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Espectroscopía básica

Espectroscopía básica

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Texto introductorio a la espectroscopía por resonancia magnética
Texto introductorio a la espectroscopía por resonancia magnética

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Published by: Aníbal J. Morillo, MD on Jul 28, 2009
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11/27/2012

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Espectroscopía básica
(Apuntes de fuentes diversas: Howe, Elster, Lenkinski, Schnall, Castillo, Arbeláez, etc.)Aníbal J. Morillo, MD
La serie APUNTES de PONDO ® es una compilación de índole educativa, con la que se pretende divulgar información relacionada o no con laradiología y ciencias afines o disímiles. Se basa en referencias bibliográficas, conferencias, esquemas y experiencia (que no siempre es sinónimode vejez). Cualquier laxitud en las normas de autoría se basa en la intención docente y sin ánimo de lucro de esta información. Sin embargo, sehan hecho ingentes esfuerzos para dar un adecuado reconocimiento a las fuentes utilizadas, plagiadas o modificadas. Aunque los APUNTES dePONDO® son de uso y divulgación libre, se recomienda abstenerse de utilizar las fotografías, figuras, esquemas y tablas con fines diferentes alos de la formación personal, ilustración o diversión, para evitar la propagación de violaciones flagrantes a los derechos de autor. La ciencia estáen permanente evolución. La lectura de la serie APUNTES de PONDO® debe ser crítica y complementada con otras fuentes de información. Elautor no se hace responsable por el contenido o veracidad de esta información o por las consecuencias derivadas de conductas o decisionestomadas con base en los APUNTES de PONDO ®.
En las imágenes por resonancia magnética (IRM) se obtienen señales de los tejidos quedependen de la estructura molecular en la que participan los átomos de hidrógeno o protones (H
+
); estas señales representan un mapa de frecuencias que son transformadasen una escala de grises. En esta representación, la frecuencia de las señales está dada por la posición espacial de la muestra analizada. En la espectroscopia por resonanciamagnética (ERM), la frecuencia está dada por el contenido químico de la muestraexaminada.De hecho, la primera aplicación de la resonancia magnética nuclear fue en químicaanalítica, pues mediante la obtención de “mapas” o espectros de frecuencias (es decir,ERM), se puede estudiar la estructura química de diversas sustancias.En los compuestos químicos se encuentran nubes de electrones alrededor de los protones (H
+
) que “protegen” al protón del la exposición al campo magnético externo y producen distorsión de dicho campo. Los efectos de esta “protección” dependen de laconfiguración molecular de cada compuesto químico. Así, los H
+
en diferentes gruposquímicos experimentan diferente campo magnético por el efecto de “escudo” que les proveen sus nubes de electrones. Cada compuesto químico tendrá entonces un espectrode picos característicos, que representan resonancias a lo largo de un eje de frecuencias.La frecuencia de codificación se normaliza con incompuesto de referencia, para lograr que el eje sea independiente de la intensidad del campo magnético utilizado. Esta es laescala de partes por millón (ppm), que se calcula como:
{
(frecuencia de interés – frecuencia de referencia) / frecuencia de referencia
}
x 10
6
 La frecuencia se mide en millones de ciclos por segundo o megahercios (MHz). Para laseñal de referencia en ERM se utilizan compuestos inertes, como el tetrametilsilano[TMS o ((CH
3
)
4
Si)], o el trimetilsilipropionato (C
6
H
13
 NaO
2
Si), los cuales se ajustan a0.0 ppm, pues sus picos residen en una región que no interfiere con los demás picos. Deesta manera, se calibra el pico de resonancia del H
2
O a 4.7ppm.
 
