Laporan Praktikum Biokimia

LIPID
Tanggal 25 Oktober 2010

Disusun oleh: KELO POK I!

1. "nin#ita $atna%ati "#it&a '0(0)5*11+2,

2- "n#rianto "gung .una%an '0(0)5*11)),

3. "stri

auli#ina '0(0)5*120*,

DEP"$TE E/ 0"$ "1I 0"K2LT"1 "TE "TIK" D"/ IL 2 PE/.ET"32"/ "L" 2/I4E$1IT"1 I/DO/E1I" DEPOK

2010

I.

Prinsip dan Tujuan

II.

Teori
Lipi# a#alah segolongan sen&a%a organik &ang ter#apat #i #alam alam #an mempun&ai si5at6si5at: 1- Ti#ak larut #alam air7 tetapi larut #alam pelarut6pelarut lemak seperti eter7 kloro5orm7 alkohol panas #an ben8ene2- Berhubunagn erat #engan asam lemak*- Dapat #igunakan oleh organisme hi#upLipi# #apat #iekstraksi oleh 9aringan binatang maupun tumbuh6tumbuhan #engan menggunakan pelarut lemak- 3asil ekstraksi merupakan :ampuran &ang kompleks #iantaran&a: trigliseri#a7 %a;7 5os5olipi#7 glikolipi#7 berma:am6ma:am sterol #an sen&a%a6sen&a%a lain &ang terbentuk sebagai hi#rolisa 8at68at tersebut #iatasTrigliseri#a7 kolesterol #an ester kolesterol #inamakan 9uga lipi# netral karena ti#ak bermuatanKlasi5ikasi enurut Bloor7 lipi# #apat #ibagi #alam tiga golongan &aitu: 11imple Lipi# erupakan ester asam6asam lemak #engan berma:am6ma:am alkohol7 &ang termasuk simple lipi# &aitu: a- Lemak netral #an min&ak Ialah ester asam6asam lemak #engan gliserol:air pa#a suhu kamar<ontoh: Tristerin7 tripalmitin7 #ipalmitostearin7 #istearopalmitinin&ak ialah lemak &ang berbentuk

b- =a; Ialah ester asam6asam lemak #engan alkohol ali5atik &ang mempun&ai rantai karbon pan9ang2<ompoun# Lipi# <ompoun# lipi# merupakan ester asam6asam lemak &ang pa#a hi#rolisa menghasilkan asam lemak7 alkohol7 #an 9uga 8at68at laina- 0os5olipi# 3i#rolisa 5os5olipi# menghasilkan asam lemak7 gliserol 'atau alkohol lain &ang bukan gliserol,7 asam 5olat #an sen&a%a6sen&a%a lain- <ontoh 5os5olipi#: 1- "sam 5os5ati#at '5os5ati#il gliserol,7 han&a mengan#ung gliserol7 asam lemak #an asam 5os5at- Di5os5ati#ilgliserol #ikenal #engan nama kar#iolipin #an ter#apat #i #alam mitokon#ria2- 0os5ati#ilkolin 'lesitin,7 mengan#ung asam 5os5at #an kolin*- 0os5ati#iletanolamin 'se5alin,7 mengan#ung asam 5os5ati#at #an etanolamin>- 0os5ati#il inositol 'lipositil,7 mengan#ung asam 5os5ati#at #an inositol5- 0os5ati#il serin7 mengan#ung asam 5os5ati#at #an asam amino serin)- Plasmalogen7 men&erupai lesitin #an se5alin7 ke:uali ikatan ester asam lemak pa#a posisi pa#a karbon gliserol #iganti oleh ikatan ester #engan suatu alkohol tak 9enuh+- 15ingomielin7 ti#ak mengan#ung gliserol- Pa#a hi#rolisa akan #ihasilkan asam lemak7 asam 5os5at7 kolin7 #an suatu alkohol &ang mengan#ung gugus amina &ang #isebut s5ingosinb- .likolipi# '1erebrosi#a, .likolipi# mengan#ung asam lemak7 s5ingo5usin #an karbohi#rat 'galaktosa?glukosa,- 1ul5ati#a ialah serebrosi#a &ang mengan#ung sul5at.angliosi#a mengan#ung7 #isamping glukosa?galaktosa7 asam lemak #an s5ingosin 9uga mengan#ung asam /6asetilneraminat #an he;osamin@DeriAat Lipi# DeriAat lipi# ialah semua sen&a%a &ang #ihasilkan pa#a hi#rolisa simple #an :ompoun# lipi# &ang masih mempun&ai si5at6si5at seperti lemak #imasukkan #alam golongan ini-

