La humanidad tiene tres grandes enemigos: la fiebre, la hambruna y la guerra: de ellos, el mayor y ms terrible es la fiebre Sir William Osler

1896.

MICROBIOLOGA

GENERALIDADES
Los primeros estudios fueron realizados por Pasteur y Koch. Ellos nos condujeron a la primera era de oro de la Microbiologa (1875-1910). Se identificaron enfermedades bacterianas y los patgenos causantes. Semmelweis y Lister demostraron como se diseminaban estos padecimientos.

En la primera mitad del siglo XX, los cientficos estudiaron la estructura, fisiologa y gentica de los microbios. A finales de siglo, la biologa molecular, gentica, genmica y protemica ampliaron esta comprensin a nivel molecular.

LOS AGENTES INFECCIOSOS

La microbiologa es una ciencia que trata de los seres vivos muy pequeos. Esta surgi gracias al invento del microscopio (griego micrs: pequeo skopeo: mirar). Estudio de las formas de vida microscpicas.

A los microorganismos se debe en buena medida la descomposicin, reciclado natural de la materia orgnica del entorno. Algunos sintetizan compuestos nitrogenados que posibilitan la nutricin de seres vivos que carecen de esa capacidad. Otros producen oxgeno mediante la fotosntesis y lo liberan a la atmsfera.

Los principales tipos de microorganismos, en trminos de tamao y complejidad ascendente son:

HISTORIA

La Microbiologa, considerada como una ciencia especializada, no aparece hasta finales del siglo XIX. Collard (1976), clasifico cuatro etapas o periodos en el desarrollo de la Microbiologa:

1er periodo, eminentemente especulativo, (antigedad hasta llegar a los primeros microscopistas). 2do. periodo, de lenta acumulacin de observaciones (1675 hasta la mitad del siglo XIX), 3er. periodo, de cultivo de microorganismos, que llega hasta finales del siglo XIX, 4to. periodo (desde principios del siglo XX hasta nuestros das).

1ER PERIODO
El descubrimiento de los microorganismos se realiz a finales del siglo XVII. Pero sus actividades ya se conocan en diferentes mbitos.

fermentaciones

(bebidas alcohlicas, pan y derivados lcteos). Enfermedades infecciosas

En la antigedad en Grecia y Roma hablaban de grmenes invisibles que transmitan enfermedades contagiosas. Lucrecio (96-55 a.C.), De rerum natura semillas de enfermedad. En el Renacimiento europeo, Girolamo Frascatorius, en su libro De contagione et contagionis (1546) grmenes vivos. Introduccin en Europa de la sfilis, una enfermedad en la que estaba clara la necesidad de contacto para su contagio.

2DO PERIODO
En el siglo XIV, se inventaron las primeras lentes para corregir la visin. En el siglo XVI Se dice que Galileo hizo algunas observaciones microscpicas invirtiendo su telescopio a partir de lentes montadas en un tubo. 1621: Constantijn Huygens, relato que el ingls Cornelis Drebbel tena un instrumento magnificador, que recibi el nombre de microscopium en 1625.

ANTONIE VAN LEEUWENHOEK (1632-1723)

El descubrimiento de los microorganismos fue obra de un comerciante holands de tejidos. Quien en su pasin por pulir y montar lentes casi esfricas sobre placas de oro, plata o cobre. Fabric unos cuatrocientos microscopios simples, con los que lleg a obtener aumentos de casi 300 dimetros. En 1675 descubri que en una gota de agua de estanque pululaba una asombrosa variedad de pequeas criaturas a las que denomin animlculos.

En 1683 descubre las bacterias, por lo que se considera el padre de la Microbiologa. Sus magnficas dotes de observador le llevaron asimismo a describir protozoos. La estructura estriada del msculo. La circulacin capilar. Los espermatozoides y Los glbulos rojos (fundador de la Histologa animal). Leeuwenhoek se percat de la abundancia y ubicuidad de sus animlculos, observndolos en vinagre, placa dental, etc.

ROBERT HOOKE (1635-1703)

Usando microscopios compuestos, describi los hongos filamentosos (1667). Descubri la estructura celular de las plantas (Micrographia, 1665), acuando el trmino clula. Hasta que hacia 1830 se desarrollaron las lentes acromticas.

3ER PERIODO

Aristteles por un lado, y escritores clsicos como Galeno, Plinio y Lucrecio, en la literatura mdica en la Edad Media y Renacimiento, dijeron que algunos seres vivos podan originarse a partir de materia inanimada, o bien a partir del aire o de materiales en putrefaccin. La observacin superficial indicaba que surgan gusanos del fango, moscas de la carne podrida, organismos de los lugares hmedos, etc. As, la idea de que la vida se estaba originando continuamente a partir de esos restos de materia inorgnica se estableci.

