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Universidad Nacional Mayor de San Marcos

Universidad del Per (DECANA DE AMRICA)

Facultad de Farmacia y Bioqumica


Escuela Acadmico Profesional de Farmacia y Bioqumica

ESTUDIO COMPARATIVO DEL EFECTO


ANTIINFLAMATORIO DE Schkuhria
pinnata (Lam) Kuntze y del Diclofenaco
GRUPO: MARTES (10 am 2 pm)
MESA: 3
INTEGRANTES:
CUEVAS ESPINAL, MERY
CUYA LOPEZ, EDILBERTO
DIAZ MARTINEZ, HEYDEE
GIURFA TUTAYA, LILIANA
OBLITAS BARBOZA, JEAN

ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata


INDICE
I.
II.

RESUMEN / SUMMARY
INTRODUCCIN
OBJETIVO GENERAL
OBJETIVOS ESPECIFICOS

III.

GENERALIDADES
2.1 CLASIFICACION BOTANICA
2.2 ASPECTOS DE LA PATOLOGIA A TRATAR

IV.

PARTE EXPERIMENTAL
3.1. EQUIPOS Y MATERIALES
3.1.1 Material Biolgico
3.1.2 Equipos de Laboratorio
3.1.3 Material de Laboratorio
3.1.4 Material Farmacolgico y Reactivos
3.2. METODOS Y TECNICAS PROCEDIMENTALES
3.2.1 Recoleccin y desecacin del material botnico.
3.2.2 Obtencin del extracto etanlico de Schkuhria pinnata
L.
3.2.3 Preparacin de la dosis.
3.2.4 Preparacin de los animales
3.2.5 Determinacin del efecto Schkuhria pinnata L.

V.

RESULTADOS
4.1 Ensayo de solubilidad del extracto
4.2 Anlisis Cualitativo Fitoqumico del extracto
4.3. Determinacion del efecto de Schkuhria pinnata L.

VI.
VII.
VIII.
IX.

DISCUSIN
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
ANEXOS

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I.

RESUMEN
Se comprob los efectos del extracto etanlico de

Schkuhria

pinnata Lamarck) Kuntze canchalagua en dosis de: 200, 400 y


600 mg/kg por va oral, sobre la inflamacin en comparacin con el
diclofenaco. Para el estudio del efecto antiinflamatorio

se trabaj

el mtodo de induccin de edema en la pata posterior izquierda


empleando

carragenina

al

1%

en

todos

los

grupos

de

experimentacin. Se observ un mayor efecto antiinflamatorio con


el extracto C, los extractos A y B inhibieron poco la inflamacin, el
grupo patrn (diclofenaco) no mostr una marcada inhibicin de la
inflamacin. En conclusin qued demostrado que el extracto
etanlico de mayor concentracin (600 mg/Kg) Schkuhria pinnata
L presenta efecto antiinflamatorio.

Palabras clave: Schkuhria pinnata, inflamacin, extracto.

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SUMARY
They tested the effects of ethanol extract Schkuhria
pinnata Lamarck) Kuntze "canchalagua" at doses of 200,
400 and 600 mg / kg orally, on inflammation compared
to diclofenac. For the study of the antiinflammatory
effect was worked edema induction method in the left
hind leg using 1% carrageenan in all experimental
groups. Greater effect was observed with the extract
antiinflammatory C, A and B extracts inhibited little
inflammation,

pattern

group

(diclofenac)

showed

marked inhibition of inflammation. In conclusion it was


shown that the highest concentration of ethanol extract
(600 mg / kg) Schkuhria pinnata L has anti-inflammatory
effect.

Keywords: Schkuhria pinnata, inflammation, extract

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II.

INTRODUCCIN
Per tiene una variedad de plantas que demuestran tener
propiedades antinflamatorias, Por lo que el presente

proyecto

estuvo dirigido para investigar la actividad antiinflamatoria de la


planta

Canchalagua

Schkuhria

pinnata

(Lam.)

Kuntze

Kuntze

es una

tradicionalmente usadas del Per.


La Canchalagua

Schkuhria pinnata (Lam.)

hierba anual erecta difuso ramosa de 20-40 cm de altura


produce numerosas pequeas flores amarillas en numerosos
tallos erectos aireadas que crecen ms leosa a medida que
madura. Canchalagua es nativa de Amrica del Sur y se
encuentra generalmente en las regiones ms secas de montaa a
unos

2000

abundantemente

3000
en

metros
los

de

valles

altitud.

Se

interandinos

encuentra
del

Per.

Canchalagua ha sido introducida y cultivada en otros pases y se


pueden encontrar en Amrica Latina, Mxico, frica, e incluso en
partes del sur de Arizona y Texas, donde se ha escapado de
cultivo y floreci como una maleza anual. Canchalagua es el
nombre dado peruano a esta planta por el pueblo Ketchwa
indgenas de los Andes. Durante mucho tiempo han utilizado esta
planta como un limpiador de la sangre eficaz. Por lo general, la
planta entera se desarraiga y cortado en pedazos y preparar en
infusin (planta fresca) o una decoccin (planta seca) para este
recurso local. Existen muchos tipos de problemas de la piel,
incluyendo eccema, dermatitis, acn, y se cree que causan las
toxinas y bacterias parcialmente digeridos que circulan en el
torrente sanguneo, y este remedio herbal canchalagua se utiliza
como un remedio natural para este tipo de afecciones de la piel
tambin.

