J. Sains & Teknologi, Desember 2006, Vol. 6 No.

3: 135–142 ISSN 1411-4674

PENGARUH LAMA KEJUTAN PANAS

TERHADAP KEBERHASILAN TRIPLOIDISASI IKAN LELE
(Clarias batrachus)

Komsanah Sukarti*, Iqbal Djawad**, dan Yushinta Fujaya**

* Fak. Perikanan, Universitas Mulawarman
** Fak. Ilmu Kelautan dan Perinakan, Universitas Hasanuddin

ABSTRACT
The aim of the study was to find out the effect of heat shock time (0 minute, 0,5 minute, 1 minute,
and 1,5 minutes) on the triploidization success of catfish (Clarias batrachus) at the temperature 36º
C and was done 4,5 minutes after fertilization. The observed parameters were percentage of triploid,
larvae survival, and growth of the catfish. The identification of ploidical rate was done by counting
the maximum number of nuclei per cell. The catfish can become triploid at the temperature of 36º C
starting at 4,5 minutes after fertilization with the length of shock 0,5, 1, and 1,5 minutes. The
indentification of triploid can be done by counting the number of nucleoli per cell. The maximum
result is 6 nucleoli per cell with the percentage of triploid 73 – 93 %. The calculation of the number
of the catfish nucleoli without a shock is 100 % diploid with the maximum 4 nucleoli per cell. The
highest triploidization success is at the length of heat shock 1,5 minutes. The catfish triploid with
the length of shock 1,5 minutes indicates the lowest larvae survival, whereas the development of
weight and length after 60 days is high.

Key words: Heat shock time, triploidization, catfish

PENDAHULUAN pertumbuhan tubuh serta kualitas

daging ikan menjadi meningkat.
Penyediaan benih ikan lele
Beaumont, (1994) menambahkan,
berkualitas dapat didukung dengan
bahwa sterilitas dapat dimanfaatkan
teknik triploidisasi, yakni individu
untuk meningkatkan produksi karena
yang mempunyai tiga set kromosom.
energi metabolisme yang biasanya
Thorgaard, (1983) menjelaskan,
digunakan untuk perkembangan
bahwa ikan triploid bersifat steril
gonad dimanfaatkan untuk per-
karena jumlah set kromosomnya
tumbuhan.
ganjil dan akan menyebabkan
Perlakuan kejutan panas dapat
gangguan pada meiosis selama
digunakan untuk memproduksi ikan
gametogenesis. Triploidisasi ikan
triploid, perlakuan ini banyak
berpotensi dalam mengontrol over-
dilakukan karena selain tidak mahal
populasi, meningkatkan laju per-
juga berhasil diadaptasikan untuk
tumbuhan juvenil, untuk mem-
skala besar. Kejutan panas digunakan
pertahankan sintasan, dan untuk
untuk menghambat pelepasan polar
pertumbuhan pada ikan dewasa.
body II sehingga individu tersebut
Menurut Zohar (1989) dan Chao,
memiliki 3 set kromosom, 2 dari telur
dkk., (1993) bahwa gonad ikan
dan 1 dari sperma (Thorgaard, 1983).
triploid tidak berkembang sehingga
Proses pelepasan polar body II pada
dapat mengatasi persoalan terlalu
kejutan panas merupakan masa yang
cepatnya kematangan kelamin dan

