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Tcnicas Utilizadas No Diagnstico E Seguimentos

Mtodos de diagnstico
Os mtodos antigos para a deteco da glicose no sangue, no geral baseiam-se no seu poder redutor frente aos metais como o cobre, que cede electres com facilidade, e convertem-se a outros ies metlicos de cor diferente. Os mtodos modernos so enzimticos e variam consoante as enzimas utilizadas (hexoquinase, glicose oxidase, glicose desidrogenase).

Existem variantes em formas de tiras/fitas reactivas para a denominada de qumica seca (Fitas)

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Glicmia Em Jejum

O valor da glicmia em jejum tem sido muito utilizado, sobretudo para descartar alteraes grosseiras do metabolismo dos carbohidratos. Est influenciada por muitos factores endgenos (stress, insnia, exerccio fsico) e exgenos (excesso de medicamentos), Muitos especialistas preferem realizar a PTG, que mede, a resposta do organismo.

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Ps-prandrial

Com esta prova, realiza-se uma comparao do valor basal da glicose com o valor medido 2 horas. Aps ingesto de uma sobrecarga de glicose oral (75 g de glicose dissolvidos em um copo de gua). Permite verificar, se o pncreas produz insulina em tempo hbil para degradar a glicose circulante.

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Ps Dextrose

Semelhante a ps-prandrial Administrado 1 g de dextrose por cada kg de peso (oferece valores precisos); Ela compara os 2 valores

Ateno a glicmia de jejum tem de ser 140 mg/dl, uma vez que se for superior o paciente poder sofrer um Infarto MA.
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PTG ou A Curva Glicmica

Semelhante a ps-dextrose, mas com uma vantagem: faz-se vrias dosagens (30, 60, 90 e 120 minutos) em vez de aps 2 horas. Permite saber o tempo exacto em que o pncreas iniciou a liberao da insulina. til no diagnstico da DM Tipo II.

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HB A1C
uma modificao ps sinttica da Hb A produzida pela glicosilao da Hb atravs de uma reaco no enzimtica, lenta, irreversvel e depende fundamentalmente da concentrao da glicose circulante. Este mtodo mede a percentagem de hemoglobina A0 que est unido ao acar. Representa um ndice muito objectivo dos nveis mdios de glicmia nos ltimos 3 meses (tempo mdia de vida da Hb). Metodologia importante e ideal para seguir a evoluo, a longo prazo, nos pacientes diabticos, tantos do tipo I como o II.
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Outras Metodologias

Nveis de Insulina Plasmtica: funcionamento das clulas beta dos ilhus de Langerhans no pncreas; Doseamento do Glucagon ou Glucagina Glicosria ou Glicose na Urina: Usa-se as tiras reactivas;
Perfil Lipdico: Nveis de colesteris (total, HDL e LDL) e triglicerdeos Acetonria
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PATOLOGIAS ASSOCIADAS A DIABETES

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Universidade Jean Piaget De Cabo Verde

AS ENZIMAS PLASMTICAS

Enzimas Plasmticas.
Funo fisiolgica e classificao das enzimas.

Patologias associadas a enzimas Plasmticas.


As Enzimas da Funo Heptica Pancretica

sseo e Cardaco.
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AS ENZIMAS
Protenas globulares, que catalisam as reaces qumicas, aumentando a sua velocidade sem serem destrudas, consumidas ou alteradas nesse processo.

As enzimas esto presentes em todos os tecidos e fluidos orgnicos e


Devido ao seu papel na manuteno da vida

O estudo da regulao farmacolgica das enzimas tem se tornado um elemento chave no diagnstico clnico e na teraputica.
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As Vrias Formas Das Enzimas


Denominadas de isoenzimas so as mltiplas formas moleculares de uma enzima. Catalisam as mesmas reaces. So codificadas por genes diferentes. Diferem na sua estrutura por variantes genticas e no genticas (modificao ps-traduo).

Existem ainda: os heteropolmeros


Protenas conjugadas ou derivados (Apoenzimas, Coenzimas e as Holoenzimas Apo + co-factor).
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Funes Das Enzimas

As enzimas aceleram a velocidade de uma reaco qumica e no so consumidas nem destrudas no processo. As enzimas podem ser reguladas (activadas ou inibidas) de modo que a velocidade de formao do produto responda s necessidades da clula

So consideradas unidades funcionais do metabolismo celular.

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Classificao E Nomenclatura Das Enzimas

Existem 3 mtodos para a nomenclatura enzimtica: Nome recomendado utiliza o sufixo ase, adicionado ao nome do substrato para caracterizar a enzima. Ex. Urease, peptidase. Nome usual algumas mantm o seu nome trivial original, o qual no tem qualquer associao com a reaco enzimtica. Ex. Tripsina, pepsina. Nome Sistemtico mais complexo, nos d informaes sobre a funo metablica da enzima, estabelecido pela UIB. Ex. ATP-G-Fosfotransferase.
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Classificao Internacional das Enzimas


Classe 1. Oxidoredutases 1. Transferases Reaco catalisada Transferncia de electres Reaces de transferncias de grupos

1. Hidrolases 1. Liases 1. Isomerases


1. Ligases

Reaces de hidrlise (transferncia de grupos funcionais para a gua) Adio de grupos em ligaes duplas, ou formao de ligaes duplas por remoo de grupos Transferncia de grupos dentro de uma mesma molcula produzindo formas isomricas
Formao de ligaes C C, C S, C O e C N atravs de reaces de condensao acopladas hidrlise de ATP.