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En los sistemas de medicina de hierbas peruanas canchalgua se


considera como un tnico capilar anti-inflamatorio, digestivo,
antitusivo (se detiene la tos),, diurtico, y hipoglucmico. Se
emplea como un remedio de hierbas all para el rin, el hgado y
los problemas renales, malaria, diabetes, alergias, infecciones por
hongos, inflamacin de la prstata, trastornos digestivos y los
gases intestinales, reumatismo, y varias afecciones cutneas
tales como acn, dermatitis y eczema. Cuando se toma
internamente se cree que ayuda a regular las hormonas y el
contenido de aceite para la piel acn juvenil y tambin se utiliza
en una aplicacin tpica para puntos negros, espinillas y acn.
Tambin se considera un buen diurtico y se utiliza para diversos
renal y trastornos renales incluyendo infecciones del tracto
urinario y dolor renal. Tambin se suele invocarse como un t
relajante para aliviar las nuseas y los dolores de estmago, y
como una ayuda digestiva general.

En la composicin qumica de esta planta se ha detectado la


presencia de glicsidos amargos, cido clorognico, flavonoides,
esteroles,

terpenos,

compuestos

sulfurados,

carbohidratos

lineales, fructosa, pentosanos, colina, arginina, levulosa, inulina y


sales

de

potasio.

Se

le

atribuyen

sus

propiedades

antiinflamatorias a la presencia de sesquiterpenos que inhiben


el NF-kappa B (mediador qumico involucrado en los procesos
inflamatorios en el cuerpo), adems de suprimir la produccin de
xido ntrico. Se ha demostrado que el extracto etanlico de la
planta entera presenta esta propiedad cuando fue evaluado en
animales de laboratorio. En la actualidad la canchalagua es

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considerada un recurso biolgico de

la regin andina con

potencial de valorizacin mediante tecnologas modernas.

OBJETIVO GENERAL
Comprobar la actividad antiinflamatoria del extracto etanlico de
la Schkuhria pinnata (lam) Kuntze en ratas alvinas.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
Comprobar la variacin de la actividad antiinflamatoria
diferentes concentraciones de extracto

etanlico de Schkuhria

pinnata (lam) Kuntze en ratas alvinas.


Comparar el mayor efecto antiinflamatorio

entre el extracto

etanolico A,B,C y el Voltaren en ratas albinas.

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III.

GENERALIDADES
La

Canchalagua

pinnata (Lam.)
hierba

Schkuhria

Kuntze

pequea

que

es una
crece

en

nuestro territorio distribuida en los


valles y laderas de sierra entre
2000 y 3000 msnm en las serranas
de Ayacucho, Ancash y
principalmente.

En

la

Piura,
medicina

tradicional es muy utilizada para el


tratamiento

de

problemas

hepticos y alrgicos, por su accin


depurativa

sangunea,

se

le

atribuye actividad colagoga, actividad diurtica, antimicrobiana


para

ciertos

antidiabtica

hongos

algunas

.Tambin se emplea

bacterias,

digestiva

para cuadros

de acn,

dermatitis y otros problemas inflamatorios de la piel. En la


composicin qumica de esta planta se ha detectado la presencia
de glicsidos amargos, cido clorognico, flavonoides, esteroles,
terpenos,

compuestos

sulfurados,

carbohidratos

lineales,

fructosa, pentosanos, colina, arginina, levulosa, inulina y sales de


potasio. Se le atribuyen sus propiedades antiinflamatorias a la
presencia

de

sesquiterpenos que inhiben el NF-kappa B

(mediador qumico involucrado en los procesos inflamatorios en


el cuerpo), adems de suprimir la produccin de xido ntrico. La

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canchalagua tambin es usada en muchos pases como un
remedio tradicional para la malaria. Se ha demostrado que el
extracto etanlico de la planta entera presenta esta propiedad
cuando fue evaluado en animales de laboratorio. En la actualidad
la canchalagua es considerada un recurso biolgico de la regin
andina con potencial de valorizacin mediante tecnologas
modernas.
3.1

CLASIFICACIN TAXNOMICA

Schkuhria pinnata (Lam.) Kuntze

Reino
Divisin
Clase
Subclase
Orden
Familia
Gnero
Especie

PLANTAE
MAGNOLIOPHYTA
MAGNOLIOPSIDA
ASTERIDAE
ASTERALES
ASTERACEAE
Schkuhria
Schkuhria pinnata (lam)
kuntze

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a. SINNIMOS:
Piqui pichana, matapulgas, jayaipichana (Bolivia). Amblyopappus
mendocinus Phil., Hopkirkia anthemoides DC., Mieria virgata La
Llave, Pectis pinnata Lam., Rothia pinnata (Lam.) Kuntze.,
Schkuhria wislizenia, Schkuhria wrightii, Schkuhria virgata (La
Llave) DC., Schkuhria isopappa Benth., Schkuhria guatemalensis
(Rydb.)

Standl.

&

Steyerm.,

Schkuhria

coquimbana

Phil.,

Schkuhria anthemoides (DC.) J.M. Coult., Schkuhria advena Thell.,


Schkuhria abrotanoides Roth., Tetracarpum guatemalense Rydb
b. NOMBRES COMUNES
Akech, anisillo cimarrn, azureta, canchalagua, canchalahua,
escoba de anisillo, calndula enano, enano maravilla mexicana,
escobilla,

jayajpichana,

kanchalawa,

putsutiri

karatataraku,

khakibush, mata pulgas, biro onyalo, pinqui pichana, threadleaf


falso pinnadas, schkuhria, estrellado cielo, Tacote, amarillo
tumbleweed matapulgas, jayaipichana (Bolivia)

c. DESCRIPCIN
Planta anual erecta, difuso ramosa de 20 40 cm de altura,
escasa cobertura. Tallos speros, estriados, foliosos hacia el
pice. Hojas profundamente pinati-sectas o bipinatisectas, de 2
4 cm de largo con raquis y segmentos filiformes. Captulos
pedicelados,