"sam6asam Lemak 1Dengan rantai karbon 9enuh2mumn&a sam6asam lemak &ang ter#apat #i alam mengan#ung 9umlah atom < genap 'asam asetat7 asam butirat7 asam kaproat7 asam laurat7 asam sterat #an asam ara:hi#at,2Dengan rantai karbon &ang mengan#ung ikatan rangkap<ontoh: asam oleat7 asam linoleat #an asam ara:hi#onat- Bang tiga terakhir #igolongkan #alam asam lemak essensial7 karena #iperlukan untuk pertumbuhan optimum #an ti#ak #ibentuk #i#alam tubuh #alam 9umlah &ang :ukup untuk keprluan 9aringan2mumn&a asam lemak 9enuh lebih ban&ak ter#apat #i#alam lemak he%an7 se#angkan asam lemak tak 9enuh lebih ban&ak #i#alam min&ak tumbuh6tumbuhan Dalam kea#aan murni7 pa#a umumn&a lemak ti#ak mengan#ung rasa7 ti#ak ber%arna7 #an ti#ak berbau- =arna lemak atau min&ak &ang ter#apat #ialam #isebabkan oleh berma:am6ma:am pigmenTipe lemak mempun&ai titik lebur &ang #itentukan oleh asam lemakn&a- 1i5at ini #apat #ipakai untuk memisah6misahkan :ampuran berma:am6ma:am lemak- 1ebagai :ontoh: Titik lebur tristearin +1C< #an trielin 65C<"sam6asam lemak tak 9enuh &ang ter#apat #ialam mu#ah mengalami oksi#asi #an membentuk berma:am6ma:am 8at &ang men&ebabkan lemak berbau tengik- Dat68at tersebut ti#ak #apat #i:ernakan #an #iantaran&a a#a &ang bersi5at ra:un- 2ntuk men:egah lemak men9a#i tengik7 #apat #itambahkan antioksi#an misaln&a hi#roEuinon"sam6asam lemak tak 9enuh #apat menghilangkan %arna io#ium- 3al ini #isebabkan karena a#isi io#ium pa#a ikatan rangkap- Ber#asarkan si5at ini7 io#ium #apat #ipakai untuk menmentukan ban&akn&a ikatan rangkap #i #alam se9umlah tertentu lemak '"ngka Io#iumF 9umlah gram &ang #apat #ia#isi oleh 100 gram lemak,-

III.

Alat dan Bahan

Alat:
-Tabung reaksi - Beaker glass - Batang penagduk - Labu Erlenmeyer - Pipet tetes - Buret dan statif - Kertas saring- Erlenmeyer bertutup glass - Gelas ukur - Penangas air - Spatel - Tabung sentrifugasi

Bahan:
Adeps lanae argarin - A!uadest - Larutan "#dium - Eter - K$%-Etan#l &'( ) - Kl#r#f#rm - %*L &'( ) - )a$% &'1 ) - "ndikat#r PP inyak kelapa - KBr$3 &'+ )

- )a+*$3 &'( , - KBr - Etan#l - %*L - ) - Larutan K" 1. , - )a-ti#sulfat &'1 ) era/ telur - Aset#n - K$% dlm etan#l 1&, - Larutan k#lester#l &'&(, dlm *%*l3 - Asam asetat an/idrat - %+S$- 0p1

IV.

Percobaan dan Hasil Pengamatan

1Per:obaan #a&a larut 2ntuk memeriksa #a&a larut suatu 8at terutama lipi# se9umlah ke:il 8at tersebut #ilarutkan #alam beberapa ml pelarut- Dera9at kelarutan #apat #ilihat se:ara langsung- Dapat 9uga larutan #ituang perlahan6lahan 'atau #isaring #engan kertas saring kering, ke #alam sebuah gelas arlo9i- Pelarut #apat #iuapkan #engan pertolongan penangas uap- Gumlah resi#u menun9ukkan 9umlah 8at &ang larut #alam larutan &ang #iperiksaa- Periksalah #a&a larut lemak #omba #alam air7 alkohol panas7 alkohol #ingin7 eter7 #an kloro5orm- Taruhlah setetes larutan #alam eter pa#a sehelai kertas saringPerhatikan ber:ak lemak setelah eter menguapBerikut merupakan hasil pengamatan kelarutan lemak #omba: Pelarut Kelarutan "ir Ti#ak larut "lkohol panas Ti#ak larut "lkohol #ingin Ti#ak larut Eter Larut

