SPEKTROFOTOMETER UV-VIS Spektrofotometer adalah alat untuk menukur transmitan atau absorban suatu sampel seba ai fun si pan!

an elomban " Spektrofotometer merupakan abun an dari alat opti# dan elektronika serta sifat-sifat kimia fisikn$a" %imana dete#tor dapat men ukur intensitas #aha$a $an dipan#arkan se#ara tidak lan sun #aha$a $an diabsorbsi" Tiap media akan men$erap #aha$a pada pan!an elomban tertentu ter antun pada sen$a&a atau &arna $an terbentuk"
'ambar ( Spektrofotometer UV-Vis beserta peran katn$a

Spektrofotometri UV-Vis merupakan abun an antara spektrofotometri UV dan Visible" )lat ini men unakan dua buah sumber #aha$a $an berbeda* $aitu sumber #aha$a UV dan sumber #aha$a Visible" +arutan $an dianalisis diukur serapan sinar ultra ,iolet atau sinar tampakn$a" Konsentrasi larutan $an dianalisis akan sebandin den an !umlah sinar $an diserap oleh -at $an terapat dalam larutan tersebut" .arna $an diserap oleh suatu sen$a&a merupakan &arna komplementer dari &arna $an teramati" /eberapa &arna $an diamati dan &arna komplementern$a terdapat pada tabel berikut ini 0

Pan!an elomban 1233 233-243 243-253 253-443 443-483 483-943 943-:33 ;:33

.arna terlihat Ultra,iolet Violet /iru 7i!au Kunin 6in a Merah Inframerah

.arna komplementer Kunin 6in a Merah Un u /iru 7i!au

Tabel ( Spektrum .arna

Sinar dari sumber #aha$a akan diba i men!adi dua berkas oleh #ermin $an berputar pada ba ian dalam spektrofotometer" /erkas pertama akan mele&ati ku,et berisi blanko* sementara berkas kedua akan mele&ati ku,et berisi sampel" /lanko dan sampel akan diperiksa se#ara bersamaan" )dan$a blanko* ber una untuk menstabilkan absorbsi akibat perubahan ,oltase dari sumber #aha$a" A. Prinsip kerja

Spektrofotometri

u,-,is

men a#u

pada

hukum

+ambert-/eer"

)pabila #aha$a monokromatik melalui suatu media <larutan=* maka seba ian #aha$a tersebut akan diserap* seba ian dipantulkan dan seba ian la i akan dipan#arkan"

B. Bagian-bagian Spektrofotometer UV-Vis (" Sumber #aha$a Sumber #aha$a pada spektrofotometer harus memiliki pana#aran radiasi $an a" stabil dan intensitasn$a tin i" Sumber #aha$a pada spektrofotometer UV-Vis ada dua ma#am 0 +ampu Tun sten <.olfram= +ampu ini di unakan untuk men ukur sampel pada daerah tampak" /entuk lampu ini mirip den na bola lampu pi!ar biasa" Memiliki pan!an elomban antara >43-??33 nm" Spektrum radiasian$a berupa aris len kun " Umumn$a memiliki &aktu (333!am pemakaian"
'ambar ? +ampu Tun sten <.olfram=

b" +ampu %euterium +ampu ini dipakai pada pan!an elomban (53->83 nm" Spektrum ener $ radiasin$a lurus* dan di unakan untuk men ukur sampel $an terletak pada daerah u," Memiliki &aktu 433 !am pemakaian"
'ambar > +ampu %euterium

?" Monokromator Monokromator adalah alat $an akan meme#ah #aha$a polikromatis men!adi a" Prisma
'ambar 2 Prisma

#aha$a tun

al <monokromatis= den an komponen pan!an

elomban tertentu" /a ian-ba ian monokromator* $aitu 0

Prisma akan mendispersikan radiasi elektroma netik sebesar mun kin supa$a di dapatkan resolusi $an baik dari radiasi polikromatis" b" 'ratin <kisi difraksi=
'ambar 4 Kisi %ifraksi

Kisi difraksi memberi keuntun an lebih ba i proses spektroskopi" %ispersi sinar akan disebarkan merata* den an pendispersi $an dalam seluruh !an kauan spektrum" #" @elah optis @elah ini di unakan untuk men arahkan sinar monokromatis $an diharapkan dari sumber radiasi" )pabila #elah berada pada posisi $an tepat* maka radiasi akan dirotasikan melalui prisma* sehin pan!an d" Filter /erfun si untuk men$erap &arna komplementer sehin $an diteruskan merupakan #aha$a ber&arna $an elomban $an dipilih" pan!an a #aha$a sesuai den an elomban $an diharapkan" a diperoleh sama* hasil dispersi akan lebih baik" Selain itu kisi difraksi dapat di unakan