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Propriedades Das Enzimas

As enzimas so catalisadores biolgicos extremamente eficientes que aceleram em mdia 103 a 108 vezes a velocidade da reaco. Capaz de transformar de 100 a 1000 molculas de substratos em produto por segundo. Actuam em concentraes muito baixas e em temperatura e pH fisiolgicos

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CINTICA ENZIMTICA

A maioria das enzimas tem algumas propriedades cinticas em comum. A velocidade de uma reaco enzimtica depende alm da [ ] de substratos e enzimas Ainda de outros factores como: pH, temperatura, presena de inibidores, etc.

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Temperatura

Quanto aumenta a temperatura

Aumenta a velocidade da reaco at se atingir A temperatura ptima (ideal), a partir do qual a actividade volta a diminuir
Pela desnaturao da molcula.

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O pH
Existe um pH ideal para cada uma das enzimas, onde a distribuio de cargas elctricas da molcula da enzima e, em especial do stio activo, ideal para a catlise enzimtica.
Portanto, h enzimas que tem a sua velocidade ideal em pH cido Pepsina, Amilase Neutro As Catalases

Alcalina A tripsina, fosfatases, arginase


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Inibidores
So qualquer substncias que reduzem a velocidade de uma reaco enzimtica. Podem ser: Inibidores irreversveis aqueles que se ligam ou destroem um grupo funcional, imprescindvel para a actividade enzimtica.
Inibidores reversveis caracterizados por uma rpida dissociao o complexo enzimainibidor (E-I). Competitivos em que a enzima pode ligar-se ao substrato ou ao inibidor, mas no aos dois simultaneamente. Esse tipo de inibio revertido pelo simples aumento da concentrao do substrato (competio) No-competitivos o inibidor liga-se enzima em um local diferente do stio activo, alterando a sua conformao. Enzima pode ligar-se simultaneamente ao inibidor e ao substrato.
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METODOLOGIAS DE ESTUDO DAS ENZIMAS


Os mtodos que analisam o consumo do substrato. Mtodos que analisam o produto formado.

Produto formado na reaco j um composto corado


Produto formado tem que ser transformado em compostos corados

Mtodos que analisam a variao de absoro da Coenzima que participa da reaco enzimtica.
Mtodos optimizados com elevada sensibilidade e excelente reprodutibilidade; Outros mtodos so os imunoensaios, electroforese, titulometria, etc.
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AS ENZIMAS PLASMTICAS E A SUA SNTESE

LOCAIS DE SNTESE E TIPOS


Todas as enzimas presentes no corpo humano so sintetizadas intracelularmente. Enzimas plasma-especficas: Enzimas activas no plasma utilizadas no mecanismo de coagulao sangunea e fibrinlise.

Enzimas secretadas: geralmente na forma inactiva e aps a sua activao actua extracelularmente. Enzimas celulares: Normalmente apresentam baixos teores sricos que aumentam quando so liberadas a partir de tecidos lesados por alguma doena.
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A ENZIMOLOGIA CLNICA

A ENZIMOLOGIA CLNICA

definida como sendo a aplicao das cincias das enzimas ao campo do diagnstico e tratamento das patologias.

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Utilidade da Enzimologia Clnica

Medidas da actividade de enzimas so importantes no diagnstico de vrias doenas. So indicadores sensveis de leses ou proliferaes celulares.

As determinaes enzimticas contribuem para estabelecer a causa, localizao e grau de extenso da leso, controlo de tratamento e ainda determinar a cura.

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O AUMENTO E A DIMINUIO SRICA DAS ENZIMAS

Em condies normais as actividades enzimticas permanecem constantes, reflectindo o equilbrio entre estes processos. Quatro factores so responsveis pelos nveis plasmticos ou sricos das enzimas.

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Factores que influem os nveis plasmticos ou sricos

A entrada das enzimas no sangue (enzimas que saem das clulas e aumento da sntese); Vazamento das enzimas das clulas (vrus ou substncias orgnicas); Sntese enzimtica alterada e

A prpria depurao das enzimas


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O aumento srico de enzimas quase sempre resultado da.. Leso celular extensa Proliferao celular e aumento na renovao celular Aumento na sntese enzimtica

Obstruo de ductos ou canais que afectam sobretudo as enzimas normalmente encontradas nas secrees excrinas. Doenas concomitantes, por exemplo insuficincia renal.
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Uma reduo srica das enzimas quase sempre o resultado de ..

Sntese enzimtica reduzida


Deficincia congnita de enzimas caso da hipofosfatasemia congnita Variantes enzimticas inerentes com baixa actividade biolgica.

