Prof.

Uderlei Covizzi

O piruvato produzida pela gliclise ou por outra via celular poder ter destinos diferentes dentro da clula Se esse piruvato for proveniente da gliclise, ser metabolizado pela respirao anaerbica, que ocorre no prprio citossol, pelo processo aerbico que mitocondrial

GLICOSE 2 ADPs, 2 NAD+ 2 ATPs, 2 NADH

2 PIRUVATO

RESPIRAO ANAERBICA

(citosslico)
RESPIRAO AERBICA

(mitocondrial)

CICLO DE KREBS

O que determina que uma clula realize o processo aerbico ou anaerbico? Presena de mitocndrias e disponibilidade de oxignio (necessariamente as duas coisas) levam a clula a aerobiose A falta de um dos itens direciona para a anaerobiose

A 6 reao da gliclise (reao de oxidao) transforma NAD NADH Portanto, durante a gliclise: NAD NADH O NADH tem que ser reoxidado em NAD, pois seno a gliclise ser interrompida (para a produo de energia pela glicose) Os eltrons do NADH sero transferidos para o oxignio (O2) na mitocndria AEROBIOSE ou para o piruvato - ANAEROBIOSE

Processo citosslico, independente de oxignio, realizado por diferentes organismos Utiliza glicose como substrato energtico

Diferentes tipos de fermentao e seus fermentadores

Realizada por leveduras e algumas bactrias anaerbicas.

1 Gliclise com produo de NADH 2 Descarboxilao pela enzima piruvato descarboxilase 3 Reduo pela enzima lcool desidrogenase

1 2

2 CO2
2 PIRUVATO 2 ACETALDEDO

Piruvato descarboxilase
2 NADH 2 ACETALDEDO 2 NAD+ 2 ETANOL

lcool desidrogenase

Realizada por bactrias anaerbicas HemciasNo contm mitocndrias Fibras musculares em geral (contrao intensa) Fibras brancas, no contm mioglobina e nem mitocndrias Fibras musculares de contrao rpida Baixo aporte de oxignio

Lactato desidrogenase

Musculatura em contrao intensa ou com baixo aporte de O2 Produo de lactato pelo msculo em anaerobiose O lactato ser liberado no sangue e transformado em glicose no fgado (gliconeognese)

Lactato desidrogenase

Processo mitocondrial e com aporte de O2 Produo de grande quantidade de energia (ATP) Utiliza outros substratos energticos, alm de glicose (Triglicrides, aminocidos, corpos cetnicos, etanol, etc)
Etapas: Produo de acetil-coA Ciclo de Krebs

Cadeia de transporte de eltrons e fosforilao oxidativa

Acetil-Coenzima A (CoA)

A acetil-CoA pode ser produzida a partir de: Piruvato ( a partir de aminocidos ou glicose) cidos Graxos (liplise) Corpos cetnicos produzidos durante a cetognese Etanol

ocorre na matriz mitocondrial

reao irreversvel catalisada pelo complexo multienzimtico piruvato desidrogenase (PD)

3 enzimas: piruvato desidrogenase; lipoato acetil transferase; lipoamida desidrogenase

Descarboxilao e oxidao do piruvato a acetil-CoA A PD utiliza 5 coenzimas (vit. B1, B2, B3, CoA e lipoato)

NAD+ PIRUVATO

NADH

CO2 ACETIL-CoA

Piruvato desidrogenase (ATIVA)

ATP, NADH, (+) PD quinase acetil-CoA, c. graxos

PD fosfatase

(+)

Piruvato desidrogenase (INATIVA)

ADP, CoA NAD ,Ca2+

8 reaes: 7 ocorrem na matriz mitocondrial e uma associada a face interna da membrana interna da mitocndria

neste ciclo ocorre oxidao total da

acetil-coA a CO2 e coenzimas reduzidas (NADH e FADH2)

Ciclo de Krebs
Produo de 3 NADH, 1 FADH2 e 1 GTP por giro

Liberao de 2 CO2

1 CITRATO SINTASE 2 ACONITASE 3 ISOCITRATO DESIDROGENASE 4 -CETOGLUTARATO DESIDROGENASE 5 SUCCINIL-COA SINTETASE 6 SUCCINATO DESIDROGENASE* 7 FUMARASE 8 MALATO DESIDROGENASE

* Localizada na face interna da membrana interna da mitocndria (associada ao complexo II da cadeia de transporte de eltrons)

Inibido por ATP e NADH Ativado por ADP, AMP e NAD

Alta: ciclo de Krebs inibido Relao ATP/ADP

Baixa: ciclo de Krebs ativado

Alta: ciclo de Krebs inibido

Relao NADH/NAD+
Baixa: ciclo de Krebs ativado

Ocorre tanto no catabolismo e anabolismo Os intermedirios do ciclo de Krebs tambm so intermedirios de outras vias metablicas

NADH e FADH2 devem ser reoxidados para que o ciclo de Krebs possa continuar rodando reoxidao feita em vrias etapas para otimizar a transferncia de energia sem que a clula seja lesionada. eltrons provenientes das coenzimas reduzidas so doados a complexos enzimticos localizados na membrana interna da mitocndria e transferncia efetuada at o aceptor final, o O2.