>" Kompartemen sampel Kompartemen ini di unakan seba ai tempat diletakkann$a ku,et" ku,et merupakan &adah $an di unakan untuk menaruh sampel $an akan dianalisis" Pada spektrofotometer double beam* terdapat dua tempat ku,et" Satu ku,et di unakan seba ai tempat untuk menaruh sampel* sementara ku,et lain di unakan untuk menaruh blanko" Sementara pada spektrofotometer sin le beam* han$a terdapat satu ku,et"
'ambar 9 Ku,et pleAi lass

Ku,et $an baik harus memenuhi beberapa s$arat seba ai berikut 0 a" Permukaann$a harus se!a!ar se#ara optis a semua #aha$a dapat di transmisikan b" Tidak ber&arna sehin

#" e"

Tidak ikut bereaksi terhadap bahan-bahan kimia /entukn$a sederhana

'ambar : Ku,et Kuarsa

d" Tidak rapuh

Terdapat berba ai !enis dan bentuk ku,et pada spektrofotometer" Umumn$a pada pen ukuran di daerah UV* di unakan ku,et $an sinar u,* sehin elomban pan!an $an terbuat dari bahan kuarsa atau pleAi lass" Ku,et ka#a tidak dapat men absorbsi a tidak di unakan pada saat pen ukuran di daerah UV" di unakan" 'unan$a a ar dapat mele&atkan daerah Oleh karena itu* bahan ku,et dipilih berdasarkan daerah pan!an elomban $an di unakan"

B UV 0 fused silika* kuarsa B Visible 0 elas biasa* silika atau plastik B IR 0 K/r* Ca@l* IRTR)C atau kristal dari sen$a&a ion Bahan Silika 'elas Plastik Panjang gelombang (43->333 >:4-?333 >83-833

Tabel ? /ahan Ku,et Sesuai Pan!an 'elomban

2" %etektor %etektor akan menan kap sinar $an diteruskan oleh larutan" Sinar kemudian diubah men!adi sin$al listrik oleh amplifier dan dalam rekorder dan ditampilkan dalam bentuk an ka-an ka pada reader <komputer=" Terdapat beberapa !enis dete#tor pada spektrofotometer 0 Jenis detector Phototube range (nm) (43 D (333 Sifat Pengg naan arus listrik UV arus listrik UVEVis peng k ran

Photomultiplie (43 D (333 r Solid state >43 D >333 Thermo#ouple 933 D ?3"333

arus listrik IR

Thermistor

933 D ?3"333

hambatan listrik IR
elomban

Tabel > 6enis-!enis detektor berdasarkan pan!an

S$arat-s$arat ideal sebuah dete#tor adalah 0 Mempun$ai kepekaan tin i elomban Respon konstan pada berba ai pan!an

.aktu respon #epat dan sin$al minimum tanpa radiasi Sin$al listrik a$n dihasilkan harus sebandin den an tena a radiasi Merupakan s$stem ba#a $an mempera akan besarn$a is$arat

4" Visual displa$ listrik* men$atakan dalam bentuk F Transmitan maupun )bsorbansi"

!. Prosed r "erja
'ambar 8 %ia ram ker!a spektrofotometer

@aha$a $an

berasal dari lampu deuterium maupun &olfram $an

bersifat polikromatis di teruskan melalui lensa menu!u ke monokromator pada spektrofotometer dan filter #aha$a pada fotometer" Monokromator kemudian akan men ubah #aha$a polikromatis men!adi #aha$a tertentu suatu -at monokromatis <tun al=" /erkas-berkas #aha$a den an pan!an men andun

kemudian akan dile&atkan pada sampel $an diserap <diabsorbsi= dan ada pula $an men hitun $an #aha$a $an

dalam konsentrasi tertentu" Oleh karena itu* terdapat #aha$a $an dile&atkan" @aha$a $an diserap dile&atkan ini kemudian di terima oleh dete#tor" %ete#tor kemudian akan diterima dan men etahui #aha$a $an diserap sebandin oleh sampel" @aha$a $an terkandun den an konsentrasi -at

dalam sampel sehin

a akan diketahui konsentrasi -at

dalam sampel se#ara kuantitatif" #. !ara Pera$atan dan Pen%impanan Alat (" ?" Sebelum di unakan* biarkan mesin &armin -up selama (4-?3 menit" Spektrofotometer lan sun * karena pen ukuran" sebisa #aha$a mun kin dari tidak terpapar akan sinar matahari an u matahari dapat men