FRANCESCO REDI (1621-1697)

Esta doctrina de la generatio spontanea o abiognesis, fue puesta en entredicho, ya que haba acuado la expresin Omne vivum ex ovo (1668), tras comprobar que los insectos y nematodos procedan de huevos puestos por animales adultos de su misma especie. Demostr que si un trozo de carne era cubierto con gasa de forma que las moscas no podan depositar all sus huevos, no aparecan gusanos,

Los descubrimientos de Redi tuvieron el efecto de desacreditar la teora de la generacin espontnea para los animales y plantas, pero la reavivaron respecto de los recin descubiertos animlculos, de modo que aunque se acept la continuidad de la vida en cuanto a sus formas superiores, no todos estaban dispuestos a admitir el ms amplio Omne vivum ex vivo aplicado a los microorganismos.

LAZZARO SPALLANZANI (1729-1799)

Demostr que los infusorios no aparecan en muestras de maceraciones sometidas a ebullicin en frascos hermticamente cerrados, pero volvan a aparecer si se practicaban agujeros en el recipiente. Los preformacionistas no se daban por vencidos; Needham, que el calor haba destruido la fuerza vegetativa de las infusiones y haba cambiado la cualidad del aire dentro de los frascos.

LOUIS PASTEUR (1822-1895)

En 1860 (Expriences rlatives aux gnrations dites spontanes) calent infusiones en matraces de vidrio a los que estiraba lateralmente el cuello, hacindolo largo, estrecho y sinuoso, y dejndolo sin cerrar, de modo que el contenido estuviera en contacto con el aire; Tras esta operacin demostr que el lquido no desarrollaba microorganismos, con lo que elimin la posibilidad de que un aire alterado fuera la causa de la no aparicin de grmenes.

Antes bien, comprob que los grmenes del aire quedaban retenidos a su paso por el largo cuello sinuoso, en las paredes del tubo, y no alcanzaban el interior del recipiente donde se encontraba la infusin, quedando sta estril. Slo si se rompa el cuello lateral o si se inclinaba el frasco de modo que pasara parte de lquido a la porcin de cuello, los grmenes podan contaminar la infusin y originar un rpido crecimiento

En 1861 Pasteur publica otro informe en el que explica cmo se pueden capturar los cuerpos organizados del aire con ayuda de un tubo provisto de un tapn de algodn como filtro. De esta forma quedaba definitivamente aclarado el origen de los microorganismos, y se abra la Edad de Oro del estudio cientfico de las formas de vida no observables a simple vista.

JOHN TYNDALL (1820-1893)

Aplic su sistema de esterilizacin por calentamiento discontinuo (hoy conocida precisamente como tindalizacin), que evidenci la existencia de formas microbianas de reposo muy resistentes al calor, lo cual fue confirmado poco ms tarde por Ferdinand Cohn al descubrir las esporas bacterianas.

DEBATE SOBRE LOS FERMENTOS

Cagniard-Latour en 1836, y Schwann y Ktzing en 1837 haban sugerido que las levaduras eran las causantes de la fermentacin alcohlica por la que el azcar pasa a alcohol etlico y dixido de carbono. Grandes qumicos de la poca (Berzelius, Wohler y Liebig). Liebig, hacia 1840, se supona que los procesos de fermentacin y putrefaccin se deban a fenmenos qumicos de descomposicin y muerte encuadrables en el marco de la teora mineral de la fisiologa vegetal. Su convencimiento de que toda actividad vital se poda explicar en trminos de qumica y fsica retras por algn tiempo la adscripcin de estos fenmenos a clulas vivas.

Fue Pasteur quien en 1857 demostr que los agentes de la fermentacin lctica eran microorganismos. Trabajando sobre un problema que haba surgido entre los destiladores de Lille cuando en sus cubas la fermentacin alcohlica se vio sustituida por una indeseable fermentacin lctica. Estos estudios duraron hasta 1876, en los que Pasteur identific distintos microorganismos responsables de diferentes clases de procesos fermentativos.

As, en 1860 adscribe inequvocamente la fermentacin alcohlica a ciertos tipos de levaduras, y en 1866, en sus tudes sur le vin resume sus hallazgos al respecto, inaugurando la Microbiologa Aplicada. A finales del siglo XIX eminentes bilogos como Hansen, en Copenhague, y Beijerink, en Delft, desarrollaban su actividad en industrias y destileras.

Trabajando sobre los agentes de la fermentacin butrica, Pasteur descubri la presencia de microorganismos que se desarrollaban en ausencia de oxgeno, lo cual desmenta la creencia de que todas las formas de vida necesitan aire para crecer. Acu los trminos aerobiosis y anaerobiosis para denominar, respectivamente, a la vida en presencia y en ausencia de oxgeno.

