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Obtension de Un Cultivo Puro

Obtension de Un Cultivo Puro

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 INTRODUCCION 
 Las bacterias u otros microorganismos que se desarrollan en medios de laboratorio, sellaman cultivos. Las diferentes especies de bacterias que se desarrollan en la misma clasede medios de cultivo pueden tener aspectos muy diferentes, y por lo tanto el conocimientode la apariencia, o de las características del cultivo de las especies es útil para reconocer ciertos tipos de bacterias; asimismo, nos puede servir como un medio que haga posibleidentificar las especies. Las bacterias pueden ser obtenidas en cultivo puro paradeterminar las características del cultivo o cualquier otra propiedad de la especie.
 
Cultivos puros.
El cultivo puro presenta las condiciones artificiales para el desarrollo de lasbacterias y otros microorganismos y las condiciones impuestas a losmicroorganismos mediante el manejo del laboratorio.
Métodos para aislar cultivos puros.Técnica de siembra por estrías en placa y técnica de siembra por difusión enplaca
.Con un asa bacteriológica, se pasa una porción de la muestra ala superficie de unmedio de cultivo hecho a base de agar y se siembra en el medio ya sea por estríaso por difusión.Para sembrar por difusión en placa, por lo común se usa una varilla de cristalestéril para esparcir la muestra. Esta operación hace posible adelgazar la muestrade tal manera que en la superficie del agar quedan las bacterias separadas unasde otras. Cabe suponer que cada colonia aislada es descendencia de una solacélula y por lo tanto un cultivo puro. En las especies donde las colonias seagrupan de manera característica, las colonias se desarrollan a partir de unmismo tipo de células e igualmente provienen de un cultivo puro. Una porción deuna colonia que se pase a un medio de cultivo en tubo viene a ser un cultivo puro.Después de una incubación adecuada, el desarrollo se observa al microscopio omediante cultivo para verificar si es puro.La cnica de siembra en placa con estrías y por difusión se puede haceconvincentemente y con equipo mínimo; estos son procedimientos de rutina quese efectúan para aislar bacteria en cultivos puros. Aunque sus limitaciones sonque solo pequeñas cantidades de la muestra pueden ser esparcidas en lasuperficie del medio de cultivo.
Técnica de la placa invertida.
Su principio es la dilución de la muestra en tubos de agar fundido y enfriado. Senecesita hacer diluciones en mas de un tubo para obtener colonias bien aisladas,si es que no se conoce la magnitud de la población bacteriana de la muestra antesde manejarla. El medio se mantiene al estado liquido a una temperatura de 45°Cpara permitir que el inoculo se distribuya adecuadamente en el medio. Una vezsembrado el medio se pone en cajas de petri, se deja solidificar y después seincuba. Como algunos microorganismos quedan atrapados en el agar, seobservaran colonias tanto en la superficie como en el medio cuando este solidifica.Esta técnica se hace de forma cualitativa o cuantitativa. Cuando se hace de formacuantitativa podremos determinar el numero de bacterias(de un tipo enparticular)en la muestra así como aislarlas en cultivo puro.Las técnicas de siembras por estrías y la de placa invertida para aislar cierta clasede bacterias, pueden mejorarse con medios de cultivos selectivos o diferenciales.
 
También es posible tratar el medio para eliminar otro tipo de bacterias diferentesde las que se desean aislar, antes de sembrar en las placas.
Técnica de enriquecimiento de cultivo.
Para mejorar las posibilidades de aislamiento de algunos tipos fisiológicos pocofrecuentes de bacterias, los procedimientos de la siembra en placa deberán estar precedidos del desarrollo de las bacterias en un cultivo de enriquecimiento. Elprincipio de esto, es procurar un ambiente de cultivo diseñado que puedafavorecer el desarrollo de cierto tipo concreto de bacterias que necesitaremos peroque no sea adecuada para los demás. Los medios de enriquecimiento se usangeneralmente cuando un tipo de bacteria que queremos aislar se encuentra enmuy pequeñas cantidades y se desarrolla con mayor lentitud que muchas de lasotras especies presentes en el inoculo.
Mantenimiento y preservación de cultivos puros.
La mayoría de los laboratorios de bacteriología cuentan con una gran variedad deeste tipo de cultivos, que frecuentemente se denominan colección de cultivos tipo.Es muy importante tener identificadas las bacterias del cultivo puros listas parausarse. La mayoría de las compías industriales de productos biológicos,mantienen colecciones de cultivos bacterianos en cantidades importantes. Estoscultivos se emplean para probar la efectividad de agentes químicosmíoterapéuticos y potencialmente efectivos, así como cultivos de referencia paraestudios taxonómicos., como agentes de ensayo para antibióticos y vitaminas, ycomo cultivos de referencia que citan en las patentes de las compañías.
Métodos de preservación.
A fin de desarrollar condiciones propias para la preservación de bacterias se harealizado un considerable número de investigaciones. Es esencial que el métodode preservación y mantenimiento conserve todas las características de lasespecies como fueron en el momento de la preservación. Algunas técnicas en usoson las siguientes:
Resiembra periódica a medios frescos.-
los cultivos de bacterias se puedenmantener en tubos de medio en los que han sido cultivados mediante pasosperiódicos a medios frescos. Cuando se va a utilizar este procedimiento paramantener una colección de cultivos se deben determinar 3 cosas antes demanejarlo: el medio de cultivo apropiado para usarlo con cada cultivo, latemperatura y el tiempo que se necesita para hacer las resiembras.
Preservación de cultivos con una capa de aceite mineral.-
muchas bacteriasse preservan bien cubriendo el agar en el que van creciendo con aceite mineralestéril. Para cultivos de agar inclinado el aceite deberá cubrir mas o menos 1.5 cmpico del agar inclinado. El mantenimiento de la vialidad bajo este tratamiento varia

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