Irfanudin Fkik

i
UJI EFEK HIPOGLIKEMIA FRAKSI ETIL ASETAT BIJI JINTEN

HITAM (Nigella sativa Linn) PADA TIKUS PUTIH JANTAN DENGAN
METODE INDUKSI ALOKSAN DAN TOLERANSI GLUKOSA

Skripsi
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk
Memperoleh gelar Sarjana Farmasi

Oleh
Irfanudin Padilah
NIM: 105102003331

PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) SYARIF HIDAYATULLAH
JAKARTA
1430 H/ 2009 M

ii

iii

iv

LEMBAR PERNYATAAN

Dengan ini penulis menyatakan bahwa skripsi ini benar-benar
hasil karya sendiri yang belum pernah diajukan sebagai
skripsi atau karya ilmiah pada perguruan tinggi atau lembaga
pendidikan manapun.

Penulis

v

ABSTRAK
Judul : Uji Efek Hipoglikemia Fraksi Etil Asetat Biji Jinten
Hitam (Nigella sativa Linn) Pada Tikus Putih Jantan
Dengan Metode Induksi Aloksan Dan Toleransi Glukosa
Biji jinten hitam (Nigella sativa Linn) merupakan salah satu
tanaman tradisional yang telah diketahui sebagai obat
antidiabet alternatif. Telah dilakukan pengujian efek
hipoglikemia fraksi etil asetat biji jinten hitam dengan
menggunakan metode induksi aloksan dengan masing-masing
dosis 41 mg/200 g bb, 82 mg/200 g bb dan 164 mg/200 g bb
yang diberikan secara oral pada tikus putih jantan, pengukuran
kadar glukosa darah dilakukan pada hari ke-7, 21 dan 28
dengan menggunakan glukometer. Pemberian variasi dosis
menunjukan bahwa dosis 41 mg/200 g bb memberikan
penurunan kadar glukosa darah yang terkuat (51,41%), diikuti
dosis 82 mg/200 g bb (41,86%) dan 164 mg/ 200 g bb
(39,33%), dibandingkan dengan kontrol positif tidak berbeda
secara bermakna dalam taraf nyata 0,05%. Dosis 41 mg/100 g
bb fraksi etil asetat biji jinten hitam diberikan secara oral pada
tikus putih jantan dengan menggunakan metode toleransi
glukosa. Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan setiap 30
menit selama 180 menit dengan menggunakan glukometer,
dibandingkan dengan kontrol positif tidak berbeda secara
bermakna pada menit ke-0, 30, 90, 120, 150 dan 180 sedangkan
dibandingkan dengan kontrol negatif berbeda secara bermakna
pada menit ke-60 dalam taraf nyata 0,05. Hasil penelitian ini
menunjukan bahwa fraksi etil asetat biji jinten hitam berpotensi
menurunkan glukosa darah.
Kata kunci : Induksi aloksan, Biji jinten hitam, Etil asetat,
Toleransi glukosa

vi

ABSTRACK
Title : Hypoglykemia Effect Of Ethyl Acetat Fraction Of Black
Seed (Nigella Sativa Linn) On Alloxan Induced And
Glucose Tolerance Method In Rats
Traditional herba medicine, black seed (Nigella sativa Linn)
has already known can be used for oral anti-diabetic drug. An
investigation of the hypoglycemia effect of black seed fraction
in ethyl acetat using alloxan induced and glucose tolerance
method. Measurement the blood glucose level was done on
day-17, 21 and 28 using glucose-test. Doses variation of the
ethyl acetat fraction showed that the dose of 41 mg/200 g bw
gave the best hypoglycemic effect (51,41%), followed by doses
82 mg/200 g bw (41,86%) and 162 mg/200 g bw (39,33%),
compared with positive control was not different incisively
whereas compared with negative control was different
incisively of significant 0,05. Dose 41 mg/200 g bw of ethyl
acetat fraction given orally to white male rats using glucose
tolerance method. Measurement of the blood glucose level was
done every 30 minutes during 180 minutes using glucose-test,
compared with positive control at minute-0, 30, 60, 90, 120,
150 and 180 was not different incisively whereas compared
with negative control was different incisively at minute 60 of
significant 0,05. This experiment showed that black seed
fraction in ethyl acetat potentially decreasing blood glucose
level.
Keys words : Alloxan induced, Black seed, Ethyl acetat,
Glucose tolerance

vii

KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Allah SWT Rabb Yang Maha Kuasa dengan
kasih dan sayang-Nya, berkat rahmat dan kuasa-Nya memberikan jalan
kepada hamba-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan
skripsi dengan judul Uji Efek Hipoglikemia Fraksi Etil Asetat Biji Jinten
Hitam (Nigella sativa Linn) Pada Tikus Putih Jantan Dengan Metode Induksi
Aloksan Dan Toleransi Glukosa. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat
untuk menyelesaikan program pendidikan tingkat sarjana Strata 1 (S1) pada
Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas
Negeri (UIN) Syarifhidayatullah Jakarta.
Penyusunan skripsi ini tidak terlepas dari berbagai pihak. Karena itu
pada kesempatan kali ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih yang sedalam-dalamnya kepada yang terhormat:
1. Keluarga besarku terutama Ayahanda tercinta Nurdin (alm) dan
Ibunda tersayang Ihat Muflihat dan kakaku Teh Pani Ropiani dan
suaminya A Yusuf serta adik-adikku Ai Risna dan Miftahul Huda
yang selalu memberikan spirit baik moril maupun spiritual selama
penelitian dan penyusunan skripsi ini.
2. Bapab Drs. M Yanis Musdja, M.Sc, Apt. dan Ibu Azrifitria, M.Si,
Apt. Selaku pembimbing Akademik yang memberikan pengarahan,
nasehat, dukungan dan bimbingannya, sehingga penulis bisa
menyelesaikan dan menyusun skripsi ini.
3. Guru spiritual Ust Ade Taqiyudin dan Kak Syahril yang telah
memberikan dorongan dan motivasi dengan tausiyahnya yang
dapat menyejukan hati dan mendorong penulis untuk bisa
menyelesaikan skripsi ini.
4. Bapak, Ibu Dosen Program Studi Farmasi yang memberikan
dukungan, sehingga penulis bisa menyelesaikan skripsi ini.
5. Teman-teman Program Studi Farmasi yang memberikan dukungan,
sehingga penulis bias menyelesaikan skripsi ini.
viii

6. Semua pihak yang telah membantu dari awal hingga akhir
penyusunan skripsi ini yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
Penulis menyadari bahwa skripsiini masih banyak kekurangan, penulis
sangat mengharapkan kritik dan saran agar skripsi peneltian ini benar-benar
bermanfaat untuk kiya semua Amin.

Jakarta, 4 November 2009 M
16 Dzulqodah 1430 H

ix

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ................................................................................................. i
LEMBAR PERSETUJUAN SKRIPSI ...................................................................... ii
LEMBAR PERNYATAAN ....................................................................................... vi
ABSTRAK ................................................................................................................. v
ABSTRACT ............................................................................................................... vi
KATA PENGANTAR ............................................................................................... vii
DAFTAR ISI .............................................................................................................. ix
DAFTAR GAMBAR ................................................................................................. xi
DAFTAR TABEL ...................................................................................................... xii
DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................................. xiii
BAB I PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang .............................................................................................. 1
1.2. Perumusan Masalah ...................................................................................... 3
1.3. Pembatasan Masalah ..................................................................................... 3
1.4. Tujuan Penelitian .......................................................................................... 4
1.5. Hipotesis ....................................................................................................... 4
1.6. Manfaat Penelitian ........................................................................................ 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Jinten Hitam (Nigella Sativa Linn) ............................................................... 5
2.1.1. Klasifikasi ........................................................................................... 5
2.1.2. Nama lain ........................................................................................... 5
2.1.3. Morfologi ............................................................................................ 6
2.1.4 Pengembangan dan Pertumbuhan ....................................................... 6
2.1.5. Penanaman dan Perkembangbiakan ................................................... 7
2.1.6. Ekologi dan Perkembangbiakan ......................................................... 7
2.1.7. Kandungan kimia biji jinten hitam ..................................................... 7
2.1.8. Khasiat jinten hitam ............................................................................ 8
2.2. Tinjauan Hewan Coba ................................................................................... 8
2.3. Ekstrak dan Ekstraksi .................................................................................... 9
2.3.1. Pembuatan serbuk ............................................................................... 10
2.3.2. Pembasahan ........................................................................................ 11
2.3.3. Penyari/Pelarut ................................................................................... 11
2.4. Diabetes Mellitus .......................................................................................... 14
2.4.1. Diabetes mellitus Tipe-1 IDDM ......................................................... 14
2.4.2. Diabetes mellitus Tipe-2 NIDDM ...................................................... 15
2.4.3. Diabetes Gestional .............................................................................. 16
2.4.4. Kelainan Fisiologis pada Diabetes ..................................................... 16
2.4.5. Diagnosis Diabetes ............................................................................. 18
2.5. Alloksan ....................................................................................................... 19
2.6. Glibenclamid ................................................................................................. 20
2.7. Acarbosa ....................................................................................................... 22
2.8. Etil asetat ....................................................................................................... 23
2.9. Metode Pengujian ......................................................................................... 24
2.9.1. Metode induksi aloksan ...................................................................... 24
x

2.9.2. Metode uji toleransi glukosa oral ....................................................... 27
BAB III KERANGKA KONSEP .............................................................................. 28
BAB IV METODE PENELITIAN ............................................................................ 29
4.1. Tempat Dan Waktu Penelitian ...................................................................... 29
4.2. Alat dan Bahan .............................................................................................. 29
4.2.1. Alat ..................................................................................................... 29
4.2.2. Bahan .................................................................................................. 29
4.3. Prosedur Kerja .............................................................................................. 30
4.3.1. Pembuatan Simplisia .......................................................................... 30
4.3.2. Ekstraksi ............................................................................................. 30
4.3.3. Uji Penapisan Fitokimia ..................................................................... 31
4.3.4. Rancangan Percobaan ......................................................................... 33
4.3.5. Pembuatan Sediaan Uji dan Dosis ...................................................... 35
4.3.6. Cara Pengambilan Darah dan Pengkuran Kadar Glukosa Darah ....... 37
4.3.7. Percobaan ........................................................................................... 37
4.3.8. Uji Statistik Terhadap Kadar Glukosa Darah ..................................... 39
BAB V HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ............................................ 40
5.1. Hasil Penelitian 40
5.1.1. Determinasi Tanaman ......................................................................... 40
5.1.2. Ekstraksi ............................................................................................. 40
5.1.3. Hasil Pengujian Ekstrak ..................................................................... 40
5.1.4. Penapisan Fitokimia ........................................................................... 41
5.1.5. Hasil Pengukuran Kadar Glukosa Darah ............................................ 41
5.2. Pembahasan................................................................................................... 42
BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................... 51
6.1. Kesimpulan ................................................................................................... 51
6.2. Saran ............................................................................................................. 51
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................ 52

xi

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Alloksan ................................................................................................... 19
Gambar 2. Glibenclamid ............................................................................................ 20
Gambar 3. Etil asetat .................................................................................................. 23
Gambar 4. Biji jinten hitam ....................................................................................... 56
Gambar 5. Kandang tikus .......................................................................................... 56
Gambar 6. Glukose-test ............................................................................................. 57
Gambar 7. Pemberian secara oral .............................................................................. 57
Gambar 8. Kurva kadar glukosa darah rata-rata hewan uji sebelum dan sesudah diberi
bahan uji pada hari pengambilan sampel selama 28 hari 72
Gambar 9. Kurva kadar glukosa darah rata-rata hewan uji menit ke 0,30,60,90,120 ,180... 72

xii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. Pembagian Kelompok Hewan Uji Induksi Aloksan ................................... 34
Tabel 2. Pembagian Kelompok Hewan Uji Toleransi Glukosa ................................ 35
Tabel 3. Hasil pemeriksaan penapisan fitokimia biji jinten hitam ............................ 41
Tabel 4. Hasil pada metode induksi aloksan ............................................................. 41
Tabel 5. Hasil pada metode toleransi glukosa aloksan ............................................. 42
Tabel 6. Konversi dosis............................................................................................. 64
Tabel 7. Kadar glukosa darah metode induksi aloksan ............................................. 68
Tabel 8. Kadar glukosa darah metode toleransi glukosa .......................................... 70
Tabel 9. Persentase penurunan pada induksi metode aloksan... 71
Tabel 10.Persentase penurunan pada metode toleransi glukosa. 71
Tabel 11. Sample Kolmogorov Uji normalitas-Smirnov.... 73
Tabel 12. Uji Homogenitas ........................................................................................ 73
Tabel 13. Uji ANAVA ............................................................................................... 74
Tabel 14. Kruskal Wallis ........................................................................................... 74
Tabel 15. Uji BNT hari ke-14 .................................................................................... 74
Tabel 19. Uji normalitas Sample Kolmogorov-Smirnov ........................................... 80
Tabel 20. Uji Homogenitas ........................................................................................ 80
Tabel 21. ANAVA ..................................................................................................... 81
Tabel 22. Kruskal Wallis ........................................................................................... 81
Tabel 23. Uji BNT menit ke-30 ................................................................................. 82
Tabel 24. Uji BNT menit ke-60 ................................................................................. 82

xiii

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Gambar Bahan Dan Alat Penelitian ..................................................... 56
Lampiran 2. Determinasi Simplisia .......................................................................... 58
Lampiran 3. Sertifikat Glibenklamid ........................................................................ 59
Lampiran 4. Skema Ekstraksi dan Partisi .......................................................................... 60
Lampiran 5. Skema Percobaan Metode Induksi Aloksan .................................................... 61
Lampiran 6. Skema Percobaan Metode Toleransi Glukosa ................................................. 62
Lampiran 7. Perhitungan Dosis Larutan Uji ............................................................... 63
Lampiran 8. Penetapan Kadar Air Dan Susut Pengeringan Etil Asetat ............................. 67
Lampiran 9. Daftar Kadar Glukosa Darah Masing-Masing Kelompok ..................... 68
Lampiran10. Persentase Penurunan Kadar Glukosa Darah ....................................... 71
Lampiran11. Kurva Kadar Glukosa Darah ................................................................ 72
Lampiran12. Analisa Data Metode Induksi Aloksan ................................................ 73
Lampiran13. Analisa Data Metode Induksi Aloksan ................................................ 80

xiv

1

BAB I
PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang
Jumlah penderita penyakit Diabetes Mellitus (DM) di Indonesia,
menurut data Badan Kesehatan Dunia (WHO), mencapai 17 juta orang atau
8,6% dari 220 juta populasi negeri ini dan meningkat terus pada akhir-akhir
ini karena angka tersebut berdasarkan penelitian pada tahun 2001. Menurut
data Badan Kesehatan Dunia (WHO) pada tahun 2003 tercatat hampir 200
juta orang di dunia menderita diabetes dan diperkirakan pada tahun 2025
jumlah penderita bisa mencapai sekitar 330 juta jiwa. Sementara di
Indonesia sendiri, berdasarkan data WHO pada tahun 2003 tercatat lebih
dari 13 juta penderita diabetes, dari jumlah tersebut diperkirakan akan
meningkat menjadi lebihdari 20 juta penderita pada tahun 2030.
Berdasarkan penelitian Departemen Kesehatan pada 2001, untuk jenis
penyakit ini Indonesia menempati urutan keempat di dunia setelah India,
China dan Amerika Serikat (AS). Pada tahun 2001 silam, tercatat 7,5%
penduduk di Pulau Jawa dan Bali, baik pria maupun wanita, menderita DM.
Kemungkinan juga angkat tersebut bisa bertambah lebih besar lagi. penyakit
ini tercantum dalam urutan nomor 4 dari prioritas penelitian nasional untuk
penyakit degeneratif setelah kardiovaskular, serebrovaskular dan
geriatri.(Perkeni, 2006)
2

Indonesia merupakan negara yang memiliki keanekaragaman hayati
terbesar di dunia dengan lebih dari 30 ribu spesies tanaman berkhasiat
mengobati melalui penelitian ilmiah. Hanya sekitar 180 spesies tersebut
telah dimanfaatkan dalam tanaman obat tradisional oleh industri obat
tradisional Indonesia.

