ASIGNATURA DE FARMACOLOGA

GUA DE PRCTICA
TERCER AO ACADMICO

2013-II

Dr. BENJAMN CASTAEDA CASTAEDA Dr. ALBERTO SALAZAR GRANARA Dr. SALOMN AYALA PIO Mg. ANGEL ALVARADO YARASCA Dr. FABRICIO GAMARRA CASTILLO Dr. JOSEPH SNCHEZ GAVIDIA Dra. CAROLINA ZIMIC ZARE Dra. ANA LUCIA TCUNA CALDERN

Jefe de la Asignatura Coordinador de Prcticas Profesor de Prcticas Profesor de Prcticas Profesor de Prcticas Profesor de Prcticas Profesor de Prcticas Profesor de Prcticas

"Si me dices LO ESCUCHO Si lo veo LO RECUERDO Si lo hago.. LO APRENDO CONFUCIO

NORMAS PARA EL TRABAJO ADECUADO EN LAS PRCTICAS DE LABORATORIO DE FARMACOLOGA. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. Ingresar al laboratorio puntualmente. Si llega tarde, por respeto y norma, no ingrese ni interrumpa el proceder del laboratorio. No entrar al Laboratorio con mochilas o bolsas. El material autorizado, para ingreso al laboratorio comprende: A) Gua de prcticas. B) Calculadora. C) Cuaderno de apuntes. D) Libros. E) Laptop o Tablet. F) tiles de escritorio (lpiz, lapicero, regla, borrador). G) Libreta de Control. H) Grabadoras de Audio y/o video. I) Cronmetro. Tener puesto el mandil blanco antes de entrar a la clase prctica. Usar guantes estriles y mascarillas para la manipulacin de animales de experimentacin. Modular el ruido en el laboratorio. Evitar el uso de colonias o sustancias que expelen olores fuertes. No toser, ni estornudar sobre los animales de experimentacin. Manipular los animales de experimentacin con suavidad, manteniendo la tica, siguiendo las pautas de las buenas prcticas de laboratorio. Una vez ingresado al Laboratorio, no puede salir hasta el trmino de la prctica, salvo casos de emergencia y autorizacin de su jefe de prctica. Tener apagado el telfono celular durante la prctica. No retirar los bancos del Laboratorio. No comer durante la prctica. Si rompen o pierden materiales de vidrio, devolverlos en el lapso de 1 semana, de la misma calidad y marca. No pararse sobre los bancos o sillas de laboratorio. No pararse sobre las mesas de trabajo del laboratorio. No sentarse sobre las mesas de trabajo del laboratorio. No sentarse en las escaleras del pabelln de los Laboratorios de prctica. No hacer ruido en las escaleras ni el espacio de espera del pabelln de los Laboratorios de prctica. CALENDARIZACIN DE LAS PRCTICAS DE FARMACOLOGA MES Agosto Agosto Agosto Agosto Agosto Setiembre Setiembre Setiembre Setiembre Octubre Octubre Octubre Octubre Octubre Noviembre Noviembre Noviembre 1. 5, 6, 7, 8. 12, 13, 14, 15. 19, 20, 21, 22. 26, 27, 28, 29. 2, 3, 4, 5. 9, 10, 11, 12. 16, 17, 18, 19. 23, 24, 25, 26. 30 Set. 1, 2, 3, Oct. 7, 9 y 10. 14, 15, 16, 17. 21, 22, 23, 24. 28, 29, 30, 31. 4, 5, 6, 7. 12, 13, 14, 15. 18,19,20. 8 9 10 11 12 13 14 FECHAS N DE P. Informativa 1 2 3 4 5 6 7 TTULO DE LA PRCTICA Informacin general de las directivas para el desarrollo de las prcticas de laboratorio. Factores que modifican los efectos de los frmacos Sinergismos y Antagonismos Agonistas y Antagonistas de Receptores Adrenrgicos Agonistas y Antagonistas de receptores Colinrgicos Toxicologa: Dosis letal 50, intoxicacin por rganos fosforados, e intoxicacin por drogas psicoactivas Anticonvulsivantes, hipnticos y sedantes Antidepresivos y antipsicticos Semana de exmenes parciales Anestsicos Generales, Locales y Bloqueantes Neuromusculares Analgsicos, Antiinflamatorios y Antipirticos Frmacos que actan en el tracto gastrointestinal Oxitcicos, Tocolticos y Teratgenos Antiarrtmicos e Intoxicacin Digitlica Frmacos que actan en el Aparato Respiratorio Frmacos que actan sobre el sistema de la coagulacin sangunea Entrega de Notas de Prctica, por cada profesor

FUENTES DE VERIFICACIN DE LAS PRCTICAS DE FARMACOLOGA LIBRETA DE CONTROL Cada alumno portar una libreta de control en la que consta todas las prctica a realizar, durante el segundo semestre acadmico, como parte del desarrollo de la asignatura de Farmacologa. En cada prctica o experimento constarn los objetivos planteados y SI fueron o NO alcanzados por el alumno. Debe ser firmado por el alumno y por el profesor de prctica . HORARIOS: Las prcticas se realizan puntualmente, de lunes a viernes, en los horarios establecidos por el departamento acadmico de. Ciencias Bsicas. Los alumnos tendrn 05 minutos de tolerancia , al cabo de los cuales se cerrarn las puertas de entrada al laboratorio. El alumno podr ingresar a los 15 minutos de empezada la prctica o cuando se autorice el ingreso por parte de los profesores de prctica, sin embargo, considerando que la evaluacin continua, exige la realizacin de los tres componentes, su nota automtica para esa prctica de laboratorio, en los tres componentes, se catalogar como cero . Slo se permitir esta hipottica situacin , en dos oportunidades , permitiendo el ingreso del alumno en las veces posteriores, pero se le catalogar como inasistencia. EVALUACIN: La evaluacin de las prcticas estar dada por: las notas de los pasos previos a cada prctica ( calificados de 0 a 20), por la nota de los informes de cada prctica ( calificados de 0 a 20) y por la nota del profesor ( calificados de 0 a 20), esta ltima tendr en cuenta su participacin en la realizacin de los experimentos y el grado de preparacin de los alumnos para cada una de las prcticas. La nota final de prcticas se obtendr de un promedio de las tres notas anteriores PASOS ESCRITOS (Componente cognitivo): Al inicio de cada prctica, se tomar un paso escrito de 5 preguntas, cada pregunta correcta tendr un valor de 4 puntos. La calificacin del paso escrito ser de 0 a 20 , los alumnos tendrn derecho de revisar el paso rendido, en caso de no estar de acuerdo con la nota obtenida; ello debern hacerlo, previa inscripcin, nicamente, en la semana siguiente a la prctica respectiva , en el horario de 7:00 a 7:30 am. Los pasos escritos no tienen recuperacin , salvo enfermedad debidamente comprobada y durante la misma semana de la prctica. Las notas de los pasos escritos se darn a conocer por el aula virtual de farmacologa de la FMH-USMP, al final de cada semana. Asimismo, se empleara como medio de comunicacin, para fines de la ctedra, la plataforma de red social Facebook, en tal sentido, los alumnos solicitarn la adhesin al mismo, buscando el Facebook de la ctedra con el siguiente nombre Farmacologa Mdica USMP en el buscador del siguiente espacio www.facebook.com. INFORME DE LABORATORIO (Componente procedimental): En total, el alumno deber presentar 14 informes de laboratorio . Todas las semanas, el alumno presentar un informe escrito (a computadora) de la prctica realizada, en este considerar las tareas de experimentos simulados consignados en la gua de prctica y los experimentos realizados in situ o simulados, de la prctica correspondiente. El informe escrito, deber consignar lo siguiente : 1)- El o los experimentos realizados (tareas y experimentos in situ o simulados correspondientes). 2)- Los resultados obtenidos, stos, presentados en forma relatada y en grficos o tablas segn corresponda. 3) - Discusin, seccin donde se explica los fenmenos farmacolgicos observados, los mecanismos involucrados en la produccin de los mismos, confrontando con la revisin bibliogrfica. 4)- Conclusiones. El informe ser personal y ser evaluado, calificado y devuelto al alumno, por su profesor de prctica. NOTA DEL PROFESOR (Componente actitudinal): Cada una de las mesas de prcticas, estar bajo la responsabilidad de un profesor de la asignatura, durante todo el perodo lectivo, quien orientar y evaluar el desempeo de sus alumnos durante la ejecucin de la prctica y firmar la libreta de control, consignando SI alcanz o NO las competencias programadas. ASISTENCIA: La asistencia a prcticas es obligatoria . La inasistencia a ms del 30% (2 inasistencias) de prcticas, inhabilita al alumno , de acuerdo al reglamento de evaluacin. COMUNICACIN Y RESOLUCIN DE PROBLEMAS: Se recomienda al alumno, la siguiente ruta: Profesor de prctica, Coordinador de Prctica y Jefe de Ctedra. Excepcionalmente , Director del Departamento de Ciencias Bsicas.

RELACIN DE HERRAMIENTAS DE SIMULACIN QUE SE EMPLEAR N EN LAS PRCTICAS DE FARMACOLOGA MDICA: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. Software Virtual Pharmacology Lab, Dept. Of Medicine and Dept. of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam. Software The Virtual Cat V2.6.1, Dr John Dempster, University of Strathclyde. Software The Rat Cardiovascular System V3.3.1, Dr John Dempster, University of Strathclyde. Software Organ Bath Simulation, V2.2, Dr John Dempster, University of Strathclyde. Software Simulation of the Cardiovascular System V. Beta 4.2, Dr. Armando Pacher y Dr. Roberto Lombardo, Entre Ros National University. Journal of Visualized Experiment JOVE on line www.jove.com Software, Ex Pharm-DOG, VE1.1.0, By R. Raveendran, Deparment of Pharmacology, JIMPER, Pondicherry, India. Software, PaigeTM XT, V.8.504 XT Single Station, Mad Scientist Software. Estados Unidos. Software, ExPharm Heart E1.00, By R. Raveendran, Deparment of Pharmacology, JIMPER, Pondicherry, India.

PRIMERA PRCTICA: Factores que modifican los efectos de los frmacos El hombre que hace que las cosas difciles sean fciles es un buen educador - Ralph Waldo Emerson OBJETIVO GENERAL: Adquirir por parte de los alumnos, los conocimientos, habilidades y destrezas que le permitan reconocer los diferentes factores que modifican los efectos de los frmacos. OBJETIVOS ESPECFICOS (COMPETENCIAS): Al finalizar la prctica, el alumno: Explica correctamente los parmetros utilizados para evaluar los efectos de los frmacos Manipula, adecuadamente, los animales de laboratorio, cumpliendo los aspectos bioticos Explica correctamente cmo las diferentes vas de administracin de un frmaco, modifican los efectos del mismo. Explica correctamente cmo la administracin simultnea de frmacos o los vehculos de administracin de un frmaco modifican los efectos del frmaco. Realiza las prcticas simuladas, analiza, interpreta y explica los resultados obtenidos

TAREAS PARA EL ALUMNO: El alumno debe revisar, previamente, los captulos de Farmacocintica y Farmacodinamia, en la bibliografa consignada; asimismo, debe revisar aspectos generales (farmacocinticos, farmacodinmicos y farmacosolgicos) de los frmacos a utilizar en la realizacin de la presente prctica, y el procedimiento a seguir en la realizacin de los diferentes experimentos, consignados en su Gua de Prctica. EXPERIMENTO N 1: Frmaco: Especie: Software: Vas de Administracin Diazepam, sol. 10 mg en 2 ml. Ratn. Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio Procedimiento : En cada mesa de trabajo se administrar a un ratn, Diazepam 10 mg/Kg de peso, por las siguientes vas: 1. 2. 3. 4. 5. Oral .- Usando una cnula metlica Subcutnea .- debajo de la piel del lomo Intramuscular .- en el msculo cudriceps Intraperitoneal.- Cuadrante inferior izquierdo del abdomen Rectal.- mediante una cnula

Tomar como parmetros de comparacin: el perodo de latencia de la droga, la intensidad, la duracin del efecto y las manifestaciones observadas en el roedor. Cada mesa de trabajo, realizar el experimento en un ratn, escogiendo una va de administracin. Para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. Asimismo, presentar el resto de partes del informe, segn indicaciones asignadas en l acpite de Fuentes De Verificacin De Las Prcticas De Farmacologa Este experimento, segn necesidad, podr ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab, en el segmento de metodologa demostrativa.

EXPERIMENTO N 1: Dosis Ratn n (marca)

Vas de Administracin, matriz de recoleccin de datos

Va mg ml

Perodo de Latencia (minutos)

Intensidad de efecto Basal Cambio

Duracin de efecto (minutos)

Observaciones

Intensidad de efectos: Sin efecto= 0. Sedante= +. Hipntico= ++. Hipnosis profunda= +++. Parlisis Respiratoria= ++++.

EXPERIMENTO N 2: Interacciones Farmacolgicas Frmacos: Estricnina sol., al 0.1 % / Gelatina Sol. 15 % / Adrenalina Sol. 1 o/oo / Agua destilada Especie: Ratn. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. of Medicine and Dept. of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento : Se inyect a un ratn por va subcutnea (Blanco / 30 g), una dosis de estricnina (1.8 mg/Kg. de peso, sol al 0.1 % , ms 0.30 ml. de agua destilada). A un segundo ratn (Cabeza / 28 g), se le inyect la misma droga, a la misma dosis y por la misma va, pero reemplazando el agua destilada por el vehculo gelatina en sol al 15 % . A un tercer ratn (Lomo / 35 g), se le administr la misma droga, por la misma va y a la misma dosis, pero esta vez usando como vehculo una solucin de adrenalina al 1 o/oo. Se control en los tres casos, el periodo de latencia y la intensidad del efecto, los cuales se presentan en la tabla de resultados del experimento. Para el informe correspondiente, se presentara la tabla de resultados, completando las dosis administradas de las sustancias en miligramos y en mililitros y el resto de partes del informe, segn indicaciones asignadas en l acpite de Fuentes De Verificacin De Las Prcticas De Farmacologa. Tabla de resultados del experimento n2 Frmacos y dosis Ratn n (marca) mg Blanco Cabeza Lomo Estricnina Agua Destilada Estricnina Gelatina Estricnina ml Perodo de Latencia (seg.) 40 280 Intensidad de efecto

++++ ++++ ++++

145 Adrenalina Intensidad de efectos: Sin efecto= 0. Hiperreflexia= +. Convulsiones= ++. Coma= +++. Parlisis respiratoria= ++++. EXPERIMENTO N 3: Factores que modifican la concentracin plasmtica del Proprano lol y la Ampicilina. Frmacos: Propranolol / Ampicilina Especie: Hombre. Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento : A continuacin se presentan 8 casos, cuyos resultados se encuentran en la tabla de resultados del experimento.

Para el informe correspondiente, se debern construir para todos los casos, grficos de lnea con eje X/Y, delimitando los siguientes parmetros clnicos farmacocinticos y farmacodinmicos: Periodo de latencia, T max (tiempo mximo), C max (concentracin mxima), T 1/2 (tiempo de vida media), Duracin del efecto, CME (Concentracin mnima efectiva), CME (concentracin mxima efectiva), ABC (rea bajo la curva), Ventana teraputica y CMT (concentracin mnima toxica). En base a las grficas y a la delimitacin de los parmetros estipulados, se deber presentar la discusin, segn indicaciones asignadas en l .acpite de Fuentes De Verificacin De Las Prcticas De Farmacologa. Tabla de resultados del experimento n3 Tiempo (min) Concentracin plasmtica (ng/ml)
63.819 60.458 40.145 30.522 22.354 18.344 13.055 11.052 9.358 112.744 97.054 66.282 58.074 46.804 41.426 34.119 31.077 28.312 12.249 11.160

Caso 1: Se administr a un indiv iduo adulto por v a oral, Propranolol en dosis de 40 mg/kg.

Casos

Caso 2: Se administr a un indiv iduo adulto may or por v a oral, Propranolol en dosis de 40 mg/kg.

30 60 90 120 180 240 360 420 480 30 60 90 120 180 240 360 420 480 1020 1080

Sin efecto. Sin efecto. Sin efecto. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Sin efecto. Sin efecto. Sin efecto. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Sin efecto.

Efecto

Caso 3: Se administr por va oral, a un individuo adulto con diagnstico de insuficiencia renal, Propranolol en dosis de 40 mg/kg

Caso 4: Se administr por va oral, a un individuo adulto con diagnstico de cirrosis heptica, Propranolol en dosis de 40 mg/kg.

Caso 5: Se administr por va oral, a un individuo adulto con diagnstico de cirrosis heptica, Propranolol en dosis de 120 mg/kg.