numerosos,

pequeos,

dispuestos

en

cimas

corimbiformes. Involucro ovado o cilndrico de 5 6 mm, de alto


por 2 mm de dimetro, formado por 5 brcteas oblongas o

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lanceoladas, glabras, obtusas con margen membranceo. Flores
5 8 en cada captulo amarillas, dimorfas, una

femenina,

brevemente

ligulada

las

dems

hermafroditas,

tubulosas. Aquenios obpiramidales de 3 4 mm de longitud con


costillas ciliadad o pilosas.
d. HBITAT Y DISTRIBUCIN
Hierba que se desarrolla en poca lluviosa, campos abiertos,
cerca de cultivos, bordes de caminos y carreteras en terrenos
arenosos, franco arenosos y pedregosos. Desde 2000 3000 m.
e. UBICACIN EN EL PER:
Crece en los valles andinos, entre los 2000 2700 msnm, en
zonas templadas y calidad de la Costa y Sierra (Ayacucho,
Ancash y Piura). Se cultiva en La Cantuta, Chsica (Lima).

f. BIOAGRICULTURA:
Vegeta en verano, florece y fortifica en Otoo.
g. COMPOSICIN QUMICA:
Almidn, antocianinas, carotenoides, compuestos reductores,
cumarinas,

esteroides,

flavonoides,

triterpenoides,

resinas,

glicsidos, sustancias grasas,

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sesquiterpenolactonas, sustancias fenlicas, cido oxlico, cido


mlico,

azcar

(glucosa, fructosa,

sacarosas),

aminocidos,

protenas, muclagos.
h. FARMACOBOTNICA Y FARMACOGNOSIA
Los

esteroides

flavonoides

tienen

marcada

actividad

antiinflamatoria.
Los flavonoides poseen accin similar a la cortisona, poseen
tambin efecto antidiurtico, contraceptivo y antibitico.

i. PROPIEDADES MEDICINALES:
Antidiabtico Antiinflamatorio
Depurativo de la sangre: Decoccin de la planta entera, es
desintoxicante.

Es

aperitivo,

digestivo,

diurtico,

antiinflamatorio.
Males estomacales: Infusin de la planta entera
Diabetes: infusin, de las ramas floridas frescas se toma en
ayunas
Afecciones renales: infusin de la planta.
Obesidad: El cocimiento de la raz como agua de tiempo
Infusin: 20g de la planta en un litro de agua hervida
reposar 10 minutos.

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Malaria: Decoccin de la planta entera al 3%
Males del tracto urinario: decoccin de las ramas y hojas
secas al 2%

3.2

ASPECTOS DE LA PATOLOGIA A TRATAR

3.2.1 INFLAMACIN

La inflamacin es la respuesta, del sistema inmunolgico de un


organismo, al dao causado a sus clulas y tejidos vascularizados
por patgenos bacterianos y por cualquier otro agresor de
naturaleza biolgica,
dolorosa,

la

reparadora;

qumica,

inflamacin
un

proceso

es,
que

fsica

mecnica. Aunque

normalmente,
implica

una respuesta

un enorme gasto de

energa metablica. En ocasiones, transcurre hacia una situacin


crnica que suele dar lugar

a una enfermedad degenerativa

como artritis, arteriosclerosis o, incluso, cncer. Aunque suele


acompaarse de una respuesta generalizada respuesta de
fase aguda caracterizada por un cuadro clnico pasajero de
sensacin de malestar, fiebre y modificacin del perfil de las
protenas

inflamacin

leucocitos
aguda

circulantes,

en

local provoca una

ocasiones,

la

reaccin orgnica

generalizada sndrome de respuesta inflamatoria sistmica

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que, en una secuencia
control
funcional

inflamacin
de

los

de reacciones a modo de espiral sin


maligna,

diferentes

rganos

conduce
y

al fracaso

sistemasfracaso

multiorgnico y, tras ello, a la muerte del individuo (Figura 1)

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Figura 1. La inflamacin, aunque en principio representa un proceso universal


e inespecfico encaminado a restaurar la homeostasis disturbada, puede
elegir, segn la causa desencadenante, diferentes escenarios de actuacin

En cualquier caso, la respuesta inflamatoria est coordinada por


un copioso dispositivo de mediadores que

se organizan en

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complejas redes reguladoras. Para disecar tal entramado, es til
agrupar esas seales en categoras funcionales y distinguir entre
inductores y

mediadores de la respuesta inflamatoria. Los

primeros son seales que inician el proceso; activan sensores


especializados que suscitan la produccin de lotes especficos
de

mediadores.

Estos,

su

vez, alteran los

estados

funcionales de clulas, tejidos y rganos que son los efectores


de la inflamacin, de manera que permitan su adaptacin
primero y reparacin despus, del dao infringido por el inductor
(Figura 2).

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Figura 2. Una
va inflamatoria
genrica
incluye, secuencialmente,
inductores, sensores, mediadores y efectores. Los inductores pueden
clasificarse en exgenos y endgenos, y ellos, a su vez, en clases diferentes.
Los diferentes inductores operan a travs de vas distintivas. AGE: Advancedglycation end
products,
C: Sistema del complemento srico, IgE:
Inmunoglobulina E, IL: Interleuquina, NALP: Miembro de la familia NLR (ver:
Tabla III), PAMP: Pathogen-Associated Molecular-Pattern, PGE: Prostaglandina E,