Kloro5orm Larut a#a ber:ak transparan 'H,Test ber:ak lemak basukkanlah se#ikit lemak pa#at ke #alam tabung reaksi- Tambahkanlah 2 ml air #an hangatkanlah #alam penangas uap Perhatikan bah%a lemak akan men:air #an terapung pa#a permukaan air- Tambahkanlah beberapa ml /aO3 #alam alkohol- Panaskan kembali- Larutan akan men9a#i 9ernih- Ko:ok #an perhatikan pembentukkan busa &ang :epat- TerangkanBerikut merupakan hasil pengamatan kelarutan lemak pa#at: 1etelah #itambahkan /aO3 #alam alkohol7 #ipanaskan7 lalu #iangkat7 :epat menghilang:Periksalah #a&a larut min&ak kelapa #alam air7 alkohol panas7 alkohol #ingin7 eter #an kloro5orm- Lakukan test ber:ak lemakasukkanlah ke#alam tabung reaksi 1 ml min&ak #an * ml air7 ko:ok #an tambahkanlah 1 ml larutan natrium karbonat 075 I #an ko:ok lagi- Bagaimana pengaruh natrium karbonat terha#ap kestabilan emulsiBerikut merupakan hasil pengamatan kelarutan min&ak kelapa: Pelarut - Kelarutan - Pengamatan Bercak "ir 6 Ti#ak larut 6 Ber:ak transparan "lkohol panas 6 Ti#ak larut 6 Ber:ak transparan "lkohol #ingin 6Ti#ak larut 6 Ti#ak a#a ber:ak Eter 6 Larut 6 Ber:ak transparan Kloro5orm 6 Larut 6 Ber:ak transparan Test Pengamatan ko:ok H 1 ml larutan /a karbonat 075 I1 ml min&ak kelapa H * ml air =arna larutan men9a#i putih susuPengaruh /a karbonat terha#ap emulsi a#alah men9a#ikan emulsi ti#ak stabil2Per:obaan untuk men&atakan ikatan tak 9enuh "mbillah * buah tabung reaksi kering- Ke#alam tabung &ang pertama masukkanlah se#ikit min&ak kelapa7 ke#alam tabung ke#ua margarin #an ke#alam tabung &ang ula6mula terlihat lemak mengapung7 terbentuk busa7 kemu#ian#iko:ok busa tersebut

ketiga lemak pa#at- Ke#alam tiap tabung #itambahkan kloro5orm #alam 9umlah sama- Kemu#ian teteskan ke#alam tiap tabung larutan io#ium- .o&anglah tabung reaksi pa#a tiap penambahan io#ium- Terangkan apa &ang ter9a#iBerikut merupakan hasil pengamatan ikatan tak 9enuh pa#a margarin7 min&ak kelapa7 #an lemak #omba: Dat 29i Pengamatan argarin Lemak pa#at =arna merah keunguan =arna merah 9ernih =arna merah ke:okelatan 'merah hati, in&ak kelapa

*- Penetapan angka pen&abunan Timbanglah lebih kurang 2 gram min&ak ke#alam Labu Erlenme&er7 tambahkanlah 25 ml larutan KO36Etanol 075 / #alam 9umlah &ang sama- Ke#ua labu #i re5lu; #i atas penangas air selama *0 menit sambil #ia#uk se%aktu6%aktu- Titrasi #engan 3<L 075 / menggunakan in#ikator 5enol5talein- 3itung angka pen&abunan #engan rumus: "ngka pen&abunan: a a#alah 9umlah 3<L 075 / &ang #ibutuhkan titrasi 8at u9i b a#alah 9umlah 3<L 075 / &ang #ibutuhkan untuk titrasi blangko g a#alah berat min&ak &ang #igunakan Berikut merupakan penentuan bilangan pen&abunan lemak #omba: J Gumlah 3<l 075 / &ang #ibutuhkan untuk titrasi 8at u9i 'a, F 107+ ml J Gumlah 3<l 075 / &ang #ibutuhkan untuk titrasi blanko 'b, F 127@ ml Ga#i7 angka pen&abunann&a: ' 127@ K 107+ , ; 2@-05 ?2 F 2(7>525?gr lemak #omba Pa#a per:obaan penentuan bilangan pen&abunan ini7 praktikan ti#ak menggunakan KO36etanol #ikarenakan keterse#iaan bahan pa#a a%al per:obaan- Praktikan menggunakan /aO36metanol sebagai ganti atas sei9in #ari asisten laboratorium- 3al ini men&ebabkan se#ikit pergeseran angka pen&abunan #iban#ingkan #engan pen&abunan menggunakan KO36etanol-