2
Al normalizar el eje de frecuencias mediante el uso de la escala de partes por millón,cada compuesto emitirá un grupo de picos característicos que siempre estará localizadoen el mismo lugar de la escala, sin importar la intensidad del campo magnéticoutilizado. La intensidad del campo es importante, pues a mayor Tesla (T), se obtiene,además de una mejor relación señal/ruido, una mayor amplitud del rango defrecuencias, es decir, una mejor separación de los picos. Esto hace deseable realizar ERM a campos altos.A diferencia de la IRM, en la que los gradientes que se utilizan para codificar la fasesuprimen la información química, en ERM, los gradientes se aprovechan para codificar tanto la fase como la información química. Las posiciones de los picos sobre la escalade frecuencias de desplazamiento químico (se conoce como desplazamiento químico porque la distribución espacial del contenido molecular se representa como “picos” quese “desplazan” o “aparecen” a lo largo de una escala de frecuencias) produce una“huella” o “firma” con la que se puede identificar de manera confiable a cadacompuesto. Los espectros se grafican como una serie de “ondas” que pueden recordar alas de un electroencefalograma, sobre una escala horizontal que corresponde aldesplazamiento químico en ppm. Esta técnica no sólo permite detectar diferentes gruposquímicos funcionales sino que puede cuantificar su concentración.Por ejemplo, la molécula de etanol que contiene protones en tres lugares diferentes,dados por los componentes –OH, -CH
2
- y –CH
3
muestra tres picos característicamente localizados a lo largo de la escala de ppm. La posición de los picos corresponde a su localizaciónespacial dentro de la molécula de etanol. La amplitud de los picos ( área bajo la curva) corresponde a su concentración. Lasdiferencias entre los ambientes químicos locales en una muestracompleja determinan sutiles
desplazamientos químicos
 (denominados por la letra griega delta -
δ
) en su frecuencia absoluta (Hz) orelativa (ppm).
C -C -O -HH -HH -HH -C -C -O -HH -HH -HH -
Las técnicas de ERM utilizan diferentes tipos de secuencias que permiten la evaluaciónde un volumen (
 single voxel 
, usualmente de unos 4 a 8 cc) o de varios volúmenes(
multivoxel 
, de 1 cc cada uno) para localizar la señal espectroscópica. Algunos ejemplosson las secuencias conocidas, como en IRM, por siglas “sonoras” o que evocan nombresde objetos o acciones comunes, como la STEAM (
STimulated Echo Acquisition
 
3
Method 
) o la PRESS (
 Point RESolved Spectroscopy)
, que ¡no debe confundirse conDRESS (
 Depth RESolved Spectroscopy
)!El agua tiene concentraciones mucho más altas que la de otros metabolitos en elcerebro. La resonancia de H
2
O a 4.7 ppm es masiva, de unas cincuenta mil veces la deotros metabolitos; para que esta gran cantidad de moléculas de agua no interfiera con lamedición de protones en otros metabolitos, se utiliza una técnica de saturación, que seconoce como CHESS (CHEemical Shift Selective), la cual, en forma análoga a lacomún técnica de saturación grasa en IRM, mejora la visualización de las señales deotras moléculas.Una ERM típica, con técnica de supresión de agua, en un cerebro normal, muestra unaserie de picos característicos. Lo que se identifica como un pico único puede ser enrealidad una serie de picos múltiples, que pueden estar muy cercanos unos de otros (con poco desplazamiento químico relativo entre ellos) y que requieren de técnicas mássensibles para discernirlos. Algunos de los picos se presentan en parejas o en tripletas.La señal depende, entre otros factores, de la movilidad de las moléculas, y se extinguecon el tiempo. El SE TE debe optimizar de caurdo al grupo de metabolitos que se va aevaluar.La escala de ppm se lee de derecha a izquierda, con elvalor 0ppm al extremo derecho de la gráfica. Si seobserva desde el extremo derecho (0ppm) hasta2.0ppm, se encuentran picos irregulares de bajaintensidad, que corresponden a lípidos móviles ytriglicéridos. Son de alta concentración (60M) entejidos adiposos y en la médula ósea, y de bajaconcentración (3.5M) en los músculos.En enfermedades neuromusculares se puede elevar esta última concentración hasta en6 veces.
Entre 1.3 y 1.5 ppm
se encuentran el lactato – Lac (1.35ppm) y la alanina – Ala(1.46ppm). El lactato se encuentra a concentraciones < 0.5 mM en el cerebro normal, yhasta 25 mM en un músculo ejercitado al máximo. El lactato es el producto final de laglicólisis anaerobia. Su elevación puede ser el resultado de metabolismo glicolítico,como ocurre en la isquemia y en algunos tumores.

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