Hal ini disebabkan pemanfaatan tumbuhan obat
Indonesia untuk mengobati suatu penyakit biasanya hanya berdasarkan
pengalaman empiris yang diwariskan secara turun temurun tanpa disertai
data penunjang yang memenuhi persyaratan. Penelitian farmakologis
dengan tahap pengujian secara sistematik, menggunakan metode uji
antidiabetes yang tepat harus digunakan agar hasilnya dapat dipertanggung
jawabkan secara ilmiah, bermanfaat bagi masyarakat dan dapat menjadi
acuan untuk penelitian selanjutnya.
Salah satu tanaman obat yang secara tradisional digunakan untuk
mengobati diabetes mellitus adalah jinten hitam (Nigella sativa
Linn).Masyarakat mesir menggunakan jinten hitam untuk mengobati
kencing manis, Penggunaan jintan hitam sebagai obat-obatan telah
dilakukan jutaan orang di Asia, Timur Tengah, dan Afrika untuk menjaga
kesehatan. Jintan hitam adalah tanaman yang berkhasiat obat dan telah
dimanfaatkan ribuan tahun lampau. Dalam masyarakat islam penggunaan
jintan hitam adalah termasuk kedalam pengobatan ala nabi (tibbun nabawi).
Hal ini terdokumentasi dengan baik melalui riwayat imam Bukhari dan
Muslim yang terjemahannya sebagai berikut:
3

"Dari Abu Hurairah ra : Rasulullah saw. bersabda: Sesungguhnya
pada jintan hitam itu terdapat obat untuk segala macam penyakit kecuali
kematian".
Salah satu khasiat jinten hitam adalah untuk antidiabetes karena
jinten hitam mempunyai banyak kandungan.(Mahmud 2007)
Hal tersebut melatar belakangi dilakukannya pengujian khasiat
antidiabetes ekstrak jinten hitam (Nigella sativa Linn) untuk menurunkan
kadar glukosa darah hewan uji. Dalam hal ini hewan percobaan yang
digunakan adalah tikus putih jantan galur wistar dan SD (Sprague Dawley)
dengan metode uji dabetes aloksan dan toleransi glukosa sebagai metode uji
antidiabetes praklinis yang mendekati keadaan penderita diabetes yang
sebenarnya dan pemeriksaan kadar glukosa darahnya menggunakan
glukometer.
1.2. Perumusan Masalah
Apakah fraksi etil asetat biji jinten hitam (nigella sativa Linn)
memiliki kemampuan menurunkan kadar glukosa darah pada tikus putih
jantan galur wistar dengan metode induksi aloksan dan uji toleransi glukosa.
1.3. Pembatasan Masalah
Penelitian ini dibatasi hanya untuk mengetahui kemampuan fraksi
etil asetat biji jinten hitam ( Nigella sativa Linn) dalam menurunkan kadar
glukosa darah tikus jantan menggunakan metode induksi aloksan dan
toleransi glukosa.

4

1.4. Tujuan Penelitian
Untuk mengetahui efek hipoglikemia dalam fraksi etil asetat biji
jinten hitam (Nigella sativa Linn) pada tikus putih jantan galur wistar
dengan metode induksi aloksan dan uji toleransi glukosa.
1.5. Hipotesis
Fraksi etil asetat jinten hitam (Nigella sativa. Linn) dapat
menurunkan kadar glukosa darah tikus putih jantan yang diinduksi dengan
metode induksi aloksan dan uji toleransi glukosa.
1.6. Manfaat Penelitian
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi dalam
meningkatkan upaya kesehatan dengan mengembangkan obat tradisional
sehingga dapat dimanfaatkan dengan berdasarkan landasan ilmiah.

5

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1. JINTEN HITAM (Nigella sativa Linn).
2.1.1. Klasifikasi (ITIS, 2009)
Berdasarkan ilmu taksonomi, klasifikasi tanaman jinten hitam
adalah sebagai berikut :
Dunia : Plantae
Sub dunia : Tracebionta
Divisi : Spermatophyta
Sub divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnopliopsida
Sub kelas : Magnoliidae
Bangsa : Ranuculases
Suku : Ranuculaceae
Marga : Nigella
Jenis : Nigella sativa Linn
Sinonim : Nigella cretica miller, Nigella indica Roxb
2.1.2. Nama lain
Di Dunia, jinten hitam dikenal dengan berbagai nama, antara lain:
Kalonji (bahasa Hindi), Kezah (Hebrew), Chamushka (Rusia), Habbatus
Sauda (Arab), Siyah daneh (Persian), Fennel Flower / Black Cumin /
Nutmeg Flower / Roman Coriander / Black Onian Seed (English)
6

2.1.3. Morfologi(Tjitrosoepomo, 2000)
Nigella sativa atau Jinten Hitam Pahit ini merupakan jenis tanaman
bunga, tumbuh setinggi 20-50 cm, berbatang tegak, berkayu dan berbentuk
bulat menusuk.
Daun runcing ,bercabang, bergaris (namun garis daunnya tidak
seperti benang ; tidak seperti ciri daun tumbuhan genus Nigella pada
umumnya), daunnya kadang-kadang tunggal atau bisa juga majemuk
dengan posisi tersebar atau berhadapan. Bentuk daunnya bulat telur
berujung lancip. Di bagian permukaan daunnya terdapat bulu halus.
Tumbuhan jintan hitam memiliki bunga yang bentuknya beraturan.
Bunga ini kemudian menjadi buah berbentuk bumbung atau buah kurung
berbentuk bulat panjang. Bunganya menarik dengan warna biru pucat atau
putih, dengan 5-10 mahkota bunga.
Buahnya keras seperti buah buni. Berbentuk besar, menggembung,
berisi 3-7 unit folikel,masing-masing berisi banyak biji atau benih yang
sering digunakan manusia sebagai rempah-rempah. Memiliki rasa pahit
yang tajam dan bau seperti buah strawberry. Bijinya berwarna hitam pekat.
2.1.4. Pengembangan dan Pertumbuhan (De Guzman, 1999)

Perkecambahan secara epigeal. di dalam iklim hangat jinten hitam
mulai berbunga sekitar 100 hari setelah penaburan dan benih mulai
tumbuh 50 hari kemudian. di dalam iklim lebih hangat, jinten hitam
berbunga mulai 8-10 minggu setelah perkecambahan. Penyerbukan
sebagian besar di lakukan oleh serangga. Penyerbukan terjadi pada bunga
yang lebih tua yang mulai membungkuk.
7

2.1.5. Penanaman dan Perkembangbiakan (De Guzman, 1999)

Jinten hitam dapat di kembangbiakan dengan mudah, dengan cara
biji di sebarkan. Perkecambahan di lakukan di tempat gelap dan
temperatur tinggi. benih ditaburkan di dalam blok tepukan, setelah menjadi
kecambah benih ditanam berbaris, umumnya jarak antara baris satu
dengan yang lain adalah 25-40 cm. Di ethiophia, Jinten hitam sering
dipanen bersamaan dengan dengan gandum dan jewawut.
2.1.6. Ekologi dan Penyebaran( K Hyne, 1987)
Jinten hitam dipercaya berasal dari Mediterania (seputar Laut
Tengah), eropa selatan, sampai ke india. Bentuknya kecil berserabut,
ukurannya tidak lebih dari 3 mm, dapat tumbuh sampai pada ketinggian
1100 m dari permukaan laut. Biasanya ditanam di daerah pegunungan
ataupun sengaja ditanam dihalaman atau ladang sebagai tumbuhan
rempah-rempah. Daerah sentra produksi Jintan di Indonesia adalah
Sumatera dan Jawa serta di berbagai daerah lainnya.
2.1.7. Kandungan kimia biji jinten hitam(De Guzman, 1999)

Biji jinten hitam antara lain mengandung :
a. Minyak atsiri: thymoquinone 25-50, p-cymene dan -pinene,
carvacrol, anetol dan -terpineol.
b. Minyak lemak: asam eososianat 0,5%, asam linoleat sekitar 60%, asam
linolenat 0,3%, asam myristat 0,3%, asam oleat sekitar 25%, asam
palmiat 0,3% dan asam stearat 3%.
c. Kandungan lainnya: Tanin, alkaloid, nigelon, nigelimin, nigelimin n-
oksida dan nigelisin, campestrol, stigmasterol, -sitosterol, -
8

spinasterol. Juga mengandung 1,5% glucosida melantin yang bila di
hidrolisis menghasilkan racun melantogenin.
Dalam 100g biji jinten hitam mengandung: air 4g, protein 22g,
lemak 41g, karbohidrat 17g, serat 8g, mineral 4,5g (Na 0,5g, K 0,5g, Ca
0,2g, P 0,5g, Fe 10mg), thiamin 1,5mg, piridoksin 0,7mg, tokoperol 34mg
dan niasin 6 mg.
2.1.8. Khasiat jinten hitam
Diuretik, karminatif, kencing batu, sakit gigi, bengkak karena
peradangan, kelelahan, cacingan, masalah kulit seperti jerawat, haid,
menambah ASI pada wanita menyusui, meningkatkan sistem kekebalan
tubuh, Khasiat lainnya adalah mengurangi berat badan dan lingkar perut,
menurunkan tekanan darah, gula darah puasa, trigiliserida dan kolesterol
HDL, asam urat, hipoglikemik (Al-Hader et al., 1993).
2.2. Tinjauan Hewan coba (Sharp et al, 1998)
Klasifikasi hewan coba yang digunakan pada penelitian ini adalah :
Regnum : Animalia
Filum : Chordata
Kelas :Mamalia
Bangsa : Rhodenta
Keluarga : Muridae
Anak Keluarga : Murinae
Marga : Rattus
Jenis : R. Norvegicus
9

Ratus norvegicus merupakan salah satu species tikus yang paling
umum di jumpai dirpekotaan. Hasil seleksi pada hewan ini sering digunakan
sebagai hewan percobaan yang dikenal dengan tikus putih dan sebagai
hewan peliharaaan dengan warna yang bervariasi.
2.3. Ekstrak dan Ekstraksi
Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi
zat aktif dari simplisia nabati atau hewani menggunakan pelarut yang
sesuai, kemudian semua atau sebagian pelarut diuapkan dan massa atau
serbuk yang tesisa perlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang
telah ditetapkan.(Depkes RI, 1994)
Ekstraksi adalah suatu proses penarikan kandungan kimia yang larut
sehingga dapat terpisah dari bahan bahan yang tidak larut dengan
menggunakan pelarut cair. Ekstrak merupakan sediaan kental yang
diperoleh dengan mengekstraksi senyawa akif dari simplisia nabati atau
hewani menggunakan pelarut dan diuapkan dan massa atau serbuk yang
tersisa diperlakukan sedemikian rupa hingga memenuhi baku yang telah
ditetapkan.(Harbone,1996)
Ekstrak tumbuhan obat yang dibuat dari simplisia nabati dapat
dipandang sebagai bahan awal dianalogkan dengan komoditi bahan baku
obat yang dengan teknologi fitofarmasi diproses menjadi bahan antara atau
produk jadi . Ekstrak sebagai bahan anatara berarti masih menjadi bahan
yang dapat diproses lagi menjadi fraksi fraksi, isolat senyawa tunggal
ataupun tetap sebagai campuan dengan ekstrak lain, ekstrak sebagai produk
10

jadi berarti ekstrak yang berada didalam sediaan obat jadi siap digunakan
oleh penderita.
Prinsip yang sangat penting dalam ekstrak adalah bahwa suatu zat
akan terekstraksi efektif jika ekstraksi dilakukan berulang - ulang dengan
menggunakan pelarut dalam jumlah yang lebih kecil daripada hanya satu
atau dua kali ekstraksi dengan jumlah yang besar.
Ekstrak dikelompokan atas dasar sifatnya, yaitu ( Voight, 2005) :
a. Ekstak encer adalah sediaan yang memiliki konsistensi semacam madu
dan dapat dituang.
b. Ekstrak kental adalah sediaan yang liat dalam keadaan dingindan tidak
dapat di tuang. Kandungan air berjumlah sampai 30%.
c. Ekstrak kering adalah sediaan yang memiliki konsistensi kering dan
mudah di tuang, sebaiknya memiliki kandungan lembab tidak lebih
dari 5 %.
d. Ekstrak cair adalah ekstrak yang di buat sedemikian rupa sehingga 1
bagian simplisia sesuai dengan 2 bagian ekstrak cair.
Proses ekstraksi dapat melalui tahap mejadi : pembuatan serbuk,
pembasahan, penyarian dan pemekatan(Depkes RI, 1978, 1986)
2.3.1. Pembuatan serbuk
Pada umumnya penyarian akan bertambah baik bila permukaan
serbuk simplisia yang bersentuhan dengan cairan penyari semakin luas.
Kehalusan serbuk akan mempermudah proses penyarian. Tetapi serbuk
yang terlalu halus akan merusak sel dinding sel sehingga akan merusak zat
11

aktif pada simplisia tersebut dan zat yang tidak diinginkan pun dapat ikut
masuk ke dalam hasil penyarian.
2.3.2. Pembasahan
Pembasahan serbuk dilakukan pada penyarian. Dimaksudkan
memberi kesempatan sebesar-besarnya kepada cairan penyari memasuki
pori-pori dalam simplisia sehingga mempermudah penyarian
selanjutnya(Depkes, 1978)
2.3.3. Penyari/ Pelarut
Cairan penyari yang di gunakan dalam proses pembuatan ekstrak
adalah penyari yang baik untuk senyawa kandungan yang berkhasiat atau
aktif. Penyari tersebut harus dipisahkan dari bahan da dari kandungan
lainnya, serta ekstrak hanya mengandung sebagian besar senyawa yang
diinginkan. Faktor utama yang menjadi pertimbangan dalam pemilihan
penyari adalah selektifitas, ekonomis, dan kemudahan bekerja(Depkes RI
1978)
Macam-macam metode penyarian dalam ekstraksi yang dapat di
lakukan ialah :
a. Ekstraksi dengan menggunakan penyari (Depkes RI 1978)
1. Maserasi(Depkes 2001)
Maserasi adalah proses pengekstrakkan simplisia dengan
menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau
pengadukan pada temperatur ruangan (kamar) secara teknologi
12

termasuk ekstraksi dengan metode pencapaian konsentrasi pada
keseimbangan.
2. Perkolasi
Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru
sampai sempurna (exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan
pada temperatur ruangan. Prinsip perkolasi adalah dengan
menempatkan serbuk simplisia pada suatu bejana silinder, yang
bagian bawahnya diberi sekat berpori. Cairan penyari akan menarik
zat aktif dalam sel-sel yang terdapat dalam simplisia.
3. Refluks
Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut sampai pada
temperatur titik didihnya selama waktu tertentu dan jumlah pelarut
terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik.
Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama
sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi
sempurna.
4. Sokhletasi
Sokhlet adalah ekstraksi menggunakan penyari yang
berbeda. Umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi
ekstraksi berlanjut sampai jumlah penyari relatif konstan dengan
adanya pendingin balik.