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3.2.2 FISIOPATOLOGA
El proceso inflamatorio representa una reaccin tisular imprevista
ante una agresin, que incluye: decisiones de puesta en marcha
o de cese, basadas en la integracin de secuencias moleculares
incitadas por el dao tisular causado por la penetracin de
microbios o por la presencia de material extrao exgeno o
endgeno; reclutamiento,
eliminacin

de

instruccin

microbios,

cuerpos

envo

extraos

de clulas;
de

clulas

infectadas y/o daadas; creacin de barreras para evitar las


metstasis microbianas, y la reparacin del tejido lesionado por la
agresin o por la respuesta del husped. Si diferentes causas
alteran o bloquean cualquiera de las etapas de este ordenado
proceso, la inflamacin

puede

derivar

hacia

soluciones

no

deseadas, como la infiltracin tisular por agregados de linfocitos


y leucocitos (granulomas) que, en ocasiones en las articulaciones,
son

embebidos

en

una

masa

hiperproliferativos (pannus), o la
biosntesis incontrolado
inflamacin
protenas

de

fibroblastos

sinoviales

distorsin tisular mediante la

de colgeno (fibrosis o cirrosis). La

persistente

puede

provocar

depsitos

de

amieloides, en principio protectoras pero que, a la

larga, pueden inducir enfermedades crnicas degenerativas, y,


tambin, lesiones oxidativas en el cido desoxirribonucleico
(ADN)

que,

con

el

tiempo,

favorezcan

transformaciones

neoplsicas.
Lo que Celso defini como rubor, calor, dolor y tumor sigue
siendo un problema intelectual de primer orden en el terreno de
la transduccin de seales y de la comunicacin intercelular, en
los sistemas biolgicos; un problema sociolaboral importante por

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su incidencia en el trabajo y en las relaciones personales, y un
mercado milmillonario para la industria farmacutica. Cuando los
acontecimientos

patognicos

primarios

fisiopatologa y el control de la

se

desconocen,

la

inflamacin son las mejores

opciones, aunque el nmero de

enfermedades consideradas de origen inflamatorio disminuye


a la par que se identifican las causas patognicas iniciales. Sin
embargo, en esta y en otras
importantes,

enfermedades

infecciosas

la respuesta inflamatoria puede causar ms dao

que el microbio (Tabla I).


La inflamacin es, ante todo, una respuesta a favor de

la

supervivencia, tal como queda reflejado por el elevado riesgo de


infecciones graves en individuos con deficiencias genticas de los
componentes principales del proceso inflamatorio; por ejemplo, la
incapacidad para movilizar

leucocitos al foco lesionado en los

dficit de adhesin leucocitaria puede conducir a la muerte por


infeccin; la incapacidad de producir diferentes componentes del
sistema

del

complemento

meningoccicas,

la

NADPHoxidasa leucoctica,

srico

predispone

incompetencia
que

de

incapacita

a
la

al

infecciones
maquinaria

fagocito

para

producir especies reactivas de oxgeno bactericidas, conlleva la


enfermedad

granulomatosa

crnica.

Por

ello,

el objetivo

mdico de inhibir la inflamacin se


acompaa, paradjicamente, por un esfuerzo de comparable
importancia para lograr inducir inflamacin de manera eficaz en,
al menos, dos situaciones. En primer lugar, causar y mantener
inflamacin se encuentran entre las funciones esenciales de los
adyuvantes en las vacunas; y en segundo, provocar inflamacin

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es uno de los objetivos primarios de la inmunologa tumoral, en
inmunizacin
inespecfica,

teraputica
como

cuando

se

en

inmunoestimulacin

instila

bacilo

de Calmette-

Gurin en una vejiga urinaria para prevenir la recurrencia


tumoral.
La evolucin no previno que la ciruga sera una tcnica
asptica. As, el organismo reacciona al trauma como si la
emergencia fuera una infeccin, y hasta que se

demuestre lo

contrario. La secuencia inflamatoria suele ejemplificarse

con un sencillo experimento: descubrir


antebrazos y colocarlo en supinacin

uno de nuestros

sobre una superficie de

apoyo. Poner las yemas de los tres dedos


medios de la otra mano sobre el antebrazo desnudo, a la altura
de la mueca y arrastrarlos hacia la flexura del brazo mientras
mantenemos una fuerte presin. Tras,
segundos aparecer un
agredida

de

nuestro

ms o menos, quince

bajorrelieve enrojecido en la piel


antebrazo,

que

desaparecer

transcurrida una hora. En cambio, si la piel ha sido lesionada


un corte y/o las bacterias han logrado acceder a los tejidos
contaminacin, el enrojecimiento y el edema persistirn,
mostrando

que se han puesto en marcha una serie de

mecanismos, sincronizados con el proceso de reparacin o con


tiempo de replicacin bacteriana y su potencial expansivo. El
episodio probablemente culminar con el confinamiento y
muerte de las bacterias que contaminaron la herida, y con la
eliminacin y reparacin del tejido daado. Si la respuesta
inflamatoria no fue adecuada por diferentes causas de origen

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congnito o adquirido, la infeccin y sus efectos se generalizarn
sepsis pudiendo, incluso, provocar la muerte del enfermo.

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T
a
bl
a
I.

Ejemplos de enfermedades inflamatorias.

La respuesta celular a la agresin


Cualquier

agresin

local

un

organismo

desencadena

respuestas en tres niveles de la organizacin: celular, tisular y


orgnico (Figura 3). La respuesta celular es individual y
aislada, y tiene por objetivos defender su acervo gnico y
mantener la conformacin nativa de sus protenas.