Caso 6: Se administr a un indiv iduo adulto por v a oral, considerando un pH gstrico de 2, Ampicilina en dosis de 500 mg/kg.

Caso 7: Se administr a un indiv iduo adulto por v a oral, considerando un pH gstrico de 3.5, Ampicilina en dosis de 500 mg/kg.

Caso 8: Se administr a un paciente con insuficiencia renal, por v a oral, Ampicilina en dosis de 500 mg/kg.

30 60 90 120 180 240 360 420 480 540 600 30 60 90 120 180 240 480 540 840 900 30 60 90 120 180 240 480 540 840 900 1000 1100 1300 60 120 180 240 300 360 480 600 60 120 180 240 300 360 480 600 60 120 180 240 300 360 480 600

103.431 73.487 66.282 37.100 27.171 22.298 15.868 13.434 11.375 9.632 8.156 211.171 150.036 75.745 55.474 45.524 38.307 23.224 19.665 8.562 7.250 590.851 419.797 278.751 211.932 155.214 127.376 64.979 55.023 23.956 20.286 15.290 11.525 6.657 6257.648 3458.025 1906.291 1050.970 579.506 319.619 97.370 29.800 2729.737 1508.474 831.570 458.459 252.794 139.426 42.475 12.999 8724.918 7902.845 7145.824 6461.478 5842.816 5283.518 4320.732 3533.736

Sin efecto. Sin efecto. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Sin efecto. Sin efecto. Sin efecto. Crisis de Asma. Antiarrtmico y Crisis Antiarrtmico y Crisis Antiarrtmico y Crisis Antiarrtmico y Crisis Antiarrtmico y Crisis Antiarrtmico. Antiarrtmico. Sin efecto. Antiarrtmico. Debilidad muscular y Debilidad muscular y Hipotensin. Hipotensin. Hipotensin. Debilidad muscular y Debilidad muscular y Crisis de Asma. Crisis de Asma. Antiarrtmico. Antiarrtmico. Sin efecto. ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

de Asma. de Asma. de Asma. de Asma. de Asma.

fatiga. fatiga.

fatiga. fatiga.

SEGUNDA PRCTICA: Sinergismo y antagonismo Las grandes obras no son fruto de la fuerza sino de la perseverancia - Samuel Jonson OBJETIVO GENERAL: Permitir, al alumno, la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le posibiliten entender, comprender y explicar, correctamente, los fenmenos farmacolgicos de Sinergismo y Antagonismo que se presentan con la administracin simultnea de frmacos. OBJETIVOS ESPECFICOS (COMPETENCIAS): Al terminar los experimentos que forman parte de la presente prctica, el alumno: Interpreta y explica, correctamente, el sinergismo que se presenta con la administracin simultnea de Cocana y Adrenalina, a los animales de experimentacin. Interpreta y explica, correctamente, el antagonismo que se produce entre Cianuro y Nitrito de sodio, en animales de laboratorio, y la importancia de ste ltimo en la intoxicacin por Cianuro. Interpreta y explica, correctamente, el antagonismo entre Estricnina y Diazepam y entre Calcio y Magnesio Trabaja en equipo y mantiene un comportamiento tico deontolgico en la relacin con sus compaeros y el manejo de los animales de laboratorio. Realiza las prcticas simuladas, analiza, interpreta y explica los resultados obtenidos TAREAS PARA EL ALUMNO: Antes de realizar la presente prctica, el alumno, deber conocer y explicar correctamente los fenmenos de Sinergismo, Antagonismo, Antidotismo, tipos y mecanismos de produccin, para lo cual debe revisar, en la bibliografa consignada, todo lo concerniente a estos fenmenos farmacolgicos. Igualmente, debe conocer los aspectos generales de los frmacos a utilizar en la presente prctica y los proce dimientos a seguir en cada uno de los experimentos. EXPERIMENTO N1: Sinergismo Cocana Adrenalina Frmacos: Cocana, Clorhidrato, solucin al 1% / Adrenalina solucin al 1 0/00 Especie: 1 Conejo albino grande, por mesa. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti. Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento: Exponer las pupilas de un conejo a un mismo grado de iluminacin, para no alterar el reflejo fotomotor. Abrir los prpados d e los conejos con los dedos pulgar e ndice de la mano izquierda y con la mano derecha, acercar una regla graduada, evitando el contacto con las pestaas y determinar el dimetro pupilar en ambos ojos, como datos basales. Luego aplicar en el saco conjuntival derecho 2 gotas de la solucin de cocana al 1% , evitando el escape de la sustancia, durante 1 minuto, diez minutos despus, medir nuevamente el dimetro de la pupila derecha, e instilar en ambos sacos conjuntivales, 2 gotas de adren alina en sol. al 10/00, de modo que al final el ojo derecho habr recibido ambas drogas. Cinco minutos despus de la ltima aplicacin medir ambas pupilas y analizar los resultados. Cada mesa de trabajo, realizar el experimento en un conejo, para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. Asimismo, presentara el resto de partes del informe, segn indicaciones asignadas en l acpite de Fuentes De Verificacin De Las Prcticas De Farmacologa. Este experimento, segn necesidad, podr ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab. EXPERIMENTO N 1: Sinergismo Cocana-Adrenalina, matriz de recoleccin de datos Basal Dimetro de la pupila (mm) Ojo derecho Reflejo corneal Saco conjuntival Dimetro de la pupila (mm) Ojo izquierdo Reflejo corneal Saco conjuntival Reflejo corneal: Presente= - . Retardado (fotomotor presente)= + . Retardado (fotomotor ausente)= ++ . Ausente= +++ Saco conjuntival: Normal (rojizo y hmedo)= - . Rosado y/o moteado= + . Rosado y menor humedad= ++ . Blanquecino y seco= +++ 8 Cocana Cambio Epinefrina Cambio Observaciones

EXPERIMENTO N2: Antagonismo fisiolgico Frmacos: Estricnina, Sulfato, solucin al 1 0/0 / Diazepam, sol. 10 mg en 2 ml. Especie: 2 ratones blancos, de 25 a 30 g de peso. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti. Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento: A un ratn se le inyectar previamente Diazepam a la dosis de 10 mg/Kg de peso por va intraperitoneal, dos minutos despus se le administrar sulfato de estricnina en sol. al 1% por va subcutnea. Se anotar el perodo de latencia de las convulsiones y la duracin de efectos. El ratn control que solo recibe estricnina, se observar en el Software. Anotar y comparar los resultados obtenidos en ambos animales. Cada mesa de trabajo, realizar el experimento en un ratn, para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. Asimismo, tambin deber consignar en el informe, las dosis administradas de las sustancias en miligramos y en mililitros y el resto de partes del informe, segn indicaciones asignadas en l acpite de Fuentes De Verificacin De Las Prcticas De Farmacologa. Este experimento, segn necesidad, podr ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab. EXPERIMENTO N 2: Antagonismo, matriz de recoleccin de datos Ratn n (marca) Estricnina Estricnina + Diazepam Intensidad de efectos: Sin efecto= -. Hipereflexia= +. Convulsiones= +. Coma= +++. Parlisis respiratoria= ++++ EXPERIMENTO N3: Antagonismo Cianuro Nitrito Drogas: Nitrito de Sodio, solucin al 2% . / Cianuro de Potasio, solucin al 1 0/00 Especie: Paloma. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Tarea y demostracin en meza de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Se comienza el procedimiento tomando parmetros basales a una paloma. Seguidamente se administr a la paloma de 1.5 kg y por va intramuscular, Cianuro de Potasio en sol. al 10/00, en dosis de 4mg/Kg. Seguidamente se procedi a observar a la paloma y delimitar los signos txicos (aleteo, ataxia, convulsiones), en ese instante, se procedi a inyectarle rpidamente por va endovenosa 35 mg/kg de Nitrito de Sodio en sol. al 2 % , producindose la recuperacin. Los resultados se encuentran en la tabla de resultados. Para el informe correspondiente, se presentar la tabla de resultados, completando las dosis administradas de las sustancias en miligramos y en mililitros y el resto de partes del informe, segn indicaciones asignadas en l .acpite de Fuentes De Verificacin De Las Prcticas De Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab, en el segmento de metodologa demostrativa. Tabla de resultados del experimento n3, antagonismo entre Cianuro de Potasio y Nitrito de Sodio Droga BASAL Dosis mg ml --------Apariencia Movimiento General cabeza 0 0 Posicin de pie 0 Observaciones Frmacos y dosis mg ml Perodo de Latencia Intensidad de efecto Observaciones

Animal erguido, alerta y excitado. Inicia con ataxia, presenta aleteo y apertura del pico, progresando Cianuro de Potasio 2 2 2 a la perdida de la postura. Recupera la postura, intenta escapar volando y presenta hipotona Nitrito de Sodio 1 0 0 muscular. Apariencia general: Normal= 0. Hipotona= 1. Sedacin= 2. Movimiento de cabeza: Normal= 0. Tambalea= 1. Cae= 2. Posicin de pie: Normal= 0. Ataxia= 1. Perdida de la bipedestacin= 2.

EXPERIMENTO N4: Antagonismo Calcio-Magnesio Frmacos: Sulfato de Magnesio, al 20 % . / Cloruro de Calcio, al 10 % . Especie: 1 Conejo albino de 4 kg. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Se inici el experimento tomando los parmetros basales en el conejo. Enseguida, a un conejo de 4 Kg, se le inyect por va intravenosa, muy lentamente, Sulfato de Mg al 20 % , dosis de 4 mililitros, lo cual provoc manifestaciones de depresin. En estado de depresin, se administr por va endovenosa y lentamente, Cloruro de Calcio al 10 % , dosis de 6 mililitros y se observ nuevas reacciones del animal. Los resultados pueden observarse en la tabla de resultados del experimento. Para el informe correspondiente, se presentara la tabla de resultados, completando las dosis administradas de las sustancias en miligramos y en mililitros y el resto de partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab, en el segmento de metodologa demostrativa . Tabla de resultados del experimento n4, antagonismo entre Calcio y Magnesio Droga BASAL Sulfato de Magnesio Dosis mg ----ml ----4 Apariencia General 0 2 Tono Muscular 0 2 Reflejo Antigravdico 0 2 Frecuencia Respiratoria 0 1 Frecuencia Cardiaca 0 1

Cloruro de Calcio 6 1 1 1 2 0 Apariencia general: Normal= 0. Ansiedad= 1. Depresin (estado letrgico)= 2. Tono Muscular: 0= Normal. 1= Hipotona. 2= Parlisis Flcida. Reflejo Antigravdico: Normal= 0. Retardado= 1. Ausente (cabeza cada)= 2. Frecuencia Respiratoria: 0= Normal. 1= Disminucin. 2= Aumento. Frecuencia Cardiaca: 0= Normal. 1= Disminucin. 2= Aumento

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TERCERA PRCTICA: Agonistas y antagonistas de receptores adrenrgicos No todo lo grande es bueno; mas todo lo bueno es grande - Melchor de Santa Cruz OBJETIVOS: GENERAL Adquirir, por parte del alumno, los conocimientos, habilidades y destrezas que le permita explicar correctamente los efectos que se producen al activarse o inhibirse los receptores adrenrgicos, en el animal de experimentacin, extrapolndolos al humano ESPECFICOS (COMPETENCIAS): Trabaja en equipo, en forma armnica y manipula y entiende acerca del uso adecuado de los animales de laboratorio. Explica e interpreta los efectos de la Epinefrina, Noradrenalina, Etilefrina, Fenilefrina, Nicotina, Isoproterenol, Terazosina e Histamina, administrada parenteralmente y sus mecanismos de accin. Enuncia las posibles aplicaciones y los efectos adversos de los frmacos empleados en la prctica. Describe correctamente el procedimiento seguido en la prctica y grafica correctamente los efectos observados en la prctica. Realiza la prctica simulada, analiza, interpreta y explica los resultados obtenidos. TAREAS PARA EL ALUMNO Para la realizacin de la presente prctica, el alumno deber revisar, en sus libros de texto, los aspectos farmacolgicos generales (Farmacocintica, Farmacodinamia, manifestaciones adversas, txicos, etc.) de los frmacos a utilizar en la realizacin de la prctica. Asimismo debe conocer el procedimiento a seguir en los experimentos, consignado en su gua de prctica. EXPERIMENTO N1: Efectos de los simpaticomimticos y simpaticolticos, sobre la FC y la PA. Frmacos: Pentobarbital sdico sol. al 6.5% / Epinefrina sol 0.1% / Etilefrina, sol. 1% / Nicotina sol. 5 % Terazosina sol. 5 % . Especie: Cerdo de 11 kg. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento : Se procedi a pesar un cerdo, seguidamente se anestesi el mismo, con la administracin endovenosa de Pentobarbital sdico, en dosis de 30 mg/kg. Estando el animal en estado de anestesia, se procedi a canalizar la arteria cartida, en donde se conect una sonda y un manmetro de mercurio, para la obtencin del registro de la presin arterial. Asimismo se rasuraron las patas traseras y la delantera derecha, en las mismas que se colocaron electrodos, que sirvieron de enlace para una mquina de electrocardiografa, que permiti el registro de la frecuencia cardiaca. Realizado todo el procedimiento antes descrito, se realizaron dos maniobras y se midi la PA y FC, estas fueron oclusin de la cartida por 30 segundos y asfixia por 45 segundos. Seguidamente, previo basal, se administr las sustancias de experimentacin y se registr la PA y FC, cuyos resultados se encuentran en la tabla de resultados del experimento. La secuencia y sustancias administradas, fueron las siguientes: 1) Epinefrina 0.005 mg/kg, va endovenosa. 2) Nicotina 0.3 mg/kg, va endovenosa. 3) Etilefrina 0.05 mg/ kg, va endovenosa. 4) Terazosina 0.2mg/kg, va endovenosa. Para el informe correspondiente, se presentar la tabla de resultados, completando las dosis administradas de las sustancias en miligramos y en mililitros y el resto de partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab, en el segmento de metodologa demostrativa . Tabla de resultados del experimento n1, Efectos de los simpaticomimticos y simpaticolticos, sobre la FC y la PA. Dosis Droga Pentobarbital sdico Oclusin de la cartida Asfixia Epinefrina Nicotina Etilefrina Terazosina mg ml Presin arterial (mmHg) Basal ------100 110 100 140 125 140 Cambio ------110 130 160 150 140 40 Frecuencia cardiaca (latidos/minuto) Basal ------110 90 160 160 205 220 Cambio ------150 140 130 180 200 50

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EXPERIMENTO N 2: Efecto a dosis escalonada de frmacos adrenrgicos y antiadrenrgicos. Frmacos: Epinefrina. / Norepinefrina / Isoproterenol / Fenilefrina / Histamina Especie: Rata de 250 g. Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento : Se procedi a anestesiar a una rata, administrndole Pentobarbital sdico, dosis de 50 mg/kg. Acto seguido se procedi a toma r la medicin de los basales de la presin arterial y la frecuencia cardiaca. Se realiz la medicin de la PA extracorpreamente, en la cola del roedor, como describe el mtodo de Riva-Rocci. La FC fue captada por medio de electrocardiografa. Seguidamente, previo basal, se administr las sustancias de experimentacin y se registr la PA y FC, cuyos resultados se encuentran en la tabla de resultados del experimento. La secuencia y sustancias administradas, fueron las siguientes: 1) Epinefrina en dosis de 1, 3, 6, 12, 24, 48 y 96 nmol/kg, va endovenosa. 2) Norepinefrina 1, 3, 6, 12, 24, 48 y 96 nmol/kg, va endovenosa. 3) Isoproterenol 1, 3, 6, 12, 24, 48 y 96 nmol/kg, va endovenosa. 4) Fenilefrina 1, 3, 6, 12, 24, 48 y 96 nmol/kg, va endovenosa. 5) Histamina 1, 3, 6, 12, 24, 48 y 96 nmol/kg, va endovenosa. Para el informe correspondiente, se presentara la tabla de resultados, completando las dosis administradas de las sustancias en miligramos y en grficos de ejes X/Y. El resto de partes del informe, segn indicaciones consignadas en l .acpite de Fuentes De Verificacin De Las Prcticas De Farmacologa.

