Professional Documents
Culture Documents
Dintre metodele folosite in acest scop, studiul caracterelor morfologice este o etapa foarte importanta.
Microscopia optica permite evidentierea formei si a dimensiunilor bacteriilor. Microscopia electronica permite cunoasterea structurii bacteriilor.
Bacteriile
avind dimensiuni de ordinul m, nu pot fi vazute cu ochiul liber, de aceea examinarea lor se efectueaza cu ajutorul microscopului.
Anthoni van Leeuwenhoek (1632-1723) a fost primul care a studiat bacterii si alte microorganisme la microscop
Examenul microscopic se executa : direct din produsele patologice (examen microscopic direct) din culturi pure.
Preparatele microscopice sint de 2 feluri: - preparat nativ-cu germeni vii - frotiu / preparat colorat- cu germeni omoriti
Examenul microscopic da indicatii asupra: 1. prezentei microorganismelor in preparat 2. proprietatilor morfotinctoriale: - forma (bacili, coci, spirili) - marimea - mobilitatea ( in preparatul nativ ) - existenta eventuala a formatiunilor neobligatorii ( cili, capsula, spori)
- asezarea in frotiu ( lant, ciorchine, diplo-, tetrade, etc) - proprietatile tinctoriale ( colorabilitatea )
Examenul microscopic - direct din produsele patologice -permite in unele infectii stabilirea diagnosticului ( gonococ, bacil tuberculos, stafilococ )
- constituie o etapa esentiala in identificarea bacteriana.
COCII Au in general diametrul de 1 Prezinta forma rotunda doar unele bacterii: stafilococi, micrococi . Majoritatea bacteriilor au forma ovoida. Dispozitia bacteriilor rezulta in urma diviziunii lor, putand ramane in urma diviziunii asociate fie pe verticala fie pe orizontala
Cocii pot prezenta dispozitia in: I.diplo: diplococi Ex:Pneumococii :coci ovoizi cu aspect de flacara de lumanare Neisserii:coci cu aspect reniform II.lanturi: Streptococi : coci, diviziune ordonata pe orizontala Tetrade: Micrococi: 4 coci reuniti Octade: Sarcina: 8 coci reuniti Gramezi: Stafilococi : aglomerari neordonate de coci cu aspect de ciorchine de strugure (staphylos=ciorchine), acestia putand avea si dizpozitie de diplococi sau de lanturi scurte
BACILII
Sunt bacterii de forma cilindrica de bastonas Dispozitia in frotiu: Izolati:Enterobacterii :bacilul coli Diplobacili: Bacilul carbunos Streptobacili: reprezentantii genului Bacillus:
Bacilul carbunos
Bordetella Brucella
FORME SPIRALATE 1.Bacili incurbati: Vibrionul holeric : bacil incurbat, mobil, cu aspect de virgula Helicobacter: mai multi bacili incurbati uniti la capete produc gastrita ,ulcer duodenal 2.Bacterii spiralate Spirochete : bacterii spiralate, lungi, mobile prin aparata locomotor Ex: Treponema pallidum
Dichotomous keys
Examenul microscopic direct din produsele patologice permite in unele infectii stabilirea diagnosticului ( gonococ, bacil tuberculos, stafilococ )
Examinarea prep. nativ are implicatii restrinse nu da informatii asupra tuturor proprietatilor morfologice ale bacteriilor
morfotinctoriale ale bacteriilor pot fi studiate mai detailat pe preparate fixate si colorate, cu germeni omoriti . Mai rar se folosesc coloratii vitale, spre ex. in reactia de umflare a capsulei .
Coloratia
Procedeu fizico-chimic complex, in care colorantii se combina cu constituenti celulari, facindu-i vizibili la microscop. Colorantul se absoarbe, apoi se dizolva si difuzeaza in continutul celular , unde are loc formarea unei combinatii stabile. Colorarea se executa de obicei prin acoperirea suprafetei frotiului fixat cu colorant, care se lasa sa actioneze un timp limitat, la cald sau la rece.
Tipuri de coloratii
Coloratia simpla- se executa cu un singur colorant Coloratia combinata -care se realizeaza prin actiunea succesiva sau simultana a mai multor coloranti, fiecare colorant actionind independent si fixindu-se pe anumite elemente
Coloratii speciale - pentru formatiuni morfologice celulare si extracelulare: corpusculi, cili, spori, capsula
Coloratia simpla
frotiul fixat se acopera complet cu un singur colorant: albastru de metilen sau fuxina, timp de 12 min. se spala cu apa si se usuca in coloratia cu albastru de metilen toate elementele se coloreaza in albastru in coloratia cu fuxina, toate elementele se coloreaza in rosu
Coloratia simpla
Permite stabilirea unor proprietati morfotinctoriale ca: -forma si marimea microorganismelor -existenta unor elemente celulare Este utila in diagnosticul prin examenul microscopic direct din produsul patologic in: - gonoree -meningita cerebrospinala epidemica
Germenii gram +
-rezista la decolorare
-isi mentin culoarea albastru violet initiala
Germenii gram
-se decoloreaza si se recoloreaza in rosu cu fuxina/safranina.
Coloratia Gram
Diferenta
de comportament in coloratia Gram se explica prin structura si compozitia chimica diferita a peretelui celular la bacteriile gram+ si gram -.
Este gros de 15-50 nm ,dar are structura mai simpla Este format din pana la 40 de straturi suprapuse de peptidoglican dar si acizi teichoici atasati de peptidoglican Acizii teichoici au rol in aderarea bacteriilor de celule epiteliale ale mucoaselor si sunt antigene de suprafata ale bacteriilor gram pozitive, inducand anticorpi specifici de specie (anticorpii pemit identificarea bacteriilor ,diagnosticul indirect al bolilor infectioase si protectie fata de reinfectia cu bacteria respectiva)
Este subtire dar are o structura mai complexa Compozitie chimica: peptidoglican in proportie redusa ,glucide,lipide, proteine in cantitate mare Este multistratificat:detine peptidoglican,strat lipoproteic ,membrana externa , lipopolizaharid(LPS)
Lipopolizaharidul este format dintr-o componenta lipidica- lipidul A si o componenta polizaharidica si lanturi oligozaharidice la exterior Lipidul A este endotoxina la bacteriile Gram negative Este responsabila de toxicitate , de fenomene toxice care apar in infectiile cu bacterii Gram negative:febra,diaree, greturi varsaturi,scaderea tensiunii arteriale Lanturile oligozaharidice laterale proemina la suprafata bacteriei ca spini si sunt in numar mare Reprezinta Antigenul O responsabil de specificitatea bacteriilor Gram negative
Christian Gram recognized two different types of bacteria based on reaction to certain staining procedure.
COCI GRAM+ :
Meningococ Gonococ
BACILI GRAM+ :
difteric)
Bacillus antracis ( bacilul carbunos), Corynebacterium diphteriae ( bacilul Clostridium botulinum ( bacilul botulinic) Clostridium tetani ( bacilul tetanic)
COCI GRAM + STREPTOCOCCUS PNEUMONIE coci lanceolati , in diplo , capsula unica pentru ambii coci
Bacili Gram
E.Coli
Haemophilus infuenzae
Cocobacili gram-
Frotiu lcr colorat Gram bacilul carbunos gram+,bacili cu capetele taiate drept