>"

Simpan spektrofotometer di dalam ruan an $an diatas me!a $an permanen"

suhun$a stabil dan

2" Pastikan kompartemen sampel bersih dari bekas sampel" 4" Saat memasukkan ku,et* pastikan ku,et kerin " 9" +akukan kalibrasi pan!an elomban dan absorban se#ara teratur"

&. 'al-hal %ang har s diperhatikan (" +arutan $an dianalisis merupakan larutan ber&arna )pabila larutan $an larutan $an lampu UV" ?" Pan!an $an elomban maksimum elomban $an di unakan adalah pan!an elomban Pan!an elomban elomban akan dianalisis merupakan larutan $an tidak ber&arna* maka larutan tersebut harus diubah terlebih dahulu men!adi ber&arna" Ke#uali apabila diukur den an men unakan

mempun$ai absorbansi maksimal" 7al ini dikarenakan pada pana! n maksimal* kepekaann$a !u a maksimal karena pada pan!an tersebut* perubahan absorbansi untuk tiap satuan konsentrasi palin besar" Selain itu disekitar pan!an datar sehin elomban a hukum

adalah $an

maksimal* akan terbentuk kur,a absorbansi $an tin kat kesalahann$a akan ke#il sekali" >" Kalibrasi Pan!an $an elomban dan )bsorban

+ambert-/eer dapat terpenuhi" %an apabila dilakukan pen ukuran ulan *

Spektrofotometer di unakan untuk men ukur intensitas #aha$a dipan#arkan dan #aha$a $an diabsorbsi" 7al ini ber antun elomban pada tertentu ter antun spektrofotometer pada pada a ar spektrum elektroma netik $an men$erap #aha$a pada pan!an sen$a&a $an pan!an elomban dan diabsorb oleh benda" Tiap media akan

terbentuk" Oleh karena itu perlu dilakukan kalibrasi absorban

pen ukuran $an di dapatkan lebih teliti" (. "elebihan Spektrofotometer

("

Pen

unaann$a

luas"

%apat

di unakan

untuk

sen$a&a

or ani#*

anor anik dan biokimia $an daerah tampak ?" Sensiti,itasn$a tin i i"

diabsorbsi pada daerah ultra,iolet maupun deteksi untuk men absorbsi dapat

/atas

diperpan!an men!adi (3-9 sampai (3-: M >" Selekti,itasn$a tin 2" Ketelitiann$a baik 4" Pen ukurann$a mudah* den an kiner!a $an #epat

Spektrofotometri merupakan salah satu metode dalam kimia analisis yang digunakan untuk menentukan komposisi suatu sampel baik secara kuantitatif dan kualitatif yang didasarkan pada interaksi antara materi dengan cahaya. Peralatan yang digunakan dalam spektrofotometri disebut spektrofotometer. Cahaya yang dimaksud dapat berupa cahaya visibel, UV dan inframerah, sedangkan materi dapat berupa atom dan molekul namun yang lebih berperan adalah elektron valensi. Sinar atau cahaya yang berasal dari sumber tertentu disebut juga sebagai radiasi elektromagnetik. Radiasi elektromagnetik yang dijumpai dalam kehidupan sehari hari adalah cahaya matahari.

!alam interaksi materi dengan cahaya atau radiasi elektromagnetik, radiasi elektromagnetik kemungkinanan dihamburkan, diabsorbsi atau dihamburkan sehingga dikenal adanya spektroskopi hamburan, spektroskopi absorbsi ataupun spektroskopi emisi. Pengertian spektroskopi dan spektrofotometri pada dasarnya sama yaitu di dasarkan pada interaksi antara materi dengan radiasi elektromagnetik. "amun pengertian spektrofotometri lebih spesifik atau pengertiannya lebih sempit karena ditunjukan pada interaksi antara materi dengan cahaya #baik yang dilihat maupun tidak terlihat$. Sedangkan pengertian spektroskopi lebih luas misalnya cahaya maupun medan magnet termasuk gelombang elektromagnetik. Radiasi elektromagnetik memiliki sifat ganda yang disebut sebagai sifat dualistik cahaya yaitu% &$ Sebagai gelombang '$ Sebagai partikel partikel energi yang disebut foton. (arena sifat tersebut maka beberapa parameter perlu diketahui misalnya panjang gelombang, frekuensi dan energi tiap foton. Panjang gelombang #l$ didefinisikan sebagai jarak antara dua puncak.