13

5. Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan
kontinyu) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperature
ruangan, secara umum dilakukan pada temperature 40
o
C-50
o
C.
6. Infus
Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur
penangas air mendidih, temperature terukur 96
o
C - 98
o
C selama
waktu tertentu (15-20 menit). Infus pada umumnya digunakan
untuk menarik atau mengekstraksi zat aktif yang larut dalam air
dari bahan-bahan nabati. Hasil dari ekstrak ini akan menghasilkan
zat aktif yang tidak stabil dan mudah tercemar oleh kuman dan
kapang, sehingga ekstrak yang diperoleh dengan infus tidak boleh
disimpan lebih dari 24 jam.
7. Dekok
Dekok adalah infus yang waktunya lebih lama (lebih dari
30 menit) dan temperatur sampai titik didih air.
Cara ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini adalah
maserasi. Maserasi adalah cara ekstraksi yang paling sederhana Bahan
yang dihaluskan sesuai dengan syarat farmakope (umumnya terpotong
potong atau diserbuk kasarkan ) disatukan dengan bahan ekstraksi.
Waktu maserasi berbedabeda, masingmasing farmakope
mencantumkan 4-10 hari. (Voight, 1995)

14

b. Destilasi uap
Destilasi uap adalah ekstraksi kandungan senyawa mudah
menguap (minyak atsiri) dari bahan (segar atau simplisisa) dengan
uap air. Cara ini didasarkan pristiwa tekanan parsial senyawa
kandungan menguap dengan fase uap air dari ketel secara berlanjut
sampai sempurna dan diakhiri dengan kondensasi fase uap campuran
menjadi destilat air bersama senyawa kandungan yang memisah
sempurna sebagian.
2.4. Diabetes Mellitus
Diabetes mellitus, penyakit gula atau kencing manis adalah suatu
gangguan kronis yang khususnya menyangkut mabolisme hidrat arang
(glukosa) di dalam tubuh. Penyebabnya adalah kekurangan hormon insulin,
yang berfungsi memanfaatkan glukosa sebagai sumber energi dan
mensintesis lemak. Akibatnya ialah glukosa bertumpuk didalam darah
(hiperglikemia) dan akhirnya diekskresikan lewat kemih tanpa digunakan
(glycosuria). Oleh karena itu produksi kemih sangat meningkat dan pasien
selalu buang air kecil, merasa selalu haus, berat badan menurun dan berasa
lelah. Penyebab lain ialah menurunnya kepekaan reseptor sel bagi insulin
(resistensi insulin) yang di kibatkan makan terlalu banyak dan kegemukan
(overweigh).
2.4.1. Diabetes melitus Tipe-1 (IDDM)
Pada tipe ini terdapat destruksi dari sel sel beta pankreas,
sehingga tidak memproduksi insulin lagi dengan akibat sel sel tidak
menyerap glukosa dari darah. Karena itu kadar glukosa darah meningkat di
15

atas 10 mmol/l, yakni nilai ambang ginjal, sehingga glukosa glukosa
berlebihan dikeluarkan lewat urin bersama banyak air (glycosuria) Di
bawah kadar tersebut glukosa ditahan oleh tubuli ginjal.Tipe-1
mengghinggapi orang-orang di bawah usia 30 tahun.
Penyebab diabetes tipe-1 ini belum begitu jelas, tetapi terdapat
indikasi kuat bahwa jenis ini disebabkan oleh suatu infeksi virus yang
menimbulkan reaksi auto imun berlebihan untuk menanggulangi virus.
Akibatnya sel-sel pertahanan tubuh tidak tidak hanya membasmi viru,
melainkan juga turut merusak atau memusnahkan sel-sel langerhans.
Dalam waktu satu tahun sesudah diagnosa, 80-90% penderita tipe-1
memperlihatkan antibodi sel-sel beta di dalam darahnya. Pada tipe ini
faktor keturunan juga memegang peranan. Virus yang dicurigai adalah
virus Coxsackie-B Epstein-Barr, morbill dan virus parotitis. Pengobatan
tipe ini satu- satunya adalah pemberian insulin seumur hidup. (Tjay dan
Rahardja, 2002)
2.4.2. Diabetes melitus Tipe-2 (NIDDM)
Pada tipe ini lazimnya mulai diatas 40 tahun dengan inssiden lebih
besar pada orang gemuk dan pada usia lebih lanjut. Orang orang yang
hidupnya makmur, culas dan kurang gerak badan lebih besar resiko
terkena gejala ini. Penyebab gejala ini adalah akibat menua, banyak pasien
jenis ini mengalami penyusutan sel sel beta yang progresif serta serta
penumpukan amiloid sekitar sel sel beta. Sel beta yang tersisa pada
umumnya masih aktif tetapi sekresi insulinnya semakin berkurang. Selain
itu kepekaan reseptornya menurun. Hipofunsi sel beta ini bersama
16

resistensi insulin yang meningkat mengakibatkan gula darah meningkat
(hiperglikemia). Pada tipe ini tidak tergantung pada insulin dan dapat
diobati dengan antidiabetik oral.
Diagnosa tipe-2 umumnya baru di diagnosa pada stadium
terlambat, padahal diagnosa dini adalah penting sekali untuk
menghindarkan komplikasi lambat. Maka bila terdapat gejala seperti haus
yang hebat, sering buang air kecil dan turunnya berat badan serta rasa leti,
maka sebaiknya segera konsultasi ke dokteruntuk di periksa penyakit
gula.(Tjay dan Rahardja, 2002)
2.4.3. Diabetes Gestional
Diabetes Mellitus gestional (GDM) adalah keadaan diabetes atau
intoleransi glukosa yang timbul selama masa kehamilan, dan biasanya
berlangsung hanya sementara atau temporer.
Diabetes pada masa kehamilan, walaupun umumnya dapat pulih
sendiri beberapa saat setelah melahirkan, namun dapat berakibat buruk
yang dapat terjadi antara lain malformasi kongenital, peningkatan berat
badan bayi ketika lahir dan meningkatnya risiko mortalitas perinatal.
Wanita yang pernah menderita GDM akan lebih besar risikonya untuk
menderita lagi diabetes dimasa depan. (Depkes, 2006).
2.4.4. Kelainan Fisiologis pada Diabetes
Manifestasi utama diabetes mellitus adalah hiperglikemia yang
terjadi akibat berkurangnya jumlah glukosa yang masuk ke dalam sel,
berkurangnya penggunaan glukosa oleh berbagai jaringan dan peningkatan
produksi glukosa karena proses glukoneogenesis oleh hati. Poliuri,
17

polidipsi, polifagi dan penurunan berat badan merupakan gejala utama
penyakit ini. Dalam keadaan hiperglikemia yang berlangsung lama dan
melewati ambang ginjal, akan terjadi glukosuria dimana batas maksimal
reabsorbsi pada tubulus renalis dilampaui dan glukosa akan diekskresikan
ke dalam urin (Murray dkk, 1992).
Volume urin meningkat (poliuri) akibat terjadinya diuresis osmotik
yang selanjutnya akan menimbulkan dehidrasi dan adanya rangsangan
untuk banyak minum (polidipsi). Glikosuria menyebabkan kehilangan
kalori yang cukup besar (4,1 kal bagi setiap karbohidrat yang
diekskresikan). Keadaan ini jika ditambah dengan deplesi jaringan otot
dan adiposa akan mengakibatkan penurunan berat badan yang hebat
kendati terdapat peningkatan selera makan (polifagia) dan asupan kalori
yang normal. Namun glukosa yang dimakan tidak akan dapat masuk ke
dalam sel untuk membentuk glikogen maupun dipergunakan untuk
menghasilkan energi sehingga mengeluh lelah, mengantuk (Murray dkk,
1992; Sylvia dkk, 1995).
Dalam keadaan defisiensi insulin, sintesis protein akan menurun.
Pengangkutan asam amino sebagai substrat glukoneogenik ke dalam otot
berkurang sehingga terjadi keseimbangan nitrogen yang negatif. Defisiensi
insulin juga terjadi keseimbangan nitrogen yang negatif. Defisiensi insulin
juga menyebabkan tidak adanya kerja antipolisis maupun lipogenik
sehingga kadar asam lemak plasma akan meninggi. Jika kemampuan hati
untuk mengoksidasi asam lemak terlampaui, maka senyawa asam -
hidroksibutirat dan asam asetoasetat akan bertumpuk sehingga terjadi
18

ketosis. Mula-mula penderita dapat mengimbangi penumpukan asam
organik ini dengan meningkatkan pengeluaran CO
2
lewat sistem respirasi,
namun bila keadaan ini tidak dikendalikan maka akan terjadi asidosis
metabolik, pernafasan menjadi cepat dan dalam (pernafasan kushmaul)
dan pasien dapat meninggal dalam keadaan koma diabetik.
Selain ketoasidosis, komplikasi yang sering timbul ialah
komplikasi vaskular jangka panjang berupa mikroangiopati mencakup
retinopati diabetik, nefropati diabetik maupun neuropati diabetik.
Mikroangiopati mempunyai gambaran histopatologis berupa
aterosklerosis, penimbunan sorbitol dalam intima vaskular.
Hiperlipoproteinemia maupun kelainan pembekuan darah. Sehingga
diabetes mellitus dapat menjadi salah satu penyebab penyakit angina
pektoris, onfark miokard, gagal ginjal, katarak. Kegagalan pernafasan
bahkan kematian (Murray dkk, 1992; Sylvia dkk, 1995).
2.4.5. Diagnosis Diabetes
Penyakit diabetes melitus ditandai gejala 3P, yaitu poliuria (banyak
berkemih), polidipsia (banyak minum) dan polifagia (banyak makan),
yang dapat di jelaskan sebagai berikut :
Di samping naiknya kadar gula darah, diabetes bercirikan adanya
gula dalam kemih (glycosuria) dan banyak berkemih karena glukosa yang
diekskresikan mengikat banyak air. Akibatnya timbul rasa sangat haus,
kehilangan energi, turunnya berat badan serta rasa letih. Tubuh mulai
membakar lemak untuk memenuhi kebutuhan energinya, yang di sertai
perubahan zat-zat perombakan, antara lain aseton, asam diksobutirat dan
19

diacetat, yang membuat darah menjadi asam. Keadaan ini, yang di sebut
ketoacidosis dan terutama timbul pada tipe-1, amat berbahaya karena
dapat menyebabkan pingsan (coma diabeticum). Napas penderita sering
kali berbau aseton (Tjay dan Rahardja, 2002). Diagnosis DM yang
dianjurkan adalah yang sesuai dengan anjuran WHO 1985 dengan
mengambil sample glukosa darah vena puasa dan dua jam post pradial
(Ganiswara, 1995).
2.5. Alloksan

Gambar 1. Alloksan
Sinonim : Alloxan; 2,4,5,6-tetraoxohexahydropyrimidine;
mesoxalylurea; mesoxalylcarbamide
Rumus molekul : C
4
H
2
N
2
O
4

Berat molekul : 142,07
Persentase kandungan : C 33.82%, H 1.42%, N 19.72%, O 45.05%
Kelarutan : mudah larut dalam air; aseton; alcohol dan
petroleum eter. Larutan dalam air panas
berwarna kuning dan setelah dingin
Penggunaan : Untuk menghasilkan dalam eksperimen
terhadap binatang diabetes; dalam eksperimen
nutrisi; dalam sintesis senyawa organic.
Mekanisme kerja : Aloksan dengan cepat terikat atau terakumulasi
di dalam sel-B pankreas berbeda dengan bukan
sel-B pankreas. agen sitotoksiknya secara cepat
20

dan selektif merusak kemampuan sel-B dalam
memproduksi insulin yang dikenal sebagai efek
diabetogenik.
Stabilitas : Aloksan stabil pada suhu 2 10 derajat celcius.
Penyimpanan pada suhu rendah dalam wadah
tidak tembus cahaya dan tertutup rapat.(Windolz
M,1983).
2.6. Glibenclamid

Gambar 2. Glibenclamid
Sinonim : Glibenclamida; Glibenclamidum;Glibenklamid;
Glibenklamidas; Glibenklamidi; Glybenclamide;
Glybenzcyclamide; HB-419; U-26452
(marthindale); Glyburide(merk)
Nama kimia : 1-{4-[2-(5-Chloro-2
methoxybenzamido)ethyl]benzenesulphonyl}-3-
Rumus molekul : C
23
H
28
ClN
3
O
5
S
Berat molekul : 494.01
Persentasi Kandungan : C 55.92%, H 5.71%, Cl 7.18%, N 8.51%, O
16.19%, S 6.49%
21

Deskripsi : Berwarna putih atau hampir putih, berbentuk
serbuk Kristal, (Marthindal)
Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air dan eter; sedikit
larut dalam, etanol (95%), metanol dan metil
alcohol; dengan mudah larut dalam diklormetan
atau metilen klorida. pKa 5,3. Dapat dilarutkan
dalam larutan hidroksida alkali. LD50 pada tikus
(g/kg): >20 secara oral; >12,5 i.p; >20 s.c.
Penggunaan terapi :Antidiabetik oral (diabetes tipe 2), hipoglikemik
Dosis : dewasa : oral 2,5 - 5 mg/hari bersamaan makan;
untuk pasien lebih sensitive terhadap obat
hipoglikemik (disfungsi ginjal atau hati) dewasa:
pada awalnya 1,25 mg/hari, perawatan: 1,25 20
mg/hari dalam dosis tunggal atau bagi, tidak
direkomendasikan untuk dosis > 20 mg/hari.
(AtoZ)
Mekanisme kerja : Derivat-klormetoksi ini adalah obat pertama
dari antidiabetika oral generasi ke-2 dengan
khasiat hipoglikemisnya yang kira-kira 100 kali
lebih kuat daripada tolbutamida. Pola kerjanya
berlainan dengan sulfonylurea lain, yaitu dengan
single-dose pagi hari mampu menstimulasi
sekresi insulin pada setiap pemasukan glukosa
(selama makan). Dengan demikian selama 24
22

jam tercapai regulasi gula darah optimal yang
mirip pola normal.resorpsinya dari usus praktis
lengkap, PP-nya diatas 99%, plasma-t1/2-nya ca
10 jam, kerjanya dapat bertahan sampai 24 jam.
Dalam hati zat inidirombak menjadi metabolit
kurang aktif, yang diekskresikan sama rata lewat
kemih dan tinja. (Tjay dan Rahardja, 2002)
mekanismenya mengurangi gula darah dengan
menstimulasi pelepasan insulin dari pankreas.
Memungkinkan juga mengurangi produksi
glukosa hati dan atau meningkatkan respon
insulin.

2.7. Acarbosa (Martindale, 2007)
Sinonim : Acarbose; Acarbosum; Akarbos
Nomor regestasi CAS : 56180-94-0
Berat molekul : 645.60
Rumus molekul : C 46.51%, H 6.71%, N 2.17%, O 44.61%
Deskripsi : Berbentuk amorp, higroskopis, berwarna putih/
kekuning-kuningan, sangat mudh larut dalam air,
larut dalam metal alcohol dan praktis tidak larut
dalam diklorometan.
Mekanisme kerja :Berkhasiat menghambat enzim glukosidase
(matase, sukrase dan glukomilase) yang perlu untuk

Dosis
Efek samping

2.8. Etil asetat (Merk)

Sinonim
Sifat kimia dan fisika
23
perombakan di/polisakarida dari makanan menjadi
monosakarida, dengan demikian penyerapan
glukosa diperlambat, sehingga fluktuasi glukosa
darah menjadi lebih kecil dan nilai rata
menurun.
: 3 dd 50 mg langsung sebelum makan, bila perlu
dinaikan 1-2 minggu sampai maksimal 3 dd 100
mg/minggu.
: Terbentuknya banyak gas di usus dan kejang usus
diakibatkan penumpukan hidratang yang tidak
dicerna didalam usus.
(Merk)
Gambar 3. Etil asetat
Sinonim : Etil ester, ester asetat, ester etanol
Sifat kimia dan fisika : Etil asetat adalah pelarut polar menengah yang
volatil (mudah menguap), tidak beracun, dan
tidak higroskopis. Etil asetat me
penerimaikatan hidrogen yang lemah, dan bukan
suatu donor ikatan hidrogen karena ti
proton yang bersifat asam (yaitu hidrogen yang
terikat pada atom elektronegatif
perombakan di/polisakarida dari makanan menjadi
monosakarida, dengan demikian penyerapan
perlambat, sehingga fluktuasi glukosa
darah menjadi lebih kecil dan nilai rata-ratanya
: 3 dd 50 mg langsung sebelum makan, bila perlu
2 minggu sampai maksimal 3 dd 100
ak gas di usus dan kejang usus
diakibatkan penumpukan hidratang yang tidak

Etil ester, ester asetat, ester etanol
polar menengah yang
(mudah menguap), tidak beracun, dan
Etil asetat merupakan
yang lemah, dan bukan
suatu donor ikatan hidrogen karena tidak adanya
(yaitu hidrogen yang
elektronegatif seperti flor,
24

oksigen dan nitrogen. Etil asetat dapat
melarutkan air hingga 3%, dan larut dalam air
hingga kelarutan 8% pada suhu kamar.
Kelarutannya meningkat pada suhu yang lebih
tinggi. Namun demikian, senyawa ini tidak stabil
dalam air yang mengandung basa atau asam.
Nama CAS :10238-21-8(merek)
Rumus molekul : C
4
H
8
O
2