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Tabla de resultados del experimento n2, Efecto a dosis escalonada de frmacos adrenrgicos y antiadrenrgicos. Dosis (mg) Presin arterial (mmHg) Basal ------100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100
A un 1 minuto post administracin

Droga

Frecuencia cardiaca (latidos/minuto) Basal ------170 170 170 170 170 170 170 160 160 160 160 160 160 160 170 170 170 170 170 170 170 170 170 170 170 170 170 170 155 155 155 155 155 155 155
A un 1 minuto post administracin

Medicin 1 ------90 125 140 155 160 175 180 115 140 155 180 190 200 210 80 80 75 75 75 70 70 115 110 120 130 140 150 165 75 55 40 30 30 30 25

A los 2 minutos post administracin

Medicin 2 ------80 90 90 90 80 95 90 105 125 125 160 170 175 160 130 130 140 135 140 140 140 105 100 100 105 105 100 105 80 75 75 75 80 90 90

Medicin 1 ------180 220 240 250 250 255 260 158 160 170 170 175 190 200 180 200 240 200 210 280 230 175 170 170 165 170 165 160 160 170 170 180 170 190 190

A los 2 minutos post administracin

Medicin 2 ------190 180 195 205 200 230 230 158 160 155 180 180 195 200 230 260 275 240 280 285 285 170 172 170 170 165 165 165 160 160 168 170 165 200 210

Pentobarbital sdico Epinefrina 1nmol/kg Epinefrina 3 nmol/kg Epinefrina 6 nmol/kg Epinefrina 12 nmol/kg Epinefrina 24 nmol/kg Epinefrina 48 nmol/kg Epinefrina 96 nmol/kg Norepinefrina 1nmol/kg Norepinefrina 3 nmol/kg Norepinefrina 6 nmol/kg Norepinefrina 12 nmol/kg Norepinefrina 24 nmol/kg Norepinefrina 48 nmol/kg Norepinefrina 96 nmol/kg Isoproterenol 1nmol/kg Isoproterenol 3 nmol/kg Isoproterenol 6 nmol/kg Isoproterenol 12 nmol/kg Isoproterenol 24 nmol/kg Isoproterenol 48 nmol/kg Isoproterenol 96 nmol/kg Fenilefrina 1nmol/kg Fenilefrina 3 nmol/kg Fenilefrina 6 nmol/kg Fenilefrina 12 nmol/kg Fenilefrina 24 nmol/kg Fenilefrina 48 nmol/kg Fenilefrina 96 nmol/kg Histamina 1nmol/kg Histamina 3 nmol/kg Histamina 6 nmol/kg Histamina 12 nmol/kg Histamina 24 nmol/kg Histamina 48 nmol/kg Histamina 96 nmol/kg

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CUARTA PRCTICA: Agonistas y antagonistas de receptores colinrgicos El que siembra errores, recoge catstrofes - Jos Selgas y Carrasco OBJETIVOS: GENERAL Adquirir, por parte del alumno, los conocimientos, habilidades y destrezas que le permita explicar correctamente, los efectos que se producen al activar o bloquear los diferentes receptores colinrgicos, en el animal de experimentacin, extrapolndolos al ser humano. ESPECFICOS (COMPETENCIAS) El alumno, realiza trabajo grupal en forma armoniosa y respetando a sus compaeros, y entiende acerca del uso adecuado de los animales de laboratorio Explica correctamente el mecanismo de accin de la Acetilcolina, Carbacol, Neostigmina, Pilocarpina, Hexametonio, Galamina y Atropina. Enuncia, analiza y explica la farmacocintica y los efectos farmacolgicos de los agonistas colinrgicos. Enuncia, analiza y explica la farmacocintica y los efectos farmacolgicos de los antagonistas colinrgicos. Realiza las prcticas simuladas, analiza, interpreta y explica los resultados obtenidos. TAREAS PARA EL ALUMNO Para realizar la presente prctica, el alumno deber revisar en su libro de texto, la farmacologa correspondiente a los agonistas y antagonistas de receptores colinrgicos, as como de los frmacos a utilizar en la prctica, considerando su farmacocintica, su farmacodinamia y su respectiva clasificacin. Asimismo, debe conocer el procedimiento a seguir en el laboratorio, para realizar correctamente el experimento, revisando su gua de prctica. EXPERIMENTO N1: Efectos sistmicos de los parasimpaticomimticos y los parasimpaticolticos en Rata. Frmacos: Atropina solucin 1 mg/ml / Pilocarpina solucin al 2% Especie: Rata. Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam. Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento: Se procede a pesar una rata, luego se le administra, por va intraperitoneal, Pilocarpina a la dosis de 100 mg/Kg de peso. Seguidamente, se coloca, el animal en una caja de vidrio tipo Macrolon, con contenido de viruta fina. Observar todas las manifestaciones colinrgicas, por espacio de 10 minutos. Luego de este periodo, administrar la Atropina va intraperitoneal, en dosis de 10 mg/Kg. Observar todas las manifestaciones anticolinrgicas, por espacio de 5 minutos. Si es necesario, se puede incrementar, o dar otra dosis de Atropina, hasta que se reviertan todos los efectos colinrgicos. El animal debe quedar en observacin por lo menos 30 minutos hasta que se recupere . Cada mesa de trabajo, realizar el experimento en una rata, para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. Asimismo, tambin deber consignar en el informe, las dosis administradas de las sustancias en miligramos y en mililitros y e l resto de partes del informe, segn indicaciones consignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, segn necesidad, podr ser simulado en el Software MICROLAB, en el segmento de metodologa demostrativa. EXPERIMENTO N 1: Efectos sistmicos de los parasimpaticomimticos y parasimpaticolticos, matriz de recoleccin de datos. Peso de la rata Frmaco Dosis (mg) Dosis (ml) Efectos basales Periodo de Latencia Efectos post administracin

Pilocarpina

Atropina Efectos: Frecuencia cardiaca (Normal), (Aument +, ++,+++), (Disminuy +,++,+++). Frecuencia respiratoria (Normal), (Aument +, ++,+++), (Disminuy +,++,+++). Mucosas (Normal), (Aument +, ++,+++), (Disminuy +,++,+++). Convulsiones (+) o (-), Temblores (-), (+), (++), (+++), Fasciculaciones (-), (+), (++), (+++). Lacrimacin (-), (+), (++), (+++). Excitacin (-), (+), (++), (+++). Sedacin (-), (+), (++), (+++). Muerte (-) o (+). 14

EXPERIMENTO N2: Efectos sistmicos de los parasimpaticomimticos y los parasimpaticolticos en Conejo. Frmacos: Atropina solucin 1 mg/ml / Pilocarpina solucin al 2% Especie: Conejo albino de 3 Kg. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam. Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software Procedimiento: Se procedi a pesar al conejo, luego se le administr, por va intraperitoneal, Pilocarpina a la dosis de 1 mg/Kg de peso. Seguidamente, se coloc al animal de experimentacin, sobre una superficie alta con la cabeza hacia abajo, de esta forma, se pudo colectar la secrecin de saliva en un vaso de plstico colocado debajo de la boca y a una altura adecuada. Asimismo, se observaron las ma nifestaciones colinrgicas, por un espacio de 5 minutos. Posteriormente, se administr lentamente, Atropina a la dosis de 0.50 mg/Kg por la va intraperitoneal, y se observ por espacio de 10 minutos, la reversin de los efectos colinrgicos. Los resultados del experimento, se encuentra en la tabla de resultados. Para el informe correspondiente, se presentar la tabla de resultados, completando las dosis administradas de las sustancias en miligramos y en mililitros y el resto de partes del informe, segn indicaciones consignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Tabla de resultados del experimento n2, Efectos sistmicos de los parasimpaticomimticos y los parasimpaticolticos en Conejo. Peso Dosis Dosis Frmaco Efectos del conejo (mg) (ml) Ojo: Dimetro de la pupila Basal= 5 mm. Cambio= 3 mm. Secreciones: Al minuto empieza a salivar, se colecto 5 ml. Por otra parte, se observ que las escleras oculares incrementaron su brillo. Pilocarpina Sistema nervioso central: Se observ excitacin, el animal empez a tener sacudidas de la cabeza. Sistema gastrointestinal: Se produjo defecacin. Frecuencia respiratoria: Se observ incremento de la FR, se logr apreciar en los movimientos de las narinas del animal. Ojo: el dimetro de la pupila se increment hasta 7 mm. Secreciones: Dejo de salivar y la mucosa oral se observ seca. Sistema nervioso central: Sedacin. Sistema gastrointestinal: Dejo de defecar. Frecuencia respiratoria: Disminucin de la FR.

Atropina

EXPERIMENTO N3: Efectos sobre la PA y FC de los parasimpaticomimticos y los parasimpaticolticos en Gato. Frmacos: Acetilcolina, Neostigmina, Carbacol, Hexametonio, Galamina, Atropina Especie: Gato de 4 kg. Software: Software, The Virtual Cat V2.6.1, Dr John Dempster, University of Strathclyde. Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software Procedimiento : Se procedi a anestesiar a un gato, para ello, se administr por va intraperitoneal, Pentobarbital sdico 50 mg/kg. Seguid amente, se introdujo una cnula endotraqueal y se conect al animal a una mquina de ventilacin artificial asistida. Seguidamente, se cnula la vena braquial izquierda, la cual fue utilizada para la administracin de las drogas de estudio. Enseguida se realiz la canalizacin de la arteria cartida izquierda, en sta se introdujo un transductor de presin arterial, el cual fue conectado a un computador y registro las presiones sistlica, media, diastlica y la frecuencia cardiaca. En estas condiciones, se administra en dosis escalonadas las siguientes drogas: Acetilcolina, Neostigmina, Carbacol, Hexametonio, Galamina y Atropina. Las dosis administradas y los resultados, se observan en la tabla de resultados del experimento. Para el informe, se construirn graficas de lneas con ejes X/Y, en base a esta, discutir los factores que influyen en los efectos observados. Asimismo, se debe presentar las dosis administradas de las sustancias en miligramos y el resto de partes del informe, segn indicaciones consignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa.

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Droga Pentobarbital sdico Acetilcolina 1ug/kg Acetilcolina 5ug/kg Acetilcolina 10ug/kg Acetilcolina 20ug/kg Acetilcolina 50ug/kg Acetilcolina 100ugl/kg Neostigmina 1 ug/kg Neostigmina 5 ug/kg Neostigmina 10 ug/kg Neostigmina 20 ug/kg Neostigmina 50 ug/kg Neostigmina 100 ug/kg Carbacol 1 ug/kg Carbacol 5 ug/kg Carbacol 10 ug/kg Carbacol 20 ug/kg Carbacol 50 ug/kg Carbacol 100 ug/kg Hexametonio 1 mg/kg Hexametonio 5 mg/kg Hexametonio 10 mg/kg Hexametonio 20 mg/kg Hexametonio 50 mg/kg Hexametonio 100 mg/kg Galamina 1 mg/kg Galamina 5 mg/kg Galamina 10 mg/kg Galamina 20 mg/kg Galamina 50 mg/kg Galamina 100 mg/kg Atropina 1 mg/kg Atropina 5 mg/kg Atropina 10 mg/kg Atropina 20 mg/kg Atropina 50 mg/kg Atropina 100 mg/kg

Tabla de resultados del experimento n3, Efectos sobre la PA y FC de los parasimpaticomimticos los parasimpaticolticos en Gato. Presin arterial (mmHg) Dosis Sistlica Media Diastlica (mg) Basal Cambio Basal Cambio Basal Cambio -------132 129 132 133 132 132 132 132 132 133 131 132 132 128 133 132 132 132 133 132 133 133 133 133 133 133 133 132 132 132 132 132 132 133 133 131 -------105 75 71 68 73 76 102 99 95 95 97 92 94 73 69 69 71 70 114 95 92 89 87 85 138 143 143 144 144 143 137 142 144 144 144 144 -------92 89 92 92 91 91 92 91 92 92 90 91 92 86 92 91 92 92 92 92 92 92 92 93 92 92 92 92 91 91 91 92 92 92 92 92 -------60 30 24 21 22 23 59 55 50 51 52 46 49 25 21 21 21 21 71 50 47 43 42 39 98 104 104 105 105 104 98 103 108 105 105 105 -------75 71 74 75 73 74 75 74 74 74 72 74 75 68 75 74 75 75 75 75 75 75 75 75 75 75 75 72 74 73 74 74 75 75 74 75 -------41 10 4 1 1 1 40 36 31 32 32 26 29 5 0 0 0 0 53 30 27 23 22 19 81 88 88 88 88 88 81 87 88 88 88 88

Frecuencia cardiaca (latidos/minuto) Basal Cambio -------110 109 107 109 109 110 109 107 107 108 108 111 110 110 111 110 107 105 110 110 110 110 108 108 107 107 111 108 107 109 108 107 108 109 108 105 -------86 26 24 12 14 20 69 67 66 61 66 64 69 37 22 19 13 15 113 116 117 117 121 120 117 124 124 124 127 128 116 124 127 124 126 126

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QUINTA PRCTICA: Toxicologa, dosis letal 50, intoxicacin por rganos fosforados, e intoxicacin por drogas psicoactivas La belleza del cuerpo es un viajero que pasa y la del alma un amigo que queda - Saavedra Fajardo OBJETIVOS GENERAL Permitir, al alumno, la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le posibiliten reconocer y explicar correctamente las manifestaciones producidas en cuadros de intoxicacin, provocados por diversos grupos de frmacos o txicos y su tratamiento farmacolgico y no farmacolgico. ESPECFICOS: Describe y explica correctamente, el mecanismo de accin, niveles de modulacin, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los inhibidores de la Acetilcolinesterasa. Explica correctamente la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de la Atropina y el Diazepam, y su importancia en el tratamiento de la intoxicacin por inhibidores de la Acetilcolinesterasa. Explica y determina correctamente, la dosis letal 50, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de la Morfina y la Anfetamina. Explica correctamente, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa del Etanol, Tetrahidrocannabinol, Cocana, y Nicotina. Explica correctamente la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de la Piridoxina y Dextrosa, y su importancia en el tratamiento de la intoxicacin por etilismo agudo y de la Naloxona en la intoxicacin por opioides. Realiza las prcticas simuladas, analiza, interpreta y explica los resultados. TAREAS PARA EL ALUMNO: Previamente, a la realizacin de la presente prctica, el alumno debe revisar, en sus libros de texto, la Farmacocintica, la Farmacodinamia y la Farmacosologa de los frmacos a utilizar en la realizacin de los experimentos. Asimismo, debe conocer el o los procedimientos a seguir durante los experimentos, consignados en su gua de prctica. EXPERIMENTO N1: intoxicacin por rgano- fosforados. Frmacos: Metamidofos / Sulfato de Atropina, solucin 1 mg/ml / Diazepam solucin 10 mg/2 ml Especie: 2 ratones albinos. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento : A un ratn control de 30 g, se le administr 0.2 ml de Metamidofos por la va intraperitoneal, se observarn las manifestaciones de intoxicacin en el Software. Seguidamente, en la mesa de trabajo, se administrar a un ratn, Atropina (va ip, 2 mg/Kg), o Diazepam (via ip., 10 mg/kg); cinco minutos despus, se administrar el insecticida rgano-fosforado, a la misma dosis y se observarn las manifestaciones. A otro ratn, se le administrar ambas drogas en las dosis establecidas (Atropina y Diazepam), cinco minutos despus, se le administrar el insecticida rganofosforado, a la misma dosis y observarn las manifestaciones. Cada mesa de trabajo, realizar el experimento en uno o dos ratones, para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. Asimismo, tambin deber consignar en el informe, las dosis administradas de las sustancias en miligramos y en mililitros y e l resto de partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, segn necesidad, podr ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab, en el segmento de metodologa demostrativa. Tabla n1: intoxicacin por rganos fosforados, matriz de recoleccin de datos Ratn Frmaco Metamidofos Atropina y Metamidofos Diazepam y Metamidofos Atropina, Diazepam y Metamidofos Efectos: Excitacin (-/+/++/+++), Sedacin (-/+/++/+++), Hipnosis (-/+/++/+++), Convulsiones (-/+/++/+++), Temblores (-/+/++/+++), Fasciculaciones (-/+/++/+++), Sudoracin (-/+/++/+++), Salivacin (-/+/++/+++), Frecuencia respiratoria incrementada (-/+/++/+++), Frecuencia respiratoria disminuida (-/+/++/+++), Frecuencia cardiaca aumentada (-/+/++/+++), Frecuencia cardiaca disminuida (-/+/++/+++), Muerte. 17 Dosis mg ml ---Efectos

EXPERIMENTO N2: Efectos sobre la PA y la FC de la Morfina y la Naloxona en Gato. Frmacos: Morfina / Naloxona Especie: Gato de 4 kg. Software: Software, The Virtual Cat V2.6.1, Dr John Dempster, University of Strathclyde. Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software Procedimiento : Se procedi a anestesiar a un gato, para ello, se administr por va intraperitoneal, Pentobarbital sdico 50 mg/kg. Seguidamente, se introdujo una cnula endotraqueal y se conect al animal a una mquina de ventilacin artificial asistida. Seguidamente, se cnula la vena braquial izquierda, la cual fue utilizada para la administracin de las drogas de estudio. Enseguida se realiz la canalizacin de la arteria cartida izquierda, en esta se introdujo un transductor de presin arterial, el cual fue conectado a un computador y registro las presiones sistlica, media, diastlica y la frecuencia cardiaca. En estas condiciones, se administra en dosis escalonadas las siguientes drogas: Morfina, Naloxona y la combinacin de ambas, considerando dosis esttica de Morfina y dosis escalonada e Naloxona. Las dosis administradas y los resultados, se observan en la tabla de resultados del experimento. Para el informe, se construirn graficas de lneas con ejes X/Y, en base a esta, discutir los factores que influyen en los efectos observados. Asimismo, se debe presentar las dosis administradas de las sustancias en miligramos y el resto de partes del informe, segn indicaciones consignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa.