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Figura 3. La respuesta del organismo a la agresin se realiza a tres niveles:


celular, tisular y sistmico. Cada uno de ellos exhibe pecu- liaridades
distintivas. ADN: cido desoxirribonucleico, APR: Acute phase response, HS-R:
Heat-shock response, R-ADN: Respuesta de reparacin
del ADN, RG-NEI:
Respuesta general neuro-endocrino-inmunolgica

LA RESPUESTA TISULAR
La figura 4 esquematiza el flujo de informacin desencadenado
por una herida contaminada, comn, de pronstico leve. La

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respuesta tisular a la agresin, o inflamacin en stricto sensu,
contempla,

en

esquema,

interrelacionados: a) la
nerviosas libres provoca

cuatro

acontecimientos

estimulacin de las terminaciones


dolor y liberacin de pptidos

bioactivos: neuropptidos; b) las clulas daadas piroptosis


liberan protenas constitutivas intracelulares: HSP, factor
nuclear HMGB1 y N-formil-pptidos (FP) mitocondriales; c) los
microorganismos

sus

diferentes

productos

incitan,

en

colaboracin con los anteriores, una respuesta inmunolgica


innata, y d) seales emanadas del foco inflamatorio reclutan
leucocitos en el lugar de la lesin.

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Figura 4. Flujo de informacin


desencadenado por una herida
contaminada, comn, de pronstico leve. Los microorganismos liberan
productos que
actan, de
manera
directa,
sobre
mastocitos,
macrfagos/APC y neutrfilos. APC: clulas presentadoras de antgenos;
C: sistema del complemento srico; f-pptidos: formil-pptidos; HMGB1:
high mobility group box 1; Hsps: protenas de choque trmico; ILs:
interleuquinas. Produccin de:.Actuacin sobre: . *: doble accin=destruye

Mediadores inflamatorios
Numerosos estudios sealan la importancia del reclutamiento
de leucocitos
circulante.

Sin

en el foco inflamatorio
embargo,

una

rpida

a partir

del

pul

respuesta

requiere

clulas centinelas estacionadas en los tejidos. Los macrfagos y


especialmente

los

mastocitos,

cumplen

tal

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funcin.

Los

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mastocitos perivasculares
liberados

por

las

responden

terminaciones

los

nerviosas

neuropptidos
daadas

estimuladas liberando histamina, triptasa y otras proteasas y


TNF-

preformados,

eicosanoides

inflamatorias,

tromboxanos

quimioquinas

neoformadas.

triptasas

causan

prostaglandi-

nas

leucotrienos, citoquinas y

Histamina,

vasodilatacin

eicosanoides

responsable del calor y

rubor inflamatorios y extravasacin responsable del tumor


o edema inflamatorio. Las triptasas mastocticas siegan el
extremo N-terminal exocelular de receptores activados por
proteasas,
crpticas,

desenmascarando
que

autoactivan

el

secuencias,
receptor.

previamente

Un receptor que

pertenece a la clase GPCR y que est presente en mastocitos,


terminaciones nerviosas libres sensitivas, endotelio vascular,
plaquetas y neutrfilos (Figura 5)

Figura 5. Mecanismo de autoactivacin de los receptores


activados por proteasas (PAR). Tras la escisin proteoltica
del extremo N-terminal (NH3+) del PAR por trombina,
tripsina o triptasa (dependiendo del subtipo del receptor), se
expone unnuevo resto N-terminal (*NH3+) y se
desenmascara la secuencia que autoactiva el receptor
acoplado a protena G.TM1: primer domino transmembranar.
TM7: sptimo dominotransmembranar. COO-: grupo

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

La cascada de adhesin leucocitaria


La mayor parte de lo anterior tiene por objetivo reclutar y
activar fagocitos en el foco inflamatorio. La cascada de adhesin
leucoctica es una secuencia de acontecimientos de adhesin y
activacin que concluye con la extravasacin de los leucocitos;
ello con la finalidad de que tales clulas ejerzan sus efectos en el
foco inflamatorio. En dicha cascada pueden distinguirse, al
menos,

cinco

etapas

bien

definidas:

captura,

rodamiento,

rodamiento lento, anclaje y migracin (Figura6 )

Figura 6. La cascada

de

adhesin

leucocitaria

es una

secuencia

de

acontecimientos de adhesin y activacin que termina con la extravasacin del


leucocito que, en el espacio intersticial donde

tienen lugar la inflamacin,

ejercer sus efectos. La cascada de acontecimientos

se ha disecado

en cinco

pasos: captura, rodamiento, rodamiento lento, anclaje y transmigracin. Cada


uno de ellos es necesario para que el reclutamiento leucocitario en el foco
inflamatorio sea efectivo. Los tres primeros pasos dependen, en principio, de

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata


selectinas, siendo integrinas las responsables de la conclusin de la secuencia.
En resumen, la iniciacin del proceso exige la acti- vacin del endotelio que, por
accin

de quimioquinas expone,

sobre

su superficie,

selectinas.

constitutivamente expresados sobre los leucocitos establecen

Ligandos

ligaduras, cada

vez ms fuertes segn avanza la secuencia, con selectinas. La conclusin de la


casca- da de adhesin depende de las interacciones de integrinas leucocitarias
con sus ligandos

endoteliales.

transendotelialmente

siguiendo

Completa
un

la captura, el leu- cocito migra

gradiente

quimioquinas. Modificada de: Klaus Ley et al.

haptotctico

de

nuevas

51

La respuesta del organismo


La respuesta de fase aguda (Acute phase response, APR)55 se
refiere a una amplia serie de acontecimientos
se

inician

lugar

una

inmediatamente despus
infeccin

fisiolgicos, que

de que haya tenido

o cualquier otro tipo de agresin al

organismo. La APR se caracteriza por fiebre, cambios en la


permeabilidad vascular y cambios en los perfiles metablicos de
varios rganos. La respuesta se inicia y coordina por diversos
mediadores

inflamatorios,

especialmente

citoquinas,

hormonas, fundamentalmente glucocorticoides. Las primeras son


liberadas precozmente desde el foco inflamatorio por fagocitos
mononucleares, linfocitos y otros tipos clulas diferenciados
activadas, y tienen potentes efectos locales y sistmicos. La
casca- da de mediadores induce la activacin, proliferacin,
cambios del comportamiento y

cambios metablicos de una

serie de clulas y de tejidos. Todo ello con el objetivo de


neutralizar el agente agresor, controlar el proceso inflamatorio
y promover el

proceso de reparacin y, as, iniciar el retorno

a la normalidad fisiolgica. Es importante


considerar la inflamacin y la consiguiente respuesta de fase
aguda como un proceso homeosttico dinmico que involucra a

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata


todos los prin- cipales sistemas del organismo, a parte de los
sistemas inmunolgico,

cardiovascular

nervioso

central

(SNC).
Autorregulacin del proceso
Poco despus de iniciarse los ciclos proinflamatorios descritos,
se accionan una serie de frenos en los que las lipoxigenasas
son

piezas

importantes.