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AS PRINCIPAIS ENZIMAS DE USO CLNICO

A determinao de enzimas no laboratrio clnico tem grandes aplicaes como: No diagnstico, prognstico
Acompanhamento da terapia de diversas patologias,

Especialmente no caso das doenas hepticas, cardacas, sseas, musculares e pancreticas.


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Enzimas

Tecidos de origem

Amilase

Transaminases
PSA Creatinoquinase CK, CPK

Principais aplicaes clnicas (Significado) G. Salivares, pncreas e Diagnstico de doenas ovrios pancreticas Doenas do parnquima Fgado, msculo-esqueltico, heptico, IM, doena corao, rim, eritrcitos muscular Prstata Msculo-esqueltico, crebro, corao, Msculo liso Carcinoma da prstata IM, e doenas musculares

Fosfatase cida
Fosfatase alcalina GGT Lactato desidrogenase Lipase
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Prstata, eritrcitos Fgado, osso, mucosa intestinal, rim


Fgado, rim Corao, fgado, msculoesqueltico, eritrcitos Pncreas

Carcinoma da prstata
Doenas hepticas e sseas

Doenas heptobiliar, alcoolismo IM, Hemlise, doenas do parnquima heptico,


Doenas pancreticas

A FUNO HEPTICA

A FUNO HEPTICA
O fgado um dos maiores rgos glandulares e possui inmeras funes metablicas: Sntese de protenas, ureia, bile,

Modificao de gorduras,
Armazenamento de glicose, vitaminas, ferro, Remoo de substncias txicas.
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As principais enzimas hepticas

As enzimas hepticas aps a sua sntese, quando liberadas do fgado, tem acesso imediato corrente sangunea. As principais enzimas hepticas so: a GOT/ALT, GPT/AST, GGT, LDH e ALP (fosfatase alcalina). O doseamento da GOT/ALT, GPT/AST, GGT, identificam mais de 95% das formas de leso heptica.

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ENZIMAS HEPTICAS E AS PATOLOGIAS ASSOCIADAS

Os Testes de funo heptica descrevem a funo do fgado mas


Tambm a presena de leso hepatocelular e das vias biliares.

Costuma incluir AST, ALT, fosfatase alcalina, GGT, albumina, bilirrubinas total e fraces e actividade da protrombina.

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As Transaminases

So enzimas que catalisam a transferncia de um grupo alfa-amino de um aminocido para um alfa-cetocido, com a formao de novos alfa-amino e alfa-cetocido (Ciclo Krebs).

O fgado produz mais de 60 transaminases, sendo que apenas 2 so de maior importncia clnica o ALT/GPT e o AST/GOT.
O aumento das transaminases est associado a vrias desordens que afectam o sistema heptobiliar.

Temos 2 Tipos:

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AS TRANSAMINASES GLUTMICA-OXALACTICA (GOT)

Encontrados fgado, miocrdio, pncreas, rins, eritrcitos, msculos esquelticos Tambm no citoplasma e tambm nas mitocndrias.
Utilidade: Diagnstico diferencial de doenas do Sistema Hepatobiliar e do Pncreas, Infarto do miocrdio e miopatias.
Aumento:

Doenas hepticas, hepatite viral aguda (20 100x), hepatite alcolica,


Congesto (Cirrose, Obstruo Biliar, Cancro metasttico)

Eclmpsia e drogas hepatotxicas.


IAM aps 48h, doenas msculo-esquelticas; Pancreatite aguda, anemia hemoltica; queimaduras.
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TRANSAMINASES GLUTMICA-PIRVICA (GPT)

Origem citoplasmtica eleve rapidamente aps a leso heptica, tornando-se um marcador sensvel da funo do fgado.
Maiores concentraes: Fgado, rim, corao e msculo-esquelticos [ ] nos recm-nascidos imaturidade dos hepatcitos, valores tornam normais a adultos por volta dos 3m

Aumentadas: Obesidade 1 a 3x o GOT no aumenta

Pr-eclampsia grave
Leucemia linfoblstica aguda
Baixa: Infeco do tracto gstrico, neoplasias.
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Patologias associadas as Transaminases


Desordens hepatocelulares

Leses ou destruio das clulas hepticas


Hepatites Virais agudas ( 100x) - GPT que a GOT

A Cirrose heptica do GOT maior que a do GTP.


Mononucleose infecciosa ( 20x)

Colestase extraheptica aguda reteno de clculos biliares, carcinoma Infarto do miocrdio AST (GOT) Aps 6 a 8 horas
Pancreatite aguda ( 2 a 5x) Outras desordens como a inflamao dos ductos biliares.
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Gama glutamiltransferase (GGT)

Encontrada em grande quantidade no fgado, rins, pncreas, intestino e prstata. Avaliam a capacidade de excreo do fgado; Associam-se a alteraes hepatobiliares (90% dos casos alterados).

Associadas a neoplasias primrio ou secundrio do fgado e a obstruo biliar.


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GGT

Utilidade Diagnstica Leses hepticas ligadas ao lcool Colestase (bloqueio do fluxo biliar) crnica e Outras patologias hepticas e biliares.
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