Tabla de resultados del experimento n2, Efectos sobre la PA y FC de la Morfina y la Naloxona en Gato. Presin arterial (mmHg) Droga Pentobarbital sdico Morfina 1ug/kg Morfina 5ug/kg Morfina 10ug/kg Morfina 20ug/kg Morfina 50ug/kg Morfina100ugl/kg Naloxona 1 mg/kg Naloxona 5 mg/kg Naloxona 10 mg/kg Naloxona 20 mg/kg Naloxona 50 mg/kg Neostigmina 100 ug/kg
Morfina100ugl/kg (Basal), luego Naloxona 5 mg/kg Morfina100ugl/kg (Basal), luego Naloxona 10 mg/kg Morfina100ugl/kg (Basal), luego Naloxona 20 mg/kg Morfina100ugl/kg (Basal), luego Naloxona 50 mg/kg Morfina100ugl/kg (Basal), luego Naloxona 100 mg/kg

Dosis (mg)

Sistlica Basal -------131 133 132 131 132 132 130 130 130 132 133 131 106 108 120 107 111 Cambio -------128 123 125 124 112 110 133 133 133 133 133 133 104 106 118 107 94 Basal

Media Cambio -------88 82 85 83 70 67 92 92 92 92 92 92 60 62 75 63 45

Diastlica Basal -------75 75 74 74 74 75 71 71 71 74 75 72 44 47 61 45 51 Cambio -------71 64 67 66 52 49 75 75 75 75 75 75 41 43 57 44 24

Frecuencia cardiaca (latidos/minuto) Basal -------106 109 109 104 107 111 109 111 111 110 107 111 120 120 121 121 120 Cambio -------112 116 118 118 118 118 109 109 110 108 108 109 116 112 110 110 107

-------92 92 92 92 91 92 89 89 89 91 93 90 62 65 79 64 69

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EXPERIMENTO N3: Dosis letal 50 (DL50) de la Anfetamina y la Morfina. Frmacos: Morfina / Anfetamina Especie: Ratn albino. Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software Procedimiento: Los ensayos de toxicidad aguda de frmacos, son pruebas preclnicas de seguridad, que buscan delimitar dosis txicas letales, en animales de experimentacin. En este experimento, se formaron dos grupos experimentales, conformados cada uno por 10 ratones albinos. A estas, se les administr por va oral, en dosis escalonada, las siguientes drogas: Morfina y Anfetamina. Seguidamente, se evalu a los animales durante 24 horas, siendo la variable principal de estudio, la presencia o ausencia de letalidad, en los grupos experimentales. Considera ndo la frecuencia de letalidad y las dosis administradas, se determina la dosis letal 50 de la droga. Los resultados del experimento se encuentran en la tabla de resultados. Se analizara en el informe, los resultados de todos los casos, mediante la construccin de graficas de lneas con ejes X/Y, e n base a estas, delimitara la dosis letal 50, mediante el uso de los valores establecidos del Probit. De la misma forma, consignara el resto de partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Tabla de resultados del experimento n3, determinacin de la dosis letal 50 de Anfetamina y Morfina ANFETAMINA MORFINA RATONES DOSIS MUERTOS PROBIT RATONES DOSIS MUERTOS PROBIT (mg/kg) (mg/kg) 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 1 5 9 13 17 23 27 33 41 48 56 1 6 9 9 11 12 12 12 14 16 16 3.35 4.48 4.87 4.87 5.13 5.25 5.25 5.25 5.52 5.84 5.84 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 3 7 11 15 21 25 29 35 43 51 60 5 6 11 14 12 15 13 14 15 17 17 4.33 4.48 5.13 5.52 5.25 5.67 5.38 5.52 5.67 6.04 6.04

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EXPERIMENTO N4: Intoxicacin por Consumo de Cannabis.

Frmacos: Especie: Software:

Tetrahidrocannabinol (Cannabis sativa) Humano.

Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam

Metodologa:

Trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software.

Procedimiento: Se Observar un video clip de un paciente que consumi Tetrahidrocannabinol. Se reconocer las siguientes manifestaciones farmacolgicas por efecto de la droga: Contraccin de la pupila, Dilatacin de vasos conjuntivales y escleras, Midriasis, Nistagmos, Tremor, Otros. De la misma forma, consignara las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Tabla N4: EXPERIMENTO N4, Intoxicacin por consumo de Tetrahidrocannabinol, matriz de recoleccin de datos Efectos Presencia Observaciones Si No

Relajacin Contraccin de la Pupila Dilatacin de los vasos conjuntivales y escleras Midriasis Nistagmos Tremor Otros
EXPERIMENTO N5: Intoxicacin por Consumo de Cocana. Frmacos: Cocana (Erytroxylum coca) Especie: Ratn. Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Se administrar a un ratn, por va intraperitoneal, 15 mg/kg de cocana. Luego de 15 minutos, observar las siguientes manifestaciones farmacolgicas por efecto de Cocana: Hiperactividad Motora, Incoordinacin Motriz, Cola de Straub, Estereotipias, Otros. De la misma forma, consignara las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Tabla N5: EXPERIMENTO N5, Intoxicacin por consumo de Cocana, matriz de recoleccin de datos

Efectos Hiperactividad motora Incoordinacin Motriz Cola de Straub Estereotipias Otros

Presencia Si No

Observaciones

EXPERIMENTO N6: Intoxicacin por Consumo de Nicotina. Frmacos: Nicotina (Cigarro) Especie: Rata. Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Se le administrar a un ratn, por va intraperitoneal, 8 mg/kg de nicotina. De inmediato, observar las manifestaciones farmacolgicas por efecto de Nicotina, reconociendo las siguientes: Hiperactividad Motora, Hipertona, Ataxia, Cola de Straub, Piloereccin, Otros. Pasados 5 minutos, observar las manifestaciones farmacolgicas por efecto de Nicotina, reconociendo las siguientes: Hiperactividad Motora, Hipertona, Ataxia, Espasmos, Cola de Straub, Pilo ereccin, Otros. De la misma forma, consignara las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el .acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. 20

Tabla N6: EXPERIMENTO N6, Intoxicacin por Nicotina, matriz de recoleccin de datos

Efectos Si Hiperactividad Motora. Hipertona. Ataxia Espasmos Cola de Straub Piloereccin. Otros.

Inmediato No

A los 5 minutos Si No

Observaciones

EXPERIMENTO N7: Intoxicacin Etlica Aguda. Frmacos: Alcohol etlico, solucin al 40% / Piridoxina 1ml/300 mg / Dextrosa al 33% Especie: Conejo de 6 Kg. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software Procedimiento: Se trabaj con un conejo en ayunas, a este, en intervalo de diez minutos y por 3 veces, se le administr por va intravenosa, 2 ml de la mezcla alcohlica al 40% , al final recibi 6 ml; en estos 3 periodos, se observaron y se anotaron las manifestaciones de la intoxicacin alcohlica. En estado de intoxicacin, se repiti la misma secuencia, pero esta vez se administr como tratamiento, en bolo, Piridoxina (4 ml) y Dextrosa (12 ml). Se observ la reversin de los efectos de intoxicacin alcohlica. Los resultados del experimento, se encuentran en la tabla de resultados. De la misma forma, consignara las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa.

Tabla de resultados del experimento n7, Intoxicacin Etlica Aguda. Efectos Basal

Post administracin de Etanol

Post administracin de Piridoxina con Dextrosa

10 min 20 min 30 min 10 min Estado de conciencia 4 2 1 1 3 Reflejo antigravdico 4 2 1 0 3 Tono muscular 4 2 1 0 3 Sensibilidad dolorosa 4 3 2 2 3 Reflejo fotomotor 4 2 0 0 3 Reflejo corneal 4 2 1 1 4 Efectos: Estado de conciencia 4=Normal. 3, 2 y 1=Disminucin leve, moderada y severa. Reflejo Antigravdico 4= Normal. 3,2 y 1 =Disminucin leve, moderado y severo. Tono muscular 4= Normal. 3,2 y 1 =Disminucin leve, moderada y severa. Sensibilidad dolorosa 4= Normal. 3, 2 y 1=Disminucin leve, moderada y severa. Reflejo fotomotor 4=Normal. 3,2 y 1= Disminucin leve, moderada y severa. Reflejo corneal 4=Normal. 3,2 y 1 =Disminucin leve, moderada y severa.

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SEXTA PRCTICA: Anticonvulsivantes, hipnticos y sedantes Entre dos opciones opta siempre por la ms generosa - Krishnamurti OBJETIVOS GENERAL: Permitir, al alumno, la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le posibiliten conocer y explicar, correctamente los efectos de los diferentes frmacos anticonvulsivantes, hipnticos y sedantes, utilizados en los diferentes experimentos, reconociendo la farmacocintica y la farmacosologa de los mismos. ESPECFICOS: - Reconoce los diferentes tipos de convulsiones y explica, correctamente, el mecanismo de su produccin. - Explica, correctamente, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa del Pentilenotetrazol. - Explica, correctamente, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los medicamentos anticonvulsivantes, en particular, de los que se emplearan en la prctica. - Explica, correctamente, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los medicamentos hipnticos, en particular, de los que se emplearan en la prctica. - Explica, correctamente, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los medicamentos ansiolticos, en particular, de los que se emplearan en la prctica. - Realiza las prcticas simuladas, analiza, interpreta y explica los resultados obtenidos. TAREAS PARA EL ALUMNO: Antes de asistir a la prctica, el alumno debe revisar, en la bibliografa consignada, los mecanismos de produccin de las convulsiones, las caractersticas de los diferentes tipos de convulsin, los mecanismos de produccin del sueo y sus fases, los mecanismos de produccin de ansiedad o estrs, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los diferentes frmacos a utilizar en la realizacin de los experimentos. Igualmente, debe conocer los procedimientos a seguir en la realizacin de los diferentes experimentos, consignados en su resp ectiva gua de prctica. EXPERIMENTO N1: Convulsiones inducidas por Pentilenotetrazol. Frmacos: Pentilenotetrazol, solucin 2.5% / Difenilhidantoina, solucin 0.5% / Diazepam, solucin 10 mg/2 ml Carbamazepina, solucin 0.1% / Gabapentina, solucin 50 mg/ml. Especie: 2 ratones de 25 a 30 g de peso. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento: En cada mesa, se trabajar con 3 ratones. El ratn control, recibir Pentilenotetrazol en dosis de 80 mg/kg y por va intraperitoneal; este ratn, no recibir ninguna droga anticonvulsivante y se observarn las manifestaciones, mediante simulacin en Software. A los otros 2 animales de experimentacin, se les administrar va intraperitoneal, los frmacos anticonvulsivantes, a las dosis consignadas; 40 minutos despus se les administrar por va intraperitoneal, la misma dosis de Pentilenotetrazol. Comparar el perodo de latencia, y convulsiones entre los animales tratados con anticonvulsivantes y el animal control. Cada mesa de trabajo, realizar el experimento en uno o dos ratones, para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. De la misma forma, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, segn necesidad, podr ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab, en el segmento de metodologa de mostrativa.

Tabla N1: EXPERIMENTO N1, Convulsiones inducidas por Pentilenotetrazol, matriz de recoleccin de datos. Intensidad Dosis Perodo de Peso de las observaciones FRMACO Ratn mg/kg latencia convulsiones Pentilenotetrazol Blanco 80 Fenobarbital Cabeza 30 Difenilhidantoina Lomo 30 Diazepam Cola 10 Carbamazepina Gabapentina Pata Oreja 10 100

Efectos: Sin convulsiones= 0. Convulsiones leves=+. Convulsiones moderadas=++. Convulsiones intensas=+++ 22

EXPERIMENTO N2: Efecto hipntico en ratn mediante el sueo barbitrico. Frmacos: Fenobarbital, 100 mg/2ml Especie: Ratn albino Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento: Se tomarn los parmetros basales en el ratn de experimentacin (estado de alerta, reflejo de enderezamiento y reflejo corneal). Seguidamente, se administrar por la va intraperitoneal, 40 mg/kg de Fenobarbital (opcionalmente puede emplearse Pentobarbital o Tiopental), seguidamente, se colocar al animal en una caja de observacin tipo Macrolom, preservando una temperatura de la superficie y del ambiente de 37 0C, a fin de evitar la hipotermia y la muerte subsiguiente. Paso siguiente, se realizar nuevamente y de forma seriada, la medicin de los parmetros de experimentacin (efectos farmacolgicos: estado de alerta, reflejo de enderezamiento y reflejo corneal, entre otr os), el tiempo de sueo se cuantifica desde la prdida del reflejo de enderezamiento, hasta su recuperacin total o parcial. Cada mesa de trabajo, realizar el experimento en uno o dos ratones, para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. De la misma forma, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa Tabla N2: EXPERIMENTO N2, Efecto hipntico en ratn mediante el sueo barbitrico , matriz de recoleccin de datos. Evaluaciones post administracin de Fenobarbital Parmetros Basal 1 (min) 2 (min) 3 (min) 4 (min) 5 (min) Estado de alerta Reflejo de enderezamiento Reflejo Corneal Periodo de latencia Tiempo de sueo Otro (s): Efectos: Estado de alerta Normal= - . Sedacin +, ++, +++. Excitacin +, ++, +++. Reflejo de enderezamiento Normal = - . Disminucin +, ++, +++. Reflejo corneal Normal = - . Disminucin +, ++, +++. EXPERIMENTO N3: Efecto ansioltico en roedor mediante la prueba de Irwin . Frmacos: Alprazolam, solucin al 0.5 % / Anfetamina. Especie: Ratn albino Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento: Mediante simulacin en Software, se administrar 40 mg/kg de Anfetamina, por va intraperitoneal a un ratn, el cual servir de control negativo, en este se tomaran los parmetros de experimentacin (estado de alerta, piloereccin, irritabilidad, sensibilidad). En otro ratn, se iniciara evaluando los parmetros de experimentacin, paso siguiente, se le administrara por la va intraperitoneal, Alprazolam en dosis de 1 mg/kg, seguidamente, se colocara al animal en una caja de observacin tipo Macrolom, preservando una temperatura del ambiente en rango entre 19 a 29 0C. Paso siguiente, se realizara nuevamente y de forma seriada, la medicin de los parmetros de experimentacin ( estado de alerta, piloereccin, irritabilidad, sensibilidad). Cada mesa de trabajo, realizar el experimento en uno o dos ratones, para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. De la misma forma, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el .acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa Tabla N3: EXPERIMENTO N3, Efecto ansioltico en roedor mediante la prueba de Irwin, matriz de recoleccin de datos. Evaluaciones post administracin de Fenobarbital Parmetros Basal 1 (min) 2 (min) 3 (min) 4 (min) 5 (min) Estado de alerta Piloereccin Irritabilidad Sensibilidad Periodo de latencia Otro (s): Efectos: Estado de alerta Normal= - . Sedacin +, ++, +++. Hiperactividad +, ++, +++. Piloereccin Si o No. Irritabilidad - , +, ++, +++. Sensibilidad Normal = - . Hipersensibilidad +, ++, +++. 23

