\ue000M\u00e9thodes colorim\u00e9triques
\ue000\u00c9lectrophor\u00e8se des prot\u00e9ines
\ue000Dosages immunologiques

\u2013 Turbidim\u00e8triques
\u2013 N\u00e9ph\u00e9l\u00e9m\u00e8triques
\u2013 Immunoenzymologiques

1. R\u00e9action de Biuret
1. 1. Principe :

En milieu alcalin, les ions cuivriques donnent avec les liaisons peptidiques
un complexe de coloration violet-pourpre. L\u2019intensit\u00e9 de la coloration est
proportionnelle \u00e0 la concentration des prot\u00e9ines. Cette coloration est
mesur\u00e9e par spectrophotom\u00e9trie en lumi\u00e8re visible. C\u2019est une m\u00e9thode
simple, rapide et fiable mais peu sensible.

2. Fractionnement des prot\u00e9ines s\u00e9riques
2. 1. M\u00e9thodes \u00e9lectrophor\u00e9tiques :

Elles se fondent sur la charge \u00e9lectrique des prot\u00e9ines en solution et sur
leur mobilit\u00e9.
Les prot\u00e9ines, substances amphot\u00e8res, poss\u00e8dent \u00e0 la fois des charges
positives et n\u00e9gatives et selon le pH de la solution, elles se comportent
comme poss\u00e9dant soit plus de charges positives, soit plus de charges

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