7ubun an dari keti a parameter di atas dirumuskan oleh Plan#k $an dikenal den an persamaan Planck" 7ubun an antara pan!an elomban frekuensi dirumuskan seba ai

c = . v atau = c/v atau v = c/

Persamaan Planck0 hubun an antara ener i tiap foton den an frekuensi

E=h.v E = h . c/

dimana ) * energi tiap foton h * tetapan Planck #+,+'+ , &- ./ 0.s$, v * frekuensi sinar c * kecepatan cahaya #. , &-1 m.s &$.

Dari rumus di atas dapat diketahui bahwa energi dan frekuensi suatu foton akan berbanding terbalik dengan panjang gelombang tetapi energi yang dimiliki suatu foton akan berbanding lurus dengan frekuensinya.

2isalnya% energi yang dihasilkan cahaya UV lebih besar dari pada energi yang dihasilkan sinar tampak. 3al ini disebabkan UV memiliki panjang gelombang #4$ yang lebih pendek #&--5/-- nm$ dibanding panjang gelombang yang dimiliki sinar tampak #/--51-- nm$.
/erba ai satuan ener i beserta faktor kon,ersin$a dapat dilihat pada tabel0

)rg & erg * & 0 joule * &-6 & kalori /,&1/78&-6 & atm * &,-&..8&-7 & ).volt * &,+-'&8&- &'

0oule &- 6 & /,&1/&,-&..8&-' &,+-'&, &7

(alori ',.7-&8&- 1 ',.7-&8&- & & '/,'&1 .,1'7&8&- '-

l.atm 7,1+168&-&7,1+168&- . /,&'7&8&- ' & &,9+&&8&- '-

).volt +,'/&18&-&& +,'/&18&-&1 ',+&&+8&-&7 &+,+'/18&-'&

:nteraksi antara materi dengan cahaya disini adalah terjadi penyerapan cahaya, baik cahaya Uv, Vis maupun :r oleh materi sehingga spektrofotometri disebut juga sebagai spektroskopi absorbsi. !ari / jenis spektrofotometri ini #UV, Vis, UV Vis dan :r$ memiliki prinsip kerja yang sama yaitu adanya interaksi antara materi dengan cahaya yang memiliki panjang gelombang tertentu . Perbedaannya terletak pada panjang gelombang yang digunakan. Secara sederhana :nstrumen spektrofotometri yang disebut spektrofotometer terdiri dari % sumber cahaya ! monokromator ! sel sampel ! detektor ! read out "pembaca#.

$ungsi masing%masing bagian& &. Sumber sinar polikromatis berfungsi sebagai sumber sinar polikromatis dengan berbagai macam rentang panjang gelombang. Untuk sepktrofotometer

UV menggunakan lampu deuterium atau disebut juga heavi hidrogen '() menggunakan lampu tungsten yang sering disebut lampu wolfram UV V:S menggunan photodiode yang telah dilengkapi monokromator. :nfra merah, lampu pada panjang gelombang :R.

'. 2onokromator berfungsi sebagai penyeleksi panjang gelombang yaitu mengubah cahaya yang berasal dari sumber sinar polikromatis menjadi cahaya monaokromatis. 0enis monokromator yang saat ini banyak digunakan adalan gratting atau lensa prisma dan filter optik. 0ika digunakan grating maka cahaya akan dirubah menjadi spektrum cahaya. Sedangkan filter optik berupa lensa ber;arna sehingga cahaya yang diteruskan sesuai dengan ;arnya lensa yang dikenai cahaya. <da banyak lensa ;arna dalam satu alat yang digunakan sesuai dengan jenis pemeriksaan.
Pada gambar di atas disebut sebagai pendispersi atau penyebar cahaya. dengan adanya pendispersi hanya satu jenis cahaya atau cahaya dengan panjang gelombang tunggal yang mengenai sel sampel. Pada gambar di atas hanya cahaya hijau yang mele;ati pintu keluar.

