KONTAMINASI Fusarium sp.

PADA TSA (TRYPTICASE SOY AGAR) DENGAN PERANTARA MEDIUM BULU MATA (Studi kasus: Laboratorium Mikrobiologi Dasar II, Kelompok 10) I Wayan Darya Kartika*

ABSTRAK Mikroorganisme terdapat di mana-mana sehingga sesungguhnya kita senantiasa dikelilingi oleh bakteri, fungi, protozoa dan mikroorganisme lain. Laboratorium, sebagaimana halnya lingkungan-lingkungan lain, dihuni oleh banyak mikroorganisme yang tersuspensikan di udara atau mengendap bersama debu pada berbagai macam permukaan. Praktikan atau laboran juga dikelilingi oleh bakteri, meskipun telah memakai peralatan laboratorium yang memadai serta melakukan prosedur aseptik yang dianjurkan karena disebabkan faktor eksternel maupun internal. Dalam percobaan ini terdapat kontaminasi dari kapang asing berwarna merah pada trypticase soy agar (TSA; agar kedele triptikase) kelompok 10. Hal ini tidak terjadi pada kelompok lain meskipun dalam satu laboratorium. Diduga salah satu penyebab dari biakan asing bakteri pada TSA kelompok 10 adalah dari medium bulu mata. Berdasarkan identifikasi yang telah dilakukan pada sampel medium bulu mata kelompok 10, didapatkan hasil bahwa mikroorganisme yang terdapat pada TSA kelompok 10 adalah kapang Fusarium solani PENDAHULUAN Mikroorganisme terdapat di mana-mana, dari dasar laut sampai ke puncakpuncak gunung berselimutkan es, di mata-mata air belerang panas, dalam tanah dan debu, di udara, dalam air dan susu, maupun pada permukaan jaringan tubuh kita sendiri (kulit dan selaput lendir); pendek kata, di segala macam tempat serta lingkungan di muka bumi ini. Sesungguhnya, memang kita senantiasa dikelilingi oleh bakteri, fungi, protozoa dan mikroorganisme lain (Hadioetomo, 1993) Laboratorium, sebagaimana halnya lingkungan-lingkungan lain, dihuni oleh banyak mikroorganisme yang tersuspensikan di udara atau mengendap bersama debu pada berbagai macam permukaan (pakaian, meja, lantai serta benda-benda lain). Ukuran sel mikrobe yang demikian kecil dan ringan menyebabkannya mudah terhembuskan ke mana-mana oleh aliran udara atau membonceng pada partikelpartikel debu. Praktikan atau laboran juga dikelilingi oleh bakteri, meskipun telah memakai peralatan laboratorium yang memadai serta melakukan prosedur aseptik yang dianjurkan. Faktor internal (dari dalam) juga mempengaruhi jumlah mikroorganisme yang terbawa oleh laboran ke laboratorium. Misalnya, saat praktikan menderita sakit atau luka luar yang berpotensi membawa mikrobe baru ke lingkungan laboratorium. Akibatnya, tak menutup kemungkinan bahwa mikroorganisme dalam laboratorium dapat terkontaminasi mikroorganisme dari luar (Aryulina, 2004). Hal tersebut dapat mempengaruhi pengamatan pada medium yang disediakan.

BAHAN DAN METODE Dalam praktikum, akan diamati mikroorganisme yang umum dijumpai di laboratorium dan pada manusia. Bahan yang digunakan adalah 3 cawan petri yang *NIM: C34090077, Kelompok 10 Departemen Teknologi Hasil Perairan Di bawah bimbingan: Dwi Novianti dan Noviarti