EXPERIMENTO N4: Convulsiones por Electrochoque supra mximo Frmacos: Fenobarbital, solucin al 2 % / Difenilhidantoina, solucin al 0.5 % / Diazepam, solucin 10 mg/2 ml / Carbamazepina, solucin al 0.1% Especie: Rata albino de 250 g. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software Procedimiento: Se indujo las convulsiones por estmulo elctrico supra-mximo, en la rata control que no recibi ninguna droga. Se consider como parmetros, las fases de flexin y extensin tnicas, de los miembros posteriores, el clonus y la depresin post-paroxismal, del animal de experimentacin. Las 4 ratas restantes, recibieron los anticonvulsivantes consignados, va intraperitoneal en las dosis indicadas. Una hora despus, se provoc convulsiones por electrochoque mximo. Los resultados se muestran en la tabla de resultados. Para el informe, se debe presentar las dosis administradas de las sustancias en miligramos y mililitros, como tambin consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab, en el segmento de metodologa demostrativa. Tabla de resultados del experimento n4, Convulsiones por Electrochoque supra mximo FRMACO Control Fenobarbital Difenilhidantoina Diazepam Carbamazepina Rata Blanco Cabeza Lomo Cola Pata Dosis mg/kg ---30 30 10 10 Dosis (mg) Dosis (ml) Intensidad de las Convulsiones 0 ++ + ++ + Observaciones

Efectos: Sin convulsiones= 0. Convulsiones leves= +. Convulsiones moderadas= ++. Convulsiones intensas= +++

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SPTIMA PRCTICA: Frmacos antidepresivos y antipsicticos Las derrotas de la vida conducen a las ms grandes victorias - Max-Pol Fouchet OBJETIVOS GENERAL: Permitir, al alumno, la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le posibiliten conocer y explicar, correctamente los efectos de los diferentes frmacos antidepresivos y antipsicticos, utilizados en los diferentes experimentos, reconociendo la farmacocinti ca, farmacodinamia y la farmacosologa de los mismos. ESPECFICOS: - Reconoce los principales mecanismos neurofisiolgicos implicados en la produccin de la psicosis y la depresin. - Explica, correctamente, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los frmacos antipsicticos y antidepresivos, en particular, de los que se emplearan en la prctica. - Explica y reconoce correctamente, las principales reacciones adversas de los frmacos antipsicticos y antidepresivos. - Explica y reconoce correctamente, las principales interacciones farmacolgicas de los frmacos antipsicticos y antidepresivos. - Realiza las prcticas in vivo y/o simuladas, analizando, interpretando y explicando los resultados obtenidos. TAREAS PARA EL ALUMNO: Antes de asistir a la prctica, el alumno debe revisar, en la bibliografa consignada, los mecanismos de produccin de la depresin y la psicosis, las caractersticas neurofisiolgicas implicadas en estos cuadros nosolgicos, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los diferentes frmacos a utilizar en la realizacin de los experimentos. Igualmente, debe conocer los procedimientos a seguir en la realizacin de los diferentes experimentos, consignados en su respectiva gua de prctica. EXPERIMENTO N1: Efecto antidepresivo de los frmacos, mediante la prueba del nado forzado. Frmacos: Mirtazapina, solucin al 0.2 % / Amitriptilina, solucin al 0.3 % / Fluoxetina, solucin al 0.5 % Especie: Ratn albino macho de 25 g. Software: Journal of Visualized Experiment JOVE on line www.jove.com Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento: El experimento comienza 24 horas previas a la prctica de farmacologa, con la fase de climatizacin, as, se inicia colocando al roedor en un cilindro de vidrio, cuyas dimensiones sern de 23 cm de altura por 25 cm de dimetro, este contendr agua hasta una altura de 12 cm, conservando una temperatura constante de 22 0C +/- 2 0C, empleando una placa caliente graduable entre 0 a 100 0C. El roedor permanecer por 15 minutos en el cilindro de vidrio, luego de este periodo ser extrado del mismo, seguidamente debe ser secado con una toalla, para luego ser colocado en una jaula tipo Macrolom, con acceso a agua y alimento ad libitum y condiciones ambientales estndar. El da de la prctica de laboratorio (post 24 horas de la fase de climatizacin), el roedor recibir la sustancia a evaluacin, por la va intraperitoneal, luego de 30 min utos, ser colocado en el cilindro de vidrio, en las mismas condiciones antes descritas. A partir de la introduccin del roedor al cilindro de vidrio, se empieza a tomar el tiempo, considerando 6 minutos, los primeros 2 minutos de este periodo, son de re-climatizacin, por tanto, durante los 4 minutos restantes, empleando un cronometro digital, se medir el tiempo de inmovilizacin en que permanece el roedor (tiempo donde el ratn no exploro activa mente el cilindro o trato de escapar del mismo). La toma del tiempo de inmovilizacin, ser realizada por 2 o 3 alumnos, independientemente. Adicionalmente, el alumno podr realizar una videograbacin del periodo de toma de inmovilizacin. Las sustancias a evaluar sern las siguientes: Suero fisiolgico 0.1 ml/10g de P.C., Mirtazapina 10 mg/kg, Amitriptilina 20 mg/kg y Fluoxetina 30 mg/kg. El alumno anotara los tiempos de inmovilizacin y dems observaciones en la tabla de recoleccin de datos. Cada mesa de trabajo, realizar el experimento en uno o dos ratones, para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. Para el informe, se debe presentar las dosis administradas de las sustancias en miligramos y mililitros, como tambin consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software Windows Media o va on line en www.jove.com, en el segmento de metodologa demostrativa. Tabla N1: EXPERIMENTO N1, Efecto antidepresivo de los frmacos, mediante la prueba del nado forzado, matriz de recoleccin de datos. Dosis Dosis Tiempo de Peso observaciones FRMACO Ratn mg ml inmovilidad Suero fisiolgico Blanco Mirtazapina Amitriptilina Fluoxetina Cabeza Lomo Cola

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EXPERIMENTO N2: Efecto antipsictico de los frmacos, mediante la prueba del nado forzado. Frmacos: Clorpromazina, solucin al 0.2 % / Haloperidol, solucin de 5 mg/5ml / Clozapina, solucin al 0.2 % Especie: Ratn albino macho de 25 g. Software: Journal of Visualized Experiment JOVE on line www.jove.com Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento: El experimento comienza 24 horas previas a la prctica de farmacologa, con la fase de climatizacin, as, se inicia colocand o al roedor, en un cilindro de vidrio cuyas dimensiones sern de 23 cm de altura por 25 cm de dimetro, este contendr agua, hasta una altura de 12 cm, conservando una temperatura constante de 22 0C +/- 2 0C, empleando una placa caliente graduable entre 0 a 100 0C. El roedor permanecer por 15 minutos en el cilindro de vidrio, luego de este periodo, ser extrado del mismo, seguidamente debe ser secado con una toalla, para luego ser colocado en una jaula tipo Macrolom, con acceso a agua y alimento ad libitum y condiciones ambientales estndar. El da de la prctica de laboratorio (post 24 horas de la fase de climatizacin), el roedor recibir la sustancia a evaluacin, por la va intraperitoneal, luego de 30 minutos, ser colocado en el cilindro de vidrio, en las mismas condiciones antes descritas. A partir de la introduccin del roedor al cilindro de vidrio, se empieza a tomar el tiempo, considerando 6 minutos, los primeros 2 minutos de este periodo, son de re-climatizacin, por tanto, durante los 4 minutos restantes, empleando un cronometro digital, se medir el tiempo de inmovilizacin en que permanece el roedor (tiempo donde el ratn no exploro activamente el cilindro o trato de escapar del mismo). La toma del tiempo de inmovilizacin, ser realizada por 2 o 3 alumnos, independiente mente. Adicionalmente, el alumno podr realizar una videograbacin del periodo de toma de inmovilizacin. Las sustancias a evaluar sern las siguientes: Suero fisiolg ico 0.1 ml/10g de P.C., Clorpromazina 10mg/kg, Haloperidol 5 mg/kg y Clozapina 10 mg/kg. El alumno anotara los tiempos de inmovilizacin y dems observaciones en la tabla de recoleccin de datos. Cada mesa de trabajo, realizar el experimento en uno o dos ratones, para el posterior informe, presentaran los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. Para el informe, se debe presentar las dosis administradas de las sustancias en miligramos y mililitros, como tambin consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software Windows Media o va on line en www.jove.com, en el segmento de metodologa demostrativa. Tabla N1: EXPERIMENTO N2, Efecto antipsictico de los frmacos, mediante la prueba del nado forzado, matriz de recoleccin de datos. Dosis Dosis Tiempo de Peso observaciones FRMACO Ratn mg ml inmovilidad Suero fisiolgico Blanco Clorpromazina Haloperidol Clozapina Cabeza Lomo Cola

EXPERIMENTO N3: Efectos neurofarmacolgicos de la Clorpromazina en rata. Frmacos: Clorpromazina Especie: Rata albina de 250 g. Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Se administr en una rata albino macho, por la va intraperitoneal, Clorpromazina a dosis de 20 mg/kg, de inmediato se coloc a la rata en una jaula Macrolom y se observ las manifestaciones farmacolgicas en los siguientes periodos: En seguida post administracin de la droga, entre los 2 o 3 minutos y entre los 6 a 10 minutos. Los resultados del experimento, se presentan en la tabla de resultados. Para el informe, se debe presentar las dosis administradas de las sustancia en miligramos, como tambin consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa. Tabla de resultados del experimento n3, Efectos neurofarmacolgicos de la Clorpromazina en rata. Evaluaciones post administracin de Clorpromazina Parmetros Basal Inmediato 2 a 3 min 6 a 10 min Actividad locomotora + +++ / ** * Sedacin ++ +++ Catalepsia +++ Efectos: Actividad locomotora Normal= - . Disminucin +, ++, +++. Incremento transitorio tras estimulo doloroso *, **, ***. Sedacin +, ++, +++. Catalepsia +, ++, +++.

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EXPERIMENTO N4: Efectos neurofarmacolgicos del Haloperidol en ratn. Frmacos: Haloperidol Especie: Ratn albino de 25 g. Software: Software Microlabs, Dr. Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Se administr en 3 ratones albinos machos, por la va intraperitoneal, Clorpromazina a dosis de 2, 5 y 15 mg/kg, de inmediato se coloc al roedor en una jaula Macrolom y se observ las manifestaciones farmacolgicas. Los resultados del experimento, se pr esentan en la tabla de resultados. Para el informe, se debe presentar las dosis administradas de las sustancia en miligramos, como tambin consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa. Tabla de resultados del experimento n4, Efectos neurofarmacolgicos del Haloperidol en ratn. Parmetros Actividad locomotora Sedacin Catalepsia Reflejo corneal Reflejo de enderezamiento Evaluaciones post administracin de Haloperidol 2 mg 5 mg 15 mg

++/*** ++ ++ +++ +++

+++/** ++ ++ +++ +++

+++/* +++ +++ ++ +++

Efectos: Actividad locomotora Normal= - . Disminucin +, ++, +++. Incremento transitorio tras estimulo doloroso *, **, ***. Sedacin +, ++, +++. Catalepsia +, ++, +++. Reflejo corneal activo +, ++, +++.Reflejo de enderezamiento activo +, ++, +++.

EXPERIMENTO N5: Efecto antidepresivo del Litio, mediante la prueba de suspensin de la cola en ratn. Frmacos: Litio. Especie: Ratn albino. Software: The Journal of Visualized Experiments (JoVE). http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/3769/the- tail-suspension- test Buscar directo en on line en www.jove.com, Como: The Tail Suspension Test Windows Media Player and Microsoft office Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Revisar el procedimiento del experimento en el siguiente web site: http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/ video/3769/the-tail-suspension-test o buscar el artculo on line en www.jove.com como: The Tail Suspension Test. Seguidamente, discutir los resultados presentados en la figura 1, respecto al efecto del Litio. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa.

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OCTAVA PRCTICA: frmacos anestsicos generales, anestsicos locales y bloqueantes neuromusculares La cortesa no cuesta nada y compra mucho - Miguel De Montaigne OBJETIVOS GENERAL: Permitir, al alumno, la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le facilite conocer y explicar correctamente los efectos, mecanismos de accin, manifestaciones adversas e indicaciones de los frmacos utilizados en la prctica. ESPECFICOS: Explica y analiza la farmacocintica, la farmacodinamia, la farmacosologa Explica y analiza la farmacocintica, la farmacodinamia, la farmacosologa Explica y analiza la farmacocintica, la farmacodinamia, la farmacosologa Neuromusculares. Realiza las prcticas simuladas, analiza, interpreta y explica los resultados y el mecanismo de accin de los frmacos Anestsicos Locales. y el mecanismo de accin de los frmacos Anestsicos Generales. y el mecanismo de accin de los frmacos Bloqueantes obtenidos de los experimentos y simulaciones en Software.

TAREAS PARA EL ALUMNO: Previamente, a la realizacin de la presente prctica, el alumno debe revisar en sus libros de texto, la Farmacocintica, la Farmacodinamia y la Farmacosologa de los frmacos a utilizar en la realizacin de los experimentos. Asimismo, debe conocer el o los procedimientos a seguir durante los experimentos, consignados en su gua de prctica. EXPERIMENTO N 1: Anestesia Local Por Pincelacin. Frmacos: Lidocana gel al 2% . / Lidocana crema al 4 % . / Lidocana Spray 10 % / Vaselina. / Crema nvea. / Colonia Spray. Especie: 3 Hombres. Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimientos: A un individuo vendarle los ojos. Seguidamente evaluar en la cara anterior de ambos antebrazos la sensibilidad, apuntando valores basales, de la siguiente forma: - Con un algodn, rozar cada antebrazo muy superficialmente y corroborar la sensibilidad tctil, al reconocimiento del estmulo . - Con una varilla con punta roma, escribir en cada antebrazo una letra y/o nmero, y corroborar la sensibilidad propioceptiva, al reconocimiento del estmulo. - Con un encendedor con borde metlico y en estado frio, colocar el mismo en cada antebrazo, y corroborar la sensibilidad termo-dolorosa, al reconocimiento del estmulo. - Con un encendedor con borde metlico y en estado caliente, colocar el mismo en cada antebrazo, y corroborar la sensibilidad termo-dolorosa, al reconocimiento del estmulo. Seguidamente, aplicar tpicamente a cada individuo, en cada antebrazo, las siguientes combinaciones de frmacos: - Individuo 1: Lidocana gel al 2% y Vaselina. - Individuo 2: Lidocana crema al 4 % y Crema nvea. - Individuo 3: Lidocana Spray 10 % y Colonia Spray. Sacar la venda de los ojos, y esperar 20 minutos, para volver a colocar la venda en los ojos y tomar nuevos valores. Utilizar tabla N 3 para la recoleccin de informacin. Cada mesa de trabajo, realizar el experimento entre todos los estudiantes (mnimo 5 estudiantes), para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa.

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Tabla N1: EXPERIMENTO N1, Anestesia Local Por Pincelacin, matriz de recoleccin de datos. Tacto Individuo Antebrazo Post Pre Combinacin Frmaco Propiocepcin Post Pre Calor/ Dolor Post Pre Frio/ Dolor Post Pre Tipo de Fibra

Observaciones

Izquierdo 1 Derecho Izquierdo 2 Derecho Izquierdo 3 Derecho Intensidad de Efecto: Normal = 0. Leve = 1. Moderado = 2. Intenso = 3. Abolicin = 4. EXPERIMENTO N2: Tipo de parlisis muscular producida por frmacos bloqueantes neuromusculares. Frmacos: Bromuro de Vecurnio 4 mg /1 ml. / Succinilcolina 500 mg/10 ml. Especie: 2 Codornices. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software Procedimiento : A una codorniz se le administrar, por va intramuscular, 0.02 mL de Bromuro de Vecurnio. A otra codorniz, se le administrar por la misma va, 0.02 mL de Succinilcolina. Antes de administrar los frmacos, observar en los animales la posicin erecta y la deambulacin, as como el tono muscular. Despus de la administracin observar los efectos inmediatos y tardos de ambos frmacos, especialmente el tip o de parlisis que producen. Este experimento, ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab, en el segmento de metodologa demostrativa. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Tabla N2: EXPERIMENTO N2, Tipo de parlisis muscular producida por frmacos bloqueantes neuromusculares, matriz de recoleccin de datos. Dosis Periodo de Frmaco Descripcin Tipo de parlisis mg Latencia

Basal

Bromuro De Vecuronio

Succinilcolina

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EXPERIMENTO N3: Anestesia General con Fentanilo en rata. Frmacos: Fentanilo / Midazolam / Flunixin (AINE) Especie: Rata de 250 g Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: En el siguiente experimento, se administra por la va endovenosa a una rata, diferentes dosis del anestsico Fentanilo. En la tabla de resultados, se muestran la secuencia de dosis administradas y las manifestaciones observadas por efecto del anestsico. El alumno deber analizar los resultados de todos los casos, construir una grfica de lneas con ejes X/Y, delimitar las fases de la anestesia, y discutir los factores que influyen en los efectos observados, a causa de la administracin del medicamento Anestsico General. Para el informe, el alumno presentar los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones en el acpite de Fuentes de Verificacin de Las Prcticas de Farmacologa.