Berat molekul : 88.12 g/mol
Deskripsi : Cairan tak berwarna
Penggunaan : Secara luas digunakan sebagai bahan pelarut
untuk indusri dan bahan pelarut untuk ekstraksi.
2.9. Metode Pengujian
2.9.1. Metode induksi aloksan
Keadaan diabetes pada hewan uji ini dapat dilakukan dengan
cara pankreotomi dan juga secara kimia. Zat-zat kimia sebagai induktor
diabetogen antara lain aloksan dan streptozosin yang pada umumnya
dapat diberikan secara parenteral. Zat diatas mampu menginduksi
hiperglikemi yang permanen dalam waktu dua samapi tiga hari.
Prinsip metodenya adalah kepada hewan uji dilakukan degan
memberikan aloksan monohidrat secara intrevena dengan dosis 140
mg/kg bb. Hewan uji yang berbeda dengan kondisi yang berbeda akan
menghasilkan dosis yang berbeda sehingga uji pendahuluan tetap
25

dilakukan delapan hari setelah pemberian aloksan. Pemberian obat
antidiabetik secara oral dapat menurunkan kadar glukosa darah
dibandingkan terhadap hewan uji normal.
Keadaan diabetes pada hewan uji dilakukan dengan
memberikan aloksan monohidrat secara intravena dengan dosis 140
mg/kg bb. Hewan uji yang berbeda sehingga uji pendahuluan tetap
dilakukan untuk menetapkan dosis aloksan. Selanjutnya perkembangan
hiperglikemia diperiksa setiap hari. Pemberian tanaman obat yang akan
diuji dilakukan delapan hari setelah pemberian aloksan. Pemberian obat
antidiabetik secara oral dapat menurunkan kadar glukosa darah
dibandingkan terhadap hewan uji normal.
Keadaan diabetes permanen pada hewan coba dapat dicapai
dengan pemberian dosis aloksan yang optimum. Sebelum mencapai
keadaan tersebut, hewan akan mengalami beberapa tahapan yang
fluktuatif dimana terjadi fase hiperglikemia, fase hipoglikemia dan
kadang-kadang secara spontan akan kembali normal bahkan dapat
terjadi kematian. Adapun fase-fase yang terjadi adalah (Jamalia, 2005) :
Pertama : setelah 5 sampai 19 menit pemberian aloksan secara
intravena akan terjadi fase hipoglikemia awal dimana saraf otonom
akan mempengaruhi sel beta pankreas agar melepaskan insulin yang
tersimpan sehingga insulin masuk ke peredaran darah dan
menyebabkan hipoglikemia. Fase ini berlangsung singkat namun dapat
berakibat fatal pada hewan.
26

Kedua : dalam fase ini mula-mula terjadi stimulasi
orthosimpatik dimana terjadi kekurangan insulin yang disebabkan
adanya inhibisi sekresi insulin yang disebabkan adanya inhibisi sekresi
insulin dalam sel-sel beta pankreas. Fase ini berlangsung 30 sampai 120
menit setelah pemberian aloksan. Dalam fase ini kadang-kadang kadar
glukosa mencapai 6 g/l.
Ketiga : pada fase ini terjadi hipoglikemia sekunder dan kadang
terjadi konvulsi pada hewan. Pada fase ini kadar glukosa darah
menurun dan mencapai keadaan yang lebih gawat dari semula. Tahap
yang terjadi antara jam ketiga atau jam kesepuluh setelah pemberian
aloksan secara intravena sangat berbahaya dan dapat menyebabkan
kematian. Untuk kedaan fatal dianjurkan pemberian glukosa.
Keempat : fase terjadinya hiperglikemia awal permanen. Pada
fase ini hewan menjadi hiperglikemia permanen. Terjadi setelah 2
sampai 8 jam setelah pemberian aloksan secara intravena. Tetapi pada
fase ini hewan dapat pula menjadi normal kembali secara spontan
setelah selang waktu tersebut. Oleh karena itu sebaiknya pemeriksaan
kadar gula darah dilakukan setelah tahap keempat tersebut atau hari ke-
3, diperkirakan sindrom diabetes permanen terjadi akibat rusaknya
sebagian sel-sel beta pulau langerhans, tetapi ada pula yang
menyatakan bahwa haya fungsi sel Langerhans saja yang ambang
rangsangnya menurun (Jamalia, 2005).

27

2.9.2. Metode uji toleransi glukosa oral. (Depkes, 1993)
Kemampuan tubuh untuk menggunakan karbohidrat disebut
toleransi karbohidrat (toleransi glukosa). Dengan memberikan glukosa
1 g/kg bb secara oral, kadar glukosa darah akan naik, tetapi tetap dalam
keadaan normal tidak pernah melebihi 10 sampai 170 mg/100 ml.
Puncak kadar glukosa dalam atau 1 jam dan kembali normal setelah
2-3 jam.
Prinsip metodenya adalah kepada hewan uji yang telah
dipuasakan selama 20-24 jam, diambil darah venanya lalu diberikan
bahan uji obat antidiabetes dan diberi larutan glukosa peroral.
Kemudian cuplikan darah diambil lagi setelah interval waktu tertentu.

28

BAB III
KERANGKA KONSEP

3.1. Alur Penelitian

Menurut empiris biji jinten
hitam dapat menurunkan
glukosa darah
Serbuk biji jinten hitam
Ekstraksi dan partisi
Pengujian fraksi etil asetat
Aklimatisasi tikus (2 minggu)
Metode induksi aloksan Metodetoleransi glukosa
Pemeriksaan kadar glukosa
darah tikus (hari ke-17, 21 dan
28)
Pemeriksaan kadar glukosa
darah tikus (menit ke-30, 60,
90, 120, 150 dan 180)
Analisa data
29

BAB IV
METODE PENELITIAN

4.1. Tempat Dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di laboratorium Fakultas Kedokteran dan
Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.
Berlangsung mulai dari bulan April 2009 sampai Agustus 2009.
4.2. Alat dan Bahan
4.2.1. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut :
Timbangan hewan, kandang tikus beserta tempat makanan dan minum,
sonde oral, jarum suntik, hot plate, blender, magnetic stirer, destiller, oven,
timbangan analitik, holder, glukometer dan tes strip, vacum rotavapor,
kertas saring, kapas, dan alat-alat gelas.
4.2.2. Bahan
Bahan yang digunakan adalah biji jinten hitam (Nigella sativa
linn), dengan spesifikasi warna hitam, bau aromatik, dan rasa agak pedas
yang diperoleh dari toko Isykarima yang di impor dari Mesir, gibenklamid
sebagai obat pebanding induksi aloksan dan akarbose sebagai obat
pebanding uji toleransi glukosa.

30

4.3. Prosedur Kerja
4.3.1. Pembuatan Simplisia
Pembuatan simplisia yang baik dan memenuhi syarat terdiri dari
tahap-tahap sebagai berikut : sortasi, pencucian, perajangan, pengeringan,
penggilingan dan pengayakan.
4.3.2. Ekstraksi (Harbone, 1996)
Simplisia biji jinten hitam (Nigella sativa L) diekstraksi dengan
metode maserasi secara bertingkat dengan menggunakan pelarut etanol
70 % sehingga didapat ekstrak, lalu ekstrak tersebut dievaporasi dengan
vacuum evaporator sehingga didapat ekstrak kental kemudian di
tambahkan pelarut etil asetat kemudian partisi hingga terbentuk 2 lapisan,
lapisan ekstrak etil asetat tersebut diuji aktivitas penurunan kadar glukosa
darah.
a. Ditimbang serbuk simplisia 2000 gram , kemudian dimasukkan ke
dalam Erlenmeyer, ditambahkan pelarut etanol 70 % sampai serbuk
simplisia terendam dan terdapat lapisan pelarut setebal 3 cm di atas
serbuk simplisia.
b. Erlenmeyer ditutup maserasi selama satu hari sambil sesekali diaduk.
c. Disaring hasil maserasi dengan menggunakan kapas di atas corong
sehingga didapatkan filtrate, selanjutnya filtrate yang dihasilkan
disaring lagi dengan menggunakan kertas saring. Kemudian
dimaserasi kembali sampai nampak warna pucat.
31

d. Filtrat yang didapatkan kemudian diuapkan pelarutnya dengan
menggunakan rotary evaporator vakum sampai didapatkan ektrak
kental.
e. Ekstrak kental ditambahkan air aquadest sebanyak 100 150 lalu
pindahkan pada corong pisah kemudian masukan etil asetat sebanyak
100 ml kemudian di kocok, lakukan partisi sampai warna pelarut
menjadi jernih kembali kemudian ambil lapisan fraksi etil asetat.
f. Fraksi etil asetat yang didapat kemudian di murnikan dengan
penambahan tragakan, kocok kuat lalu disaring menggunakan kertas
saring.
g. Fraksi etil asetat murni kemudian diuapkan dengan rotary evaporator
hingga didapatkan fraksi kental etil asetat. Kemudian di buat larutan
uji dan diberikan kepada hewan uji.
4.3.3. Uji Penapisan Fitokimia
a. Identifikasi golongan alkaloid
Sebanyak + 5 gram serbuk dilembabkan dengan 5 ml
ammoniak 25 % digerus dalam mortir, kemudian ditambahkan 20 ml
kloroform dan digerus kembali dengan kuat, campuran tersebut
disaring dengan kertas saring, filtrat berupa larutan organik diambil
(sebagai larutan A), sebagai larutan A (10 ml) diekstraksi dengan 10
ml larutan HCl 1:10 dengan pengocokan dalam tabung reaksi, diambil
larutan bagian atasnya (larutan B). Larutam A diteteskan beberapa
tetes pada kertas saring dan disemprot atau ditetesi dengan pereaksi
Dragendroff, terbentuk warna merah atau jingga pada kertas saring
32

menunjukkan adanya senyawa alkaloid. Larutan B dibagi dalam 2
tabung reaksi, ditambahkan masing-masing pereaksi Dragendroff
dan pereaksi Mayer, terbentuk endapan merah bata dengan pereaksi
Dragendroff atau endapan putih dengan pereaksi Mayer menunjukkan
adanya senyawa alkaloid.
b. Identifikasi golongan flavonoid
Sebanyak + 10 gram serbuk ditambah 100 ml air panas,
didihkan selama 5 menit, saring. Ambil 5 ml filtratnya (dalam tabung
reaksi), ditambahkan serbuk Mg secukupnya dan 1 ml asam klorida
pekat dan 2 ml amil alkohol, kocok kuat dan biarkan memisah.
Terbentuknya warna merah, kunig, atau jingga pada lapisan amil
alkohol menunjukkan adanya flavonoid.
c. Identifikasi golongan saponin
Serbuk dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambah 10
ml air panas. Setelah dingin kocok kuat secara vertikal selama 10
detik. Terbentuknya busa yang stabil, menunjukkan adanya saponin,
bila ditambahkan 1 tetes HCl 1% busa tetap stabil.
d. Identifikasi golongan steroid dan triterpenoid
Sebanyak + 5 gram serbuk dimaserasi dalam 20 ml eter
selama 2 jam kemudian disaring. Diuapkan dalam cawan penguap
sampai kering. Ditambahkan 2 tetes asetat anhidrat dan 1 tetes asam
sulfat pekat ke dalam residu. Terbetuknya warna hijau atau merah
menunjukkan adanya steroid/triterpenoid.
33

e. Identifikasi golongan tanin
Sebanyak + 10 gram serbuk ditambah 10 ml air, didihkan
selama 15 menit, setelah dingin kemudian di saring dengan kertas
saring. Filtrat ditambah 1-2 tetes FeCl
3
1 %, terbentuknya warna biru,
hijau atau hitam menunjukkan adanya seyawa golongan tanin.
f. Identifikasi golongan kuinon
Sebanyak + 1 gram serbuk dipanaskan dalam air selama 5
menit, disaring. Sebanyak ml filtat ditambah 5 ml NaOH 1 N,
terbentuk warna merah menunjukkan adanya kuinon.
g. Identifikasi golongan minyak atsiri
Sebanyak + 2 gram serbuk dimasukkan ke dalam tabung
reaksi (volume 20 ml), tambahkan 10 ml pelarut petroleum eter. Pada
mulut tabung dipasang corong yang diberi lapisan kapas yang telah
dibasahi dengan air, kemudian disaring dengan kertas saring. Filtrat
yang diperoleh diuapkan pada cawan penguap, selanjutnya residu
dilarutkan dengan pelarut etanol 95 % sebanyak 5 ml lalu saring
dengan kertas saring. Filtratnya diuapkan dengan cawan penguap,
residu yang berbau aromatik menunjukkan adanya senyawa golongan
minyak atsiri.
4.3.4. Rancangan percobaan
Hewan coba yang digunakan adalah tikus putih jantan galur
Wistar, berumur 4-5 bulan dengan berat badan 180-250 gram
diaklimatisasi selama dua minggu agar dapat menyesuaikan dengan
34

lingkungannya. Selama proses adaptasi, dilakukan pengamatan kondisi
umum dan penimbangan berat badan.
a. Induksi aloksan
Hewan uji dipilih sebanyak 36 ekor tikus putih jantan secara
acak untuk dibagi menjadi 6 kelompok, masing-masing terdiri dari 6
ekor. Penentuan jumlah tikus tiap kelompok, dihitung berdasarkan
rumus Federer : (n-1) (t-1) 15, dimana t menunjukkan jumlah
perlakuan dan n menunjukkan jumlah ulangan minimal dari tiap
perlakuan (Sudjana, 1992).
b. Metode toleransi glukosa
Hewan uji dipilih sebanyak 32 ekor tikus putih jantan secara
acak untuk dibagi menjadi 4 kelompok, masing-masing terdiri dari 8
ekor. Penentuan jumlah tikus tiap kelompok, dihitung berdasarkan
rumus Federer : (n-1) (t-1) 15, dimana t menunjukkan jumlah
perlakuan dan n menunjukkan jumlah ulangan minimal dari tiap
perlakuan (Sudjana, 1992).
Tabel 1. Pembagian Kelompok Hewan Uji induksi aloksan
Kel
Jml
Tikus
Perlakuan
1 6 Kontrol normal, diberi aqudest 1 ml/200 g bb
2 6
Kontrol negatif, dibuat diabetes, diberi aqudest 1
ml/200 g bb
35

Tabel 2. Pembagian Kelompok Hewan Uji Toleransi Glukosa

4.3.5. Pembuatan Sediaan Uji dan Dosis
a) Dosis ekstrak biji jinten hitam
Dosis dipakai berdasarkan penelitian Al-awdi dan Guma tahun
1987 bahwa dengan dosis 41 mg/hari biji jinten hitam tidak
3 6
Kontrol positif, dibuat diabetes,
diberi suspensi glibenklamid 0,1 mg/200 g bb
4 6
Dibuat diabetes, diberi sediaan uji ekstrak kental biji
jinten hitam 41 mg/200 g bb
5 6
6 6
Kel Jml Tikus Perlakuan
1 8 Kontrol normal, diberi aqudest 1 ml/200 g bb
2 8
Kontrol negatif, diberi glukosa, diberi air suling 1
ml/200 g bb
3 8
Kontrol positif, diberi glukosa,
diberi suspensi akarbosa 1,0 mg/200 g bb
4 8
Diberi glukosa, diberi sediaan uji fraksi etil asetat
biji jinten hitam dosis potensial pada metode
induksi aloksan.
36

memberikan efek yang signifikan terhadap penurunan kadar glukosa
darah tikus dengan metode induksi streptotozin. Dalam penelitian ini
dilakukan percobaan dengan dosis fraksi etil asetat biji jinten hitam
yang digunakan adalah :
Dosis rendah 41 mg/ 200 g bb
Dosis sedang 82 mg/ 200 g bb
Dosis tinggi 164 mg/ 200 g bb
Volume larutan uji yang di berikan kepada setiap kelompok uji
dan kontrol pembanding sama dengan volume air suling yang diberikan
kepada kontrol normal dan kontrol perlakuan yaitu sebanyak 1 ml / 200
g.
b) Dosis glibenklamid
Glibenklamid diberikan dalam bentuk suspensi dengan CMC
sesuai dosis oral efektif pada manusia 5 mg/60 kg bb yang
dikonversikan berdasarkan rumus HED, yaitu dosis untuk setiap 200 g
bb tikus adalah 0,1 mg/200 g bb tikus.
c) Dosis akarbosa
Akarbosa diberikan dalam bentuk suspensi dengan CMC sesuai
dosis oral efektif pada manusia 50 mg/60 kg bb yang dikonversikan
berdasarkan rmus HED, yaitu dosis untuk setiap 200 g bb tikus adalah
1,0 mg/200 g bb tikus.
d) Dosis aloksan
Dosis aloksan ditetapkan berdasarkan hasil uji pendahuluan dan
penelitian sebelumnya. Diambil dosis yang pada hari ke-7
37

menyebabkan hiperglikemia tetapi belum menyebabkan kematian pada
tikus. Dosis aloksan yang digunakan dalam percobaan ini adalah 13
mg/200g bb (maria, 2001).
e) Dosis glukosa
Dosis glukosa ditetapkan berdasarkan hasil uji pendahuluan dan
penelitian sebelumnya. Diambil dosis yang setelah pemberian
menyebabkan hiperglikemia tetapi belum menyebabkan kematian pada
tikus.Dosis glukosa yang digunakan pada percobaan ini adalah adalah
200 mg/ 200 g bb pemberianya secara oral.
4.3.6. Cara Pengambilan Darah dan Pengkuran Kadar Glukosa Darah
Sebelum pengambilan darah, tikus dimasukkan ke dalam kandang
kecil sedemikian rupa hingga tidak dapat bergerak. Kemudian ekor tikus
dibersihkan dengan alkohol 70%. Selanjutya ujung ekor tikus digunting
0,2 cm dari ujung ekor, dilakukan pemijatan perlahan terhadap ekor agar
darah keluar. Kemudian diukur kadar gula darah dengan alat glukometer.
4.3.7. Percobaan
a. Metode induksi aloksan
Pada uji pendahuluan dilakukan upaya peningkatan kadar
glukosa darah dengan menginduksi tikus dengan aloksan 13 mg/200 g
bb. Setelah penginduksian tersebut, kadar glukosa darah tikus dikontrol
pada hari ke-3, ke-7 dan ke-14 untuk meyakinkan bahwa aloksan
dengan dosis tersebut menyebaban kerusakan pankreas.
38

