LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM BIOFARMASETIKA DAN FARMAKOKINETIKA

UJI BIOAVABILITAS DAN BIOEKIVALENSI OBAT

Disusun oleh Rinda Riany 260110100019

Selasa / 13.00 16.00

LABORATORIUM BIOFARMASETIKA DAN FARMAKOKINETIKA FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS PADJADJARAN 2013

UJI BIOAVABILITAS DAN BIOEKIVALENSI OBAT

I.

TUJUAN Tujuan dari percobaan ini adalah: 1. Menentukan status bioekivalensi dari suatu produk obat yang diuji. 2. Merancang uji bioavabilitas dan bioekivalensi suatu produk obat.

II. PRINSIP Prinsip pada percobaan kali ini adalah : 1. Bioavabilitas adalah suatu ketersediaan hayati atau suatu pengukuran laju dan jumlah obat yang mencapai sirkulasi umum (persentase obat yang diabsorbsi tubuh dari suatu dosis yang diberikan dan tersedia, untuk melakukan efek terapeutisnya). 2. Bioekivalensi adalah sediaan yang laju dan jumlah absorpsinya tidak berbeda secara bermakna apabila diberikan dalam dosis dan kondisi percobaan yang sama (suatu proses dengan innovator produk yang telah dipasarkan dan memiliki data valid tentang etikasi dan keamanannya).

III. TEORI DASAR Pada saat ini banyak produk obat dengan bahan aktif yang sama diproduksi dan dipasarkan oleh perusahaan yang berbeda. Obat yang dipasarkan tersebut dapat berupa produk inovator, yaitu produk yang dipatenkan oleh pabrik penemu,dan ada pula produk obat copy, yaitu produk yang mengandung zat aktif yang sama dan telah memenuhi standar kesetaraan/ekivalensi dengan produk inovator. Hasil penelitian biofarmasi telah membuktikan bahwa metode pembuatan dan formulasi yang berbeda dari produk-produk yang berbeda tetapi mengandung zat aktif yang sama menyebabkan profil bioavailabilitas (ketersediaan hayati) obat berbeda dan
2

menghasilkan kualitas efek farmakologis yang berbeda pula (Aiche dan Devissaguiet, 1993). Hal ini menunjukkan bahwa konsep ekivalensi obat menjadi penting untuk menjamin mutu suatu obat. Ekivalensi obat dapat dibedakan menjadi beberapa jenis, diantaranya: (1) ekivalensi farmasetik, yaitu kesetaraan antara produk obat dengan bentuk sediaan yang sama yang memiliki zat aktif yang sama dalam dosis yang sama; (2) ekivalensi biologis (bioekivalen), jika produk-produk obat tersebut memiliki ekivalensi farmasetik dan pada pemberian dosis yang sama akan menghasilkan bioavailabilitas yang sebanding; dan (3) ekivalensi terapeutik, jika keduanya memiliki ekivalensi farmasetik dan pada pemberian dosis yang sama akan menghasilkan efikasi klinik dan keamanan yang sama (BPOM, 2004). Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam penelitian bioekivalensi agar hasil yang diperoleh dapat digunakan antara lain adalah: a. Subyek, yang meliputi penetapan kriteria inklusi dan ekslusi pada saat seleksi subyek penelitian, perlakuan awal yang perlu dilakukan terhadap subyek sebelum uji bioekivalensi dilaksanakan b. Rancangan, antara lain berapa jumlah subyek yang akan diguna-kan, jenis kelamin, dan rancangan penelitian c. Perlakuan yang akan diberikan, yang meliputi dosis obat yang digunakan, cara pemberian, rancangan pengambilan sampel seperti sampel apa yang akan dikumpulkan (darah, plasma, atau urin) dan'waktu pengambilan sampel Evaluasi hasil yang diperoleh, antara lain uji statistic yang akan digunakan dan penetapan definisi dari bioekivalen sebelum uji dimulai (Udin, dkk. 2003). Parameter farmakokinetik yang digunakan untuk evaluasi status bioekivalen suatu produk adalah: a. AUC (area under the curve of concentration-time relationship, luas area dibawah kurva hubungan konsentrasi dan waktu)