Tabla de resultados del experimento n3, Anestesia General con Fentanilo en rata.
Compartimiento Central de inmediato mg Basal 1 3 6 9 12 15 18 21 24 27 ----3.5 10 20 30 40 50 60 70 80 90 [ng/l] [mg/l] -------

Dosis (ug/kg)

Ritmo Cardiaco (lat/min)

Ritmo Respiratorio (resp/min)

Locomocin

Reflejo al Pinchamiento (dolor)

Reflejo Postural Enderezamiento

Reflejo Corneal

Reflejo Estiramiento de la Pata

350 345 334 320 307 265 284 273 264 255 0

81 79 75 70 66 62 58 55 53 51 0

+++ ++ ++ + + + 0 0 0 0 0

+++ +++ +++ +++ ++ 0 0 0 0 0 0

+++ +++ +++ +++ ++ + 0 0 0 0 0

+++ +++ +++ +++ ++ + 0 0 0 0 0

+++ +++ +++ +++ ++ + 0 0 0 0 0

Efectos: +++ = PRESENTE. ++ = DISMINUCION. + = MAYOR DISMINUCION. 0 = AUSENTE

EXPERIMENTO N4: Anestesia General con Isoflurano en rata Frmacos: Isoflurano / N 2O / O2 Especie: Rata de 250 g Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam. Metodologa: Tarea y trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: En el siguiente experimento, se administra por la va inhalatoria a una rata, diferentes dosis del anestsico Isoflurano. En la tabla de resultados, se muestran la secuencia de dosis administradas y las manifestaciones observadas por efecto del anestsico. El alumno deber analizar los resultados de todos los casos, construir una grfica de lneas con ejes X/Y, delimitar las fases de la anestesia y discutir los factores que influyen en los efectos observados, a causa de la administracin del medicamento Anestsico General. Para el informe, el alumno presentar los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa.

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Tabla de resultados del experimento n4, Anestesia General con Isoflurano en rata
Dosis Compar timiento Centr al de inmediato (mg) (%) ----0.2 0.3 0.5 0.7 0.8 1 1.1 1.3 1.6 2 (mg) Compar timiento Centr al a los 30 minutos (%) ------0.3 0.5 0.7 0.9 1 1.2 1.3 1.5 1.8 2.2 (mg)

(%) Basal 0.6 0.9 1.2 1.5 1.8 2.1 2.4 2.7 3 4

Ritmo Car diaco (lat/min)

Ritmo Respir ator io (r esp/min)

Locomocin

Reflejo Pinchamiento

Reflejo Postur al Ender ezamiento

Reflejo Cor neal

Reflejo Estir amiento Pata

350 329 320 311 303 295 287 281 273 266 0

81 74 70 67 65 62 59 58 55 53 0

+++ ++ ++ + + 0 0 0 0 0 0

+++ +++ +++ ++ ++ 0 0 0 0 0 0

+++ +++ +++ ++ ++ + 0 0 0 0 0

+++ +++ +++ ++ ++ + 0 0 0 0 0

+++ +++ +++ ++ ++ + 0 0 0 0 0

Efectos: +++ = PRESENTE. ++ = DISMINUCION. + = MAYOR DISMINUCION. 0 = AUSENTE

EXPERIMENTO N 5: Anestesia local por Infiltracin Frmacos: Lidocana, clorhidrato solucin al 2% / Lidocana, clorhidrato solucin al 2% , ms Adrenalina al 0.1/oo Bupivacana, clorhidrato solucin al 2% / Bupivacana, clorhidrato solucin al 2% , ms Adrenalina al 0.1 /oo Especie: Conejo de 2 kg Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento : Se procedi a depilar la pared abdominal del conejo. Luego se delimitaron 4 cuadrantes. Seguidamente, con un estimulador elctrico, se estimul la superficie de cada cuadrante, generando como reaccin, la retraccin o contraccin de la piel, determinando el umbral basal. Posteriormente, se administraron los anestsicos locales especficos en cada cuadrante, en volumen de 0.4 ml (ver tabla de resultados). Post administracin de las drogas, se realizan las mediciones de la variacin del umbral cada 15 minutos (ver tabla de resultados) , anotando adems, la variacin en la intensidad de la retraccin o contraccin de la piel al estmulo elctrico. Con los datos de mV (mili voltios) presentados en la tabla de resultados, realizar el clculo del % de elevacin del umbral de anestesia local. Para el informe, el alumno presentar los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Tabla de resultados del experimento n5, Anestesia local por Infiltracin Basal mV 1.00 1.00 1.00 1.00 Efecto +++ +++ +++ +++ Primer control 1 mV 1.00 1.00 1.00 1.00 Efecto Primer control 2 mV 2.00 2.00 2.00 2.00 Efecto + Primer control 3 mV 3.00 3.00 3.00 3.00 Efecto ++ + ++ + Primer control 4 mV 4.00 4.00 4.00 4.00 Efecto ++++ + +++ % Umbral

Frmacos Lidocana Lidocana + Epinefrina Bupivacana Bupivacana + Epinefrina

Intensidad de efecto: > a +++ = Muy intenso. +++ = Intenso. ++ = Moderado. + = Leve. - = Ausencia.

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EXPERIMENTO N 6: Efecto de los frmacos Bloqueantes neuromusculares en el msculo diafragma. Frmacos: Tubocurare, Pancuronio, Atracurio. Especie: Rata. Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam The Virtual Twitch V2.2. Dr. John Dempster, University of Strathclyde. Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento : Un sistema de rganos aislados, permite la evaluacin de los efectos de una sustancia en una porcin especfica de tejido. Esto se logra aislando el rgano de una especie animal; en esta prctica se utiliza una rata, y se obtiene de ella una porci n del msculo diafragma, manteniendo la integridad del nervio frnico, que es llevado a una copa del sistema de rganos aislados, en la que existe una sustancia nutricia especfica, con aireacin continua con carbgeno y oxgeno, mantenida a una temperatura constante de 37 C. En estas condicio nes, uno de los bordes del msculo diafragma es sujetado a la base de la copa que lo hospeda, y el otro extremo es sujetado a un transductor, que convierte los movimientos de contraccin y relajacin, en gramos por fuerza, que a su vez es conectada a un computador, que automticamente la convierte en porcentajes. El nervio frnico es conectado a un estimulador que aplica pulsos elctricos de 8 voltios (0.5 Hz) con duracin de 0.2 mseg. En este sistema simulado en el Software, se procedi a someter al msculo diafragma a los efectos del Tubocurare, Pancuronio y Atracurio, cuya secuencia de administracin y dosis se encuentra en la tabla de resultados. Con los datos de gramos de tensin (g) presentados en la tabla de resultados, realizar el clculo del % de blo queo neuromuscular por accin de los frmacos. Analizar los resultados de todos los casos, construir una grfica de lneas con ejes X/Y, y en base a sta, discutir los factores que influyen en el efecto de los frmacos bloqueantes neuromusculares sobre el msculo diafragma. Para el informe, el alumno presentara los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Tabla de resultados del experimento n6, Efecto de los frmacos Bloqueantes neuromusculares en el msculo diafragma. Frmacos Dosis Tensin % de mg/ml (g) inhibicin Basal 2.3 Tubocurare 1 ug/ml 1.5 Tubocurare 5 ug/ml Tubocurare 10 ug/ml Tubocurare 20 ug/ml Pancuronio 0.01 ug/ml Pancuronio 0.1 ug/ml Pancuronio 0.5 ug/ml Pancuronio 1 ug/ml Atracurio 0.1 ug/ml Atracurio 0.5 ug/ml Atracurio 1 ug/ml Atracurio 5 ug/ml 0.5 0.3 0.0 2.2 1.5 0.5 0.3 2.2 1.5 1.2 0.4

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NOVENA PRCTICA: Analgsicos, Antiinflamatorios y Antipirticos La prueba ms clara de la sabidura es una alegra continua - Miguel De Montaigne OBJETIVOS GENERAL Permitir al alumno, la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le posibiliten explicar, correctamente, las acciones y efectos farmacolgicos de los frmacos capaces de producir analgesia, anti-inflamacin y anti-pirexia. ESPECFICOS Describe y entiende la fisiologa y la fisiopatologa del dolor, la inflamacin y la fiebre. Explica correctamente los mecanismos de accin de los frmacos analgsicos, antiinflamatorios y antipirticos. Describe la farmacodinamia, farmacocintica y farmacosologa de los diferentes grupos farmacolgicos. Realiza las prcticas in vivo y simuladas, analiza, interpreta y explica los resultados observados. TAREAS PARA EL ALUMNO Para realizar la presente prctica, el alumno deber revisar en su libro de texto, los mecanismos de produccin de dolor, la inflamacin y la fiebre; la farmacologa correspondiente a los grupos farmacolgicos correspondientes, considerando su farmacocintica, su farmacodinamia y su respectiva clasificacin. Asimismo, debe conocer el procedimiento a seguir en el laboratorio, para realizar correctamente el experimento, revisando su gua de prctica. EXPERIMENTO N 1: Efecto de los frmacos analgsicos, antiinflamatorios y antipirticos, mediante el mtodo de contorsiones abdominales en roedor. Frmacos: Diclofenaco sdico, sol. 0.5 mg/ml / Metamizol. Sol. 1 % / Morfina clorhidrato, sol. 1 o/oo / Tramadol, sol. 50 mg/ml Parecoxib sdico, sol. 40 mg/2ml / Solucin fisiolgica al 0.9% / c. Actico, sol. 2% Especie: 2 Ratones de 25-30 g de p/c Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento: Se procede a pesar y marcar un ratn. Administrar por va intraperitoneal, a un ratn (animal control previamente recibe 0.1 ml de solucin fisiolgica por cada 10 g/pc), cido actico al 2 % , en volumen de 0,2 ml por cada 10 gramos de peso (este ratn pu ede ser obviado y ser simulado en el Software). Observar, el comportamiento del animal, el nmero de contracciones (El cido actico produce una respuesta caracterstica de contorsin, que se manifiesta por contracciones abdominales, retorcimiento del tronco y extensin de las patas posteriores), considerando el perodo de latencia y el nmero total de contracciones durante 20 minutos. A los 5 ratones restantes, administrar por va IP, segn el esquema propuesto, las siguientes sustancias protectoras: Ratn Ratn Ratn Ratn Ratn A, cola, Diclofenaco sdico, 10 mg por Kg de peso. B, cabeza, Metamizol sdico, 30 mg /Kg de peso. C, lomo, morfina clorhidrato, 10 mg /Kg de peso. D, pata, Tramadol clorhidrato, 20 mg /Kg de peso E, oreja, Parecoxib sdico, 20 mg/kg de peso.

Esperar 20 minutos y luego administrar, a todos los animales, cido actico, va IP, a la dosis de 0.2 ml por cada 10 gramos de peso corporal ratn. Contar el periodo de latencia y el nmero de contracciones y estiramientos durante 20 minutos. Determinar el porcentaje de inhibicin del dolor, segn la disminucin de las contorsiones abdominales. Calcular tambin, el porcentaje de prolongacin del periodo de latencia, seg n el periodo de latencia del ratn control. Cada mesa realizar un ratn, con una droga especfica, para el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realizo su prctica. Para el informe, el alumno presentara los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, segn necesidad, podr ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab, en el segmento de metodologa demostrativa

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Ratones Blanco (control) cabeza lomo pata cola oreja

Tabla N1: Experimento N 1, Efecto analgsico de frmacos analgsicos por el mtodo de contorsiones abdominales en roedor, matriz de recoleccin de datos. Dosis Analgesia Perodo Nmero de Frmacos de contorsiones % de disminucin % de prolongacin administrados peso mg ml latencia durante 20 de las contorsiones del periodo de latencia Sol. fisiolgica Metamizol Morfina Tramadol Diclofenaco Parecoxib

EXPERIMENTO N 2: Efecto analgsico de frmacos analgsicos por el mtodo de la placa caliente en roedor. Frmacos: Morfina / Fenilbutazona / NaCl Especie: Ratn. Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio, mediante prctica simulada en Software. Procedimiento: La placa caliente consiste en una superficie calentada, encima de un bao de agua. La temperatura es controlada, entre 56 a 57C. Los animales son colocados en la superficie caliente, y se toma el tiempo de latencia con un cronmetro, en que el animal rea cciona lamindose las patas delanteras o hacer saltos. Se registra el periodo de latencia, antes y despus de 20, 30 o 60 minutos luego de la administracin oral o subcutnea de las drogas a probar. Si el tiempo de latencia excede 30 o 60 segundos, se retira el animal de la placa caliente . Para el informe, el alumno presentara los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en l .acpite de Fuentes de Verificacin de Las Prcticas de Farmacologa.

Tabla N2: Experimento N 2, Efecto analgsico de frmacos analgsicos por el mtodo de la placa caliente, matriz de recoleccin de datos. Perodo Analgesia Frmacos Ratones de % de prolongacin administrados latencia del periodo de latencia Grupo 1 (control) Sol. fisiolgica

Grupo 2

Morfina

Grupo 3

Fenilbutazona

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EXPERIMENTO N3: Determinacin del umbral del dolor en rata diabtica. Frmacos: Analgsico Especie: Ratn albino y rata albino. Software: The Journal of Visualized Experiments (JoVE). http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/3785/rapid-determination -thermal-nociceptive-threshold-diabetic Buscar directo en on line en www.jove.com, Como: Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats. Windows Media Player and Microsoft office Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Revisar el procedimiento del experimento en el siguiente web site: http://hinarigw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/3785/rapid-determination-thermal-nociceptive-threshold-diabetic o buscar el artculo on line en www.jove.com como: Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats. Seguidamente, discutir los resultados presentados en las figura 1, 2, 3 y 4. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en l acpite de Fuentes De Verificacin De Las Prcticas De Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa. EXPERIMENTO N4: Determinacin del dolor neuropatico en rata. Frmacos: Ninguna Especie: Rata albino. Software: The Journal of Visualized Experiments (JoVE). http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/3393/chronicconstriction-sciatic-nerve-pain-hypersensitivity-testing Buscar directo en on line en www.jove.com, Como: Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats Windows Media Player and Microsoft office Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Revisar el procedimiento del experimento en el siguiente web site: http://hinarigw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/3393/chronic-constriction-sciatic-nerve-pain-hypersensitivity-testing o buscar el artculo on line en www.jove.com como: Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats. Seguidamente, discutir los resultados presentados en la figura 3. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa.

EXPERIMENTO N5: Determinacin del dolor trmico en Drosophila Larvae. Frmacos: Ninguna Especie: Drosophila Larvae. Software: The Journal of Visualized Experiments (JoVE). http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/3837/local-global -methods-assessing- thermal-nociception-drosophila Buscar directo en on line en www.jove.com, Como: Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae Windows Media Player and Microsoft office Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Revisar el procedimiento del experimento en el siguiente web site: http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/ video/3837/local-global-methods-assessing-thermal-nociception-drosophila o buscar el artculo on line en www.jove.com como: Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae. Seguidamente, discutir los resultados presentados en las figura 1,2, 3,4,5 y 6. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa.

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DCIMA PRCTICA: Frmacos que actan en el tracto gastrointestinal Los deseos del joven muestran las futuras virtudes del hombre - Marco Tulio Cicern OBJETIVOS: GENERAL Permitir, al alumno, la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le posibiliten sealar y explicar los aspectos farmacolgicos de los frmacos que actan a nivel del tracto gastrointestinal. ESPECFICOS Explica correctamente, la fisiologa y la fisiopatologa del tracto gastrointestinal, con nfasis en la motilidad gastrointestinal y la secrecin glandular . Explica, correctamente, la accin de la ACh, Atropina, la Hioscina, la Pargeverina, Carbacol y la Loperamida, sobre el intestino aislado de rata, incluyendo los mecanismos de accin, la farmacocintica y la farmacosologa Explica, correctamente, la accin de la Neostigmina, Atropina, y Metoclopramida, en el sistema gastrointestinal de un roedor, incluyendo los mecanismos de accin, la farmacocintica y la farmacosologa. Realiza las prcticas simuladas e in vivo, analiza, interpreta y explica los resultados obtenidos.