AVANCES TCNICOS

La doctrina del pleomorfismo, mantena que los microorganismos adoptaban formas y funciones cambiantes dependiendo de las condiciones ambientales. A estas ideas se oponan frontalmente investigadores como Koch, Pasteur y Cohn, que estaban convencidos de la especificidad y constancia morfolgica y fisiolgica de cada tipo de microorganismo (monomorfismo). El pleomorfismo haba surgido como una explicacin a la gran variedad de formas y actividades que aparecan en un simple frasco de infusin,

Pero ya Pasteur, en sus estudios sobre la fermentacin, se haba percatado de que los cultivos que aparecan podan considerarse como una sucesin de distintas poblaciones de microorganismos predominantes. La solucin definitiva a esta cuestin dependa, de nuevo, de un desarrollo tcnico: los mtodos de cultivo puro.

BREFELD (MICOLOGO)
Logr aislar esporas de hongos y cultivarlas sobre medios slidos a base de gelatina y obtuvo los primeros cultivos puros. Lister, en 1878 realiz diluciones secuenciales de cultivos mixtos, hasta lograr muestras en las que exista una sola clula. Pero la tcnica era larga y tediosa.

Koch buscaba con ahnco mtodos ms sencillos de cultivo puro. Primero emple rodajas de patata como sustrato slido nutritivo. Compactar el tpico caldo de cultivo a base de carne aadindole gelatina (1881). El medio slido as logrado era transparente, lo que permita visualizar fcilmente los rasgos coloniales, y contena los nutrientes adecuados para el crecimiento de una amplia gama de bacterias.

stas eran inoculadas en la superficie del medio con un hilo de platino pasado previamente por la llama, por la tcnica de siembra en estra. Sin embargo, la gelatina presentaba los inconvenientes de ser atacada por determinados microorganismos, y de tener un bajo punto de fusin. 1882 el mdico alemn Walter Hesse, siguiendo una sugerencia de su mujer Fanny, introdujo el agar-agar (polisacrido extrado de algas rojas) como nuevo agente solidificante.

El trabajo de Koch derrib las ideas pleomorfistas, y supuso la primera propuesta del concepto de especie dentro del mundo bacteriano. En 1887 Petri, un ayudante de Koch, sustituy las bandejas de vidrio, por un sistema manejable de placas de cristal planas, que se conoce como cajas de Petri.

BEIJERINCK Y WINOGRADSKY (1888)

Desarrollaron los medios selectivos y de enriquecimiento Estos medios, donde se aplica a pequea escala el principio de seleccin natural, se disean de forma que su composicin qumica definida favorezca slo el crecimiento de ciertos tipos fisiolgicos de microorganismos, nicos capaces de usar ciertos nutrientes del medio.

Medios diferenciales, en los que se manifiesta algn rasgo bioqumico o metablico, lo que contribuye a la identificacin microbiana. Fue Wrtz quien, en 1892, introdujo el uso de indicadores de pH, incorporados en los medios, lo cual permita revelar la produccin de acidificaciones por fermentacin en ciertas bacterias.

MICROSCOPIO COMPUESTO

En la ciudad de Jena se haba creado una atmsfera de progreso (Haeckel, Strassburger o Abb) y con una poderosa industria ptica y qumica. Concretamente, la industria ptica de Abb y Zeiss, que se mantena en conexin con la compaa vidriera Schott, pudo satisfacer la necesidad de Koch de perfeccionar el microscopio compuesto, introduciendo lentes acromticas y una iluminacin inferior provista de condensador. El mismo Abb desarroll en 1878 el objetivo de inmersin en aceite.

COLORANTES

Por otro lado, la industria qumica BASF, que por aquella poca se encontraba en pleno auge de patentes de nuevos colorantes, sumistr al laboratorio de Koch una serie de derivados de anilina que tean las bacterias permitiendo su fcil visualizacin al microscopio en frotis de tejidos infectados.

Carl Weigert (1875) Ti bacterias con pirocarmn, un colorante que ya vena siendo usado desde haca unos aos en estudios zoolgicos. En aos sucesivos se fueron introduciendo el azul de metileno (Koch, 1877), la fuchsina, y el violeta cristal. En 1882-1883 Ziehl y Neelsen desarrollan su mtodo de cido-alcohol resistencia para teir Mycobacterium tuberculosis.

En 1884 el patlogo dans Christian Gram establece una tincin de contraste que permite distinguir dos tipos bacterianos en funcin de su reaccin diferencial de tincin. En 1890 Loeffler logra visualizar flagelos bacterianos por medio de su tcnica de impregnacin argntica.