El araquidonato liberado de los

neutrfilos sirve de sus- trato a la 5-lipoxigenasa de los propios


neutrfilos para generar el proinflamatorio leucotrieno B4. Sin
embargo, cuando los neutrfilos infiltran los tejidos, tambin
ceden araquidonato a estos, donde las clulas expresan 15lipoxigenasa. La 15-lipoxigenasa produce lipoxinas a partir del
araquidonato. Las lipoxinas son una clase de eicosanoides
oxidados que se acoplan a receptores cuya seal bloquea el
influjo de neutrfilos. Los neutrfilos tambin pasan a otras
clulas

un

metabolito

intermedio

de

la

5-lipoxigenasa:

leucotrieno A4, al que la 15-lipoxigenasa convierte tambin en


lipoxina. De esta manera, interacciones intercelulares favorecen
una

transicin

en

el

perfil

de

los

productos

del

araquidonato: desde los proinflamatorios leucotrienos a los


derivados

antiinflamatorios

(Cyclopentanone

de

prostaglandin,

la

clase

ciclopentanonas

CyPGs: PGF2g, PGA1 y PGD2),

que inhiben la actividad, no la produccin, de los factores de


transcripcin AP-1, STAT (Signal

transducer and activator of

transcription) y NF-B, y a las lipoxinas (Figura 7).

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

Figura 7. Las prostaglandinas (PG) son pequeas molculas lipdicas que regulan
numerosos procesos orgnicos. La produccin de PG comienza con la liberacin de
cido araquidnico o eicosanoico de los fosfolpidos (PL) de las membranas celulares,
por accin de la fosfolipasa A2 en respuesta a estmulos inflamatorios. El cido
araquidnico es convertido

a PGH2 por las enzimas ciclo-oxige- nasas COX-1 y COX-2


(sintasa de prostaglandina-endoperxido H). Se considera que COX-1 se expresa
constitutivamente en la mayo- ra de los tejidos y acta para mantener procesos
homeostticos (ej. secrecin de moco o funcin renal). COX-2, por el contrario, es una
enzima inducible y est involucrada, primariamente, en la regulacin de la inflamacin.
Est en discusin una tercera forma (COX-3). La va COX da lugar a prostaglandinas,
tromboxanos y prostaciclinas. Prostaciclinas y derivados ciclopentanona-PG (cyPG) PGD2
y su metabolito PGJ2 son eficaces antiinflamatorios, mientras que las PG clsicas
PGE2 y PGF2 y tromboxanos son proinflama- torias. El cido araquidnico puede ser

metabolizado a travs de otras dos vas enzimticas: lipoxigenasas dan lugar a los
hidroperxi- dos leucotrienos y lipoxinas; y citocromo P450 forma derivados epxidos.
Mientras que los leucotrienos son potentes proinflamato- rios, las lipoxinas frenan el
proceso inflamatorio. Durante el desarrollo del proceso inflamatorio se produce
Pginaun31
desplazamiento hacia lipoxinas; ello mediante la reorientacin del metabolismo
hidroperxido hacia intereses antiinflamatorios bajo la direccin de los pro- ductos de la
va COX. Existe una cuarta va metablica del cido araquidnico, no enzimtica,
dependiente de la produccin de radi- cales libres de oxgeno [O*] por los fagocitos

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

IV.

PARTE EXPERIMENTAL

4.1. MATERIALES Y EQUIPOS:


4.1.1 MATERIAL BIOLGICO:
Ratas adultas cepa Wistar, de ambos sexos (2 meses de
edad,Peso promedio 200-250 g.).
Muestra seca pulverizada de la planta entera sin raz de
Schkuhria pinnata canchalagua

4.1.2 EQUIPOS DE LABORATORIO


Molino de cuchillas (Malla N20)
Balanza analtica
Estufa
Plestimografo

4.1.3 MATERIAL DE LABORATORIO


Pipetas Pasteur.
Embudo de vidrio
Placas petri
Cronmetro
Papel filtro
Gradilla
Frascos de color mbar

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

4.1.4 MATERIAL FARMACOLGICO Y REACTIVOS


Agua destilada
Diclofenaco (75 mg/3mL)
Uretano al 20%
Carragenina al 1%

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

4.2.

MTODOS Y TCNICAS PROCEDIMENTALES

4.2.1 Recoleccin y desecacin del material botnico


La especie vegetal Schkuhria pinnata L. fue recolectada en la
ciudad de Lima, en el distrito de La Victoria, en el mes de de
octubre del 2012. Se recolect la planta entera (hojas, tallos y
flores) sin raz. Un kilo y medio de muestra recolectada se llev a
estufa con aire circulante a una temperatura de 40 C durante 3
das para su secado respectivo. Se realiz la molienda en un
molino elctrico de cuchillas. El producto seco y molido fue
almacenado en frascos de vidrio mbar para su posterior
preparacin.
4.2.2 Obtencin del extracto etanlico de Schkuhria
pinnata (Lam.) O. Kuntze
Se prepararon dos extractos.
PARA LA MARCHA FITOQUMICA
EXTRACTO I

(anexo 1)

Fueron macerados 27 gramos en polvo de la planta entera


Schkuhria pinnata L excepto la raz en 100 mL de etanol a 96
durante 12 das. Posteriormente se filtr la solucin etanlica y se
concentro a 40C en bao mara hasta obtener un volumen de 30
mL,

con

este

extracto

re

realiz

la

marcha

fitoqumica

correspondiente en el laboratorio de Farmacognosia de la


Facultad de Farmacia y Bioqumica de la UNMSM(anexo3).