TAREAS PARA EL ALUMNO: Para la realizacin de la presente prctica, el alumno debe revisar, previamente, en la bibliografa consignada, la fisiologa intestinal y la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los frmacos que actan a nivel gastrointestinal. Asimismo, debe conocer el procedimiento a seguir para la realizacin de los experimentos, consignado en la gua de prctica. EXPERIMENTO N1: Evalu aci n d e la mo t i lid ad g ast ro in t est in al in vivo en ro ed o r. Frmacos: Agua destilada, solucin 10 ml. / Neostigmina, solucin 0.1 mg/ml. / Sulfato de Atropina, solucin 0.25 mg/1ml. / Metoclopramida, solucin 10 mg/2ml. Especie: 2 Ratones Software: Ninguno Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio Procedimiento: 24 horas previo al inicio del experimento, se priva de alimentos a los roedores y se les deja con agua ad libitum. Posteriormente se administra la sustancia problema, de la siguiente forma: Ratn 1: Agua destilada, 0.1 ml/10 g P.C. por V.O. Ratn 2: Neostigmina, 0.4 mg/kg, por va IP. Ratn 3: Sulfato de Atropina, 1,5 mg/kg, por va IP. Ratn 4: Metoclopramida, 10mg/kg, por va IP. Esperar 15 minutos y p roceder a administrar por va oral, a todos los ratones, el marcador carbn activado al 5-10% , en dosis de 0.1 ml/10 gr de peso. Esperar 15 minutos y sacrificar a los animales por dislocacin cervical. Seguidamente, realizar diseccin tipo laparotoma y extraer el intestino delgado desde la porcin pilrica, hasta la unin ileocecal. Luego, medir la distancia recorrida del carbn activado que contuvo por lo menos 1cm continuo de carbn. Anotar la s distancias recorridas del carbn activado y comparar los resultados, para el anlisis respectivo. Cada mesa r ealizar 2 r atones, pudiendo ser uno el r atn contr ol y otr o r atn con dr oga. P ara el posterior informe, presentarn los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realiz su prctica. Para el informe, el alumno presentara los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa.

Tabla N1: EXPERIMENTO N1, Evalu aci n d e la mo t ilid ad g ast ro in t est in al in vivo en ro ed o r, mat riz d e reco lecci n d e d at o s Ratn 1 2 3 4 Droga Agua destilada Neostigmina Sulfato de Atropina Metoclopramida Dosis (mg) y (ml) Dosis Carbn Activado (ml) Tamao del intestino delgado (cm) Recorrido del Carbn Activado (cm) % Inhibicin Motilidad Intestina % Estimulacin Motilidad Intestinal

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EXPERIMENTO N2: Evalu aci n d e la mo t ilid ad in t est in al in vit ro en leo n d e rat a. Frmacos: Acetilcolina solucin 1% / Atropina Sulfato. Amp.1 mg/ ml / Pargeverina clorhidrato sol. 5 mg./ ml. Hioscina, sol. 20mg/ml. / Loperamida, 2mg en 10ml. Especie: leon de rata. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Tarea y trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento : Se sacrifica una rata por dislocacin cervical. Seguidamente, realizar diseccin tipo lapar oto ma y ex tr aer un segmento de intestino delgado, de aproximadamente 3 cm. Realizar lavado de la luz intestinal, e instalarlo en el aparato de rganos aislados. Utilizar como lquido nutricio una solucin de Ringer Locke, aireacin continua y temperatura de 37C. Registrar la actividad espontnea y agregar los fr macos y observar la reaccin respecto a contraccin o relajacin del intestino aislado. La siguiente fue la secuencia de administracin de drogas: 0.2 ml de Acetilcolina. Encontrndose el segmento de intestino contrado, se instilo 0.2 ml de Hioscina. Se cambia de segmento intestinal e instilar 0.2 ml. de Acetilcolina, encontrndose el segmento contrado, se instil 0.6 ml de Loperamida. Se cambia el segmento intestinal, e instilar 0.2 ml. de Acetilcolina, encontrndose el segmento contrado, se instil 0.2 ml. de Pargeverina. Cambiar el segmento intestinal, e instilar 0.2 ml. Acetilcolina, encontrndose el segmento contrado, se instil 1 ml de Atropina. Los resultados de las variaciones en las contracciones del segmento de intestino, se catalogan en intensidad de efectos, bajo la siguiente forma: Leve = +. Moderado = ++. Intensa = +++. Muy intensa = ++++. Los resultados se encuentran en la tabla de resultados. Para el informe, el alumno presentar los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, ser simulado en el Software Virtual Pharmacology Lab. Tabla de resultados del experimento n2, Evalu aci n d e la mo t ilid ad in t est in al in vit ro en leo n d e rat a. Frmacos Acetilcolina Hioscina Acetilcolina Loperamida Acetilcolina Pargeverina Acetilcolina, Atropina mg Intensidad de efecto +++ ++ +++ ++ ++++ +++ ++++ ++

EXPERIMENTO N3: Efecto de Acetilcolina en dosis escalonada, en leon aislado de rata. Frmacos: Acetilcolina Especie: leon aislado de rata Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Tarea y trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Un sistema de rganos aislados, permite la evaluacin de los efectos de una sustancia en una porcin especfica de tejido. Esto se logra aislando el rgano de una especie animal; en esta prctica se utiliza una rata, y se obtiene de ella una porcin de le on de aproximadamente 3 cm, que es llevada a la copa del sistema de rganos aislados, en la que existe una sustancia nutricia especfica, solucin de Ringer Locke, con aireacin continua con carbgeno y oxgeno, mantenida a una temperatura constante de 37 C. En estas condiciones, uno de los extremos del leon es sujetado a la base de la copa que lo hospeda, y el otro es conectado a un tra nsductor, que convierte los movimientos de contraccin y relajacin del intestino aislado, en fuerza, que a su vez es conectada a u n computador, que automticamente la convierte en porcentajes. En este sistema simulado en el Software Microlabs, procedemos a someter al leon de rata, a dosis escalonada de Acetilcolina, la secuencia y los resultados podemos observarlos en una tabla. En base a los resultados observados, analizarlos, segn los mecanismos farmacolgicos implicados en este efecto farmacolgico. Para el informe, el alumno presentara los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa.

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Tabla de resultados del experimento N3, Efecto de Acetilcolina en dosis escalonada, en leon asilado de rata. Frmacos Dosis (mol/l) Dosis (mg) Tensin (g) Acetilcolina 1E-9 4 Lavado 3 Acetilcolina 3E-9 2 Lavado 2 Acetilcolina 6E-9 9 Lavado 0 Acetilcolina 12E-9 18 Lavado 4 Acetilcolina 24E-9 31 Lavado 2 Acetilcolina 48E-9 49 Lavado 3 Acetilcolina 96E-9 70 Lavado 1 Acetilcolina 192E-9 83

EXPERIMENTO N4: Evaluacin de la motilidad intestinal y la inflamacin de la pared intestinal. Frmacos: Ninguna Especie: Roedor. Software: The Journal of Visualized Experiments (JoVE). http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/4086/functional -assessment-intestinal- motility-gut-wall-inflammation Buscar directo on line en www.jove.com, Como: Functional Assessment of Intestinal Motility and Gut Wall Inflammation in Rodents: Analyses in a Standardized Model of Intestinal Manipulation. Windows Media Player and Microsoft office Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Revisar el procedimiento del experimento en el siguiente web site: http://hinarigw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/4086/functional-assessment-intestinal- motility-gut-wall-inflammation o buscar el artculo on line en www.jove.com como: Functional Assessment of Intestinal Motility and Gut Wall Inflammation in Rodents: Analyses in a Standardized Model of Intestinal Manipulation. Seguidamente, discutir los resultados presentados en las figura 1,2 y 3. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa.

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DECIMO-PRIMERA PRCTICA: Oxitcicos, tocolticos y teratgenos Languidece la virtud sin adversarios - Lucio Anneo Sneca OBJETIVOS: GENERAL Permitir al alumno, la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le posibiliten explicar e interpretar correctamente la accin de los frmacos que modifican la motilidad uterina, incrementndola o disminuyndola y los efectos teratognicos de las drogas durante la gestacin. ESPECFICOS: Interpreta y explica, correctamente, la fisiologa de la gestante y su influencia en la farmacocintica y la farmacodinamia. Interpreta y explica, correctamente, la motilidad uterina y la accin de los frmacos que incrementan la motilidad uterina (Oxitcicos), considerando su farmacocintica, su farmacodinamia y su farmacosologa. Interpreta y explica, correctamente, la accin de los frmacos inhibidores de la motilidad uterina (Tocolticos), incluyendo la farmacocintica, la farmacodinamia y farmacosologa de los mismos. Interpreta y analiza, correctamente, el efecto teratognico de las drogas. Realiza las prcticas simuladas, analiza, interpreta y explica los resultados obtenidos. TAREAS PARA EL ALUMNO: Previamente a la realizacin de la prctica, el alumno debe revisar, en la bibliografa consignada, la fisiologa de la gestante, con nfasis a la motilidad uterina y la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los frmacos que actan en este nivel y en particular, de los que se utilizaran en la prctica. Asimismo, debe conocer el procedimiento a seguir para la realizacin del experimento. EXPERIMENTO N1: Evaluacin de la motilidad uterina in vitro , en cuerno uterino de rata. Frmacos: Oxitocina 10 UI/ml / Ritodrina 50 mg/5ml/ Ergonovina 200mg/ml / Nifedipina 10mg/ml / Misoprostol 200 ug/ml / Sulfato de Magnesio 10% . Especie: Cuerno uterino de rata Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Tarea y demostracin, mediante simulacin en Software Procedimiento : Sacrificar una rata, extirpar el tero e instalar uno de los cuernos en el vaso del aparato de rganos aislados, de 20 ml de capacidad, conteniendo solucin de Tyrode con aireacin continua a temperatura constante de 37C; registrar las contracciones uterinas mediante una palanca inscriptora en un papel ahumado, esperar durante 15 minutos hasta que se estabilice la preparacin; hacer un registro de con trol y luego instilar 0.10 ml del frmaco en estudio, en el lquido nutricio, despus de observar el efecto deseado, lavar con Tyrode la preparacin, dejar que se estabilice y agregar el frmaco siguiente, El momento de administracin del frmaco ser de acuerdo al estado de contraccin del tero. Las variaciones en las contracciones del segmento uterino, se catalogan en intensidad de efectos, bajo la siguiente forma: Leve = +. Moderado = ++. Intensa = +++. Muy intensa = ++++. La secuencia de drogas empleadas y los resultados se muestran en la tabla correspondiente. Para el informe, se realizarn los clculos correspondientes y se consignaran las partes del informe, segn indicaciones asignadas en l .acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa Este experimento, ser simulado en Software Virtual Pharmacology Lab, en el segmento de metodologa demostrativa Tabla de resultados del experimento N1, Evaluacin de la motilidad uterina in vitro , en cuerno uterino de rata. Frmacos Dosis (ml) Dosis (mg) Efecto Misoprostol 0.30 ++ Lavado Ritodrina 0.20 +++ Lavado Ergonovina 0.40 ++++ Lavado Nifedipina 0.30 ++ Lavado Oxitocina 0.10 ++++ Lavado Sulfato de Magnesio 0.50 ++

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EXPERIMENTO N2: Evaluacin de los efectos teratognicos del etanol en Zebrafish. Frmacos: Etanol QP. Especie: Danio rerio. Software: The Journal of Visualized Experiments (JoVE). http://www.jove.com/video/3704/assessing- teratogenic-changes-in-a-zebrafish- model-of- fetal-alcohol-exposure Windows Media Player and Microsoft office Metodologa: Tarea y denostacin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento : 4.3 horas post fertilizacin, embriones de Zebrafish fueron expuestos a diferentes concentraciones de etanol qumicamente puro, en rangos de 0.2 % a 2.5 % , y en pulsos de 24 horas. Este periodo de exposicin a etanol, es el equivalente a la fase de implantacin del embrin, y a la gastrulacin. Posteriormente, los embriones son colectados, y mediante tcnicas moleculares como hibridacin in situ, tincin de anticuerpos, tincin de cartlago, qPCR, entre otras, se evalan los efectos teratognicos del Etanol. Revisar el siguiente web site: http://www.jove.com/pdf/3704/jove-protocol-3704-assessing- teratogenic-changes-in-a-zebrafish- model-of- fetal-alcoholexposure Seguidamente, discutir los resultados presentados en la figura 2, 3 y 4 Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes De Verificacin De Las Prcticas De Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa. EXPERIMENTO N3: Determinacin del transporte de molculas a travs de la placenta. Frmacos: Nanopartculas Especie: Placenta humana. Software: The Journal of Visualized Experiments (JoVE). http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/50401/determination-transport-rate-xenobioticsnanomaterials-across Buscar directo on line en www.jove.com, Como: Determination of the Transport Rate of Xenobiotics and Nanomaterials Across the Placenta using the ex vivo Human Placental Perfusion Model Windows Media Player and Microsoft office Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Revisar el procedimiento del experimento en el siguiente web site: http://hinarigw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/50401 /deter mination-transpor t-rate-xenobiotics-nanomaterials-across o buscar el artculo on line en www.jove.com como: Determination of the Transport Rate of Xenobiotics and Nanomaterials Across the Placenta using the ex vivo Human Placental Perfusion Model. Seguidamente, discutir los resultados presentados en las figura 1,2, 3, 4, 5 y 6. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa. EXPERIMENTO N4: Exposicin pre-natal del Etanol y el efecto de apoptosis cerebral. Frmacos: Etanol Especie: Ratn C57BL/6. Software: The Journal of Visualized Experiments (JoVE). http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/50092/experimental- methods-for- testing-effectsneurotrophic-peptide-adnf-9 Buscar directo on line en www.jove.com, Como: Experimental Methods for Testing the Effects of Neurotrophic Peptide, ADNF-9, Against Alcohol-induced Apoptosis during Pregnancy in C57BL/6 Mice. Windows Media Player and Microsoft office Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Revisar el procedimiento del experimento en el siguiente web site: http://hinarigw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/50092/experimental- methods-for-testing-effects-neurotrophic-peptide-adnf-9 o buscar el artculo on line en www.jove.com como: Experimental Methods for Testing the Effects of Neurotrophic Peptide, ADNF-9, Against Alcohol-induced Apoptosis during Pregnancy in C57BL/6 Mice. Seguidamente, discutir los resultados presentados en las figura 1,2 y 3. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa.

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DECIMO-SEGUNDA PRCTICA: Antiarrtmicos e intoxicacin digitlica La ventaja de ser inteligente es que as resulta ms fcil pasar por tonto. Lo contrario es mucho ms difcil - Kart Tucholsky OBJETIVOS GENERAL: Permitirle al alumno la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le posibiliten explicar correctamente el funcionamiento cardaco in situ, los efectos y los mecanismos de accin de los frmacos en las arritmias cardiacas, en la insuficiencia cardiaca y su toxicidad. ESPECFICOS - Explica, correctamente, las funciones cardacas y describe un ECG normal, identificando sus componentes. - Explica, correctamente, la fisiopatologa de las arritmias cardiacas y de la insuficiencia cardiaca. - Explica, correctamente, los efectos de los frmacos antiarrtmicos, con nfasis en los digitlicos y su efecto sobre el msculo cardaco normal e insuficiente, y su accin sobre el electrocardiograma, identificando patrones de toxicidad. - Explica, correctamente, la farmacocintica, farmacodinamia y farmacosologa de los frmacos antiarrtmicos, con nfasis en los medicamentos cardiotnicos. - Explica, correctamente, las interacciones de los frmacos antiarrtmicos, en especial de los cardiotnicos, con otras familias de medicamentos y con las alteraciones hidroelectrolticas en sangre. - Explica, correctamente, la accin de la Lidocana y otras drogas, en el tratamiento de las manifestaciones de toxicidad digitlica. - Realiza la prctica simulada, analiza, interpreta y explica los resultados obtenidos. TAREAS PARA EL ALUMNO: Previo a la realizacin de la prctica, el alumno debe revisar, en la bibliografa consignada, la fisiologa cardaca normal; la fisiopatologa de las arritmias y la insuficiencia cardiaca, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los medicamentos antiarrtmicos y cardiotnicos y la metodologa a seguir en la realizacin de la prctica, consignada en su gua respectiva. EXPERIMENTO N1: Efecto de los antiarrtmicos en la funcin cardiovascular. Frmacos: Digoxina, Milrinona, Atenolol, Verapamilo, Nitroglicerina, Calcio Especies: Humano, Rata y Gato. Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam. Software, The Virtual Cat V2.6.1, Dr John Dempster, University of Strathclyde. Software, The Rat Cardiovascular System V3.3.1, Dr John Dempster, University of Strathclyde. Software, Simulation of the Cardiovascular System V. Beta 4.2, Dr. Armando Pacher y Dr. Roberto Lombardo, Entre Ros National University. Metodologa: Demostracin en Software. Procedimiento: Se emplearan 4 Software que simulan la funcionalidad cardiovascular en especies animales y en humanos, como tambin la respuesta de los frmacos antiarrtmicos, en diferentes patrones cardiovasculares, tales como: Presin arterial, frecuencia cardiaca, presin en la aurcula, presin en el ventrculo, presin venosa central, fuerza de contraccin, contractibilidad del ventrculo izquierdo, contractibilidad del ventrculo derecho, rigidez o tensin del ventrculo izquierdo, relajacin del ventrculo izquierdo, presin pericrdica, resistencia perifrica, apertura y cierre de las vlvulas aortica y mitral. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa. Tabla N1: EXPERIMENTO N1, Efecto de los antiarrtmicos en la funcin cardiovascular. FC HF ABP LVP VBP LVC RVC LVS PP PR