135
Heat shock time, triploidization, catfish
kritis, sintasan larvanya rendah
(Rustidja, 1989).
Menurut Thorgaard (1983),
teknik triploidisasi jarang mencapai
keberhasilan 100 %, keberhasilan
triploidisasi sangat ditentukan oleh
ketepatan waktu awal, lama, dan suhu
kejutan yang sebaiknya diteliti pada
setiap ikan. Menurut Johnstone,
(1985), semakin lama kejutan panas
yang diberikan, derajat tetas telur
semakin rendah tetapi rata-rata jumlah
ikan triploid semakin tinggi.
Alimuddin, (1994) melaporkan
keberhasilan triploid dengan kejutan
panas 36 °C yang dilakukan selama
1,5 menit dan dimulai 4,5 menit
setelah pembuahan pada ikan lele
(Clarias batrachus), menghasilkan
individu triploid 92 %. Derajat
penetasan 66,80 % dan sintasan larva
umur 7 hari sebesar 41,56 %.
Tujuan penelitian ini adalah
untuk mengetahui pengaruh lama
kejutan panas terhadap keberhasilan
triploidisasi ikan lele. Parameter yang
diamati meliputi persentase individu
triploid, sintasan larva dan
pertumbuhan larva. Hasil penelitian
ini diharapkan dapat memberikan
informasi tentang lama kejutan panas
yang tepat pada triploidisasi dan dapat
digunakan untuk meningkatkan benih
ikan lele yang berkualitas.
METODE PENELITIAN
Hewan uji yang digunakan
adalah induk ikan lele matang gonad,
panjang induk betina 31,1 ± 4,45 cm
dan jantan 28,7 ± 2,39 cm, berat
induk betina 254,0 ± 63,11gr dan
jantan 232,2 ± 48,24 gr. Pemijahan
buatan pada ikan lele dilakukan untuk
memperoleh waktu yang lebih awal
pada perlakuan kejutan panas. Induk
betina disuntik larutan Ovaprim 0,3
136
ISSN 1411-4674
ml dan induk jantan 0,2 ml, suntikan
ini gunanya untuk mempercepat
kematangan gonad.
Untuk mendapatkan telur
dilakukan stripping terhadap induk
betina 13 jam setelah penyuntikan.
Sperma ikan lele diperoleh dengan
melakukan pembedahan untuk
mengambil testesnya 13 jam setelah
penyuntikan. Testes dipotong-potong
dan digerus sehingga sperma keluar
dari kantong sperma. Sperma
ditambah larutan fisiologis (campuran
7,98 gr NaCl + 0,02 gr NaHCO3
dalam 1 liter air), larutan ini gunanya
untuk mengencerkan sperma..
Pembuahan buatan dilakukan
dengan cara mencampur telur dengan
sperma, dan menambahkan larutan
pembuahan (campuran 4 gr NaCl + 3
gr urea dalam 1 liter air), larutan ini
gunanya agar tidak terjadi perlekatan
sesama telur. Selanjutnya telur yang
sudah terbuahi segera disebarkan ke
atas lempengan kaca dengan bulu
ayam. Perlakuan kejutan suhu
dilakukan dengan perendaman dalam
waterbath. Kejutan panas diberikan
pada saat 4,5 menit setelah
pembuahan dengan suhu 36 °C dan
lama kejutan sesuai perlakuan yakni
0; 0,5; 1; dan 1,5 menit.
Penetasan dan pemeliharaan
larva dilakukan dalam akuarium 30 x
25 x 25 cm. Kepadatan larva di
akuarium pemeliharaan 10 ekor/liter.
Setelah kantung kuning telur habis
terserap, pada umur 4 hari larva diberi
makan Moina sp. yang telah disaring
dengan frekuensi tiga kali sehari
sampai larva berumur 12 hari.
Kepadatan larva di akuarium
pemeliharaan 10 ekor/liter. Pada saat
larva berumur 13 hari diberi pakan
buatan Pokphand HI-Pro-Vite 781.
dengan dosis 8 %/ berat tubuh pada
sore hari dan diberi cacing tubifex
Komsanah Sukarti et al. ISSN 1411-4674

