Nombre: Henry Alberto Salazar Lazo

Cátedra: Bioquímica Práctica

Catedrática: Dra. Elva Camba

DETERMINACIÓN DE LOS CUERPOS

CETÓNICOS
Introducción.-

Los cuerpos cetónicos se generan en el hígado como intermediarios entre el

metabolismo de los lípidos y el de los carbohidratos.

Los cuerpos cetónicos se originan de la degradación de los ácidos grasos que se

producen en condiciones normales; se conocen con este nombre a tres compuestos: el
acetoacetato, el B hidroxibutirato y la acetona.

CHE – C – CH2 – COO- CH3 – C – CH3 CH3 – CH – CH2 – COO-

O O OH

ACETOACETATO ACETONA BETA –HIDROXIBUTIRATO

El proceso mediante el cual se originan estos compuestos en el organismo se denomina

cetogénesis en condiciones normales, la producción de los cuerpos cetónicos ocurre a
tal velocidad que pueden ser rápidamente metabolizados y no suelen acumularse en la
sangre, sino que se incorporan al ciclo de ácido cítrico, para proporcionar energía.

Sin embargo, en algunas situaciones anormales, (diabetes descompensada, inanición) los

cuerpos cetónicos se acumulan en la sangre porque la velocidad de su producción
excede la capacidad del organismo para utilizarlos. Esta acumulación excesiva de
cuerpos cetónicos se conoce como cetosis y se acompaña de un exceso de estos
compuestos en sangre (cetonemia) y en orina (cetonuria).

Cuando la cetosis es muy intensa, el carácter ácido de algunos de estos compuestos

causa disminución del pH sanguíneo; en estos casos el trastorno se conoce como
cetoacidosis, situación que se considera sumamente grave.

Aunque el hígado es el órgano en que se generan los cuerpos cetónicos, no tiene la

capacidad de utilizarlos con fines energéticos. Estos cuerpos cetónicos pasan a la sangre
y se metabolizan en los tejidos extrahepáticos.

Justificación.-

En la práctica clínica, la cetosis tiene importancia en la producción de la cetoacidosis

diabética, así como, para explicar algunas consecuencias de la inanición y de la
intoxicación alcohólica, y para entender el mecanismo por el cual actúan las dietas bajas
en carbohidratos para disminuir el peso corporal de los obesos.

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Fundamento.-

El diagnostico de cetosis por medio de pruebas de laboratorio es relativamente fácil,

aunque no se suelen hacer cuantificaciones de acetoacetato o de beta hidroxibutirato. Se
utilizan en la práctica clínica pruebas semicuantitativas mediante el nitroprusiriato que
reacciona con la acetona y el acetoacetato, lo cual produce un complejo de color morado
en condiciones alcalinas; la intensidad del color es proporcional a la concentración de
acetoacetato.

Ninguno de los métodos que se utilizan para determinar cuerpos cetónicos en suero o en
orina reaccionan con tres tipos de cuerpos cetónicos. La prueba es 15 -20 veces más
sensible para el ácido acetoacético que para la acetona y no reacciona con el ácido beta
hidroxibutírico.

El ácido acetoacético y el beta hidroxibutírico se cuantifican en suero mediante análisis

enzimático más específico catalizado por la enzima beta hidroxibutirato deshidrogenasa
(B-HBD).

Objetivo.-

• Realizar el diagnóstico de cetosis por medio de una prueba cualitativa,

empleando nitroprusiato de sodio.

Reactivos y materiales

1) Amoníaco al 60%
2) Nitroprusiato de sodio al 2%
3) Ácido acético (concentrado)
4) Material biológico: muestra de orina
5) Tubos de ensayo 150x16mm
6) Tuberas o gradillas
7) Pipetas serológicas de 1 y 5 ml

Procedimiento:

• En dos tubos perfectamente limpios y marcados como A (paciente normal) y B

(paciente sospechoso o patológico) colocar 2.5ml de muestra de orina
• Adicionar a cada uno de los tubos 0.5ml de nitroprusiato de sodio. Mezclar bien
• Agregar a cada uno de los tubos 0.5ml de ácido acético (concentrado). Mezclar
bien
• Inclinando el tubo, adicionar por las paredes 2.5ml de la solución de amoníaco,
permitiendo la formación de dos capas
• Observar los resultados. En la interfase la aparición de un anillo color púrpura,
indica la reacción positiva para ácido acetoacético. La acetona produce el 20%
del color.