>- Penetapan bilangan Io#ium Timbang lebih kurang 2 gram 8at #alam labu Erlenme&er bertutup gelas7 larutkan #alam 10 ml <3<l* #an berturut6turut tambahkan 25 ml KBrO* 072 /L 175 gram KBr &ang telah #ilarutkan #alam 5 ml air #an + ml 3<L > /- 1impan labu #i tempat gelap selama 1 9am- Buka sumbat7 tambahkan + ml larutan natrium tiosul5at 071 / #an ko:ok kuat6kuat- Lakukan titrasi blangkoBilangan Io#ium : ' b K a, ; / /a212O* ; 100 ; 0712)(?g a a#alah 9umlah /a212O* 071 / &ang #ibutuhkan untuk titrasi 8at u9i b a#alah 9umlah /a212O* 071 / &ang #ibutuhkan untuk titrasi blangko g a#alah berat 8at &ang #igunakan Berikut merupakan penentuan bilangan Io#ium: J Gumlah /a212O* 071 / &ang #ibutuhkan untuk titrasi 8at u9i 'a, F 157* ml J Gumlah /a212O* 071 / &ang #ibutuhkan untuk titrasi blanko 'b, F 2*7( ml Ga#i bilangan Io#iumn&a: '2*7( K 157*, ; 071 ; 100 ; 0712)( ?2 F 107(1*>?gr mentega 5- Ekstraksi kolesterol #ari merah telur ula6mula telur #ipe:ahkan #an #ikeluarkan isin&a7 kemu#ian bagian kuning telur #ipisahkan #ari putihn&a7 kuning telur #imasukkan ke#alam gelas piala 100 ml #an #itimbang beratn&a1eban&ak 25 ml metanol #alam 1275 kloro5orm berturut6turut #ituangkan ke#alam gelas piala &ang berisi kuning telur7 lalu #ia#uk #an #i#iamkan selama 10 menit1elan9utn&a :ampuran tersebut #isaring #engan kertas saring n0->0 &ang telah #ibasahkan sebelumn&a #engan alkohol7 #an #itampung ke #alam gelas piala keringEn#apan &ang terbentuk #ibilas #engan 20 ml :ampuran metanol6kloro5orm 2:1 'A?A,3asil bilasan tersebut #isatukan #engan 5iltrat- Larutan K<L 1 I kemu#ian #itambahkan ke#alam :ampuran 5iltrat #an hasil bilasan #engan Aolume 1:11eluruh :ampuran larutan tersebut kemu#ian #imasukkan ke #alam :orong pisah lalu #iko:ok6ko:ok hingga terbentuk #ua bagian larutan7 larutan kloro5orm akan bera#a #i bagian ba%ah :orong pemisahKemu#ian larutan kloro5orm &ang melarutkan kolesterol hasil ekstraksi #iambil

seban&ak 10 ml #an #itampung #alam Aial 25 ml7 lalu #isimpan #alam lemari pen#ingin untuk analisis ka#ar kolesterolBerikut merupakan hasil pengamatan pa#a ekstraksi kolesterol #ari merah telur: Terbentuk #ua lapisan larutan &ang bagian atasn&a ber%arna putih keruh #an pa#a bagian ba%ahn&a ber%arna kuning- <airan tersebut kemu#ian #ipisahkan #engan :orong pemisah7 #iambil bagian ba%ahn&a &ang ber%arna kuning kurang lebih Aolumen&a 10 ml)- Per:obaan6per:obaan #engan kolesterol a$eaksi 1alko%ski eto#e: 1 ml larutan kolesterol 0705 I #alam kloro5orm #i:ampur berhati6hati #engan 1 ml 321O> pekat- 1etelah ke#ua lapisan :airan berpisah lagi akan timbul berturut6 turut %arna merah7 biru7 ungu #alam lapisan kloro5orm- 1elai #ari itu #alam lapisan asam akan tampak 5luorosensi kuningBerikut merupakan hasil pengamatan reaksi 1alko%ski: Reaksi Salkowski Larutan stan#ar Larutan ekstrak merah keunguan b$eaksi Liebermann6Bur:har# eto#e: 1 ml larutan kolesterol stan#ar 0705 I #alam kloro5orm #itambah #engan 1 ml pereaksi Liebermann6Bu:har# 'asam asetat anhi#rat #an asam sul5at pekat 10:2,Ko:oklah hati6hati #an perhatikan %arna6%arna &ang timbulBerikut merupakan hasil pengamatan reaksi Liebermann6Bu:har#: Reaksi Liebermann-Burchard Pengamatan Larutan stan#ar: terbentuk %arna hi9au H asam asetat anhi#rat 10 tetes H * tetes Pengamatan Terbentuk #ua lapisan :airan ber%arna merah mu#a #an bening Terbentuk #ua lapisan :airan ber%arna merah :okelat #an Per:obaan ini memerlukan alat6alat &ang kering benar-

321O>'p, Ekstrak kolesterol: terbentuk %arna hi9au &ang pekat H asam asetat anhi#rat 10 tetes H * tetes 321O>'p,

V.