100 % / berat tubuh pada pagi hari
sampai larva berumur 60 hari. Untuk
menghitung penambahan jumlah
pakan yang diberikan, dilakukan
penimbangan berat total setiap
seminggu sekali.
Rancangan percobaan yang
digunakan dalam penelitian ini adalah
Rancangan Acak Kelompok (RAK)
dengan 3 kelompok (3 ulangan) dan 4
perlakuan. Kelompok perlakuan
merupakan pasangan-pasangan induk
untuk pemijahan. Adapun perlaku-
annya adalah : (A) tanpa kejutan
panas (B) kejutan panas selama 0,5
menit, (C) kejutan panas selama 1
menit (D) kejutan panas selama 1,5
menit. Untuk pemeliharaan larva lele
digunakan Rancangan Acak Lengkap
(RAL) dengan 3 ulangan dan 4
perlakuan. Adapun perlakuannya
adalah : (A) tanpa kejutan panas (B)
kejutan panas selama 0,5 menit, (C)
kejutan panas selama 1 menit (D)
kejutan panas selama 1,5 menit.
Peubah yang diukur meliputi
persentase individu triploid dihitung
dari persentase jumlah ikan triploid
dari jumlah ikan yang diamati.
Derajat sintasan larva dihitung dari
jumlah larva yang hidup dari jumlah
total telur yang menetas dihitung
setelah larva berumur 7 dan 12 hari
sampai 60 hari (Alimuddin, 1994).
Pertumbuhan berat dan panjang ikan
dihitung dari pertambahan berat dan
panjang pada akhir pemeliharaan
dikurangi berat dan panjang pada
awal pemeliharaan.
Penentuan tingkat ploidi
dilakukan pada saat larva berumur 7 –
14 hari dengan metode penghitungan
jumlah maksimal nukleolus per sel.
Jaringan yang digunakan adalah
sepotong sirip ekor yang diambil dari
ikan hidup. Pengamatan di bawah
mikroskop dilakukan pada pem-
besaran 400 kali – 1000 kali. Peng-
hitungan nukleoli setiap ekor
dilakukan sebanyak kurang lebih 200
sel.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Nilai persentase individu
triploid tertinggi diperoleh pada
perlakuan lama waktu kejutan panas
1,5 menit yaitu 93 %, lama kejutan 1
menit sebesar 87 % dan 0,5 menit
sebesar 73 %. Pada perlakuan tanpa
kejutan 100 % diploid. Hasil yang
diperoleh menunjukkan bahwa
perlakuan kejutan panas yang
diberikan pada telur mampu
mencegah terjadinya pelepasan polar
body II dan tidak mengakibatkan
kematian total pada zigot.

Tabel 1. Persentase individu triploidi ikan lele tanpa kejutan (P0), lama kejutan
0,5 menit (P1), 1 menit (P2), dan 1,5 menit (P3).

Jumlah ikan Jumlah ikan (ekor) Individu

Perlakuan
dianalisa (ekor) triploid (%)
2N 3N
P0 15 15 0 0
P1 15 4 11 73
P2 15 2 13 87
P3 15 1 14 93

137
Heat shock time, triploidization, catfish
Individu triploid ikan lele lokal
dapat dihasilkan dengan suhu kejutan
36 °C, lama kejutan 0,5 – 1,5 menit
dan waktu awal kejutan 4,5 menit
setelah pembuahan. Pada penelitian
ini diperoleh tingkat keberhasilan
triploidisasi yang semakin menurun
dengan semakin singkatnya lama
kejutan. Menurut Johnstone (1985),
setelah batas tertentu, hasil triploid
menurun, karena polar body II telah
lepas sehingga tidak dapat menyatu
kembali ke dalam pronukleus embrio.
Bagian tubuh ikan yang
digunakan untuk pemeriksaan triploid
adalah sirip ekor, dengan tujuan agar
ikan hasil uji atau yang diambil
bagian tubuhnya tidak mengalami
kematian. Jaringan yang dibutuhkan
dalam pembuatan preparat amat
sedikit sehingga sampel dapat
diperoleh tanpa membunuh ikan.
Pemeriksaan triploid dengan
perhitungan jumlah nukleolus pada
setiap sel dapat dilakukan karena
disamping murah biayanya juga
peralatan yang digunakan relatif
sederhana dan perhitungan nukleolus
dapat diterapkan pada setiap spesies
ikan. Menurut Carman (1992),
distribusi jumlah nukleolus satu dan
dua nukleoli pada sirip ekor juga lebih
merata.
Dari pengamatan preparat
nukleolus diperoleh 100 % ikan tanpa
kejutan memiliki maksimal 4
nukleolus per sel, individu triploid
memiliki maksimal 6 nukleolus per
sel. Adanya variasi jumlah nukleolus
kemungkinan karena kemampuan
pewarnaan perak nitrat yang
digunakan. Ukuran nukleolus yang
diamati juga bervariasi, ada yang
besar dan kecil. Sel-sel dengan
jumlah maksimal nukleoli lebih
sedikit ukuran nukleolusnya lebih
138
ISSN 1411-4674
besar dari ukuran nukleolus pada sel-
sel dengan jumlah maksimal nukleoli
lebih banyak. Dengan pewarnaan
perak nitrat, sel berwarna kuning-
kecoklatan dan nukleolus nampak
berwarna coklat-kehitaman. Menurut
Carman (1992), pewarna perak hanya
mampu mewarnai nukleolus pada
NOR yang aktif, tidak semua NOR
aktif pada saat pembuatan preparat
dilakukan.
Terdapat hubungan antara
jumlah maksimal nukleolus per sel
dengan tingkat ploidi, pengujian
tingkat ploidi pada ikan lele lokal
dengan penghitungan maksimal
nukleolus bisa dikatakan cukup
akurat, terdapat perbedaan jelas antara
individu diploid dengan triploid.
Terjadinya peningkatan jumlah
maksimal nukleolus sebagai indikasi
peningkatan jumlah kromosom pada
ikan triploid.
Perkembangan larva diamati
dari tahap prelarva sampai postlarva.
Pada tahap prelarva kuning telur
masih ada, tubuhnya transparan Sirip
ekor sudah ada tetapi belum sempurna
bentuknya dan kebanyakan prelarva
yang baru keluar dari cangkang telur
belum terlihat bintik matanya. Mulut
dan rahang belum berkembang dan
ususnya masih merupakan tabung
yang lurus.
Pada hari kedua setelah
penetasan sungut sudah kelihatan,
kepala berbercak hitam, ada bintik
mata, mulut terlihat terbuka, detak
jantung lebih nyata. Makanannya
didapatkan dari sisa kuning telur yang
belum habis diserap. Sebagian larva
ikan ada yang mulai berenang ke
permukaan air lalu turun kembali,
seperti sedang mengambil udara di
permukaan air.
Komsanah Sukarti et al. ISSN 1411-4674