b. Cmaks (konsentrasi maksimum) c. Tmaks (waktu untuk mencapai konsentrasi maksimum) (Sunoko, 2004). Dalam praktek, Cmaks dan Tmaks diperoleh dari konsentrasi maksimum hasil pengukuran konsentrasi dalam sampel yang diperoleh dan waktu tercapainya konsentrasi maksimum tersebut. Perlu diperhatikan dalam penetapan Tmaks bahwa pada daerah puncak kurva hubungan konsentrasi dan waktu profil kurva relatif mendatar sehingga dengan adanya variabilitas metode penetapan kadar yang digunakan maka nilai Tmaks yang diperoleh mungkin bukan merupakan Tmaks yang sebenarnya. Tidak optimalnya frekuensi pengambilan sampel dapat menyebabkan penetapan nilai Tmaks yang tidak akurat (Hosiana, dkk, 2000). Bioavailabilitas suatu obat adalah laju dan jumlah relatif obat yang mencapai sirkulasi umum tubuh (sistem peredaran darah). Laju relatif obat yang mencapai sistem peredaran darah (laju absorbsi) dapat ditentukan dari konstanta laju absorbsi, sedangkan jumlah relatif obat yang terabsorbsi dapat ditentukan dari availabilitas absolut atau availabilitas relatif. Manfaat dari biavailabilitas diantaranya adalah dapat diketahui waktu yang dibutuhkan suatu obat agar dapat memberikan efek terapi dan seberapa banyak obat tersebut dapat terserap oleh tubuh (Sulastri, 2006). Dasar untuk menentukan bioavailabilitas suatu obat terlebih dahulu harus diketahui profil disolusinya. Disolusi tablet ialah jumlah atau persen zat aktif dari sediaan padat yang larut pada waktu tertentu dalam kondisi baku. Kondisi yang dimaksud misalnya, dalam suhu, kecepatan, pengadukan, dan komposisi media tertentu. Uji disolusi merupakan suatu metode fisika kimia yang penting sebagai parameter dalam pengembangan produk dan pengendalian mutu sediaan obat yang didasarkan pada pengukuran kecepatan pelepasan dan melarut zat aktif dari sediaannya. Uji disolusi digunakan untuk uji bioavailabilitas secara in vitro, karena hasil uji disolusi berkorelasi dengan ketersediaan hayati obat dalam tubuh (Sunoko, 2004).

Bioavalabilitas absolut merupakan rasio ketersediaan zat aktif dalam sirkulasi sistemik suatu sediaan obat terhadap pemberian i.v. parenteral. Bioavailabilitas absolut jika diberikan pada dosis yang berbeda, membutuhkan suatu koreksi, sehingga diperoleh persamaan sebagai berikut :

Bioavailabilitas absolut sama dengan F. Di mana F adalah fraksi obat yang terabsorpsi. Oleh karena tidak semua zat aktif tersedia dalam pemberian i.v., maka timbulah pengertian bioavailabilitas relatif. Bioavailabilitas relatif merupakan rasio ketersediaan dalam sistemik suatu produk obat dibandingkan dengan standar dengan jenis zat aktif dan rute pemberian yang sama. Bioavailabilitas relatif jika diberikan pada dosis yang berbeda membutuhkan suatu koreksi, sehingga persamaan adalah sebagai berikut:

(Shargel, 1985). Nilai FABS antara 0-100%, sedangkan FREL dapat lebih dari 100 % (Sunoko, 2004). Uji Bioekivalensi (BE) merupakan data ekivalensi untuk melihat kesetaraan sifat dan kerja obat didalam tubuh suatu obat copy dibandingkan dengan obat innovator sebagai pembanding. Dua produk obat disebut bioekivalen jika keduanya mempunyai bioekivalensi farmaseutik dan alternatif farmaseutik dan pada pemberian dengan dosis yang sama akan menghasilkan bioavailabilitas yang sebanding sehingga efek dalam efikasi maupun keamanan akan sama (BPOM, 2004).

Uji bioavailabilitas dan bioekivalensi (BA/BE) mensyaratkan pelaksanaan sesuai dengan pedoman praktek laboratorium yang benar (Good Laboratory Practice) dan pedoman cara uji klinik yang baik (Good Clinical Practice). Setiap laboratorium pengujian, untuk menyusun proposal uji BA/BE diharuskan melakukan penelitian dan kajian pustaka, karena dalam pedoman uji bioekivalensi tidak menentukan produk yang harus diuji maupun inovator atau komparatornya demikian pula dengan metode yang digunakan (BPOM, 2004). Uji BA-BE umumnya menggunakan matriks darah dan pengukuran kadar obat dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT), sedangkan urin dapat digunakan apabila kadar obat yang utuh dalam urin lebih besar dari 40%. (Shargel, 2005).

IV. ALAT DAN BAHAN 1. Alat Software Microsoft Excel 2010 2. Bahan Komputer

V. PROSEDUR 1. Dari soal yang diberikan, disusun data AUC dari masing-masing obat yang telah diuji. Ditentukan obat yang akan dijadikan sebagai standar.

2. Dihitung bioavabilitas, FREL dan FABS menggunakan Microsoft excel 2010 3. Disimpulkan status bioekivalensi dari produk yang diuji.