Pembahasan
1- Per:obaan #a&a larut Pa#a tes kelarutan #i#apat hasil bah%a lemak #omba #an min&ak kelapa &ang bersi5at nonpolar larut #alam eter #an kloro5orm karena ke#uan&a merupakan pelarut organik 'nonpolar,- 1e#angkan pa#a pelarut polar seperti air #an alkohol7 lemak #omba #an min&ak kelapa ti#ak #apat larut- Kelarutan suatu 8at #alam suatu pelarut #itentukan oleh ban&ak hal7 antara lain a#alah si5at kepolaran 8at #an pelarutn&a2mumn&a 8at &ang polar #apat larut #alam pelarut &ang bersi5at polar7 namun ti#ak #apat larut #alam pelarut nonpolar- Begitu 9uga sebalikn&a- 3al ini #ikarenakan a#an&a momen #ipol pa#a 8at atau pelarut sehingga #apat berikatan #an berinteraksi #engan sesaman&a- 1e#angkan pa#a pelarut nonpolar ti#ak memiliki momen #ipol7 sehingga ti#ak bisa berinteraksi #engan 8at &ang polar7 9a#i ti#ak #apat larutPa#a tes ber:ak lemak7 a#an&a ber:ak transparan pa#a kertas saring menan#akan a#an&a lemak pa#a 8at tersebut- Pa#a 8at #alam pelarut eter ter#apat ber:ak karena lemak #omba telah larut sehingga terba%a pa#a saat penetesan #an #apat membuat ber:ak pa#a kertasPengaruh /a2<O* terha#ap kestabilan emulsi a#alah: #engan a#an&a logam /a men&ebabkan emulsi men9a#i :epat pe:ah 'terpisah men9a#i #ua komponenn&a kembali,- Pa#a saat min&ak #iko:ok bersama air akan ter9a#i emulsi min&ak #alam air7 #itan#ai #engan a#an&a kekeruhan ? larutan ber%arna putih- 1etelah #itambah /a2<O*7 emulsi langsung pe:ah #itan#ai #engan a#an&a lapisan min&ak 'ber%arna kuning, pa#a permukaan7 lapisan air pa#a bagian ba%ah7 #engan se#ikit kekeruhan pa#a bagian tengah larutan2- Per:obaan untuk men&atakan ikatan tak 9enuh

Per:obaan ini #ilakukan untuk men&atakan a#an&a ikatan tak 9enuh #alam suatu lemak atau min&ak- Bahan6bahan &ang #igunakan a#alah min&ak kelapa7 margarin7 #an lemak pa#at berupa a#eps lanae- Ketiga 8at tersebut #ilarutkan #alam kloro5orm karena ti#ak larut #alam air- 1etelah itu7 #itambahkan larutan io#ium sama ban&ak pa#a ketiga 8at$eaksi &ang ter9a#i a#alah reaksi a#isi oleh io#- Io# akan memutus ikatan rangkap &ang ter#apat molekul 8at7 kemu#ian io# tersebut akan menggantikan posisi #ari ikatan rangkap tersebut melalui reaksi a#isi sehingga 9umlah ikatan rangkap #alam molekul 8at akan berkurang atau men9a#i ti#ak a#a sama sekali '9ika tera#isi semuan&a oleh io#,- Dengan a#an&a reaksi ini7 maka %arna larutan io# akan hilangin&ak kelapa mengan#ung triasil gliserol #engan @06@5 I asam lemak 9enuh"sam lemak utama &ang ter#apat #alam min&ak kelapa a#alah asam laurat #an asam miristat 'merupakan asam lemak #engan bobot molekul ren#ah #an memiliki bilangan pen&abunan &ang tinggi,- 1elain itu7 min&ak kelapa 9uga mengan#ung asam kaprilat7 asam kaprat7 #an asam oleatargarin merupakan salah satu pro#uk makanan konsumsi sehari6hari &ang #ibuat #engan menggunakan bahan baku lemak nabatiargarin #ibuat melalui proses argarin a#alah hi#rogenasi asam lemak tak 9enuh &ang bersumber #ari tanamanBritish /utrition 0oun#ation a#alah : J Lemak 'minimum @0 I7 tetapi kurang #ari (0 I, J Lemak susu 'maksimum * I #ari total lemak, J 4itamin " (>06()0 I2 per oun:e '@006100 Mg setiap 100 g, J 4itamin D @06100 I2 per oun:e '+7056@7@2 Mg setiap 100 g, "#eps lanae 'lemak bulu #omba7 lanolin, a#alah 8at serupa lemak &ang #imurnikan7 #iperoleh #ari bulu #omba OAis aries Linne '0amilia BoAi#ae, &ang #ibersihkan #an #ihilangakan %arna #an baun&a- "#eps lanae mengan#ung air ti#ak lebih #ari 0725 I #an boleh mengan#ung antioksi#an &ang sesuai ti#ak lebih #ari 0702 I- "#eps lanae mengan#ung kolesterol7 alkohol #an isokolesterol7 bersama #engan berbagai ester lainn&a- 1elain itu7 9uga ter#apat asam lanoserat7 asam