Drogas Digoxina Milrinona Atenolol Verapamilo Nitroglicerina Calcio

PA

AV

MV

PA= Presin arterial. FC= Frecuencia cardiaca. HF= Fuerza del corazn. ABP= Presin arterial atrial. LVP= Presin ventricular izquierda. VBP= Presin venosa central. LCV= Contractibilidad del ventrculo izquierdo. RVC= Contractibilidad del ventrculo derecho. LVS= Tensin o rigidez del ventrculo izquierdo. PP= Presin pericrdica. PR= Resistencia perifrica. AV= Vlvula aortica. MV= Vlvula mitral. 41

EXPERIMENTO N2: Intoxicacin digitlica. Frmacos: Deslanosido C, sol. 0.4 mg/2ml / Cl K, sol. 10% / Lidocana, sol. 2% / Pentobarbital, sol. 2% . Especie: Conejo de 6 kg. Software: Software Virtual Pharmacology Lab, Ing. Jos Mujica, Ing. Yelinna Pulliti, Dept. Of Medicine and Dept. Of Electronic Engineering, San Martin de Porres University. Metodologa: Tarea y demostracin en Software. Procedimiento: Se anestesi al conejo, con Pentobarbital, por va intraperitoneal, dosis de 30 mg/kg. Acto seguido, se realiz la canalizacin de arteria cartida y se conect a una barra de mercurio, para tomar registros basales de presin arterial y se conect a un cardigrafo donde se registr la frecuencia cardiaca. Seguidamente, se administr va intraperitoneal, 2 ml. de Cedilanid, se reiter esta dosis hasta que se presenten las manifestaciones cardiovasculares, los intervalos fueron entre 15 y 20 minutos. Asimismo, se administr va intraperitoneal, 2 ml de Cl K al 10 % . En base a la presencia de las manifestaciones cardiovasculares, se administr va intraperitoneal, Lidocana, dosis de 1.5 mg/kg. Los resultados del experimento se muestran en la tabla de resultados. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa. Tabla de resultados del experimento N2, Intoxicacin digitlica. Droga Presin Arterial Frecuencia Cardiaca Basal 11 130 Deslanosido C, primera administracin 13 92 Deslanosido C, segunda administracin 13 182 Lidocana 11 142 Cl K 10 160 EXPERIMENTO N3: Efecto de la Adrenalina y la Noradrenalina en dosis escalonada en rata. Frmacos: Adrenalina y Noradrenalina Especie: Rata de 250 g Software: Software, The Rat Cardiovascular System V3.3.1, Dr John Dempster, University of Strathclyde Metodologa: Tarea y demostracin en Software. Procedimiento: Se anestesi una rata albina, con Pentobarbital, por va intraperitoneal, dosis de 30 mg/kg. Acto seguido, se realiz la canalizacin de la vena cava superior, por donde se introdujeron sensores que permitieron medir constantes cardiacas. Adicionalmente, se realiz la desmedulacin de la rata (seccin de la medula espinal a nivel cervical). Seguidamente, se administr va intraperitoneal, dosis escalonada de Adrenalina y Noradrenalina, cuya secuencia y dosis se muestran en la tabla de resultados.. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa. Tabla de resultados del experimento N3, Efecto de la Adrenalina y la Noradrenalina en dosis escalonada en rata. Droga Basal Adrenalina 5 ug/kg Adrenalina 10 ug/kg Adrenalina 20 ug/kg Adrenalina 50 ug/kg Adrenalina 100 ug/kg Noradrenalina 5 ug/kg Noradrenalina 10 ug/kg Noradrenalina 20 ug/kg Noradrenalina 50 ug/kg Noradrenalina 50 ug/kg Dosis (mg) FC (lat/min) 353 477 559 577 676 688 389 412 477 553 600 HF (g) 7.2 11.3 12 13.9 17.1 16.7 8.1 8.6 10.6 13.2 14.2 ABP (mmHg) 84 100 113 115 127 117 95 142 162 176 188 LVP (mmHg) 85 101 111 115 129 108 98 139 156 178 178 VBP (mmHg) 9.1 10.9 12.3 14.1 15.5 16.5 9.7 10 9.9 10.9 12

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DECIMO-TERCERA PRCTICA: Frmacos que actan en el aparato respiratorio El arte de envejecer es el arte de conservar alguna esperanza - Andr Maurois OBJETIVOS GENERAL : Permitir al alumno, la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le posibiliten explicar, correctamente, las acciones y efectos farmacolgicos, de frmacos que actan en el Sistema Respiratorio. EXPECFICOS: - Explica correctamente la fisiologa y la fisiopatologa del aparato respiratorio, con nfasis a la actividad muscular y secretora bronquial. - Explica correctamente, la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los frmacos que actan a nivel del apara to respiratoria, con nfasis a las drogas que se emplean en la prctica de laboratorio (Histamina, Acetilcolina, Clorferamina, Mepiramina, Adrenalina, Fenoterol, Dexamentasona y Bromuro de Ipratropio). - Realiza la prctica in situ y simulada, analiza, interpreta y explica los resultados obtenidos. TAREAS PARA EL ALUMNO Para realizar la presente prctica, el alumno revisar en su libro de texto, los mecanismos de inflamacin, hipersecrecin y broncoespasmo de las vas areas del aparato respiratorio; como tambin las familias de frmacos a emplearse en la prctica, considerando sus asp ectos de farmacocintica, farmacodinamia y farmacosologa. Asimismo, debe conocer el procedimiento a seguir en el laboratorio, para realizar correctamente el experimento, revisando su gua de prctica. Experimento N 1: Broncoespasmo inducido por Histamin a en cobayo. Frmacos: Histamina Clorhidrato, sol. 1 % . / Clorferamina maleato, sol. 10 mg/ml / Adrenalina, sol.1mg/ml. Fenoterol, sol. 5mg/ml. / Dexamentasona, sol. 4 mg/2 ml. / Bromuro de Ipratropio, sol. 250 ug/ml. Especie: Cobayos Software: Ninguno Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio Procedimiento: Se usarn 2 cobayos por mesa de prctica. Se iniciara tomando datos basales en todos los cobayos, registrando por observacin directa la frecuencia respiratoria y ruidos patolgicos del aparato respiratorio (sibilantes y/o roncantes). Seguidamente, se admin istrara a un cobayo, preventivamente, las siguientes drogas: Cobayo cabeza: Clorferamina maleato, 20 mg/kg va IP (dosis de rescate 0.3 ml por va SC). Cobayo lomo: Dexamentasona, 5 mg/kg va IP (dosis de rescate de Clorferamina 0.3 ml por va SC). Cobayo patas anteriores: Fenoterol, 2.5 mg/kg va IP (dosis de rescate de Clorferamina 0.3 ml por va SC). Cobayo patas posteriores: Bromuro de Ipratropio, 10 ug/kg va IP (dosis de rescate de Clorferamina 0.3 ml por va SC). Cobayo orejas: Dosis de rescate de Adrenalina 0.3 ml va SC. Cobayo blanco: No recibe droga. Luego de 20 minutos, introducir a los Cobayos, dentro de una campana de vidrio y proceder a nebulizar con 2 ml de Histamina al 1% . Observar los cambios respecto a frecuencia respiratoria y ruidos patolgicos y anotar. Al detectar un marcado deterioro de la funcin respiratoria, en base al incremento de la FR, ruidos patolgicos entre otros, extraerlos de la campana de vidrio y de inmediato aplicar Clorferamina maleato y/o Adrenalina en dosis de rescate, como est indicado previamente. Otra maniobra de rescate que puede realizar en los cobayos, es la maniobra de nebulizacin con Fenoterol en dosis de 2.5 mg/kg. Cada mesa utilizar 2 cobayos, pudiendo ser uno el cobayo control y otro cobayo con droga. Para el posterior informe, presentaran los resultados de las 8 12 mesas de trabajo, del da que realizo su prctica. Para el informe, el alumno presentara los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa.

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Experimento N 1: Broncoespasmo inducido por Histamina en cobayo, Matriz de recoleccin de datos. Dosis Basales Cambio Ruidos Ruidos Respiratorios Respiratorios Observaciones Cobayo n mg ml FR FR Patolgicos Patolgicos SI NO SI NO 1 2 3 4 5 6 EXPERIMENTO N2: Sinergismo Histamina Acetilcolina Frmacos: Acetilcolina, Histamina Especie: leon aislado de rata Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Tarea y trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software Procedimiento: Un sistema de rganos aislados, permite la evaluacin de los efectos de una sustancia en una porcin especfica de tejido. Esto se logra aislando el rgano de una especie animal; en esta prctica se utiliza una rata, y se obtiene de ella una porcin de le on de aproximadamente 3 cm, que es llevada a la copa del sistema de rganos aislados, en la que existe una sustancia nutricia especfica, solucin de Ringer Locke, con aireacin continua con carbgeno y oxgeno, mantenida a una temperatura constante de 37 C. En estas condiciones, uno de los extremos del leon es sujetado a la base de la copa que lo hospeda y el otro extremo es sujetado a un transductor, que convierte los movimientos de contraccin y relajacin del intestino aislado, en gramas de fuerza, este sistema es conectado a un computador que automticamente la convierte en porcentajes. En este sistema simulado en el Software Microlabs, procedemos a someter al leon de rata a los frmacos a emplear, la secuencia y los resultados podemos observarlos en el grfico 1. En base a los resultados observados, analizarlos e indicar el tipo de sinergismo que sucedi entre Histamina y Acetilcolina, como tambin, los mecanismos implicados en este efecto farmacolgico. Para el informe, el alumno presentara los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. EXPERIMENTO N 2: Grfico n1, Sinergismo Histamina-Acetilcolina, resultados.

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EXPERIMENTO N3: Antagonismo Histamina Mepiramina Frmacos: Histamina / Mepiramina Especie: leon aislado de rata Software: Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of Amsterdam Metodologa: Tarea y trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Un sistema de rganos aislados, permite la evaluacin de los efectos de una sustancia en una porcin especfica de tejido. Esto se logra aislando el rgano de una especie animal; en esta prctica se utiliza una rata, y se obtiene de ella una porcin de leon de aproximadamente 3 cm, que es llevada a la copa del sistema de rganos aislados, en la que existe una sustancia nutricia especfica, solucin de Ringer Locke, con aireacin continua con carbgeno y oxgeno, mantenida a una temperatura constante de 37 C. En estas condiciones, uno de los extremos del leon es sujetado a la base de la copa que lo hospeda, y el otro extremo es fijado a un transductor, que convierte los movimientos de contraccin y relajacin del intestino aislado, en fuerza, que a su vez es conectada a un computador, que automticamente la convierte en porcentajes. En este sistema simulado en el Software Microlabs, procedemos a someter al leon de rata, a los frmacos a emplear, la secuencia y los resultados podemos observarlos en el grfico 2. En base a los resultados observados, analizarlos, e indicar el tipo de antagonismo que sucedi entre Histamina y Mepiramina, como tambin, los mecanismos implicados en este efecto farmacolgico. Para el informe, el alumno presentara los clculos de dosis correspondientes a los resultados presentados, como tambin, consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa

EXPERIMENTO N 3: Antagonismo Histamina - Mepiramina, grfico 2.

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DECIMO-CUARTA PRCTICA: Frmacos que actan sobre el sistema de la coagulacin sangunea Lo peor de la ignorancia es que a medida que se prolonga adquiere confianza - Annimo OBJETIVOS GENERAL: Permitir, al alumno, la adquisicin de conocimientos, habilidades y destrezas que le posibiliten explicar satisfactoriamente el fenmeno de la coagulacin sangunea y la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de los diferentes frmacos que la modifican. ESPECFICOS: - Explica, correctamente, las diferentes etapas de la coagulacin sangunea y los factores que en ella intervienen, in vivo e in vitro - Explica, correctamente, la accin de la Heparina, mecanismos de accin, indicaciones, contraindicaciones y manifestaciones adversas - Explica, correctamente, la accin del Citrato de sodio, Oxalato de sodio y Cloruro de calcio; mecanismo de accin, indicaciones y manifestaciones adversas. TAREAS PARA EL ALUMNO: Previo, a la realizacin de la prctica, el alumno debe revisar, en sus libros de texto de Fisiologa y Farmacologa, el fen meno de la coagulacin sangunea y la farmacocintica, la farmacodinamia y la farmacosologa de la Heparina, las Cumarinas, el Citrato de sodio, el Oxalato de sodio y el Cloruro de calcio. Asimismo, debe conocer el procedimiento a seguir en los experimentos, consignados en la gua de prctica. EXPERIMENTO N1: Evaluacin de frmacos anticoagulantes in vitro . Frmacos: Heparina / Warfarina, sol. 1% / Citrato de Sodio, sol. 2% / Oxalato de Sodio, sol. 2% / Cloruro de Calcio, sol. 10% Especie: Hombre, Sangre Metodologa: Trabajo en mesa de laboratorio. Procedimiento: Colocar 5 tubos de prueba, en una gradilla; conteniendo, respectivamente, las siguientes soluciones. Usar guantes por medida de seguridad: Tubo N1: 0.05 ml de Heparina Tubo N2: 0.10 ml de Warfarina 5mg. Tubo N3: 0.10 ml de Citrato de sodio al 2% Tubo N4: Citrato de Sodio al 2% + 5 gotas de cloruro de calcio al 10% Tubo N5: 0.10 ml de Oxalato de Sodio en sol al 2% Tubo N6: control, sin solucin anticoagulante. Extraer sangre de la vena de un alumno voluntario, usando jeringa estril. Colocar un ml de sangre en cada tubo. Observar el fenmeno de coagulacin, hasta que se forme el cogulo completo. Anotar los tiempos en que se produce la coagulacin.

Tabla N1: EXPERIMENTO N1: Evaluacin de frmacos anticoagulantes in vitro , matriz de recoleccin de datos. Tubo Nro. 1 2 3 4 5 6 Frmaco Heparina Warfarina Citrato de Sodio Citrato de Sodio + Cloruro de Calcio Oxalato de Sodio Control sin Anticoagulante Coagulacin Tiempo

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EXPERIMENTO N2: Medicin del Factor V en pacientes con coagulacin intravascular disemin ada. Frmacos: Ninguno Especie: Humano Software: The Journal of Visualized Experiments (JoVE). http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/3822/measurement- factor-v-activity-human-plasmausing-microplate Buscar directo on line en www.jove.com, Como: Measurement of Factor V Activity in Human Plasma Using a Microplate Coagulation Assay. Windows Media Player and Microsoft office Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Revisar el procedimiento del experimento en el siguiente web site: http://hinarigw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/3822/measurement- factor-v-activity-human-plasma-using- microplate o buscar el artculo on line en www.jove.com como: Measurement of Factor V Activity in Human Plasma Using a Microplate Coagulation Assay. Seguidamente, discutir los resultados presentados en las figura 1 y 2 y la tabla 1. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes De Verificacin De Las Prcticas De Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa. EXPERIMENTO N3: Efecto anticoagulante de la Enoxaparina. Frmacos: Enoxaparina Especie: Humano Software: The Journal of Visualized Experiments (JoVE). http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/3852/rapid-point-care-assay-enoxaparin-anticoagulantefficacy-whole Buscar directo on line en www.jove.com, Como: Rapid Point-of-Care Assay of Enoxaparin Anticoagulant Efficacy in Whole Blood. Windows Media Player and Microsoft office Metodologa: Tarea y demostracin en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software. Procedimiento: Revisar el procedimiento del experimento en el siguiente web site: http://hinarigw.who.int/whalecomwww.jove.com/whalecom0/video/3852/rapid-point-care-assay-enoxaparin-anticoagulant-efficacy-whole o buscar el artculo on line en www.jove.com como: Rapid Point-of-Care Assay of Enoxaparin Anticoagulant Efficacy in Whole Blood. Seguidamente, discutir los resultados presentados en las figura 1 y 2. Para el informe, se debe consignar las partes del informe, segn indicaciones asignadas en el acpite de Fuentes de Verificacin de las Prcticas de Farmacologa. Este experimento, podr ser simulado en el Software, en el segmento de metodologa demostrativa.

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