VI. DATA PENGAMATAN 1. Hitung bioavailabilitas (F) sediaan obat berupa suspensi oral (konsentrasi zat aktif 50 mg/ml) apabila dibandingkan dengan sediaan injeksi intravena (konsentrasi zat aktif 100 mg/ml), dimana dosis yang diberikan untuk suspensi oral adalah 2 sendok teh sedangkan dosis injeksi IV adalah 2 ml. Data kadar obat dalam plasma terhadap waktu adalah sebagai berikut

T (jam) 0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 3,00 4,00 6,00 8,00 Jumlah (AUC (0-8)) Slope AUC (8-~) AUC total

Kadar (g/ml) Suspensi Injeksi Oral Intravena 0,00 6,13 2,75 5,31 6,24 4,62 8,50 4,02 9,81 3,50 7,43 2,65 5,60 2,01 3,19 1,16 1,91 0,66

AUC SO 0,69 2,25 3,69 4,58 8,62 6,52 8,79 5,10

Ln SO

AUC I.V 2,86 2,48 2,16 1,88 3,08 2,33 3,17 1,82

Ln I.V 1,81 1,67 1,53 1,39 1,25 0,97 0,70 0,15 -0,42

1,01 1,83 2,14 2,28 2,01 1,72 1,16 0,65

40,22 -0,2689 7,1026 47,33

19,78 -0,2784 2,3706 22,15

Keterangan: T = waktu (jam)

AUC SO = AUC suspensi oral = Kadar1+Kadar2 T2-T1 AUC I.V = AUC intravena

= Kadar1+Kadar2 T2-T1 AUC (8-~) = Konsentrasi saat waktu 8 jam Slope F = (AUC oral/AUC i.v) x (dosis i.v/dosis oral) x 100% = 85,46555732%

Grafik Oral
12.00 Konsentrasi (g/ml) 10.00 8.00 6.00 4.00 2.00 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 T (jam) Grafik Oral

Grafik ln Oral
2.00 1.80 1.60 1.40 1.20 1.00 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 T (jam) ln konsentrasi oral y = -0.2689x + 2.7901 R = 0.9993 Grafik ln Oral Linear (Grafik ln Oral)

Grafik Intravena
6.00

Konsentrasi (g/ml)

5.00 4.00 3.00 2.00 1.00 0.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 T (jam) Grafik Intravena

Grafik ln Intravena
0.80 ln konsentrasi intravena 0.60 0.40 0.20 0.00 -0.20 -0.40 -0.60 T (jam) 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Grafik ln Intravena Linear (Grafik ln Intravena) y = -0.2784x + 1.8142 R = 0.9999

2. Nyatakan status bioekivalensi dari ketiga sediaan kapsul uji (A,B,C) terhadap sediaan standar (STD) dengan data sebagai berikut:
Sukarelawan AUC (g/ml.jam) Kapsul A Kapsul B Kapsul C Kapsul STD 1 14,1 19,1 9,6 15,8 2 20,2 20 10,6 19 3 19 17,5 14,6 19,3

4 5 6 7 8

13,2 13,5 17,9 12,4 15,8

20,3 17,3 17,4 17,2 16,9

13,1 10,4 8,3 14,5 11,4

18,4 17,2 16,5 17,9 17,5

Kapsul Kapsul A STD F 1 14,1 15,8 89,24 2 20,2 19 106,32 3 19 19,3 98,45 4 13,2 18,4 71,74 5 13,5 17,2 78,49 6 17,9 16,5 108,48 7 12,4 17,9 69,27 8 15,8 17,5 90,29 Rata2 F 89,03 Standar Deviasi (Sf) 14,97 Standar deviasi rataan (Sf) 5,291459 t(0,05)(dk=7) 1,895 CLI(+) 99,06153 CLI(-) 79,0069 tidak ekivalen dengan standar tambah sampel lagi lalu diuji lagi Kapsul Kapsul B STD F 1 19,1 15,8 120,8861 2 20 19 105,2632 3 17,5 19,3 90,67358 4 20,3 18,4 110,3261 5 17,3 17,2 100,5814 6 17,4 16,5 105,4545 7 17,2 17,9 96,08939 8 16,9 17,5 96,57143 Rata2 F 103,2307 Standar Deviasi (Sf) 9,495696

10

Standar deviasi rataan (Sf) t(0,05)(dk=7) CLI(+) CLI(-) ekivalen dengan standar

3,357235 1,895 109,5927 96,86875

Kapsul Kapsul C STD F 1 9,6 15,8 60,75949 2 10,6 19 55,78947 3 14,6 19,3 75,64767 4 13,1 18,4 71,19565 5 10,4 17,2 60,46512 6 8,3 16,5 50,30303 7 14,5 17,9 81,00559 8 11,4 17,5 65,14286 Rata2 F 65,03861 Standar Deviasi (Sf) 10,33253 Standar deviasi rataan (Sf) 3,6531 t(0,05)(dk=7) 1,895 CLI(+) 71,96124 CLI(-) 58,11598 tidak ekivalen dengan standar

VII.

PEMBAHASAN

VIII. KESIMPULAN 1. Bioavabilitas absolut dari obat adalah sebesar 85,46 %, hal ini menunjukkan bahwa obat dengan pemberian melalui oral tidak diabsorpsi secara sempurna. 2. Kapsul A dan kapsul C tidak ekivalensi, sedangkan kapsul B memiliki ekivalensi sama dengan kapsul standar
11

DAFTAR PUSTAKA

12