Pada hari ke-3 percobaan dimulai, dilakukan penentuan kadar
glukosa puasa seluruh hewan uji secara kuantitatif. Setiap kali
pengambilan darah, semua hewan uji dipuasakan selama 16 jam. Kadar
glukosa yang didapat merupakan kadar glukosa darah awal. Kemudian
larutan aloksan disuntikkan di bagian vena ekor tikus pada kelompok
tikus 2,3,4,5dan 6.
Pada hari ke-14 dilakukan pengambilan darah. Hasil pengukuran
kadar glukosa darah ditetapkan sebagai kadar glukosa darah 14 hari
(hiperglikemia awal). Kemudian tikus diberikan bahan uji sesuai
rancangan percobaan yang diperlihatkan pada tabel 1. Selesai
perlakukan, semua tikus diistirahatkan di dalam kandang masing-
masing dan diberi makan dan minum.
Pemberian larutan bahan uji, pembanding dan air suling
dilakukan setiap hari selama 2 minggu. Pengukuran kadar glukosa
darah selanjutnya dilakukan pada hari ke-3, ke-7 dan ke-14 setelah
pemberian bahan uji yang pertama (Antia dkk, 2005).

b. Metode toleransi glukosa
Sebelum uji toleransi glukosa, tikus di aklimitasi selama dua
minggu agar bisa menyesuaikan diri kemudian tikus di timbang berat
badannya. Kadar glukosa awal di ukur untuk menit ke 0, sebelumnya
tikus di puasakan selama 16 -18 jam tujuanya untuk menghilangkan
faktor yang mempengaruhi perhitungan glukosa darah. Kemudian tikus
39

diberikan bahan uji sesuai rancangan percobaan yang diperlihatkan
pada tabel 2.
Ekstrak jinten hitam yang diberikan ialah ekstrak yang potensial
dari hasil induksi aloksan, setelah jam pemberian ekstrak, diberikan
glukosa 200 mg/200 g berat badan, kemudian di periksa kadar gula
darahnya pada menit ke 30, 60, 90, 120, 150 dan 180.
4.4.8. Uji Statistik Terhadap Kadar Glukosa Darah
Hasil percobaan dihitung secara statistik, dimana kadar glukosa darah
awal untuk kelompok hewan uji yang diinduksi aloksan dan toleransi
glukosa diuji kenormalannya dengan metode Kolmogorov-Smirnov dan
homogenitasnya dengan metode Levene. Bila kedua uji ini dipenuhi maka
dilanjutkan dengan uji Analisis Varian satu arah (ANAVA) untuk melihat
perbedaan antar kelompok (Sudjana, 1992). Jika ada perbedaan secara
bermakna antar kelompok perlakuan maka di lanjutkan dengan uji Kruskal
Wallis untuk melihat perbedaan antar kelompok. Jika masih ada perbedaan
secara bermakna antar kelompok perlakuan maka dilanjutkan dengan uji
Beda Nyata Terkecil (BNT).

40

BAB V
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

5.1. Hasil Penelitian
5.1.1. Determinasi Tanaman
Determinasi tanaman dilakukan di Herbarium Bogoriense, Pusat
Penelitian Biologi LIPI, Bogor, Jawa Barat. Hasil determinasi
menunjukkan bahwa tanaman ini adalah jenis tanaman jinten hitam
(Nigelala sativa. Llinn) suku Ranuculaceae.
5.1.2. Ekstraksi
Ditimbang 2000 gram serbuk biji jinten hitam (Nigelala sativa.
Linn) dimaserasi dengan etanol 70%, kemudian dikentalkan dengan vacum
rotary evaporator, dan didapatkan ekstrak kental 173,5 g. ekstrak kental
kemudian di fraksinasi dengan etil asetat dan di kentalkan dengan vacum
rotavapor dan didapatkan 25,2 g fraksi kental biji jinten hitam.
5.1.3. Hasil Pengujian Ekstrak
Dari hasil pengujian ekstrak biji jinten hitam yang di fraksinasi
dengan etil asetat didapat susut pengeringan ekstrak biji jinten hitam
sebesar 0. 155 % sedangkan hasil pengujian kadar air ekstrak biji jinten
hitam sebesar 4,87 %.

41

5.1.4. Penapisan Fitokimia
Berdasarkan hasil pemeriksaan penapisan fitokimia biji jinten hitam
(Nigelala sativa. Llinn) terdapat beberapa golongan senyawa. Hasilnya
dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil pemeriksaan penapisan fitokimia biji jinten hitam
Golongan senyawa Hasil penapisan
a. Alkaloid
b. Flavonoid
c. Saponin
d. Steroid/triterpenoid
e. Tannin
f. Kuinon
g. Minyak Atsiri
+
+
+
+
+
+
-
Keterangan : (+) Memberikan reaksi positif, (-) Memberikan reaksi negatif
5.1.5. Hasil Pengukuran Kadar Glukosa Darah
Tabel 4. Hasil pada metode induksi aloksan
Waktu
(hari)
Kadar rata-rata glukosa darah dan standar devasi
KLNR KLPF KLNF DOS1 DOS2 DOS3
0 84,75-3,59 85,503,41 83,75-1,25 87,753,30 862,27 86,752,75
14 88,50-16,84 199,5049,47 168,5035,30 164,2523,93 150.514,47 150,002,17
17 90,00-14,14

72,5027,38 165,505,19 109,75-8,99 122.7510,21 118,256,70
21 89,75-14,15 77,0024,45 170,00-4,08 85,004,32 99.257,88 96,004,89
28 90,00-23,10 78,5012,66 177,506,45 80,256,60 87.55,68 91,006,95
Keterangan :
KLNR : Kontrol normal
KLPF : Kontrol positif
KLNF : Kontol negatif
DOS1 : Dosis 41 mg
DOS2 : Dosis 82 mg
DOS3 : Dosis 162 mg
42

Tabel 5. Hasil pada metode toleransi glukosa aloksan
Waktu
(hari)
Kadar rata-rata glukosa darah dan standar devasi
KLNR KLPF KLNF DOSP
0
105.8322,04 87.1612,84 9155,51 100.519,78
30
94.169,64 141.8319,13 166.664,45 153.514,70
60
94.338,84 102.6616,58 150.666,68 107.513,42
90
874,42 101.510,54 10318,28 92.8315,51
120
86.3320,52 8711,64 97.3314,58 96.510,29
150
878,76 9613,95 100.6618,00 93.1610,22
180
10612.64 944,28 95.832,71 87.338,28
Keterangan :
KLNR : Kontrol normal
KLPF : Kontrol positif
KLNF : Kontol negatif
DOSP : Dosis potensial

5.2. Pembahasan
Jinten hitam yang di gunakan untuk penelitian sebelumnya
dilakukan determinasi terlebih dahulu untuk memastikan bahwa tanaman
yang diteliti adalah jinten hitam. Pelarut etanol yang digunakan untuk
proses ekstraksi sebelumnya didestilasi terlebih dahulu supaya etanol benar-
benar jernih dan terhindar dari pengotor. Pelarut etanol yang digunakan
adalah etanol 96% yang kemudian diencerkan menjadi etanol 70% supaya
lebih mudah menarik senyawa-senyawa yang terkandung dalam simplisia
yang meliputi senyawa polar, semi polar dan non polar.
Cara ekstraksi yang digunakan adalah maserasi, karena cara ini lebih
mudah dilakukan, alat yang digunakan sedehana dan maserat yang
43

digunakan cukup banyak. Hasil maserasi kemudian ditambahkan tragakan
untuk menarik pengotor yang ada dalam ekstak, ekstrak lalu disaring dan
dikentalkan dengan vacum rotary evaporator untuk menjadi ekstrak kental.
Untuk mendapatkan fraksi etil asetat maka dilakukan partisi ekstak etanol
kental yang didapat dalam pelarut etil asetat. Partisi dilakukan hingga
lapisan fraksi etil asetat menjadi jernih kembali untuk membuktikan bahwa
senyawa semipolar yang terdapat dalam ekstrak etanol tidak dapat ditarik
kembali oleh etil asetat.
Penelitian ini menggunakan tikus sebagai hewan uji karena mudah
didapat, murah dan telah ada penelitian sebelumnya yang berhasil. Tikus
purtih jantan pada usia 4-5 bulan adalah tikus dewasa muda yang
mempunyai keadaan fisiologik yang optimum. Sebelum digunakan, tikus
diaklimatisasi selama 2 minggu, agar dapat menyesuaikan diri dengan
lingkungannnya selama penelitian berlangsung.
Tikus yang dipilih untuk penelitian adalah tikus yang sehat dengan
ciri-ciri : bulu bersih, mata merah jernih bersinar, tingkah laku normal dan
berat badan bertambah setelah diaklimatisasi menjadi 180-300 g. selama
pemeliharaan semua tikus ditimbang, diberi makan dan minum dengan
takaran yang sama untuk setiap ekor. Sebelum dilakukan percobaan, tikus
diaklimatisasi selama 2 minggu agar dapat menyesuaikan diri dengan
lingkungannya selama penelitian berlangsung.
Sebelum diberi perlakuan, tikus dipuasakan terlebih dahulu untuk
meniadakan pengaruh zat-zat lain pada pengukuran kadar glukosa darah
puasa sebagian kadar glukosa darah awal. Penelitian ini menggunakan
44

metode induksi aloksan dan toleransi glukosa yang merupakan uji praklinik
yang lebih mendekati keadaan penderita diabetes yang sebenarnya.
Terlebih dahulu dilakukan percobaan dengan menggunakan metode
induksi aloksan, pada percobaan ini pankreas hewan uji coba dirusak
dengan pemberian aloksan secara intravena sehingga pankreas hanya dapat
menghasilkan sedikit insulin dan terjadi hiperglikemia pada hewan uji.
Fraksi etil asetat biji jinten hitam diuji kemampuannya untuk merangsang
sekresi insulin dari pankreas yang telah rusak sehingga dapat menurunkan
kadar glukosa darah.
Pada penelitian ini digunakan 3 kelompok kontrol yaitu kontrol
normal, kontrol negatif dan kontrol positif. Kelompok Kontrol normal
diperlukan untuk mengetahui kadar normal glukosa darah selama
percobaan. Kontrol negatif yang diinduksi dengan aloksan sehingga menjadi
diabetes diperlukan untuk mengetahui peningkatan kadar glukosa darah dari
keadaan normal selama percobaan. Sedangkan kontrol positif dalam
penelitian ini adalah glibenklamid, diperlukan untuk melihat pengaruh obat
anti diabetik oral yang telah terbukti khasiatnya untuk menurunkan kadar
glukosa darah. Glibenklamid merupakan obat golongan sulfonylurea
generasi kedua, yang sering digunakan oleh pasien diabetes mellitus.
Karena glibenklamid tidak larut dalam air, maka disuspensikan dengan zat
pensuspensi CMC (Carboxy Methy Cellulosa) 1 %.
Berdasarkan penelitian sebelumnya, dosis aloksan adalah13 mg/200
g bb/hari yang diberikan secara intravena.. Bahan uji yang digunakan dalam
penelitian ini berupa fraksi etil asetat biji biji jinten hitam dengan dosis 41
45

mg/200 g bb, 82 mg/200 g bb, dan 164 mg/200 g bb. Sedangkan dosis
kontrol positif yang digunakan adalah 0,1 mg/200 g bb. Dosis ini
didapatkan berdasarkan dosis efektif oral pada manusia yang dikonversikan
ke dosis tikus. Pemberian bahan uji dilakukan satu kali sehari peroral
dengan menggunakan sonde lambung selama 2 minggu berturut-turut.
Pada hari pertama percobaan, sebelum diinduksi dengan aloksan,
kadar glukosa darah tikus seluruh kelompok menunjukkan hasil yang
normal. Pada hari ke-3, 7 dan14 setelah diinduksi, hewan uji yang telah
diinduksi aloksan diperiksa kadar glukosa darahnya. Hasilnya menunjukkan
hewan uji tersebut mengalami hiperglikemia mulai terlihat pada hari ke-3, 7
dan hari ke-14 mengalami hiperglikemia yang sangat tinggi setelah
diinduksi, kelompok hewan yang diinduksi aloksan mengalami keadaan
hiperglikemia. dari penampakan fisik, tikus yang mengalami hiperglikemia
tersebut mengalami penurunan berat badan, polidipsi, polifagi dan poliuri
yang jelas terlihat. Keadaan kandang dari kelompok tikus yang mengalami
hiperglikemia tersebut menjadi lebih lembab dan berbau tidak sedap dari
pada kandang kelompok tikus normal.
Pada hari ke-17, Ke-20 dan ke 28 kadar glukosa darah kontrol normal
masih tetap dalam rentang normal sedangkan kontrol negatif mengalami
hiperglikemia yang semakin parah. Tikus yang daya tahan tubuhnya tidak
kuat sangat berisiko mengalami kematian. Sehingga harus selalu dijaga agar
waktu untuk tikus kontrol negatif tersebut dipuasakan tepat dan tidak
menimbulkan kematian. Untuk kontrol positif dan uji terlihat penurunan
kadar glukosa darah secara bertahap pada hari ke-3, ke-6 dan ke-14 setelah
46

perlakuan. Keadaan fisik tikus juga mengalami perbaikan berupa
peningkatan berat badan, dan menurunnya gejala polidipsi dan polifagi.
Namun penurunan kadar glukosa darah yang paling cepat terjadi pada
kelompok uji dosis 41 mg/200 g bb, dimana pada hari ke-14 setelah
diberikan sediaan uji menunjukkan kadar glukosa dalam rentang normal.
Berdasarkan uji normalitas Kolmogorov-Smirnov menunjukkan
bahwa kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji pada hari ke-0, 14,
17 dan 21 terdistribusi normal sedangkan pada hari ke-28 tidak terdistribusi
normal. Pada uji homogenitas menunjukan hanya kadar glukosa hari ke-0
yang homogen sedangkan pada hari ke- 14, 17, 21 dan 28 tidak homogen.
Untuk hari ke-0 dilanjutkan dengan uji statistik ANAVA sedangkan untuk
hari ke- 14, 17, 21 dan 28 dilanjutkan dengan statistik metode Kruskal
Wallis.
Pada uji statistik dengan metode Kruskal Wallis menunjukan kadar
glukosa hari ke- 14, 17, 21 dan 28 menunjukan adanya kelompok yang
berbeda secara bermakna oleh sebab itu dilanjutkan dengan metode uji beda
nyata terkecil (BNT).
Pada hari ke-14 BNT menunjukan antara kelompok uji dosis 41
mg/200g bb, 82 mg/200g bb dan 164 mg/ 200g bb memperlihatkan tidak
adanya perbedaan secara bermakna terhadap kontrol negatif, tetapi ada
perbedaan secara beermakna dengan kontrol normal. Hal ini menunjukan
bahwa ada kenaikan kadar glukosa darah yang efeknya signifikan dengan
dosis negatif. BNT menunjukan untuk hari ke-17 antara kelompok uji dosis
41mg/200g bb memperlihatkan tidak ada perbedaan secara bermakna
47