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Significación clínica:

• Los rangos de referencia para ácido acetoacético y ácido beta hidroxibutírico son
inferiores a 3mg/dl. Estos niveles, el suero y la orina resultan negativos al
efectuar análisis semi-cuantitativos con nitroprusiato.
• Individuos normales sometidos a dieta mixta, excretan de 3 – 15mg/día
• Toda eliminación superior a 20-25 mg/diarios se considera patológica

Formación de los cuerpos cetónicos:

Los cuerpos cetonicos son compuestos químicos producidos por citogénesis en la
mitocondria hepática. La citogénesis es el proceso por el cual en el hígado se forma
cuerpos cetonicos que son aceto acetato-betahidroxibutirato-acetona, obtenidos por la
beta oxidación de los ácidos grasos.
La citogénesis ocurre cuando la gluconeogénesis es activa, pues induce una disminución
en los niveles de oxalacetato, impidiendo que el acetil-CoA de la beta-oxidación se
oxide completamente en el ciclo de Krebs. Estos metabolitos aumentan en situaciones
como diabetes descompensada o ayuno prolongado. Puede ser determinada por la
presencia de cuerpos cetónicos eliminados en la orina en el cual el organismo realiza un
balance cuando hay un exceso de grasas.
La cetogénesis surge cuando el aporte en hidratos de carbono es menor a unos 80 g/día.
La cetosis representa un estado en que la producción hepática de cetonas es mayor que
la utilización extrahepática de las mismas.
Hormonas como la ACTH, GH, o prolactina tienen un efecto cetógeno sobre el
organismo. Estas hormonas son conocidas por su efecto hipoglicemiante, con lo que el
organismo derivará hacia gluconeogénesis estimulando de esta forma la producción de
los cuerpos cetónicos.

Cetosis sucede durante el ayuno, dietas muy bajas en carbohidratos, embarazo y también
puede ser causada por diabetes. La manera en que funciona es, usando toda glucosa, y tu
cuerpo empieza a quemar las reservas de grasa a modo de energía para todas las
funciones de tu cuerpo. Este cambio en el metabolismo sucede cuando el cuerpo ya no
esta recibiendo carbohidratos para producir glucosa, y después de que el hígado se
queda sin glucosa. Empieza a utilizar grasa, ya sea grasa que estas consumiendo o
reservas de grasa en tu cuerpo, y se convierten en cuerpos cetonicos. Las cetonas se
usan para la energía de tu cuerpo, el exceso de ellos son desechados por el aliento y por
la orina.

Regulación del metabolismo de las grasas: En caso de ingestión deficiente de

carbohidratos, las grasas se metabolizan anormalmente acumulándose en el organismo
cuerpos cetónicos, que son productos intermedios de este metabolismo provocando así
problemas (cetosis).

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Gráfico de la formación de los cuerpos cetónicos:

Existe una relación que se da entre los lípidos y carbohidratos en cuanto a la formación
de cuerpos cetonicos ya que una dieta carente de hidratos de carbono provoca un
aumento de la lipolisis, la formación de cuerpos cetónicos y el incremento del
catabolismo proteico. En cuanto a los lípidos: el principal componente lipídico de los
alimentos lo constituyen los triacilgliceroles o triglicéridos, compuestos de ácidos
grasos y glicerol. El organismo puede sintetizar ácidos grasos saturados a partir de acil-
CoA, que intervienen en la citogénesis que el aumento de cuerpos cetonicos en una
persona con diabetes se producen cuando no hay suficiente insulina para meter la
glucosa dentro de las células. Las células creerán entonces que no hay azúcar y
utilizarán las grasas como fuente de energía.
Cuando una persona sin diabetes está en ayunas durante muchas horas o está vomitando
mucho, también se pueden producir cetonas. En este caso se producen por falta de
glucosa. Al faltar el azúcar las células quemarán las grasas para obtener la energía que
necesitan.

En cuanto a la formación de los cuerpos cetónicos comenzaremos con el acetato, el

anión acetato, [C2H3O2] es un carboxilato y es la base conjugada del ácido acético. El
ión acetato está formado por la desprotonación del ácido acético:

CH3COOH ⇌ CH3COO− + H+

El ácido betahidroxibutírico (D-β-hidroxibutírico), o su forma ionizada, el D-β-

hidroxibutirato. Esta es su estructura química:

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El acido acetoacético o en su forma ionizada acetoacetato es producido en la cetogénesis

cuando la HMG-Coa se degrada para dar acetoacetato y acetil CoA por medio de la
HMG liasa. Esta es su estructura química:

En términos químicos la cetosis por inanición quiere decir, relación glucagón: insulina
alta -> elevación de la [cAMP] hepática -> disminución de [malonil CoA] ->
desinhibición de CPT I -> activación de la oxidación de ácidos grasos y de la
producción de cuerpos cetónicos.