Tabel 2. Rata-rata nilai derajat sintasan larva umur 7 hari, 12 hari, dan 60 hari
larva ikan lele tanpa kejutan dan perlakuan kejutan.

Perlakuan Umur 7 hari Umur 12 hari Umur 60 hari

P0 (tanpa kejutan) 91,2 ± 7,28 a 77,9 ± 10,70 a 51,7 ± 4,51a
P1(lama kejutan 0,5 menit) 80,8 ± 10,44 a 67,8 ± 9,47 a 45,7 ± 4,04 a
P2 (lama kejutan 1 menit) 87,1 ± 7,57 a 66,2 ± 5,54 a 40,7 ± 3,51ab
P3 (lama kejutan 1,5 menit) 86,5 ± 7,46 a 67,1 ± 14,53 a 33,7 ± 6,11 b

Keterangan : Angka yang diikuti oleh huruf yang sama menunjukkan tidak
berbeda nyata, sedangkan huruf yang tidak sama menunjukka
berbeda nyata berdasarkan hasil uji BNT 5 %.

Tahap postlarva ikan adalah tinggi dan kondisi kesehatannya

masa larva mulai dari hilangnya
kantung kuning telur sampai
terbentuknya organ-organ baru atau
selesainya taraf penyempurnaan
organ-organ yang telah ada, sehingga
pada masa akhir dari postlarva
tersebut secara morfologis bentuk
ikan lele hampir seperti induknya.
Bentuk yang jelas setelah terjadi
pembesaran antara sirip punggung,
ekor dan anus setelah larva umur 3
minggu.
Masa kritis pemeliharaan larva
ketika perubahan dari masa kuning
telur setelah habis ke masa mulai
mencari makan. Larva lemah yang
tidak mampu mendapatkan makanan
akan mati, larva yang
perkembangannya abnormal setelah
kuning telur habis juga segera mati.
Hasil penetasan dari pemijahan
buatan yang dicapai ini kondisi
larvanya lebih lemah. Selain itu
perlakuan kejutan juga mempengaruhi
sintasan larva yang ada. Menurut
Liao (1993), pemijahan alami hasil
pembuahannya rata-rata tinggi,
sintasan larva rata-rata rendah, dan
kondisi kesehatan larva lebih kuat
dengan pemberian pakan alami saja.
Untuk pemijahan buatan hasil rata-
rata pembuahan rendah, sintasan
lemah, dengan diberi pakan alami dan
buatan.
Kejutan panas berpengaruh
terhadap sintasan larva pada tingginya
mortalitas Walaupun beresiko tinggi
terhadap kelangsungan hidup larva
dengan pemberian kejutan panas,
tetapi peluang untuk mendapatkan
keturunan triploid sangat besar.
Hasil penelitian derajat sintasan
larva menunjukkan nilai yang cukup
tinggi pada hari ke 7 antara 80,80 –
91,15 % jika dibandingkan penelitian
Alimuddin (1994) yakni 30,60 –
35,62 %. Sedangkan penelitian
Rustidja (1989) hanya mencapai 5,87
– 18,15 % pada hari ke 3, dalam hal
ini Rustidja menggunakan kejutan
dingin. Untuk menghasilkan individu
triploid pada ikan lele, perlakuan
kejutan panas lebih efektif dan relatif
murah serta mortalitas yang dialami
lebih rendah jika dibandingkan
kejutan dingin.
Pada awal kehidupannya
setelah telur menetas secara alami
larva ikan lele sudah dibekali
cadangan makanan berupa kuning
telur yang relatif besar. Kuning telur
berada dari bagian kepala sampai
perut. Gerak larva sudah terlihat aktif
sejak menetas, walaupun ada juga