emulsi air #alam min&ak &ang berbentuk pa#at- Komposisi #ari margarin menurut

lanopalmitat7 asam karnaubat7 asam miristat7 asam oleat7 #an mungkin asam serotat serta asam palmitatPa#a hasil per:obaan7 min&ak kelapa7 margarin #an a#eps lanae memberikan hasil positi5 &aitu #engan hilangn&a %arna larutan io# 'ungu,in&ak kelapa menghasilkan %arna 9ingga 9ernih7 margarin menghasilkan %arna 9ingga keruh7 #an a#eps lanae menghasilkan %arna kuning- 3al itu berarti pa#a ketiga 8at itu7 ter#apat ikatan tak 9enuh 'ikatan rangkap, sehingga #engan penambahan larutan io#ium7 ter9a#i reaksi a#isi &ang men&ebabkan hilangn&a %arna larutan io#- Ikatan tak 9enuh &ang ter#apat #alam margarin lebih ban&ak #aripa#a ikatan tak 9enuh #alam a#eps lanae #an min&ak kelapa 'ikatan tak 9enuh #alam margarin N min&ak kelapa N a#eps lanae,- 3al tersebut #apat #isimpulkan #ari intensitas %arna &ang terbentuk '9ingga keruh N 9ingga 9ernih N kuning,*- Penetapan "ngka Pen&abunan enurut 0armakope e#isi III7 bilangan pen&abunan a#alah bilangan &ang menun9ukkan 9umlah mg kalium hi#roksi#a &ang #iperlukan untuk menetralkan asam lemak bebas #an men&abunkan ester &ang ter#apat #alam 1 g 8at u9i- <aran&a a#alah #engan menentukan 9umlah kelebihan KO3 &ang tersisa setelah saponi5ikasiPa#a per:obaan7 &ang #ihitung a#alah angka sabun #ari margarinula Kmula margarin #ilelehkan #ahulu7 kemu#ian #itimbang 2 gram ke #alam labu erlenme&er7 lalu tambahkan 25 ml larutan KO36etanol 075 /- Etanol #igunakan karena margarin ti#ak #apat larut #alam air7 maka untuk meningkatkan kelarutan margarin #igunakan etanol- 1etelah itu lakukan re5lu;- <aran&a a#alah pa#a bagian atas labu erlenme&er '&ang telah berisi margarin &ang #i:ampur #engan KO36etanol, #iberi :orong &ang #itutup #engan ka:a arlo9i &ang bagian atasn&a #iberi kapas basah- Lalu #imasukkan ke #alam penangas air selam *0 menit- Dengan a#an&a pemanasan #an penambahan alkali 'KO3, maka margarin akan membentuk gliserol #an sabun atau garam asam lemak- Proses ini lebih #ikenal #engan nama saponi5ikasi- Kemu#ian #ilakukan titrasi #engan 3<l 075 / #an 1 ml phenol5talein sebagai in#ikator- Titrasi 3<l akan menetralkan KO3 &ang berlebih #an terbentuklah en#apan putih garam netral K<l1erta kelebihan 3<l akan mengubah sabun men9a#i asam lemakn&a- Larutan 3<l

tersebut #igunakan untuk mengetahui sisa KO3 &ang ti#ak bereaksi- 1elisih antara titrasi blanko #engan larutan &ang berisi 8at u9i a#alah 9umlah KO3 &ang #igunakan untuk men&abunkan lemak- Titik akhir titrasi #iperoleh apabila %arna larutan telah berubah #ari merah mu#a men9a#i ti#ak ber%arna- Prose#ur ini #ilakukan baik terha#ap larutan &ang berisi 8at u9i maupun terha#ap blankoDari penentuan angka sabun ini #apat #itentukan atau #iperkirakan pan9ang rantai karbon #alam gugus asam #ari molekul min&ak atau lemak #an #apat 9uga #itentukan 9umlah asam &ang terikat pa#a ester- Besar ke:iln&a angka pen&abunan tergantung pa#a pan9ang pen#ekn&a rantai karbon asam lemak- "tau #engan kata lain besarn&a angka pen&abunan tergantung pa#a berat molekul asam lemak tersebuttampak pa#a tabel berikut : akin besar berat molekul lemak maka makin makin ke:il bilangan pen&abunann&a7 seperti

"ngka pen&abunan &ang #iperkirakan Berat sample 'gram, 065( 107061270 )06+( (7061170 @06(( +706@7) 100611( 57+6+70 12061*( >7(657( 1>061>( >726571 1)061+( *7(6>7@ 1@061(( *7*6>71 200621( *706*7+ 22062*( 27+6*7> 2>0625( 2756*71 2)06*00 272627+ 1etelah semua asam lemak bereaksi #engan KO3 akan ter9a#i reaksi : KO3 H 3<l O K<l H 32O 1etelah semua KO3 habis7 reaksin&a :