masing-masing berisi medium biakan mikrobe yang mencakup nutrient agar (NA; agar nutrient), potato dextrose agar (PDA; agar dekstrosa kentang) dan trypticase soy agar (TSA; agar kedele triptikase). Praktikan menuliskan keterangan pada masing-masing nutrien dalam cawan petri yang mencakup nama kelompok, tanggal praktikum serta medium biakan mikrobe (lihat Lampiran, Gambar 1). Masing-masing medium telah siap digunakan untuk membiakkan mikrobe yang berasal dari udara, meja laboratorium serta tubuh manusia). Buka tutup cawan petri PDA; biarkan terbuka di atas meja selama 1 jam. Setelah itu kembalikan tutupnya, letakkan terbalik dan inkubasikan pada suhu kamar selama 2 5 hari. Selanjutnya, celupkan batang penyeka steril ke dalam air steril dalam tabung, lalu oleskan pada permukaan meja kerja atau permukaan benda lain. Buka tutup cawan petri NA dan oleskan batang penyeka tadi ke atas permukaan agar. Kembalikan tutupnya dan letakkan dalam posisi terbalik dalam keranjang yang disediakan. Cawan yang berisi NA diinkubasikan pada suhu 37C selama 2 - 5 hari. Bukalah terlebih dahulu tutp cawan petri TSA, kemudian sentuhkan atau letakkan pada permukaan dari salah satu medium berikut: jari, rambut, jilatan lidah, percikan bensin atau batuk. Dalam medium ini, digunakan rambut/bulu mata dari salah satu anggota kelompok 10. Selanjutnya, cawan petri TSA diinkubasikan pada suhu 37C selama 2 - 5 hari.

HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Pengamatan Tabel 1. Hasil biakan mikrobe kelompok 10 pada medium agar Dua macam koloni yang tumbuh Jumlah Sumber terbanyak macam Nama Koloni Koloni koloni Sketsa Ciri utama Miselium putih sampai kelabu hitam, hifa non septat, 3 Mucor sporangia dan NA sporangiospora Permukaan putih 1 Syncephalastrum sampai kelabu hitam Hijau kebiruan dengan area kuning 12 Aspergillus sulfur pada permukaannya PDA Permukaan putih sampai kelabu, 2 Nigrospora permukaan belakang hitam TSA ??? 1 ???

Gambar 1. Biakan bakteri asing berwarna merah pada TSA kelompok 10

Berdasarkan tabel, dapat dilihat bahwa mikroba yang berkembang di masingmasing medium merata, ditunjukannya dengan tidak ada bakteri yang sama pada nutrien yang berbeda. Koloni Aspergillus sp. mendominasi NA dengan jumlah koloni yang lebih banyak daripada mikroba lain di nutrien yang lain. Keanehan terjadi pada TSA, karena setelah diinkubasi selama 2 hari, mikroba yang tumbuh adalah mikroba asing yang berwarna merah (lihat Gambar 1) Perbandingan biakan mikroorganisme pada TSA kelompok lain (kecuali kelompok 10) pada Laboratorium Mikrobiologi 2 dapat dilihat pada tabel di bawah ini. Tabel 2. Hasil biakan mikrobe beberapa kelompok lain pada medium agar Medium biakan mikroorganisme dan mikroorganismenya Kelompok NA PDA TSA __ __ Aspergillus, 9 Rhizopus Hormodendrum, Monstospora Oospora 11 Monstospora Monstospora 13 Aspergillus Oospora, Mucor Oospora 14 Trichothecium Gliodadium

&

Sedangkan pada kelompok lain, mikroba yang dominan muncul adalah Montospora dan Oospora. Kedua organisme itu merupakan organisme lumrah yang dapat hidup di mana saja bahkan di laboratorium sekaligus (Sunatmo, 2009). Kedua kapang tersebut lebih berkembang pada medium yang terbuat dari bahan tumbuhan alami dari alam (Odum, 1959) misalnya kentang ataupun kedelai. Diduga salah satu penyebab dari biakan asing bakteri pada TSA kelompok 10 adalah dari medium bulu mata. Bulu atau rambut memang medium yang dianjurkan pada medium TSA ini. Namun belum diketahui apakah bulu mata tersebut dalam keadaan normal atau sedang terinfeksi. Karena bulu mata adalah bagian dari mata, maka diasumsikan bulu mata terinfeksi akibat adanya infeksi di sekitar mata. Berikut ini literatur yang diterjemahkan mengenai infeksi mata yang disebabkan oleh kapang atau jamur (Doctor Fungus, 2009). Tabel. 3 infeksi mata yang disebabkan oleh kapang dan jamur Fungi type Moulds Yeasts Trauma dari luar Penyakit permukaan Faktor yang Penggunaan lensa mata kronis memberi Ketidakimunan tubuh kontak pengaruh Pembedahan mata Obat kornea anestetik

Kekhasan klinis

Agen yang menginfeksi

Infiltrasi stromal yang mempunyai reaksi selular dan tekstur kasar Permukaan epitel mata terlihat kering, kelabu dan mungkin diatas permukaan kornea tidak jelas Fusarium spp Aspergillus spp Acremonium Other

Inflamasi stromal ekstensif dan adanya edema kemungkinan adanya keratitis bakteri gram positif

