Tinciones especiales: Gram, Ziehl Neelsen y cpsula

Prctica 5

Coloracin
Favorece la observacin

Estudio de caractersticas
Forma Agrupacin Estructuras celulares

Frotis o extendido
Preparacin del extendido obtener una monocapa separada de clulas

Secado evaporar el lquido del extendido

Fijado
coagular las protenas protoplasmticas, adherir los microorganismos a la lamina y soportar los pasos de las tinciones

Coloracin

Procedimiento

Preparacin del frotis

Lmina 1: Staphylococcus aureus Lmina 2: Escherichia coli Lmina 3: Laminas preparadas Lmina 4: Klebsiella pneumoniae

Tincin de gram
Las diferencias de la tincin se deben a los distintos grados de permeabilidad de las paredes celulares. Gram positivo Gram negativo

Fijar

Cristal violeta

Yodo

Alcohol-acetona

Safranina

Tincin de Gram
(lamina 1 y 2)

Cristal violeta (1 minuto) Lavar Lugol (1 minuto) Lavar Alcohol-acetona (3-5 segundos) Lavar Safranina (1 minuto) Lavar

Tincin de Ziehl Neelsen

Propiedad que presentan las bacterias para resistir la decoloracin de cidos fuertes despus de teirse con fucsina caliente
Bacterias alcohol cido resistentes

Tincin de Ziehl Neelsen

(lamina 3)

Fucsina feniciada (1 minuto)

Calentar con mechero de alcohol produccin de vapores Esperar 5 minutos Lavar

Alcohol cido (30 segundos)

Lavar

Azul de metileno (30 segundos)

Lavar

Tincin de la cpsula
CAPSULA: estructura superficial, que consiste en la acumulacin de material mucoso o viscoso alrededor de la pared celular. Tincin: se tie el entorno, no la cpsula.

Tincin de Cpsula
(lmina 4)

Azul de metileno (5 minutos)

Lavar Dejar secar Tinta Parker con otra lmina hacer un frote sobre la lamina (ngulo de 45 )

Observacin al microscopio
Dibujo en 100x Enfocar primero en 10 x Laminas: Gram positivo Gram negativo Alcohol cido resistentes Cpsula

Gram positivo

Gram negativo

Alcohol cido resistente

Cpsula