dengan kontrol normal tetapi ada perbedaan secara bermakna dengan
kontrol positif dan negatif. Hal ini menunjukan terjadi penurunan glukosa
darah yang sinifikan pada rentang normal tetapi efeknya tidak signifikan
dengan obat pembanding. Untuk dosis 82mg/200g bb dan 164mg/200g bb
memperlihatkan ada perbedaan secara signifikan antara kontrol normal,
kontrol positif dan kontrol negative. Hal ini menunjukan bahwa kedua dosis
uji tersebut belum menunjukan penurunan yang signifikan. Pada hari ke- 21
BNT menunjukan dosis 41mg/200g bb dan dosis 164mg/200mg bb
memperlihatkan tidak ada perbedaan secara bermakna dengan kontrol
nomal dan kontrol positif tetapi berbeda secara bermakna dengan kontrol
negatif. Hal ini menunjukan bahwa terjadi penurunan yang signifikan
glukosa darah dalam rentang normal dan efeknya signifikan dengan obat
pembanding (kontrol positif). Untuk dosis 84mg/200g bb memperlihatkan
tidak ada perbedaan secara bermakna dengan kontrol normal, tetapi berbeda
secara bermakna dengan kontrol normal dan kontrol positif, menunjukan
terjadi penurunan yang signifikan glukosa darah dalam rentang normal
tetapi tidak signifikan dengan obat pembanding. BNT menunjukan untuk
hari ke-28 dosis 41mg/200g bb, 82mg/200g bb dan 164mg/200g bb
memperlihatkan tidak ada perbedaan secara bermakna dengan kontrol
normal dan kontrol positif tetapi berbeda secara bermakna dengan kontrol
negative. Hal ini menunjukan penurunan yang signifikan dalam rentang
normal dan efeknya signifikan dengan obat pembanding.
Jadi uji statistik dalam metode induksi aloksan pada umumnya dosis
42mg/200g bb sangat berpotensi menurunkan glukosa darah disebabkan
48

pada hari ke-21 dan 28 tidak berbeda secara bermakna dengan kontrol
positif dan berbeda secara bermakna dengan kontrol negatif dalam taraf
nyata.
Selanjutnya dilakukan percobaan dengan metode toleransi glukosa
menggunakan dosis potensial 41mg/200g bb yang diketahui pada percobaan
metode induksi aloksan. Lain halnya dengan metode induksi aloksan, sedian
uji diberikan terlebih dahulu sebelum tejadi efek hiperglikemia diakibatkan
pemberian glukosa secara oral, ini bertujuan untuk mengetahui
penghambatan sediaan uji terhadap absorpsi glukosa dalam tubuh supaya
mencegah kadar glukosa darah yang melambung tinggi.
Penelitian tahap ini berlangsung selama 180 menit. Sebelum
dilakukan pengambilan glukosa darah dan pemberian larutan uji, tikus
dipuasakan selama 16 jam untuk menurunkan kadar glukosa darah, dengan
harapan ketika di beri perlakuan akan mudah terlihat peningkatan kadar
glukosa darahnya, dan juga untuk meningkatkan rasa lapar pada tikus
sehingga pada saat tikus diberi perlakuan mau menelan sediaan uji dengan
mudah.
Pada menit ke-30 kadar glukosa darah meningkat secara nyata di
setiap kelompok kontrol dan uji disebabkan oleh pemberian glukosa oral.
Pada pemberian sediaan uji fraksi etil asetat biji jinten hitam menunjukan
kemampuan dalam menghambat peningkatan kadar glukosa darah mulai
terlihat pada menit ke-60 dalam rentang normal, pada menit ke-90 sedikit
turun dan cenderung stabil hingga menit ke- 180. Begitu pula kontrol positif
(akarbose) menunjukan hal yang sama seperti sediaan uji. Hal ini
49

menunjukan bahwa efektifitas sediaan uji sama baiknya dengan kontrol
normal (akarbose) dalam menghambat peningkatan kadar glukosa darah.
Sedangkan control negative terlihat secara nyata peningkatan kadar glukosa
darah pada menit ke-30 dan sedikit turun pada menit ke-60 tetapi masih
dalam rentang hiperglikemia lalu kembli normal pada menit ke-90 dan terus
stabil hingga menit ke-180.
Antihiperglikemia/antidiabetes dalam metode ini lebih cenderung
pada proses penghambatan meningkatnya kadar glukosa darah, seperti
penghambatan pada alfa glucosidase yang dapat menghambat proses
pemecahan karbohidrat, dan penghambatan transporters sodium-glukosa
yang dapat menghanbat penyerapan glukosa. (Kobayashi et al. 2000).
Berdasarkan uji normalitas Kolmogorov-Smirnov menunjukan
bahwa kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji pada menit ke-0
hingga menit ke-150 terdistribusi normal. Sedangkan uji homogenitas
menunjukan kadar glukosadarah menit ke-0, 30, 60, 120 dan 150 homogen
sedangkan pada menit ke-90 dan 180 tidak homegen. Maka pada menit ke-
90 dan 180 harus dilakukan statistik dengan metode Kruskal Wallis.
Berdasarkan uji statistik pada metode Kruskal Wallis, pada menit
ke-90 menunjukan seluruh hewan uji tidak berbeda secara bermakna,
sedangkan pada menit ke- 180 menunjukan adanya kelompok yang berbeda
secara bermakna oleh sebab itu dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Kecil
(BNT). BNT menunjukan bahwa kelompok uji dosis 42mg/200g bb
memperlihatkan tidak ada perbedaan secara bermakna tehadap dosis
kontrol positif dan negatif dan menunjukan perbedaan secara bermakna
50

dengan kontrol normal. Hal ini menunjukan bahwa efektifitas sediaan uji
sama baiknya dengan obat pembanding (acarbose) dan adanya sedikit
peningkatan kadar glukosa darah pada kontrol normal sedangkan efek
pemberian glukosa oral pada kontrol negatif telah hilang.
Untuk menit ke-0, 30, 60, 120 dan 150 dapat dilakukan statistik
dengan ANAVA untuk melihat perbedaan pada setiap kelompok hewan uji.
Pada menit ke-0, 120 dan 150 menunjukan seluruh kelompok hewan uji
tidak berbeda secara bermakna sedangkan pada menit ke-30 dan 60
menunjukan adanya kelompok yang berbeda secara bermakna oleh sebab itu
dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Terkecil (BNT). BNT menunjukan untuk
menit untuk menit ke-30 dosis 42mg/200g bb memperlihatkan tidak ada
perbedaan secara bermakna terhadap kontrol positif dan negatif. Hal ini
disebabkan oleh pemberian glukosa oral meningkatkan kadar glukosa darah
setelah 30 menit. Untuk menit ke-60 dosis 42mg/200g bb memperlihatkan
tidak ada perbedaan secara bermakna terhadap kontrol positif dan normal,
berbeda secara bermakna dengan kontrol negatif. Hal ini menunjukan
bahwa terjadi penghambatan peningkatan kadar glukosa darah secara
signifikan oleh sediaan uji hingga batas rentang normal.

51

BAB VI
KESIMPULAN DAN SARAN

6.1. Kesimpulan
1. Dosis 41mg/200mg bb menunjukan efek paling bagus dibandingkan
dengan dosis 82mg/200g bb dan dosis 164mg/200g bb dengan penurunan
glukosa darah mencapai 51,14 %, pada hari ke-28.
2. Dosis 41mg/200g bb dibandingkan dengan kontrol positif tidak berbeda
secara bermakna pada menit ke-0, 30, 60, 90, 120,150 dan 180
sedangkan dengan kontrol negatif berbeda secara bermakna untuk menit
ke-60.
6.2. Saran
1. Untuk lebih melengkapi data ilmiah, perlu dilakukan lebih lanjut
mengenai efek hipoglikemia tanaman ini menggunakan metode yang
lebih baik serta mencari kandungan senyawa aktif yang berkhasiat
sebagai senyawa hipoglikemianya.
2. Perlu dilakukan penelitian tentang toksisitas biji jinten hitam (Nigella
sativa Linn) pda hewan uji untuk mengevaluasi batas keamanannya jika
digunakan dalam jangka panjang.

52

DAFTAR PUSTAKA

[ACUC] Animl Care and Use Committes.2005. Guidelines for Survival Bleeding
of Mice and Rates.
Al-awadi FM, Gumaa KA. Studies on the activity of individual plants of an
antidiabetic plant mixture, Acta Diabetol, 1987;24:7-41.
Anonim. Tekhnologi Ekstrak. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan makanan.
Jakarta. 1-17.
Antia,BS, J E Okon 2005. Hypoglycemic Activity of Aquos Leaf Extract of Persea
Americana Mill. Departement of Chemistry, University of Uyo, Uyo
Nigeria.
Barre, KJ. 1949. Le Diabetique Allocanique.
1st
Edition. Actual Pharmacology.
New York; 113-124
Burkill, M.A. Government Of The Straits Settlements And Federated Malay States
By The Crown Agents For The Colonies. Millbank. London. 1935; 1555-
1557
Dalimartha, Setiawan. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Diabetes Mellitus.
Penebar Swadaya. Depok. 2004. 59-60
Departemen Kesehatan RI. 1979. Materia Medika Indonesia. Jilid III. Dirjen
POM. Departemen Kesehatan RI. Jakarta; 112
Departemen Kesehatan RI. Direktorat Budidaya Tanaman Rempah Dan Penyegar.
Jakarta. 2006;
Departemen Kesehatan RI. 1989 Vedemekum Bahan Obat Alam. Dirjen POM.
Jakarta;
Departemen Kesehatan RI 2001. Buku panduan teknologi ekstrak. Direktorat
Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Jakarta; 13-14
Departemen Kesehatan RI. 2006. Pharmaceutical Care Untuk Penyakit Diabetes
Mellitus. Ditjen Bina kefarmasian dan Alkes. Jakarta; 11
Departemen Kesehatan RI. 1979. Farmakope Indonesia. Edisi 3 Jakarta; 9
Departemen Kesehatan RI. 1993. Martindale. The Extra Pharmacopoela. 30
th
.
De Guzman, C.C and Siemonsma, J.S. Plant Resources Of South-East Asia 13.
Backhuys Publishers. Leiden. 1999; 148-151
53

El-Naggar Am, El-Deib AM. A study of some bilogical activities of Nigella sativa
(black seed) Habat El Baraka. J Egypt Pharmacol Exp Ther
1992;11:789-99.
Farnsworth, N.R 1969. Biological and Phytochemical Screening of Plants.
Journal Pharmaceutical Science. 255-265
Ganiswara, SG. Farmakologi dan terapi. Edisi 4. bagian farmakologi fkui.
Jakarta. 1995; 22, 467-481
Ganong WF. 1999. Fisiologi Kedokteran, Edisi ke-14. Jonatan Oswari. Penerbit
Buku Kedokteran EGC. Jakarta. Terjemahan dri : Petrus Andriano.
Harborne, J.B. Metode Fitokimia Penuntun Cara modern Menganalisis
Tumbuhan. Terjemahan: Kosasih P, Soediro Iwang, Bandung ITB. 1996;
6-17.
Jamalia Lia. 2005. Uji Antidiabetes Ekstrak Etanol 96% Buah Mahkota Dewa (
Phaleria macrocarpa Boerl) Pada Tikus Putih Yag Diinduksi Aloksan.
Skripsi. Jakarta. 20-25.
Jacquie SR, Linda MF, Heidi Af, Delisa JA, Rose L. 2004. Canine and Feline
Diabetes Melitus: Nature or Narture?.J. Nutr. 134:2072S-2080S.
Jung B. 2007. Gestational Diabetes. Diabetes Partners in Prevention: A
Publication of the Connecticut Departement of Public Health.
Kaplan L. 1989. Clinical Chemistry Theory, Analysis, and Correlation.
2sc

Edition. Philadelphia, Toronto: The C.V. Mosby Company; 850-855.
Kahn, C.R. 1995, Disorder of Fuel Metabolism, In Becker, K.L. (ed), Principles
and Practice of Endocrinology and Metabolism, 2nd Ed, 1148-54.
Kundiarto, Kunto. Pengaruh Pemberian Ekstrak Kloroform dan n-butanol daun
kembang bulan (Tithonia diversifolia [Hemsley] A. Gray) Terhadap
Penurunan Kadar Glukosa Darah Mencit (Mus musculus). Fakultas
Famasi Universitas Pancasila. 2007.
K Heyne. Tumbuhan berguna indonesia II. Badan Penelitian Dan Pengembangan
Kehutanan. Departemen Kehutanan. 1987; 751
Lawrence, J.C., 1994, Insulin and Oral Hypoglycemic Agents, In Brody, T.M.,
Larner, J., Minneman, K.P., and Neu, H.C. (Ed.), Human Pharmacology,
2nd Ed., 523-539, Mostby, London.
Linder MC. 2006. Biokimia Nutrisi dan Metabolisme. UI Press. Jakarta.
Terjemahan dari : Aminudin Parakkasi.
Mahmud Muhamad Mahir Hasan. 2007. Mukjizat Kedokteran Nabi. Qultum
Media.
54

Martindale. The Complete Drug Reference, 35th edn. (Sweetman S, ed.) London:
Pharmacetical Press,2007.
Maria, Fatma. Pengaruh sari Buah Mengkudu terhadap kadar glukosa darah tikus
putih yang diinduksi aloksan. FMIPA Jurusan Farmasi UI. 2001.
Maryadele J. Oneil, The Merck Index Thirdteen Edition. Merck and Company
Incorporated, Whitehouse station. New Jersey USA. 2001.
Media Informasi Peresepan Rasional Bagi Yenaga Kesehatan Indonesia. 2001.
Non-Insulin Dependent Diabetes Mellitus. Rasional Volume 1, no.3
Murray, RK., Mays PA, Garner DK, Rodwell VW. 1992. Biokimia (Review of
Biochemistry). Edisi 24. EGC; 141-151, 190, 199-200, 185, 212.
[NDIC} National Diabetes Information Clearinghouse. 2005. National Diabetes
Statistics http://diabetes.niddk.nih.gov/dm/pubs/statistics/index.htm.
diakses agustus 2009.
NSW Health Departement.2004. Diabetes in Pregnancy gestatnal diabetes.
NSW Multicutural Health communication service. http://mhcs.Health.
nsw.gov.au. diakses agustus 2009
[Perkeni] Perkumpulan Endokrinologi Indonesia. 2006. Konsensus Pengelolaan
dan Pencegahan Diabetes Mellitus Tipe 2 di Indonesia.
Rees, D, A and Alcolado, J. C., 2005, Animal models of diabetes mellitus,
Diabetic Medicine, 22: 359-370.
Sudjana. 1992. Metode Stastistika. Tarsito. Bandung. 299, 219-307.
Skudelsky. T., 2001, The Mechanism Of Alloxan And Streptozotocin Action In
Cells Of The Rat Pancreas, Physiology Research, 50: 536-554.
Tjay, Tan Hoan Rahardja, Kirana. 2007. Obat-Obat Penting. Penerbit PT Elex
Media
Komputindo. Jakarta; 693, 696-697
Unger, RH and Foster, DW. 1992. Diabetes Mellitus, In Wilson, J.D. and Foster,
D.W. Endocrinology, 1255-1317, W.B Sunders Company, A Division of
Harcourt Brance and Company, London.
Voight, R. 1995. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Alih Bahasa Soendani
Noerono Soewandhi. Universitas Gajah Mada. Yogyakarta; 556, 577-578
Tjitrosoepomo. 2000. Taksonomi Tumbuhan (Spermatophyta). Gadjah Mada
University Press. Yogyakarta;
Watts, H David. 1984. Terapi medic (Handbook of Medical Treatment. Edisi ke-
17. Alih Bahasa Petrus Lukmanto. Penerbit EGC, Jakarta; 240-241
55

Waspadji Sarwono, Darmono, Tjokroprawiro Askandar. 1996. Buku Ajar Ilmu
Penyakit Dalam. Jilid I Edisi ketiga. Balai Penerbit FKUI. Jakarta. 590-
625.
Windolz M. 1983. The Merck Index Anencyclopedian Of Chemicals, Driegs And
Biologocal. 4-43
Yuniarti, Titin. Ensiklopedia Tanaman Obat Tradisional. MedPress. Yogyakarta.
2008; 23-25.