Proses dispersi atau penyebaran cahaya seperti yang tertera pada gambar.

.. Sel sampel berfungsi sebagai tempat meletakan sampel UV, V:S dan UV V:S menggunakan kuvet sebagai tempat sampel. (uvet biasanya terbuat dari kuarsa atau gelas, namun kuvet dari kuarsa yang terbuat dari silika memiliki kualitas yang lebih baik. 3al ini disebabkan yang terbuat dari kaca

dan plastik dapat menyerap UV sehingga penggunaannya hanya pada spektrofotometer sinar tampak #V:S$. Cuvet biasanya berbentuk persegi panjang dengan lebar & cm. :R, untuk sampel cair dan padat #dalam bentuk pasta$ biasanya dioleskan pada dua lempeng natrium klorida. Untuk sampel dalam bentuk larutan dimasukan ke dalam sel natrium klorida. Sel ini akan dipecahkan untuk mengambil kembali larutan yang dianalisis, jika sampel yang dimiliki sangat sedikit dan harganya mahal.

/. !etektor berfungsi menangkap cahaya yang diteruskan dari sampel dan mengubahnya menjadi arus listrik. Syarat syarat sebuah detektor %

(epekaan yang tinggi Perbandingan isyarat atau signal dengan bising tinggi Respon konstan pada berbagai panjang gelombang. =aktu respon cepat dan signal minimum tanpa radiasi. Signal listrik yang dihasilkan harus sebanding dengan tenaga radiasi.

*acam%macam detektor &

!etektor foto #Photo detector$ Photocell, misalnya CdS. Phototube 3antaran foto !ioda foto !etektor panas

9. Read out merupakan suatu sistem baca yang menangkap besarnya isyarat listrik yang berasal dari detektor.

+roses ,bsorbsi -ahaya pada )pektrofotometri

(etika cahaya dengan panjang berbagai panjang gelombang #cahaya polikromatis$ mengenai suatu >at, maka cahaya dengan panjang gelombang tertentu saja yang akan diserap. !i dalam suatu molekul yang memegang peranan penting adalah elektron valensi dari setiap atom yang ada hingga terbentuk suatu materi. )lektron elektron yang dimiliki oleh suatu molekul dapat berpindah #eksitasi$, berputar #rotasi$ dan bergetar #vibrasi$ jika dikenai suatu energi. 0ika >at menyerap cahaya tampak dan UV maka akan terjadi perpindahan elektron dari keadaan dasar menuju ke keadaan tereksitasi. Perpindahan elektron ini disebut transisi elektronik. <pabila cahaya yang diserap adalah cahaya inframerah maka elektron yang ada dalam atom atau elektron ikatan pada suatu molekul dapat hanya akan bergetar #vibrasi$. Sedangkan gerakan berputar elektron terjadi pada energi yang lebih rendah lagi misalnya pada gelombang radio. <tas dasar inilah spektrofotometri dirancang untuk mengukur konsentrasi suatu suatu yang ada dalam suatu sampel. !imana >at yang ada dalam sel sampel disinari dengan cahaya yang memiliki panjang gelombang tertentu. (etika cahaya mengenai sampel sebagian akan diserap, sebagian akan dihamburkan dan sebagian lagi akan diteruskan. Pada spektrofotometri, cahaya datang atau cahaya masuk atau cahaya yang mengenai permukaan >at dan cahaya setelah mele;ati >at tidak dapat diukur, yang dapat diukur adalah :t?:- atau :-?:t #perbandingan cahaya datang dengan cahaya setelah mele;ati materi #sampel$$. Proses penyerapan cahaya oleh suatu >at dapat digambarkan sebagai berikut%

@ambar Proses penyerapan cahaya oleh >at dalam sel sampel. dari gambar terlihat bah;a >at sebelum mele;ati sel sampel lebih terang atau lebih banyak di banding cahaya setelah mele;ati sel sampel

Cahaya yang diserap diukur sebagai absorbansi #<$ sedangkan cahaya yang hamburkan diukur sebagai transmitansi #A$, dinyatakan dengan hukum lambert beer atau 3ukum Beer, berbunyi%

Cjumlah radiasi cahaya tampak "ultraviolet. inframerah dan sebagainya# yang diserap atau ditransmisikan oleh suatu larutan merupakan suatu fungsi eksponen dari konsentrasi /at dan tebal larutanD.