139
Heat shock time, triploidization, catfish ISSN 1411-4674

yang terlihat masih lemah. dari 3 hari, setelah itu larva sudah
Berdasarkan pengamatan kantung aktif mengambil makanan dari
kuning telur tersebut hanya cukup lingkungan.
untuk persediaan selama tidak lebih

Tabel 3. Pertumbuhan berat dan panjang larva ikan lele pada hari ke-60 tanpa
kejutan dan perlakuan kejutan.

Perlakuan Berat (mg) Panjang (mm)

P0 (tanpa kejutan) 597,9 ± 120,87 a 26,1 ± 3,11 a
P1 (lama kejutan 0,5 menit) 767,1 ± 104,99 a 31,0 ± 0,78 b
P2 (lama kejutan 1 menit) 647,2 ± 60,19 a 29,5 ± 1,78 ab
P3 (lama kejutan 1,5 menit) 1472,8 ± 250,30 b 38,6 ± 3,22 c

Keterangan : Angka yang diikuti oleh huruf yang sama menunjukkan tidak
berbeda nyata, sedangkan huruf yang tidak sama menunjukkan
berbeda nyata berdasarkan hasil uji BNT 5 %.

Larva yang baru menetas mg, umur 15 hari mencapai 14 mm

panjang rata-rata 3,5 mm, umur 3 hari dengan berat rata-rata 46,7 mg.
mencapai 5 mm, umur 5 hari Sampai umur 2 minggu, sirip
panjangnya 7 mm, larva ikan sudah punggung dan dubur masih menyatu
tidak bergerombol lagi melainkan dengan sirip ekor, setelah umur 3
aktif berenang dan warna tubuh minggu, sirip punggung dan dubur
nampak sudah hitam serta mata tidak bersambung lagi dengan sirip
nampak jelas. Umur larva 7 hari ekor.
panjang 11,4 mm dan beratnya 20,2

1,600
1,400
Berat larva (mg)

1,200
1,000
800
600
400
200
0
15 30 45 60
Pengamatan hari ke-
Tanpa kejutan Kejutan 0,5 menit Kejutan 1 menit Kejutan 1,5 menit

Gambar 1. Grafik rata-rata pertambahan berat larva ikan lele

140
Komsanah Sukarti et al. ISSN 1411-4674

60

50
Panjang larva (mm)

40

30

20

10

0
15 30 45 60
Waktu pengam atan (hari ke-)
Tanpa kejutan Kejutan 0,5 m enit kejutan 1 m enit Kejutan 1,5 m enit