56

Lampiran 1. Gambar Bahan Dan Alat Penelitian

Gambar 4. Biji jinten hitam

Gambar 5. Kandang tikus
57

Gambar 6. Glukose-test

Gambar 7. Pemberian secara oral
58

Lampiran 2. Determinasi Simplisia

59

Lampiran 3. Sertifikat glibenklamid

60

Lampiran 4. Skema Ekstraksi dan Partisi

- Dimaserasi dengan etanol 70%
-Disaring

- Dievaporasi

-Dipartisi

-Dievaporasi

Serbuk biji jinten hitam
Ekstrak etanol 70% Residu jinten hitam
Ekstrak kental etanol
Fraksi etil
asetat
Fraksi air
Fraksi kental
etil asetat
Sediaan uji
Uji efek
hipoglikemia
61

Lampiran 5. Skema Percobaan Metode Induksi Aloksan

Kontrol positif
Persiapan tikus
(dipuasakan 16) jam
Kontrol negatif Kontrol normal Kelompok sediaan
dosis (41, 82, 164)
Pengukuran kadar
glukosa awal
Larutan Na CMC 1% Induksi aloksan (selama 2 minggu)
Pengukuran kadar gula
darah hiperglikemia awal
Larutan Na CMC 1% Larutan Na CMC 1% Uji dengan
glibenklamid
Uji dosis
Pengukuran glukosa darah
(pada hari ke-17, 21 dan 28)
Analisis data
62

Lampiran 6. Skema Percobaaan Metode Toleransi Glukosa

Kontrol positif Kontrol negatif Kontrol normal Kelompok sediaan
dosis potensial
Pengukuran kadar
glukosa menit ke-0
Larutan Na CMC 1%
Persiapan tikus
(dipuasakan 16) jam)
Pemberian glukosa oral
Larutan Na CMC 1% Uji dengan akarbosa Uji dosis
Aquadest
Pengukuran kadar glukosa darah
(menit ke-30, 60, 90, 120, 150, 180)
Analisa data
63

Lampiran 7. Perhitungan Dosis Larutan Uji
A. Fraksi etil asetat biji jinten hitam (Nigella sativa Linn)
1. Perhitungan Dosis
Dosis 1 = 41 mg/200 g bb tikus
Dosis 2 = 41 mg/200 g bb tikus x 2 = 82mg/200g bb tikus
Dosis 3 = 82 mg/200 g bb tikus x2 = 164mg/200g bb tikus
2. Dosis (41 mg/ 200 g bb/hari)
Untuk satu ekor tikus dengan berat badan 200 g, maka volume larutan
sediaan untuk dosis 1 adalah :
VAO =
Dosis x Berat Badan
Konsentrasi

=
41mg/200g x 200 g
41mg/ml

= 1 ml
VAO =
Dosis x Berat Badan
Konsentrasi

=
82mg/200g x 200 g
82mg/ml

= 1 ml
VAO =
DosisxBerat Badan
Konsentrasi

=
164mg/200g x200 g
164mg/ml

= 1 ml
64

B. Larutan Glibenklamid
Tabel 6. Konversi dosis
Species Weight BSA(m
2
) K
m
factor
Manusia
Dewasa
Anak-anak
Baboon
Anjing
Monyet
Kelinci
Guinea pig
Tikus besar
Hamster
Tikus

60
20
12
10
3
1,8
0,4
0,15
0,08
0,02

1,6
0,8
0,6
0,5
0,24
0,15
0,05
0,025
0,02
0,007

37
25
20
20
12
12
8
6
5
3

HED (mg/kg) = animal dose (mg/kg) x

5 mg/60 kg = animal dose x 6/37
0,083 mg/kg = animal dose x 0,162
Animal dose =
0,083 mg/ Kg
0,162

Animal dose = 0.10 mg/ 200 g
2. Dosis I (0,1 mg/ 200 g bb)
sediaan Glibenklamid adalah :
VAO =

=
, /
,/

= 1 ml
65

C. Larutan Acarbosa
HED = animal dose x

50 mg/60 kg = animal dose x 6/37
0,83 mg/kg = animal dose x 0,162
Animal dose =
, /
.

Animal dose = 1,0 mg/200 g
2. Dosis I (1,0 mg/200 g bb)
sediaan Akarbose adalah :
VAO =

=
, /
, /

= 1 ml

D. Larutan Aloksan
Dosis aloksan adalah 65 mg/kg bb
Dosis Aloksan untuk satu ekor tikus dengan berat badan 200 g adalah 13
mg/200 g
Karena induksi Aloksan di buat IV maka volume yang di buat untuk satu
ekor tikus dengan berat badan 200 g dibuat ml. Volume yang di buat
adalah :
VAO =

=
/
/

= ml
66

E. Larutan glukosa
Dosis Glukosa adalah 1 g/kg bb
Dosis Glukosa untuk satu ekor tikus dengan berat badan 200 g adalah
200 mg/200 g, maka volume larutan sediaan Glukosa adalah :
VAO =

=
/
/

= 1 ml

67

Lampiran 8. Penetapan Kadar Air Dan Susut Pengeringan Etil Asetat

A. Data Pengujian Fraksi etil asetat Biji Jinten Hitam
Berat cawan kosong + tutup sebelum pemanasan : 25,3486 g
Berat cawan kosong + tutup setelah pemanasan 30

menit adalah : 25,
3478 g
Berat cawan kosong + 1 g Eksrak adalah : 26,3663 g
Berat cawan kosong + 1 g Ekstrak setelah pemanasan ke-1 selama 30
menit adalah : 26, 2789 g
B. Perhitungan Susut Pengeringan Dan Kadar Air
1. Susut pengeringan =

X 100 %
=
, ,
,
X 100 %
= 0, 155 %

2. Kadar air =

( )
X 100%
=
, ,
, (,)
X 100 %
= 4,87 %

68

Lampiran 9. Daftar Kadar Glukosa Darah Masing-Masing Kelompok
Tabel 7. Kadar glukosa darah metode induksi aloksan
Kelompok 1 (Kontrol normal)
Waktu
(Hari)
Tikus X S
1 2 3 4
0 90 83 84 82 84,75 3,59
14 101 75 73 105 88,50 16,84
3 100 70 90 100 90,00 14,14
7 80 89 80 110 89,75 14,15
14 76 124 85 75 90,00 23,10
Kelompok 2 (Kontrol positif)
Waktu
(Hari)
Tikus X S
1 4
0 85 87 89 81 85,50 3,41
14 249 149 185 215 199,50 49,47
3 61 84 41 104 72,50 27,38
7 66 108 51 83 77,00 24,45
14 93 64 73 84 78,50 12,66
Kelompok 3 (Kontrol negatif)
Waktu
(Hari)
Tikus X S
1 2 3 4
0 85 82 84 84 83,75 1,25
14 142 150 220 162 168,50 35,30
3 167 170 167 158 165,50 5,19
7 170 175 170 165 170,00 4,08
14 185 180 175 170 177,50 6,45
Kelompok 4 (Dosis 41 mg)
Waktu
(Hari)
Tikus X S
1 2 3 4
0 83 90 88 90 87,75 3,30
14 161 199 150 147 164,25 23,93
3 123 103 107 106 109,75 8,99
7 91 83 81 85 85,00 4,32
14 89 79 73 80 80,25 6,60
Waktu
(Hari)
Tikus X S
1 2 3 4
0 90 85 84 85 86 2,70
14 160 143 134 165 150,5 14,47
3 133 130 115 113 122,75 10,21
7 100 110 92 95 99,25 7,88
14 90 91 90 79 87,50 5,68
69

Waktu
(Hari)
Tikus X S
1 4
0 88 84 90 85 86,75 2,75
14 151 150 147 152 150,00 2,16
3 123 112 113 125 118,25 6,70
7 100 94 90 100 96,00 4,89
14 97 85 85 97 91,00 6,92
70

Tabel 8. Kadar glukosa darah metode toleransi glukosa
Kelompok 1 (kontrol normal)
Waktu (menit)
Tikus
X S
1 2 3 4 5 6
0 109 92 92 149 97 96 105.83 22.04
30 110 90 102 86 87 90 94.16 9.64
60 89 83 107 98 100 89 94.33 8.84
90 80 91 86 91 85 89 87 4.24
120 75 56 117 85 88 97 86.33 20.52
150 97 73 95 83 85 89 87 8.76
180 91 124 98 111 115 97 106 12.64
Kelompok 2 (kontrol Positif)
Waktu (menit)
Tikus
X S
1 2 3 4 5 6
0 112 84 78 82 89 78 87.16 12.84
30 110 169 140 149 145 138 141.83 19.13
60 90 80 105 128 103 110 102.66 16.58
90 85 96 108 108 98 114 101.5 10.54
120 70 79 102 87 97 87 87 11.64
150 100 87 112 82 83 112 96 13.95
180 88 95 101 93 92 95 94 4.28
Kelompok 3 (kontrol negatif)
Waktu (menit)
Tikus
X S
1 2 3 4 5 6
0 100 86 86 90 95 89 91 5.51
30 170 168 164 171 168 159 166.66 4.45
60 150 158 140 153 146 157 150.66 6.86
90 91 113 80 90 120 124 103 18.28
120 97 114 74 111 90 98 97.33 14.58
150 95 127 95 118 80 89 100.66 18
180 96 98 98 93 92 98 95.83 2.71
Kelompok 4 (Dosis potensial)
Waktu (menit)
Tikus
X S
1 2 3 4 5 6
0 62 116 100 103 113 109 100.5 19.78
30 168 171 134 153 155 140 153.5 14.70
60 123 94 100 93 115 120 107.5 13.42
90 117 71 90 84 100 95 92.83 15.51
120 95 96 87 116 96 89 96.5 10.29
150 99 78 84 103 102 93 93.16 10.22
180 80 85 95 100 80 84 87.33 8.28

71

Lampiran 10. Persentase Penurunan Kadar Glukosa Darah

A. Metode Induksi Aloksan
P(%) =
hari ke 14 hari uji
hari ke 14
100 %
Keterangan :
P (%) = Persentase penurunan kadar glukosa darah
Hari ke-14 = Hiperglikemia
Hari uji = Kadar glukosa darah setelah perlakuan

Tabel 9. Persentase penurunan pada metode induksi aloksan

Kelompok Perlakuan
% Penurunan glukosa darah
Hari ke-17 Hari ke-21 Hari ke-28
Kontrol pembanding 63,65 % 61,40 % 60,65 %
Dosis 41 mg/200 g bb 33,18 % 48,24 % 51,14 %
Dosis 82 mg/200 g bb 18,43 % 34,05 % 41,86 %
Dosis 164 mg/200 g bb 21,16 % 36,00 % 39,33%

B. Metode toleransi Glukosa
P (%) =
DDK
DDK

DDK
100%
Keterangan :
P(%) = Persentase penurunan kadar glukosa darah
DDK = Daerah di bawah kurva
Negatif = Kontrol negatif
Sediaan uji = Kontrol positif dan dosis potensial

Tabel 10. Persentase penurunan pada metode toleransi glukosa
Kelompok perlakuan Persentase penurunan glukosa darah
Kontrol Positif 12,95%
Dosis Potensial 10,07%

72

Lampiran 12. Kurva Kadar Glukosa Darah

A. Metode Induksi Aloksan

Gambar 8. Kurva kadar glukosa darah rata-rata hewan uji sebelum dan sesudah
diberibahan uji pada hari pengambilan sampel selama 28 hari

B. Metode Toleransi Glukosa

Gambar 9. Kurva kadar glukosa darah rata-rata hewan uji menit ke 0,30,60,90,120
dan 180.

0
50
100
150
200
250
0 14 3 7 14
normal
positif
negatif
41 mg
82 mg
164 mg
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
0 30 60 90 120 150 180
normal
positif
negatif
potensial
73

Lampiran 13. Analisa Data Metode Induksi Aloksan

A. Uji Normalitas

Tabel 11. Sample Kolmogorov Uji normalitas -Smirnov

Puasa hari14 hari 17 hari21 hari28
N 24 24 24 24 24
Normal
Parameters
a,,b

Mean 85.7500 153.5417 113.0833 102.5000 101.3333
Std. Deviation 2.92292 41.29110 32.17874 33.66200 36.72893
Most Extreme
Differences
Absolute .226 .182 .134 .245 .339
Positive .226 .182 .112 .245 .339
Negative -.135 -.182 -.134 -.169 -.179
Kolmogorov-Smirnov Z 1.108 .893 .656 1.201 1.659
Asymp. Sig. (2-tailed) .171 .402 .783 .112 .008
Keputusan : Kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji pada puasa, hari
ke-14, 17 dan 21 terdistribusi normal sedangkan pada hari ke-28
tidak terdistribusi normal pada tarap uji 0,05.

B. Uji Hmogenitas

Tabel 12. Uji Homogenitas

Levene Statistic df1 df2 Sig.
Puasa .708 5 18 .625
hari14 2.928 5 18 .042
hari 17 4.134 5 18 .011
hari21 3.456 5 18 .023
hari28 3.250 5 18 .029

Keputusan : Kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji pada puasa, hari
ke-17 dan 21 homogen sedangkan pda hari ke-14 dan 28 tidak
homogen pada taraf uji 0,05
Dari data normalitas dan homogenitas terdapat data yang tidak
terdistribusi normal dan tidak homogen yaitu pada hari ke-14, 17, 21 dan 28,
oleh karena itu tidak bisa dilakukan uji ANAVA dan harus di lakukan uji
Kruskal Wallis. Untuk data puasa dapat dilakukan uji ANAVA.

74

Keputusan : Kadar glukosa darah seluruh hewan uji pada puasa tidak berbeda
secara bermakna pada taraf uji 0,05.

D. Uji Kruskal Wallis

Tabel 14. Kruskal Wallis

hari14 hari 17 hari21 hari28
Chi-Square 12.219 20.153 13.618 14.471
df 5 5 5 5
Asymp. Sig. .032 .001 .018 .013
Keputusan : Kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji pada hari ke-14,
17, 21 dan 28 berbeda secara bermakna pada tarap uji 0,05.

Dari data Kruskal Wallis kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji
pada hari ke-14, 17, 21 dan 28 berbeda secara bermakna maka, harus dilanjutkan
dengan uji BNT untuk melihat perbedaan disetiap kelompoknya.