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

PARA

LA

DETERMINACIN

DEL

EFECTO

ANTIINFLAMATORIO
EXTRACTO II.(anexo2)
Para la obtencin del extracto

fueron macerados doscientos

veintin gramos en polvo de la planta entera Schkuhria pinnata L


excepto la raz en 1600 mL de etanol

a 96 durante 12 das.

Posteriormente se filtr la solucin etanlica y se llevo a


sequedad a una temperatura de 42C por una semana en estufa,
para obtener de esta manera el extracto etanlico que consisti
en una masa homognea de consistencia pegajosa y blanda color
verde oscuro. El extracto fue conservado a una temperatura de
1C - 3C en un frasco mbar hermticamente cerrado y
refrigerado evitando su exposicin a la luz para evitar su
degradacin.
4.2.3 Preparacin de las dosis.
Se trabaj con los extractos a las dosis de 200, 400 y 600mg/kg
de peso. Estos extractos fueron preparados por dilucin a partir
del extracto alcohlico de Schkuhria pinnata L. El frmaco de
referencia fue Diclofenaco sdico 75mg/3mL en inyectable. Este
no necesit preparacin previa. La dosis de trabajo fue 50mg/Kg
de peso. La va de administracin fue oral en ambos casos.(ANEXO 4)
4.2.4 Preparacin de los animales
Se trabaj con 25 ratas Wistar entre machos y hembras de
aproximadamente 3 meses de edad con un peso entre 200
250g distribuidas de la siguiente manera:
GRUPO

# de
ratas

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata


Control (N)
5
Diclofenaco (D)
5
Extracto 1 (A)
5
Extracto 2 (B)
5
Extracto 3 (C)
5
Tabla 2. Grupos de experimentacin

Se administr uretano al 20 % como anestsico para facilitar la


manipulacin de los animales. Alcanzado el efecto anestsico se
procedi con la determinacin del efecto antiinflamatorio. (ANEXO5)
4.2.5 Determinacin del efecto antiinflamatoria
Se inicio el procedimiento con la medida del volumen basal de la
pata con el pletismgrafo. Luego se administr la droga y los
extractos para cada grupo respectivamente. Al grupo control se
le administr solamente agua destilada.
Treinta minutos despus se inyect 0,1mL de carragenina al 1%
en la pata trasera derecha de cada animal y se realiz la primera
lectura despus de 1 hora. Se realizaron 5 lecturas a intervalos
de 1hora entre lecturas.

V.

RESULTADOS

5.1

Ensayo de solubilidad del extracto etanlico Schkuhria


pinnata
(Lamarck) Kuntze

Canchalagua

SOLVENTE
Agua
Etanol 96C

RESULTADO
++
+++

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata


+++
Eter
+++
Cloroformo
Tabla 3. Ensayo de solubilidad

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

5.2

Anlisis Cualitativo Fitoqumico del extracto etanlico


Los resultados del anlisis fitoqumica del extracto etanlico de
Schkuhria pinnata L (Canchalagua).
REACTIVO

METABOLITO

RESULTAD

Molish A
Antrona
FeCl3
Gelatina
Shinoda
Ninhidrina
Shinoda
Bourchada

Carbohidratos
Carbohidratos
Taninos
Taninos
Flavonoides
Aminocidos libres
Flavonoides
Triterpenoides

t
Bortrange

Naftoquinonas

r
Dragendor

Alcaloides

+++

Alcaloides
Antocianinas

+++
+

f
Mayer
Roseheim
LEYENDA:

+++
+++
+++
+++
+++
+
++
+

+ + + : Abundante cantidad
+ + : Regular cantidad
+

: Poca cantidad

: Ausencia
Tabla 4. Anlisis fitoqumico

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

Carrageni

Diclofenac Extracto A

Extracto B

Extrac

na

200

400

to C

50 mg/Kg

mg/Kg

mg/Kg

600
mg/Kg

Grupo
Grupo
Grupo
Grupo
Grupo

N
D
A
B
C

x
x
x
x
x

Tabla 5. Distribucin de las drogas y extractos

5.3. DETERMINACIN DEL EFECTO ANTIINFLAMATORIO

Grupo

Volume

Vol 1

Vol 2

Vol 3

Vol 4

Vol 5

Vol 6

n basal

( T=

(T=2h

(T=3h

(T=4h

(T=5h

(T=

Grupo

1.3

1h)
1.9

)
2.34

)
2.36

)
2.5

)
2.38

6h)
2.62

N
Grupo

0.96

1.28

1.54

1.8

1.94

1.92

1.96

D
Grupo

1.01

1.56

1.96

2.38

2.5

2.52

2.52

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata


A
Grupo

1.22

2.28

2.78

2.98

3.14

2.8

2.6

B
Grupo

1.22

1.74

2.28

2.34

2.12

2.26

C
Tabla 6. Volumenes desplazados.

PORCENTAJE DE INFLAMACIN

PORCENTAJE DE INFLAMACIN AL CABO DE 6 HORAS

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

VARIACIN DEL VOLUMEN DE INFLAMACIN VS


TIEMPO

Variacin de
volumen (mL)

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

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VI.