Espao intermembranas

MI

Matriz mitocondrial

cada NADH bombeia para o espao intermembranas 8 H+ cada e FADH2 bombeia para o espao intermembranas 6 H+ O2 aceptor final dos eltrons e forma H2O metablica Bombeamento de prtons para o espao intermembranas gera fora prton-motriz (Teoria Quimiosmtica de Mitchell) Prtons no atravessam membrana devendo ser transportados de volta matriz mitocondrial por canais especficos: ATP sintase

Membrana externa H+ + H H+ H+ H+ ATP sintase

Matriz mitocondrial
Espao H+ intermembranas

H+ Membrana interna

corresponde etapa de retorno dos prtons matriz mitocondrial que gera energia para fosforilao do ADP a ATP.

a volta dos H+ d-se pelo complexo transmembrana ATP sintase.

As velocidades do transporte de eltrons e da

sntese de ATP concentrao de ADP

so

regulados

pela

O ajuste da produo de ATP ao seu gasto promovido pelo acoplamento entre CTE e fosforilao oxidativa (produo de ATP), e vice-versa.

 Existem drogas capazes de atuar a cadeia de transporte de eltrons impedindo a transferncia de eltrons.

Essa ao leva paralisao do transporte de eltrons e das vias metablicas que dependem da CTE para a reoxidao de coenzimas. Com a CTE bloqueada, no forma o gradiente de prtons e, consequentemente, no h sntese de ATP.

Essas drogas so potencialmente letais.

INIBIDORES

COMPLEXO

Barbituratos (hipnticos) Rotenona (inseticida) Malonato (inibidor competitivo da succinato desidrogenase) Antimicina A Cianeto, monxido de carbono cido sulfdrico, azida sdica

I I II III IV IV

 Em

condies especiais o transporte de eltrons pode ocorrer sem a sntese de ATP

desacopladores: dissociam a CTE da fosforilao oxidativa. (acontece o transporte de eltrons, porm a sntese de ATP para). No incio do sculo XX: Doena grave em trabalhadores da indstria de explosivos devido ao cido pcrico (trinitrofenol). Sintomas: hiperpirexia e perda de peso.

So hidrofbicos (atravessam membranas). Transportam prtons do espao intermembranas (pH baixo) para a matriz mitocondrial (pH alto), sem passar pela ATP sintase. O transporte de eltrons feito nessas condies acelerado, aumentando o consumo de O2 e gerando calor.

Expectativa de tratamento da obesidade: acelerar a oxidao de coenzimas sem produo de ATP levaria ao aumento da oxidao das reservas de gordura. Esse tipo de tratamento foi abandonado porque seu uso levou a acidentes fatais, alm de verificar-se posteriormente, que tais agentes eram mutagnicos.

Tecido adiposo marrom (multilocular): animais que hibernam ou mamferos recm nascidos liberam calor

desacopla da CTE e Fosforilao oxidativa

ETAPA
GLICLISE

PRODUTO
2 ATPs 2 NADH

ATPs
2

4 OU 6
6 18 4 2

2 PIRUVATO A 2 ACETIL-CoA CICLO DE KREBS

2 NADH 6 NADH 2 FADH2 2 GTPs

TOTAL:

36 ou 38 ATPs

membrana interna da impermevel a NADH e NAD+

mitocndria

Sistemas

de lanadeiras que transfere os eltrons do NADH citosslico pela membrana interna da mitocndria para a matriz mitocondrial.

Transfere os eltrons do NADHcit para a matriz mitocondrial como NADHmit

Ocorre nos tecidos muscular cardaco, heptico e renal de mamferos.

O NADH citosslico = NADHmit

Oxaloacetato NADHcit

Oxaloacetato

NADHmit NAD+

NAD+

Malato

Malato

CITOSSOL

MITOCNDRIA

Lanadeira malato

aspartato: transferncia do NADH citosslico para a mitocndria

Transfere os eltrons do NADHcit para a matriz mitocondrial como FADH2mit Ocorre nos tecidos muscular esqueltico e crebro de mamferos e no msculo de vo de insetos. NADH citosslico = FADH2 mitocondrial

Diidroxicetona-P NADH

Diidroxicetona-P

NAD+
FADH2

Glicerol-P

FAD

Glicerol-P CITOSSOL MITOCNDRIA

Lanadeira glicerol fosfato: transferncia de NADH citosslico para FADH2 mitocondrial