C. Uji ANAVA

Tabel 13. Uji ANAVA

Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 40.500 5 8.100 .935 .482
Within Groups 156.000 18 8.667

Total 196.500 23

E. Uji Beda Nyata Terkecil (BNT)
Tabel 15. Uji BNT hari ke-14
(I) kelompok (J) kelompok
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
kontrol normal kontrol positif -111.00000
*
18.56127 .000 -149.9958 -72.0042
75

Keputusan : Dosis 41 mg dibandingkan dengan kontrol normal berbeda secara
bermakna sedangkan dibandingkan dengan kontrol positif, negatif,
dosis 82 mg dan dosis 164 mg tidak berbeda secara bermakna pada
taraf uji 0,05.Dosis 82 mg dibandingkan dengan kontrol normal
kontrol negatif -80.00000
*
18.56127 .000 -118.9958 -41.0042
dosis 41 mg -75.75000
*
18.56127 .001 -114.7458 -36.7542
dosis 82 mg -62.00000
*
18.56127 .004 -100.9958 -23.0042
dosis 164 mg -61.50000
*
18.56127 .004 -100.4958 -22.5042
kontrol positif kontrol normal 111.00000
*
18.56127 .000 72.0042 149.9958
kontrol negatif 31.00000 18.56127 .112 -7.9958 69.9958
dosis 41 mg 35.25000 18.56127 .074 -3.7458 74.2458
dosis 82 mg 49.00000
*
18.56127 .017 10.0042 87.9958
dosis 164 mg 49.50000
*
18.56127 .016 10.5042 88.4958
kontrol negatif kontrol normal 80.00000
*
18.56127 .000 41.0042 118.9958
kontrol positif -31.00000 18.56127 .112 -69.9958 7.9958
dosis 41 mg 4.25000 18.56127 .821 -34.7458 43.2458
dosis 82 mg 18.00000 18.56127 .345 -20.9958 56.9958
dosis 164 mg 18.50000 18.56127 .332 -20.4958 57.4958
dosis 41 mg kontrol normal 75.75000
*
18.56127 .001 36.7542 114.7458
kontrol positif -35.25000 18.56127 .074 -74.2458 3.7458
kontrol negatif -4.25000 18.56127 .821 -43.2458 34.7458
dosis 82 mg 13.75000 18.56127 .468 -25.2458 52.7458
dosis 164 mg 14.25000 18.56127 .453 -24.7458 53.2458
*
18.56127 .004 23.0042 100.9958
kontrol positif -49.00000
*
18.56127 .017 -87.9958 -10.0042
kontrol negatif -18.00000 18.56127 .345 -56.9958 20.9958
dosis 41 mg -13.75000 18.56127 .468 -52.7458 25.2458
dosis 164 mg .50000 18.56127 .979 -38.4958 39.4958
*
18.56127 .004 22.5042 100.4958
kontrol positif -49.50000
*
18.56127 .016 -88.4958 -10.5042
kontrol negatif -18.50000 18.56127 .332 -57.4958 20.4958
dosis 41 mg -14.25000 18.56127 .453 -53.2458 24.7458
dosis 82 mg -.50000 18.56127 .979 -39.4958 38.4958
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
76

dan positif berbeda secara bermakna sedangkan dibandingkan
dengan kontrol negatif, dosis 41 mg dan dosis 164 mg tidak
berbeda secara bermakna pada taraf uji 0.05. Dosis 164 mg
dibandingkan dengan kontrol normal dan positif berbeda secara
bermakna sedangkan dibandingkan dengan kontrol negatif, dosis
41 mg dan dosis 82 mg tidak berbeda secara bermakna pada taraf
uji 0,05.

Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
kontrol normal kontrol positif 17.50000 10.00069 .097 -3.5107 38.5107
*
10.00069 .000 -96.5107 -54.4893
dosis 41 mg -19.75000 10.00069 .064 -40.7607 1.2607
dosis 82 mg -32.50000
*
10.00069 .004 -53.5107 -11.4893
dosis 164 mg -28.25000
*
10.00069 .011 -49.2607 -7.2393
kontrol positif kontrol normal -17.50000 10.00069 .097 -38.5107 3.5107
*
10.00069 .000 -114.0107 -71.9893
dosis 41 mg -37.25000
*
10.00069 .002 -58.2607 -16.2393
dosis 82 mg -50.00000
*
10.00069 .000 -71.0107 -28.9893
dosis 164 mg -45.75000
*
10.00069 .000 -66.7607 -24.7393
*
10.00069 .000 54.4893 96.5107
kontrol positif 93.00000
*
10.00069 .000 71.9893 114.0107
dosis 41 mg 55.75000
*
10.00069 .000 34.7393 76.7607
dosis 82 mg 43.00000
*
10.00069 .000 21.9893 64.0107
dosis 164 mg 47.25000
*
10.00069 .000 26.2393 68.2607
dosis 41 mg kontrol normal 19.75000 10.00069 .064 -1.2607 40.7607
*
10.00069 .002 16.2393 58.2607
*
10.00069 .000 -76.7607 -34.7393
dosis 82 mg -12.75000 10.00069 .219 -33.7607 8.2607
dosis 164 mg -8.50000 10.00069 .407 -29.5107 12.5107
*
10.00069 .004 11.4893 53.5107
*
10.00069 .000 28.9893 71.0107
*
10.00069 .000 -64.0107 -21.9893
dosis 41 mg 12.75000 10.00069 .219 -8.2607 33.7607
77

dosis 164 mg 4.25000 10.00069 .676 -16.7607 25.2607
*
10.00069 .011 7.2393 49.2607
*
10.00069 .000 24.7393 66.7607
*
10.00069 .000 -68.2607 -26.2393
dosis 41 mg 8.50000 10.00069 .407 -12.5107 29.5107
dosis 82 mg -4.25000 10.00069 .676 -25.2607 16.7607
Keputusan : Dosis 41 mg dibandingkan dengan kontrol positif dan negatif
berbeda secara bermakna sedangkan dibandingkan dengan kontrol
normal, dosis 82 mg dan dosis 164 mg tidak berbeda secara
bermakna pada taraf uji 0,05.Dosis 82 mg dibandingkan dengan
kontrol normal, positif dan negatif berbeda secara bermakna
sedangkan dibandingkan dengan dosis 41 mg dan dosis 164 mg
tidak berbeda secara bermakna pada taraf uji 0.05. Dosis 164 mg
dibandingkan dengan kontrol normal, positif dan negatif berbeda
secara bermakna sedangkan dibandingkan dengan dosis 41 mg dan
dosis 82 mg tidak berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05.

Mean
Difference (I-J) Std. Error Sig.
*
9.17348 .000 -99.5228 -60.9772
dosis 41 mg 4.75000 9.17348 .611 -14.5228 24.0228
dosis 82 mg -9.50000 9.17348 .314 -28.7728 9.7728
dosis 164 mg -4.25000 9.17348 .649 -23.5228 15.0228
*
9.17348 .000 -112.2728 -73.7272
dosis 41 mg -8.00000 9.17348 .395 -27.2728 11.2728
dosis 82 mg -22.25000
*
9.17348 .026 -41.5228 -2.9772
dosis 164 mg -17.00000 9.17348 .080 -36.2728 2.2728
*
9.17348 .000 60.9772 99.5228
*
9.17348 .000 73.7272 112.2728
dosis 41 mg 85.00000
*
9.17348 .000 65.7272 104.2728
dosis 82 mg 70.75000
*
9.17348 .000 51.4772 90.0228
dosis 164 mg 76.00000
*
9.17348 .000 56.7272 95.2728
78

dosis 41 mg kontrol normal -4.75000 9.17348 .611 -24.0228 14.5228
kontrol positif 8.00000 9.17348 .395 -11.2728 27.2728
*
9.17348 .000 -104.2728 -65.7272
dosis sedang -14.25000 9.17348 .138 -33.5228 5.0228
dosis 164 mg -9.00000 9.17348 .340 -28.2728 10.2728
*
9.17348 .026 2.9772 41.5228
*
9.17348 .000 -90.0228 -51.4772
dosis 41 mg 14.25000 9.17348 .138 -5.0228 33.5228
dosis 164 mg 5.25000 9.17348 .574 -14.0228 24.5228
kontrol positif 17.00000 9.17348 .080 -2.2728 36.2728
*
9.17348 .000 -95.2728 -56.7272
dosis 41 mg 9.00000 9.17348 .340 -10.2728 28.2728
dosis 82 mg -5.25000 9.17348 .574 -24.5228 14.0228
Keputusan : Dosis 41 mg dibandingkan dengan kontrol negatif berbeda secara
bermakna sedangkan dibandingkan dengan kontrol normal, kontrol
positif, dosis 82 mg dan dosis 164 mg tidak berbeda secara
kontrol positif dan negatif berbeda secara bermakna sedangkan
dibandingkan dengan kontrol normal dosis 41 mg dan dosis 164 mg
tidak berbeda secara bermakna pada taraf uji 0.05. Dosis 164 mg
sedangkan dibandingkan dengan kontrol normal, positif, dosis 41
mg dan dosis 82 mg tidak berbeda secara bermakna pada taraf uji
0,05.

Mean
*
8.29742 .000 -104.9322 -70.0678
dosis 41 mg 9.75000 8.29742 .255 -7.6822 27.1822
dosis 82 mg 2.50000 8.29742 .767 -14.9322 19.9322
dosis 164 mg -4.25000 8.29742 .615 -21.6822 13.1822
79

*
8.29742 .000 -116.4322 -81.5678
dosis 41 mg -1.75000 8.29742 .835 -19.1822 15.6822
dosis 82 mg -9.00000 8.29742 .292 -26.4322 8.4322
dosis 164 mg -15.75000 8.29742 .074 -33.1822 1.6822
*
8.29742 .000 70.0678 104.9322
*
8.29742 .000 81.5678 116.4322
dosis 41 mg 97.25000
*
8.29742 .000 79.8178 114.6822
dosis 82 mg 90.00000
*
8.29742 .000 72.5678 107.4322
dosis 164 mg 83.25000
*
8.29742 .000 65.8178 100.6822
kontrol positif 1.75000 8.29742 .835 -15.6822 19.1822
*
8.29742 .000 -114.6822 -79.8178
dosis 82 mg -7.25000 8.29742 .394 -24.6822 10.1822
dosis 164 mg -14.00000 8.29742 .109 -31.4322 3.4322
kontrol positif 9.00000 8.29742 .292 -8.4322 26.4322
*
8.29742 .000 -107.4322 -72.5678
dosis 41 mg 7.25000 8.29742 .394 -10.1822 24.6822
dosis 164 mg -6.75000 8.29742 .427 -24.1822 10.6822
kontrol positif 15.75000 8.29742 .074 -1.6822 33.1822
*
8.29742 .000 -100.6822 -65.8178
dosis 41 mg 14.00000 8.29742 .109 -3.4322 31.4322
dosis 82 mg 6.75000 8.29742 .427 -10.6822 24.1822
Keputusan : Dosis 41 mg dibandingkan dengan kontrol negatif berbeda secara
bermakna sedangkan dibandingkan dengan kontrol normal, kontrol
positif, dosis 82 mg dan dosis 164 mg tidak berbeda secara
kontrol negatif berbeda secara bermakna sedangkan dibandingkan
dengan kontrol normal, positif, dosis 41 mg dan dosis 164 mg tidak
berbeda secara bermakna pada taraf uji 0.05. Dosis 164 mg
sedangkan dibandingkan dengan kontrol normal, positif, dosis 41
mg dan dosis 82 mg tidak berbeda secara bermakna pada taraf uji
0,05.

80

Lampiran 14. Analisa Data Metode Toleransi Glukosa

A. Uji Normalitas
Tabel 19. Uji normalitas Sample Kolmogorov-Smirnov

Puasa Menit30 Menit60 Menit90 Menit120 Menit150 Menit180
N 24 24 24 24 24 24 24
Normal
Parameters
a,,b

Mean 96.1250 139.041 113.791 96.0833 91.7917 94.2083 95.7917
Std.
Deviation
17.0480 30.5307 24.9468 14.0524 14.7618 13.3350 10.0994
Most Extreme
Differences
Absolute .118 .153 .149 .183 .129 .110 .205
Positive .118 .148 .149 .183 .129 .110 .205
Negative -.102 -.153 -.110 -.094 -.123 -.076 -.109
Kolmogorov-Smirnov Z .580 .750 .730 .896 .631 .540 1.005
Asymp. Sig. (2-tailed) .889 .627 .661 .398 .821 .932 .265

Keputusan : Kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji pada puasa,
menit ke-30, 60, 90, 120, 150 dan 180 terdistribusi normal pada
taraf uji 0,05.

B. Uji Homogenitas

Tabel 20. Uji homogenitas

Levene Statistic df1 df2 Sig.
Puasa 1.222 3 20 .328
Menit30 1.450 3 20 .258
Menit60 1.732 3 20 .193
Menit90 4.555 3 20 .014
Menit120 .738 3 20 .542
Menit150 2.213 3 20 .118
Menit180 7.854 3 20 .001
Keputusan: Kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji pada puasa,
menit ke-30, 60, 120, 150 dan 180 homogen sedangkan pada
menit ke-90 dan 180 tidak homogeny pada taraf uji 0,05.

81

Dari data normalitas dan homogenitas terdapat data yang tidak homogen
yaitu pada menit ke-90 dan 180, oleh kareha itu maka tidak bisa dilanjutkan
dengan uji ANAVA dan harus dilakukan uji Kruskal Wallis. Untuk data puasa,
menit ke-30,60,120 dan 150 dapat dilakukan uji ANAVA.
C. Uji ANAVA
Tabel 21. ANAVA

Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Puasa Between Groups 1319.458 3 439.819 1.640 .212
Within Groups 5365.167 20 268.258

Total 6684.625 23

Meit30 Between Groups 17962.458 3 5987.486 34.445 .000
Within Groups 3476.500 20 173.825

Total 21438.958 23

Menit60 Between Groups 11410.458 3 3803.486 26.199 .000
Within Groups 2903.500 20 145.175

Total 14313.958 23

Menit150 Between Groups 587.792 3 195.931 1.119 .365
Within Groups 3502.167 20 175.108

Total 4089.958 23

Menit120 Between Groups 633.792 3 211.264 .965 .429
Within Groups 4378.167 20 218.908

Total 5011.958 23

Keputusan : Kadar gluksa darah seluruh kelompok uji pada pusa, menit ke-120
dan 150 tidak berbeda secara bermakna sedangkan pada menit ke-
30 dan 60 berbeda secara bermakna pada tariaf uji 0,05.

D. Uji Kruskal Wallis
Tabel 22. Kruskal Wallis

Menit90 Menit120
Chi-Square 4.939 2.798
df 3 3
Asymp. Sig. .176 .424
Keputusan : Kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji menit ke-90 dan
180 tidak berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05.

82

Dari data ANAVA terdapat data yang berbeda secara bermakna yaitu pada
menit ke-30 dan 60 maka harus dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Terkecil
(BNT).

E. Uji Beda Nyata Terkecil (BNT)
Tabel 23. Uji BNT menit ke-30
Mean
kontrol normal kelompok positif -47.66667
*
7.61194 .000 -63.5449 -31.7884
kelompok negatif -72.50000
*
7.61194 .000 -88.3782 -56.6218
dosis potensial -59.33333
*
7.61194 .000 -75.2116 -43.4551
kontrol positif kelompok normal 47.66667
*
7.61194 .000 31.7884 63.5449
*
7.61194 .004 -40.7116 -8.9551
dosis potensial -11.66667 7.61194 .141 -27.5449 4.2116
kontrol negatif kelompok normal 72.50000
*
7.61194 .000 56.6218 88.3782
kelompok positif 24.83333
*
7.61194 .004 8.9551 40.7116
dosis potensial 13.16667 7.61194 .099 -2.7116 29.0449
dosis potensial kelompok normal 59.33333
*
7.61194 .000 43.4551 75.2116
kelompok positif 11.66667 7.61194 .141 -4.2116 27.5449
kelompok negatif -13.16667 7.61194 .099 -29.0449 2.7116
Keputusan : Dosis potensial dibandingkan dengan kontrol normal berbeda
secara bermakna sedangkan dibandingkan dengan kontrol positif
dan negatif tidak berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05.
Tabel 24. Uji BNT menit ke-60
Mean
kontrol normal kelompok positif -8.33333 6.95641 .245 -22.8442 6.1775
*
6.95641 .000 -70.8442 -41.8225
dosis potensial -13.16667 6.95641 .073 -27.6775 1.3442
kontrol positif kelompok normal 8.33333 6.95641 .245 -6.1775 22.8442
*
6.95641 .000 -62.5108 -33.4892
dosis potensial -4.83333 6.95641 .495 -19.3442 9.6775
83

kontrol negatif kelompok normal 56.33333
*
6.95641 .000 41.8225 70.8442
kelompok positif 48.00000
*
6.95641 .000 33.4892 62.5108
dosis potensial 43.16667
*
6.95641 .000 28.6558 57.6775
dosis potensial kelompok normal 13.16667 6.95641 .073 -1.3442 27.6775
kelompok positif 4.83333 6.95641 .495 -9.6775 19.3442
*
6.95641 .000 -57.6775 -28.6558
Keputusan : Dosis potensial dibandingkan dengan kontrol normal dan positif
tidak berbeda secara bermakna sedangkan dibandingkan dengan
kontrol negatif berbeda secara bermakna pada taraf 0,05.

84

Irfanudin Fkik

Uploaded by

Document Information

Original Title

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

Irfanudin Fkik

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

i

UJI EFEK HIPOGLIKEMIA FRAKSI ETIL ASETAT BIJI JINTEN

You might also like