3H H PP O ti#ak ber%arna 2ntuk menghitung angka pen&abunan #igunakan rumus : a F 9umlah 3<l 075 / untuk titrasi larutan &ang berisi 8at u9i b F 9umlah 3<l 075 / untuk titrasi blanko /amun7 pa#a per:obaan kali ini7 praktikan ti#ak menggunakan KO3 melainkan /aO37 namun pa#a prinsipn&a a#alah sama>- Penetapan Bilangan Io#ium enurut 0armakope In#onesia e#isi III bilangan Io#ium a#alah bilangan &ang menun9ukkan 9umlah gram Io#ium &ang #iserap oleh 100 gram 8ato Bila bilangan io# 1*0 : #r&ing oils "ngka io#ium #apat #igunakan untuk menentukan #era9at keti#ak9enuhan asam lemak &ang terkan#ung #i #alamn&a7 tetapi ti#ak #apat memberikan in5ormasi &ang signi5ikan mengenai 9umlah ikatan ti#ak 9enuh &ang a#a #alam sampel- Dari sumber &ang praktikan #apatkan7 #apat #in&atakan bilangan io#ium sebagai berikut: "sam Lemak Gumlah Ikatan $angkap Bilangan Io#in "sam Palmitat 1 (5 "sam Oleat 1 @) "sam Linoleat 2 1+* "sam Linolenat * 2)1 "sam "raki#onat > *20 Pa#a 8at u9i7 #alam hal ini margarin &ang telah #ilelehkan #itimbang 2 gram7 setelah itu #ilarutkan #alam 10 ml kloro5orm7 #an #i:ampurkan #engan 25 ml KBrO* 072 / #an 175 gram KBr &ang #ilarutkan #alam 5 ml air #an + ml 3<l > /- kemu#ian #iamkan selama 1 9am #i tempat gelap- 1etelah itu #itambahkan larutan KI 1) I + ml &ang akan membetuk %arna larutan :oklat- Pa#a pen#iaman selama 1 9am tersebut akan terbentuk Br2- Br2 #ihasilkan #ari proses re#uksi BrO*6 'Br &ang berasal #ari KBr #ioksi#asi oleh Br #ari KBrO* membentuk Br2,- Br2 &ang #ihasilkan kemu#ian sebagian akan menga#isi margarin #an sebagian lagi akan bereaksi #engan larutan KI 'I6, membentuk I27 &ang kemu#ian #ititrasi #engan /a212O* men9a#i I6 kembali-

Br2 &ang mengoksi#asi I6 men9a#i I2 men&ebabkan larutan ber%arna :oklat1emakin ban&ak Aolume /a212O*7 makin ban&ak I2 #ire#uksi men9a#i I67 sehingga men9a#i larutan ti#ak ber%arnaaksu# pen#iaman #i tempat gelap selama 1 9am setelah margarin #ilarutkan #engan berma:am6ma:am pelarut #an sebelum bereaksi #engan KI a#alah supa&a BrO*6 seban&ak mungkin tere#uksi men9a#i Br27 sehingga akan ban&ak bereaksi #engan 8at #an larutan KI- $eaksi lengkapn&a a#alah : ) Br2 H ) 32O2 BrO*6 H 10 Br K H 12 3H Bagian Br2 lainn&a akan bereaksi #engan penambahan larutan KI : I2 H 2 Br K 'larutan men9a#i ber%arna :oklat,Br2 H 2 I6 I2 &ang terbentuk #ititrasi #enagn menggunakan larutan natrium tiosul5at7 #engan reaksi : 2 I6 H 1>O)26 'larutan men9a#i 9ernih,I2 H 2 12O*26 Titrasi #ihentikan apabila telah ter9a#i perubahan %arna larutan #ari :oklat men9a#i ti#ak ber%arna #an pa#a bagian ba%ah larutan ter#apat en#apan ber%arna kuning mu#a- Titrasi #ilakukan #engan menutup mulut erlenme&er #engan plastik untuk menghin#ari penguapan I2Dari per:obaan #ibutuhkan larutan natrium tiosul5at seban&ak +7515 ml untuk larutan u9i #an 5>7)50 ml untuk larutan blanko- Perhitungan bilangan io#ium #apat #ilakukan #engan menggunakan rumus : 'b6a, ; / /a212O* ; 100 ; 0712)(?g b F 9umlah ml /a212O* 071 / untuk titrasi blanko a F 9umlah ml /a212O* 071 / untuk titrasi 8at u9i 5- Ekstraksi kolesterol #ari merah telur Pertama6tama7 praktikan memisahkan kuning telur #ari putihn&a- Putih telur mengan#ung protein berupa albumin- 1e#angkan kuning telur mengan#ung berbagai 5os5olipi# #alam 9umlah &ang seban#ing #engan berat merah telur- Kemu#ian kuning telur #ipisahkan #ari putihn&aerah telur #ia#uk #engan :ampuran 25 ml al:ohol #an 12-5 ml eter7 #iamkan sambil #iko:ok se%aktu6%aktu selama 10 menit- 1aring ke #alam beaker kering melalui kertas saring &ang #ibasahi #engan al:ohol- <u:i resi#u