Cetoacidosis Diabética:
Se le define como un síndrome causado por déficit de insulina y/o desenfreno de las
hormonas catabólicas, caracterizado por hiperglicemia, deshidratación, desequilibrio
electrolítico y acidosis metabólica. Afecta de preferencia a los diabéticos insulino
dependientes, pero no es infrecuente en los no dependientes en condiciones de stress
metabólico.

La cetoacidosis es desencadenada por un déficit de insulina e incremento de las

hormonas de contrarregulación. El déficit de insulina es una condición indispensable,
aunque él puede ser absoluto o relativo. Las concentraciones séricas de glucagón,
catecolaminas, cortisol y hormona de crecimiento están elevadas, ya que el diabético
sobrerresponde al estrés con un mayor aumento de estas hormonas producto del déficit
de insulina. Esta alteración endocrina condiciona una serie de manifestaciones
metabólicas como Hiperglicemia, Deshidratación, Desequilibrio electrolítico, Acidosis
metabólica.

En cuanto a la regulación hormonal esta dada por la insulina, que es una hormona
"anabólica" por excelencia; es decir, permite disponer a las células del aporte necesario
de glucosa para los procesos de síntesis con gasto de energía, que luego por glucólisis y
respiración celular se obtendrá la energía necesaria en forma de ATP. Su acción es
activada cuando el nivel de glucosa es elevada en la sangre, siendo la insulina liberada
por las células beta del páncreas. Su función es la de favorecer la incorporación de
glucosa de la sangre, hacia las células. El glucagón, al contrario de la insulina, actúa
cuando el nivel de glucosa disminuye y es entonces liberado a la sangre. Por su parte, la
Somatostatina, es la hormona encargada de regular la producción y liberación tanto de
glucagón como de insulina. Por eso cuando hay estos tipos de trastornos en personas
diabéticas que tienen un déficit en la producción de esta hormona.

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EFECTOS FUNCIONALES AGUDOS POR DÉFICIT DE INSULINA

Entre ellos, es importante destacar los siguientes:

1) Hiperglicemia: Por incremento de la producción hepática de glucosa y reducción de

su utilización. Ello condiciona un cierto grado de hiperosmolaridad del intravascular y
deshidratación intracelular lo que, en casos extremos, a nivel del encéfalo lleva a
deterioro psicomotor.
2) Glucosuria osmótica: El incremento de la concentración de glucosa en el filtrado del
glomérulo renal, eleva la carga tubular y supera la capacidad de reabsorción máxima, lo
que induce diuresis osmótica, deshidratación, perdida de sustratos energéticos y
electrolítos y desencadena una polidipsia compensatoria.
3) Cetoacidosis: La activación de la cetogénesis hepática y la reducción de la capacidad
de utilizar los cetoácidos, lleva a una elevación de su concentración en la sangre y orina
y a una acidósis metabólica. Esta desencadena mecanismos compensatorios como
polipnea, e intercambio de iones intracelulares por hidrogeniones, condicionando en
forma especial una elevación de los niveles intravasculares de potasio y fósforo.
4) Mayor riesgo de trombosis venosas y arteriales: En pacientes con daños vasculares
producto de la macroangiopatía (ateroesclerosis) y de la hipercoagulabilidad por la
descompensación metabólica aguda (mayor agregación plaquetaria, hiper viscosidad
sanguínea y reducida la fibrinolisis).
5) Mayor riesgo de infecciones: La hiperglicemia y la acidosis deterioran la inmunidad
celular específica e inespecífica. Hay defectos en la adhesión y migración de los
polimorfonucleares, menor actividad fagocitaria de los monocitos y una menor
respuesta proliferativa de los linfocitos. Algunos gérmenes (hongos) aumentan su
virulencia

CONCLUSIÓN:
• Por medio del presente experimento pudimos cumplir nuestro objetivo propuesto
en la práctica el que fue realizar el diagnóstico de cetosis por medio de una
prueba cualitativa, empleando nitroprusiato de sodio,la aparición de un anillo
color púrpura, indica la reacción positiva para ácido acetoacético. La acetona
produce el 20% del color.

BIBLIOGRAFÍA:

http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/cetogenesis.html

http://foros.hispavista.com/salud_y_medicina/5/813260/m/informacion-completa-de-
cetosis/

http://es.wikipedia.org/wiki/Cetog%C3%A9nesis

http://escuela.med.puc.cl/paginas/cursos/tercero/IntegradoTercero/ApFisiopSist/nutricio
n/Nutricion3.html

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Nombre: Henry Alberto Salazar Lazo
Cátedra: Bioquímica Práctica
Catedrática: Dra. Elva Camba

Información proporcionada por la Dra. Elva Camba