Candida albicans Candida parapsilosis Candida tropicalis

Mikroba yang diduga mengkontaminasi adalah kapang (jamur) dari genus Fusarium, dengan ciri-ciri umum: (1) Pusat berwarna rose tua dengan tepi merah muda dan (2) konidia seringkali berbentuk bulan sabit (Hadioetomo, 1993-hal. 25). Namun, belum teridentifikasi secara jelas apa spesies dari kapang Fusarium sp. tersebut. Oleh karena itu, diambil sampel spesies yang dominan dengan dengan ciriciri umum terdekat, yaitu: Fusarium solani, Fusarium oxysporum dan Fusarium chlamydosporum Tabel 3. Karakteristik mikroorganisme kontaminasi (Fusarium sp.) pada TSA Fusarium sp. Ciri Koloni F. solani F. oxysporum F. chlamydosporum Warna merah muda merah muda merah pucat Elevasi timbul timbul timbul Tepian berlekuk bercabang berombak Bentuk keriput keriput keriput Bau Berdasarkan tabel, ciri warna, elevasi dan bentuk hampir sama. Perbedaannya terletak pada bentuk tepiannya. Dengan perpatokan pada ciri umum genus Fusarium sp , yaitu (1) pusat berwarna rose tua dengan tepi merah muda dan (2) konidia seringkali berbentuk bulan sabit (berlekuk) maka jenis kapang yang terdapat pada TSA kelompok 10 adalah Fusarium solani.

KESIMPULAN Berdasarkan identifikasi yang telah dilakukan pada sampel medium bulu mata kelompok 10, didapatkan hasil bahwa mikroorganisme yang terdapat pada TSA kelompok 10 adalah kapang Fusarium solani. Dugaan tersebut diambil berdasarkan ciri-ciri umum genus Fusarium serta asumsi infeksi mata yang merembet ke sampel bulu mata.

DAFTAR PUSTAKA [Doctor Fungus]. 2009. Eye Infection [terhubung berkala] [akses: 1

http://www.doctorfungus.org/mycoses/human/other/eyeinfections.htm Oktober 2010]

Aryulina, Diah, Choirul Muslim, Syalfinaf Manaf, Endang Widi Winarni. 2004. Biologi 2. Jakarta: Erlangga Hadioetomo, Ratna Siri. 1993. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek: Teknik dan Prosedur Dasar Laboratorium. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama Odum, Eugene P. I959. Fundamentals of Ecology. USA: W. B. Saunders Company Suhardi. 1983. Evolusi Avertebrata. Jakarta: Penerbit Universita Indonesia (UI-Press) Sunatmo, Tedja Imas. 2009. Mikrobiologi Esensial Jilid I. Jakarta: Penerbit Ardy Agency

LAMPIRAN Lampiran 1. Eye infection Fungi type Predisposing factors

Moulds

Yeasts Chronic ocular surface diseases Chronic mucocutaneous candidiasis Immunosuppression, including AIDS Corneal anesthetic abuse Small, oval, sharply demarcated ulcerations with a "color button" configuration Extensive stromal inflammation and edema May be indistinguishable from Gram-positive bacterial keratitis

Outdoor or vegetablerelated trauma Contact lens usage Eye surgery

Clinical features

Stromal infiltrates have minimal cellular reaction and rough texture. The epithelial surface looks dry, gray and may be either above the level of the corneal surface or ulcerated. Feathery infiltrates. Sometimes pigmented fungal elements can be recognized Satellite lesions or multifocal microabscesses are also seen. Fusarium spp Aspergillus spp Acremonium Other

Most common etiologic agents

Candida albicans Candida parapsilosis Candida tropicalis

sumber: http://www.doctorfungus.org/mycoses/human/other/eyeinfections.htm

LAMPIRAN Lampiran 2. Gambar Fusarium sp.

Gambar 1. TSA yang terkontaminasi Fusarium sp. (kiri) dan TSA steril (kanan)

Gambar 2. Koloni Fusarium sp. berwarna merah muda, elevasi timbul dan tepian berlekuk

Gambar 3. Koloni Fusarium sp. Berbentuk keriput (dilihat dari bawah)

Gambar 4. Koloni Fusarium sp. dengan perbesaran 40x10, perlakuan pewarnaan gram

Gambar 5. Infeksi mata akibat kontaminasi Fusarium sp.(keratitis mata)