Gambar 2. Grafik rata-rata pertambahan panjang larva ikan lele

Flajshans, dkk. (1993) pertumbuhan ikan triploid steril

menemukan bahwa ikan tinca betina dibuktikan setelah ikan diploid
triploid tumbuh nyata lebih cepat dari normal berkembang gonadnya dan
pada betina diploid dan jantan diploid mendekati musim pemijahan.
serta lebih cepat dari triploid jantan. Pengamatan yang dilakukan terhadap
Rustidja (1989), ikan lele betina pertumbuhan ikan lidah dan Channel
triploid lebih kecil ovarinya, Catfish triploid dalam 1 tahun
berlemak, dan Gonado Somatik menunjukkan jika pada ikan diploid
Indeksnya rendah. Ratio belum berkembang gonadnya, maka
lemak/protein lebih tinggi pada ikan ikan triploid lebih cepat tumbuhnya.
triploid, sedangkan pada diploid
lemaknya rendah tetapi proteinnya KESIMPULAN
tinggi. Pada umur 109 hari gonad ikan 1. Ikan lele dapat menjadi triploid
lele secara normal mulai berkembang, dengan perlakuan kejutan panas
sedang ikan lele dewasa dicapai pada
yang dilakukan pada suhu 36 °C,
umur 178 hari.
dimulai 4,5 menit setelah
Dengan masa pemeliharaan
pembuahan dengan lama waktu
yang singkat, tahap perkembangan
kejutan 0,5, 1, dan 1,5 menit.
gonad ikan lele masih belum bisa
2. Identifikasi triploid dapat
diketahui. Berdasarkan hasil
dilakukan dengan penghitungan
penelitian diketahui bahwa ikan lele
jumlah nukleolus. Hasilnya
triploid pertumbuhannya lebih tinggi
maksimal 6 nukleolus per sel
dari ikan lele diploid sampai umur 60
dengan persentase individu
hari. Perbedaan antara jantan dan
triploid 73 – 93 %. Penghitungan
betina ikan lele juga belum jelas
jumlah nukleolus ikan lele tanpa
sehingga tidak diketahui juga
kejutan hasilnya 100 % diploid
perbedaan pertumbuhannya. Menurut
maksimal 4 nukleolus per sel.
Zohar, (1989) sebaiknya kecepatan

141
Heat shock time, triploidization, catfish
3. Keberhasilan triploidisasi pada
perlakuan lama waktu kejutan
panas 1,5 menit menunjukkan
hasil persentase individu triploid
dan pertumbuhan berat maupun
panjang yang tertinggi.
DAFTAR PUSTAKA
Alimuddin. (1994). Pengaruh Waktu
Awal Kejutan Panas Terhadap
Keberhasilan Triploidisasi
Ikan Lele Lokal (Clarias
batrachus L.). Program Studi
Budidaya Perairan. Fakultas
Perikanan. Institut Pertanian
Bogor. Bogor. 44 h
Beaumont, A.R. (1994). Genetics and
Evolution of Aquatic
Organisms. Chapman & Hall.
London. p. 467 – 485
Carman, O. (1992). Chromosome
Set Manipulation in Some
Warm-Water Fish. Doctoral
Thesis. Tokyo University of
Fisheries. Tokyo. 131 p.
Chao, N.H., H.W. Hsu, H. Y. Hsu, W.
H. Liang, and I. C. Liao.
(1993). Studies on Methods
of Triploidy Percentage
Analysis. TML. Conference
Proceedings 3 : 203 – 210.
Flajshans, M., O. Linhart, and P.
Kvasnicka. (1993). Genetic
Studies of Tench (Tinca tinca
142
ISSN 1411-4674
L.) : Induced Triploidy and
Tetraploidy and First Perfor-
mance Data. Aquaculture, 113
: 301 – 312.
Johnstone, R.. (1985). Induction of
Triploidy in Atlantic Salmon
by Heat Shock. Aquaculture,
49 : 133 – 139.
Liao, I.C. (1993). Finfish Hatcheries
in Taiwan : Recent Advances
TML Conference Proceedings
3 : 1 – 25.
Rustidja. (1989). Artificial Induced
Breeding and Triploidy in the
Asian Catfish (Clarias
batrachus Linn.). Fakultas
Pascasarjana. Institut Per-
tanian Bogor. Bogor. 80 h.
Thorgaard, G.H. (1983). Chromo-
some Set Manipulation and
Sex Control in Fish. In “Fish
Physiology” (Editor :
W.S.Hoar, D. J. Randall, and
E.M.Donaldson). Volume
IXB. Academic Press, Inc.
London. p. 405 – 434.
Zohar, Y. (1989). Fish Reproduction
: Its Physiology and Artificial
Manipulation. In “Fish Culture
in Warm Water Systems :
Problems and Trends” (Editor
: M. Shilo and S. Sarig).
CRC Press, Inc. Boca Raton.
Florida. p. 65 – 120.