Berdasarkan hukum Eambert Beer, rumus yang digunakan untuk menghitung banyaknya cahaya yang hamburkan%

dan absorbansi dinyatakan dengan rumus%

dimana :- merupakan intensitas cahaya datang dan : t atau :& adalah intensitas cahaya setelah mele;ati sampel.
Rumus $an diturunkan dari 7ukum /eer dapat ditulis seba ai0

,= a . b . c atau , = 0 . b . c

dimana% < * absorbansi

b atau terkadang digunakan l * tebal larutan #tebal kuvet diperhitungkan juga umumnya & cm$ c * konsentrasi larutan yang diukur F * tetapan absorptivitas molar #jika konsentrasi larutan yang diukur dalam molar$ a * tetapan absorptivitas #jika konsentrasi larutan yang diukur dalam ppm$.

Secara eksperimen hukum Eambert beer akan terpenuhi apabila peralatan yang digunakan memenuhi kriteria kriteria berikut% &. Sinar yang masuk atau sinar yang mengenai sel sampel berupa sinar dengan dengan panjang gelombang tunggal #monokromatis$. '. Penyerapan sinar oleh suatu molekul yang ada di dalam larutan tidak dipengaruhi oleh molekul yang lain yang ada bersama dalam satu larutan. .. Penyerapan terjadi di dalam volume larutan yang luas penampang #tebal kuvet$ yang sama. /. Penyerapan tidak menghasilkan pemancaran sinar pendafluor. <rtinya larutan yang diukur harus benar benar jernih agar tidak terjadi hamburan cahaya oleh partikel partikel koloid atau suspensi yang ada di dalam larutan. 4" (onsentrasi analit rendah. (arena apabila konsentrasi tinggi akan menggangu kelinearan grafik absorbansi versus konsntrasi.

Gaktor faktor yang sering menyebabkan kesalahan dalam menggunakan spektrofotometer dalam mengukur konsentrasi suatu analit% &. <danya serapan oleh pelarut. 3al ini dapat diatasi dengan penggunaan blangko, yaitu larutan yang berisi selain komponen yang akan dianalisis termasuk >at pembentuk ;arna. '. Serapan oleh kuvet. (uvet yang ada biasanya dari bahan gelas atau kuarsa, namun kuvet dari kuarsa memiliki kualitas yang lebih baik. >" (esalahan fotometrik normal pada pengukuran dengan absorbansi sangat rendah atau sangat tinggi, hal ini dapat diatur dengan pengaturan konsentrasi, sesuai dengan kisaran sensitivitas dari alat yang digunakan #melalui pengenceran atau pemekatan$.

)pektrum 1'. '(). 1'%'() dan (2 !ata data yang dikeluarkan oleh UV atau V:S dapat berupa absorbansi atau transmitansi yang langsung dibaca pada spektrofotometer. "amun untuk UV, V:S, UV V:S dan :R data yang dikeluarkan dapat berupa spektrum jika telah dihubungkan dengan komputer. Spektrum yang dikeluarkan oleh UV, V:S dan UV V:S berupa pita yang lebar sedangkan pada pita yang dikeluarkan oleh :R berupa garis atau puncak tajam. Pita melebar dari UV V:S disebabkan karena energi yang dimiliki selain menyebabkan transisi elektronik terjadi pula rotasi dan vibrasi elektron dalam molekul. Sedangkan pada :R hanya terjadi vibrasi elektron maka spektrum yang dihasilkan berupa garis atau puncak tajam. Selain pada :R, spektrum berupa garis dapat terjadi pula pada spektroskopi "2R karena hanya terjadi rotasi elektron. Spektrum yang dihasilkan dari setiap spektroskopi berbeda antara satu dengan yang lainnya. Para kimia;an spektrum UV, V:S maupun :R dapat dibedakan dengan mudah. Spektrum yang dihasilkan oleh UV, V:S dan UV V:S tidak berbeda jauh namun sangat sangat berbeda bila dibanding spektrum :R. Untuk membedakannya dapat dilihat pada gambar%

@ambar spektrum UV. "amun spektrum dari spektrofotometer V:S dan UV V:S menyerupai spektrum UV

@ambar spektrum :R. Pita tertinggi mengarah ke ba;ah sedangkan pada UV pita yang paling tinggi mengarah ke atas hal ini disebabkan spektrofotometer :R ditulis dalam bentung bilangan gelombang