DISCUSIN

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

El presente trabajo busc establecer la actividad antiinflamatoria del


extracto etanlico de Schkuhria pinnata (Lam.) Kuntze, canchalagua, a
travs de la induccin de edema con carragenina en la pata izquierda
posterior.
La determinacin previa de los metabolitos de la especie vegetal nos
muestra la presencia de carbohidratos, taninos, aminocidos libres,
flavonoides, triterpenoides, naftoquinonas, alcaloides y antocianinas en
diferente concentracin. Sin embargo otros estudios como el realizado
por Len y col.

(5)

demuestran mediante espectroscopa infrarrojo (IR)

que la Schkuhria pinnata tambin posee poliacetilenos, diterpenos,


lactonas sesquiterpnicas y fenilpropanoides. Es probable que los
flavonoides y triterpenoides sean los metabolitos que le confieran la
actividad antiinflamatoria

; sin embargo, no hay estudios que lo

(8)

comprueben.

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

En el ensayo de la actividad antiinflamatoria de Schkuhria pinnata se


determin que el extracto etanlico a una concentracin de 600mg/Kg
es el que posee una mejor accin antiinflamatoria que los extractos a
concentraciones de 200 mg/Kg y 400 mg/Kg, debido a que su porcentaje
de inflamacin es menor y su porcentaje de inhibicin del edema es
mayor. No obstante, la respuesta antiinflamatoria es tarda ya que se
aprecia a partir de las cuatro horas de haberse iniciado el tratamiento.
En investigaciones relacionadas(9)(10)(11)(12)la actividad antiinflamatoria de
los extractos estudiados es significativa, es decir, el porcentaje de
inhibicin del edema es mayor al 30%. Mientras que en nuestro estudio
el extracto etanlico de Schkuhria pinnata (canchalagua) 600mg/Kg
presenta un porcentaje de inhibicin de tan solo un 13,7%. Este
resultado nos indica que las concentraciones trabajadas en el estudio no
seran las adecuadas, se necesitara de un extracto de mayor
concentracin para obtener resultados mucho ms favorables.

VII. CONCLUSIONES
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

(1)

ESTUDIO DE LA BIODIVERSIDAD CUENCA DEL COTAHUASI:


LA UNIN AREQUIPA, FLORA MEDICINAL. Serie: Agenda local
21 de la UNIN AREQUIPA PER.

(2)

ISABEL SUNG, Fitomedicina. 1100 plantas medicinales. Editorial


Isabel.

(3)

MOSTACERO LEN, jose. Taxonoma de Fanerogamas Peruanas.


CONCYTEC.

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

Enciclopedia Campesina ASPADERUC . PLANTAS MEDICINALES

CAJAMARQUINAS.

Essalud.

Programa

nacional

de

Medicina

Complementaria.MANUAL DE FITOTERAPIA.

(6)

PEDRO GARCA BARRENO IX Programa de Promocin de la

Cultura Cientfica y
Tecnolgica Rev.R.Acad.Cienc.Exact.Fs.Nat. (Esp) Vol. 102, N.
1, pp 91-159,2008
(7)

Len, Alejandra; Reyes, Blanca M.; Chvez, Mara Isabel;

Toscano, Rubn A. and


Delgado, Guillermo. Sesquiterpene Lactones, Acyl Phenyl
Propanoids and Other
Constituents from Schkuhria pinnata var. wislizeni. Antioxidant
Evaluation. J.
Mex. Chem. Soc. 2009, 53(3), 193-200
(8)

Villar Lpez, Martha y Villavicencio Vargas, scar. Manual de

Fitoterapia. Lima,
EsSalud; Organizacin Panamericana de la Salud, 2001.
Captulo VIII: Uso clnico
de las plantas medicinales, pg. 347.

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata


(9)

Chiclana, Carlos F.; Enrique, Andrea y Consolini, Alicia E.

Actividad
Antiinflamatoria Local de Malva sylvestris L. (Malvaceae) en el
Edema Inducido
por Carragenina en Ratas. Latin American Journal of Pharmacy
(formerly Acta
Farmacutica Bonaerense)Lat. Am. J. Pharm. 28 (2): 275-8
(2009)
(10)

Lekshmi. R. Nath, k. P. Manjunath, r. V. Savadi and k. S. Akki.

Anti-inflammatory
activity of Mirabilis jalapa linn. Leaves. Journal of basic and
clinical pharmacy,
2010.

(11)

Binny K, Sunil Kumar G2 and Dennis Thomas. Anti-inflammatory

and antipyretic
properties of the rhizome of Costus speciosus (koen.) SM.
Journal of Basic and
Clinical Pharmacy, 2010.

(12) . Estacio M.; Gmez A.; Gmez Z.C.; Granda H.K.; Guerrero M.;
Gutierrez, J; Herrada L.; Nina M.; Ohara Z.J.; Olaya U.M.; Olivos M.;
Pulache K.; Quispe M.; Castaeda, Benjamn; Ibez, Lucy. Estudio
Comparativo del Efecto Antiinflamatorio del

Plantago major

Llantn y del Diclofenaco. Facultad de Medicina, Universidad


Privada San Martn de Porres.

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ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DEL EXTRACTO Schkuhria pinnata

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IX.

ANEXO 1
EXTRACTO I

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ANEXO 2

EXTRACTO II

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ANEXOS 3

ANEXO 4

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PREPARACIN DE LAS SOLUCIONES DE 200, 400 Y 600 MG/Kg

ANEXO 5

PREPARACIN DE LA MUESTRA BIOLGICA

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ANEXO 6
MATERIALES Y EQUIPO

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ANEXO 7
DETERMINACIN DEL EFECTO

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