#i atas kertas saring #engan 10 ml larutan al:ohol6eter segar &ang #ipakai untuk ekastraksi- 2apkan 5iltrat hingga kering #iatas %aterbath7 larutkan resi#u #i #alam 10 ml eter7tuang perlahan6lahan ke #alam *0 ml aseton sambil #ia#uk- En#apan &ang ter9a#i a#alah lesitin'5os5olipi#,Lesitin atau 5os5ati#ilkolin a#alah sen&a%a 5os5ogliserol &ang mengan#ung kolin 'lesitin mengan#ung gliserol7 asam lemak7 asam 5os5at7 #an kolin,- 1en&a%a ini a#alah 5os5olipi# kolin ter#apat #engan 9umlah terban&ak #i #alam membran sel #an menun9ukkan proporsi simpanan kolin &ang besar pa#a tubuh- Kolin sangat penting #alam proses transmisi sara5 #an sebagai simpanan7 gugus metil &ang labil- Lesitin #apat #iperoleh #ari he%an7 kuning telur7 ke:ambah7 gan#um7 ragi7 #an ke#elaiPemisahan 5os5ati#ilkolin #ari lemak #an kolesterol #ilakukan #engan pelarut eter #an aseton- Lesitin memiliki gugus kolin &ang bermuatan positi5 sehingga lebih larut #alam eter #an kurang larut #alam aseton- 3al ini #isebabkan eter memiliki elektron bebas &ang #apat #iserang oleh muatan positi5 #ari kolin sehingga kolin lebih larut #alam eter #aripa#a aseton &ang ti#ak memiliki elektron bebas0iltrat &ang #iperoleh #ari pen&aringan lesitin 'eter6aseton, #iuapkan #iatas %aterbath sampai menghasilkan suatu pasta- Kemu#ian7 #itambahkan 15 ml larutan KO3 #alam etanol 10I lalu #isaring- En#apann&a a#alah sabun7 se#angkan 5iltratn&a mengan#ung kolesterol &ang ber%arna kuning kemerahan? ke:oklatan 'berupa sabun,Kolesterol merupakan lipi# am5ipatik #an merupakan komponen penting struktural &ang membentuk membran sel serta lapisan eksternal lipoprotein plasmaKolesterol masuk ke #alam membran bila&er 'membran sel, #engan gugus hi#roksiln&a mengarah ke 5ase air #an :in:in hi#ro5obikn&a ber#ekatan #engan gugus lemak #an 5os5olipi#- .ugus hi#roksil #ari kolesterol membentuk ikatan hi#rogen #engan gugus polar 5os5olipi#Kolesterol #isintesis #ari asetil6ko" #alam ban&ak 9aringan #an #ikeluarkan #ari tubuh le%at empe#u- Kolesterol merupakan prekursor semua sen&a%a steroi# #alam tubuh7 seperti kortikosteroi#7 hormon seks7 asam empe#u #an Aitamin D- Kolesterol ter#apat #alam segala ma:am makanan &abg berasal #ari he%an seperti kuning telur7 #aging hati7 #an otak-

)- $eaksi Liebermann6Bur:har# 'blanko, Per:obaan ini #ilakukan untuk mengi#enti5ikasi a#an&a kolesterol #engn a#an&a pereaksi asam astat anhi#ra# #an 321O> 'p, akan memberikan perubahan %arna #ari ungumerah men9a#i biru #an kemu#ian hi9au #engan se#ikit en#apan hitam &ang mela&ang &ang #isebabkan a#an&a gugus kromo5or #an auksokrom pa#a kolesterol-

VI.

Kesimpulan
1- Lipi# 'lemak, larut #alam pelarut organik &ang bersi5at nonpolar- Pa#a per:obaan untuk men&atakan ikatan tak 9enuh ter9a#i reaksi a#isi I2 #engan ketiga 8at u9i7 &aitu margarin7 a#eps lanae #an min&ak kelapa- 3al ini #itun9ukkan #engan a#an&a perubahan %arna2- "ngka pen&abunan F 2(7>525?gr lemak #omba *- Bilangan Io#ium F 107(1*>?gr mentega >- Kolesterol #apat #iu9i #engan reaksi Liebermann6Bur:har# karena kolesterol mempun&ai gugus kromo5or &ang memberikan %arna #an mempun&ai serapan pa#a pan9ang gelombang tertentu5- Pa#a min&ak kelapa7 margarin7 #an lemak pa#at 'a#eps lanae, ter#apat ikatan tak 9enuh &ang #apat #ibuktikan #engan hilangn&a %arna io#ium-

DAFTA P!"TAKA

An#nim. 122(. Farmakope Indonesia edisi IV. 3akarta4 5epartemen Kese/atan 6epublik "nd#nesia' /alaman (7-(8. urray' 6#bert K. et al. +&&3. Biokimia Harper Edisi ke-25. 3akarta4 Penerbit Buku Ked#kteran EG*' /alaman 1(.' +77' (.-. http://www.nutrition.org.uk/information/foodandingredients/marg.html